專利名稱：冰片脂肪酸酯衍生物及含有該衍生物的制劑的制作方法
技術領域：
本發明涉及醫藥技術領域，確切地說是公開一類含冰片和脂肪酸的衍生物(冰片脂肪酸酯衍生物)及含有該衍生物的制劑。
背景技術：
冰片可分天然冰片和合成冰片兩大類。天然冰片為腦香科植物龍腦香樹脂的加工品，因資源緊缺，現多使用以樟腦、松節油等為原料的人工合成品(江蘇新醫學院編.《中藥大辭典》上海人民出版社，1977年951.)冰片的結構如下 冰片性辛、苦，微寒。歸心、脾、肺經。具有開竅醒神，清熱止痛。用于熱病神昏、痙厥，中風痰厥，氣郁暴厥，中惡昏迷，目赤，口瘡，咽喉腫痛，耳道流膿。冰片有多種藥理作用1、對中樞神經系統的作用龍腦或其異構體(異龍腦)、合成冰片250mg/kg腹腔注射，小鼠熱板法，能顯著延長舔足時間；200mg/kg腹腔注射顯著延長戊巴比妥鈉所致小鼠睡眠時間。2、抗炎作用5％龍腦或異龍腦乳劑涂耳對2％巴豆涂耳合劑所致小鼠炎癥反應有抑制作用，其中異龍腦作用顯著。3、抗菌作用龍腦、異龍腦和人工合成冰片對金黃色葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌，草綠色鏈球菌、肺炎鏈球菌和大腸桿菌等，在試管內均有明顯抗菌作用，三者的抗菌作用相似，低濃度抑菌，高濃度滅菌。4、抗生育作用5、與其他藥物的相互作用.最近，將冰片用于腦靶向、吸收促進劑(陳艷明，王寧生 冰片對P-糖蛋白的影響《中藥新藥與臨床藥理》2003，14(2).-96-99；趙保勝 劉啟德 冰片促血腦屏障開放與病理性開放的比較《中藥新藥與臨床藥理》2002，13(5).-287-288；王寧生，謝獨，梁美容，等.CT動態掃描觀察冰片對兔血腦屏障作用的影響《中藥新藥與臨床藥理》，1992，3(4)28；陳鐵峰，林曙光，陳露西，等.冰片促進四甲基吡嗪的吸收《中國藥理學報》，1993，4(4)42.)。
由于冰片具有較強的揮發性，給制劑工藝帶來困難，同時也會在長期貯存后，藥物損失嚴重，造成藥效不能保證，可以考慮在冰片分子上連上一脂質基團，制備冰片衍生物。已見報道的冰片衍生物有冰片葡(萄)糖苷酸(HUEBNER CF，LINK KP.Note on the bornyl ester of bornyl d-glucuronide.J Biol Chem.1950Sep；186(1)393-4.)等，但未見本發明中所指出的衍生物。

發明內容
本發明的目的是提供一種冰片脂肪酸酯衍生物，它可以降低冰片的揮發性，并將其用于制劑中，實現提高藥物的透皮吸收和提高藥物穿透血腦屏障、黏膜的目的。
一種含冰片與脂肪酸的衍生物---冰片脂肪酸酯衍生物，其結構通式如下 在此所示的冰片包括異冰片，有天然的與合成的兩大類。所說的脂肪酸為C5～C30的直鏈或支鏈脂肪酸(或R＝C4～C29)，包括飽和或不飽和脂肪酸，如己酸、辛酸、葵酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸、特戊酸、(亞)油酸、亞麻油酸、二十二碳六烯酸(DHA)等。為了制備冰片脂肪酸酯衍生物，可以通過制備脂肪酰氯后與冰片進行反應。為了提高反應速度和程度，可以在反應液中加入常規的催化劑，如吡啶、DMAP、三乙胺、碳酸鉀。所用的溶劑為除去水的有機溶劑，如氯仿、二氯甲烷、苯、甲苯、二甲苯、醚類、酯類、丙酮、烷烴類、環己烷、二氧六環。另外，冰片脂肪酸酯衍生物還可以通過將脂肪酸與冰片混合溶解于有機溶劑后，加入脫水劑和常規的催化劑，如EDCI、DCC、NHS，還可加入吡啶、DMAP、三乙胺、碳酸鉀。也可以通過制備酸酐，如戊酸酐，在固體酸催化劑、固體超強酸催化劑S2O82-/ZRO2作用下來與冰片進行酯化反應，制備冰片脂肪酸衍生物。所制備的冰片脂肪酸衍生物，可被用于注射劑、口服劑和外用劑中，如脂質體、乳劑、納米粒、乳膏、滴眼劑等，以提高藥物的腦靶向、透皮吸收或黏膜吸收，提高藥物的生物利用度。也可利用衍生物的低揮發性作為冰片替代品而用于含有冰片的制劑中，如速效救心丸、醒腦靜注射液。


圖1為不同衍生物在50℃條件下樣品的殘留率表。
圖2為阿霉素在腦組織中的濃度(ug/g)表。
圖3為腦組織伊文氏藍濃度(ug/g)表。
具體實施例方式下面結合實例對本發明做進一步詳細的描述實施例1冰片月桂酸酯(BL)取冰片5g加入50mL二氯甲烷溶解，按等摩爾量加入月桂酰氯，混均后，加入0.5ml吡啶，于30℃條件下反應5小時，蒸除二氯甲烷，所得物中加入水10ml，30℃反應0.5小時，消除未反應的月桂酰氯，補加水100ml，混均后，用二氯甲烷萃取，共三次，每次30ml，合并二氯甲烷，用無水硫酸鈉出去殘余的水分，減壓蒸除二氯甲烷，得產物。
IR(KBr壓片)ν/cm-1特征峰1735.4(酯，C＝O)，1160.3(C-O)，1112.8(C-O)。13C NMR(DMSO-d6)，δ172(酯，C＝O)。ESI-MS m/z337.6[M]+。元素分析(％)實測值C 62.17，N 8.82，H 3.22；計算值C 62.19，N 8.81，H 3.22。證明為目標化合物。
實施例2冰片肉豆蔻酸酯(BM)
取冰片5g加入50mL甲苯溶解，按等摩爾量加入肉豆蔻酰氯，混均后，加入0.3克二甲基吡啶(DMAP)，于60℃條件下回流反應3小時，蒸除甲苯，所得物中加入水5ml，60℃反應0.5小時，消除未反應的肉豆蔻酰氯，補加水100ml，混均后，用乙酸乙酯萃取，共三次，每次30ml，合并乙酸乙酯萃取液，用無水硫酸鈉出去殘余的水分，減壓蒸除乙酸乙酯，得產物。
IR(KBr壓片)ν/cm-1特征峰1 735.8(酯，C＝O)，1161.1(C-O)，1113.1(C-O)。13C NMR(DMSO-d6)，δ172(酯，C＝O)。ESI-MS m/z365.6[M]+。元素分析(％)實測值C 62.17，N 8.82，H 3.22；計算值C 62.19，N 8.81，H 3.22。證明為目標化合物。
實施例3冰片油酸酯(BO)取冰片5g加入50mL異丙醚溶解，按1∶1.1摩爾量加入油酸酰氯，混均后，加入1ml三乙胺，于40℃條件下回流反應7小時，蒸除異丙醚，所得物中加入水5ml，60℃反應0.5小時，消除未反應的油酸酰氯，補加水100ml，混均后，用二氯甲烷萃取，共三次，每次30ml，合并二氯甲烷萃取液，用無水硫酸鈉出去殘余的水分，減壓蒸除二氯甲烷，得產物。
IR(KBr壓片)ν/cm-1特征峰1735.6(酯，C＝O)，1160.6(C-O)，1113.4(C-O)。13C NMR(DMSO-d6)，δ172(酯，C＝O)。ESI-MS m/z419.7[M]+。證明為目標化合物。
實施例4冰片棕櫚酸酯(BP)取冰片5g加入50mL二氧六環溶解，按1∶1.5摩爾量加入棕櫚酸，混均后，加入1克碳酸鉀和0.3克DCC，于40℃條件下回流反應10小時，蒸除二氧六環，所得物中加入水5ml，60℃反應0.5小時，消除未反應的油酸酰氯，補加水100ml，混均后，用氯仿萃取，共三次，每次30ml，合并氯仿萃取液，用無水硫酸鈉出去殘余的水分，減壓蒸除氯仿，得產物。
IR(KBr壓片)ν/cm-1特征峰1735.5(酯，C＝O)，1160.1(C-O)，1113.2(C-O)。13C NMR(DMSO-d6)，δ172(酯，C＝O)。ESI-MS m/z393.7[M]+。元素分析(％)實測值C 62.17，N 8.82，H 3.22；計算值C 62.19，N 8.81，H 3.22。，證明為目標化合物。
實施例5冰片二十二碳六烯酸酯(BDHA)取冰片5g，NHS，DCC加入四氫呋喃50mL溶解，按1∶1.5摩爾量加入二十二碳六烯酸，通氮氣，混均后，室溫下攪拌反應8h。取出反應混合物，過濾除去沉淀，濾液減壓除去溶劑，所得物中加入水25ml，混均振搖，用乙酸乙酯萃取，共三次，每次30ml，合并乙酸乙酯萃取液，用無水硫酸鈉出去殘余的水分，減壓蒸除乙酸乙酯，得產物。
IR(KBr壓片)ν/cm-1特征峰1735.0(酯，C＝O)，1160.6(C-O)，1112.5(C-O)。13C NMR(DMSO-d6)，δ172(酯，C＝O)。ESI-MS m/z465.7[M]+。證明為目標化合物。
實施例6不同衍生物的揮發性將0.5克樣品置于50℃恒溫箱中，60分鐘后取出樣品，稱重，計算殘留率，結果見附圖1。
注冰片己酸衍生物(BC)、冰片月桂酸衍生物(BL)、冰片肉豆蔻酸(BM)、冰片油酸(BO)、冰片二十二碳六烯酸(BDHA)由此可知，對冰片進行結構修飾后，其揮發性大大下降，脂肪酸的碳數大于10時，藥物的揮發性可忽略不計。
實施例7阿霉素腦靶向脂質體的制備及腦靶向效果脂質體的制備處方組成氫化大豆卵磷脂(HSPC)0.5g，膽固醇(CH)0.1g，靶向輔料--冰片月桂酸酯(BL)0.02g，檸檬酸緩沖液(pH4.0)，阿霉素10mg，共成10mL。
將處方量的HSPC、CH、BL加入配置容器中，60℃條件下用適量乙醇溶解，并揮盡乙醇成膜，同溫度下加入檸檬酸緩沖液水化，制備空白脂質體。空白脂質體經超聲儀處理，通過0.22μm微孔濾膜整粒。整粒后的脂質體采用pH梯度，60℃孵化20min，制備阿霉素脂質體。其平均粒度為186nm粒度。
體內分布取昆明種小鼠，體重18～22g，分3組阿霉素水溶液、普通脂質體組、靶向脂質體組，按10mg/kg的劑量尾靜脈給藥，于不同時間點斷頭處死動物，放盡血液后，取出腦組織，用生理鹽水沖洗干凈，濾紙吸干，稱重。經組織勻漿，沉淀蛋白后，采用熒光分光光度法測定阿霉素的濃度。結果見附圖2。表明靶向脂質體組阿霉素在腦中的濃度顯著提高。采用其它試驗也可得到相同的結果。
實施例8腦靶向乳劑的制備及其對伊文氏藍腦中分布的影響乳劑的制備處方組成冰片肉豆蔻酸酯(BM)0.5g、注射用大豆油0.5g、大豆卵磷脂(SPC)1.0g、甘油2.2g，共成100ml。
制備工藝1、在配制設備中，將處方量的冰片肉豆蔻酸酯(BM)溶解于0.5g注射用大豆油中混合均勻；2、將處方量的SPC及甘油(無水)與適量的注射用水混合均勻；3、將2)在攪拌的條件下加入1)中，在40℃時攪拌后得初乳，過G3漏斗抽濾，所得液體經微射流儀處理，過0.22um微孔濾膜除菌，腦靶向注射用乳劑。平均粒度212nm。
腦組織中伊文氏藍的測定小鼠經尾靜脈注入腦靶向乳劑后2小時，按2ml/kg注射2％伊文氏藍，分別于15、30、60分鐘處死動物，取出腦組織，經組織勻漿，沉淀蛋白后，采用分光光度法測定伊文氏藍的濃度。結果見附圖3。表明腦靶向乳劑能增加伊文氏藍腦中的濃度。
實施例9促進雙氯芬酸鈉的透皮吸收皮膚的制備取體重180～220g的大鼠飼養1天，處死，剪去大鼠背部或腹部毛，取下脫毛處皮膚，將之沖洗干凈后，剝離皮膚下脂肪組織組織，選完整皮膚用生理鹽水洗干凈，4℃冰箱短期保存，備用。
方法取備用皮膚，用棉花吸干表面水分，在整個大鼠皮膚表面涂上冰片油酸酯(BO)，隨后將鼠皮固定在擴散池和接受池之間，角質層朝向給藥室，取雙氯芬酸鈉溶液(1％)5ml置于給藥室中，接受池中充滿30％的乙醇，于32℃水浴中進行透皮吸收試驗。計算透皮速率，結果表明BO能極大提高雙氯芬酸鈉的透皮吸收量，其透皮速率由未用BO對照組(1％AZONE)的93.2μg/cm2·h提高到183.1μg/cm2·h。
實施例10 將速效救心丸中含有的冰片用冰片脂肪酸酯衍生物代替，上述藥物具有同樣的效果。
實施例11 將醒腦靜注射液中含有的冰片用冰片脂肪酸酯衍生物代替，醒腦靜注射液具有同樣的效果。可見冰片脂肪酸酯衍生物可替代冰片用于含有冰片的制劑中。
權利要求
1.冰片脂肪酸酯衍生物，其結構通式如下
2.根據權利要求1所述的冰片脂肪酸酯衍生物，其特征在于所述冰片包括異冰片，有天然的與合成的兩大類。
3.根據權利要求1所述的冰片脂肪酸酯衍生物，其特征在于所述的脂肪酸為C5～C30的直鏈或支鏈脂肪酸或R＝C4～C29。
4.根據權利要求1所述的冰片脂肪酸酯衍生物，其特征在于所述的脂肪酸包括飽和或不飽和脂肪酸，己酸、辛酸、葵酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸、特戊酸、(亞)油酸、亞麻油酸、二十二碳六烯酸(DHA)等。
5.一種如權利要求1所述的冰片脂肪酸酯衍生物的制備方法，其特征在于可以通過制備脂肪酰氯后與冰片進行反應制得，為了提高反應速度和程度，可以在反應液中加入常規的催化劑，所用的溶劑為除去水的有機溶劑。
6.根據權利要求5所述的冰片脂肪酸酯衍生物的制備方法，其特征在于所述的常規催化劑包括吡啶、DMAP、三乙胺、碳酸鉀。
7.根據權利要求5所述的冰片脂肪酸酯衍生物的制備方法，其特征在于所述的除去水的有機溶劑為氯仿、二氯甲烷、苯、甲苯、二甲苯、醚類、酯類、丙酮、烷烴類、環己烷、二氧六環。
8.一種如權利要求1所述的冰片脂肪酸酯衍生物的制備方法，其特征在于可通過將脂肪酸與冰片混合溶解于有機溶劑后，加入脫水劑和常規的催化劑制得，脫水劑和常規的催化劑為EDCI、DCC、NHS，還可加入吡啶、DMAP、三乙胺、碳酸鉀；也可以通過制備酸酐，用戊酸酐來與冰片進行酯化反應，制備冰片脂肪酸衍生物，此時可以用固體酸催化劑、固體超強酸S2O82-/ZrO2作催化劑。
9.根據權利要求1所述的冰片脂肪酸酯衍生物，其特征在于該衍生物可用于脂質體、乳劑、納米粒、乳膏、外用口服注射，提高藥物的腦靶向、透皮吸收促進劑，提高藥物的生物利用度，特別是提高藥物的透皮吸收和提高藥物穿透血腦屏障、黏膜。
10.根據權利要求1所述的冰片脂肪酸酯衍生物，其特征在于該衍生物可作為冰片替代品而用于含有冰片的制劑中。
全文摘要
本發明公開了一種含冰片和脂肪酸的衍生物及其含有該衍生物的制劑，該類衍生物是由冰片與脂肪酸經酯化反應而得到的。其結構通式如圖所示。所述冰片包括異冰片，有天然的與合成的兩大類，所述的脂肪酸為C
文檔編號A61P29/00GK1651395SQ20041008768
公開日2005年8月10日 申請日期2004年11月29日 優先權日2004年11月29日
發明者鄧意輝, 吳紅兵, 王紹寧 申請人:沈陽藥科大學