Tlr7激動劑與酪氨酸激酶抑制劑聯用在制備抗腫瘤藥物中的應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及抗腫瘤藥物技術領域，具體涉及TLR7激動劑與酪氨酸激酶抑制劑聯 用在腫瘤治療中的應用。
【背景技術】
[0002] 腫瘤治療不僅是世界性的難題，同時也是醫學界面臨的一項重大挑戰。臨床中應 用的腫瘤治療主要是去除腫瘤固體塊，通過外科手術、物理治療和化學治療。物理治療和化 學治療在殺傷大量癌細胞的同時，也使得機體的正常細胞大量被殺傷，且嚴重破壞免疫系 統，這讓患者抗癌能力大大降低，剩余的耐藥性癌細胞會變得更加瘋狂增殖，且有繼發性的 可能。同時放、化療不僅會給患者帶來巨大痛苦，還會引起一系列的毒副反應。這些傳統 的治療方法，在腫瘤治療歷史上具有重要的作用，但隨著科學飛速發展，其局限性也日漸凸 顯，對于新的腫瘤診療方法的探求迫在眉睫。
[0003] 最近，在對腫瘤發病機制的深入了解中促進了一種新的治療方案，如腫瘤免疫治 療聯合靶向藥物治療。腫瘤免疫治療分為三種類型：非特異性免疫療法、主動免疫療法及被 動免疫療法，機理都是一種通過增強和激發機體的免疫功能，來達到殺滅和控制腫瘤細胞 的免疫療法。但是，對于晚期實體腫瘤療效來說，單純的免疫療法的治療方式可行性存在異 議，因為其只能清除少量、離散的腫瘤細胞。而靶向藥物治療是通過與腫瘤發生、發展過程 中的特定分子靶點的作用來阻止腫瘤細胞的生長。但腫瘤容易出現耐藥變異，導致疾病逐 漸進展。免疫治療是刺激宿主的免疫反應，達到長期的腫瘤抑制，而靶向治療是抑制維持腫 瘤生長的至關重要的分子通路。因此，兩者聯合十分有可能有效的改善臨床結果。

【發明內容】

[0004] 本發明所要解決的技術問題是，為了克服現有技術中抗腫瘤藥物治療的不足，提 供TLR7激動劑與酪氨酸激酶抑制劑聯用在腫瘤治療中的應用。
[0005] 本發明所要解決的技術問題，通過以下技術方案予以實現：
[0006] 本發明提供一種TLR7激動劑與酪氨酸激酶抑制劑聯用在腫瘤治療中的應用，所 述的TLR7激動劑具有式（I)所述的結構；所述的酪氨酸激酶抑制劑為拉帕替尼，具有 (Π)所示的結構：：
[0007]
.'〇·
[0008] 本發明發明人通過反復摸索和大量實驗，令人驚奇地發現，將式（I)所示的TLR7 激動劑與拉帕替尼聯用，具有很好的協同抗腫瘤作用。
[0009] 所述的拉帕替尼（Lapatinib，LA)，中文名稱為二對甲苯磺酸，中文別名為 N-(3-氯-4-((3-氟苯基）甲氧基）苯基）-6-(5-(((2-(甲磺酰基）乙基）氨基）甲 基）-2_呋喃基）-4-喹唑啉胺二對甲苯磺酸鹽。所述的拉帕替尼的結構式如式（II)所示。
[0010] 本發明還提供一種TLR7激動劑與酪氨酸酶抑制劑聯用在治療腫瘤中的應用，所 述的酪氨酸酶抑制劑為拉帕替尼，所述的TLR7激動劑具有式（I)所示的結構。
[0011] 本發明還提供一種TLR7激動劑與酪氨酸激酶抑制劑聯用作為NF-κB信號通路激 活劑的應用，所述的酪氨酸激酶抑制劑為拉帕替尼，所述的TLR7激動劑具有式（I)所示 的結構。
[0012] 本發明還提供一種TLR7激動劑在制備抗腫瘤藥物中的應用，所述的TLR7激動劑 具有式（I)所示的結構。其作用機理為激活細胞內的受體TLR7,進而觸發下游的免疫反 應。
[0013] 本發明再提供一種抗腫瘤藥物組合物，所述的組合物含有TLR7激動劑和酪氨酸 激酶抑制劑，所述的酪氨酸激酶抑制劑為拉帕替尼，所述的TLR7激動劑具有式（I)所示 的結構。
[0014] 優選地，在所述的抗腫瘤藥物組合物中，TLR7激動劑與拉帕替尼的質量比為1~ 100:1 ~100〇
[0015] 進一步優選地，TLR7激動劑與拉帕替尼的質量比為1~50:1~50。
[0016] 更進一步優選地，，TLR7激動劑與拉帕替尼的質量比為1~25:1~25。
[0017] 最優選地，TLR7激動劑與拉帕替尼的質量比為1:10~25。
[0018] 優選地所述的抗腫瘤藥物組合物，還包含可接受的藥用載體，制成各種藥學上可 接受的制劑。
[0019] 優選地，所述的腫瘤為乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、肺癌、肝癌、黑素瘤、視網膜母細胞 瘤、食管癌、大腸癌、結腸癌、白血病、淋巴瘤、腦瘤、子宮頸癌、肉瘤、前列腺瘤、膀胱瘤、網狀 內皮組織瘤、Wilm氏瘤、星細胞瘤、成膠質細胞瘤、成神經細胞瘤、骨肉瘤、腎癌、或頭頸癌。
【附圖說明】
[0020] 圖1為TLR7激動劑（T7)與兩種TKI(拉帕替尼，LA、舒尼替尼，Suni)聯合治療小 鼠腫瘤的效果圖。（*表示Ρ〈〇· 05, **表示0· 05〈ρ〈0· 01)
[0021] 圖2為TLR7激動劑（Τ7)與兩種TKI(拉帕替尼，LA、舒尼替尼，Suni)聯合刺激小 鼠脾淋巴細胞誘導TLR7蛋白水平表達變化和NF-κB信號通路的胞漿中P65、IκΒα及胞 核中Ρ65蛋白水平表達變化圖。
【具體實施方式】
[0022] 以下結合具體實施例來進一步解釋本發明，但實施例對本發明不做任何形式的限 定。
[0023] 實施例1TLR7激動劑與酪氨酸激酶抑制劑聯合的抗腫瘤實驗
[0024] (1)實驗動物及其飼養
[0025] 雌性4周齡Balb/c近交系小鼠（體重16±20g)，購自廣東省實驗動物中心。實驗 過程中，小鼠飼養于深圳大學醫學部SPF級動物房。
[0026] (2)構建小鼠乳腺癌模型
[0027] 1)取對數期生長的4T1細胞，用0. 25%胰酶消化細胞，加入10%FBS的完全培養 基終止消化，然后用完全培養基制成細胞懸液，調整細胞濃度為2X106個/ml。
[0028] 2)取30只健康Babl/c純系小鼠，雌性，4周齡，體重（16±20g)，將2X105個 (0.lml) 4T1小鼠乳腺癌細胞皮下注射接種于每只小鼠大腿部位，3-5天全部小鼠可觸及皮 下結節，1周左右腫瘤長至時認200mm3為模型成功，開始抑瘤實驗。
[0029] (3)小鼠隨機分組，抑瘤實驗開始
[0030] 將30只小鼠隨機分組，每組5只。實驗動物組：1)T7聯合拉帕替尼組：T7, 5mg/kg/3天、拉帕替尼，40mg/kg/天；2)T7聯合舒尼替尼組：T7,5mg/kg/3天、舒尼替尼，10mg/ kg/2 天；3)陰性對照組：0·lml/PBS/ 天；4)T7 組：5mg/kg/3 天；5)拉帕替尼組：40mg/kg/ 天；6)舒尼替尼組：10mg/kg/2天。（上述T7是本發明式I所示TLR7激動劑的簡稱，下同）。
[0031] 抑瘤實驗開始時，所有動物給予自由飲食、飲水，每天觀察動物活動、毛發、其他一 般狀況及瘤大小。
[0032] 實驗結果：隨著抑瘤實驗的進行后，開始時小鼠活動狀態基本無明顯變化，腫瘤多 為圓形或橢圓形，大小均一，后期藥物干預后腫瘤開始逐漸不規則，且大小不一，其中對照 組腫瘤體積增長最為迅速，抑瘤結果如（圖1)所示，發現所有治療組中T7聯合拉帕替尼組 的腫瘤大小為最有療效組（差異有統計學意義，P〈〇. 05)，比其單藥組腫瘤小很多，呈現了 顯著的協同治療效果，而T7聯合舒尼替尼組的腫瘤比其單藥組腫瘤大，呈現拮抗的治療效 果。
[0033] 實施例2WeSternblot檢測TLR7激動劑與酪氨酸激酶抑制劑聯合刺激小鼠免疫 細胞后