本發明屬于藥物載體基礎材(cai)料(liao)的合成技術(shu)領域，具體涉及一種具有(you)磁性和葉酸雙重(zhong)靶(ba)向的復合納米材(cai)料(liao)的制備方(fang)法。

背景技術：

葉(xie)(xie)酸(suan)是一(yi)種(zhong)水溶性(xing)B族維生素，對(dui)于核苷酸(suan)的(de)更(geng)新及單電子轉移(yi)反(fan)應是必須的(de)，甚(shen)至在其通(tong)過(guo)γ-羧(suo)基(ji)被衍生化后仍能(neng)保持對(dui)葉(xie)(xie)酸(suan)受(shou)體(ti)的(de)親和力，因此成為可(ke)能(neng)的(de)腫(zhong)(zhong)瘤(liu)靶(ba)向配基(ji)。而眾(zhong)所(suo)周知，一(yi)些惡(e)性(xing)腫(zhong)(zhong)瘤(liu)，尤(you)其是卵巢、鼻咽、宮頸和絨毛膜瘤(liu)均有(you)高水平表(biao)達(da)的(de)葉(xie)(xie)酸(suan)受(shou)體(ti)，這些受(shou)體(ti)可(ke)通(tong)過(guo)血流接近(jin)，而在一(yi)些正常組織，如胎盤、腎、輸卵管脈(mo)絡膜叢，其表(biao)達(da)則被局(ju)限在無法接近(jin)血流的(de)上皮細胞(bao)腔壁。研究表(biao)明(ming)，盡(jin)管存(cun)在一(yi)定的(de)生理水平的(de)葉(xie)(xie)酸(suan)血流中的(de)葉(xie)(xie)酸(suan)受(shou)體(ti)，葉(xie)(xie)酸(suan)受(shou)體(ti)特(te)有(you)的(de)腫(zhong)(zhong)瘤(liu)依然對(dui)葉(xie)(xie)酸(suan)鍵合物(wu)能(neng)夠(gou)吸收。葉(xie)(xie)酸(suan)靶(ba)向已經被用來評估很多治療藥(yao)物(wu)的(de)腫(zhong)(zhong)瘤(liu)細胞(bao)選擇性(xing)遞(di)送過(guo)程。因此，具有(you)葉(xie)(xie)酸(suan)的(de)載體(ti)可(ke)實現對(dui)腫(zhong)(zhong)瘤(liu)部位的(de)主動結(jie)合，實現主動靶(ba)向。

磁性納米粒子如Fe₃O₄已經在(zai)(zai)生物(wu)(wu)醫學(xue)如(ru)靶向(xiang)遞(di)(di)藥(yao)、生物(wu)(wu)傳感器、生化分(fen)離及磁(ci)(ci)(ci)共振成像中(zhong)(zhong)得到應(ying)用，藥(yao)物(wu)(wu)磁(ci)(ci)(ci)靶向(xiang)即將藥(yao)物(wu)(wu)固定于磁(ci)(ci)(ci)性材料中(zhong)(zhong)，通過外磁(ci)(ci)(ci)場進行導向(xiang)已經成為(wei)重要的遞(di)(di)藥(yao)手段。因其(qi)提高了現有的藥(yao)物(wu)(wu)和基(ji)因傳遞(di)(di)技術，超順磁(ci)(ci)(ci)性納米粒子對藥(yao)物(wu)(wu)分(fen)子的遞(di)(di)藥(yao)有潛在(zai)(zai)的臨床應(ying)用。

將葉酸和(he)(he)磁(ci)性納(na)米粒子(zi)通過化學或(huo)物理作用(yong)(yong)嵌入藥物載體(ti)，則(ze)可(ke)實現物理磁(ci)靶(ba)(ba)向(xiang)(xiang)和(he)(he)主動靶(ba)(ba)向(xiang)(xiang)相結合的(de)(de)雙重靶(ba)(ba)向(xiang)(xiang)作用(yong)(yong)，從而提(ti)高藥效，減(jian)少(shao)正常組織的(de)(de)副作用(yong)(yong)。針(zhen)對以上情況(kuang)，本發明將葉酸直接與磁(ci)性材料相結合，從而形(xing)成(cheng)新的(de)(de)復(fu)合納(na)米粒子(zi)，則(ze)以此(ci)為基礎，方便與各(ge)種無機或(huo)有機材料進行(xing)復(fu)合，從而實現載體(ti)對藥物的(de)(de)主動靶(ba)(ba)向(xiang)(xiang)和(he)(he)磁(ci)靶(ba)(ba)向(xiang)(xiang)。

技術實現要素：

本發明解決的(de)(de)技術問題是提供了一種能夠在極性溶劑中良好(hao)分(fen)散的(de)(de)具有(you)磁性和葉酸雙重靶向的(de)(de)復合納米材(cai)料的(de)(de)制備方法(fa)。

本發明為解決(jue)上述技術問題采用如(ru)下技術方(fang)案，具有磁性(xing)和(he)葉酸(suan)雙重靶向的復合納(na)米(mi)材(cai)料(liao)的制備方(fang)法(fa)，其(qi)特征(zheng)在(zai)于具體步驟為：

（1）油酸(suan)保(bao)護的(de)四氧化三鐵(tie)納米(mi)粒(li)子(zi)的(de)合成(cheng)，將六水(shui)合氯化鐵(tie)和油酸(suan)鈉(na)溶(rong)(rong)于乙醇(chun)(chun)、水(shui)和正己烷(wan)的(de)混合溶(rong)(rong)液中(zhong)，加熱回流2h，用去離(li)子(zi)水(shui)洗滌后(hou)(hou)(hou)真空干(gan)燥得到(dao)油酸(suan)鐵(tie)磁流體(ti)，將油酸(suan)鐵(tie)磁流體(ti)溶(rong)(rong)于60℃的(de)水(shui)中(zhong)，加入(ru)油酸(suan)，在(zai)氮氣保(bao)護下以3-5℃/min的(de)升(sheng)溫(wen)(wen)速率(lv)升(sheng)溫(wen)(wen)至(zhi)(zhi)200℃保(bao)持(chi)20min，繼續以3-5℃/min的(de)升(sheng)溫(wen)(wen)速率(lv)升(sheng)溫(wen)(wen)至(zhi)(zhi)320℃保(bao)持(chi)40min，然后(hou)(hou)(hou)降溫(wen)(wen)至(zhi)(zhi)60℃用乙醇(chun)(chun)洗滌后(hou)(hou)(hou)溶(rong)(rong)于環己烷(wan)中(zhong)，再用乙醇(chun)(chun)沉淀并離(li)心(xin)分離(li)后(hou)(hou)(hou)于60℃烘(hong)干(gan)得到(dao)油酸(suan)保(bao)護的(de)四氧化三鐵(tie)納米(mi)粒(li)子(zi)；

（2）二巰基丁二酸修飾的(de)四氧化三(san)鐵納(na)米粒子(zi)的(de)合成(cheng)，將步驟(zou)（1）得(de)(de)到的(de)油酸保(bao)護的(de)四氧化三(san)鐵納(na)米粒子(zi)分(fen)散于氯仿中(zhong)并加入(ru)三(san)乙(yi)胺(an)，分(fen)散均勻后加入(ru)到二巰基丁二酸的(de)二甲基亞砜溶液(ye)中(zhong)，再置于60℃的(de)油浴中(zhong)攪拌反應24h，所(suo)得(de)(de)產物離心分(fen)離，沉淀用乙(yi)醇洗滌(di)得(de)(de)到二巰基丁二酸修飾的(de)四氧化三(san)鐵納(na)米粒子(zi)；

（3）葉酸(suan)乙(yi)(yi)(yi)二(er)(er)(er)(er)胺(an)復合物(wu)的(de)合成，將葉酸(suan)和1-(3-二(er)(er)(er)(er)甲氨基(ji)丙(bing)基(ji))-3-乙(yi)(yi)(yi)基(ji)碳二(er)(er)(er)(er)亞胺(an)鹽(yan)酸(suan)鹽(yan)加(jia)入到溶解有Boc-乙(yi)(yi)(yi)二(er)(er)(er)(er)胺(an)和三乙(yi)(yi)(yi)胺(an)的(de)二(er)(er)(er)(er)甲基(ji)甲酰(xian)胺(an)溶液中，于40-80℃反應(ying)60h，反應(ying)完全后加(jia)入氯(lv)仿和水(shui)，靜置分層后傾(qing)去(qu)(qu)上層溶液，用(yong)飽(bao)和食(shi)鹽(yan)水(shui)洗滌沉淀(dian)，揮(hui)發除去(qu)(qu)溶劑(ji)后再(zai)溶于乙(yi)(yi)(yi)醇(chun)，抽濾，取濾液加(jia)入蒸(zheng)餾水(shui)沉淀(dian)，在沉淀(dian)中加(jia)入二(er)(er)(er)(er)氯(lv)甲烷和三氟乙(yi)(yi)(yi)酸(suan)，常溫靜置3h，除去(qu)(qu)有機(ji)溶劑(ji)后再(zai)用(yong)丙(bing)酮洗滌，然后離心分離得(de)到固體葉酸(suan)乙(yi)(yi)(yi)二(er)(er)(er)(er)胺(an)復合物(wu)；

（4）具有(you)磁性和葉酸雙(shuang)重靶(ba)(ba)向(xiang)復合(he)納(na)米材(cai)(cai)料的(de)合(he)成，將步驟（3）得(de)(de)到(dao)(dao)的(de)葉酸乙(yi)二胺復合(he)物溶(rong)于水中(zhong)并加入(ru)步驟（2）得(de)(de)到(dao)(dao)的(de)二巰基丁二酸修飾(shi)的(de)四氧化三鐵(tie)納(na)米粒子和二環己(ji)基碳二亞胺，回流(liu)反應48h后離心(xin)分離，水洗三遍得(de)(de)到(dao)(dao)目(mu)標產物具有(you)磁性和葉酸雙(shuang)重靶(ba)(ba)向(xiang)復合(he)納(na)米材(cai)(cai)料。

進(jin)一(yi)步優選，步驟（1）中(zhong)(zhong)所述六水合氯化鐵(tie)與油酸(suan)鈉的(de)質量(liang)比(bi)為3:1，乙醇(chun)、水和(he)正己(ji)烷(wan)的(de)混(hun)合溶(rong)液(ye)中(zhong)(zhong)乙醇(chun)、水與正己(ji)烷(wan)的(de)體積(ji)比(bi)為20:15:35。

進(jin)一步優選，步驟(zou)（2）中所述二巰基丁(ding)二酸與油(you)酸保(bao)護的(de)四氧化三鐵納米粒子的(de)質(zhi)量比為1:2。

進一步優(you)選，步驟（3）中所述葉酸與(yu)1-(3-二(er)(er)甲(jia)氨基(ji)丙基(ji))-3-乙基(ji)碳二(er)(er)亞胺鹽(yan)酸鹽(yan)的質量(liang)比(bi)為1-3:1，Boc-乙二(er)(er)胺與(yu)三乙胺的體(ti)積(ji)比(bi)為1:1-3，二(er)(er)氯甲(jia)烷與(yu)三氟乙酸的體(ti)積(ji)比(bi)為10-20:1。

進一步(bu)優(you)選，步(bu)驟（4）中所述葉酸(suan)乙二胺(an)復合物(wu)(wu)溶(rong)于水形成的溶(rong)液中葉酸(suan)乙二胺(an)復合物(wu)(wu)的質量分數(shu)為1%-4%，二巰基丁二酸(suan)修飾的四(si)氧化三鐵納(na)米粒子與(yu)二環己基碳二亞胺(an)的質量比為1-5:1。

本發明(ming)與(yu)現有(you)技術相(xiang)比具有(you)以下有(you)益(yi)效果：

1、本發明所合成的具有磁性(xing)和葉酸雙重靶向(xiang)復(fu)合納米材料(liao)能夠在水等極性(xing)溶劑中(zhong)很好的分散；

2、本發明所合成的具有(you)(you)磁性(xing)和(he)葉酸雙重靶向復合納米材料能夠(gou)進一步與親水性(xing)高分子結合形成親水性(xing)藥(yao)物(wu)載體，并且具有(you)(you)腫瘤(liu)靶向作用。

附圖說明

圖(tu)1是實施例1合成(cheng)的(de)(de)不同化合物的(de)(de)紅外光譜(pu)圖(tu)；

圖(tu)2是(shi)實施(shi)例1合成的葉酸乙二胺復合物與葉酸的熒光(guang)圖(tu)譜；

圖3是實施(shi)例1合成的具有(you)磁性(xing)和(he)葉(xie)酸雙重靶向復合納米材料的透射(she)電鏡圖；

圖4是(shi)實施例1合成的具有磁性(xing)和葉酸(suan)雙(shuang)重靶向復(fu)合納米材料(liao)的磁滯曲線(xian)。

具體實施方式

以下通(tong)過實(shi)施(shi)例對本(ben)(ben)發明(ming)的(de)上述內(nei)容做進(jin)一步詳細說明(ming)，但不(bu)應該將此理解為本(ben)(ben)發明(ming)上述主題的(de)范(fan)圍(wei)僅(jin)限于(yu)以下的(de)實(shi)施(shi)例，凡(fan)基于(yu)本(ben)(ben)發明(ming)上述內(nei)容實(shi)現的(de)技術均屬于(yu)本(ben)(ben)發明(ming)的(de)范(fan)圍(wei)。

本發明(ming)合成過程的反應方程式為：

實施例1

（1）油(you)(you)酸(suan)(suan)保(bao)(bao)護(hu)的(de)(de)(de)(de)四氧化三鐵(tie)納米(mi)粒子(zi)(zi)的(de)(de)(de)(de)合成，將3g六水(shui)合氯化鐵(tie)和(he)1g油(you)(you)酸(suan)(suan)鈉溶(rong)于70mL乙(yi)醇、水(shui)和(he)正(zheng)己烷（20:15:35，v/v/v）的(de)(de)(de)(de)混合溶(rong)液(ye)中，加熱回流2h，用去離子(zi)(zi)水(shui)洗滌(di)后(hou)真(zhen)空(kong)干燥得到(dao)油(you)(you)酸(suan)(suan)鐵(tie)磁(ci)流體，將油(you)(you)酸(suan)(suan)鐵(tie)磁(ci)流體溶(rong)于60℃的(de)(de)(de)(de)水(shui)中，加入2mL油(you)(you)酸(suan)(suan)，在氮(dan)氣保(bao)(bao)護(hu)下以(yi)4℃/min的(de)(de)(de)(de)升溫(wen)速率升溫(wen)至(zhi)200℃保(bao)(bao)持20min，繼續以(yi)4℃/min的(de)(de)(de)(de)升溫(wen)速率升溫(wen)至(zhi)320℃保(bao)(bao)持40min，然(ran)后(hou)降溫(wen)至(zhi)60℃用乙(yi)醇洗滌(di)后(hou)溶(rong)于環己烷中，再(zai)用乙(yi)醇沉淀并(bing)離心(xin)分(fen)離后(hou)于60℃烘干得到(dao)油(you)(you)酸(suan)(suan)保(bao)(bao)護(hu)的(de)(de)(de)(de)四氧化三鐵(tie)納米(mi)粒子(zi)(zi)；

（2）二巰基丁(ding)(ding)二酸修飾的四氧(yang)化三(san)鐵納米粒子的合成(cheng)，將1g步驟（1）得到的油酸保護的四氧(yang)化三(san)鐵納米粒子分(fen)散于(yu)10mL氯仿中(zhong)并加入0.5mL三(san)乙胺，分(fen)散均(jun)勻后加入到0.5g二巰基丁(ding)(ding)二酸的二甲基亞(ya)砜溶液(ye)中(zhong)，再(zai)置(zhi)于(yu)60℃的油浴中(zhong)攪拌反應24h，所得產物離心(xin)分(fen)離10min，沉淀用乙醇洗(xi)滌(di)得到二巰基丁(ding)(ding)二酸修飾的四氧(yang)化三(san)鐵納米粒子；

（3）葉酸(suan)乙二(er)胺(an)(an)復(fu)合(he)(he)物的合(he)(he)成，將2g葉酸(suan)和1g 1-(3-二(er)甲(jia)氨基(ji)丙(bing)基(ji))-3-乙基(ji)碳二(er)亞胺(an)(an)鹽(yan)酸(suan)鹽(yan)加入(ru)到溶解有1mL Boc-乙二(er)胺(an)(an)和2mL三乙胺(an)(an)的二(er)甲(jia)基(ji)甲(jia)酰(xian)胺(an)(an)溶液(ye)(ye)中，于60℃反應60h，反應完全后(hou)(hou)加入(ru)氯仿和水(shui)，靜置后(hou)(hou)分層傾(qing)去上層溶液(ye)(ye)，飽和食鹽(yan)水(shui)洗滌沉(chen)淀(dian)，揮(hui)發除(chu)去溶劑后(hou)(hou)再溶于乙醇，抽濾(lv)，取濾(lv)液(ye)(ye)加入(ru)蒸餾水(shui)沉(chen)淀(dian)，在沉(chen)淀(dian)中加入(ru)15mL二(er)氯甲(jia)烷(wan)和1mL三氟乙酸(suan)，常溫(wen)靜置3h，除(chu)去有機溶劑后(hou)(hou)再用丙(bing)酮洗滌，然后(hou)(hou)離心分離得到固體葉酸(suan)乙二(er)胺(an)(an)復(fu)合(he)(he)物；

（4）具(ju)(ju)有(you)磁性和(he)葉酸(suan)雙(shuang)重靶(ba)向(xiang)復合納米(mi)材料的(de)合成，將2g步(bu)驟（3）得到的(de)葉酸(suan)乙二(er)(er)(er)胺復合物溶于100mL水中并(bing)加(jia)入3g步(bu)驟（2）得到的(de)二(er)(er)(er)巰基(ji)丁二(er)(er)(er)酸(suan)修(xiu)飾(shi)的(de)四氧化三(san)鐵納米(mi)粒子和(he)1g二(er)(er)(er)環(huan)己(ji)基(ji)碳二(er)(er)(er)亞胺，回流反應48h后離心分離，水洗三(san)遍得到目標產物具(ju)(ju)有(you)磁性和(he)葉酸(suan)雙(shuang)重靶(ba)向(xiang)復合納米(mi)材料。

實施例2

（1）油(you)(you)酸(suan)保(bao)護(hu)的四(si)氧化(hua)三鐵(tie)納米(mi)粒子的合成，將3g六水(shui)合氯化(hua)鐵(tie)和(he)1g油(you)(you)酸(suan)鈉溶(rong)(rong)于(yu)(yu)70mL乙(yi)醇(chun)(chun)、水(shui)和(he)正(zheng)己(ji)烷（20:15:35，v/v/v）的混(hun)合溶(rong)(rong)液中(zhong)，加熱回流2h，用去離(li)子水(shui)洗滌(di)后(hou)(hou)真空干燥得(de)到油(you)(you)酸(suan)鐵(tie)磁(ci)流體，將油(you)(you)酸(suan)鐵(tie)磁(ci)流體溶(rong)(rong)于(yu)(yu)60℃的水(shui)中(zhong)，加入3mL油(you)(you)酸(suan)，在氮(dan)氣保(bao)護(hu)下以5℃/min的升(sheng)溫速率(lv)升(sheng)溫至(zhi)200℃保(bao)持(chi)20min，繼續以5℃/min的升(sheng)溫速率(lv)升(sheng)溫至(zhi)320℃保(bao)持(chi)40min，然后(hou)(hou)降(jiang)溫至(zhi)60℃用乙(yi)醇(chun)(chun)洗滌(di)后(hou)(hou)溶(rong)(rong)于(yu)(yu)環己(ji)烷中(zhong)，再用乙(yi)醇(chun)(chun)沉淀并離(li)心分離(li)后(hou)(hou)于(yu)(yu)60℃烘干得(de)到油(you)(you)酸(suan)保(bao)護(hu)的四(si)氧化(hua)三鐵(tie)納米(mi)粒子；

（2）二(er)巰基(ji)(ji)丁二(er)酸(suan)修飾(shi)的(de)四(si)氧(yang)(yang)化(hua)三(san)鐵納(na)米粒(li)子的(de)合成，將1g步驟(zou)（1）得到(dao)的(de)油(you)酸(suan)保護的(de)四(si)氧(yang)(yang)化(hua)三(san)鐵納(na)米粒(li)子分散于(yu)10mL氯仿中并(bing)加入(ru)0.5mL三(san)乙(yi)胺(an)，分散均勻(yun)后加入(ru)到(dao)0.5g二(er)巰基(ji)(ji)丁二(er)酸(suan)的(de)二(er)甲基(ji)(ji)亞砜溶液(ye)中，再置(zhi)于(yu)60℃的(de)油(you)浴中攪拌反應24h，所(suo)得產(chan)物離(li)心分離(li)10min，沉(chen)淀用(yong)乙(yi)醇洗滌得到(dao)二(er)巰基(ji)(ji)丁二(er)酸(suan)修飾(shi)的(de)四(si)氧(yang)(yang)化(hua)三(san)鐵納(na)米粒(li)子；

（3）葉(xie)酸(suan)乙(yi)二(er)(er)(er)胺(an)(an)復(fu)合(he)物(wu)的(de)(de)合(he)成，將3g葉(xie)酸(suan)和1g 1-(3-二(er)(er)(er)甲氨基(ji)(ji)丙基(ji)(ji))-3-乙(yi)基(ji)(ji)碳二(er)(er)(er)亞胺(an)(an)鹽(yan)酸(suan)鹽(yan)加(jia)入(ru)到溶解有1mL Boc-乙(yi)二(er)(er)(er)胺(an)(an)和1mL三乙(yi)胺(an)(an)的(de)(de)二(er)(er)(er)甲基(ji)(ji)甲酰胺(an)(an)溶液(ye)中(zhong)，于40℃反(fan)應60h，反(fan)應完全后加(jia)入(ru)氯仿和水，靜置后分層傾去上層溶液(ye)，飽和食鹽(yan)水洗(xi)滌(di)沉淀，揮發(fa)除(chu)(chu)去溶劑后再溶于乙(yi)醇，抽(chou)濾，取濾液(ye)加(jia)入(ru)蒸餾水沉淀，在沉淀中(zhong)加(jia)入(ru)10mL二(er)(er)(er)氯甲烷和1mL三氟乙(yi)酸(suan)，常(chang)溫靜置3h，除(chu)(chu)去有機溶劑后再用(yong)丙酮(tong)洗(xi)滌(di)，然后離(li)心(xin)分離(li)得到固體葉(xie)酸(suan)乙(yi)二(er)(er)(er)胺(an)(an)復(fu)合(he)物(wu)；

（4）具有磁性(xing)和葉(xie)酸(suan)雙(shuang)重(zhong)靶(ba)向(xiang)復(fu)合(he)納米(mi)材料的(de)合(he)成，將4g步驟（3）得到的(de)葉(xie)酸(suan)乙二(er)胺復(fu)合(he)物(wu)溶于100mL水(shui)(shui)中并(bing)加入5g步驟（2）得到的(de)二(er)巰基(ji)丁二(er)酸(suan)修(xiu)飾的(de)四氧化三(san)鐵納米(mi)粒子和1g二(er)環己基(ji)碳二(er)亞(ya)胺，回流反應48h后離心分離，水(shui)(shui)洗三(san)遍得到目標產物(wu)具有磁性(xing)和葉(xie)酸(suan)雙(shuang)重(zhong)靶(ba)向(xiang)復(fu)合(he)納米(mi)材料。

實施例3

（1）油(you)酸保(bao)(bao)護(hu)(hu)的四氧(yang)化三鐵(tie)納米粒子的合成，將3g六水(shui)合氯(lv)化鐵(tie)和1g油(you)酸鈉溶(rong)(rong)于(yu)(yu)70mL乙醇(chun)、水(shui)和正(zheng)己烷(wan)（20:15:35，v/v/v）的混合溶(rong)(rong)液中，加(jia)熱回(hui)流2h，用(yong)(yong)去離子水(shui)洗滌后(hou)真空(kong)干(gan)燥得到油(you)酸鐵(tie)磁流體，將油(you)酸鐵(tie)磁流體溶(rong)(rong)于(yu)(yu)60℃的水(shui)中，加(jia)入(ru)3mL油(you)酸，在氮氣保(bao)(bao)護(hu)(hu)下以(yi)(yi)3℃/min的升溫速率(lv)升溫至(zhi)(zhi)200℃保(bao)(bao)持20min，繼(ji)續以(yi)(yi)3℃/min的升溫速率(lv)升溫至(zhi)(zhi)320℃保(bao)(bao)持40min，然后(hou)降溫至(zhi)(zhi)60℃用(yong)(yong)乙醇(chun)洗滌后(hou)溶(rong)(rong)于(yu)(yu)環己烷(wan)中，再用(yong)(yong)乙醇(chun)沉淀(dian)并離心分離后(hou)于(yu)(yu)60℃烘(hong)干(gan)得到油(you)酸保(bao)(bao)護(hu)(hu)的四氧(yang)化三鐵(tie)納米粒子；

（2）二(er)(er)巰基(ji)(ji)丁(ding)二(er)(er)酸(suan)(suan)修(xiu)飾的(de)四氧化三鐵納米粒子(zi)的(de)合成，將1g步驟(zou)（1）得到的(de)油酸(suan)(suan)保護的(de)四氧化三鐵納米粒子(zi)分散于(yu)(yu)10mL氯仿中(zhong)并加入0.5mL三乙(yi)胺，分散均勻后加入到0.5g二(er)(er)巰基(ji)(ji)丁(ding)二(er)(er)酸(suan)(suan)的(de)二(er)(er)甲基(ji)(ji)亞砜(feng)溶液中(zhong)，再置(zhi)于(yu)(yu)60℃的(de)油浴中(zhong)攪拌反(fan)應24h，所得產(chan)物(wu)離心分離10min，沉淀(dian)用乙(yi)醇(chun)洗滌得到二(er)(er)巰基(ji)(ji)丁(ding)二(er)(er)酸(suan)(suan)修(xiu)飾的(de)四氧化三鐵納米粒子(zi)；

（3）葉酸(suan)(suan)(suan)乙(yi)二(er)(er)(er)胺(an)(an)復合物(wu)的合成，將1g葉酸(suan)(suan)(suan)和(he)(he)(he)1g 1-(3-二(er)(er)(er)甲(jia)(jia)氨基(ji)(ji)丙基(ji)(ji))-3-乙(yi)基(ji)(ji)碳二(er)(er)(er)亞(ya)胺(an)(an)鹽酸(suan)(suan)(suan)鹽加(jia)入(ru)到(dao)溶(rong)(rong)解有1mL Boc-乙(yi)二(er)(er)(er)胺(an)(an)和(he)(he)(he)3mL三乙(yi)胺(an)(an)的二(er)(er)(er)甲(jia)(jia)基(ji)(ji)甲(jia)(jia)酰(xian)胺(an)(an)溶(rong)(rong)液中，于(yu)80℃反應(ying)(ying)60h，反應(ying)(ying)完全后(hou)加(jia)入(ru)氯(lv)仿和(he)(he)(he)水，靜置后(hou)分層傾(qing)去上層溶(rong)(rong)液，飽和(he)(he)(he)食(shi)鹽水洗滌沉(chen)淀(dian)，揮發除去溶(rong)(rong)劑(ji)后(hou)再溶(rong)(rong)于(yu)乙(yi)醇，抽(chou)濾，取濾液加(jia)入(ru)蒸餾水沉(chen)淀(dian)，在沉(chen)淀(dian)中加(jia)入(ru)20mL二(er)(er)(er)氯(lv)甲(jia)(jia)烷(wan)和(he)(he)(he)1mL三氟(fu)乙(yi)酸(suan)(suan)(suan)，常溫靜置3h，除去有機溶(rong)(rong)劑(ji)后(hou)再用丙酮洗滌，然(ran)后(hou)離心分離得到(dao)固體(ti)葉酸(suan)(suan)(suan)乙(yi)二(er)(er)(er)胺(an)(an)復合物(wu)；

（4）具有磁性和(he)(he)(he)葉酸雙重靶(ba)向(xiang)復合(he)納米材(cai)料(liao)的合(he)成，將1g步驟（3）得(de)到(dao)的葉酸乙二(er)胺復合(he)物溶(rong)于100mL水中并加入1g步驟（2）得(de)到(dao)的二(er)巰基丁二(er)酸修飾(shi)的四氧化三鐵納米粒(li)子和(he)(he)(he)1g二(er)環(huan)己基碳二(er)亞胺，回流(liu)反應48h后離(li)心分離(li)，水洗三遍得(de)到(dao)目標產物具有磁性和(he)(he)(he)葉酸雙重靶(ba)向(xiang)復合(he)納米材(cai)料(liao)。

以上(shang)實(shi)施(shi)例(li)(li)描述(shu)了(le)本(ben)(ben)發(fa)明(ming)的(de)基本(ben)(ben)原(yuan)理(li)(li)、主要(yao)特征及優(you)點，本(ben)(ben)行業的(de)技術人員應該(gai)了(le)解，本(ben)(ben)發(fa)明(ming)不受(shou)上(shang)述(shu)實(shi)施(shi)例(li)(li)的(de)限(xian)制，上(shang)述(shu)實(shi)施(shi)例(li)(li)和(he)說明(ming)書中描述(shu)的(de)只是(shi)說明(ming)本(ben)(ben)發(fa)明(ming)的(de)原(yuan)理(li)(li)，在不脫離本(ben)(ben)發(fa)明(ming)原(yuan)理(li)(li)的(de)范圍下(xia)，本(ben)(ben)發(fa)明(ming)還會有(you)各種變化和(he)改進(jin)，這(zhe)些變化和(he)改進(jin)均落入本(ben)(ben)發(fa)明(ming)保護(hu)的(de)范圍內。