環肽化合物gg6f及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬化學領域，涉及肽類化合物及其化學制備方法，具體涉及環六肽化合物 GG6F及其化學制備方法。
【背景技術】
[0002] 現有技術公開了環肽類成分在組成結構上與普通（直鏈）肽類具有結構的高度相 似性，但環肽類化合物因其主體結構中氨基酸殘基連接成環，與直鏈肽結構不同，以致藥物 性質不同：首先，環肽類化合物分子中的游離羧基和氨基等親水基團消失，使得其水溶性明 顯減小，在溶劑中的極性降低，化合物的脂溶性增強；第二，游離氨基和羧基的消失，使得所 述環肽化合物對體內氨肽酶和羧肽酶的敏感性明顯降低，在生物體內的穩定性增加；第三， 直鏈肽成環后，減少了肽鏈運動的自由度，因而環狀多肽在溶液中具有相對穩定和明確的 構象，與受體契合的可能性明顯提高。研究顯示，通常，環肽的代謝穩定性和生物利用度高 于直鏈，因此，環肽類化合物作為藥物，與直鏈肽和其他有機小分子藥物相比具有其結構和 性質的獨特性。
[0003] 現有技術中，環肽合成的第一步是合成直鏈肽前體。目前鏈狀肽的合成方法主要 有固相和液相兩種肽合成方法，由于固相肽合成技術獨特的優勢，已有若干具有重要生物 活性的多肽、激素及蛋白質被陸續合成，促進了生命科學研究的深入發展。
[0004] 目前，固相法已成為實驗室多肽合成的首選方法。固相合成中，將帶有保護基的氨 基酸連接到固態樹脂上，脫去保護基，再將下一個保護氨基酸與第一個氨基酸殘基的游離 氨基形成肽鍵，最后脫去保護而再連接下一個氨基酸，如此循環使肽鏈不斷延長直到完成， 再用切割試劑將肽鏈從樹脂上分離下來。固相合成免除了傳統液相直鏈合成中的重結晶、 蒸餾、萃取、柱層析或者薄層層析等繁重復雜的純化方法；同時，固相載體對分子的固定作 用和對反應底物一端功能基的保護避免了反應底物分子之間的成鍵，并可確保含多功能基 的分子只發生單一功能基反應。
[0005] 目前，直鏈肽的合成已趨自動化和商業化，但環狀肽的合成還存在著一定的難度， 其關鍵問題在于直鏈肽的合環的步驟。通常環狀肽的合環方式分為首尾相連、側鏈之間相 連、側鏈與端基相連，二硫橋鍵相連或其他方式相連；其中，肽鏈首尾相連成環的合成難度 更大，因為環肽的前體直鏈肽的肽鍵具有很強的P鍵特征，分子更傾向于形成反式構象，呈 舒展狀態，造成首尾成環的羧基和氨基在空間上距離較遠，不利于發生分子內的肽鍵縮合， 更有利于分子間的縮合反應，因此，環肽合成中產率低成為制約因素；另一方面，由于每一 個肽鏈的氨基酸殘基不同，或順序不同，使得每一個環肽合環條件都具有其特殊性，因此， 對于有活性的環肽化合物，尚不能用商業化或自動化方法方便地獲得，且首尾相連的環狀 肽的合成尚存在有一定的挑戰性。
[0006] 現有技術的合成首尾相連的環肽的經典方法是在稀溶液（KT3-KT4M)中，用活潑 酯法或疊氮法將帶有保護基的的線性前體肽選擇性地活化并合環；使用DCC、DMP等通用 有機縮合劑，產率通常為10-30%，且反應時間通常為數天。
[0007] 近年氮雜苯駢唑類包括HATU、TBTU和HBTU等化合物新型有機縮合劑的使用，為肽 合成方法的研究提供了很大的幫助；但迄今為止，尚未見有關環六肽化合物GG6F尤其是其 化學制備方法的報道。

【發明內容】

[0008] 本發明的目的是提供環六肽化合物GG6F及其化學制備方法。
[0009] 本發明所述的制備目標產物環六肽化合物GG6F為環狀肽，由六個a -L-氨基酸首 尾順次連接而成，肽鏈順序為：環-(Gly-Leu1-Val-LeU 2-LeU3-Phe);其中，所述氨基酸為甘 氨酸（Gly)、亮氨酸（Leu)、繳氨酸（Val)、苯丙氨酸（Phe);其結構分子式為C 34H54N6O6,分子 量為642,其結構如式（I)所示，
[0010]
【主權項】
1. 式⑴結構的環六肽化合物GG6F，其分子式為C34H54N6O 6，分子量為642，
2. 按權利要求1所述的化合物GG6F，其特征在于，所述化合物的六個a-L-氨基酸首 尾順次連接，肽鏈順序為：環-(Gly-Leu-Val-Leu-Leu-Phe)。
3. 按權利要求2所述的化合物GG6F，其特征在于，所述化合物的a-L-氨基酸組成為： 甘氨酸（Gly)、亮氨酸（Leu)、纈氨酸（Val)、苯丙氨酸（Phe)。
4. 制備權利要求1的化合物GG6F的化學方法，其特征在于，其包括固相合成直鏈肽、液 相合環、萃取和柱色譜分離四部分，步驟為：由Wang樹脂以Fomc保護的氨基酸為原料固相 化學合成方法制備直鏈肽，由直鏈肽首尾相連合環，制成單環肽化合物；其中，所述直鏈肽 的合環，在HOAt/HATU和NMM (氮甲基嗎琳）存在下于溶液中完成。
5. 按權利要求4的方法，其特征在于，所述方法中，以Wang樹脂在HOAt/HATU和NMM條 件下固相合成直鏈肽，在溶液中形成頭尾相連的環狀肽。
6. 按權利要求4的方法，其特征在于，所述的合成原料氨基酸為Fomc保護氨基酸。
7. 按權利要求4的方法，其特征在于，其中采用接Wang樹脂的Gly為合成直鏈肽的起 始氨基酸。
8. 權利要求1所述的化合物GG6F在制備藥物合成的先導化合物中的用途。
【專利摘要】本發明屬于藥學領域，涉及式(I)結構的環六肽化合物GG6F及其化學制備方法。所述環六肽化合物GG6F由六個α-L-氨基酸首尾順次連接而成，表示為cyclo-(Gly-Leu-Val-Leu-Leu-Phe)。本發明中，以Wang樹脂為固相載體，HATU/HOAt為縮合劑，N,N-二甲基甲酰胺為溶劑，固相合成直鏈肽前體；液相合環化學制備環肽；所述GG6F由反應產物通過柱色譜純化，其結構通過核磁共振波譜和質譜進行確證。本發明的制備方法步驟簡單、產率高，適用于藥物活性環六肽的制備。
【IPC分類】C07K1-02, C07K1-16, C07K1-04, C07K7-64, C07K1-06
【公開號】CN104861045
【申請號】CN201410057197
【發明人】陳杰桃, 丁慧文, 穆青, 楊萍
【申請人】復旦大學
【公開日】2015年8月26日
【申請日】2014年2月20日