本發明涉(she)及血管緊張(zhang)素(su)轉化(hua)酶抑制劑(ACEI)、腦啡肽酶抑制劑與(yu)葉酸類化(hua)合(he)物的藥(yao)物組合(he)物及其(qi)用途，屬于醫藥(yao)領域。

背景技術：

高(gao)血壓是(shi)最常見的(de)慢(man)性(xing)疾病(bing)(bing)之一，也是(shi)心(xin)(xin)腦(nao)血管(guan)(guan)病(bing)(bing)最主(zhu)要(yao)的(de)危險(xian)因素，其腦(nao)卒中(zhong)(zhong)、心(xin)(xin)肌梗塞、心(xin)(xin)力衰(shuai)竭及慢(man)性(xing)腎(shen)臟病(bing)(bing)等主(zhu)要(yao)并(bing)發癥(zheng)的(de)致殘(can)、致死率(lv)高(gao)，嚴重(zhong)消(xiao)耗醫療(liao)資源，給家庭和社會(hui)帶來(lai)沉重(zhong)負擔。高(gao)血壓的(de)主(zhu)要(yao)治(zhi)療(liao)目標是(shi)最大限(xian)度地降(jiang)低心(xin)(xin)血管(guan)(guan)并(bing)發癥(zheng)的(de)發生(sheng)與死亡的(de)總體危險(xian)，需要(yao)治(zhi)療(liao)所有可逆(ni)性(xing)心(xin)(xin)血管(guan)(guan)危險(xian)因素、亞臨(lin)床(chuang)靶器官損害以(yi)及各種并(bing)存的(de)臨(lin)床(chuang)疾病(bing)(bing)【中(zhong)(zhong)國高(gao)血壓防治(zhi)指南(nan)(nan)修訂委員會(hui).中(zhong)(zhong)國高(gao)血壓防治(zhi)指南(nan)(nan)2010.中(zhong)(zhong)華心(xin)(xin)血管(guan)(guan)病(bing)(bing)雜志，2011；39(7)：579】。

心(xin)力(li)衰(shuai)(shuai)(shuai)竭(簡(jian)稱心(xin)衰(shuai)(shuai)(shuai))是(shi)高血(xue)壓后(hou)期(qi)的常(chang)見并發癥(zheng)，其(qi)病(bing)理機(ji)制是(shi)心(xin)室泵血(xue)或(huo)(huo)充盈功能低下，心(xin)排血(xue)量不能滿(man)足機(ji)體(ti)代謝的需(xu)要，組織、器(qi)官(guan)血(xue)液灌注不足，出現肺循環和/或(huo)(huo)體(ti)循環淤血(xue)，其(qi)實也是(shi)各(ge)種心(xin)臟(zang)病(bing)發展到嚴(yan)重階段的臨(lin)床綜合癥(zheng)，也稱為充血(xue)性(xing)心(xin)力(li)衰(shuai)(shuai)(shuai)竭。心(xin)衰(shuai)(shuai)(shuai)的特點是(shi)左室肥厚(hou)或(huo)(huo)擴張，導致神經內分泌失常(chang)、循環功能異常(chang)，出現典型的臨(lin)床癥(zheng)狀，如心(xin)悸氣促(cu)、呼吸困(kun)難(nan)、體(ti)液潴留(liu)(浮腫)、乏力(li)(特別是(shi)運(yun)動時(shi))等(deng)。慢性(xing)心(xin)衰(shuai)(shuai)(shuai)是(shi)指持續存在的心(xin)力(li)衰(shuai)(shuai)(shuai)竭狀態，可(ke)以穩(wen)定、惡化或(huo)(huo)失代償(chang)。

心衰(shuai)(shuai)是心血管(guan)病(bing)患(huan)者喪失勞動力及死(si)亡的(de)(de)(de)(de)重要(yao)原因之一，全球估計(ji)有(you)(you)2600萬人(ren)患(huan)有(you)(you)心衰(shuai)(shuai)。據世界衛(wei)生(sheng)組織的(de)(de)(de)(de)統計(ji)資料，心衰(shuai)(shuai)的(de)(de)(de)(de)發生(sheng)率(lv)(lv)已達1.9％，人(ren)類終生(sheng)患(huan)病(bing)幾(ji)率(lv)(lv)達20％，心衰(shuai)(shuai)的(de)(de)(de)(de)兩年(nian)病(bing)死(si)率(lv)(lv)為(wei)37％，6年(nian)死(si)亡率(lv)(lv)高(gao)達82％。在美(mei)國，衛(wei)生(sheng)統計(ji)顯(xian)示國家醫療(liao)費(fei)用支出的(de)(de)(de)(de)1-2％用于心衰(shuai)(shuai)治(zhi)療(liao)。我國心衰(shuai)(shuai)發病(bing)率(lv)(lv)亦比較高(gao)，心衰(shuai)(shuai)患(huan)病(bing)率(lv)(lv)預(yu)計(ji)在1.26％，估計(ji)約400萬人(ren)左右。

臨床(chuang)上(shang)治療(liao)心(xin)(xin)衰的(de)常用(yong)藥物(wu)包括(kuo)利尿劑(ji)(ji)、強心(xin)(xin)苷(gan)類(lei)、非苷(gan)類(lei)正性(xing)肌力藥、腎素-血(xue)管緊(jin)(jin)張素-醛固酮系統(RAAS)抑(yi)制(zhi)劑(ji)(ji)、β受(shou)體阻斷劑(ji)(ji)等。血(xue)管緊(jin)(jin)張素轉換酶抑(yi)制(zhi)劑(ji)(ji)(ACEI)是臨床(chuang)上(shang)控制(zhi)高血(xue)壓的(de)常用(yong)藥物(wu)，它主要抑(yi)制(zhi)血(xue)管緊(jin)(jin)張素轉化酶(ACE)的(de)活(huo)性(xing)，降低血(xue)管緊(jin)(jin)張素II(Ang II)和醛固酮的(de)含量，同時能(neng)減少(shao)緩激(ji)肽降解，促進 前列(lie)腺素釋(shi)放，從(cong)而舒(shu)張血(xue)管、降低血(xue)壓。臨床(chuang)上(shang)常用(yong)的(de)ACEI有卡托普(pu)(pu)(pu)利、依那普(pu)(pu)(pu)利、貝那普(pu)(pu)(pu)利、賴諾普(pu)(pu)(pu)利、雷米(mi)普(pu)(pu)(pu)利、福辛普(pu)(pu)(pu)利、西拉普(pu)(pu)(pu)利、培哚普(pu)(pu)(pu)利等。

Ang II是RAAS中關鍵的一種生物學效應物，它和特異受體AT₁結合可介導血(xue)管(guan)(guan)平滑肌(ji)收縮(suo)、抗利尿激素及(ji)醛(quan)固(gu)酮分泌釋放(fang)(鈉水潴(zhu)留(liu))、交感神經兒(er)茶酚(fen)胺釋放(fang)增(zeng)(zeng)多(duo)等一系列(lie)效(xiao)應(ying)。心(xin)衰(shuai)的(de)(de)病理(li)生理(li)機制涉及(ji)RAAS激活、醛(quan)固(gu)酮增(zeng)(zeng)加等，故ACEI不(bu)僅用于治療(liao)(liao)高血(xue)壓，同時也是治療(liao)(liao)心(xin)衰(shuai)(尤其是伴有低射(she)血(xue)分數時)的(de)(de)基礎藥物。左心(xin)室肥(fei)厚是心(xin)衰(shuai)的(de)(de)重(zhong)要病理(li)基礎，ACEI兼有抗增(zeng)(zeng)生作用，能逆轉高血(xue)壓患(huan)者的(de)(de)心(xin)臟(zang)肥(fei)厚。ACEI逆轉心(xin)室重(zhong)構主要通過降低心(xin)室前后負荷、抑制Ang II的(de)(de)增(zeng)(zeng)生作用和(he)(he)交感神經活性、抑制醛(quan)固(gu)酮誘導的(de)(de)心(xin)臟(zang)肥(fei)厚及(ji)間質和(he)(he)血(xue)管(guan)(guan)周圍纖(xian)維化(hua)等【中華醫學(xue)會血(xue)管(guan)(guan)病學(xue)分會.血(xue)管(guan)(guan)緊(jin)張(zhang)素轉換(huan)酶(mei)抑制劑(ji)在(zai)心(xin)血(xue)管(guan)(guan)病中應(ying)用中國專家(jia)共識.中華心(xin)血(xue)管(guan)(guan)病雜志，2007，35(2)：97】。循證醫學(xue)研(yan)究顯示，在(zai)輕、中度心(xin)衰(shuai)患(huan)者中，長期用依那普利可減低死(si)亡(wang)相對風險16％。總體看(kan)，ACEI是RAAS抑制劑(ji)中心(xin)衰(shuai)療(liao)(liao)效(xiao)相對較好的(de)(de)一類，但仍有1/2以上的(de)(de)頑(wan)固(gu)心(xin)衰(shuai)療(liao)(liao)效(xiao)反(fan)應(ying)不(bu)佳(jia)，亟待改(gai)進。

腦(nao)(nao)(nao)啡肽(tai)酶(mei)抑(yi)(yi)制劑是(shi)(shi)一(yi)類(lei)能夠抑(yi)(yi)制腦(nao)(nao)(nao)啡肽(tai)酶(mei)活(huo)性的(de)(de)化合(he)物(wu)或其前體(ti)。腦(nao)(nao)(nao)啡肽(tai)酶(mei)是(shi)(shi)一(yi)種中性內肽(tai)酶(mei)，在體(ti)內降解(jie)幾種內源(yuan)性血(xue)管(guan)活(huo)性肽(tai)，包(bao)括心(xin)房利(li)鈉(na)肽(tai)(ANP)、緩(huan)激肽(tai)和(he)腎上腺髓質素(su)。抑(yi)(yi)制腦(nao)(nao)(nao)啡肽(tai)酶(mei)即可以增加(jia)這些(xie)物(wu)質的(de)(de)水平，對抗血(xue)管(guan)收縮、鈉(na)潴留、心(xin)肌重(zhong)構和(he)神經內分泌(mi)的(de)(de)過度(du)激活(huo)【Buggey J，et al.Angiotensin receptor neprilysin inhibition in heart failure：mechanistic action and clinical impact.J Card Fail.2015；21(9)：741】。特別強調(diao)的(de)(de)是(shi)(shi)，腦(nao)(nao)(nao)啡肽(tai)酶(mei)抑(yi)(yi)制的(de)(de)重(zhong)要效(xiao)應是(shi)(shi)ANP的(de)(de)濃度(du)增加(jia)，ANP具有(you)強大的(de)(de)擴血(xue)管(guan)、排鈉(na)、利(li)尿、抑(yi)(yi)制RAAS和(he)抑(yi)(yi)制交感神經系統興奮進(jin)而降低循環(huan)血(xue)量、減(jian)輕心(xin)臟負(fu)荷以及調(diao)節水電解(jie)質平衡的(de)(de)作用，是(shi)(shi)體(ti)內最重(zhong)要的(de)(de)RAAS拮抗激素(su)，在心(xin)衰的(de)(de)治療(liao)機制中占(zhan)有(you)重(zhong)要地位(wei)。目前市場有(you)個別單一(yi)的(de)(de)腦(nao)(nao)(nao)啡肽(tai)酶(mei)抑(yi)(yi)制劑類(lei)藥物(wu)，但(dan)主(zhu)要用于治療(liao)兒童腹(fu)瀉；沙庫比曲(sacubitril，又稱AHU-377)是(shi)(shi)一(yi)種腦(nao)(nao)(nao)啡肽(tai)酶(mei)抑(yi)(yi)制劑的(de)(de)實驗性前體(ti)藥物(wu)，曾試用于治療(liao)高(gao)血(xue)壓。

葉(xie)酸(suan)類化合物包括葉(xie)酸(suan)、5-甲(jia)基(ji)四氫葉(xie)酸(suan)、甲(jia)酰四氫葉(xie)酸(suan)、亞葉(xie)酸(suan)、左亞葉(xie)酸(suan)鈣等，它們(men)均屬于水溶性維(wei)生素(su)，經(jing)由腸道吸收，由尿排出體(ti)外(wai)，在人體(ti)內存留(liu)時(shi)間短暫，很(hen)少蓄積，所(suo)以必須經(jing)常從體(ti)外(wai)攝取以滿(man)足(zu)營養和代謝需要。人體(ti)內葉(xie)酸(suan)缺乏(fa)時(shi)影響同型(xing)半胱氨酸(suan)(Hcy)的代謝，目前認為Hcy是(shi)一種心血(xue)管(guan)危(wei)險因素(su)，與血(xue)管(guan)內皮損傷、誘導(dao)血(xue)栓(shuan)形成等可能(neng)有關(guan)。【Herrmann W.Significance of hyperhomo- cysteinemia.Clin Lab.2006，52(7-8)：367-374.】

當前臨床上心(xin)(xin)衰(shuai)治(zhi)療(liao)總體有效(xiao)率(lv)不(bu)甚理想，而且長期心(xin)(xin)衰(shuai)使機體循環系統血流緩(huan)慢、瘀滯，易導致腦血栓形成。因(yin)此(ci)，為(wei)提高(gao)ACEI治(zhi)療(liao)慢性心(xin)(xin)衰(shuai)的(de)療(liao)效(xiao)，進一步降(jiang)低心(xin)(xin)衰(shuai)患(huan)者住(zhu)院率(lv)、住(zhu)院時間和死亡風(feng)險(xian)(xian)，本(ben)發明專(zhuan)利提供ACEI、腦啡(fei)肽酶抑制(zhi)劑與葉酸(suan)類化合物的(de)組合物，通過三者的(de)協(xie)同效(xiao)應，達到更有效(xiao)(多(duo)靶點)治(zhi)療(liao)慢性心(xin)(xin)衰(shuai)、降(jiang)低腦血管(guan)事(shi)件(jian)和死亡風(feng)險(xian)(xian)的(de)目(mu)的(de)。

技術實現要素：

本(ben)發明的(de)(de)目的(de)(de)是(shi)克服ACEI藥物和腦啡肽(tai)酶抑制劑存在的(de)(de)不足，提供一(yi)種在心衰治療有效率方(fang)面表現(xian)更優的(de)(de)復方(fang)藥物組合物。

為實現上述目的(de)，本發明采(cai)用以下技術(shu)方案：

一(yi)種藥物組合物，包括

(1)藥用劑量的血(xue)管(guan)緊張素(su)轉化酶抑制劑(ACEI)；

(2)藥用劑(ji)量的腦啡肽酶抑(yi)制(zhi)劑(ji)；

(3)藥用劑量的(de)葉酸類化合物；

(4)藥劑學上可(ke)接(jie)受(shou)的載體。

所述ACEI選自卡托普(pu)(pu)(pu)利(li)(li)(Captopril)、依(yi)那普(pu)(pu)(pu)利(li)(li)(Enalapril)、貝那普(pu)(pu)(pu)利(li)(li)(Benazepril)、賴諾普(pu)(pu)(pu)利(li)(li)(Lisinopril)、雷米(mi)普(pu)(pu)(pu)利(li)(li)(Ramipril)、福辛普(pu)(pu)(pu)利(li)(li)(Fosinopril)、西拉(la)普(pu)(pu)(pu)利(li)(li)(Cilazapril)、培哚普(pu)(pu)(pu)利(li)(li)(Perindopril)、咪達普(pu)(pu)(pu)利(li)(li)(Imidapril)、喹那普(pu)(pu)(pu)利(li)(li)(Quinapril)、地(di)拉(la)普(pu)(pu)(pu)利(li)(li)(Delapril)、螺普(pu)(pu)(pu)利(li)(li)(Spirapril)、阿拉(la)普(pu)(pu)(pu)利(li)(li)(Alacepril)的一種，含量為(wei)1.25～75mg。

所(suo)述腦啡肽(tai)酶抑制劑是(shi)沙庫比曲(sacubitril)，含量為10～120mg。

所述葉(xie)酸(suan)(suan)(suan)類(lei)化(hua)合物(wu)選自葉(xie)酸(suan)(suan)(suan)、5-甲基四氫葉(xie)酸(suan)(suan)(suan)、甲酰(xian)四氫葉(xie)酸(suan)(suan)(suan)鈣、亞(ya)葉(xie)酸(suan)(suan)(suan)、左亞(ya)葉(xie)酸(suan)(suan)(suan)鈣、葉(xie)酸(suan)(suan)(suan)可藥(yao)用鹽、其它(ta)可在體(ti)內釋放或(huo)生(sheng)成(cheng)葉(xie)酸(suan)(suan)(suan)的物(wu)質，含量為(wei)0.1～5mg，優(you)選含量為(wei)0.2～2mg。

通過進(jin)一(yi)步研究(jiu)，ACEI的含(han)量分別為(wei)卡托普(pu)(pu)(pu)(pu)(pu)利(li)(li)(li)(li)(li)(12.5～75mg)、依(yi)那(nei)普(pu)(pu)(pu)(pu)(pu)利(li)(li)(li)(li)(li)(2.5～30mg)、貝那(nei)普(pu)(pu)(pu)(pu)(pu)利(li)(li)(li)(li)(li)(5～30mg)、賴諾普(pu)(pu)(pu)(pu)(pu)利(li)(li)(li)(li)(li)(2.5～30mg)、雷米(mi)普(pu)(pu)(pu)(pu)(pu)利(li)(li)(li)(li)(li)(1.25～15mg)、福辛普(pu)(pu)(pu)(pu)(pu)利(li)(li)(li)(li)(li)(10～30mg)、西拉(la)普(pu)(pu)(pu)(pu)(pu)利(li)(li)(li)(li)(li)(1.25～5mg)、培哚(duo)普(pu)(pu)(pu)(pu)(pu)利(li)(li)(li)(li)(li)(2～8mg)、咪(mi)達普(pu)(pu)(pu)(pu)(pu)利(li)(li)(li)(li)(li)(2.5～10mg)、喹那(nei)普(pu)(pu)(pu)(pu)(pu)利(li)(li)(li)(li)(li)(10～30mg)、地拉(la)普(pu)(pu)(pu)(pu)(pu)利(li)(li)(li)(li)(li)(7.5～45mg)、螺普(pu)(pu)(pu)(pu)(pu)利(li)(li)(li)(li)(li)(6～25mg)、阿(a)拉(la)普(pu)(pu)(pu)(pu)(pu)利(li)(li)(li)(li)(li)(25～75mg)等，上述(shu)(shu)物質的活(huo)性代謝產物或鹽(yan)類含(han)量與相應(ying)的上述(shu)(shu)物質含(han)量等同。

通過進一步研究，腦啡肽酶抑制(zhi)劑的含量(liang)(liang)為沙庫比曲(qu)10～120mg，進一步優選(xuan)20～100mg，上述物質(zhi)的活(huo)性代(dai)謝(xie)產物或(huo)鹽(yan)類含量(liang)(liang)與(yu)相(xiang)應(ying)的上述物質(zhi)含量(liang)(liang)等同。

通過進(jin)一步研(yan)究(jiu)，葉酸類化(hua)合物(wu)(wu)的(de)含量為(wei)0.2～2mg，進(jin)一步優選0.4～1.6mg，上述(shu)物(wu)(wu)質的(de)活性代謝產物(wu)(wu)或鹽類含量與相應的(de)上述(shu)物(wu)(wu)質含量等同。

通過研(yan)究發(fa)現，腦啡肽酶抑(yi)制劑單用有(you)輕(qing)度降壓作用，能顯(xian)著提升血(xue)漿ANP濃度，當(dang)與ACEI合(he)用時，能增(zeng)強后者的(de)抗心(xin)(xin)衰作用(詳見實施例)。在本發(fa)明中，引(yin)起(qi)心(xin)(xin)衰的(de)基礎疾(ji)病(bing)(bing)以原發(fa)性(xing)高血(xue)壓及高血(xue)壓性(xing)心(xin)(xin)臟病(bing)(bing)為(wei)主，也可以由其它疾(ji)病(bing)(bing)引(yin)起(qi)，如冠心(xin)(xin)病(bing)(bing)、風濕(shi)性(xing)心(xin)(xin)臟病(bing)(bing)等。

術(shu)語“藥(yao)(yao)用(yong)劑(ji)量(liang)”是(shi)指(zhi)(zhi)為達(da)到有(you)(you)效控制或(huo)治療疾病(bing)的(de)(de)(de)目的(de)(de)(de)，臨床醫生根據患(huan)病(bing)個體(ti)病(bing)情(qing)嚴重程(cheng)度對(dui)患(huan)病(bing)個體(ti)施與藥(yao)(yao)物(wu)的(de)(de)(de)劑(ji)量(liang)。應(ying)當(dang)理解本發明(ming)提供的(de)(de)(de)藥(yao)(yao)物(wu)藥(yao)(yao)用(yong)劑(ji)量(liang)不是(shi)對(dui)本發明(ming)的(de)(de)(de)限制，而是(shi)對(dui)本發明(ming)的(de)(de)(de)優(you)選，通常情(qing)況下，在(zai)該劑(ji)量(liang)優(you)選范圍(wei)(wei)內，該藥(yao)(yao)物(wu)能夠(gou)對(dui)患(huan)病(bing)個體(ti)產生有(you)(you)效的(de)(de)(de)治療效果。患(huan)病(bing)個體(ti)是(shi)指(zhi)(zhi)患(huan)有(you)(you)疾病(bing)的(de)(de)(de)獨立(li)存在(zai)的(de)(de)(de)生命體(ti)，在(zai)本發明(ming)中，生命體(ti)尤指(zhi)(zhi)人(ren)(ren)類。應(ying)當(dang)理解，現(xian)有(you)(you)技(ji)術(shu)中，人(ren)(ren)類藥(yao)(yao)用(yong)劑(ji)量(liang)或(huo)藥(yao)(yao)用(yong)劑(ji)量(liang)范圍(wei)(wei)可與哺乳動(dong)物(wu)，如大鼠、小鼠等進(jin)行(xing)換算(suan)以得出適(shi)合(he)相(xiang)應(ying)動(dong)物(wu)適(shi)用(yong)的(de)(de)(de)藥(yao)(yao)用(yong)劑(ji)量(liang)或(huo)劑(ji)量(liang)范圍(wei)(wei)。

本發(fa)明提供的(de)(de)(de)(de)(de)藥(yao)(yao)物(wu)組(zu)(zu)(zu)合(he)物(wu)中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)(de)(de)化合(he)物(wu)在(zai)(zai)相同(tong)(tong)(tong)的(de)(de)(de)(de)(de)制劑中(zhong)(zhong)可(ke)以(yi)(yi)同(tong)(tong)(tong)時(shi)施(shi)與(yu)(yu)患(huan)病個體(ti)(ti)，也(ye)可(ke)分(fen)(fen)別(bie)(bie)地(di)相繼(ji)施(shi)與(yu)(yu)患(huan)病個體(ti)(ti)。若(ruo)(ruo)是(shi)相繼(ji)施(shi)與(yu)(yu)患(huan)病個體(ti)(ti)，則第二個(或附加的(de)(de)(de)(de)(de))活性成分(fen)(fen)施(shi)與(yu)(yu)的(de)(de)(de)(de)(de)延遲不(bu)應當導致(zhi)活性成分(fen)(fen)聯合(he)帶來的(de)(de)(de)(de)(de)有益效果的(de)(de)(de)(de)(de)損(sun)失。若(ruo)(ruo)是(shi)同(tong)(tong)(tong)時(shi)施(shi)與(yu)(yu)患(huan)病個體(ti)(ti)，組(zu)(zu)(zu)合(he)物(wu)中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)(de)(de)化合(he)物(wu)可(ke)以(yi)(yi)混合(he)存在(zai)(zai)于同(tong)(tong)(tong)一(yi)(yi)(yi)個藥(yao)(yao)物(wu)制劑形(xing)(xing)式中(zhong)(zhong)，也(ye)可(ke)以(yi)(yi)以(yi)(yi)同(tong)(tong)(tong)樣的(de)(de)(de)(de)(de)制劑形(xing)(xing)式分(fen)(fen)別(bie)(bie)獨立存在(zai)(zai)。若(ruo)(ruo)是(shi)以(yi)(yi)同(tong)(tong)(tong)樣的(de)(de)(de)(de)(de)制劑形(xing)(xing)式分(fen)(fen)別(bie)(bie)獨立存在(zai)(zai)，則藥(yao)(yao)物(wu)組(zu)(zu)(zu)合(he)物(wu)可(ke)以(yi)(yi)變(bian)通(tong)的(de)(de)(de)(de)(de)以(yi)(yi)“組(zu)(zu)(zu)合(he)藥(yao)(yao)盒(he)”形(xing)(xing)式存在(zai)(zai)。“組(zu)(zu)(zu)合(he)藥(yao)(yao)盒(he)”是(shi)一(yi)(yi)(yi)種(zhong)盒(he)狀容器，內(nei)置一(yi)(yi)(yi)種(zhong)或多種(zhong)劑量形(xing)(xing)式的(de)(de)(de)(de)(de)藥(yao)(yao)物(wu)組(zu)(zu)(zu)合(he)及其使用說明書，在(zai)(zai)本發(fa)明中(zhong)(zhong)優選所述的(de)(de)(de)(de)(de)ACEI類(lei)藥(yao)(yao)物(wu)、腦啡肽酶抑制劑沙庫比曲及葉(xie)酸類(lei)化合(he)物(wu)。

本發明的(de)(de)另一(yi)個目的(de)(de)是提(ti)供含(han)有藥(yao)用(yong)(yong)劑(ji)量的(de)(de)ACEI及其活(huo)性代謝產物中(zhong)的(de)(de)一(yi)種、藥(yao)用(yong)(yong)劑(ji)量的(de)(de)腦啡(fei)肽酶抑制劑(ji)及其活(huo)性代謝產物或其鹽類中(zhong)的(de)(de)一(yi)種、藥(yao)用(yong)(yong)劑(ji)量的(de)(de)葉(xie)酸類化合物和可(ke)藥(yao)用(yong)(yong)載體的(de)(de)藥(yao)物組合物在制備用(yong)(yong)于(yu)治療(liao)心衰和預防腦卒中(zhong)的(de)(de)藥(yao)物中(zhong)的(de)(de)用(yong)(yong)途。

本發明(ming)提供的藥物組合物的劑(ji)(ji)型包括但不(bu)限于普通(tong)片(pian)(pian)(pian)(pian)劑(ji)(ji)、雙(shuang)(shuang)層片(pian)(pian)(pian)(pian)劑(ji)(ji)、多層片(pian)(pian)(pian)(pian)劑(ji)(ji)、緩釋片(pian)(pian)(pian)(pian)劑(ji)(ji)、單室控(kong)(kong)(kong)釋片(pian)(pian)(pian)(pian)劑(ji)(ji)、雙(shuang)(shuang)室控(kong)(kong)(kong)釋片(pian)(pian)(pian)(pian)劑(ji)(ji)、微(wei)孔型控(kong)(kong)(kong)釋片(pian)(pian)(pian)(pian)劑(ji)(ji)、舌下含片(pian)(pian)(pian)(pian)、口(kou)腔速崩片(pian)(pian)(pian)(pian)、分散片(pian)(pian)(pian)(pian)、腸溶(rong)片(pian)(pian)(pian)(pian)、顆(ke)(ke)粒劑(ji)(ji)、丸劑(ji)(ji)、腸溶(rong)膠(jiao)囊(nang)、延(yan)遲釋放片(pian)(pian)(pian)(pian)、定時/位釋放片(pian)(pian)(pian)(pian)、普通(tong)膠(jiao)囊(nang)、 緩釋膠(jiao)囊(nang)、控(kong)(kong)(kong)釋膠(jiao)囊(nang)、含有(you)微(wei)丸或(huo)小片(pian)(pian)(pian)(pian)的膠(jiao)囊(nang)、含有(you)微(wei)丸或(huo)小片(pian)(pian)(pian)(pian)的pH依(yi)賴型膠(jiao)囊(nang)、顆(ke)(ke)粒劑(ji)(ji)、口(kou)服液、膜(mo)劑(ji)(ji)或(huo)貼劑(ji)(ji)等劑(ji)(ji)型，其中(zhong)優選片(pian)(pian)(pian)(pian)劑(ji)(ji)、膠(jiao)囊(nang)或(huo)顆(ke)(ke)粒劑(ji)(ji)。

本發明的(de)復方(fang)制劑可以每(mei)天服(fu)(fu)用(yong)一次(ci)或(huo)(huo)兩次(ci)，或(huo)(huo)者以緩釋或(huo)(huo)控釋方(fang)式每(mei)天或(huo)(huo)隔(ge)天服(fu)(fu)用(yong)一次(ci)，其中優(you)選每(mei)日(ri)服(fu)(fu)用(yong)1-2次(ci)。

本發明的(de)有益效果是：本發明提(ti)供的(de)藥(yao)物(wu)(wu)(wu)(wu)組(zu)合(he)物(wu)(wu)(wu)(wu)具有明顯協(xie)同作用(yong)(yong)(yong)，即協(xie)同治療(liao)慢性心力衰竭和預(yu)防(fang)腦卒(zu)中的(de)作用(yong)(yong)(yong)。本發明還提(ti)供了上(shang)述(shu)藥(yao)用(yong)(yong)(yong)劑(ji)量(liang)ACEI、腦啡肽(tai)酶抑制(zhi)劑(ji)、葉酸類化合(he)物(wu)(wu)(wu)(wu)組(zu)成的(de)藥(yao)物(wu)(wu)(wu)(wu)組(zu)合(he)物(wu)(wu)(wu)(wu)在(zai)制(zhi)備(bei)用(yong)(yong)(yong)于治療(liao)心力衰竭和預(yu)防(fang)腦卒(zu)中的(de)藥(yao)物(wu)(wu)(wu)(wu)中的(de)用(yong)(yong)(yong)途。

下面(mian)結合具體(ti)實施方式對本(ben)發(fa)明(ming)(ming)做進一步說明(ming)(ming)，并非對本(ben)發(fa)明(ming)(ming)的限定，凡依(yi)照本(ben)發(fa)明(ming)(ming)內容進行的任何本(ben)領域的等同替換，均屬于(yu)本(ben)發(fa)明(ming)(ming)的保(bao)護范(fan)圍。

具體實施方式

實施例1.制備沙庫比(bi)曲20mg/依那普利5mg/葉酸0.4mg片(1000片量)

制(zhi)(zhi)備方(fang)法：將輔(fu)料過80目篩，干(gan)燥(zao)備用。取(qu)25g無水(shui)磷酸(suan)(suan)(suan)氫鈣、5g馬來酸(suan)(suan)(suan)依那普利按(an)照(zhao)等量(liang)遞增法混合均勻，按(an)照(zhao)處(chu)方(fang)量(liang)分別加(jia)入沙庫比曲、葉酸(suan)(suan)(suan)、微晶纖維素(su)、羧(suo)甲(jia)淀粉(fen)鈉(na)、交(jiao)聯聚維酮和(he)無水(shui)磷酸(suan)(suan)(suan)氫鈣，用2％羥丙基(ji)甲(jia)基(ji)纖維素(su)溶液(ye)制(zhi)(zhi)成(cheng)軟材(cai)，20目篩制(zhi)(zhi)粒(li)(li)，40℃干(gan)燥(zao)約(yue)2h，20目篩整粒(li)(li)，控制(zhi)(zhi)顆(ke)粒(li)(li)的(de)(de)含水(shui)量(liang)為2-3％，將干(gan)燥(zao)后的(de)(de)顆(ke)粒(li)(li)與硬(ying)脂酸(suan)(suan)(suan)鎂、滑石粉(fen)混合均勻，半成(cheng)品進(jin)行檢(jian)測，測定(ding)含量(liang)，用壓片(pian)(pian)(pian)機壓制(zhi)(zhi)成(cheng)1000片(pian)(pian)(pian)。制(zhi)(zhi)備過程中注意避光，制(zhi)(zhi)成(cheng)的(de)(de)片(pian)(pian)(pian)劑需(xu)鋁塑(su)泡罩包裝，避光保存(cun)。

實施例2.制(zhi)備(bei)沙庫(ku)比曲30mg/雷米普利2.5mg/葉酸(suan)0.4mg片(1000片)

制(zhi)(zhi)備方法(fa)：輔料為直壓輔料，干(gan)燥(zao)備用。取(qu)(qu)處方量(liang)(liang)(liang)的(de)雷米(mi)普利(li)、葉酸及(ji)微晶(jing)纖(xian)維(wei)素30g按照等量(liang)(liang)(liang)遞增法(fa)混(hun)合(he)均勻，得(de)到(dao)混(hun)粉(fen)(fen)1；稱取(qu)(qu)剩余處方量(liang)(liang)(liang)的(de)微晶(jing)纖(xian)維(wei)素、乳糖、交聯(lian)羧甲基纖(xian)維(wei)素鈉、膠態二氧(yang)化硅，與沙(sha)庫比曲充分混(hun)勻，得(de)到(dao)混(hun)粉(fen)(fen)2；將混(hun)粉(fen)(fen)1和混(hun)粉(fen)(fen)2與處方量(liang)(liang)(liang)的(de)山(shan)愈酸甘油(you)酯(zhi)混(hun)合(he)均勻，得(de)最(zui)終混(hun)粉(fen)(fen)中(zhong)間體，檢測(ce)混(hun)粉(fen)(fen)中(zhong)間體，壓制(zhi)(zhi)成1000片。制(zhi)(zhi)備過程中(zhong)注意避光，制(zhi)(zhi)成的(de)片劑需鋁(lv)塑泡罩包裝，避光保(bao)存。

實施(shi)例(li)3.制備沙庫比曲40mg/貝那普利(li)10mg/葉酸0.4mg膠囊(1000粒(li)量)

制備方法：將原輔料80目(mu)(mu)篩(shai)(shai)，干燥備用(yong)(yong)。取(qu)40g沙庫比曲(qu)、10g貝那(nei)普利、0.4g葉酸按照等(deng)量遞增法混合均勻，分別加入乳糖(tang)、微晶纖(xian)(xian)維素、羧甲基淀(dian)粉(fen)鈉和低取(qu)代(dai)羥丙纖(xian)(xian)維素，混合均勻，用(yong)(yong)2％羥丙甲纖(xian)(xian)維素溶液制成軟材，20目(mu)(mu)篩(shai)(shai)制粒，40℃干燥約2h，20目(mu)(mu)篩(shai)(shai)整粒，控(kong)制顆粒的含(han)水量為(wei)2-3％，將干燥后的顆粒與(yu)滑(hua)石(shi)粉(fen)混合均勻，半成品進行檢測，測定含(han)量，裝(zhuang)入空(kong)心(xin)膠囊即(ji)得。

實施例4.依那普利(li)/沙庫比(bi)曲/葉酸組方(fang)對(dui)心(xin)衰大鼠的(de)治(zhi)療作用

一、方法

1.動物：Wistar大鼠(shu)40只，雌雄(xiong)各半(ban)，體重200--240g，購自中國科學院(yuan)上(shang)海實驗動物中心。

2.造模(mo)方(fang)法：采用腹(fu)主(zhu)動(dong)脈(mo)(mo)縮窄(zhai)法(心(xin)(xin)臟后負荷增加)制作慢性心(xin)(xin)衰大鼠模(mo)型。大鼠行4％戊巴(ba)比妥鈉腹(fu)腔(qiang)注(zhu)(zhu)射麻醉，每公斤(jin)體重(zhong)注(zhu)(zhu)射40mg，劍突下腹(fu)正中切(qie)口，分(fen)層(ceng)打開(kai)腹(fu)腔(qiang)，在腎動(dong)脈(mo)(mo)分(fen)支(zhi)以(yi)上(shang)鈍性游離腹(fu)主(zhu)動(dong)脈(mo)(mo)，將(jiang)7#注(zhu)(zhu)射器針(zhen)頭平行置于腹(fu)主(zhu)動(dong)脈(mo)(mo)上(shang)，用4#手術絲(si)線將(jiang)腹(fu)主(zhu)動(dong)脈(mo)(mo)和注(zhu)(zhu)射器一同結扎(zha)，然后緩慢將(jiang)注(zhu)(zhu)射器撤(che)出，關(guan)腹(fu)，分(fen)層(ceng)縫合。使大鼠腹(fu)主(zhu)動(dong)脈(mo)(mo)直徑縮窄(zhai)為(wei)0.7mm。正常(chang)對照組開(kai)腹(fu)后將(jiang)手術絲(si)線穿過腹(fu)主(zhu)動(dong)脈(mo)(mo)，除不縮窄(zhai)腹(fu)主(zhu)動(dong)脈(mo)(mo)以(yi)外(wai)，其(qi)他操作與手術組完全相同。正常(chang)喂養(yang)3周，測定(ding)血液動(dong)力學指標，以(yi)確定(ding)慢性心(xin)(xin)衰模(mo)型是否(fou)成功(gong)。

3.分(fen)組(zu)給(gei)(gei)藥(yao)及指標(biao)(biao)檢測：將上述造模成功后的心(xin)衰大鼠(shu)隨機(ji)分(fen)組(zu)，另(ling)設正常對照組(zu)大鼠(shu)10只，各組(zu)給(gei)(gei)藥(yao)或處(chu)理情況見表(biao)1。采(cai)用(yong)灌胃給(gei)(gei)藥(yao)，每(mei)天1次(ci)，連續3周(zhou)(zhou)。分(fen)別(bie)測定給(gei)(gei)藥(yao)前、給(gei)(gei)藥(yao)后不同(tong)(tong)時間(jian)大鼠(shu)心(xin)率(lv)(HR)、射(she)血(xue)(xue)前期(PEP)、左(zuo)室舒張時間(jian)(LVET)、每(mei)搏心(xin)輸出量(SV)、每(mei)分(fen)心(xin)輸出量(CO)。采(cai)用(yong)無創性(xing)心(xin)功能血(xue)(xue)流動(dong)(dong)力(li)學監測系統(tong)。接好心(xin)電圖的肢體導聯，同(tong)(tong)步(bu)記(ji)錄心(xin)電圖和心(xin)阻抗-階微分(fen)圖。記(ji)錄8-10個心(xin)動(dong)(dong)周(zhou)(zhou)期，求(qiu)其平均值。系統(tong)自動(dong)(dong)采(cai)用(yong)Kubicek公式(shi)計(ji)算(suan)相關(guan)指標(biao)(biao)。另(ling)取大鼠(shu)靜脈血(xue)(xue)1ml，用(yong)來檢測血(xue)(xue)漿ANP濃(nong)度(du)(ELISA法)。

4.統計(ji)學處理：所有實驗數據，計(ji)量資(zi)(zi)料(liao)用均數±標準(zhun)差(X±S)表示(shi)，兩組間均數比(bi)較(jiao)用t檢驗，計(ji)數資(zi)(zi)料(liao)用卡方檢驗。全部數據采(cai)用SPSS10.0軟件進行分析(xi)。

二、結果

1、造(zao)模(mo)(mo)情(qing)況：(1)一般情(qing)況：于手(shou)術后(hou)第3周(zhou)觀察大(da)(da)(da)鼠(shu)一般情(qing)況，以(yi)評價心(xin)(xin)衰(shuai)(shuai)程度(du)，結果顯(xian)(xian)示(shi)：腹主動脈縮窄法造(zao)成(cheng)大(da)(da)(da)鼠(shu)3周(zhou)后(hou)出現(xian)明(ming)(ming)顯(xian)(xian)心(xin)(xin)衰(shuai)(shuai)癥狀，模(mo)(mo)型組(zu)(zu)(zu)(zu)大(da)(da)(da)鼠(shu)活動明(ming)(ming)顯(xian)(xian)減少(shao)，爪背紫紺(gan)，水(shui)(shui)腫，尿量減少(shao)，與正常(chang)對(dui)(dui)照組(zu)(zu)(zu)(zu)有顯(xian)(xian)著差(cha)(cha)異(yi)。(2)血流動力(li)學(xue)變(bian)化(hua)：第3周(zhou)手(shou)術組(zu)(zu)(zu)(zu)和(he)對(dui)(dui)照組(zu)(zu)(zu)(zu)大(da)(da)(da)鼠(shu)心(xin)(xin)功(gong)能變(bian)化(hua)情(qing)況見(jian)表2。模(mo)(mo)型組(zu)(zu)(zu)(zu)HR由381+52.4次/分(fen)上(shang)升到471±57.8次/分(fen)，LVET由80.3+24.0ms縮短至52.5+22.3ms，SV和(he)CO均顯(xian)(xian)著下降(jiang)，提(ti)示(shi)模(mo)(mo)型組(zu)(zu)(zu)(zu)大(da)(da)(da)鼠(shu)手(shou)術后(hou)3周(zhou)心(xin)(xin)臟功(gong)能明(ming)(ming)顯(xian)(xian)下降(jiang)，而(er)對(dui)(dui)照組(zu)(zu)(zu)(zu)心(xin)(xin)功(gong)能各項(xiang)指標(biao)均無變(bian)化(hua)。組(zu)(zu)(zu)(zu)間比較HR、LVET、CO、SV均有顯(xian)(xian)著性差(cha)(cha)異(yi)，說(shuo)明(ming)(ming)模(mo)(mo)型組(zu)(zu)(zu)(zu)造(zao)模(mo)(mo)成(cheng)功(gong)。(3) 病(bing)理觀察：模(mo)(mo)型組(zu)(zu)(zu)(zu)電鏡(jing)所見(jian)：心(xin)(xin)肌(ji)(ji)(ji)T-管及肌(ji)(ji)(ji)漿網池(chi)均呈(cheng)高度(du)至極度(du)擴張成(cheng)大(da)(da)(da)串，有處(chu)大(da)(da)(da)串連(lian)接成(cheng)蔟(cu)。心(xin)(xin)肌(ji)(ji)(ji)線粒(li)體(ti)(ti)于肌(ji)(ji)(ji)膜(mo)下增生成(cheng)蔟(cu)、有的(de)線粒(li)體(ti)(ti)灶(zao)性溶解。心(xin)(xin)肌(ji)(ji)(ji)肌(ji)(ji)(ji)膜(mo)局部溶解、水(shui)(shui)腫，局部肌(ji)(ji)(ji)纖維溶解。散在的(de)肌(ji)(ji)(ji)纖維有小灶(zao)性溶解。心(xin)(xin)肌(ji)(ji)(ji)束間微(wei)血管擴張，內(nei)皮細胞胞飲泡增多。正常(chang)對(dui)(dui)照組(zu)(zu)(zu)(zu)電鏡(jing)所見(jian)：為(wei)正常(chang)心(xin)(xin)肌(ji)(ji)(ji)組(zu)(zu)(zu)(zu)織，均符合下列(lie)條件(jian)：核(he)常(chang)染色質(zhi)和(he)異(yi)染色質(zhi)分(fen)明(ming)(ming)，有大(da)(da)(da)圓(yuan)核(he)仁。有豐富核(he)仁協同染色質(zhi)，有染色質(zhi)周(zhou)圍(wei)及間顆粒(li)。核(he)周(zhou)間隙狹窄而(er)一致。線粒(li)體(ti)(ti)完整，大(da)(da)(da)而(er)嵴清(qing)晰。心(xin)(xin)肌(ji)(ji)(ji)T-管及肌(ji)(ji)(ji)漿網少(shao)而(er)不擴張。肌(ji)(ji)(ji)膜(mo)下無水(shui)(shui)腫。

表1：第3周手術組和(he)對照組大鼠(shu)心功能變化情況(kuang)

【注】最(zui)初用30只(zhi)大鼠造模(mo)，造模(mo)后死亡(wang)4只(zhi)，即最(zui)后有26只(zhi)存(cun)活。

每組第3周測量值分別與本組第1周比較：*P＜0.05，**P＜0.01；模型組與對照組的比較：^ΔP＜0.05，^ΔΔP＜0.01。

2、依(yi)(yi)(yi)那(nei)普利/沙(sha)庫比曲(qu)/葉(xie)酸與依(yi)(yi)(yi)那(nei)普利的比較(jiao)：經3周治療(liao)后，與模(mo)型(xing)組(zu)(zu)(zu)比較(jiao)，依(yi)(yi)(yi)那(nei)普利組(zu)(zu)(zu)、依(yi)(yi)(yi)那(nei)普利/沙(sha)庫比曲(qu)/葉(xie)酸組(zu)(zu)(zu)心(xin)(xin)衰大(da)鼠(shu)第6周的血流動力學均(jun)得到(dao)顯著改(gai)善，表現(xian)為(wei)心(xin)(xin)率及PEP下降、LVET及CO上(shang)升(sheng)，依(yi)(yi)(yi)那(nei)普利組(zu)(zu)(zu)、依(yi)(yi)(yi)那(nei)普利/沙(sha)庫比曲(qu)/葉(xie)酸組(zu)(zu)(zu)均(jun)提(ti)示(shi)對心(xin)(xin)衰的顯著治療(liao)作(zuo)用(yong)。此(ci)外，與依(yi)(yi)(yi)那(nei)普利組(zu)(zu)(zu)比較(jiao)，依(yi)(yi)(yi)那(nei)普利/沙(sha)庫比曲(qu)/葉(xie)酸組(zu)(zu)(zu)血漿ANP濃度明顯增高，血流動力學PEP下降、CO上(shang)升(sheng)更為(wei)顯著，提(ti)示(shi)對心(xin)(xin)衰的治療(liao)作(zuo)用(yong)有(you)一(yi)定(ding)優勢。

表2：第6周各組(zu)大鼠心(xin)功能及血漿ANP情況比較(n＝10)

與對照組比較：^*P＜0.05，^**P＜0.01；與模型組比較：^ΔP＜0.05，^ΔΔP＜0.01；

與依那普利組比較：^#P＜0.05。

三、討論

本研究采(cai)用(yong)腹(fu)(fu)主(zhu)(zhu)動(dong)脈(mo)縮窄法制作慢性心(xin)(xin)衰(shuai)大鼠(shu)模(mo)型。心(xin)(xin)衰(shuai)時血液(ye)動(dong)力學異(yi)常是產生臨床充血癥狀(zhuang)(zhuang)的病(bing)理生理基(ji)礎。左室功能障礙引起CO降(jiang)低和左室舒張時間延長，前者(zhe)導致組(zu)(zu)織(zhi)器官血液(ye)灌(guan)注不足(zu)，后者(zhe)引起肺血管嵌壓(ya)升高。采(cai)用(yong)縮窄大鼠(shu)腹(fu)(fu)主(zhu)(zhu)動(dong)脈(mo)，造(zao)(zao)成壓(ya)力負荷病(bing)理性增高，心(xin)(xin)臟作功增加，引起左心(xin)(xin)衰(shuai)，最(zui)終導致全心(xin)(xin)衰(shuai)。實驗結(jie)果顯(xian)(xian)示(shi)：腹(fu)(fu)主(zhu)(zhu)動(dong)脈(mo)縮窄3周(zhou)后出現(xian)明(ming)顯(xian)(xian)心(xin)(xin)衰(shuai)癥狀(zhuang)(zhuang)，與正(zheng)常對照組(zu)(zu)有顯(xian)(xian)著性差異(yi)。模(mo)型組(zu)(zu)大鼠(shu)活(huo)動(dong)明(ming)顯(xian)(xian)減少(shao)，爪(zhua)背紫紺(gan)、水(shui)腫(zhong)，與對照組(zu)(zu)比較有顯(xian)(xian)著性差異(yi)。提(ti)示(shi)造(zao)(zao)模(mo)組(zu)(zu)大鼠(shu)心(xin)(xin)功能下降(jiang)，全身血液(ye)灌(guan)注減少(shao)。心(xin)(xin)臟功收縮和舒張功能障礙分(fen)別引起CO降(jiang)低和左室舒張末壓(ya)力(LVEDP)增高。隨著心(xin)(xin)輸(shu)出量的減少(shao)，激活(huo)了(le)各種神(shen)經內分(fen)泌(mi)的調節(jie)機制，使外周(zhou)循環阻力增加，外周(zhou)血液(ye)重(zhong)新(xin)分(fen)配(pei)。

實驗結果顯(xian)示：模型組HR顯(xian)著加快(kuai)；LVET縮短，SV和(he)CO均(jun)顯(xian)著下(xia)(xia)降(jiang)(jiang)，提(ti)示模型組大鼠(shu)(shu)手術(shu)后(hou)3周心(xin)(xin)臟(zang)功(gong)能明顯(xian)下(xia)(xia)降(jiang)(jiang)，而(er)(er)(er)對(dui)照組心(xin)(xin)功(gong)能各項指標(biao)均(jun)無(wu)變化，說明造(zao)(zao)模成功(gong)。本實驗采用無(wu)創(chuang)性心(xin)(xin)功(gong)能血流動力(li)學監測系統，在大鼠(shu)(shu)清(qing)醒狀態下(xia)(xia)測量(liang)心(xin)(xin)功(gong)能血液動力(li)學指標(biao)，克(ke)服(fu)了在麻(ma)醉狀態下(xia)(xia)使用創(chuang)傷性測量(liang)方法(fa)，從而(er)(er)(er)避(bi)免了動物所處狀態(清(qing)醒或麻(ma)醉)以及操作方法(fa)(有(you)創(chuang)或無(wu)創(chuang))不同而(er)(er)(er)造(zao)(zao)成的對(dui)大鼠(shu)(shu)心(xin)(xin)功(gong)能的干擾。模型組大鼠(shu)(shu)手術(shu)3周后(hou)心(xin)(xin)臟(zang)收縮和(he)舒(shu)張(zhang)功(gong)能均(jun)明顯(xian)降(jiang)(jiang)低，說明模型組大鼠(shu)(shu)心(xin)(xin)臟(zang)收縮和(he)舒(shu)張(zhang)功(gong)能明顯(xian)下(xia)(xia)降(jiang)(jiang)。

本研究(jiu)初(chu)步(bu)證實依(yi)那普(pu)(pu)利(li)/沙(sha)庫(ku)比(bi)曲/葉酸(suan)(suan)組(zu)方在對(dui)(dui)心(xin)衰(shuai)治療(liao)的顯著療(liao)效：經(jing)3周治療(liao)后，與(yu)模(mo)型組(zu)比(bi)較，依(yi)那普(pu)(pu)利(li)/沙(sha)庫(ku)比(bi)曲/葉酸(suan)(suan)組(zu)心(xin)衰(shuai)大鼠第6周的血流動(dong)力學(xue)均得(de)到(dao)顯著改善(shan)，表現(xian)為心(xin)率及PEP下降、LVET及CO上升(sheng)，大鼠血漿ANP濃(nong)度亦明顯增高(gao)，這(zhe)些(xie)結果(guo)的綜合提示對(dui)(dui)心(xin)衰(shuai)的顯著治療(liao)作用。此外，與(yu)依(yi)那普(pu)(pu)利(li)組(zu)比(bi)較，依(yi)那普(pu)(pu)利(li)/沙(sha)庫(ku)比(bi)曲/葉酸(suan)(suan)組(zu)ANP濃(nong)度明顯增高(gao)，PEP下降、CO上升(sheng)也更為顯著，提示本組(zu)方對(dui)(dui)心(xin)衰(shuai)的治療(liao)作用有一定優勢。

實施例5.雷米(mi)普利/沙(sha)庫比(bi)曲/葉酸組方對(dui)心衰大鼠的(de)治療作用

一、方法

1.動(dong)物(wu)：Wistar大鼠48只(zhi)，雌雄各半，體重(zhong)205--245g，購自中國科學院上海實驗動(dong)物(wu)中心。

2.造模方法：同實施例4。

3.分(fen)組給(gei)藥(yao)及指標檢測(ce)：將上(shang)述(shu)造模成功(gong)后(hou)的心(xin)衰大(da)(da)鼠(shu)隨機分(fen)組，另設正常對照組大(da)(da)鼠(shu)12只，各組給(gei)藥(yao)或處理情(qing)況(kuang)見表4。采(cai)用灌胃給(gei)藥(yao)，每(mei)(mei)天1次，連續3周(zhou)。分(fen)別測(ce)定給(gei)藥(yao)前(qian)、給(gei)藥(yao)后(hou)不同時(shi)間(jian)大(da)(da)鼠(shu)心(xin)率(HR)、射血(xue)(xue)前(qian)期(PEP)、左室舒張時(shi)間(jian)(LVET)、每(mei)(mei)搏心(xin)輸出量(SV)、每(mei)(mei)分(fen)心(xin)輸出量(CO)。采(cai)用無創(chuang)性心(xin)功(gong)能(neng)血(xue)(xue)流動力學監測(ce)系統。接好心(xin)電圖(tu)的肢體導聯，同步(bu)記錄(lu)心(xin)電圖(tu)和心(xin)阻抗-階微(wei)分(fen)圖(tu)。記錄(lu)8-10個心(xin)動周(zhou)期，求其平均值(zhi)。系統自動采(cai)用Kubicek公式計算相關(guan)指標。另取大(da)(da)鼠(shu)靜脈(mo)血(xue)(xue)1ml，用來(lai)檢測(ce)血(xue)(xue)漿ANP濃度(ELISA法)。

4.統計(ji)學處理：所有實驗(yan)數(shu)(shu)據，計(ji)量(liang)資料用(yong)均數(shu)(shu)±標準差(X±S)表示，兩組間(jian)均數(shu)(shu)比較用(yong)t檢(jian)驗(yan)，計(ji)數(shu)(shu)資料用(yong)卡方檢(jian)驗(yan)。全部數(shu)(shu)據采用(yong)SPSS 10.0軟件進(jin)行分析。

二、結果

1、造模情(qing)(qing)況(kuang)：(1)一(yi)(yi)般情(qing)(qing)況(kuang)：于手(shou)術后(hou)第(di)3周(zhou)(zhou)(zhou)觀(guan)察(cha)(cha)大(da)(da)鼠(shu)(shu)一(yi)(yi)般情(qing)(qing)況(kuang)，結果顯(xian)示(shi)：腹(fu)主(zhu)動(dong)脈縮窄(zhai)法(fa)造成(cheng)(cheng)大(da)(da)鼠(shu)(shu)3周(zhou)(zhou)(zhou)后(hou)出(chu)現明(ming)顯(xian)心(xin)衰癥狀，模型(xing)組(zu)大(da)(da)鼠(shu)(shu)活(huo)動(dong)明(ming)顯(xian)減(jian)少，爪背紫紺，水腫(zhong)，尿(niao)量減(jian)少，與正常對(dui)(dui)照組(zu)有顯(xian)著(zhu)(zhu)差異(yi)。(2)血流動(dong)力學變化：第(di)3周(zhou)(zhou)(zhou)手(shou)術組(zu)和(he)對(dui)(dui)照組(zu)大(da)(da)鼠(shu)(shu)心(xin)功能變化情(qing)(qing)況(kuang)見表3。模型(xing)組(zu)HR上升，LVET縮短(duan)，SV和(he)CO顯(xian)著(zhu)(zhu)下(xia)降，提(ti)(ti)示(shi)模型(xing)組(zu)大(da)(da)鼠(shu)(shu)手(shou)術后(hou)3周(zhou)(zhou)(zhou)心(xin)臟功能明(ming)顯(xian)下(xia)降，而對(dui)(dui)照組(zu)心(xin)功能各(ge)項指標均(jun)無變化，提(ti)(ti)示(shi)造模成(cheng)(cheng)功。(3)病理(li)觀(guan)察(cha)(cha)：模型(xing)組(zu)電(dian)鏡見心(xin)肌(ji)T-管及(ji)肌(ji)漿網池(chi)均(jun)呈高(gao)度至極度擴張成(cheng)(cheng)大(da)(da)串(chuan)，有處大(da)(da)串(chuan)連接成(cheng)(cheng)蔟。心(xin)肌(ji)線(xian)粒體于肌(ji)膜下(xia)增生成(cheng)(cheng)蔟、有的線(xian)粒體灶(zao)性溶解。心(xin)肌(ji)肌(ji)膜局部(bu)溶解、水腫(zhong)，局部(bu)肌(ji)纖(xian)維溶解。散在(zai)的肌(ji)纖(xian)維有小(xiao)灶(zao)性溶解。正常對(dui)(dui)照組(zu)電(dian)鏡未見上述病理(li)改變。

表3：第3周手術組(zu)和對照組(zu)大(da)鼠心(xin)功能變化情況

【注】最初用36只(zhi)大鼠(shu)造模，造模后死(si)亡5只(zhi)，即最后有(you)31只(zhi)成功。

每組第3周測量值分別與本組第1周比較：^*P＜0.05，^**P＜0.01；模型組與對照組的比較：^▲P＜0.05，^▲▲P＜0.01。

2、雷(lei)(lei)(lei)米(mi)普(pu)(pu)(pu)利(li)/沙庫(ku)(ku)比(bi)(bi)曲/葉酸(suan)(suan)與雷(lei)(lei)(lei)米(mi)普(pu)(pu)(pu)利(li)的(de)(de)比(bi)(bi)較：經3周治療后，與模型組(zu)比(bi)(bi)較，雷(lei)(lei)(lei)米(mi)普(pu)(pu)(pu)利(li)組(zu)、雷(lei)(lei)(lei)米(mi)普(pu)(pu)(pu)利(li)/沙庫(ku)(ku)比(bi)(bi)曲/葉酸(suan)(suan)組(zu)心(xin)衰大鼠第(di)6周的(de)(de)血(xue)流動力學均得到顯(xian)著改善，表現為心(xin)率(lv)及(ji)PEP下(xia)降(jiang)(jiang)、LVET及(ji)CO上升，雷(lei)(lei)(lei)米(mi)普(pu)(pu)(pu)利(li)組(zu)、雷(lei)(lei)(lei)米(mi)普(pu)(pu)(pu)利(li)/沙庫(ku)(ku)比(bi)(bi)曲/葉酸(suan)(suan)組(zu)均提示對(dui)心(xin)衰的(de)(de)顯(xian)著治療作用。此外，與雷(lei)(lei)(lei)米(mi)普(pu)(pu)(pu)利(li)組(zu)比(bi)(bi)較，雷(lei)(lei)(lei)米(mi)普(pu)(pu)(pu)利(li)/沙庫(ku)(ku)比(bi)(bi)曲/葉酸(suan)(suan)組(zu)血(xue)漿ANP濃度明(ming)顯(xian)增(zeng)高，血(xue)流動力學PEP下(xia)降(jiang)(jiang)、CO上升更為顯(xian)著，提示對(dui)心(xin)衰的(de)(de)治療作用有一(yi)定優勢。

表4：第6周各組(zu)大鼠心功能及(ji)血漿ANP情(qing)況(kuang)比較

與對照組比較：^*P＜0.05，^**P＜0.01；與模型組比較：^ΔP＜0.05，^ΔΔP＜0.01；

與雷米普利組比較：^#P＜0.05。

三、討論

實驗(yan)結果顯示：模型(xing)組(zu)(zu)HR顯著(zhu)加快；LVET縮(suo)短，SV和CO均顯著(zhu)下(xia)降(jiang)，提(ti)示模型(xing)組(zu)(zu)大(da)鼠(shu)手(shou)術后(hou)3周(zhou)心(xin)臟(zang)(zang)功能(neng)明(ming)(ming)顯下(xia)降(jiang)，而(er)(er)對照(zhao)組(zu)(zu)心(xin)功能(neng)各項指標(biao)(biao)均無變化(hua)，說(shuo)明(ming)(ming)造模成功。本(ben)實驗(yan)采用(yong)(yong)無創(chuang)(chuang)性心(xin)功能(neng)血(xue)流(liu)動(dong)(dong)力學(xue)(xue)監(jian)測(ce)系統，在(zai)大(da)鼠(shu)清醒(xing)狀態(tai)下(xia)測(ce)量心(xin)功能(neng)血(xue)液動(dong)(dong)力學(xue)(xue)指標(biao)(biao)，克服了(le)在(zai)麻(ma)醉狀態(tai)下(xia)使(shi)用(yong)(yong)創(chuang)(chuang)傷性測(ce)量方(fang)法，從而(er)(er)避免了(le)動(dong)(dong)物(wu)所處狀態(tai)(清醒(xing)或麻(ma)醉)以及操作方(fang)法(有創(chuang)(chuang)或無創(chuang)(chuang))不同而(er)(er)造成的對大(da)鼠(shu)心(xin)功能(neng)的干(gan)擾。模型(xing)組(zu)(zu)大(da)鼠(shu)手(shou)術3周(zhou)后(hou)心(xin)臟(zang)(zang)收縮(suo)和舒(shu)張功能(neng)均明(ming)(ming)顯降(jiang)低，說(shuo)明(ming)(ming)模型(xing)組(zu)(zu)大(da)鼠(shu)心(xin)臟(zang)(zang)收縮(suo)和舒(shu)張功能(neng)明(ming)(ming)顯下(xia)降(jiang)。

本研究初步證實雷米(mi)普利(li)/沙庫(ku)比(bi)曲/葉(xie)(xie)酸(suan)組(zu)方用(yong)于(yu)大(da)(da)鼠(shu)心(xin)衰時有(you)顯著療(liao)(liao)效：經3周治(zhi)療(liao)(liao)后，與模型組(zu)比(bi)較(jiao)，雷米(mi)普利(li)/沙庫(ku)比(bi)曲/葉(xie)(xie)酸(suan)組(zu)心(xin)衰大(da)(da)鼠(shu)第(di)6周的(de)(de)血(xue)流動(dong)力學均得到顯著改善，表現為心(xin)率及PEP下降(jiang)、LVET及CO上升(sheng)，大(da)(da)鼠(shu)血(xue)漿ANP濃度(du)亦(yi)(yi)明顯 增高，這些(xie)結(jie)果的(de)(de)綜(zong)合(he)提示對心(xin)衰的(de)(de)顯著治(zhi)療(liao)(liao)作用(yong)。此(ci)外(wai)，與雷米(mi)普利(li)組(zu)比(bi)較(jiao)，雷米(mi)普利(li)/沙庫(ku)比(bi)曲/葉(xie)(xie)酸(suan)組(zu)ANP濃度(du)明顯增高，PEP下降(jiang)、CO上升(sheng)亦(yi)(yi)更(geng)為顯著，提示本組(zu)方對心(xin)衰的(de)(de)治(zhi)療(liao)(liao)作用(yong)具有(you)一定優勢。