專利名稱：一種對抗細胞色素氧化酶p450抑制劑的藥物組合物及其用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種對抗細胞色素氧化酶P450抑制劑的藥物組合物，屬藥物領域。

背景技術：
細胞色素氧化酶P450(cyp450)是一類參與內源性和外源性化合物代謝的酶，主要存在于生物體的內質網內，肝臟cyp450酶系統對外源性藥物和毒物的代謝有非常重要的意義。這些化合物通過肝細胞中CYP450酶系統的代謝，可由疏水性強的形式轉變成為親水性強，易分泌排泄的形式。還有些外源性化合物也受肝外cyp450酶系統的影響，如胃腸道內cyp450對經口的外源化合物的生物轉化有很重要的意義。其活性被抑制可導致多種藥物代謝減緩，半衰期延長，為減輕或避免代謝性藥物相互作用的發生，最簡便易行的方法是合理選用藥物，而考慮cyp450酶至關重要。
目前尚未見報道有對抗cyp450抑制劑的藥物在臨床上的應用。


發明內容
本發明的技術方案是提供了一種對抗細胞色素氧化酶P450抑制劑的藥物組合物。
一種對抗細胞色素氧化酶P450(cyp450)抑制劑的藥物組合物，它是由含有有效量的甘草酸為活性成份制備而成的制劑。
其中，所述的有效量的甘草酸是60～540mg。
進一步地，所述的有效量的甘草酸是120～300mg。
更進一步地，所述的有效量的甘草酸是150～210mg。
所述的藥物組合物是含有甘草酸、細胞色素氧化酶P450抑制劑為活性成分，加上藥學上可接受的輔料或輔料性成分制備而成的制劑，甘草酸與細胞色素氧化酶P450抑制劑的重量配比為甘草酸20～90份、細胞色素氧化酶P450抑制劑30～200份。
其中，所述的細胞色素氧化酶P450抑制劑是天然藥材提取物、化合物。
進一步地，所述的天然藥材提取物是胡椒堿、肉桂提取物、吳茱萸提取物、小茴香提取物、花椒提取物。
進一步地，所述的化合物是伊曲康唑、克拉霉素、紅霉素、乙胺碘呋酮、氯西嗪、酮康唑、美托洛爾、甲硝唑、米康唑、去甲替林、口服避孕藥、羥保泰松、奮乃靜、保泰松、伯氨喹、普萘羅爾、奎尼丁、丙戌酸鈉、磺吡酮、磺胺、硫利達嗪、甲氟芐啶或維拉帕米。
其中，所述的制劑是口服制劑。所述的口服制劑是片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、口服液等藥學上常用的口服劑型。
本發明還提供了該藥物組合物在制備對抗細胞色素氧化酶P450抑制劑的藥物中的用途。
由于cyp450作為一種氧化酶在多種藥物的代謝過程中起著十分重要的作用。cyp450的變化可以改變藥物固有的半衰期，使藥物在體內停留的事件發生改變，當聯合用藥時，就有可能產生相互作用，影響療效。本發明甘草酸作為對抗多種cyp450抑制劑的藥物，使cyp450波動減小，能保證藥物本身藥效，且降低藥物的副作用，從而為藥物的聯合應用拓寬了道路，為臨床提供了一種新的用藥選擇。
顯然，根據本發明的上述內容，按照本領域的普通技術知識和慣用手段，在不脫離本發明上述基本技術思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。
以下通過實施例形式的具體實施方式
，對本發明的上述內容再作進一步的詳細說明。但不應將此理解為本發明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發明上述內容所實現的技術均屬于本發明的范圍。



圖1甘草酸對抗胡椒堿抑制cyp450的劑量關系 圖2甘草酸對抗胡椒堿抑制cyp450的劑量關系 圖3血藥濃度-時間曲線(A胡椒堿+甘草提取物+芍藥提取物；B芍藥提取物)
具體實施例方式 劑量說明在一個中藥復方中，60kg成人甘草使用量為12g/day(參看中華人民共和國藥典)，在制劑中甘草酸實際含量約為0.75％，即90mg。在該劑量下，同時口服給予胡椒堿90mg/day，不對肝藥酶產生抑制作用，前述甘草酸有效劑量依據來源于下述動物實驗。在大鼠動物實驗中所用劑量為等比例人體的10倍，所選取的甘草酸劑量10mg/kg、20mg/kg、25mg/kg、35mg/kg、50mg/kg、90mg/kg折算成60kg成人每日劑量分別為60mg、120mg、150mg、210mg、300mg、540mg。
實施例1本發明藥物的制備 取市售胡椒堿標準品(含胡椒堿98％)30mg分別與市售甘草酸標準品(含甘草酸98％)10mg、20mg、25mg、35mg、50mg、90mg混合，得到胡椒堿與甘草酸純品的混合物。
實施例2本發明藥物的制備 取甘草藥材用70％乙醇提取濃縮后經大孔吸附樹脂精制，得到含甘草酸25％的提取物；取胡椒用95％乙醇提取后經萃取及重結晶精制后得到含胡椒堿80％的提取物.取甘草提取物40g胡椒堿提取物37.5g經混合后，加入微粉硅膠10g，羧甲基淀粉鈉10g，預膠化淀粉252.5g，混合均勻，制成1000粒膠囊。每粒含甘草酸10mg，含胡椒堿30mg的膠囊劑。
實施例3本發明藥物的制備 取甘草藥材用70％乙醇提取濃縮后經大孔吸附樹脂精制，得到含甘草酸25％的提取物；取胡椒用95％乙醇提取后經萃取及重結晶精制后得到含胡椒堿80％的提取物。取甘草提取物80g胡椒堿提取物37.5g經混合后，加入微粉硅膠10g，羧甲基淀粉鈉10g，預膠化淀粉212.5g，混合均勻，制成1000粒膠囊。每粒含甘草酸20mg，含胡椒堿30mg的膠囊劑。
實施例4本發明藥物的制備 取甘草藥材用70％乙醇提取濃縮后經大孔吸附樹脂精制，得到含甘草酸25％的提取物；取胡椒用95％乙醇提取后經萃取及重結晶精制后得到含胡椒堿80％的提取物。取甘草提取物100g胡椒堿提取物37.5g經混合后，加入微粉硅膠10g，羧甲基淀粉鈉10g，預膠化淀粉192.5g，混合均勻，制成1000粒膠囊。每粒含甘草酸25mg，含胡椒堿30mg的膠囊劑。
實施例5本發明藥物的制備 取甘草藥材用70％乙醇提取濃縮后經大孔吸附樹脂精制，得到含甘草酸25％的提取物；取胡椒用95％乙醇提取后經萃取及重結晶精制后得到含胡椒堿80％的提取物。取甘草提取物140g胡椒堿提取物37.5g經混合后，加入微粉硅膠10g，羧甲基淀粉鈉10g，預膠化淀粉152.5g，混合均勻，制成1000粒膠囊。每粒含甘草酸35mg，含胡椒堿30mg的膠囊劑。
實施例6本發明藥物的制備 取甘草藥材用70％乙醇提取濃縮后經大孔吸附樹脂精制，得到含甘草酸25％的提取物；取胡椒用95％乙醇提取后經萃取及重結晶精制后得到含胡椒堿80％的提取物。取甘草提取物200g胡椒堿提取物37.5g經混合后，加入微粉硅膠10g，羧甲基淀粉鈉10g，預膠化淀粉92.5g，混合均勻，制成1000粒膠囊。每粒含甘草酸50mg，含胡椒堿30mg的膠囊劑。
實施例7本發明藥物的制備 取甘草藥材用70％乙醇提取濃縮后經大孔吸附樹脂精制，得到含甘草酸25％的提取物；取胡椒用95％乙醇提取后經萃取及重結晶精制后得到含胡椒堿80％的提取物。取甘草提取物360g胡椒堿提取物37.5g經混合后，加入微粉硅膠10g，羧甲基淀粉鈉10g，預膠化淀粉82.5g，混合均勻，制成1000粒膠囊。每粒含甘草酸90mg，含胡椒堿30mg的膠囊劑。
實施例8本發明藥物的制備 取芍藥和甘草藥材用70％乙醇提取濃縮后經大孔吸附樹脂精制，得到含芍藥苷25％、含甘草酸10％的提取物；取胡椒用95％乙醇提取后經萃取及重結晶精制得到含胡椒堿80％的提取物。取芍藥甘草混合提取物140g，胡椒堿提取物12.5g經混合后，加入微粉硅膠10g，羧甲基淀粉鈉10g，預膠化淀粉177.5g，混合均勻，制成1000粒膠囊。每粒含芍藥苷35mg、含甘草酸14mg，含胡椒堿10mg的膠囊劑。
實施例9本發明藥物的制備 取甘草藥材用70％乙醇提取濃縮后經大孔吸附樹脂精制，得到含甘草酸25％的提取物；取甘草提取物120mg，分別與小茴香提取物45mg，肉桂提取物36mg混合后，溶于3ml雙蒸水中制成混合物，加入淀粉，制顆粒、壓片，得片劑。
實施例10本發明藥物的制備 取甘草藥材用70％乙醇提取濃縮后經大孔吸附樹脂精制，得到含甘草酸25％的提取物；取甘草提取物120mg，分別與伊曲康唑40mg，克拉霉素100mg、維拉帕米50mg混合后，溶于3ml雙蒸水中制成混合物，制備得口服液。
為了更好地描述本發明公開的內容，以下舉出了一些實例來進一步說明。
試驗例1甘草酸+胡椒堿復方中藥對cyp450的影響的實驗 1.1試劑和儀器 胡椒堿標準品、甘草酸標準品購自江西本草天工科技有限責任公司；所用試劑均為分析純，試驗用水為雙蒸水。996PAD可見紫外檢測器為美國Waters公司產品；臺式高速冷凍離心機為德國Heraeus公司產品。Sprague-Dawley大鼠，雌雄各半，體重180-200g。
1.2方法 1.2.1給藥劑量與方法 72只大鼠，隨機分成9組，每組雌雄各4只。A組給予胡椒堿30mg/kg，ig；B組給予甘草酸180mg/kg，ig；C、D、E、F、G、H組分別給予胡椒堿30mg/kg+甘草酸10mg/kg、20mg/kg、25mg/kg、35mg/kg、50mg/kg、90mg/kg，ig；正常對照組給予等量生理鹽水。連續給藥7天后禁食24h，斷頸處死。
1.2.2肝微粒體的制備 處死后的大鼠盡量放血，迅速打開腹腔取出肝臟，用4℃預冷的生理鹽水反復沖洗，除凈血污，濾紙吸干；肝稱重后剪成細小的碎塊，加10ml勻漿液(含0.25M蔗糖、0.01M Tris-HCl、1mM EDTA，pH7.4)，在玻璃勻漿器中制成勻漿。勻漿液4℃、9000g離心15min，棄去沉淀，上清夜中緩慢加入50％聚乙二醇至終濃度為8.5％，以10000g離心20min，棄去上清夜，沉淀部分用150mmol/L KCl緩沖液(150mmol/LKCl-10mmol/L Tris-HCl 1mmol/L EDTA，pH7.4)漂洗，再加入聚乙二醇至終濃度為8.5％，重復離心后即得到微粒體組分，用10ml勻漿液懸浮沉淀-70℃冰箱保存。
1.2.3cyp450濃度測定 由于還原型的cyp450與CO結合后在450nm處有最高的吸收峰，根據這一原理應用比較光譜可測定cyp450濃度，并以此作為微粒體含量的指標。方法如下取微粒體懸液0.5ml，加入0.1M KH2PO4緩沖液(pH7.4含0.1mM EDTA)5.5ml，分裝入兩個3ml的比色杯中。在兩個比色杯中各加入約1mg的連二亞硫酸鈉，其中一個作為空白，另一個作為樣品通CO(濃H2SO4+HCOOH的氣體發生裝置)60sec，在分光光度計上400nm-500nm范圍進行掃描，以450nm和490nm的吸光差除以消光系數91CM-1mM-1算出P450濃度。
1.2.4統計方法 所有數據采用均數±標準差

的方式表示，P450濃度用(nmol/ml)表示。
1.3結果 實驗結果如表1所示。
表1不同組別大鼠肝微粒體中cyp450含量的測定 實際甘草酸含量對抗胡椒堿抑制肝cyp450的劑量關系如圖1. 結果表明，與正常對照組相比，A組肝cyp450含量明顯降低，B組肝cyp450含量無明顯變化，而C、D、E、F、G、H組其肝P450的含量隨甘草酸劑量的增加而增加，說明甘草酸與對抗細胞色素氧化酶P450抑制劑的作用呈量效關系。
1.4小結說明甘草酸具有對抗胡椒堿對大鼠肝P450抑制的作用。
試驗2甘草酸+胡椒堿復方中藥對cyp450的影響的實驗 2.1試劑和儀器 甘草提取物、芍藥提取物由成都藥友科技有限公司提供；苯巴比妥鈉，上海新亞藥業公司生產，批號9501121；胡椒堿購自上海試劑廠；所用試劑均為分析純，試驗用水為雙蒸水。996PAD可見紫外檢測器為美國Waters公司產品；臺式高速冷凍離心機為德國Heraeus公司產品。Sprague-Dawley大鼠，雌雄各半，體重180-200g。
2.2方法 2.2.1給藥劑量與方法 72只大鼠，隨機分成9組，每組雌雄各4只。A組給予胡椒堿30mg/kg，i.g.；B組給予甘草提取物120mg/kg，i.g.；C組給予苯巴比妥鈉50mg/kg，i.g.；D、E、F、G、H、I組分別給予實例1-6所述膠囊1粒溶于3ml雙蒸水中，ig；正常對照組給予等量生理鹽水。連續給藥7天后禁食24h，斷頸處死。
2.2.2肝微粒體的制備 處死后的大鼠盡量放血，迅速打開腹腔取出肝臟，用4℃預冷的生理鹽水反復沖洗，除凈血污，濾紙吸干；肝稱重后剪成細小的碎塊，加10ml勻漿液(含0.25M蔗糖、0.01M Tris-HCl、1mM EDTA，pH7.4)，在玻璃勻漿器中制成勻漿。勻漿液4℃、9000g離心15min，棄去沉淀，上清夜中緩慢加入50％聚乙二醇至終濃度為8.5％，以10000g離心20min，棄去上清夜，沉淀部分用150mmol/L KCl緩沖液(150mmol/LKCl-10mmol/L Tris-HCl 1mmol/L EDTA，pH7.4)漂洗，再加入聚乙二醇至終濃度為8.5％，重復離心后即得到微粒體組分，用10ml勻漿液懸浮沉淀-70℃冰箱保存。
2.2.3cyp450濃度測定 由于還原型的cyp450與CO結合后在450nm處有最高的吸收峰，根據這一原理應用比較光譜可測定cyp450濃度，并以此作為微粒體含量的指標。方法如下取微粒體懸液0.5ml，加入0.1M KH2PO4緩沖液(pH7.4含0.1mM EDTA)5.5ml，分裝入兩個3ml的比色杯中。在兩個比色杯中各加入約1mg的連二亞硫酸鈉，其中一個作為空白，另一個作為樣品通CO(濃H2SO4+HCOOH的氣體發生裝置)60sec，在分光光度計上400nm-500nm范圍進行掃描，以450nm和490nm的吸光差除以消光系數91CM-1mM-1算出P450濃度。
2.2.4統計方法 所有數據采用均數±標準差

的方式表示，P450濃度用(nmol/ml)表示。
2.3結果 實驗結果如表2所示。
表2不同組別大鼠肝微粒體中cyp450含量的測定 實際甘草酸含量對抗胡椒堿抑制肝cyp450的劑量關系如圖2. 結果表明，與正常對照組(4.971±1.631nmol/ml)相比，A組肝cyp450含量(2.734±1.013nmol/ml)明顯降低，B組肝cyp450含量(4.840±1.094nmol/ml)無明顯變化，C組肝cyp450含量(16.620±3.503nmol/ml)明顯升高，而D、E、F、G、H、I組其肝P450的含量隨甘草酸劑量的增加而增加。
2.4小結說明甘草酸具有對抗胡椒堿對大鼠肝P450抑制的作用。
試驗例3甘草酸消除溫里類中藥提取物對cyp450抑制作用的大鼠試驗 3.1試劑和儀器 苯巴比妥鈉，上海新亞藥業公司生產，批號9501121；甘草提取物、芍藥提取物、小茴香提取物、肉桂提取物由成都藥友科技有限公司提供；聚乙二醇6000購自上海試劑廠；所用試劑均為分析純，試驗用水為雙蒸水。996PAD可見紫外檢測器為美國Waters公司產品；臺式高速冷凍離心機為德國Heraeus公司產品。Sprague-Dawley大鼠，雌雄各半，體重180-200g。
3.2方法 3.2.1給藥劑量與方法 56只大鼠，隨機分成7組，每組雌雄各4只。A組給予甘草提取物120mg/kg，i.g.；B組給予小茴香提取物45mg/kg，i.g.；C組給予肉桂提取物36mg/kg，i.g.；D組給予甘草提取物120mg/kg+肉桂提取物36mg/kg，i.g.；E組給予甘草提取物120mg/kg+小茴香提取物45mg/kg，i.g.；F組給予苯巴比妥鈉50mg/kg，i.g.；正常對照組給予等量生理鹽水。連續給藥7天后禁食24h，斷頸處死。
3.2.2肝微粒體的制備 處死后的大鼠盡量放血，迅速打開腹腔取出肝臟，用4℃預冷的生理鹽水反復沖洗，除凈血污，濾紙吸干；肝稱重后剪成細小的碎塊，加10ml勻漿液(含0.25M蔗糖、0.01M Tris-HCl、1mM EDTA，pH7.4)，在玻璃勻漿器中制成勻漿。勻漿液4℃、9000g離心15min，棄去沉淀，上清夜中緩慢加入50％聚乙二醇至終濃度為8.5％，以10000g離心20min，棄去上清夜，沉淀部分用150mmol/L KCl緩沖液(150mmol/LKCl-10mmol/L Tris-HCl1mmol/L EDTA，pH7.4)漂洗，再加入聚乙二醇至終濃度為8.5％，重復離心后即得到微粒體組分，用10ml勻漿液懸浮沉淀-70℃冰箱保存。
3.2.3 cyp450濃度測定 由于還原型的cyp450與CO結合后在450nm處有最高的吸收峰，根據這一原理應用比較光譜可測定cyp450濃度，并以此作為微粒體含量的指標。方法如下取微粒體懸液0.5ml，加入0.1M KH2PO4緩沖液(pH7.4含0.1mM EDTA)5.5ml，分裝入兩個3ml的比色杯中。在兩個比色杯中各加入約1mg的連二亞硫酸鈉，其中一個作為空白，另一個作為樣品通CO(濃H2SO4+HCOOH的氣體發生裝置)60sec，在分光光度計上400nm-500nm范圍進行掃描，以450nm和490nm的吸光差除以消光系數91CM-1mM-1算出P450濃度。
3.2.4統計方法 所有數據采用均數±標準差

的方式表示，P450濃度用(nmol/m1)表示。
3.3結果 實驗結果如表3所示 結果表明，與正常對照組(4.971±1.631nmol/ml)相比，B、C組肝cyp450含量(3.235±0.723nmol/ml、3.114±0.574nmol/ml)明顯降低，A、D、E組肝cyp450含量(4.840±1.094nmol/ml、4.615±1.237nmol/ml、4.408±0.784nmol/ml)無明顯變化，F組肝cyp450含量(16.620±3.503nmol/ml)明顯升高。
3.4小結甘草酸可以對抗溫里類中藥小茴香、肉桂等引起的肝P450的抑制。
試驗例4甘草酸消除化合物對cyp450抑制作用的大鼠試驗 4.1試劑和儀器 甘草提取物、芍藥提取物由成都藥友科技有限公司提供；苯巴比妥鈉，上海新亞藥業公司生產，批號9501121；伊曲康唑口服液購自比利時楊森制藥公司；克拉霉素膠囊劑，125mg/粒，批號970710，由濟南軍區藥劑研究中心提供；鹽酸維拉帕米片，購自天津市中央藥業有限公司；聚乙二醇6000購自上海試劑廠；所用試劑均為分析純，試驗用水為雙蒸水。996PAD可見紫外檢測器為美國Waters公司產品；臺式高速冷凍離心機為德國Heraeus公司產品。Sprague-Dawley大鼠，雌雄各半，體重180-200g。
4.2方法 4.2.1給藥劑量與方法 56只大鼠，隨機分成7組，每組雌雄各4只。A組給予甘草提取物120mg/kg，ig；B組給予伊曲康唑40mg/kg，ig；C組給予克拉霉素100mg/kg，i.g.；D組給予維拉帕米50mg/kg，i.g.；E組給予甘草提取物120mg/kg+維拉帕米50mg/kg，i.g.；F組給予甘草提取物120mg/kg+伊曲康唑40mg/kg，i.g.；G組給予甘草提取物120mg/kg+克拉霉素100mg/kg，i.g.；H組給予苯巴比妥鈉50mg/kg，i.g.；正常對照組給予等量生理鹽水。連續給藥7天后禁食24h，斷頸處死。
4.2.2肝微粒體的制備 處死后的大鼠盡量放血，迅速打開腹腔取出肝臟，用4℃預冷的生理鹽水反復沖洗，除凈血污，濾紙吸干；肝稱重后剪成細小的碎塊，加10ml勻漿液(含0.25M蔗糖、0.01M Tris-HCl、1mM EDTA，pH7.4)，在玻璃勻漿器中制成勻漿。勻漿液4℃、9000g離心15min，棄去沉淀，上清夜中緩慢加入50％聚乙二醇至終濃度為8.5％，以10000g離心20min，棄去上清夜，沉淀部分用150mmol/L KCl緩沖液(150mmol/LKCl-10mmol/L Tris-HCl 1mmol/L EDTA，pH7.4)漂洗，再加入聚乙二醇至終濃度為8.5％，重復離心后即得到微粒體組分，用10ml勻漿液懸浮沉淀-70℃冰箱保存。
4.2.3 cyp450濃度測定 由于還原型的cyp450與CO結合后在450nm處有最高的吸收峰，根據這一原理應用比較光譜可測定cyp450濃度，并以此作為微粒體含量的指標。方法如下取微粒體懸液0.5ml，加入0.1M KH2PO4緩沖液(pH7.4含0.1mM EDTA)5.5ml，分裝入兩個3ml的比色杯中。在兩個比色杯中各加入約1mg的連二亞硫酸鈉，其中一個作為空白，另一個作為樣品通CO(濃H2SO4+HCOOH的氣體發生裝置)60sec，在分光光度計上400nm-500nm范圍進行掃描，以450nm和490nm的吸光差除以消光系數91CM-1mM-1算出P450濃度。
4.2.4統計方法 所有數據采用均數±標準差

的方式表示，P450濃度用(nmol/m1)表示。
4.3結果 實驗結果如表4所示 結果表明，與正常對照組(4.971±1.631nmol/ml)相比，B、C、D組肝cyp450含量(2.063±0.236、2.698±0.754、3.008±0.784nmol/ml)明顯降低，A、E、F、G組肝cyp450含量(4.840±1.094、5.145±0.237、4.875±0.324、5.003±0.507nmol/ml)無明顯變化，H組肝cyp450含量(16.620±3.503nmol/ml)明顯升高。
4.4小結說明甘草酸可以消除克拉霉素、維拉帕米、伊曲康唑等化合物對肝藥酶P450的抑制作用。
試驗例5聯合給予胡椒堿和甘草酸后對藥物代謝影響 5.1試劑和儀器 芍藥提取物；胡椒堿；甘草提取物。所用試劑均為分析純，試驗用水為雙蒸水。高效液相色譜儀2690，996PAD可見紫外檢測器，Millennium 32數據工作站為美國Waters公司產品；臺式高速冷凍離心機為德國Heraeus公司產品。Beagle犬8只，購自四川省醫學科學院醫學實驗動物中心，平均體重9.5kg(8.4～12.0kg)。
5.2方法 5.2.1給藥劑量與方法 Beagle犬于實驗前晚禁食過夜，隨機分為2組，每組4只。A組給予實例7中所述膠囊1粒；B組給予芍藥提取物500mg/kg。將藥物溶解于100ml雙蒸水中，使用橡皮管插管ig給藥。給藥后再給溫水50ml，觀察沒有藥物從口腔嘔出。
5.2.2血漿的制備 給藥后分別于0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0h自前肢靜脈采血1.5ml，血樣本收集于肝素抗凝試管中，于1500rpm離心15min，分離血漿，血漿樣品保存于-20℃待測。
5.2.3血漿中藥物濃度的測定 取血漿0.5ml，加入乙腈1ml，于渦旋振蕩器上混合放置20min，16000rpm離心25min，取上層澄清液體為樣品。使用HPLC檢測血漿樣品中藥物的含量，色譜柱為Phenomenex公司Luna C18柱(250mm×4.6mm)，流動相為甲醇-水(30∶70)，體積流量為1ml/min，檢測波長230nm，使用外標法峰面積定量。
5.2.4藥物動力學參數的計算 采用中國藥理學會制訂的實用藥物動力學計算程序3P87進行數據處理，采用統計矩計算AUC等參數，Cmax與Tmax根據實際血藥時間數據讀出，得到與藥物消除有關的t1/2α和t1/2β，采用t檢驗進行各組數據之間的統計學差異比較。
5.3結果 A組和B組的各個采樣時間點的血藥濃度見圖3，藥物動力學參數見表5。C組和D組藥動學參數見表6. 表5 Beagle犬單劑量灌胃A組和B組的藥物動力學參數
兩組比較經方差分析*P＜0.05；**P＞0.05 實驗結果顯示，各實驗組藥物與對照組相比，反映分布的t1/2α和反映消除的t1/2β無顯著性差異。
5.4小結說明甘草酸和胡椒堿聯合給予后對芍藥苷或其它藥物的藥物動力學不產生影響。
試驗例6聯合給予胡椒堿和甘草酸后對藥物代謝影響 6.1儀器和試劑 馬來酸多潘立酮片(商品名多美力通)，規格10mg/片，韓國韓美藥品株式會社生產，批號H10004，；格列吡嗪片，規格5mg/片，珠海聯邦制藥股份有限公司中由分公司生產，批號030901；利巴韋林片，規格100mg/片，江西南昌濟生制藥廠生產，批號030308，甘草提取物、胡椒提取物由成都藥友科技發展有限公司提供。高效液相色譜儀2690，996PAD可見紫外檢測器，Millennium32數據工作站為美國Waters公司產品；臺式高速冷凍離心機為德國Heraeus公司產品。
6.2方法 6.2.1給藥劑量和方法 健康男性志愿受試者60名，年齡(21±2.8)歲，體重(61±5.2)kg，身高(171±5.3)cm。試驗前，經體格檢查與血、尿常規，心、肝、腎功能檢查均正常。試驗前12h吃清淡晚餐后禁食，次日清晨8:00空腹分別給予口服格列吡嗪片10mg，200ml溫開水送服；甘草提取物+胡椒提取物+格列吡嗪片；口服利巴韋林片600mg，200ml溫開水送服；甘草提取物+胡椒提取物+利巴韋林片；口服多美力通10mg，200ml溫開水送服；甘草提取物+胡椒提取物+多美力通。
6.2.2血樣采集 于服藥前0和服藥后0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、4、6、8、10、12、24h取肘靜脈血4mL，置肝素抗凝管中，于常溫下靜置0.5～1h后，4000rpm離心6min，上層血漿置-20℃保存待測。
6.2.3血漿中藥物濃度的測定 取血漿0.5ml，加入乙腈1ml，于渦旋振蕩器上混合放置20min，16000rpm離心25min，取上層澄清液體為樣品。使用HPLC檢測血漿樣品中藥物的含量，色譜柱為Phenomenex公司Luna C18柱(250mm×4.6mm)，流動相為甲醇-水(30∶70)，體積流量為1ml/min，檢測波長230nm，使用外標法峰面積定量。
6.2.4藥物動力學參數的計算 采用中國藥理學會制訂的實用藥物動力學計算程序3P87進行數據處理，Cmax與Tmax根據實際血藥時間數據讀出，得到與藥物消除有關的t1/2ke采用t檢驗進行各組數據之間的統計學差異比較。
6.3結果 各組藥物消除的半衰期參數見表6。
表6各組的藥物動力學參數
兩組比較經方差分析*P＜0.05；**P＞0.05 實驗結果顯示，各實驗組藥物與對照組相比，反映消除的t1/2ke無統計學差異。
6.4小結說明甘草酸和胡椒堿聯合給予后對多種藥物的藥物動力學不產生影響。
上述試驗說明，甘草酸與細胞色素氧化酶P450抑制劑配伍使用，能對抗其它藥物對P450的抑制作用，且保持抑制劑本身的藥效穩定，該配伍使用為臨床提供了一種新的對抗cyp450抑制劑的藥物。
權利要求
1、一種對抗細胞色素氧化酶P450抑制劑的藥物組合物，其特征在于它是由含有有效量的甘草酸為活性成份，加上藥學上可接受的輔料或輔料性成分制備而成的制劑。
2、根據權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于所述的藥劑每制劑單位含有甘草酸60～540mg。
3、根據權利要求2所述的藥物組合物，其特征在于所述的藥劑每制劑單位含有甘草酸120～300mg。
4、根據權利要求3所述的藥物組合物，其特征在于所述的藥劑每制劑單位含有甘草酸150mg～210mg。
5、根據權利要求1-4任一項所述的藥物組合物，其特征在于它是含有甘草酸、細胞色素氧化酶P450抑制劑為活性成分，加上藥學上可接受的輔料或輔料性成分制備而成的制劑，甘草酸與細胞色素氧化酶P450抑制劑的重量配比為甘草酸20～90份、細胞色素氧化酶P450抑制劑30～200份。
6、根據權利要求5所述的藥物組合物，其特征在于所述的細胞色素氧化酶P450抑制劑是天然藥材提取物、化合物。
7、根據權利要求6所述的藥物組合物，其特征在于所述的天然藥材提取物是胡椒堿、肉桂提取物、吳茱萸提取物、小茴香提取物、花椒提取物。
8、根據權利要求6所述的藥物組合物，其特征在于所述的化合物是伊曲康唑、克拉霉素、紅霉素、乙胺碘呋酮、氯西嗪、酮康唑、美托洛爾、甲硝唑、米康唑、去甲替林、口服避孕藥、羥保泰松、奮乃靜、保泰松、伯氨喹、普萘羅爾、奎尼丁、丙戌酸鈉、磺吡酮、磺胺、硫利達嗪、甲氟芐啶或維拉帕米。
9、根據權利要求1-8任一項所述的藥物組合物，其特征在于所述的制劑是口服制劑。
10、權利要求1所述的藥物組合物在制備對抗細胞色素氧化酶P450抑制劑的藥物中的用途。
全文摘要
本發明提供了一種對抗細胞色素氧化酶P450抑制劑的藥物組合物，它是由含有有效量的甘草酸為活性成份，加上藥學上可接受的輔料或輔料性成分制備而成的制劑。本發明還提供了該藥物組合物的用途。本發明甘草酸作為對抗多種cyp450抑制劑的藥物，使cyp450波動減小，從而為藥物的聯合應用拓寬了道路，為臨床提供了一種新的用藥選擇。
文檔編號A61K9/16GK1935146SQ200510021729
公開日2007年3月28日 申請日期2005年9月23日 優先權日2005年9月23日
發明者唐小海, 宋鑫, 邱宇 申請人:成都市藥友科技發展有限公司