專利名稱：治療慢性心力衰竭的醫藥組合物的制作方法
技術領域：
本發明涉及慢性心力衰竭患者的特定癥狀的改善劑，尤其是慢性心力衰竭患者的運動耐量改善劑、心肌梗塞后的慢性心力衰竭患者的生存期延長劑、慢性心力衰竭患者的左心室的擴張機能和收縮機能低下的改善劑或慢性心力衰竭患者心肌梗塞后的心肌重構抑制劑。
背景技術：
國際專利公開第97/22595號公報記載了N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺及其鹽，揭示其具有抑制ET-1與內皮素ETA受體的結合以及抑制ET-1誘發的血管收縮、升壓的作用，暗示可用于以心血管疾病為代表的與內皮素有關的各種疾病的治療。
本發明者以創制新型治療藥為目的，深入研究了N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其鹽對更具體的疾病進行治療的可能性。
發明的揭示本發明者發現N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其鹽能有效地改善慢性心力衰竭患者的特定癥狀，從而完成了本發明。
本發明者發現，N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其鹽能有效地改善慢性心力衰竭的運動耐量，從而完成了本發明。尚未見報道內皮素受體拮抗劑能改善慢性心力衰竭的運動耐量。從下述試驗例1所示的心力衰竭的大鼠的長期口服試驗中能夠獲知，本發明的有效成分以1mg/kg·日的極低劑量就顯示了改善運動耐量低下的作用。
而且，本發明者發現，N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其鹽能有效地延長心肌梗塞后的慢性心力衰竭的生存期，從而完成了本發明。對ETA受體及ETB受體無選擇性的拮抗劑波生坦(bosentan)對心肌梗塞后心力衰竭模型進行口服9個月的長期試驗中，30mg/kg·日時無效，而100mg/kg·日時據報道能顯著改善死亡率(Circulation，96(6)1976-1982，1997)。另一方面，國際專利公開第97/22595號公報中，作為本發明的有效成分的實施例2的化合物在口服時對于脊髓被破壞的大鼠，用約1/50的波生坦劑量對big ET-1的升壓作用顯示同等的抑制作用。如下述試驗例1及例2所示的長期口服試驗中，本發明的有效成分對心肌梗塞后心力衰竭模型用1mg/kg·日的極低劑量就顯示改善死亡率的作用。
而且，本發明者發現，N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其鹽，能有效地改善慢性心力衰竭患者的左心室的擴張機能及收縮機能低下，從而完成了本發明。對ETA受體和ETB受體無選擇性的拮抗劑波生坦在大鼠心力衰竭模型的長期口服試驗中，能改善作為左心室擴張機能指標的左心室舒張末期壓(LVEDP)，但據報道對作為左心室收縮機能指標的左心室收縮期壓力最大變化率(LVdP/dtmax)得出無效的結果(Circulation，96(6)1976-1982，1997)。另外，ETA受體拮抗劑達盧生坦(darusentan)在大鼠心力衰竭模型的10周口服試驗中雖能改善左心室的舒張末期壓(LVEDP)，但據報道對左心室收縮期壓力最大變化率(LVdP/dtmax)和心肥大無效(Cardiovascular Research，39600-608，1998)。如下述試驗例2所示，在大鼠心力衰竭模型的長期口服試驗中，本發明的有效成分以1mg/kg·日的極低劑量對作為左心室擴張機能指標的左心室舒張末期壓(LVEDP)和作為左心室收縮機能指標的左心室收縮期壓力最大變化率(LVdP/dtmax)均顯示接近正常大鼠的相同程度的改善作用。
而且，本發明者發現，N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其鹽，能有效地抑制心肌梗塞后的慢性心力衰竭患者的心肌重構，從而完成了本發明。心肌重構是指心肌梗塞后發生的梗塞區變薄、非梗塞區離心性肥大、內腔擴大等一系列變化。心肌梗塞后的長期預后與左心室機能不全的程度相關，但抑制心肌重構對左心室機能的保持十分重要(Circulation，811161-1172，1990，Circulation，963294-3299，1997)。如下述試驗例2所示，在大鼠心肌梗塞后的心力衰竭模型的長期口服試驗中，本發明的有效成分以1mg/kg·日的極低劑量即顯示出抑制心肌重構的作用。
即，本發明涉及以N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其制藥學上容許的鹽為有效成分的醫藥組合物，該醫藥組合物可用于慢性心力衰竭患者的選自以下(1)～(4)的特定癥狀的改善。
(1)運動耐量低下，(2)心肌梗塞后的生存期縮短，(3)左心室擴張機能及收縮機能低下，(4)心肌梗塞后的心肌重構。
本發明涉及以N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其制藥學上容許的鹽為有效成分、用于改善慢性心力衰竭患者的運動耐量的醫藥組合物；用于延長心肌梗塞后慢性心力衰竭患者的生存期的醫藥組合物；用于改善慢性心力衰竭患者的左心室擴張機能及收縮機能低下的醫藥組合物；或者用于抑制心肌梗塞后慢性心力衰竭患者的心肌重構的醫藥組合物。
而且，本發明涉及N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其制藥學上容許的鹽在制備慢性心力衰竭患者的選自上述(1)～(4)的特定癥狀的改善劑中的應用。本發明涉及N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其制藥學上容許的鹽在制備慢性心力衰竭患者的運動耐量改善劑、心肌梗塞后慢性心力衰竭患者的生存期延長劑、慢性心力衰竭患者的左心室擴張機能及收縮機能低下的改善劑或心肌梗塞后慢性心力衰竭患者的心肌重構抑制劑中的應用。
此外，本發明涉及包括給患者服用治療有效量的N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其制藥學上容許的鹽的改善慢性心力衰竭患者的選自上述(1)～(4)的特定癥狀的方法。本發明涉及包括給患者服用治療有效量的N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其制藥學上容許的鹽的改善慢性心力衰竭患者的運動耐量的方法、延長心肌梗塞后慢性心力衰竭患者的生存期的方法、改善慢性心力衰竭患者的左心室擴張機能和收縮機能低下的方法或抑制心肌梗塞后慢性心力衰竭患者的心肌重構的方法。
此外，本發明的有效成分由于口服吸收性良好，所以可制成有效的口服治療藥。
以下，對本發明進行更詳細的說明。
本發明的醫藥有效成分是N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其制藥學上容許的鹽。這樣的鹽可列舉前述國際專利公開第97/22595號記載的鹽，具體包括與鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、硝酸、磷酸等無機酸及與甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、甲磺酸、乙磺酸、天冬氨酸、谷氨酸等有機酸的酸加成鹽，與鈉、鉀、鎂、鈣、鋁等無機堿及與甲胺、乙胺、乙醇胺、賴氨酸、鳥氨酸等有機堿形成的鹽和銨鹽等。特別好的是鉀鹽。
而且，本發明的有效成分包括所有的各種異構體的混合物及分離的異構體、水合物、溶劑合物。且本發明的有效成分中也存在多晶型化合物，包括所有結晶型。
這些化合物根據上述國際專利公開第97/22595號記載的制法或以該制法為基準能夠很容易地制得。
采用適于口服或非口服的有機或無機載體、賦形劑和其他添加劑，根據常法可制備作為本發明的藥物的口服固體制劑、口服液體制劑或注射劑。本發明的醫藥有效成分因具有優良的口服吸收性，所以適于制備口服制劑。最好是患者自己容易服用，且便于保存和運輸的口服固體制劑。
口服固體制劑可以是片劑、散劑、細粒劑、顆粒劑、膠囊劑、丸劑、緩釋制劑等。這些固體制劑中，一種或以上的活性物質與至少一種惰性稀釋劑，例如乳糖、甘露醇、葡萄糖、微晶纖維素、淀粉、玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、鋁硅酸鎂混合。根據常法，組合物可含有惰性稀釋劑以外的添加劑，例如，羥丙纖維素、羥丙甲纖維素(HPMC)等粘合劑，硬脂酸鎂、聚乙二醇、淀粉和滑石粉等潤滑劑，纖維素乙醇酸鈣等崩解劑，氧化鈦、滑石、黃色氧化鐵等著色劑。片劑或丸劑必要時可用蔗糖、明膠、瓊脂、果膠、羥丙纖維素、羥丙甲纖維素鄰苯二甲酸酯等糖衣或胃溶性或腸溶性薄膜包衣。
口服液體制劑包括制藥學上容許的乳濁劑、溶液劑、懸浮劑、糖漿劑、酏劑等，含有通常使用的惰性稀釋劑，例如精制水、乙醇。這些組合物可含有惰性稀釋劑以外的濕潤劑和懸浮劑等助劑、甜味劑、調味劑、芳香劑、防腐劑。
靜注、肌注、皮下注射等注射劑包括無菌的水性或非水性的溶液劑、懸浮劑、乳劑。水性溶液劑、懸浮劑的稀釋劑包括注射用蒸餾水及生理鹽水。非水溶性的溶液劑、懸浮劑的稀釋劑有丙二醇、聚乙二醇、橄欖油等植物油，乙醇等醇類，聚山梨酯80等。這些組合物中還可含有防腐劑、濕潤劑、乳化劑、分散劑、穩定劑(如乳糖)、增溶劑(如谷氨酸、天冬氨酸)等助劑。它們可經除菌濾器過濾，然后加入殺菌劑或經照射而滅菌。它們也可制成無菌的固體組合物，于使用前溶于無菌水或無菌的注射用溶劑而使用。
本發明的有效成分化合物的給藥量可根據給藥途徑、疾病癥狀、給藥對象的年齡、性別等各種情況而決定，但通常口服時成人的有效成分約0.1～500mg/日，較好為1～250mg/日，將其分1～2次給藥。
此外，本發明的藥劑可與其他治療慢性心力衰竭的藥物同時或間隔一段時間合并使用。可與本發明的藥劑并用的藥物包括馬來酸依那普利、賴諾普利等ACE抑制劑，螺內酯、坎利酸鉀(potassium canrenoate)、氨苯蝶啶等醛固酮拮抗藥，呋塞米、布美他尼、依他尼酸、阿佐塞米等髓袢利尿藥，氫氯噻嗪、三氯噻嗪、美托拉宗(metolazone)、曲帕胺(tripamide)、美夫西特(mefruside)等噻嗪類利尿藥，硝酸異山梨酯、硝酸甘油、肼屈嗪、卡培立肽等血管擴張藥，鹽酸多巴酚丁胺、鹽酸多巴胺、米力農、鹽酸Olprinone、匹莫苯、地諾帕明、地高辛、洋地黃毒苷、維司力農等強心藥，卡維地洛、酒石酸美托洛爾等β阻滯劑，氨氯地平等鈣拮抗劑，胺磺酮等抗心律失常藥。
附圖的簡單說明

圖1表示長期(24周)服用化合物1對經行走訓練的心肌梗塞后的心力衰竭大鼠的生存率的改善作用。
圖2表示長期(30周)服用化合物1對心肌梗塞后心力衰竭的大鼠的生存率的改善作用。
圖3表示長期服用化合物1對心肌梗塞后心力衰竭的大鼠的心功能的改善作用(A.左心室壓力最大變化率(LV+dp/dtmxa)、B.左心室舒張末期壓(LVEDP)、C.右心室收縮壓(RVSP)、D.中心靜脈壓(CVP))。
圖4表示長期服用化合物1對心肌梗塞后心力衰竭的大鼠的心肌重構的抑制作用。
實施發明的最佳方式根據以下實施例和試驗例對本發明作更詳細的說明，但本發明不限于這些實施例等。此外，以下實施例等使用的化合物1為N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺鉀鹽。
實施例1 膠囊劑表1

將上述成分混合，充填膠囊，制得膠囊劑。
試驗例1長期服用化合物1對心肌梗塞后慢性心力衰竭的大鼠的運動耐量低下和生存率的改善效果(方法)(1)心力衰竭模型大鼠的制作用冠狀動物結扎引起的心肌梗塞后的心力衰竭模型大鼠作為實驗性心力衰竭大鼠(Circ.Rse.，44(4)503-512，1979/Circulation，72406-412，1984)。采用6周齡的SD系雄性大鼠(120～150g)制作冠狀動脈結扎大鼠。大鼠在乙醚麻醉下開胸，用鉗子將肋間切開部擴大，剪開心包膜后將心臟從切口推出。用結扎線結扎左冠狀動脈降支后，迅速讓心臟返回胸腔內。其后在胸壁外側輕輕加壓使胸腔內不殘留空氣，閉胸。用傷口夾(wound crip)縫合皮膚。術后1周內對生存大鼠進行心電圖檢查，從心電圖上異常Q波的出現確定有無心肌梗塞以及梗塞區的大小。手術后1周內因急性心肌梗塞、心律失常等的死亡率約為60％。
(2)給藥將心肌梗塞大鼠分成2組，使梗塞區大小均等，在冠狀動脈結扎10日后的24周內，只給對照組(21只)連續飲用蒸餾水，給試驗組(14只)連續口服化合物1的0.2mg/ml溶液，每次5ml/kg，每日1次。另對12只大鼠以同樣的術式進行不結扎冠狀動脈的假手術，作為正常組同樣連續飲用蒸餾水，持續24周。
(3)運動負荷試驗為使大鼠預先習慣踏旋器行走試驗，在給藥期間每周進行短時間(5～10分左右)的行走訓練。在24周給藥之后，對生存大鼠用踏旋器行走裝置進行運動負荷試驗。將以一定行走速度(25m/min)行走至不能行走時的行走時間用于評價運動耐量，并算出各組的死亡率。
(4)統計處理對生存率及運動耐量測定結果進行統計學分析。在化合物1的組與對照組中進行對數秩和檢驗(Log rank test)，生存率檢定的風險率不到5％的情況認為有顯著差異。對運動耐量測定結果在正常組、對照組和試驗組中進行單因素方差分析后分別進行不成對的多重比較(Fisher’s LSD method)，風險率(P)不到5％的情況認為有顯著差異。
(結果)(1)對運動耐量的影響如表2所示，對心力衰竭模型進行運動負荷試驗的結果與做假手術的大鼠(正常組)相比，心力衰竭大鼠(對照組)行走時間顯著縮短。另一方面，試驗組比對照組的行走時間顯著延長。
以上顯示長期服用化合物1能顯著改善慢性心力衰竭大鼠的運動耐量。
表2

**與正常組比較P＜0.01，#與對照組比較p＜0.05(2)對死亡率的影響按圖1所示，正常組未見一例死亡，與此相比，對照組的死亡率在開始給藥的第24周為47.6％。另一方面，化合物1組死亡率為0.7％，這說明長期服用化合物1能明顯減少死亡率(p＝0.013)。
以上顯示使進行行走訓練的慢性心力衰竭大鼠長期服用化合物1能使死亡率顯著降低。
試驗例2長期服用化合物1以改善心肌梗塞后心力衰竭大鼠的生存率及心功能的效果(方法)(1)心力衰竭模型大鼠的制作與試驗例1同樣制作冠狀動脈結扎所致心肌梗塞后心力衰竭大鼠，用于實驗。
(2)將心肌梗塞大鼠分成2組使梗塞面積均等，在冠狀動脈結扎10天后開始約30周內，只給對照組(33只)飲用蒸餾水，給試驗組(21只)口服化合物1的0.2mg/ml溶液，每次5ml/kg，每日1次，連續口服。以同樣的術式經不結扎冠狀動脈的假手術的大鼠作為正常組(17只)，在約30周內同樣連續給它們飲用蒸餾水。
(3)心功能測定算出各組的死亡率，對長期給藥后生存的大鼠進行心重量及心臟血流動力學測定(血壓、左心室收縮壓、左心室舒張末期壓、LV+dP/dtmax、右心室收縮壓、中心靜脈壓等)。因正常組所有動物均生存，隨機選出9只進行心重量及心血流動力學測定。
(4)組織學檢查進行心血流動力學測定和心重量測定后，在左心室標本冠狀動脈結扎部位與心尖部之間制作2mm間隔的切片。將含乳頭肌的一切片以10％中性緩沖甲醛溶液固定后，切成3μm薄片。將薄切片貼附于載玻片，進行馬松三色(Masson trichrome)染色，將纖維組織染成藍色。在實體顯微鏡下(2.5倍)和光學顯微鏡下(200倍)觀察染色后的組織切片心肌細胞肥大和心肌纖維化情況。
(5)統計處理對生存率和心功能測定結果進行統計學分析。生存率檢定在對照組和化合物1組中進行對數秩和檢驗，風險率不到5％的情況認為有顯著差異。心功能測定結果在正常組、對照組和化合物1組中在單因素方差分析后分別進行不成對的多重比較(Fisher’s LSD method)，風險率(P)不到5％的情況認為有顯著差異。
(結果)(1)對死亡率的影響如圖2所示，正常組未見一例死亡，與此相比，對照組的死亡率在開始給藥第30周為81/8％。另一方面，化合物1組的死亡率為55.0％，這說明長期服用化合物1可顯著降低死亡率(p＝0.0465)。
以上說明給慢性心力衰竭大鼠長期服用化合物1可使死亡率顯著降低。
(2)對心功能的影響如圖3所示，測定生存大鼠的心血流動力學的結果是，心力衰竭大鼠(對照組)比做假手術的大鼠(正常組)的左心室壓力最大變化率(LV+dP/dtmax)顯著降低，左心室舒張末期壓(LVEDP)、右心室收縮壓(RVSP)和中心靜脈(CVP)顯著上升，因此心力衰竭大鼠(對照組)的左心室收縮機能和擴張機能低下，出現肺動脈高血壓和全身淤血。另一方面，試驗組的心力衰竭大鼠的左心室擴張機能和收縮機能的改善程度與正常組相同，減輕了右心負荷(圖3)。
以上說明給慢性心力衰竭大鼠長期服用化合物1能顯著改善左心室擴張機能和收縮機能的低下。
(3)對心肥大和心肌重構的影響對生存大鼠測定心重量的結果是，心力衰竭大鼠(對照組)與做假手術的大鼠(正常組)相比，其左心室重量體重比[(LV+SEP)/BW]、右心室重量體重比(RV/BW)及肺濕重體重比(肺/BW)顯著增大，心力衰竭大鼠(對照組)發生左心室及右心室肥大和肺淤血，這說明長期服用化合物1能顯著抑制兩心室肥大及肺淤血(表3)。
表3

**與正常組比較p＜0.01，##與對照組比較p＜0.01如圖4所示，對生存大鼠的左心室組織標本以實體顯微鏡觀察的結果是，與假手術大鼠(正常組)比較，心力衰竭大鼠(對照組)的左心室內腔擴大，這說明長期服用化合物1可抑制左心室內腔的擴大。以光學顯微鏡觀察非梗塞區殘存心肌的結果是，心力衰竭大鼠(對照組)與假手術大鼠(正常組)相比，出現各心肌細胞水平的伸長和肥大，且對照組的心肌細胞間隙的間質組織纖維化顯著。這說明長期服用化合物1能顯著抑制心力衰竭大鼠的心肌肥大和纖維化。
以上說明給心肌梗塞后的慢性心力衰竭大鼠長期服用化合物1能顯著改善心肌重構。
產業上利用的可能性本發明能提供改善慢性心力衰竭患者的特定癥狀的優良治療藥。即，能提供慢性心力衰竭患者的運動耐量的改善劑、心肌梗塞后的慢性心力衰竭患者的生存期延長劑、慢性心力衰竭患者的左心室擴張機能及收縮機能低下的改善劑及/或心肌梗塞后的慢性心力衰竭患者的心肌重構抑制劑。
權利要求
1.醫藥組合物，其特征在于，以N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其制藥學上容許的鹽為有效成分，用于改善慢性心力衰竭患者的選自以下(1)～(4)的特定癥狀(1)運動耐量低下，(2)心肌梗塞后的生存期縮短，(3)左心室擴張機能及收縮機能低下，(4)心肌梗塞后的心肌重構。
2.如權利要求1所述的醫藥組合物，其特征還在于，它是用于改善慢性心力衰竭患者的運動耐量的醫藥組合物。
3.如權利要求1所述的醫藥組合物，其特征還在于，它是用于延長心肌梗塞后慢性心力衰竭患者的生存期的醫藥組合物。
4.如權利要求1所述的醫藥組合物，其特征還在于，它是用于改善慢性心力衰竭患者的左心室擴張機能和收縮機能低下的醫藥組合物。
5.如權利要求1所述的醫藥組合物，其特征還在于，它是用于抑制心肌梗塞后慢性心力衰竭患者的心肌重構的醫藥組合物。
6.如權利要求1～5中任一項所述的醫藥組合物，其特征還在于，所述組合物為口服制劑。
全文摘要
改善慢性心力衰竭患者的運動耐量的醫藥組合物，它以N－[6－甲氧基－5－(2－甲氧基苯氧基)－2－(2－嘧啶基)－4－嘧啶基]－2－苯基乙烯磺酰胺或其制藥學上容許的鹽為有效成分。
文檔編號A61K31/506GK1491110SQ02804541
公開日2004年4月21日 申請日期2002年2月6日 優先權日2001年2月9日
發明者藤森明, 湯山弘法, 原田博規, 法, 規 申請人:山之內制藥株式會社