專利名稱：稠合雙環含氮雜環的制作方法
對相關申請的交叉引用本申請要求于2002年11月22日提出的美國臨時申請序列號No.60/428,600的利益，其內容通過參考結合于此。
關于在聯邦政府資助的研究和開發下完成的發明的權利聲明不適用對光盤提交的“序列表”，表格，或計算機程序列表附錄的參考不適用發明背景甘油三酯代表儲存在真核生物中的能量的主要形式。甘油三酯代謝的紊亂或不平衡涉及肥胖癥、胰島素抗性綜合癥和II型糖尿病、非酒精性脂肪肝病和冠心病的發病機理和增加的風險(參見，Lewis，等，EndocrineReviews(2002)23201和Malloy和Kane，Adv Intern Med(2001)47111)。另外，血甘油三酯過多經常是癌癥治療的不利后果(參見，Bast，等CancerMedicine，5thEd.，(2000)B.C.Decker，Hamilton，Ontario，CA)。
合成甘油三酯的關鍵酶是乙酰CoA二酰甘油酰基轉移酶，或DGAT。DGAT是在哺乳動物組織中廣泛表達的微粒體酶，在內質網處催化1，2-二酰甘油和脂酰CoA連接形成甘油三酯(綜述于Chen和Farese，TrendsCardiovasc Med(2000)10188和Farese，等，Curr Opin Lipidol(2000)11229)。最初認為DGAT在甘油三酯合成的兩個主要途徑(磷酸甘油和單酰甘油)中，唯一地控制將二酰甘油酰化為甘油三酯的最終步驟的催化。由于甘油三酯被認為是生存所必需的，認為它們的合成通過單一機制發生，通過抑制DGAT的活性抑制甘油三酯合成還未大量探索。
現在已經克隆和表征了編碼小鼠DGAT1的基因和相關人同系物ARGP1和ARGP2(Cases，等，Proc Natl Acad Sci(1998)9513018；Oelkers，等，J Biol Chem(1998)27326765)。小鼠DGAT1的基因已經被用于產生DGAT敲除(knock-out)小鼠以更好地闡明DGAT基因的功能。出乎意料地，不能夠表達功能性DGAT酶的小鼠(Dgat-/-小鼠)可存活并且還能合成甘油三酯，顯示多種催化機制對甘油三酯合成起作用(Smith，等，NatureGenetics(2000)2587)。還鑒定了催化甘油三酯合成的其它酶，例如DGAT2和二酰甘油轉酰酶(Buhman，J.Biol Chem，supra和Cases，等，J Biol Chem(2001)27638870)。
顯著地，Dgat-/-小鼠抵抗糖尿病誘導的肥胖癥且保持瘦。即使當喂養高脂肪食物(21％脂肪)，Dgat-/-小鼠保持與喂養常規食物(4％脂肪)的小鼠相當的重量且具有更低的全身甘油三酯水平。在Dgat-/-小鼠中的肥胖癥抗性不是由于降低的熱量攝入，而是增加的能量消耗和降低的對胰島素和來普汀的抗性的結果(Smith，等，Nature Genetics，supra；Chen和Farese，Trends Cardiovasc Med，supra；和Chen，et al，J Clin Invest(2002)1091049)。另外，Dgat-/-小鼠具有降低的甘油三酯吸收率(Buhman，等，JBiol Chem(2002)27725474)。除了改善的甘油三酯代謝以外，Dgat-/-小鼠還具有改善的葡萄糖代謝，與野生型小鼠相比，在葡萄糖負荷后具有更低的葡萄糖和胰島素水平(Chen和Farese，Trends Cardiovasc Med，supra)。
多種酶有助于催化由二酰甘油合成甘油三酯的發現是有意義的，因為它提供了在個體中調節該生化反應中的一種催化機制以獲得治療結果而使不利的副作用最小的可能。例如，通過特異性地抑制DGAT1的人同系物的活性抑制二酰甘油轉化為甘油三酯的化合物，可用于降低甘油三酯的身體濃度和吸收以治療性地抵抗致病作用，所述的致病作用是由在肥胖癥、胰島素抗性綜合征和明顯的II型糖尿病、充血性心力衰竭和動脈粥樣硬化中的以及作為癌癥治療的后果的甘油三酯的異常代謝導致的。
由于全世界社會中日益增加的肥胖癥，II型糖尿病，心臟病和癌癥的流行，迫切需要開發新療法來有效治療和預防這些疾病。因此，有興趣開發可以有效地和特異性地調節二酰甘油向甘油三酯酶促轉化的單個催化機制的化合物。特別有希望的是特異性抑制DGAT1及其其它哺乳動物同系物的催化活性的化合物。
發明概述本發明提供稠合雙環含氮雜環化合物，其用于治療或預防動物(特別是人)中與DGAT有關的病癥和紊亂。
通常，本發明的化合物由通式(I)或其藥用鹽、前藥或立體異構體表示 其中字母X表示C(R1)或N；字母Y表示C(R1)，C(R2)(R2)，N或N(R2)；字母Z表示O或S。符號L1表示鍵，(C1-C4)亞烷基，(C2-C4)亞鏈烯基，O或N(Ra)C(O)；W1表示取代或未取代的成員，該成員選自環(C3-C8)烷基，雜環(C3-C8)烷基，芳基和雜芳基。下標m為0或1，表示另外部分L2-W2的存在(m為1)或不存在(m為0)。對于其中m為1的那些實施方案，符號L2表示鍵，O，(C1-C4)亞烷基，(C2-C4)亞鏈烯基，(C1-C4)雜亞烷基和N(Ra)C(O)；符號W2表示取代或未取代的成員，該成員選自環(C3-C8)烷基，雜環(C3-C8)烷基，芳基和雜芳基。
剩余的取代基，R1至R7和Ra和Rb具有下列含義每個R1獨立地選自H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，氟代(C1-C8)烷基，芳基，芳基(C1-C4)烷基，C(O)Ra，CO2Ra和C(O)NRaRb；每個R2獨立地選自H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，氟代(C1-C8)烷基，C(O)Ra，CO2Ra，C(O)NRaRb，芳基和芳基(C1-C4)烷基；R3和R4獨立地選自H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，C(O)Ra，CO2Ra，C(O)NRaRb和(C1-C4)亞烷基-ORa；R5和R6獨立地選自H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，C(O)Ra和CO2Ra；R7選自H，(C1-C8)烷基，鹵代(C1-C4)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，C(O)Ra，ORa和NRaRb；每個Ra和Rb獨立地選自H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，氟代(C1-C8)烷基，芳基和芳基(C1-C4)烷基。
虛線表示任選的鍵。在其它任選實施方案中，R3和R4可以結合形成3-，4-，5-或6-元螺環；R2，R3或R4可以與W1結合形成5-，6-或7-元稠環，該稠環含有0-3個選自N，O和S的雜原子；R5和R6可以與它們每個連接的氮原子結合形成5-，6-或7-元環；當X是C(R1)時，R5或R6可以與R1結合形成5-，6-或7-元稠環，該稠環含有連接R5或R6的氮原子；當X是C(R1)時，R7可以與R1結合形成5-，6-或7-元稠環；當作為Y的一部分提供時，R2或R1可以與R5結合形成5-或6-元環，該環具有連接R5的氮，任選地攜帶有氧代部分；且當m為1和L2是鍵時，W2上的取代基可以與W1上的取代基結合形成與W1和螺稠合或與W2稠合的5-，6-或7-元環，其中所述環是飽和的或不飽和的并且含有0，1或2個選自N，O和S的雜原子作為環成員。
在上面的通式I的化合物中，該化合物不同于 其中R8是H，NO2，Cl，甲氧基，甲基和苯基。
除非另外指出，上面的通式中提供的化合物意指包括其所有的藥用鹽，前藥或立體異構體。
本發明還提供包含本發明的化合物和藥用載體或賦形劑的藥物組合物。
本發明還提供治療或預防病癥或紊亂的方法，所述病癥或紊亂選自肥胖癥，糖尿病，神經性厭食癥，貪食癥，惡病質，X綜合征，代謝綜合征，胰島素抗性，高血糖，高尿酸血癥，高胰島素血癥，血膽固醇過多，血脂過多，血脂異常，混合性血脂異常，血甘油三酯過多，非酒精性脂肪肝病，動脈粥樣硬化，動脈硬化，急性心力衰竭，充血性心力衰竭，冠狀動脈病，心肌病，心肌梗死，心絞痛，高血壓，低血壓，中風，局部缺血，缺血性再灌注損傷，動脈瘤，再狹窄，脈管狹窄，實體瘤，皮膚癌，黑素瘤，淋巴瘤，乳腺癌，肺癌，結直腸癌，胃癌，食管癌，胰腺癌，前列腺癌，腎癌，肝癌，膀胱癌，子宮頸癌，子宮癌，睪丸癌和卵巢癌，該方法包含向需要其的受治療者給藥治療有效量的本發明的化合物。對于該方法和以下提供的方法，本發明的化合物在一些實施方案中與第二種治療劑聯合給藥。
本發明還提供治療或預防與DGAT有關的病癥和紊亂的方法，該方法包含向需要其的受治療者給藥治療有效量的本發明的化合物。
本發明另外提供治療或預防DGAT介導的病癥和紊亂的方法，該方法包含向需要其的受治療者給藥治療有效量的本發明的化合物。
本發明還提供調節DGAT的方法，該方法包含將細胞與本發明的化合物接觸。
附圖
簡述不適用發明詳述縮略語和定義術語“治療(treat)”，“治療(treating)”和“療法(treatment)”是指減輕或消除疾病和/或其伴隨癥狀的方法。
術語“預防(prevent)”，“預防(preventing)”和“防止(prevention)”是指防止疾病和/或其伴隨癥狀的發作或預防受治療者得病的方法。如此處所用，“預防(prevent)”，“預防(preventing)”和“防止(prevention)”還包括延緩疾病和/或其伴隨癥狀的發作和減少受治療者得病的風險。
術語“治療有效量”是指給藥的化合物的量，該量足以防止被治療的病癥或紊亂的一種或多種癥狀的發展或某種程度上緩解。
如此處所用，“糖尿病”是指I型糖尿病(青少年發作糖尿病，胰島素依賴型糖尿病或IDDM)或II型糖尿病(非胰島素依賴型糖尿病或NIDDM)，優選II型糖尿病。
如此處所用，“X綜合征”是指包括以下各項的異常的集合高胰島素血癥，肥胖癥，升高的甘油三酯水平，尿酸，血纖蛋白原，小而致密的(smalldense)LDL粒子和血纖蛋白溶酶原激活物抑制劑1(PAI-1)，和降低的HDL膽固醇水平。X綜合征另外意指包括代謝綜合征。
如此處所用，術語“肥胖癥”是指體脂的過量累積。肥胖癥可以具有遺傳、環境(例如支出的能量比消耗的少)和調節的決定因素。肥胖癥包括外源性肥胖，胰島功能亢進性肥胖，增生性肥胖，甲狀腺功能減退性肥胖，下丘腦性肥胖，癥狀性肥胖，嬰兒肥胖，上身肥胖，飲食性肥胖，性腺功能減退性肥胖，單純性和中樞性肥胖，垂體性肥胖和飲食過多。代謝紊亂如高脂血和糖尿病，和心血管病癥如高血壓和冠狀動脈病，通常與肥胖癥相關。
術語“調節(modulate)”是指化合物增加或降低DGAT的功能或活性的能力。如此處所用，“調節(modulation)”的各種形式意欲包括拮抗，激動，部分拮抗和/或部分激動與DGAT相關的活性。DGAT抑制劑是例如結合、部分或完全阻斷刺激、降低、防止、延緩激活、失活、脫敏、或下調信號轉導的化合物。DGAT激活劑是例如結合、刺激、增加、開啟、激活、促進、增強激活、敏化或上調信號轉導的化合物。
如此處所用，術語“組合物”意欲包括包含特定量的特定成分的產品，以及由組合特定量的特定成分直接或間接產生的任何產品。“藥用的”是指載體、稀釋劑或賦形劑必須與制劑的其它成分相容和對其接受者無害。
這里定義的“受治療者”包括動物如哺乳動物，包括但不限于靈長目(例如人類)，牛，綿羊，山羊，馬，狗，貓，兔，大鼠，小鼠等。在優選實施方案種，受治療者是人。
除非另外指出，術語“DGAT”是指酰基CoA二酰甘油酰基轉移酶或其變體。DGAT變體包括基本上與天然DGAT同源的蛋白質，即具有一個或多個天然或非天然發生的氨基酸缺失、插入或替換的蛋白質(例如DGAT衍生物，同系物和片段)。DGAT變體的氨基酸序列優選與天然DGAT至少約80％相同，更優選至少約90％相同，最優選至少約95％相同。
如此處所用，術語“DGAT-相關的病癥或紊亂”是指與不適當的(例如小于或大于正常的)DGAT活性有關和至少部分響應DGAT調節或受其影響的病癥或紊亂(例如DGAT抑制劑或拮抗劑在至少一些患者中導致患者健康的一些改善)。不適當的DGAT功能活性可由于在正常不表達DGAT的細胞中的DGAT表達、降低的DGAT表達或增加的DGAT表達而產生。DGAT-相關的病癥或紊亂可以包括DGAT-介導的病癥或紊亂。
如此處所用，術語“DGAT-介導的病癥或紊亂”等是指其特征在于不適當的(例如小于或大于正常的)DGAT活性的病癥或紊亂。DGAT-介導的病癥或紊亂可以完全或部分受不適當的DGAT活性所介導。然而，DGAT-介導的病癥或紊亂是其中DGAT導致涉及病癥或疾病的一些影響的病癥或紊亂(例如DGAT抑制劑或拮抗劑在至少一些患者中導致患者健康的一些改善)。
除非另外指出，術語“烷基”，其本身或作為另外的取代基的一部分，是指直鏈或支鏈、或環狀烴基，或其組合，其是完全飽和的，具有指示的碳原子數(即C1-C8是指1-8個碳)。烷基的實例包括甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，叔丁基，異丁基，仲丁基，環己基，(環己基)甲基，環丙基甲基，例如正戊基、正己基、正庚基、正辛基等的同系物或異構體。
術語“鏈烯基”，其本身或作為另外的取代基的一部分，是指直鏈或支鏈或環狀烴基，或其組合，其可以是單或多不飽和的，具有指示的碳原子數(即C2-C8是指2-8個碳)和一個或多個雙鍵。鏈烯基的實例包括乙烯基，2-丙烯基，巴豆基，2-異戊烯基，2-(丁間二烯基)，2，4-戊二烯基，3-(1，4-戊二烯基)及其高級同系物和異構體。
術語“炔基”，其本身或作為另外的取代基的一部分，是指直鏈或支鏈烴基，或其組合，其可以是單或多不飽和的，具有指示的碳原子數(即C2-C8是指2-8個碳)和一個或多個三鍵。炔基的實例包括乙炔基，1-和3-丙炔基，3-丁炔基及其高級同系物和異構體。
術語“亞烷基”，其本身或作為另外的取代基的一部分，是指衍生于烷基的二價基團，由-CH2CH2CH2CH2作為示例。典型地，烷基(或亞烷基)含有1-24個碳原子，在本發明中優選含有10個或更少碳原子的那些基團。“低級烷基”或“低級亞烷基”是較短鏈的烷基或亞烷基，通常含有8個或更少的碳原子。類似地，“亞鏈烯基”和“亞炔基”是指不飽和形式的亞烷基，分別具有至少一個雙鍵或三鍵。例如，“亞鏈烯基”意指包括-CH2CH＝CHCH2-，而“亞炔基”意指包括-CH2C≡CCH2-。
術語“烷氧基”，“烷基氨基”和“烷硫基”(或硫代烷氧基)以它們的常規意思使用，是指與分子的剩余部分分別通過氧原子、氨基或硫原子連接的那些烷基。
除非另外指出，術語“雜烷基”，其本身或與其它術語組合，是指穩定的直鏈或直鏈或環狀烴基，或其組合，由指定數目的碳原子和1-3個選自O、N、Si和S的雜原子組成，其中氮和硫原子可以任選地被氧化和氮雜原子可以任選地被季銨化。雜原子O，N和S可以位于雜烷基的任何內部位置。雜原子Si可以位于雜烷基的任何位置，包括烷基與分子的其它部分連接的位置。實例包括-CH2-CH2-O-CH3，-CH2-CH2-NH-CH3，-CH2-CH2-N(CH3)-CH3，-CH2-S-CH2-CH3，-CH2-CH2，-S(O)-CH3，-CH2-CH2-S(O)2-CH3，-CH＝CH-O-CH3，-Si(CH3)3，-CH2-CH＝N-OCH3，和-CH＝CH-N(CH3)-CH3。可達兩個的雜原子可以是相鄰的，如例如-CH2-NH-OCH3和-CH2-O-Si(C3)3。
類似地，術語“雜亞烷基”，其本身或作為另外的取代基的一部分，是指衍生于雜烷基的二價基團，由-CH2-CH2-S-CH2CH2-和-CH2-S-CH2-CH2-NH-CH2-作為示例。對于雜亞烷基，雜原子還可以占據鏈末端之一或兩端(例如亞烷基氧基，亞烷基二氧基，亞烷基氨基，亞烷基二氨基等)。另外，對于亞烷基和雜亞烷基連接基團，沒有包含連接基團的定向。
除非另外指出，術語“環烷基”和“雜環烷基”，其本身或與其它術語組合，分別表示環狀形式的“烷基”和“雜烷基”。因此，環烷基具有指定數目的碳原子(即C3-C8意指3-8個碳)和可以還具有1個或2個雙鍵。雜環烷基由指定的碳原子數和1-3個選自O、N、Si和S的雜原子組成，其中氮和硫原子可以任選地被氧化和氮雜原子可以任選地被季銨化。另外，對于雜環烷基，雜原子可以占據雜環與分子的剩余部分連接的位置。環烷基的實例包括環戊基，環己基，1-環己烯基，3-環己烯基，環庚基等。雜環烷基的實例包括1-(1，2，5，6-四氫吡啶基)，1-哌啶基，2-哌啶基，3-哌啶基，4-嗎啉基，3-嗎啉基，四氫呋喃-2-基，四氫呋喃-3-基，四氫噻吩-2-基，四氫噻吩-3-基，1-哌嗪基，2-哌嗪基等。
除非另外指出，術語“鹵代”和“鹵素”，其本身或作為另外的取代基的一部分，是指氟、氯、溴或碘原子。另外，術語如“鹵代烷基”意指包括被可以相同或不同的鹵原子取代的烷基，該鹵原子數目為1至(2m’+1)個，其中m’是烷基中的碳原子總數。例如術語“鹵代(C1-C4)烷基”意指包括三氟甲基，2，2，2-三氟乙基，4-氯丁基，3-溴丙基等。因此，術語“鹵代烷基”包括一鹵代烷基(被一個鹵素原子取代的烷基)和多鹵代烷基(被2至(2m’+1)個鹵素原子取代的烷基，其中m’是烷基中的碳原子總數)。除非另外指出，術語“全鹵代烷基”是指被(2m’+1)個鹵素原子取代的烷基，其中m’是烷基中的碳原子總數。例如術語“全鹵代(C1-C4)烷基”意指包括三氟甲基，五氯乙基，1，1，1-三氟-2-溴-2-氯乙基等。
除非另外指出，術語“芳基”是指多不飽和的、典型地芳族烴基取代基，其可以是單環或稠合在一起或共價連接的多環(可達三個環)。非限制性的芳基的實例包括苯基，1-萘基，2-萘基，4-聯苯基和1，2，3，4-四氫化萘。
術語“雜芳基”是指含有1-4個選自N，O，和S的雜原子的芳基(或環)，其中氮和硫原子任選地被氧化和氮雜原子任選地被季銨化。雜芳基可以與分子的剩余部分通過雜原子連接。雜芳基的非限制性實例包括1-吡咯基，2-吡咯基，3-吡咯基，3-吡唑基，2-咪唑基，4-咪唑基，吡嗪基，2-噁唑基，4-噁唑基，2-苯基-4-噁唑基，5-噁唑基，3-異噁唑基，4-異噁唑基，5-異噁唑基，2-噻唑基，4-噻唑基，5-噻唑基，2-呋喃基，3-呋喃基，2-噻吩基，3-噻吩基，2-吡啶基，3-吡啶基，4-吡啶基，2-嘧啶基，4-嘧啶基，5-苯并噻唑基，嘌呤基，2-苯并咪唑基，5-吲哚基，1-異喹啉基，5-異喹啉基，2-喹喔啉基，5-喹喔啉基，3-喹啉基和6-喹啉基。
為了簡明，當與其它術語組合使用時(例如芳氧基，芳基硫氧基(arylthioxy)，芳烷基)，術語“芳基”包括如上定義的芳基和雜芳環。因此，術語“芳烷基”意指包括其中芳基與烷基連接的那些基團(例如芐基，苯乙基，吡啶基甲基等)，包括其中碳原子(例如亞甲基)已經被例如氧原子取代的那些烷基(例如苯氧基甲基，2-吡啶基氧基甲基，3-(1-萘氧基)丙基等)。
以上術語(例如“烷基，”“雜烷基，”“芳基”和“雜芳基”)中的每一個意指包括取代和未取代形式的所示基團。每種類型的基團的優選取代基在下面提供。
烷基和雜烷基(以及稱為亞烷基，鏈烯基，雜亞烷基，雜鏈烯基，炔基，環烷基，雜環烷基，環鏈烯基和雜環鏈烯基的那些基團)的取代基可以是各種基團，所述的基團選自-OR’，＝O，＝NR’，＝N-OR’，-NR’R”，-SR’，鹵素，-SiR’R”R_，-OC(O)R’，-C(O)R’，-CO2R’，-CONR’R”，-OC(O)NR’R”，-NR”C(O)R’，-NR’-C(O)NR”R_，-NR’SO2NR”R_，-NR”CO2R’，-NH-C(NH2)＝NH，-NR’C(NH2)＝NH，-NH-C(NH2)＝NR’，-S(O)R’，-SO2R’，-SO2NR’R”，-NR”SO2R’，-CN和-NO2，數量為0-3個，特別優選具有0、1或2個取代基的那些基團。R’，R”和R_各自獨立地表示氫，未取代的(C1-C8)烷基和雜烷基，未取代的芳基，被1-3個鹵素取代的芳基，未取代的烷基，未取代的芳基，被1-3個鹵素取代的芳基，未取代的烷基，烷氧基或硫代烷氧基，或芳基-(C1-C4)烷基。當R’和R”與同一個氮原子連接時，它們可以與該氮原子結合形成5-，6-或7-元環。例如，-NR’R”意指包括1-吡咯烷基和4-嗎啉基。另外，以上取代基可以與烷基(或亞烷基，環烷基等)通過1-4個碳原子的間隔基(通常作為亞甲基或支鏈未取代的亞烷基(例如-CH2CH2-和-CH(CH3)CH2-)、亞鏈烯基或亞炔基存在)連接。典型地，烷基或雜烷基具有0-3個取代基，在本發明中優選具有2個或更少取代基的那些基團。更優選地，烷基或雜烷基基團是未取代的或單取代的。最優選，烷基或雜烷基基團是未取代的。從上述取代基的討論，本領域技術人員將理解術語“烷基”意指包括基團如三鹵代烷基(例如-CF3和-CH2CF3)。
烷基和雜烷基的優選取代基選自-OR’，＝O，-NR’R”，-SR’，鹵素，-SiR’R”R_，-OC(O)R’，-C(O)R’，-CO2R’，-CONR’R”，-OC(O)NR’R”，-NR”C(O)R’，-NR”CO2R’，-NR’SO2NR”R_，-S(O)R’，-SO2R’，-SO2NR’R”，-NR”SO2R’，-CN和-NO2，其中R’和R”如上定義。進一步優選的取代基選自-OR’，＝O，-NR’R”，鹵素，-OC(O)R’，-CO2R’，-CONR’R”，-OC(O)NR’R”，-NR”C(O)R’，-NR”CO2R’，-NR’-SO2NR”R_，-SO2R’，-SO2NR’R”，-NR”SO2R，-CN和-NO2。另外，每個優選的和更優選的取代基可以與烷基(或亞烷基，環烷基等)通過1-4個碳原子的間隔基(通常作為亞甲基或支鏈未取代的亞烷基)連接。
類似地，芳基和雜芳基的取代基不同和選自鹵素，-OR’，-OC(O)R’，-NR’R”，-SR’，-R’，-CN，-NO2，-CO2R’，-CONR’R”，-C(O)R’，-OC(O)NR’R”，-NR”C(O)R’，-NR”CO2R’，-NR’-C(O)NR”R_，-NR’-SO2NR”R_，-NH-C(NH2)＝NH，-NR’C(NH2)＝NH，-NH-C(NH2)＝NR’，-S(O)R’，-SO2R’，-SO2NR’R”，-NR”SO2R’，-N3，-CH(Ph)2，全氟(C1-C4)烷氧基和全氟(C1-C4)烷基，數量為0至芳環系統上開放化合價的總數；其中R’，R”和R_獨立地選自氫，(C1-C8)烷基和雜烷基，未取代的芳基和雜芳基，(未取代的芳基)-(C1-C4)烷基和(未取代的芳基)氧基-(C1-C4)烷基。當芳基是1，2，3，4-四氫化萘時，它可以被取代的或未取代的(C3-C7)螺環烷基取代。(C3-C7)螺環烷基可以以此處對于“環烷基”定義的相同方式被取代。典型地，芳基或雜芳基具有0-3個取代基，在本發明中優選具有2個或更少取代基的那些基團。在本發明的一個實施方案中，芳基或雜芳基是未取代的或單取代的。在另一實施方案中，芳基或雜芳基是未取代的。當被取代時，以上取代基可以與芳基或雜芳基通過1-4個碳原子的間隔基(通常作為亞甲基或支鏈未取代的亞烷基(例如-CH2CH2-和-CH(CH3)CH2-)存在)連接。
對于芳基和雜芳基的優選取代基選自鹵素，-OR’，-OC(O)R’，-NR’R”，-SR’，-R’，-CN，-NO2，-CO2R’，-CONR’R”，-C(O)R’，-OC(O)NR’R”，-NR”C(O)R’，-S(O)R’，-SO2R’，-SO2NR’R”，-NR”SO2R’，-N3，-CH(Ph)2，全氟(C1-C4)烷氧基和全氟(C1-C4)烷基，其中R’和R”如上定義。進一步優選的取代基選自鹵素，-OR’，-OC(O)R’，-NR’R”，-R’，-CN，-NO2，-CO2R’，-CONR’R”，-NR”C(O)R’，-SO2R’，-SO2NR’R”，-NR”SO2R’，全氟(C1-C4)烷氧基和全氟(C1-C4)烷基。如上所述，這些取代基任選地與芳基或雜芳基部分通過1-4個亞甲基的間隔基連接。
應當理解此處所用的取代基-CO2H包括對其的生物電子等排替換，如
等。參見例如，The Practice of Medicinal Chemistry；Wermuth，C.G.，Ed.；Academic PressNew York，1996；p.203。
芳環或雜芳環的相鄰原子上的兩個取代基可以任選地被通式-T-C(O)-(CH2)q-U-的取代基取代，其中T和U獨立地為-NH-，-O-，-CH2-或單鍵，q是0-2的整數。備選地，芳環或雜芳環的相鄰原子上的兩個取代基可以任選地被通式-A-(CH2)r-B-的取代基所取代，其中A和B獨立地為-CH2-，-O-，-NH-，-S-，-S(O)-，-S(O)2-，-S(O)2NR’-或單鍵，r為1-3的整數。如此形成的新環的單鍵之一可任選地被雙鍵所取代。備選地，芳環或雜芳環的相鄰原子上的兩個取代基可以任選地被通式-(CH2)s-X-(CH2)t-的取代基所取代，其中s和t獨立地為0-3的整數，且X是-O-，-NR’，-S-，-S(O)-，-S(O)2-，或-S(O)2NR’-。-NR’-和-S(O)2NR’-中的取代基R’選自氫或未取代的(C1-C6)烷基。
如此處所用，術語“雜原子”意欲包括氧(O)，氮(N)，硫(S)和硅(Si)。
術語“藥用鹽”意指包括活性化合物的鹽，其是用相對非毒性的酸或堿制備的，這取決于在此處所述化合物上發現的具體取代基。當本發明的化合物含有相對酸性的官能團時，通過將游離酸形式的這些化合物與足量的期望堿凈接觸或在適當惰性溶劑中接觸可以獲得堿加成鹽。藥用堿加成鹽的實例包括鈉，鉀，鈣，銨，有機氨基，或鎂鹽，或類似鹽。當本發明的化合物含有相對堿性的官能團時，通過游離堿形式的這些化合物與足量的期望酸凈接觸或在適當惰性溶劑中接觸可以獲得酸加成鹽。藥用酸加成鹽的實例包括衍生于無機酸的那些鹽和衍生于相對非毒性有機酸的鹽，所述無機酸如鹽酸，氫溴酸，硝酸，碳酸，碳酸氫酸，磷酸，磷酸氫酸，磷酸二氫酸，硫酸，硫酸氫酸，氫碘酸，或亞磷酸等，所述有機酸如乙酸，丙酸，異丁酸，馬來酸，丙二酸，苯甲酸，琥珀酸，辛二酸，富馬酸，扁桃酸，鄰苯二甲酸，苯磺酸，對甲苯磺酸，檸檬酸，酒石酸，甲磺酸等。還包括氨基酸如精氨酸等的鹽，和有機酸如葡糖醛酸或半乳糖醛酸的鹽(參見，例如，Berge，S.M.，等“Pharmaceutical Salts”，Journal of PharmaceuticalScience，1977，66，1-19)。本發明某些特定的化合物含有允許化合物轉化為堿加成鹽或酸加成鹽的堿性和酸性官能團。
化合物的中性形式可以通過將鹽與堿或酸接觸并以常規方式分離母體化合物來再生。化合物的母體形式在某些物理性質方面與各種鹽形式不同，如在極性溶劑中的溶解度，但是對于本發明的目的這些鹽與化合物的母體形式等價。
除了鹽形式以外，本發明提供前藥形式的化合物。此處所述的化合物的前藥是容易在生理條件下進行化學變化以提供本發明的化合物的那些化合物。另外，前藥可以在體外環境中通過化學或生化方法轉化為本發明的化合物。例如，當放置在透皮貼片儲存器中使用適當酶或化學試劑，前藥可以緩慢轉化為本發明的化合物。
應當理解當本發明的化合物含有一個或多個不對稱碳原子(光學中心)或雙鍵時，本發明包括單個的立體異構體和幾何異構體以及其混合物。例如，當m為1和W2是取代的環(C3-C8)烷基(例如以下的A.4)時，1，4-順式和反式異構體及其外消旋物意欲屬于本發明的范圍內
本發明的某些化合物可以以非溶劑化形式以及溶劑化形式存在，包括水合形式存在。通常，溶劑化形式等價于非溶劑化形式并且意欲包含在本發明的范圍內。本發明的某些化合物可以以多結晶或無定形形式存在。通常，所有物理形式對于本發明考慮的應用等價并且意欲包括在本發明的范圍內。
本發明的化合物還可以在一個或多個構成該化合物的原子上含有非天然比例的原子同位素。例如，化合物可以用放射性同位素(如例如氚(3H)，碘-125(125I)或碳-14(14C))放射標記。本發明化合物的所有同位素變化(放射性或非放射性)意欲包括在本發明的范圍內。
本發明的實施方案化合物在一方面，本發明提供通式(I)的化合物或其藥用鹽，前藥或立體異構體 在該通式中，字母X表示C(R1)或N；字母Y表示C(R1)，C(R2)(R2)，N或N(R2)；和字母Z表示O或S。
接著轉到雙環雜芳族核上的取代基，符號L1表示鍵，(C1-C4)亞烷基，(C2-C4)亞鏈烯基，O或N(Ra)C(O)；且W1表示取代或未取代的成員，該成員選自環(C3-C8)烷基，雜環(C3-C8)烷基，芳基和雜芳基。下標m為0或1，表示另外部分L2-W2的存在(m為1)或不存在(m為0)。對于其中m為1的那些實施方案，符號L2表示鍵，O，(C1-C4)亞烷基，(C2-C4)亞鏈烯基，(C1-C4)雜亞烷基和N(Ra)C(O)；且符號W2表示取代或未取代的成員，該成員選自環(C3-C8)烷基，雜環(C3-C8)烷基，芳基和雜芳基。當m為1和L2是鍵時，W2上的取代基可以與W1上的取代基結合形成與W1和螺稠合或與W2稠合的5-，6-或7-元環，其中所述環是飽和的或不飽和的并且含有0，1或2個選自N，O和S的雜原子作為環成員。W1和W2各自的取代基可以選自在上述定義中提供的取代基以及對于以下各個具體實施方案引用的取代基。
剩余的取代基，R1至R7和Ra和Rb具有下列含義每個R1獨立地選自H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，氟代(C1-C8)烷基，芳基，芳基(C1-C4)烷基，C(O)Ra，CO2Ra和C(O)NRaRb；每個R2獨立地選自H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，氟代(C1-C8)烷基，C(O)Ra，CO2Ra，C(O)NRaRb，芳基和芳基(C1-C4)烷基；R3和R4獨立地選自H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，C(O)Ra，CO2Ra，C(O)NRaRb和(C1-C4)亞烷基-ORa；R5和R6獨立地選自H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，C(O)Ra和CO2Ra；R7選自H，(C1-C8)烷基，鹵代(C1-C4)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，C(O)Ra，ORa和NRaRb；每個Ra和Rb獨立地選自H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，氟代(C1-C8)烷基，芳基和芳基(C1-C4)烷基。
虛線表示任選的鍵。在其它任選的實施方案中，R3和R4可以結合形成3-，4-，5-或6-元螺環；R2，R3或R4可以與W1結合形成5-，6-或7-元稠環，該稠環含有0-3個選自N，O和S的雜原子；R5和R6可以與它們每個連接的氮原子結合形成5-，6-或7-元環；當作為Y的一部分提供時，R2或R1可以與R5結合形成5-或6-元環，該環具有連接R5的氮，任選地攜帶氧代部分；當X是C(R1)時，R5或R6可以與R1結合形成5-，6-或7-元稠環，該稠環含有連接R5或R6的氮原子；當X是C(R1)時，R7可以與R1結合形成5-，6-或7-元稠環。
在優選實施方案中，R1和R2各自獨立地為H或(C1-C8)烷基；R3和R4各自獨立地為H或(C1-C4)烷基；R5和R6各自為H，(C1-C4)烷基或者與它們各自各自連接的氮結合形成5-或6-元環(例如吡咯烷或哌啶環)；和R7為H，(C1-C8)烷基或鹵代(C1-C4)烷基。
在上述通式(I)的化合物中，化合物不同于 其中R8是H，NO2，Cl，甲氧基，甲基和苯基。
在上面的通式(I)中，優選多組實施方案。
在一組優選實施方案中，X為N。還更優選地，X是N和Z是O。在該組實施方案中，優選L1是鍵和W1是取代的或未取代的成員，該成員選自苯，吡啶，噻吩，噁唑，噻唑，苯并噁唑，苯并噻唑，苯并呋喃，苯并噻吩，(C4-C7)環烷，(C5-C7)環烯，1，2，3，4-四氫化萘和1，2-二氫化茚。還更優選，W1是取代的或未取代的成員，該成員選自吡啶，噻吩，(C4-C7)環烷，1，2，3，4-四氫化萘和1，2-二氫化茚。對于其中W1是取代的苯的那些實施方案，除了L2-W2以外的取代基(以下Rc)優選選自鹵素(包括F，Cl，Br和I)，Rc1，ORc1，N(Rc1)2，SRc1，NO2，CN，(C1-C8)鹵代烷基和(C1-C8)鹵代烷氧基，其中每個Rc1獨立地為H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基或(C2-C8)炔基，且任選地，與同一氮原子連接的兩個Rc1基團結合形成5-或6-元環。另外地，取代的苯優選具有1-4個取代基，更優選1個或2個取代基，最優選1個取代基。W1和W2各自的取代基可以選自在上述定義中提供的取代基以及對于以下各個具體實施方案引用的取代基。
在一組具體實施方案中，下標m是0和L1是鍵。還更優選地，W1選自取代的或未取代的苯，吡啶，噻吩，噁唑，噻唑，苯并噁唑，苯并噻唑，苯并呋喃，苯并噻吩，(C4-C7)環烷，(C5-C7)環烯，1，2，3，4-四氫化萘和1，2-二氫化茚。還更優選地，W1是取代的或未取代的成員，該成員選自苯，吡啶，噻吩，(C4-C7)環烷，1，2，3，4-四氫化萘和1，2-二氫化茚。再進一步優選的是描述為以下通式Ia，Ib，Ic，Id，Ie，If和Ig的那些實施方案
和 其中下標n為0-4的整數，每個Rc表示獨立地選自鹵素(包括F，Cl，Br和I)，Rc1，ORc1，N(Rc1)2，SRc1，NO2，CN，(C1-C8)鹵代烷基和(C1-C8)鹵代烷氧基的取代基，其中每個Rc1獨立地為H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基或(C2-C8)炔基和當Rc為N(Rc1)2時，兩個Rc1基團可以結合形成5-或6-元環。任選地，對于If和Ig，兩個Rc1基團可以結合形成3-，4-，5-，6-或7-元任選取代的螺環。剩余的取代基具有以上關于通式I提供的含義。
在一個相關組的具體實施方案中，X是N，Z是O，L1優選是鍵，W1是取代的或未取代的成員，該成員選自苯，吡啶，噻吩，噁唑，噻唑，苯并噁唑，苯并噻唑，苯并呋喃，苯并噻吩，(C4-C7)環烷，(C5-C7)環烯，1，2，3，4-四氫化萘和1，2-二氫化茚，且m為1。在該組實施方案中，L2優選是鍵，O，或(C1-C4)雜亞烷基(e.g.，-OCH2-，-OCH2CH2-，-NHCH2-)和W2是取代的或未取代的選自苯，吡啶和(C4-C7)環烷的成員。
在一組特別優選的實施方案中，化合物選自
和 其中下標n是0-4的整數，每個Rc表示獨立地選自鹵素(包括F，Cl，Br和I)，Rc1，ORc1，N(Rc1)2，SRc1，NO2，CN，(C1-C8)鹵代烷基和(C1-C8)鹵代烷氧基的取代基，其中每個Rc1獨立地為H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基或(C2-C8)炔基，任選地，與同一氮原子連接的兩個Rc1基團結合形成5-或6-元環。另外，下標p是0-4的整數，更優選0，1或2，每個Rd是獨立地選自下列各項的取代基鹵素(包括F，Cl，Br和I)，Rd1，ORd1，N(Rd1)2，-(CH2)t-S(O)uRe，NO2，CN，(C1-C8)鹵代烷基，(C1-C8)鹵代烷氧基，芳基(C1-C4)烷基，雜芳基(C1-C4)烷基，-CH(Rf)-CO2Re，-C(Rf)2-CO2Re，-C(O)CO2Re，-(CH2)t-CO2Re，-(CH2)t-C(O)Re，-(CH2)t-C(O)NReRf，-(CH2)t-NHSO2Re，-(CH2)t-SO2NReRf，-(CH2)t-NReRf，-(CH2)t-ORe，-(CH2)t-NHSO2NHCO2Re，-(CH2)t-NHSO2NReRf，-(CH2)t-CONHSO2Re，-(CH2)t-W3，-(CH2)t-NHCO2Re，-(CH2)t-NRfCORe，-(CH2)t-NHCONReRf和-(CH2)t-NHCO-(CH2)t-OCORe，其中下標t在各種情形中是0-8的整數，下標u是0-2的整數，Rd1選自H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基和(C3-C8)環烷基，其中脂族部分任選地被OH，CO2H，NH2，CONH2，苯基，鹵素，鹵代(C1-C4)烷基和CO2Rg取代，且任選地，與同一氮連接的兩個Rd1基團結合形成5-或6-元環；其中每個Re和Rf獨立地為H或(C1-C8)烷基，或當與同一氮原子連接時結合形成5-或6-元環，或者任選地選自
和 其中Re和Rf的任何烷基部分任選地被選自下列各項的成員所取代OH，COOH，NH2，CONH2，苯基，二烷基氨基和COORg，其中Rg是(C1-C4)烷基；且W3選自
和 其中每個Ri和每個Rj獨立地選自H，OH，COOH，鹵素，鹵代(C1-C4)烷基，羥基(C1-C4)烷基，(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷氧基，(C1-C6)烷氧基(C1-C4)烷基和COO(C1-C4)烷基，其中脂族部分是未取代的或任選地被鹵素取代。
在一些實施方案中，Rd取代基選自鹵素(包括F，Cl，Br和I)，Rd1，ORd1，N(Rd1)2，SRd1，NO2，CN，(C1-C8)鹵代烷基，(C1-C8)鹵代烷氧基，芳基(C1-C4)烷基，雜芳基(C1-C4)烷基，(C1-C8)亞烷基-CO2Re，C(O)Re，CO2Re，-CH2-CO2Re，-CH(Rf)-CO2Re，-C(Rf)2-CO2Re，-CH2CH2CO2Re，-C(O)NReRf，-CH2C(O)NReRf，-CH2CH2CONReRf，-NHSO2Re，-CH2NHSO2Re，-CH2CH2NHSO2Re，-CH2SO2NReRf，-CH2CH2SO2NReRf，-CH2OH，-CH2NReRf，CH2CH2OH，-CH2C(CH3)2OH，-CH2-W3，-CH2CH2-W3和-C(O)CO2Re，其中每個Rd1，Re，Rf和W3具有以上關于通式Ih，Ii，Ij和Ik提供的含義，剩余的取代基具有以上關于通式I提供的含義。
在另外其它優選的實施方案中，化合物具有選自下列各項的通式
和 其中R2，R3，R4，R5，R6，R7和Rc中的每一個和下標n具有以上關于通式Ia-Ik提供的含義。下標q是0-3的整數，更優選0或1。下標s是0-4的整數，更優選0，1或2，每個Rh是獨立地選自下列各項的取代基氧代，鹵素(包括F，Cl，Br和I)，Rh1，ORh1，N(Rh1)2，-(CH2)t-S(O)uRe，NO2，CN，(C1-C8)鹵代烷基，(C1-C8)鹵代烷氧基，芳基(C1-C4)烷基，雜芳基(C1-C4)烷基，-CH(Rf)-CO2Re，-C(Rf)2-CO2Re，-C(O)CO2Re，＝CH-CONReRf，＝CH-CO2Re，-(CH2)t-CO2Re，-(CH2)t-C(O)Re，-(CH2)t-C(O)NReRf，-(CH2)t-NHSO2Re，-(CH2)t-SO2NReRf，-(CH2)t-NReRf，-(CH2)t-ORe，-(CH2)t-NHSO2NHCO2Re，-(CH2)t-NHSOxNReRf，-(CH2)t-CONHSO2Re，-(CH2)t-W3，-(CH2)t-NHCO2Re，-(CH2)t-NRfCORe，-(CH2)t-NHCONReRf和-(CH2)t-NHCO-(CH2)t-OCORe，其中下標t在各種情形中是0-8的整數，下標u是0-2的整數，Rh1選自H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基和(C3-C8)環烷基，其中脂族部分任選地被OH，CO2H，NH2，CONH2，苯基，鹵素，鹵代(C1-C4)烷基和CO2Rg取代，任選地與同一氮連接的兩個Rh1基團結合形成5-或6-元環，或者Rh和Rh1基團可以結合形成具有0-2個選自N，O和S的雜原子的3-，4-，5-或6-元螺環或稠環；其中Re和Rf各自獨立地為H或(C1-C8)烷基，或當與同一氮原子連接時結合形成5-或6-元環，或者任選地選自 和 其中Re和Rf的任何烷基部分任選地被選自下列各項的成員所取代OH，COOH，NH2，CONH2，苯基，二烷基氨基和COORg，其中Rg是(C1-C4)烷基；和W3選自下列各項
和 其中每個Ri和每個Rj獨立地選自H，OH，COOH，鹵素，鹵代(C1-C4)烷基，羥基(C1-C4)烷基，(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷氧基，(C1-C6)烷氧基(C1-C4)烷基和COO(C1-C4)烷基，其中脂族部分是未取代的或任選地被鹵素取代。
在一些實施方案中，Rh取代基選自氧代，鹵素(包括F，Cl，Br和I)，Rh1，ORh1，N(Rh1)2，SRh1，NO2，CN，(C1-C8)鹵代烷基，(C1-C8)鹵代烷氧基，芳基(C1-C4)烷基，雜芳基(C1-C4)烷基，(C1-C8)亞烷基-CO2Re，C(O)Re，CO2Re，＝CH-CONReRf，＝CH-CO2Re，-CH2-CO2Re，-CH(Rf)-CO2Re，-C(Rf)2-CO2Re，-CH2CH2CO2Re，-C(O)NReRf，-CH2C(O)NReRf，-CH2CH2CONReRf，-NHSO2Re，-CH2NHSO2Re，-CH2CH2NHSO2Re，-CH2SO2NReRf，-CH2CH2SO2NReRf，-CH2OH，-CH2NReRf，CH2CH2OH，-CH2C(CH3)2OH，-CH2-W3，-CH2CH2-W3和-C(O)CO2Re，其中Rh1，Re，Rf和W3具有以上關于通式Il，Im，In，Io，Ip和Iq提供的含義，剩余的取代基具有以上關于通式I所提供的含義。
在通式Ia至Iq各自的一些實施方案中，R2(當存在時)是H或(C1-C8)烷基；R3和R4各自獨立地為H，(C1-C4)烷基或結合形成3-，4-，5-或6-元螺環；R5和R6各自為H，(C1-C4)烷基或與各自連接的氮結合形成5-或6-元環(例如吡咯烷或哌啶環)；R7為H，(C1-C8)烷基或鹵代(C1-C4)烷基。還更優選的是其中下標n為0，q為1和s為1的那些實施方案。在特別優選的一組實施方案中，化合物具有通式Il，Im或In，Rh表示具有下面的通式的取代基C(O)Re，CO2Re，＝CH-CO2Re，-CH2-CO2Re，-CH2NHCORe，-CH(Rf)-CO2Re，-C(Rf)2-CO2Re，-CH2CHCO2Re，-C(O)NReRf，＝H-CONReRf，-CH2C(O)-NReRf，-CH2CH2C(O)NReRf，-CH2CH2NHCO2Re，-CH2NHCO2Re，-NHSO2Re，-CH2NHSO2Re，-CH2CH2NHSO2Re，-CH2SO2NReRf，-CH2CH2SO2NReRf，-CH2OH，-CH2NReRf，-CH2CH2OH，-CH2C(CH3)2OH，-CH2-W3，-CH2CH2-W3，-C(O)CO2Re或-CH2-C(CF3)2-OH。在另外一組優選實施方案中，化合物具有通式II，其中R3和R4獨立地為H或未取代的(C1-C4)烷基；R5和R6獨立地為H或未取代的(C1-C4)烷基；R7選自H，未取代的(C1-C4)烷基或鹵代(C1-C4)烷基；下標n為0，1或2，Rc選自氟，氯，溴，氰基，甲基，三氟甲基和硝基；Rh選自CO2Re，＝CH-CO2Re，-CH2-CO2Re，-CH2NHCORe，-CH(Rf)-CO2Re，-C(Rf)2-CO2Re，-CH2CH2CO2Re，-C(O)NReRf，＝CH-CONReRf，-CH2C(O)-NReRf，-CH2CH2C(O)NReRf，-CH2CH2NHCO2Re，-CH2NHCO2Re，-CH2NReRf，-CH2-W3和-CH2CH2-W3；其中Re和Rf各自為H或(C1-C4)烷基，其任選地被選自下列各項的成員所取代OH，COOH，NH2，CONH2，苯基，二烷基氨基和COORg，其中Rg是(C1-C4)烷基；且其中W3選自 其中Ri和Rj各自獨立地選自H和(C1-C4)烷基。
在還有的其它組的優選實施方案中，化合物由通式Ir至Iy表示
其中R3，R4，R5，R6，R7和Rc中的每一個以及下標n具有以上關于通式Ia-Ik提供的含義。下標q是0-3的整數，更優選0或1。下標s是0-4的整數，更優選0，1或2，每個Rh是獨立地選自以上關于通式Il，Im，In，Io，Ip和Iq提供的基團的取代基。對于Rh優選的基團是以上作為通式Il，Im，In，Io，Ip和Iq的優選基團提供的那些。
在優選實施方案中，R3和R4各自獨立地為H，(C1-C4)烷基或結合形成3-，4-，5-或6-元螺環；R5和R6各自為H，(C1-C4)烷基或與它們每個連接的氮結合形成5-或6-元環(吡咯烷環或哌啶環)；且R7是H，(C1-C8)烷基或鹵代(C1-C4)烷基。還更優選的是其中下標n為0，q為1和s為1的那些實施方案。在特別優選的一組實施方案中，Rh表示具有通式C(O)Re，CO2Re，＝CH-CO2Re，-CH2-CO2Re，-CH(Rf)-CO2Re，-C(Rf)2-CO2Re，-CH2CH2CO2Re，-C(O)NReRf，＝CH-CONReRf，-CH2C(O)NReRf，-CH2CH2C(O)NReRf，-CH2CH2NHCO2Re，-CH2NHCO2Re，-NHSO2Re，-CH2NHSO2Re，-CH2CH2NHSO2Re，-CH2SO2NReRf，-CH2CH2SO2NReRf，-CH2OH，-CH2NReRf，-CH2CH2OH，-CH2C(CH3)2OH，-CH2-W3，-CH2CH2-W3，-C(O)CO2Re或-CH2-C(CF3)2-OH的取代基，其中Re，Rf和W3中的每一個如上所述。
在特別優選的一組實施方案中，化合物具有通式Iw.4，其中取代基具有以上關于通式I提供的含義，且優選選自關于通式Ir至Iy提供的優選的基團。
更優選地，通式Iw.4的化合物是其中R3和R4獨立地為以下所述的那些，其中R3和R4獨立地為H或未取代的(C1-C4)烷基；R5和R6獨立地為H或未取代的(C1-C4)烷基；R7選自H，未取代的(C1-C4)烷基或鹵代(C1-C4)烷基；下標n為0，1或2，Rc選自氟，氯，溴，氰基，甲基，三氟甲基和硝基；Rh選自CO2Re，＝CH-CO2Re，-CH2-CO2Re，-CH2NHCORe，-CH(Rf)-CO2Re，-C(Rf)2-CO2Re，-CH2CH2CO2Re，-C(O)NReRf，＝CH-CONReRf，-CH2C(O)-NReRf，-CH2CH2C(O)NReRf，-CH2CH2NHCO2Re，-CH2NHCO2Re，-CH2NReRf，-CH2-W3和-CH2CH2-W3；其中每個Re和Rf為H或(C1-C4)烷基，其任選地被選自下列各項的成員所取代OH，COOH，NH2，CONH2，苯基，二烷基氨基和COORg，其中Rg是(C1-C4)烷基；且其中W3選自
其中Ri和Rj各自獨立地選自H和未取代的(C1-C4)烷基。
在其它特別優選的組的實施方案中，化合物由通式Il.4和Ig.4表示 和 其中各個取代基具有以上對于通式Ir至Iy提供的含義和優選基團。
本發明更優選的化合物是在以下實施例中提供的和進一步在表1-10中例舉的那些。
在特別優選的一組實施方案中，化合物選自


化合物的制備本發明的化合物可以從可商購的原材料開始和使用本領域技術人員已知的通用合成技術制備。以下概述的是適于制備這些化合物的反應路線。進一步的例證見提供的具體實施方案中。
反應路線1 如反應路線1所示，本發明的化合物，其中X是N、Y是N和Z是O，可以由適當取代的嘧啶(ii)和取代的酮(i)制備，(i)中的LG表示離去基團如鹵素原子，甲苯磺酸鹽，甲磺酸鹽或三氟甲磺酸鹽。在有機溶劑或溶劑混合物(包括含水混合物)中，在酸(例如HCl)或堿(例如NaHCO3)存在或不存在的條件下，i和ii的縮合在后處理后提供通式iii的化合物。用還原劑例如硼氫化鈉，硼氫化鋰或三乙酰氧基硼氫化鈉還原iii，提供本發明另外其它的化合物，如反應路線2中iv所示。
反應路線2 反應路線3a-3i舉例說明了制備通式結構i的中間體化合物的多種方法。在反應路線3a中，苯衍生物如4-苯基-環己酮(v)被官能化以在環己烷環上引入所期望的取代基。在所示實施例中，使用Horner-Emmons或類似的Wittig反應來引入α，β-不飽和酯基，生成vi(例如與適當的膦酸鹽在堿如氫化鈉的存在下在溶劑如DMF或THF中反應)。使用例如鈀或鉑催化劑，在相對極性的溶劑如THF、甲醇或含有醇或THF作為助溶劑的水性混合物中的vi的催化氫化例如被用于還原雙鍵，生成化合物vii。然后使用弗雷德-克萊福特(Friedel-Crafts)反應以將鹵代乙酰基連接到vii的苯環上，形成官能化的苯乙酮(ix)。優選地，在該順序中的離去基團是Cl或Br。對于酰化的適當路易斯酸包括例如AlCl3，AlBr3，BCl3，TiCl4，等；適當的溶劑在本領域是公知的并且包括CS2，硝基苯，二氯甲烷和對于所用試劑和路易斯酸是非反應性的類似溶劑。本領域技術人員應當理解還已知制備這些中間體的其它合成方法，例如，酰化金屬化的芳族物質，如芳基鋰或芳基格氏(Grignard)試劑與例如酰化劑如氯乙酸衍生物的N-甲基-N-甲氧基酰胺(通常稱為Weinreb酰胺)(參見，例如，Nahm和Weinreb(1981)TetrahedronLett.223815-3818)或適當酰基酯。這些方法提供對這些官能化的苯乙酮衍生物的其它異構體的途徑。
反應路線3a 備選地，vii可以通過下面的方法烷基化，來提供中間體x(反應路線3b)用堿如二異丙基酰胺鋰或六甲基二硅氮化鋰在適當溶劑如THF中處理，接著與烷基化劑如烷基鹵，甲磺酸烷基酯，三氟甲磺酸烷基酯或甲苯磺酸烷基酯反應。如果需要，可以重復該順序以提供通式xi的中間體。xi的酰化可以如上所述完成以提供xii。
反應路線3b
可以使用類似方法生產其它功能化的苯乙酮衍生物(參見反應路線3c)。例如，4-苯基環己酮(v)可以如下兩步轉化為醛使用與甲氧基甲基三苯基正膦在適當溶劑如THF，DME或二噁烷中的Wittig反應生成xiv，例如接著溫和酸性水解。該醛可以通過與(甲氧甲酰)亞甲基三苯基正膦在適當溶劑中的Wittig反應同系化(homologated)為α，β-不飽和酯。如果需要，該雙鍵可以通過例如使用碳載鈀的催化氫化來還原生成xv。該氫化反應的適當溶劑包括乙醇或乙酸乙酯。xv生成官能化苯乙酮衍生物(xvi)的酰化可以如上關于vii的酰化所述完成。
反應路線3c 反應路線3d舉例說明了通式i另外的官能化苯乙酮衍生物的合成，適于合成本發明的化合物。
反應路線3d
在反應路線3d中，使用例如苯基格氏試劑或苯基鋰引入苯基以提供xiii。可以在標準條件下酯化羧酸官能團以生成xix，可以使用酸催化劑如乙酸、鹽酸或三氟乙酸在適當溶劑如氯仿或甲苯中完成脫水，生成xx。環己烯雙鍵的還原可以在典型地使用鈀作為催化劑的催化氫化條件下來完成，提供xxi。該還原生成異構體的混合物(生成順式和反式-二取代的環己烷)；如果需要，這些可以使用堿如醇鹽或DBU在甲醇或甲苯中分離或平衡，以主要生成熱力學更穩定的反式-二取代的異構體。如上所述進行xxi的酰化以生成官能化的苯乙酮xxii。
通過類似順序可以合成對于W2含有雜環的本發明的化合物，條件是雜環對于酰化反應條件穩定。例如，可以以這種方式合成其中W2是酰化的哌啶的化合物，其使用官能化的苯乙酮衍生物，如通過反應路線3e所示順序生產的那些。在該順序中，4-羥基-4-苯基哌啶(xxiii)在氮上使用本領域技術人員已知的試劑和條件(例如在溫和堿如三乙胺或吡啶的存在下用草酸二乙酯或乙基草酰氯酰化)被烷基化，磺酰化或酰化以生成xxiv。N-官能化(例如N-酰化)的化合物然后如反應路線3d所示脫水和催化還原以生成4-苯基哌啶草酸酰胺(xxv)。該化合物然后如上所述酰化，生成相應的官能化苯乙酮衍生物(xxvi)。
反應路線3e 類似地，苯基哌嗪xxvii可以在氮上被烷基化，磺酰化或酰化，以提供N-官能化的化合物xxviii，其又可以如上所述酰化生成官能化的苯乙酮衍生物xxix。
反應路線3f 本發明的具有作為W2的雜環的其它化合物可以通過下面的方法制備將雜環基團連接到苯乙酮上，然后在α碳上鹵化苯乙酮以生成通式i的化合物，如反應路線3g所示。在該順序中，在上述典型的弗雷德-克萊福特條件下，通過酰化氟代苯合成4-氟代苯乙酮化合物(xxiv)。4-氟代基團然后進行芳族親核置換反應；在該反應路線中，通過與親核哌啶在極性質子惰性溶劑如DMSO或DMF中反應，它被取代的哌啶基團置換。攜帶R3和R4的碳原子的官能化生成xxvi可以使用例如溴(Br2)或氯(Cl2)在極性溶劑如DME或乙酸乙酯中在酸催化劑如乙酸或氫溴酸的存在下完成。
反應路線3g 適于制備本發明的其中L1是鍵的化合物的某些官能化苯乙酮衍生物可以由取代的苯乙酮制備，特別是當R3和R4是相同基團時，如反應路線3h所示。例如，用-L2-W2取代的苯乙酮(xxxiii)可以用烷基化劑如甲基碘，乙基溴，或其它類似烷基化劑在堿如二異丙基酰胺鋰、六甲基二硅氮化鋰或氫化鈉的存在下和使用溶劑如DMF，DME，THF或甲苯烷基化。這生成其中R3和R4相同的苯乙酮。該苯乙酮然后可以如上反應路線3g所述鹵化以生成通式I的官能化苯乙酮，其與取代的嘧啶如反應路線1所示縮合，制備本發明的化合物。
反應路線3h
如反應路線3g所示，使用類似步驟可以合成含有W1雜環的本發明化合物的制備。例如，取代的或未取代的雜環xxxvi如呋喃，噻吩，吡咯，噁唑，噻唑，咪唑或噻二唑可以用例如丁基鋰或二異丙基酰胺鋰在適當溶劑如THF，DME或二噁烷中鋰化。金屬化的物質可以與例如酰胺(如二甲基酰胺或N-甲基-N-甲氧基酰胺)反應，生成酰化的雜環xxxvii，其又可以如上所述鹵化以生成通式xxxviii的官能化苯乙酮衍生物。以類似方式，取代的或未取代的苯并呋喃，苯并噻吩，苯并吡咯，苯并噁唑，苯并噻唑，苯并咪唑或苯并噻二唑(xxxix)可以被鋰化和酰化以提供xl，其又可以如上所述鹵化。本領域技術人員應當理解其它雜環也可以用于這些轉化。
反應路線3i 如反應路線4所示，具有取代的苯環如W1和取代的環己烷環如L2-W2的通式iv的化合物(例如xlii)可以由這些取代的苯乙酮衍生物如ix制備。
反應路線4 化合物如xlii可以用于制備本發明的其它化合物，例如通過水解乙基酯以提供羧酸化合物xliii。(反應路線5)酯水解可以在溶解xlii和至少部分與水混溶的大多數溶劑中、通過用堿如例如氫氧化鈉或氫氧化鉀的水溶液處理xlii的溶液來完成。羧酸又可以通過本領域技術人員公知的方法轉化為其它基團如酰胺。例如，羧酸可以通過與各種偶聯劑(包括羥基苯并三唑(HOBt)和N-羥基琥珀酰亞胺(HOSu))縮合而活化，例如使用二環己基碳二亞胺(DCC)或類似的碳二亞胺試劑或各種各樣的試劑，如對于形成肽鍵開發的那些。這些反應的條件是本領域普通技術人員所公知的。活化的中間體，例如HOBt或HOSu的酯，然后可以與各種各樣的親核試劑例如胺，醇和硫醇縮合。反應路線5顯示通式xlii的化合物通過該順序轉化為酰胺(xliv)，其使用氨作為親核試劑。
反應路線5
通過各種方法可以完成酰胺xliv脫水為腈(xlv)。參見以上反應路線5。五氧化二磷是該反應最常見的脫水劑，但是許多其它的脫水劑是本領域技術人員所已知的。腈又可以通過本領域普通技術人員公知的方法轉化為其它基團如四唑(xlvi)。例如，腈與疊氮化物如疊氮化鈉、疊氮化鋰或疊氮酸在溶劑如DMF或水中反應以完成該轉化。
反應路線6a和6b舉例說明了制備通式I的化合物的一種方法，在通式I中，W1是具有除了L2-W2組分以外的另外取代基的亞苯基部分。如反應路線6a所示，中間體溴苯乙酮xlvii可以在標準條件下(硝酸，硫酸，在溶劑如氯仿、二氯甲烷、乙酸中或純的)硝化，以提供xlviii。硝基的還原是通過使用催化氫化或SnCl2(通常在醇溶劑中)脫溴來完成的，以提供xlix。氨基的氯化物置換是使用氯化銅在適當的亞硝酸鹽(酯)(例如亞硝酸叔丁酯，亞硝酸鈉)和溶劑的存在下完成，以提供中間體如l。溴可以使用標準溴化條件(例如HBr/HOAc，Br2/N-溴代琥珀酰亞胺或CuBr2)而再次引入，提供li。備選地，xlvii可以使用本領域技術人員已知的標準試劑(例如磺酰氯，Cl2或N-氯代琥珀酰亞胺)和條件直接氯化提供li。
反應路線6a 反應路線6b舉例說明了中間體如xlix至其它取代的化合物的制備。例如，通式lii(其中X10是F)的化合物可以由xlix使用氟化劑如四氟硼酸亞硝鎓、DAST、HF或CsF(通常在溶劑如甲苯，苯，二氯甲烷或二氯乙烷中)來制備。lii的隨后溴化生成liii可以按照已知方法完成。li或liii向通式liv的目標化合物的轉化通過與適當取代的嘧啶的縮合來完成(參見實施例1)。
反應路線6b 如反應路線7中所示，本發明的化合物，其中X是N，Y是CH，Z是O和W1是取代或未取代的芳基或雜芳基，可以由適當取代的嘧啶lv(其中A是鹵素，例如Br，I或三氟甲基磺酸鹽或本領域技術人員已知的其它適當取代基)和取代的或未取代的芳基或雜芳基物質lvi(其中M為B(OR2)，Sn(R3)或本領域技術人員已知的其它適當的金屬)通過例如鈀催化的交叉偶聯反應來制備。本領域技術人員還將理解A和M可以交換。
反應路線7 反應路線8舉例說明了制備通式結構lv的中間體的方法。嘧啶lviii與lvii在適當溶劑如乙酸中的縮合提供lix。例如分別使用磷酰氯或磷酰溴，羥基部分向離去基團(例如氯或溴)轉化，接著用適當取代的胺置換離去基團以提供Iv。
反應路線8 組合物在另一方面，本發明提供用于調節人和動物中的DGAT活性的藥物組合物，其典型地含有通式I的化合物和藥用載體或稀釋劑。
用于給藥本發明化合物的藥物組合物可以便利地以單位劑量形式存在并且可以通過藥學領域公知的任何方法制備。所有方法包括將活性成分與構成一種或多種輔助成分的載體結合的步驟。通常，通過均勻地和緊密地將活性成分與液體載體或細碎的固體載體或兩者結合，然后如果需要將產品成型為所期望的制劑來制備藥物組合物。在藥物組合物中，包括足以對疾病過程或病癥產生期望作用的量的活性目標化合物。
含有活性成分的藥物組合物可以是適于口服使用的形式，例如作為片劑，錠劑，糖錠，水性或油性混懸劑，可分散性粉末或顆粒，乳劑，硬或軟膠囊，或糖漿或酏劑。意欲用于口服使用的組合物可以按照本領域關于制備藥物組合物的任何已知方法制備。這些組合物可以含有一種或多種選自甜味劑、調味劑、著色劑和防腐劑的試劑以便提供藥學上精致的和可口的制劑。片劑含有與適于制備片劑的其它非毒性藥用賦形劑混和的活性成分。這些賦形劑可以例如是惰性稀釋劑，如碳酸鈣，碳酸鈉，乳糖，磷酸鈣或磷酸鈉；造粒劑和崩解劑，例如玉米淀粉，或藻酸；粘合劑，例如淀粉，明膠或阿拉伯膠，和潤滑劑，例如硬脂酸鎂，硬脂酸或滑石。片劑可以是未包衣的或者它們可以通過已知技術包衣，以延緩在胃腸道內的崩解和吸收，由此提供長時間的持續作用。例如，可以使用延時材料如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。它們還可以通過在美國專利號4,256,108；4,166,452；和4,265,874中描述的技術包衣，以形成用于控釋的滲透性治療片劑。
用于口服使用的制劑還可以作為硬明膠膠囊提供，其中活性成分與惰性固體稀釋劑例如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土混和，或作為軟明膠膠囊提供，其中活性成分與水或油介質例如花生油、液體石蠟或橄欖油混和。
水性混懸劑含有與適于制備水性混懸劑的賦形劑混和的活性物質。這些賦形劑是混懸劑，例如羧甲基纖維素鈉，甲基纖維素，羥丙基甲基纖維素，藻酸鈉，聚乙烯-吡咯烷酮，黃芪樹膠和阿拉伯樹膠；分散劑或濕潤劑可以是天然存在的磷脂，例如卵磷脂，或烯化氧與脂肪酸的縮合產物，例如聚氧乙烯硬酯酸酯，或環氧乙烷與長鏈脂族醇的縮合產物，例如十七烷基乙烯氧基鯨蠟醇，或環氧乙烷與衍生于脂肪酸和己糖醇的偏酯的縮合產物如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯，或環氧乙烷與衍生于脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的縮合產物，例如聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯。水性混懸劑還可以含有一種或多種防腐劑，例如苯甲酸乙酯，苯甲酸正丙酯，對羥基苯甲酸酯，一種或多種著色劑，一種或多種調味劑，和一種或多種甜味劑，如蔗糖或糖精。
油性混懸劑可以通過將活性成分懸浮在植物油(例如花生油，橄欖油，芝麻油或可可油)中或礦物油(如液體石蠟)中來配制。油性混懸劑可以含有增稠劑，例如蜂蠟，硬石蠟或鯨蠟醇。可以加入甜味劑如以上列舉的那些和調味劑以提供可口的口服制劑。這些組合物可以通過加入抗氧化劑如抗壞血酸保存。
適于通過加入水來制備水性混懸劑的可分散性粉末和顆粒提供活性成分，其與分散劑或潤濕劑、混懸劑和一種或多種防腐劑混和。適當的分散劑或潤濕劑和混懸劑例舉為以上已經提及的那些。還可以存在另外的賦形劑，例如甜味劑，調味劑和著色劑。
本發明的藥物組合物還可以是水包油型乳劑的形式。油相可以是植物油，例如橄欖油或花生油，或礦物油，例如液體石蠟或這些的混合物。適當的乳化劑可以是天然存在的樹膠，例如阿拉伯樹膠或黃芪樹膠，天然存在的磷脂，例如大豆油，卵磷脂和衍生于脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯，例如失水山梨糖醇單月桂酸酯，和所述偏酯與環氧乙烷的縮合產物，例如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯。乳劑還可以含有甜味劑和調味劑。
糖漿和酏劑可以使用甜味劑例如甘油、丙二醇、山梨醇或蔗糖來配制。這些制劑還可以含有緩和劑，防腐劑，調味劑和著色劑。
藥物組合物可以是無菌注射水性或油性混懸劑。該混懸劑可以按照現有技術使用以上已經提及的那些適當的分散劑或潤濕劑和混懸劑來配制。無菌注射制劑還可以是在非毒性腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌注射液或混懸劑，例如作為1，3-丁二醇中的溶液。在可接受的載體和溶劑中可以使用的有水，林格(Ringer′s溶)液和等滲氯化鈉溶液。另外，無菌不揮發油被常規用作溶劑或混懸介質。為此，可以使用任何溫和的不揮發油，包括合成的單酸甘油一酯或甘油二酯。另外，脂肪酸如油酸可以用于制備注射劑。
本發明的化合物還可以以栓劑形式給藥，用于藥物的直腸給藥。這些組合物可以通過將藥物與適當的非刺激性賦形劑混和來制備，該賦形劑在常溫下是固體的但是在直腸溫度下是液體，因此在直腸中溶解以釋放藥物。這些材料有可可油和聚乙二醇。
對于局部應用，使用含有本發明的化合物的貼片，乳膏，軟膏劑，膠凍劑，溶液或混懸劑等。如此處所用，局部給藥還意欲包括使用漱口水和漱口劑。
本發明的藥物組合物和方法可以另外還含有在此指出的、通常用于治療上述病理性病癥的其它治療活性化合物。
使用方法在再一方面，本發明提供使用本發明的化合物或組合物治療或預防與DGAT有關的疾病或病癥的方法。與脂質代謝和細胞增殖有關的疾病和病癥及其并發癥可以用本發明的化合物和組合物來治療。在一組實施方案中，可以用DGAT功能的抑制劑治療的人或其它物種的疾病和病癥(包括慢性疾病)包括但不限于代謝紊亂，如肥胖癥，糖尿病，神經性厭食癥，貪食癥，惡病質，X綜合征，胰島素抗性，低血糖，高血糖，高尿酸血癥，高胰島素血癥，血膽固醇過多，血脂過多，血脂異常，混合性血脂異常，血甘油三酯過多和非酒精性脂肪肝病；心血管疾病，如動脈粥樣硬化，動脈硬化，急性心力衰竭，充血性心力衰竭，冠狀動脈病，心肌病，心肌梗死，心絞痛，高血壓，低血壓，中風，局部缺血，缺血性再灌注損傷，動脈瘤，再狹窄和脈管狹窄；腫瘤性疾病，如實體瘤，皮膚癌，黑素瘤，淋巴瘤和內皮癌，例如，乳腺癌，肺癌，結直腸癌，胃癌，胃腸道的其它癌(例如，食管癌和胰腺癌)，前列腺癌，腎癌，肝癌，膀胱癌，子宮頸癌，子宮癌，睪丸癌和卵巢癌；和對DGAT功能的調節敏感或響應的其它疾病和病癥。
本發明的方法典型地涉及向需要治療性治療的受治療者給藥有效量的通式(I)的化合物。該給藥的劑量，頻率和時間選擇將大部分取決于所選熱擇的治療劑，所治療的病癥的性質，受治療者的狀況包括年齡、體重和存在其它病癥或紊亂，給藥的制劑和主治醫師的判斷。優選地，本發明的組合物和化合物及其藥用鹽是通過口服、腸胃外或局部途徑給藥。通常，將化合物以每日約2mg至約2,000mg的劑量給藥，盡管根據如上所述的疾病靶、患者、給藥途徑的需要可以發生變化。優選的劑量是每kg體重每日口服給藥約0.05mg/kg至約20mg/kg，更優選約0.05mg/kg至約2mg/kg，最優選約0.05mg/kg至約0.2mg/kg。對于局部給藥的所用劑量當然將取決于所治療的區域的大小。
與另外的活性劑的聯合治療本發明另外提供聯合一種或多種另外的活性劑使用本發明的化合物或組合物方法，這取決于期望的目標治療(參見例如，Turner，N.等Prog.Drug Res.(1998)5133-94；Haffner，S.Diabetes Care(1998)21160-178；和DeFronzo，R.等(eds.)，Diabetes Reviews(1997)Vol.5No.4)。許多研究已經調查了與口服劑的聯合療法的益處(參見例如，Mahler，R.，J.Clin.Endocrinol.Metab.(1999)841165-71；United Kingdom Prospective DiabetesStudy GroupUKPDS 28，Diabetes Care(1998)2187-92；Bardin，C.W.，(ed.)，CURRENT THERAPY IN ENDOCRINOLOGY AND METABOLISM，6thEdition(Mosby-Year Book，Inc.，St.Louis，MO 1997)；Chiasson，J.等，Ann.Intern.Med.(1994)121928-935；Coniff，R.等，Clin.Ther.(1997)1916-26；Coniff，R.等，Am.J.Med.(1995)98443-451；和Iwamoto，Y.等，Diabet.Med.(1996)13365-370；Kwiterovich，P.Am.J.Cardiol(1998)82(12A)3U-17U)。
特別是，以上提供的研究表明糖尿病和血脂過多調節可以另外在許多情形中通過向治療方案加入第二種藥劑來改善。聯合療法包括給藥單一藥物劑型的含有具有通式I通式結構的化合物和一種或多種另外的活性劑，以及以它們自己分開的藥物劑型給藥通式I的化合物和各種活性劑。例如通式I的化合物和HMG-CoA還原酶抑制劑可以以單個口服劑量組合物如片劑或膠囊一起給藥于人，或者每種藥劑可以以分開的口服劑型給藥。當使用分開的劑量制劑時，通式I的化合物和一種或多種另外的活性劑可以在基本上相同時間(即同時)，或在分開交錯的時間(即順序地)給藥。聯合療法應當理解為包括所有這些療法。
調節(防止癥狀或并發癥的發作，所述癥狀或并發癥涉及)動脈粥樣硬化的聯合療法的實例包括聯合一種或多種下列活性劑給藥通式I的化合物抗高血脂藥，血漿HDL-升高劑，抗高膽固醇血癥藥，如膽固醇生物合成抑制劑，例如羥甲基戊二酰(HMG)CoA還原酶抑制劑(也稱為statins，如洛伐他汀，辛伐他汀，普伐他汀，氟伐他汀，和阿托伐他汀)，HMG-CoA合成酶抑制劑，鯊烯環氧酶抑制劑，或鯊烯合成酶抑制劑(也稱為鯊烯合酶抑制劑)；酰基-輔酶A膽固醇酰基轉移酶(ACAT)抑制劑，如亞油甲芐胺；普羅布考；煙酸及其鹽和煙酰胺；膽固醇吸收抑制劑，如β-谷甾醇；膽汁酸多價螯合劑陰離子交換樹脂，如考來烯胺，考來替泊或交聯葡聚糖的二烷基氨基烷基衍生物；LDL(低密度脂蛋白)受體誘導劑，fibrates，如氯貝丁酯，苯扎貝特，非諾貝特，和吉非貝齊；維生素B6(也稱為吡哆醇)及其藥用鹽，如HCl鹽；維生素B12(也稱為氰鈷胺)；維生素B3(也稱為煙酸和煙酰胺，上述)；抗氧化劑維生素，如維生素C和E和β胡蘿卜素；β-阻斷劑；血管緊張素II拮抗劑；血管緊張素轉化酶抑制劑；血小板聚集抑制劑，如血纖蛋白原受體拮抗劑(即糖蛋白IIb/IIIa血纖蛋白原受體拮抗劑)和阿司匹林。如上所述，通式I的化合物可以與多于一種另外的活性劑聯合給藥，例如通式I的化合物與HMG-CoA還原酶抑制劑(例如洛伐他汀，辛伐他汀和普伐他汀)和阿司匹林的聯合給藥，或通式I的化合物與HMG-CoA還原酶抑制劑和β阻斷劑的聯合給藥。
另外的聯合療法的實例可以在治療肥胖癥或肥胖癥相關的紊亂中發現，其中通式I的化合物可以聯合例如以下各項有效使用苯丙醇胺，芬特明，二乙胺苯丙酮，馬吲哚；芬氟拉明，右芬氟拉明，phentiramine，β3腎上腺素能受體激動劑；西布曲明，腸胃脂肪酶抑制劑(如奧利司他)，和來普汀。其它用于治療肥胖癥或肥胖癥相關病癥的藥劑可以與通式I的化合物聯合使用，包括例如神經肽Y，enterostatin，縮膽囊肽，鈴蟾肽，amylin，組胺H3受體，多巴胺D2受體，黑素細胞刺激激素，促腎上腺皮質激素釋放因子，galanin和γ氨基丁酸(GABA)。
另外的聯合治療的實例可以在調節糖尿病(或治療糖尿病及其相關癥狀，并發癥，和紊亂)中發現，其中通式I的化合物可以聯合例如以下各項有效使用磺脲類(如氯磺丙脲，甲苯磺丁脲，醋磺己脲，妥拉磺脲，格列胺脲，格列齊特，格列本脲，格列美脲，和格列吡嗪)，雙胍(如二甲雙胍)，噻唑烷二酮類(如環格列酮，吡格列酮，曲格列酮，和羅西格列酮)；脫氫表雄酮(也稱為DHEA或其偶聯的硫酸酯，DHEA-SO4)；抗糖皮質激素；TNFα抑制劑；α-葡糖苷酶抑制劑(如阿卡波糖，米格列醇和伏格列波糖)，普蘭林肽(人激素amylin的合成類似物)，其它胰島素促分泌素(如瑞格列奈，格列喹酮，和那格列奈)，胰島素以及以上關于治療動脈粥樣硬化討論的活性劑。
還有另外的聯合治療的實例可以在調節血脂過多(治療血脂過多及其相關并發癥)中發現，其中通式I的化合物可以聯合例如以下各項有效使用statins(如氟伐他汀，洛伐他汀，普伐他汀或辛伐他汀)，膽汁酸結合樹脂(如考來替泊或考來烯胺)，煙酸，普羅布考，β胡蘿卜素，維生素E，或維生素C。
按照本發明，治療有效量的通式I的化合物可以用于制備藥物組合物，該藥物組合物用于治療糖尿病，治療血脂過多，治療高尿酸血癥，治療肥胖癥，降低甘油三酯水平，降低膽固醇水平，升高高密度脂蛋白的血漿水平，和用于治療、預防動脈粥樣硬化或降低發展動脈粥樣硬化的風險。
另外的聯合治療的實例可以在調節皮膚病中發現，其中通式I的化合物可以聯合例如以下各項有效使用痤瘡治療劑(例如異維A酸，強力霉素，四環素，水楊酸鹽)和脂溢性皮炎治療劑(抗真菌劑如氯咪巴唑，酮康唑)。此外，通式I化合物可以有效用于增強以貼片、洗劑、凝膠劑、乳膏等形式局部給藥的藥物的透皮傳遞。
還有另外的聯合治療的實例可以在治療非酒精性脂肪肝病(NAFLD)中發現，其中通式I的化合物可以聯合例如以下各項有效使用護肝劑如熊去氧膽酸和甜菜堿。
另外，有效量的通式I化合物和治療有效量的一種或多種選自下列各項的活性劑可以一起用于制備用于上述治療的藥物組合物抗高血脂藥，血漿HDL-升高劑，抗高膽固醇血癥藥，如膽固醇生物合成抑制劑，例如HMG-CoA還原酶抑制劑，HMG-CoA合成酶抑制劑，鯊烯環氧酶抑制劑，或鯊烯合成酶抑制劑(也稱為鯊烯合酶抑制劑)，酰基-輔酶A膽固醇酰基轉移酶抑制劑，普羅布考，煙酸及其鹽，煙酰胺，膽固醇吸收抑制劑，膽汁酸多價螯合劑陰離子交換樹脂，低密度脂蛋白受體誘導劑，氯貝丁酯，非諾貝特，和吉非貝齊，維生素B6及其藥用鹽，維生素B12，抗氧化劑維生素，β-阻斷劑，血管緊張素II拮抗劑，血管緊張素轉化酶抑制劑，血小板聚集抑制劑，血纖蛋白原受體拮抗劑，阿司匹林，phentiramine，β3腎上腺素能受體激動劑，磺脲類，雙胍，α-葡糖苷酶抑制劑，其它胰島素促分泌素，胰島素和護肝劑。
實施例
1H-NMR光譜通過Varian Gemini 400MHz，Jeol Alpha 300MHz，BrukerDPX 300MHz，Varian Mercury 400MHz或Bruker Avance 500MHz NMR分光光度計來記錄。將有意義的峰做成表并典型地包括質子數，多重性(s，單峰；d，雙峰；t，三重峰；q，四重峰；m，多重峰；brs，寬單峰)和w偶合常數(Hertz)。IR光譜記錄在Perkin Elmer 1600FT-IR或Perkin ElmerSpectrum One FT-IR上。質譜結果報道為質量對電荷的比率，之后是每個離子的相對豐度(在括號中)。在以下合成實施例中的原材料是可獲自商業來源如Aldrich Chemical Co.，Milwaukee，Wisconsin，USA或文獻方法。以下實施例所用的縮略語具有它們在化學文獻中被接受的含義。例如，THF(四氫呋喃)，Et2O(乙醚)，MeOH(甲醇)，LDA(二異丙基酰胺鋰)，MeCN(乙腈)，DMAP(4-二甲氨基吡啶)，WSC(1-乙基-3-(3’-二甲氨基丙基)碳二亞胺)，HOBt(1-羥基苯并三唑)，DBU(1，8-二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯)，DME(1，2-二甲氧基乙烷)，DMF(N，N-二甲基甲酰胺)，DMSO(二甲亞砜)，AcOH(乙酸)和AcOEt(乙酸乙酯)。此處使用其它常規縮略語例如按照接受的實踐，甲基經常作為未標記的末端“鍵”提供。
實施例1本實施例舉例說明了稱為Ex.1的化合物的制備。
向4，5-二氨基-6-羥基嘧啶(1.0g，7.93mmol)和4-溴苯甲酰甲基溴(2.2g，7.93mmol)在EtOH(20mL)中的懸浮液加入NaHCO3(666mg，7.93mmol)，將混合物在80℃下攪拌1.5小時。在冷卻后，濃縮反應混合物，用CHCl3(40mL)稀釋剩余物。在過濾不溶性物質后，濃縮濾液。用甲苯研磨剩余物以提供期望化合物Ex.1(840mg)，為淡黃色晶體，m.p.＞200℃。IR(cm-1)3291，3145，1634，1586。MS(ESI+)305，307(100)。1HNMR(DMSO-d6，400MHz)5.44(s，2H)，7.10(br s，2H)，7.69(d，2H，J＝8.6Hz)，7.93(s，1H)，8.03(d，2H，J＝8.6Hz)。
實施例1-2至1-37以與實施例1相同的方式獲得在表1中顯示的化合物。
實施例2本實施例舉例說明了稱為Ex.2的化合物的制備。
a) 在0℃下，向膦酰乙酸三乙酯(2.6mL，12.91mmol)在DMF(5.5mL)中的溶液中，逐份加入氫化鈉(在油中60％，517mg，12.91mmol)，在室溫下攪拌反應混合物30分鐘。加入DMF(2.0mL)中的4-苯基環己酮溶液。在攪拌0.5小時后，將混合物傾倒入5％的KHSO4(10mL)水溶液中并用二乙醚(10mL)萃取。相繼用水(5mL)和鹽水(5mL)洗滌有機層，通過MgSO4干燥并濃縮。通過柱色譜法(己烷/AcOEt＝7/1)純化剩余物，提供化合物2(2.0g)，為無色油。
b) 向攪拌的2(500mg，2.05mmol)在EtOH(5mL)中的溶液中，加入10％Pd/C(50mg)。在大氣壓力的氫氣下室溫下攪拌混合物1小時。通過過濾去除催化劑，真空濃縮濾液以提供粗制化合物3(491mg)，為無色油，其用于下一反應而不進一步純化。
c) 在0℃下，向化合物3(271mg，1.10mmol)在CH2Cl2(1.4mL)中的溶液中，逐份加入無水AlCl3(440mg，3.30mmol)，然后滴加2-溴異丁酰溴(0.14mL，1.10mmol)。在0℃下攪拌1小時后，將混合物傾倒入冰水中并用CHCl3(5mL)萃取。相繼用飽和NaHCO3(5mL)和鹽水(5mL)洗滌合并的有機層，通過MgSO4干燥并濃縮。通過柱色譜法(己烷/AcOEt＝7/1)純化剩余物以提供化合物4(402mg)，為無色油。
d) 將4，5-二氨基-6-羥基嘧啶(63.1mg，0.50mmol)與1N HCl水溶液(0.50mL，0.50mmol)，水(2mL)和EtOH(2mL)和化合物4(395mg，1.00mmol)在乙醇EtOH(2mL)中混和。將反應混合物回流(105℃)12小時。將反應混合物濃縮至體積量的一半。用2N NaOH水溶液將剩余物調節至pH 9-10。用AcOEt(5mL)萃取產生的混合物。用10％檸檬酸水溶液將水層調節至pH 3-4，用AcOEt(5mL)萃取。用水(5mL)和鹽水(5mL)洗滌有機層，用MgSO4干燥。蒸發溶劑得到粗制Ex.2(54mg，順式和反式異構體的混合物)。用水(5mL)和鹽水(5mL)洗滌第一有機層，用MgSO4干燥。蒸發溶劑產生粗制化合物5(126mg，順式和反式異構體的混合物)，其用于下一反應而不進一步純化。在40℃攪拌4小時后，向粗制化合物5在EtOH(1.2mL)，THF(1.8mL)和水(1.2mL)中的溶液中，加入2N NaOH水溶液(0.45mL)。將反應混合物濃縮至一半體積，加入水(2mL)和用AcOEt(2mL)洗滌。用10％檸檬酸水溶液將水層調整至pH 3-4，用AcOEt(5mL)萃取。有機層用水(5mL)和鹽水(5mL)洗滌，用MgSO4干燥。蒸發溶劑得到白色固體(113mg)。白色固體(113mg)和粗制Ex.2(54mg)合并，并從EtOH中重結晶以提供Ex.2(92mg，反式異構體)，為白色晶體，m.p.＞270℃。IR(cm-1)3320，2929，1702，1601。MS(ESI+)395(100)。1H NMR(DMSO-d6，300MHz)1.10-1.16(m，2H)，1.45-1.84(m，13H)，2.15(d，2H，J＝6.0Hz)，2.54(m，1H)，6.97(br s，2H)，7.30(d，2H，J＝8.4Hz)，7.64(d，2H，J＝8.4Hz)，7.94(s，1H)，11.95(br s，1H)。
實施例2-2 向Ex.2(80mg，0.20mmol)在DMF(2.4mL)中的溶液中，加入HOBt-H2O(34.2mg，0.22mmol)，EDC-HCl(42.8mg，0.22mmol)和28％氨水溶液(0.04mL，0.81mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌70小時。將混合物傾倒入飽和NaHCO3水溶液中，并用AcOEt(3mL)萃取。相繼用水(3mL ×2)，飽和NaHCO3(3mL)和鹽水(3mL)洗滌有機層，通過MgSO4干燥。蒸發溶劑產生白色固體(69.5mg)。用EtOH淤化固體，產生化合物Ex.2-2(48.2mg)，為白色晶體，m.p.224-226℃。IR(cm-1)3348，2923，1672，1604。MS(ESI+)394(100)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)1.03-1.22(m，8H)，1.4-1.49(m，2H)，1.70-1.82(m，5H)，2.14(d，2H，J＝6.9Hz)，2.54(m，1H)，4.11(br s，1H)，5.27(br s，1H)，6.23(br s，2H)，7.25(d，2H，J＝8.0Hz)，7.36(d，2H，J＝8.0Hz)，7.61(s，1H)，11.75(br s，1H)。
實施例2-3 在0℃，向Ex.2(120mg，0.30mmol)在THF(3.6mL)和MeOH(3.6mL)中的溶液中，逐份加入NaBH4(194mg，4.86mmol)，反應混合物在0℃下攪拌20小時。加入2N NaOH水溶液(0.46mL，0.91mmol)并在60℃下攪拌30分鐘。將反應混合物濃縮至一半體積。將剩余物加入至水(3mL)中并用AcOEt(3mL)洗滌。用10％檸檬酸水溶液將水層調整至pH 3-4，用AcOEt(5mL)萃取。用水(5mL)和鹽水(5mL)洗滌有機層，通過MgSO4干燥。蒸發溶劑產生白色固體(150mg)。從EtOH中重結晶固體以提供Ex.2-3(97mg)，為白色晶體，m.p.274-279℃(已分解)。IR(cm-1)3414，2927，1650，1595。MS(ESI+)397(100)。1H NMR(DMSO-d6，300MHz)1.02-1.17(m，2H)，1.40-1.53(m，2H)，1.61(s，6H)，1.66-1.87(m，5H)，1.98(d，2H，J＝7.1Hz)，2.53(m，1H)，6.67(br s，1H)，6.89(br s，2H)，7.21(br s，1H)，7.30(d，2H，J＝8.1Hz)，7.63(d，2H，J＝8.1Hz)，7.94(s，1H)。
實施例2-4a) 在Ar下，向攪拌的氯化甲氧基甲基三苯基鏻(3.14g，9.2mmol)在THF(8mL)中混懸液中，加入叔丁醇鉀(516mg，4.6mmol)。在1小時后，將4-苯基環己酮(1)(400mg，2.3mmol)加入至該溶液中。在室溫下攪拌混合物1小時，在70℃加熱過夜。在冷卻后，將反應混合物傾倒入飽和NaHCO3(40mL)中并用乙醚(50mL)萃取。用水(40mL)和鹽水(40mL)洗滌有機萃取液并用Na2SO4干燥，去除溶劑以提供粗制化合物7(2.19g)，其用于下一步驟而不進一步純化。
b) 將粗制化合物7(2.19g)與80％AcOH水溶液(25mL)混和，在攪拌下70℃加熱3.5小時。減壓下濃縮反應混合物。通過柱色譜法(己烷/AcOEt＝20/1)純化剩余物，提供化合物8(395mg)，為無色油。
c) 向攪拌的化合物8(383mg，2.03mmol)在甲苯(20mL)中的溶液中，加入DBU(365μL，2.44mmol)并在80℃下在Ar下加熱混合物5小時。然后向反應混合物中，加入(三苯基亞正膦基)乙酸甲酯(1.2g，3.05mmol)并在100℃攪拌混合物過夜。在冷卻后，用5％KHSO4(10mL)，飽和NaHCO3(10mL)和鹽水(10mL)洗滌反應混合物，通過Na2SO4干燥有機層并濃縮。通過柱色譜法(己烷/AcOEt＝20/1)純化剩余物，提供化合物9(474mg)，為無色油。
d) 將10％木炭載鈀(50mg)在化合物9(474mg，1.94mmol)在EtOH(15mL)中的溶液中的混懸液在大氣壓力的氫氣氣氛下室溫氫化過夜。過濾反應混合物，將濾液濃縮以提供化合物10(436mg)，為無色油，其純度足夠用于下一步驟而不進一步純化。
e)
將實施例2的方法以436mg(1.94mmol)的規模應用于化合物10，產生Ex.2-4(231mg)，為無色晶體，m.p.＞250℃。IR(cm-1)3310，2922，1702，1611。MS(ESI+)409(100)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)1.04-1.09(m，2H)，1.43(m，1H)，1.43-1.50(m，4H)，1.60(s，6H)，1.83(br d，4H，J＝11.4Hz)，2.25(t，2H，d＝7.7Hz)，2.50(m，1H)，6.88(br s，2H)，7.29(d，2H，J＝8.3Hz)，7.63(d，2H，J＝8.3Hz)，7.94(s，1H)，11.84(br s，1H)。
實施例2-5 將實施例2-2的方法以50mg(0.12mmol)的規模應用于Ex.2-4，產生Ex.2-5(41mg)，為無色晶體，m.p.244-246℃。IR(cm-1)3357，2920，1696，1602。MS(ESI+)408(100)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)1.04-1.08(m，2H)，1.29(m，1H)，1.40-1.49(m，4H)，1.60(s，6H)，1.83(br d，4H，J＝10.2Hz)，2.09(t，2H，d＝7.4Hz)，2.50(m，1H)，6.60(br s，1H)，6.88(brs，2H)，7.20(br s，1H)，7.29(d，2H，J＝8.3Hz)，7.63(d，2H，J＝8.3Hz)，7.94(s，1H)。
實施例2-6 將實施例2-3的方法以38mg(0.09mmol)的規模應用于Ex.2-4，產生Ex.2-6(19mg)，為無色晶體，m.p.＞250℃。IR(cm-1)3348，2922，1638，1595。MS(ESI+)411(100)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)1.04-1.09(m，2H)，1.08(s，3H)，1.22(s，3H)，1.32(m，1H)，1.43-1.48(m，4H)，1.83(br d，4H，J＝10.7Hz)，2.24(t，2H，d＝7.7Hz)，2.50(m，1H)，4.11(s，1H)，5.26(s，1H)，6.22(br s，2H)，7.23(d，2H，J＝8.1Hz)，7.35(d，2H，J＝8.1Hz)，7.62(s，1H)，11.73(br s，1H)。
實施例2-7a) 將化合物11(3mL，18.82mmol)和30mL乙醇和NaOH溶液在室溫下一起攪拌3小時。然后真空去除溶劑，加入12mL 2M HCl溶液。用25mLAcOEt萃取水層，用鹽水洗滌萃取液，通過MgSO4干燥，真空濃縮以提供粗制化合物12，其用于下一步驟而不進一步純化。
b) 在0℃下，向攪拌的粗制化合物12(1.594g，ca.11.21mmol)在15mLTHF中的溶液中，加入1.0M PhMgBr(24.7mL，24.7mmol)并攪拌30分鐘。在加入10mL水后，用1M HCl溶液將混合物酸化。用30mLAcOEt萃取水層，用鹽水洗滌萃取液，通過MgSO4干燥，真空濃縮以提供粗制化合物13，其用于下一步驟而不進一步純化。
c) 向攪拌的粗制化合物13和K2CO3(2.01g，14.5mmol)在10mL DMF中的懸浮液中，加入MeI(0.98mL，15.7mmol)并攪拌3小時。在加入15mL水后，用25mL AcOEt萃取水層，用水和鹽水洗滌萃取液，通過MgSO4干燥，真空濃縮以提供粗制化合物14，其用于下一步驟而不進一步純化。
d) 將粗制化合物14，15mL CHCl3，三氟乙酸(3.02mL，39.4mmol)和三乙基硅烷(3.02mL，22.5mmol)在65℃下一起攪拌5.5小時。在加入25mL水后，分離有機層，用鹽水洗滌，通過MgSO4干燥，真空濃縮。通過硅膠柱色譜法(己烷/AcOEt＝10/1)純化剩余物，提供化合物15(1.5g)，為淡黃色油。
e) 向攪拌的化合物15(1.5g，6.94mmol)在15mL MeOH中的溶液中，加入10％Pd/C(240mg)。將混合物在室溫下在大氣壓力的氫氣下攪拌5小時。通過過濾去除催化劑，真空濃縮濾液以提供粗制化合物16，其用于下一反應而不進一步純化。
f) 將粗制化合物16和10mL MeOH和28％MeONa(1.5mL，7.3mmol，甲醇溶液)在70℃一起攪拌7.5小時。在加入30mL水后，用40mLAcOEt萃取水層，用水和鹽水洗滌萃取液，通過MgSO4干燥，真空濃縮以提供粗制化合物17，為非對映體的混合物(比率4∶1)，其用于下一反應而不進一步純化。
g) 將實施例2-c)和2-d)的方法以69mg(0.55mmol)的規模應用于化合物17，產生Ex.2-7(54mg)，為無色晶體，m.p.＞250℃。IR(cm-1)3328，2931，1704，1615。MS(ESI+)381(100)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)1.40-1.58(m，4H)，1.61(s，6H)，1.82-1.92(m，2H)，1.97-2.08(m，2H)，2.24-2.36(m，1H)，2.52-2.61(m，1H)，6.91(br s，2H)，7.31(d，2H，J＝8.6Hz)，7.65(d，2H，J＝8.6Hz)，7.95(s，1H)，11.92(br s，1H)。
實施例2-8至2-268以與實施例2至2-7相同的方式獲得在表2中所示的化合物。
實施例3a) 在0℃下，向攪拌的4-羥基-4-苯基哌啶(18)(1.00g，5.64mmol)和Et3N(0.94mL，6.77mmol)在10mL CHCl3中的溶液中，加入乙基草酰氯(0.63mL，5.64mmol)并攪拌1小時。在加入10mL水后，分離有機層，通過MgSO4干燥，真空濃縮以提供粗制化合物19，其用于下一反應而不進一步純化。
b) 將粗制化合物19，10mL CHCl3，三氟乙酸(1.52mL，19.7mmol)和三乙基硅烷(1.52mL，11.3mmol)在65℃下一起攪拌1.5小時。在加入15mL水后，分離有機層，用鹽水洗滌，通過MgSO4干燥，真空濃縮。通過硅膠柱色譜法(己烷/AcOEt＝9/1)純化剩余物，提供化合物20(1.38g)，為淡黃色油。
c) 向攪拌的化合物20(1.38g，5.32mmol)在8mL MeOH中的溶液中，加入10％Pd/C(200mg)。將混合物在室溫下在大氣壓力的氫氣下攪拌5小時。通過過濾去除催化劑，真空濃縮濾液提供粗制化合物21，其用于下一反應而不進一步純化。
d) 將實施例2-c)和2-d)的方法以58mg(0.46mmol)的規模應用于化合物21，產生Ex.3(20mg)，為無色晶體，m.p.188.8-190.9℃。IR(cm-1)1618，1460，1440。MS(ESI+)410(100)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)1.46-1.67(m，2H)，1.6(s，6H)，1.81-1.94(m，2H)，2.72-2.98(m，2H)，3.21-3.34(m，1H)，3.63-3.71(m，1H)，4.34-4.46(m，1H)，6.98(br s，2H)，7.33(d，2H，J＝8.4Hz)，7.67(d，2H，J＝8.4Hz)，7.95(s，1H)。
實施例3-2至3-3以與實施例3相同的方式獲得在表3中所示的化合物。
實施例4a) 將氟代苯(1.78mL，18.96mmol)，氯化鋁(2.53g，18.96mmol)和異丁酰氯(1.0mL，9.48mmol)在Ar下混和，在室溫下攪拌混合物1小時。在攪拌下，將反應混合物傾倒入冰水中，用乙醚(50mL)萃取。用飽和NaHCO3(30mL)和鹽水(30mL)洗滌有機萃取液并通過Na2SO4干燥，去除溶劑以提供化合物23(1.47g)，為無色油，其純度足夠用于下一步驟而不進一步純化。
b) 向化合物23(50mg，0.30mmol)在DMSO(0.5mL)中的溶液中，加入哌啶(119μL，1.2mmol)，將混合物在140℃下在Ar下加熱5小時。在冷卻后，用乙醚(10mL)稀釋反應混合物并用5％KHSO4(10mL)，水(10mL)和鹽水(10mL)洗滌反應混合物。通過Na2SO4干燥有機層，去除溶劑以提供化合物24(65mg)，為無色油，其純度足夠用于下一步驟而不進一步純化。
c) 向化合物24(64mg，0.28mmol)在DME(1mL)中的溶液中，相繼加入25％HBr-AcOH(100μl，0.31mmol)和Br2(15.7μl，0.31mmol)，室溫下攪拌混合物30分鐘。向反應混合物中，加入4，5-二氨基-6-羥基嘧啶(17.5mg，0.14mmol)，1N HCl(140μl，0.14mmol)，EtOH(1mL)，和水(1mL)，將混合物回流過夜。在冷卻后，在減壓下去除EtOH，用AcOEt(10mL)稀釋剩余物和用1N NaOH(10mL)和鹽水(10mL)洗滌。通過Na2SO4干燥有機層并濃縮。通過薄層色譜法，使用CHCl3-MeOH(9∶1)作為洗脫劑，來純化剩余物以提供Ex.4(40mg)，為淡黃色晶體，m.p.191-193℃。IR(cm-1)3318，2933，1606，158。MS(ESI+)338(100)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)1.58-1.62(m，6H)，1.62(s，6H)，3.26(br s，4H)，6.79(br s，2H)，7.29(d，2H，J＝9.0Hz)，7.63(d，2H，J＝9.0Hz)，7.91(s，1H)。
實施例4-2至4-7以與實施例4相同的方式獲得在表4中所示的化合物。
實施例5a) 將3-氯苯乙酮(0.5mL，3.85mmol)，粉狀KOH(2.16g，38.5mmol)，18-冠醚-6(102mg，0.385mmol)，甲基碘(1.92mL，30.8mmol)和12mL甲苯在室溫下一起攪拌3天。在加入30mL水后，用20mLAcOEt萃取水層，用鹽水洗滌萃取液，通過MgSO4干燥，真空濃縮以提供粗制化合物27，其不進一步純化而用于下一反應。
b) 將實施例4的方法以60mg(0.47mmol)的規模應用于化合物27，產生Ex.5(40mg)，為無色晶體，m.p.117.2-133.4℃。IR(cm-1)1639，1583，1468。MS(ESI+)289(100)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)1.60(s，6H)，7.01(br s，2H)，7.48(t，1H，J＝5.9Hz)，7.55(ddd，1H，J＝5.9，1.3，0.8Hz)，7.67(ddd，1H，J＝5.9，1.3，0.8Hz)，7.76(t，1H，J＝1.3Hz)，7.97(s，1H)。
實施例5-2至5-3以與實施例5相同的方式獲得在表5中所示的化合物。
實施例6a) 在0℃下，向攪拌的化合物22(20.0g，54.5mmol)在160mL CHCl3中的溶液中，滴加96％硫酸(12.1mL，218mmol)和60％硝酸(4.56mL，59.9mmol)，在相同溫度下攪拌30分鐘。然后將反應混合物傾倒入碎冰(150g)中。用水(50mL)和鹽水(50mL)洗滌有機層，通過Mg2SO4干燥，真空濃縮。通過從AcOEt/庚烷(1/2，120mL)中結晶純化剩余物，提供化合物28(18.4g)，為淡黃色晶體。
b) 向攪拌的Zn(15.9g，218mmol)在150mL乙酸中的混懸液中，在0℃下逐份加入化合物28(15.0g，36.4mmol)，在室溫下攪拌1小時，然后在60℃攪拌另外30分鐘。將混合物冷卻至環境溫度，過濾，真空濃縮濾液。向剩余物中加入AcOEt(150mL)，用水(50mL)和鹽水(50mL)洗滌，通過Mg2SO4干燥，真空濃縮。通過從EtOH/H2O(3/1，50mL)中結晶純化剩余物，產生化合物29(9.36g)，為白色晶體。
c) 在0℃下向攪拌的氯化銅(II)(6.30g，44.5mmol)在135mL丙酮中的混懸液中，加入亞硝酸叔丁酯(5.88mL，44.5mmol)，然后逐份加入化合物29(9.00g，29.7mmol)，并在相同溫度下攪拌2小時。然后室溫攪拌混合物1小時。在加入2N HCl后，用AcOEt(100mL)萃取混合物。相繼用1N HCl(50mL)，水(50mL)和鹽水(50mL)洗滌萃取液，通過Mg2SO4干燥，真空濃縮。通過硅膠柱色譜法(CHCl3/AcOEt＝10/1～4/1)純化剩余物，產生化合物30(7.40g)，為淡黃色晶體。
d)
3031在0℃下，向攪拌的化合物30(100mg，0.31mmol)在1mL DME中的溶液中，加入25％HBr-AcOH溶液(89mL，0.372mmol)和溴(19mL，0.37mmol)，并在室溫下攪拌7小時。在加入水后，用AcOEt萃取混合物，用水和鹽水洗滌有機層，通過Mg2SO4干燥。蒸發溶劑產生粗制化合物31(112mg)，為淡黃色固體，其不進一步純化而用于下一反應。
e) 向化合物31(461mg，1.07mmol)在EtOH(4mL)中的溶液中，加入4，5-二氨基-6-羥基-2-甲基嘧啶二鹽酸鹽(457mg，2.14mmol)和水(1.3mL)，并回流12小時。在冷卻后，向反應混合物中加入4N NaOH(2.5mL，10.0mmol)并回流1小時。在冷卻后，用4N HCl將反應混合物調整至pH 4并攪拌1小時。通過過濾收集沉積的固體，用水洗滌，真空干燥產生Ex.6(354mg)，為橙色固體。
f) 31的備選制備在0℃下，向攪拌的化合物22(100mg，0.272mmol)在磺酰氯(0.219mL，2.72mmol)中的溶液中，加入氯化鋁(127mg，0.953mmol)和催化量的S2Cl2，并攪拌2小時。然后，將反應混合物傾倒入冰水(30g)中，并用AcOEt(30mL)萃取。用水(20mL)，鹽水(20mL)洗滌有機層，通過Mg2SO4干燥。蒸發溶劑產生粗制化合物31，其不進一步純化而用于上述的下一反應。
實施例6-9a) 在氬氣下，在0℃向化合物29(1.0g，3.29mmol)在15mL甲苯中的混懸液中加入四氟硼酸亞硝鎓(462mg，3.95mmol)。在0℃下攪拌30分鐘后，將混合物加熱至120℃并攪拌1小時。在冷卻后，用AcOEt稀釋溶液，用水洗滌有機層，通過Na2SO4干燥，真空濃縮。通過硅膠柱色譜法(AcOEt/CHCl3/己烷＝1/1/1)純化剩余物，產生化合物32(381mg)，為淡黃色晶體。
b) 在0℃下，向攪拌的化合物32(381mg，1.24mmol)在4mL DME中的溶液中，加入25％HBr-AcOH溶液(356mL，1.49mmol)和溴(76mL，1.49mmol)，并在0℃下攪拌5分鐘和在室溫下攪拌30分鐘。在加入水后，用AcOEt萃取混合物，用鹽水洗滌有機層，通過Na2SO4干燥。蒸發溶劑產生粗制化合物33(454mg)，為淡黃色固體，其用于下一反應而不進一步純化。
c) 向化合物33(454mg，1.18mmol)在EtOH(6mL)中的溶液中，加入4，5-二氨基-6-羥基-2-甲基嘧啶二鹽酸鹽(502mg，2.36mmol)和水(2mL)，回流12小時。在冷卻后，向反應混合物中加入2N NaOH(5.9mL，11.8mmol)并回流3小時。在冷卻后，用2N HCl將反應混合物調節至pH 4并攪拌1小時。通過過濾收集沉積的固體，用水洗滌并真空干燥，提供Ex.6-9(477mg)，為淡黃色固體。
實施例6-2至6-25以與實施例6和6-9相同的方式獲得在表6中所示的化合物。
實施例7a) 在0℃下，向攪拌的AlCl3(6.41g，48.1mmol)在30mL CH2Cl2中的混合物中，加入乙基草酰氯(1.58mL，14.2mmol)和化合物34(3.0g，14.2mmol)，并在0℃～室溫攪拌2小時。在將反應混合物傾倒入冰中后，將10mLAcOEt加入至混合物中，加入濃HCl直至懸浮液變清澈。分離有機層，真空濃縮。通過硅膠柱色譜法(己烷/AcOEt＝3/1～1/1)純化剩余物，提供化合物35(3.36g)，為白色固體。
b) 將化合物35(3.36g，10.5mmol)和KOH(2.0g，35.8mmol)和N2H4.H2O(1.38mL，28.5mmol)在三(乙二醇)(30mL)的混合物在175℃下攪拌1小時。在冷卻至室溫后，加入2N HCl(30mL，60mmol)和水(40mL)，通過過濾收集沉積的固體以提供化合物36(2.58g)，為淡黃色固體。
c) 在0℃下向攪拌的化合物36(2.57g，9.3mmol)在30mL MeOH中的混合物中，加入SOCl2(1.7mL，23.3mmol)，在室溫下攪拌4小時。真空濃縮反應混合物，然后通過硅膠柱色譜法(己烷/AcOEt＝5/1～3/1)純化剩余物，提供化合物37(2.13g)，為白色固體。
d) 將化合物37(2.13g，7.0mmol)和N，N-二甲基甲酰胺二乙基乙縮醛(6.8mL，39.7mmol)的混合物在130℃下攪拌3天。然后加入甲苯(20mL)，真空濃縮反應混合物，提供粗制化合物38，其用于下一反應而不進一步純化。
e) 將化合物38(粗制，7.0mmol)和4，6-二羥基-2-甲基嘧啶(883mg，7.0mmol)在AcOH(20mL)中的混合物在110℃攪拌4小時。在反應混合物在真空下濃縮后，加入EtOH(10mL)和水(8mL)，通過過濾收集沉積的固體，提供化合物39(1.12g)，為棕色固體。
f) 將化合物39(200mg，0.49mmol)和POCl3(1mL)的混合物在90℃下攪拌3小時。然后，將反應混合物傾倒入冰中，用AcOEt(3mL)萃取產物，相繼用水(2mL)和鹽水(2mL)洗滌有機層。通過MgSO4干燥有機層，真空濃縮。通過硅膠柱色譜法(己烷/AcOEt＝2/1)純化剩余物，提供化合物40(174mg)，為橙色固體。
g) 將化合物40(124mg，0.30mmol)和4N NaOH(0.41mL，1.65mmol)在MeOH(5mL)中的混合物在室溫下攪拌19小時，然后在60℃下攪拌2.5小時。在冷卻至室溫后，加入2N HCl(2mL，4mmol)和水(10mL)，沉積的固體通過過濾收集，以提供化合物41(100mg)，為淡黃色固體。
h) 向攪拌的0.93M MeMgBr在THF(1.2mL，1.12mmol)中的溶液中，加入化合物41(100mg，0.23mmol)在THF(1.5mL)中的懸浮液，室溫下攪拌3小時。在加入水(1mL)和2N HCl(2mL)后，用AcOEt(3mL)萃取產物，相繼用鹽水(2mL)洗滌有機層。通過MgSO4干燥有機層，真空濃縮以提供粗制化合物42，其然后用于下一反應而不進一步純化。
i) 將化合物42(粗制，0.23mmol)和AcOH(2mL)的混合物在100℃攪拌40分鐘。在冷卻至室溫后，將水(3mL)加入至反應混合物中，用AcOEt(3mL)萃取產物，然后相繼用水(2mL)和鹽水(2mL)洗滌有機層。通過MgSO4干燥有機層，真空濃縮。通過硅膠柱色譜法(CHCl3/MeOH＝40/1～20/1)純化剩余物，提供化合物43(54mg)，為橙色固體。
j) 向攪拌的化合物43(52mg，0.12mmol)和K2CO3(50mg，0.37mmol)在DMF(1.5mL)中的懸浮液中，加入MeI(0.023mL，0.37mmol)，室溫下攪拌混合物3小時。在加入水(3mL)后，用AcOEt(3mL)萃取產物，相繼用水(2mL)和鹽水(2mL)洗滌有機層。通過MgSO4干燥有機層，真空濃縮。通過硅膠柱色譜法(己烷/AcOEt＝4/1)純化剩余物，提供化合物44(46mg)，為白色固體。
k) 向攪拌的化合物44(134mg，0.30mmol)在甲苯(4mL)中的溶液中，加入二苯甲酮亞胺(0.255mL，1.52mmol)和Pd(OAc)2(14mg，0.061mmol)和(S)-(-)-BINAP(57mg，0.091mmol)和CsCO3(198mg，0.61mmol)，在110℃下攪拌混合物23小時。在加入水(3mL)后，用AcOEt(3mL)萃取產物，相繼用鹽水(2mL)洗滌有機層。通過MgSO4干燥有機層，真空濃縮。通過硅膠柱色譜法(己烷/AcOEt＝4/1～2/1)純化剩余物，提供化合物45(88mg)，為黃色固體。
l)
45 46向攪拌的化合物45(85mg，0.145mmol)在THF(2mL)中的溶液中，加入濃HCl(0.050mL)，室溫下攪拌混合物1小時。在加入4N NaOH(0.14mL)后，用AcOEt(5mL)萃取產物，相繼用水(4mL)和鹽水(4mL)洗滌有機層。真空濃縮有機層，如此獲得的剩余物通過硅膠柱色譜法(CHCl3/MeOH＝50/1)純化，提供化合物46(57mg)，為黃色固體。
m) 向攪拌的化合物46(55mg，0.13mmol)在混和溶劑(2mL的THF和3mL的MeOH)中的混合物中，加入1N NaOH(0.43mL，0.43mmol)，在80℃攪拌混合物4小時。在反應混合物在真空下濃縮后，將2N HCl(0.25mL，0.5mmol)和EtOH(1mL)加入至混合物中，通過過濾收集沉積的固體，提供Ex.7(38mg)，為淡黃色固體。
實施例7-4
化合物49.將47(10.0g，89.2mmol)和48(14.5g，89.2mmol)在AcOH(100mL)中的混合物在100℃下加熱24小時。真空去除溶劑，通過快速色譜法(硅膠4％MeOH/CH2Cl2)純化產生的棕色剩余物，提供49，為黃色固體(12.04g)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.02(s，1H)，6.71(s，1H)，1.53(s，6H)。質譜(ESI+)m/e＝257和259(M+1)。
化合物50.將49(2.13g，8.29mmol)在POCl3(10mL)中的溶液在100℃下加熱1小時，冷卻至室溫，傾倒在冰上。用EtOAc(3×75mL)萃取獲得的溶液。合并有機層，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，真空濃縮以提供50，為黃色油(2.28g)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.49(s，1H)，7.00(s，1H)，1.64(s，6H)。質譜(ESI+)m/e＝275，277，和279(M+1)。
化合物51.將二異丙基乙胺(1.9mL，10.9mmol)加入至50(2.0g，7.26mmol)和4-甲氧基芐胺(2.83mL，21.8mmol)在THF(20mL)中的溶液中。將反應混合物在回流下加熱16小時，冷卻至室溫，用水(20mL)洗滌，用EtOAc(3×75mL)萃取。合并有機層，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，真空濃縮以提供黃色固體。通過快速色譜法(硅膠，50％EtOAc/己烷)純化提供51，為灰白色固體(2.14g)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.05(s，1H)，7.79(m，1H)，7.21(d，J＝8.7Hz，2H)，7.08(s，1H)，6.87(d，J＝8.7Hz，2H)，4.50(d，J＝5.7Hz，2H)，3.71(s，3H)，1.50(s，6H)。質譜(ESI+)m/e＝376，和378(M+1)。
化合物52.將51(620mg，1.65mmol)在TFA(20mL)中的溶液在50℃下加熱7小時。真空去除溶劑，將獲得的油溶解在EtOAc(30mL)中，用飽和NaHCO3水溶液(2×50mL)，鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，真空濃縮以提供黃色固體。將固體在Et2O(5mL)中超聲處理，通過真空過濾收集，提供52，為灰白色固體(388mg)。1H NMR(DMSO-d6)δ7.97(s，1H)，7.10(s，1H)，7.00(s，2H)，1.52(s，6H)。質譜(ESI+)m/e＝256和258(M+1)。
化合物54.在0℃下在氮氣氣氛下將NaH(211mg，5.23mmol)在礦物油中的60％懸浮液加入至53(1.0g，5.26mmol)在無水THF(25mL)中的溶液中。在0℃下在氮氣氣氛下在分開的燒瓶中將膦酰乙酸三甲酯(1.02mL，6.31mmol)加入至NaH(315mg，7.88mmol)在無水THF(25mL)中的懸浮液中。在15分鐘后，將兩種混合物升溫至室溫并攪拌30分鐘。將含有酮的溶液通過套管加入至膦酸酯溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌5小時，用水(50mL)猝滅和用EtOAc(3×50mL)萃取。合并有機層，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，真空濃縮以提供54，為白色固體(1.25g)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.12(s，1H)，7.01(d，J＝8.4Hz，2H)，6.66(d，J＝8.4Hz，2H)，5.70(s，1H)，3.82(m，1H)，3.62(s，3H)，2.70(m，1H)，2.33(m，2H)，2.01(m，1H)，1.92(m，2H)，1.47(m，2H)。質譜(ESI+)m/e＝247(M+1)。
化合物55.將54(5.18g，21.0mmol)和10％Pd/C(500mg)在EtOAc(150mL)中的混合物在室溫下在氫氣氣氛下攪拌20小時。將反應混合物濾過硅藻土并真空濃縮，提供黃色固體。從EtOAc(6mL)再結晶產生55，為無色棱晶，順/反比率為201(2.96g)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.08(s，1H)，6.99(d，J＝8.5Hz，2H)，6.65(d，J＝8.5Hz，2H)，3.60(s，3H)，2.33(dt，J＝3.0和12.1Hz，1H)，2.23(d，J＝6.9Hz，2H)，1.75(m，5H)，1.38(m，2H)，1.11(m，2H)。質譜(ESI+)m/e＝249(M+1)。
化合物56.在0℃下和在氮氣氣氛下將三乙胺(421μL，3.02mmol)滴加到55(500mg，2.02mmol)和三氟甲磺酸酐(424μL，2.52mmol)在無水CH2Cl2(20mL)中的溶液中。將反應混合物升溫至室溫，攪拌4.5小時，傾倒入水(30mL)中，分離層。合并有機層，用飽和NaHCO3水溶液、鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，真空濃縮以提供56，為灰白色固體(765mg)。1H NMR(DMSO-d6)δ7.42(d，J＝8.7Hz，2H)，7.38(d，J＝8.7Hz，2H)，3.60(s，3H)，2.57(m，1H)，2.25(d，J＝6.6Hz，2H)，1.79(m，5H)，1.47(m，2H)，1.14(m，2H)。質譜(ESI+)m/e＝381(M+1)。
化合物57.在50mL圓底燒瓶中，裝入56(1.35g，3.55mmol)，KOAc(1.05g，10.6mmol)，二(頻哪醇根合(pinacolato))二硼(991mg，3.90mmol)，PdCl2(dppf)(87mg，0.107mmol)，和dppf(59mg，0.107mmol)。將燒瓶連續充滿氮和抽空三次。加入無水二噁烷(25mL)，將反應混合物在80℃下加熱17小時。將反應混合物冷卻至室溫，用EtOAc(50mL)稀釋，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，真空濃縮以提供棕色油。通過快速色譜法(硅膠，15％EtOAc/己烷)純化，提供57，為白色固體(914mg)。1H NMR(DMSO-d6)δ7.59(d，J＝7.8Hz，2H)，7.24(d，J＝7.9Hz，2H)，3.60(s，3H)，2.45(m，1H)，2.25(d，J＝6.8Hz，2H)，1.78(m，5H)，1.46(m，2H)，1.28(s，12H)，1.14(m，2H)。質譜(ESI+)m/e＝359(M+1)。
化合物58.將52(1.12g，4.38mmol)，57(2.0g，6.57mmol)，Pdl2(dppf)(107mg，0.132mmol)，和2M Na2CO3水溶液(11mL)在DMF(30mL)中的混合物在80℃下在氮氣氣氛下加熱24小時。用水(75mL)稀釋溶液，通過真空過濾收集產生的沉淀以提供灰白色固體。通過快速色譜法(硅膠，5％MeOH/CH2Cl2)純化提供58，為白色固體(1.09g)。1H NMR(DMSO-d6)δ7.95(s，1H)，7.29(d，J＝8.0Hz，2H)，7.24(d，J＝8.1Hz，2H)，6.86(s，2H)，6.57(s，1H)，3.61(s，3H)，2.47(m，1H)，2.25(d，J＝6.7Hz，2H)，1.79(m，5H)，1.51(s，6H)，1.44(m，2H)，1.16(m，2H)。質譜(ESI+)m/e＝408.5(M+1)。
Ex.7-4.將58(130mg，0.319mmol)在MeOH(12mL)和10％含水LiOH(4mL)中的溶液在100℃下加熱4小時。真空去除MeOH，獲得的水溶液用1N HCl酸化至pH4。通過真空過濾收集獲得的沉淀，以提供Ex.7-4，為灰白色固體(111mg)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.09(s，1H)，7.33(bs，2H)，7.30(d，J＝8.1Hz，2H)，7.26(d，J＝8.1Hz，2H)，6.61(s，1H)，2.47(m，1H)，2.15(d，J＝6.9Hz，2H)，1.82(m，4H)，1.74(m，1H)，1.55(s，6H)，1.51(m，2H)，1.13(m，2H)。質譜(ESI+)m/e＝394(M+1)。
實施例7-5 化合物60.在100mL圓底燒瓶中，裝入59(2.54g，7.58mmol)，二(頻哪醇根合)二硼(2.41g，9.47mmol)，KOAc(2.23g，22.7mmol)，PdCl2(dppf)(186mg，0.227mmol)，和dppf(126mg，0.227mmol)。將燒瓶連續充滿氮氣和抽空三次。加入無水二噁烷(70mL)和將反應混合物在80℃下加熱17小時。將反應混合物用EtOAc(75mL)稀釋，用水，鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，真空濃縮以提供棕色油。通過快速色譜法(硅膠，5％EtOAc/己烷)純化，提供60，為白色固體(2.02g)。1H NMR(DMSO-d6)δ7.52(s，1H)，7.47(d，J＝7.6Hz，1H)，7.18(d，J＝7.5Hz，1H)，5.74(s，1H)，3.71(m，1H)，3.62(s，3H)，2.89(t，J＝7.4Hz，2H)，2.41(m，1H)，2.32(m，1H)，2.13(m，3H)，1.66(m，4H)，1.28(s，12H)。質譜(ESI+)m/e＝383(M+1)。
化合物61.在氫氣氣氛下將60(2.02g，5.28mmol)和10％Pd/C(562mg)在MeOH(50mL)中的混合物在室溫下攪拌21小時。將反應混合物濾過硅藻土和真空濃縮，以提供無色油。從MeOH中結晶，接著用MeOH擴散從CH2Cl2中重結晶，提供61，為白色針狀晶體，反/順比率為20∶1(600mg)。1H NMR(DMSO-d6)δ7.70(s，1H)，7.68(d，J＝7.7Hz，1H)，7.18(d，J＝7.5Hz，1H)，3.71(s，3H)，2.90(t，J＝7.3Hz，2H)，2.29(d，J＝7.0Hz，2H)，1.99(t，J＝7.4Hz，2H)，1.90(m，1H)，1.76(m，2H)，1.68(m，2H)，1.60(m，2H)，1.35(s，12H)，1.25(m，2H)。質譜(ESI+)m/e＝385(M+1)。
化合物62.將52(100mg，0.391mmol)，61(150mg，0.391mmol)，Pd(PPh3)4(23mg，0.020mmol)，和2M Na2CO3水溶液(1mL)在DMF(10mL)中的混合物在80℃下加熱3.5小時。將反應混合物用EtOAc(75mL)稀釋，用水(3×50mL)，鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，真空濃縮，以提供黃色固體。通過快速色譜法(硅膠，5％MeOH/CH2Cl2)純化，提供62，為白色固體(103mg)。1H NMR(DMSO-d6)δ7.95(s，1H)，7.18(m，3H)，6.84(s，2H)，6.56(s，1H)，3.61(s，3H)，2.85(t，J＝7.3Hz，2H)，2.28(d，J＝7.0Hz，2H)，1.95(t，J＝7.3Hz，2H)，1.79(m，1H)，1.65(m，5H)，1.51(s，6H)，1.49(m，1H)，1.23(m，2H)。質譜(ESI+)m/e＝434(M+1)。
Ex.7-5.將62(103mg，0.238mmol)在MeOH(9mL)和10％LiOH水溶液(3mL)中的溶液在100℃下加熱2小時。真空去除MeOH，將獲得的水層用1N HCl酸化至pH1。通過真空過濾收集獲得的沉淀以提供Ex.7-5，為灰白色固體(73mg)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.14(s，1H)，7.50(bs，2H)，7.20(m，3H)，6.61(s，1H)，2.86(t，J＝7.2Hz，2H)，2.17(d，J＝6.8Hz，2H)，1.96(t，J＝7.3Hz，2H)，1.71(m，1H)，1.67(m，2H)，1.63(m，3H)，1.56(s，6H)，1.50(m，2H)，1.22(m，2H)。質譜(ESI+)m/e＝420(M+1)。
以與實施例7，7-4和7-5相同的方式獲得在表7中所示的化合物。
實施例8 步驟(A)，(B)和(C).在氮氣氣氛下向配備有磁力攪拌器、回流冷凝器和加料漏斗的火焰干燥的1L 3-頸圓底燒瓶中，放入鎂屑(1.1當量，8.8g)和二乙醚(60mL)。通過加料漏斗加入1-溴-3-苯基丙烷(322.4mmol，65.5g)的二乙醚溶液，速率為在加入過程中保持溫和的回流，約1小時10分鐘。在加入開始時加入一些碘顆粒，以引發反應。在加入溴化物完成后，將反應混合物在回流下加熱1小時，使其冷卻至室溫和進一步在冰浴中冷卻。將1，4-環己烷二酮單亞乙基縮酮(1當量，51.91g)在THF(100mL)中的溶液通過加料漏斗在攪拌下、在1小時30分鐘內緩慢加入冰冷卻的混合物中。在冰浴中持續攪拌混合物30分鐘，在室溫下攪拌過夜。將反應混合物在冰浴中預冷卻，加入冰和4N HCl水溶液的混合物。攪拌混合物直至鎂全部溶解，分離層，用二乙醚(2x)萃取水層。合并的有機物用鹽水洗滌至中性，通過無水硫酸鈉干燥，真空濃縮。將剩余物用于下一步驟，其中將它在回流混合物中用MeOH(400mL)和3N H2SO4水溶液(100mL)水解6小時。冷卻反應混合物，真空濃縮，用冰水稀釋和用EtOAc(2x)萃取。用鹽水(2x)洗滌合并的有機物，通過無水硫酸鈉干燥和真空濃縮。剩余物的柱色譜法(EtOAc/己烷，35/65)提供期望的羥基酮64(30g)。1H NMR(CDCl3)δ1.45(br s，1H)，1.59-1.63(m，2H)，1.73-1.83(m，4H)，1.93-1.97(m，2H)，2.20-2.28(m，2H)，2.65-2.76(m，4H)，7.19-7.24(m，3H)，7.28-7.33(m，2H)。質譜(CI+)m/e＝215.1(M+1)。
步驟(D).在冰浴中在氮氣所氛下，向火焰干燥的單頸圓底燒瓶中，放入NaH(在礦物油中的60％分散液)(1當量，0.66g)，隨后裝入THF(20mL)。通過注射器向其滴加膦酰乙酸三甲酯(1當量，2.89g/2.75mL)。當氫逸出顯示完全時，通過加料漏斗緩慢引入羥基酮64(15.5mmol，3.33g)在THF(40mL)中的溶液。在環境溫度下攪拌反應混合物過夜。用飽和NH4Cl水溶液接著用水猝滅反應，用EtOAc(2x)萃取。用鹽水(2x)洗滌合并的有機物，通過無水硫酸鈉干燥并真空濃縮。剩余物的柱色譜法(EtOAc/己烷，30/70)提供期望的羥基丙烯酸酯(3.5g)。1H NMR(CDCl3)δ1.16(s，1H)，1.29(t，J＝7.1Hz，3H)，1.51-1.61(m，4H)，1.70-1.80(m，4H)，2.10-2.14(m，1H)，2.43-2.59(m，2H)，2.65(t，J＝7.5Hz，2H)，3.46-3.50(m，1H)，4.16(q，J＝7.1Hz，2H)，5.65(s，1H)，7.19-7.22(m，3H)，7.28-7.32(m，2H)。
步驟(E).將以上獲得的羥基丙烯酸酯(15.5mmol)在鈀(木炭上10％)(10mol％)上在EtOAc(60mL)中使用氫氣在大氣壓下氫化10小時。通過硅藻土層濾去Pd/C，真空濃縮濾液。產物含有期望叔羥基酯65的兩種構象異構體(比率3∶1)的混合物，其通過柱色譜法(EtOAc/己烷，20/80)分離并由下列光譜數據表征。在實踐中，將構象異構體混合物進一步加工而不分離。1H NMR(主要構象異構體，CDCl3)δ1.06(s，1H)，1.27(t，J＝7.1Hz，3H)，1.33-1.42(m，4H)，1.46-1.51(m，2H)，1.55-1.66(m，4H)，1.68-1.76(m，3H)，2.23(d，J＝7.0Hz，2H)，2.63(t，J＝7.6Hz，2H)，4.14(q，J＝7.1Hz，2H)，7.18-7.23(m，3H)，7.28-7.32(m，2H)。質譜(CI+)m/e＝287.1(M+1)；1HNMR(次要構象異構體，CDCl3)δ1.07-1.15(m，2H)，1.22(s，1H)，1.27(t，J＝7.1Hz，3H)，1.39-1.44(m，2H)，1.54-1.58(m，2H)，1.67-1.75(m，6H)，1.88(m，1H)，2.22(d，J＝7.1Hz，2H)，2.65(t，J＝7.6Hz，2H)，4.14(q，J＝7.1Hz，2H)，7.18-7.22(m，3H)，7.29-7.32(m，2H)。質譜(CI+)m/e＝287.1(M+1)。
步驟(F)，(G)和(H).向在冰鹽浴中的火焰干燥的50mL單頸圓底燒瓶中，放入AlCl3(2.5當量，1.43g)，接著在氮氣氣氛下滴加2-溴異丁酰基溴(2當量，2.01g/1.08mL)。攪拌混合物約5分鐘，加入CH2Cl2(8mL)。在另外5分鐘后，滴加叔羥基酯65(4.3mmol，1.23g)的CH2Cl2(20mL)溶液。在冰鹽浴中持續攪拌反應混合物1小時。加入冰和2N HCl水溶液的混合物，攪拌混合物直至全部溶解，用CH2Cl2(2x)萃取。用鹽水(3x)洗滌合并的有機物，通過無水硫酸鈉干燥，真空濃縮。剩余物主要含有兩種比率為約4∶1的酰化區域異構體(regioisomer)，其用4，5-二氨基-6-羥基嘧啶半硫酸鹽(0.5當量，0.63g)在2N HCl水溶液(2.2當量，4mL)的存在下在3∶1EtOH-H2O(40mL)中環化。將混合物回流約12小時。冷卻混合物，用飽和NH4Cl水溶液稀釋，用EtOAc(2x)萃取。用飽和NH4Cl水溶液(2x)洗滌合并的有機物，通過無水硫酸鈉干燥并真空濃縮。通過LiOH·H2O(5當量，0.73g)在3∶1MeOH-H2O(20mL)中水解產物。使用與上述環化步驟所用相同的后處理，獲得兩種主要區域異構體(67)的混合物。主要異構體(1.2g)通過重結晶(EtOAc/CH2Cl2/MeOH)獲得。通過母液的制備HPLC獲得期望的異構體(Ex.8)(200mg)。1H NMR(CDCl3)(單一構象異構體，反式-)δ1.35-1.43(m，2H)，1.69-1.88(m，16H)，1.96(m，1H)，2.36(d，J＝7.0Hz，2H)，2.83(t，J＝6.0Hz，2H)，7.34(d，J＝1.6Hz，1H)，7.42(dd，J＝8.4，1.6Hz，1H)，7.49(d，J＝8.4Hz，1H)，8.16(s，1H)。質譜(CI+)m/e＝435.2(M+1)。
實施例8-2 化合物69.在0℃下在氮氣氣氛下將膦酰乙酸三甲酯(10.36mL，64.0mmol)加入至NaH在無水THF(500mL)中的懸浮液中。在0℃下30分鐘后，通過套管加入1，4-環己烷二酮單亞乙基縮酮(10.0g，64.0mmol)在無水THF(50mL)中的溶液。將反應混合物升溫至環境溫度，攪拌12小時。用水猝滅反應，真空去除THF。用EtOAc萃取水層，合并有機層，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，真空濃縮以提供68，為無色油。將10％Pd/C加入至68在95％EtOH(200mL)中的溶液中。在氫氣氣氛下攪拌反應混合物20小時，濾過硅藻土，真空濃縮，提供無色油。將對甲苯硫酸一水合物(1.21g，6.40mmol)加入丙酮(200mL)和水(50mL)中的該油的溶液中，將反應混合物在回流下加熱24小時。真空去除丙酮，用EtOAc萃取水溶液。合并有機層，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，真空濃縮，提供69，為無色液體(5.86g)。1H NMR(CDCl3)δ1.46(m，2H)，2.08(m，2H)，2.25-2.33(m，3H)，2.37(m，4H)，3.68(s，3H)。質譜(ESI+)m/e＝171.1(M+H)。
化合物70.在0℃下在氮氣氣氛下，通過注射器將異丙基氯化鎂(25.5mL，51.0mmol)加入至4-溴-3-甲基芐腈(5.0g，25.5mmol)在無水Et2O(50mL)中的溶液中。在回流下加熱反應混合物12小時。將反應混合物冷卻至0℃，用6N HCl猝滅。在環境溫度下攪拌12小時后，分離層，用EtOAc萃取水溶液。合并有機萃取液，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，真空濃縮以提供棕色油。快速色譜法(硅膠，2％EtOAC/己烷)提供70，為無色油(3.69g)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.08(d，J＝6.8Hz，6H)，2.41(s，3H)，3.62(m，1H)，7.68(d，J＝8.4Hz，1H)，7.73(d，J＝8.3Hz，1H)，7.92(s，1H)。質譜(ESI+)m/e＝241.1和243.1(M+H)。
化合物71.將對甲苯磺酸一水合物(360mg，1.89mmol)加入至70(4.57g，18.9mmol)和1，2-亞乙基二醇(8.45mL，0.152mol)在苯(50mL)中的溶液中。在回流下加熱反應混合物20小時，通過使用迪安-斯達克榻分水器去除水。用飽和NaHCO3水溶液，鹽水洗滌該溶液，干燥(MgSO4)，過濾和真空濃縮，以提供無色油。快速色譜法(硅膠，2％EtOAc/己烷)提供71，為無色油(4.86g)。1H NMR(DMSO-d6)δ0.79(d，J＝6.8Hz，6H)，2.03(m，1H)，2.34(s，3H)，3.63(m，2H)，3.92(m，2H)，7.07(dd，J＝2.2和8.2Hz，1H)，7.30(d，J＝2.1Hz，1H)，7.52(d，J＝8.2Hz，1H)。質譜(ESI+)m/e＝285.0和287.1(M+H)。
化合物72.在-78℃下將n-BuLi(5.4mL，13.5mmol)加入至71(3.50g，12.3mmol)在無水THF(20mL)中的溶液中。在-78℃下攪拌溶液30分鐘，在-78℃下，將其加入至69(2.30g，13.5mmol)在無水THF(20mL)中的溶液中。將反應混合物升溫至環境溫度，攪拌12小時。用飽和NH4Cl水溶液猝滅反應，分離層。用EtOAc萃取水層，合并有機萃取液，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾和真空濃縮以提供黃色油。快速色譜法(硅膠，15％EtOAc/己烷)提供72，為無色油，順式和反式異構體的混合物(2.24g)。1HNMR(CDCl3)δ0.88(d，J＝6.8Hz，6H)，0.88(d，J＝6.8Hz，6H)，1.60-2.40(m，24H)，2.60(s，3H)，2.62(s，3H)，3.66(s，3H)，3.68(s，3H)，3.75(m，4H)，3.98(m，4H)，7.15-7.26(m，4H)，7.33(m，2H)。質譜(ESI+)m/e＝359.2([M-H2O]+H)。
化合物73.將NBS(260mg，1.46mmol)和72(500mg，1.33mmol)在苯(100mL)中的溶液在回流下加熱24小時。將反應混合物冷卻至環境溫度，用水、鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾和真空濃縮，以提供棕色油。快速色譜法(硅膠，10％EtOAc/己烷)提供73，為黃色油，順式和反式異構體的混合物(187mg)。1H NMR(DMSO-d6)δ0.88(d，J＝6.8Hz，6H)，0.89(d，J＝6.8Hz，6H)，1.54-2.10(m，20H)2.28(d，J＝7.0Hz，2H)，2.43(d，J＝7.3Hz，2H)，3.68(s，3H)，3.70(s，3H)，3.76(m，4H)，3.97(m，4H)，5.02(s，2H)，5.03(s，2H)，7.00(d，J＝7.8Hz，1H)，7.22(m，3H)，7.28(m，2H)。質譜(ESI+)m/e＝375.1(M+H)。
化合物74.將73(450mg，1.20mmol)和對甲苯磺酸一水合物(23.0mg，0.120mmol)在丙酮(25mL)和水(5mL)中的溶液在回流下加熱24小時。真空去除丙酮，用EtOAc萃取水溶液。合并有機層，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾和真空濃縮，以提供黃色油，為順式和反式異構體的混合物(366mg)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.09(d，J＝6.8Hz，6H)，1.09(d，J＝6.8Hz，6H)，1.40-1.83(m，18H)2.25(d，J＝7.0Hz，2H)，2.53(d，J＝7.4Hz，2H)，3.59(s，3H)，3.60(s，3H)，3.63(m，2H)，4.98(s，4H)，7.38(d，J＝7.9Hz，1H)，7.60(d，J＝7.9Hz，1H)，7.87(m，4H)。質譜(ESI+)m/e＝331.2(M+H)。
將74(400mg，1.21mmol)和CuBr2(811mg，3.63mmol)在CHCl3(25mL)和EtOAc(25mL)中的混合物在回流下加熱5小時。真空去除溶劑，剩余物在EtOAc和水之間分配。分離層，用EtOAc萃取水溶液。合并有機層，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，真空濃縮以提供75，為黃色油。將4，5-二氨基-6-羥基嘧啶半硫酸鹽(170mg，0.486mmol)和2N HCl(535μL，1.07mmol)加入至75(398mg，0.972mmol)在EtOH(18mL)和水(6mL)中的溶液中。在回流下加熱反應混合物23小時，用飽和NH4Cl水溶液猝滅。用EtOAc萃取溶液，合并有機層，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，真空濃縮以提供76，為橙色泡沫(360mg)。將氫氧化鋰一水合物(173mg，4.12mmol)加入至76(360mg，0.825mmol)在MeOH(18mL)和水(6mL)中的溶液中。將反應混合物在回流下加熱18小時，用NH4Cl猝滅。用HCl酸化溶液，用EtOAc萃取。合并有機層，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，真空濃縮，提供Ex.8-2，為黃色固體(146mg)，為順式和反式異構體的混合物，其通過反相HPLC分離。1H NMR(主要異構體，DMSO-d6)δ1.50(m，5H)，1.61(s，6H)，1.82(m，4H)，2.40(d，J＝7.3Hz，2H)，4.97(s，2H)，7.53(d，J＝7.9Hz，1H)，7.60(d，J＝8.0Hz，1H)，7.62(s，1H)，7.99(s，1H)。質譜(CI+)m/e＝423.2(M+1)。1H NMR(次要異構體，DMSO-d6)δ1.40(m，2H)，1.60(s，6H)，1.64(m，4H)，1.75(m，3H)，2.15(d，J＝6.9Hz，2H)，4.97(s，2H)，7.30(d，J＝8.5Hz，1H)，7.61(m，2H)，7.98(s，1H)。質譜(CI+)m/e＝423.2(M+1)。
實施例8-3
化合物78.在室溫下在N2下向攪拌的叔丁醇鉀(16.2g，142mmol)在1，4-二噁烷(300mL)中的懸浮液中，加入(甲氧基甲基)三苯基氯化鏻(48.5g，142mmol)。在攪拌2小時后，在室溫下在N2下向溶液中加入在二噁烷(170mL)中的5-溴(2，3-二氫-1-茚酮)(77，13g，61.6mmol)。在室溫下攪拌混合物2小時，傾倒入水(500mL)中，用EtOAc(500mL)萃取。分離有機層，用鹽水洗滌，通過Na2SO4干燥，真空濃縮。向剩余物中，加入己烷∶EtOAc(2∶1(500mE))。在室溫下攪拌混合物，過濾，用2x己烷∶EtOAc(2∶1(500mL))洗滌沉淀物。真空濃縮濾液，蒸餾剩余物(700mm托，145-150℃)，提供化合物78，為順式和反式混合物的淡黃色固體(14.5g)。1H NMR(CDCl3)δ2.70-2.80(m，2H，主要和次要異構體)，2.94-3.00(m，2H，主要和次要異構體)，3.75(s，3H，主要和次要異構體)，6.20(t，J＝1.8Hz，1H，僅次要異構體)，6.65(t，J＝2.6Hz，1H，僅主要異構體)，7.12(d，J＝8.2Hz，1H，僅主要異構體)，7.22-7.34(m，2H，主要和次要異構體)，7.68(d，J＝8.2Hz，1H，僅次要異構體)。
化合物79.在室溫下向攪拌的78(14.5g，60.8mmol)在甲苯(60mL)中的溶液中，加入甲基乙烯基酮(6.0mL，68mmol)和對甲苯磺酸一水合物(1.2g，6.3mmol)。在N2下在100℃下加熱混合物18小時，使其冷卻至室溫，傾倒入飽和NaHCO3水溶液(200mL)中。分離有機層，用鹽水洗滌。用EtOAc萃取水層，分離有機層，用鹽水洗滌。通過Na2SO4干燥有機層，真空濃縮。從EtOH∶H2O(2∶1(168mL))中重結晶剩余物，過濾和60℃真空干燥，提供79，為淡黃色固體(9.90g)。1H NMR(CDCl3)δ2.09-2.24(m，3H)，2.29-2.32(m，1H)，2.54(dd，J＝7.2，6.3Hz，2H)，2.99-3.12(m，2H)，6.10(d，J＝10.1Hz，1H)，6.76(d，J＝10.1Hz，1H)，6.99(d，J＝8.1Hz，1H)，7.35(d，J＝8.1Hz，1H)，7.44(s，1H)。
化合物80.向攪拌的79(153.4g，0.55M)在乙酸(3.7L)中的溶液中，加入10％Pd/C(30g)。在氫氣氣氛下攪拌混合物4小時，通過硅膠過濾(用乙酸洗滌，接著用DCM洗滌)。真空濃縮濾液以提供80，為白色固體(150.51g)。1H NMR(CDCl3)δ1.90-1.97(m，2H)，2.02-2.12(m，2H)，2.26(t，J＝7.3Hz，2H)，2.43-2.61(m，4H)，3.01(t，J＝7.3Hz，2H)，7.04(d，J＝8.1Hz，1H)，7.32-7.35(m，1H)，7.40(s，1H)。
化合物59.在N2氣氛下在0℃在7分鐘內向攪拌的膦酰乙酸三甲酯(116.45g，640mmol.)在無水(116.45g，640mmol.)中的溶液中，滴加氫化鈉(25.6g 60％分散液，在礦物油中，640mmol.)。在0℃下攪拌混合物30分鐘，使其在30分鐘內升溫至室溫。在10分鐘內加入80(149g，533mmol.)在無水THF(375mL)中的溶液。在室溫下攪拌混合物90分鐘，加入飽和NH4Cl水溶液(500mL)。攪拌混合物5分鐘，真空濃縮去除THF。用二乙醚(1L和500mL)洗滌水相。用鹽水溶液洗滌合并的有機級分，干燥(MgSO4)和真空濃縮。研磨獲得的油相剩余物提供白色固體，其通過過濾收集和用己烷洗滌以提供59(62.0g)。真空濃縮母液，在0℃在從EtOAc/己烷重結晶剩余物以提供另外的59(38.3g)。上述重結晶方法的另外三次重復提供另外的59(40.5g)。1H NMR(CDCl3)δ1.68-1.78(m，4H)，2.11-2.21(m，3H)，2.31-2.46(m，2H)，2.95(t，J＝7.4Hz，2H)，3.73(s，3H)，3.82-3.87(m，2H)，5.73(s，1H)，6.99(d，J＝8.0Hz，2H)，7.29-7.32(m，1H)，7.37(s，1H)。
化合物82a.向含有59(140g，418mmol)的5L 3-頸圓底燒瓶中，加入Et3N(280mL，2.03mol)，芐醇(420mL，4.06mmol)和甲苯(1.4L)。獲得的溶液用CO吹洗5分鐘，之后加入Pd(PPh3)4(9.34g，8mmol)。加熱反應混合物至90℃8小時，同時吹洗CO。將混合物在冰浴中攪拌30分鐘和過濾，用EtOAc洗滌沉淀物。用水、鹽水洗滌濾液，通過硫酸鈉干燥。真空去除溶劑和過量的芐醇。將剩余物溶解在DCM(50mL)和己烷(50mL)中，通過裝填有硅膠(500g)的漏斗過濾。用己烷/EtOAc(梯度洗脫9/1至1/1)洗滌濾墊。真空濃縮提供81，為黃色油(160g)。將化合物81溶解在EtOH(12L)中，加入碳載Pd(10％，20g)。在氫氣氣氛下攪拌混合物2天，通過硅藻土墊過濾，真空濃縮，提供白色固體(120g)。向粗制產物加入EtOAc(200mL)，將混合物加熱至回流1分鐘和過濾。將濾液重新加熱至回流，緩慢加入己烷。將產生的混合物緩慢冷卻至室溫，提供白色晶體固體，其通過過濾收集(44g反式異構體82a)。濃縮母液，從EtOAc己烷中重結晶提供另外16g的82a。1H NMR(CDCl3)δ1.23-1.27(m，2H)，1.59-1.90(m，7H)，2.03(t，J＝7.4Hz，2H)，2.28(d，J＝7.0Hz，2H)，2.93(t，J＝7.4Hz，2H)，3.70(s，3H)，7.21(d，J＝7.9Hz，1H)，7.93(s，1H)，7.95(d，J＝7.9Hz，1H)。質譜(ESI+)m/e＝303(M+1)。
化合物83.在0℃下在氮氣氣氛下，將DMF(200μL)加入至82a(57.23g，0.189mol)和草酰氯(19.8mL，0.227mol)在CH2Cl2(500mL)中的溶液中。在0℃下攪拌反應混合物15分鐘，在室溫下攪拌3小時。真空去除溶劑，提供酰氯，為灰白色固體(60.3g)。在三頸2L圓底燒瓶中，裝入CuCN(4.19g，46.8mmol)和無水THF(500mL)，并且冷卻至-25℃。向該攪拌的懸浮液中，滴加2M異丙基氯化鎂溶液(46.8mL，93.5mmol，在THF中)，同時保持內部溫度為-25和-22℃之間。向該溶液中，滴加酰氯(上述制備)(10g，31.2mmol)在無水THF(50mL)中的溶液，同時保持內部溫度為-20和-17℃之間。在-15℃攪拌反應混合物1小時，用在飽和NH4Cl水溶液(300mL)中的10％NH4OH猝滅。將該溶液升溫至室溫，分離層。用在飽和NH4Cl水溶液中的10％NH4OH(2×300mL)、鹽水(1×300mL)洗滌有機層，干燥(MgSO4)，過濾，真空濃縮，以提供83，為灰白色固體(10.08g)。1H NMR(CDCl3)δ7.83(m，2H)，7.22(d，J＝8.4Hz，1H)，3.72(s，3H)，3.54-3.58(m，1H)，2.94(t，J＝7.4Hz，2H)，2.30(d，J＝7.0Hz，2H)，2.04(t，J＝7.4Hz，2H)，1.92(m，1H)，1.78(m，2H)，1.69-1.64(m，4H)，1.28(m，2H)，1.23(d，J＝6.8Hz，6H)。質譜(ESI+)m/e＝329(M+1)。
化合物84.將83(5g，15.2mmol)在EtOAc(100mL)和氯仿(100mL)中的溶液用CuBr2(10g，44.8mmol)處理，將混合物在回流下加熱8小時，之后冷卻至室溫。過濾反應混合物，用EtOAc洗滌。用水、鹽水洗滌濾液，通過硫酸鈉干燥。真空去除溶劑，加入己烷(20mL)。在攪拌下形成白色固體84，通過過濾收集(5g)。在0℃下，通過從母液中結晶獲得另外的84(0.76g)。1H NMR(CDCl3)δ1.25-1.28(m，2H)，1.61-1.92(m，7H)，2.03-2.06(m，8H)，2.29(d，J＝7.0Hz，2H)，2.94(t，J＝7.4Hz，2H)，3.72(s，3H)，7.19(d，J＝8.0Hz，1H)，7.99(s，1H)，8.05(d，J＝8.0Hz，1H)。質譜(ESI+)m/e＝407和409(M+1)。
化合物86.向84(0.5g，1.23mmol.)和4，5-二氨基-6-羥基-2-三氟甲基嘧啶(85，J.A.Barone等，J.Med.Chem.，1969，6，39；P.D.Landauer等，J.Chem.Soc.，1953，3721.)(0.26g，1.34mmol)中，加入甲醇(13mL)，2N HCl(2mL)和水(5mL)。在回流下加熱混合物24小時，冷卻并真空濃縮。向該剩余物中，加入水(10mL)，通過過濾收集獲得的沉淀物，用戊烷洗滌，真空干燥，提供86(375mg)，為白色固體。1H NMR(DMSO-d6)δ1.18-1.27(m，2H)，1.48-1.86(m，13H)，1.98(t，J＝7.3Hz，2H)，2.28(d，J＝7.2Hz，2H)，2.89(t，J＝7.1Hz，2H)，3.61(s，3H)，7.28(d，J＝8.0Hz，1H)，7.53(d，J＝8.0Hz，1H)，7.58(s，1H)。
Ex.8-3.向攪拌的86(100mg，0.199mmol)在DMF(1mL)中的溶液中，加入無水碘化鋰(670mg，5mmol)。將混合物在125-130℃下加熱24小時，傾倒入水(20mL)中。通過過濾收集獲得的沉淀物，用水洗滌。從乙醇中重結晶沉淀物，提供Ex.8-3(70mg)，為白色固體。1H NMR(DMSO-d6)δ1.17-1.26(m，2H)，1.48-1.82(m，16H)，1.98(t，J＝7.4Hz，2H)，2.18(d，J＝6.8Hz，2H)，2.90(t，J＝7.2Hz，2H)，7.28(d，J＝8.1Hz，1H)，7.37(brs，1H)，7.53(d，J＝8.1Hz，1H)，7.58(s，1H)，7.80(brs，1H)，12.05(brs，1H)。
實施例8-4
化合物89.將干燥的500mL單頸圓底燒瓶中，裝入茚87(8.91g，76.65mmol)和THF(60mL)。攪拌溶液并通過冰浴冷卻。通過注射器在30分鐘內向燒瓶中加入二(三甲基甲硅烷基)酰胺鋰(153.3mL，1.0M在THF中，153.3mmol)。將獲得的混合物在0℃攪拌30分鐘，在0℃下在30分鐘內通過套管轉移至攪拌的二溴縮酮88(20.0g，66.23mmol)在THF中的溶液中。在加入后，在0℃下攪拌反應混合物2小時，在室溫下攪拌30分鐘。真空蒸發溶劑，通過硅膠色譜法(己烷/EtOAc 25/1-15/1；梯度洗脫)純化剩余物，提供化合物89(15.0g)，為淡黃色晶體。1HNMR(CDCl3)δ1.43(d，J＝13.5Hz，2H)，1.88-1.99(m，4H)，2.20(d，J＝4.0，13.0Hz，2H)，4.06(s，4H)，6.78(d，J＝6.0，1H)，6.85(d，J＝6.0，1H)，7.20-7.27(m，2H)，7.34(d，J＝7.5，1H)，7.42(d，J＝7.5，1H)。質譜(ESI+)m/e＝243(M++1)。
化合物90.向89(15.0g，62mmol)在MeOH(350mL)中的溶液中，加入3M H2SO4(60mL)。反應混合物在回流下在氮氣氣氛下加熱7小時。將混合物冷卻至室溫，真空去除MeOH。用冰水稀釋混合物，用EtOAc(100mL×3)萃取，用水(25mL×2)和鹽水(20mL)洗滌，通過MgSO4干燥。真空濃縮，提供粗制產物，其通過硅膠柱色譜法(己烷/EtOAc 20/1)純化，得到化合物90(10.0g)，為白色固體。1H NMR(CDCl3)δ1.76(m，2H)，2.34(m，2H)，2.68(m，4H)，6.90(d，J＝6.0，1H)，6.95(d，J＝6.0，1H)，7.25-7.51(m，4H)。質譜(ESI+)m/e＝199(M+1)。
化合物91.在氮氣氣氛下，將在500mL預先干燥的燒瓶中的NaH(在礦物油中的60％分散液)(2.45g，61.25mmol)在THF(200mL)中的懸浮液冷卻至0℃。在0℃下在15分鐘內向燒瓶中滴加2-膦酰丙酸三乙酯(14.60g，61.25mmol)在THF(10mL)中的溶液。將混合物在0℃下攪拌15分鐘，通過加料漏斗在25分鐘內滴加90(7.8g，39.20mmol)在THF(50mL)中的溶液。在加入后，將混合物在室溫下攪拌過夜。用飽和NH4Cl水溶液猝滅反應，用EtOAc萃取，用水和鹽水洗滌，通過MgSO4干燥。蒸發溶劑提供粗制產物，其通過硅膠柱色譜法(己烷/EtOAc 20/1)純化，提供化合物91(10.0g)，為白色固體。1H NMR(CDCl3)δ1.35(t，J＝7.1Hz，3H)，1.50-1.1.60(m，2H)，1.98(s，3H)，1.95-2.05(m，2H)，2.25-2.48(m，2H)，2.75-2.90(m，1H)，3.10-3.25(m，1H)，4.25(q，J＝7.1Hz，2H)，6.81(d，J＝5.7，1H)，6.93(d，J＝5.7，1H)，7.20-7.36(m，4H)。
化合物92.將91(5.6g，19.72mmol)溶解在EtOAc(60mL)中，在鈀(木炭上10％)上使用大氣壓力的氫氣氫化24小時。將混合物濾過硅藻土，真空濃縮濾液，提供產物92(5.4g)，為無色油，其直接用于下一反應而不進一步純化。1H NMR(CDCl3)δ1.18(d，J＝7.0Hz，3H)，1.30(t，J＝7.1Hz，3H)，1.61-1.85(m，9H)，1.98(t，J＝7.5Hz，2H)，2.31(m，1H)，2.89(t，J＝7.4Hz，2H)，4.14-4.19(m，2H)，7.05-7.20(m，4H)。
化合物93.將92(2.63g，9.21mmol)溶解在MeOH/THF/H2O(40mL，5/2/1)中。向上述溶液中加入氫氧化鋰一水合物(1.93g，46.0mmol)，將混合物在50℃下攪拌過夜。真空去除MeOH，將反應混合物用2N HCl酸化。用EtOAc(25mL×3)萃取混合物，用水、鹽水洗滌，通過MgSO4干燥。蒸發溶劑提供粗制產物，其通過硅膠柱色譜法(己烷/EtOAc 8/1)純化，提供化合物93(2.38g)，為白色固體。1H NMR(CDCl3)δ1.24(d，J＝7.02Hz，3H)，1.61-1.85(m，10H)，1.95-2.0(m，2H)，2.3-2.4(m，1H)，2.88-2.92(m，2H)，7.05-7.20(m，4H)。質譜(ESI+)m/e＝258(M)。
化合物94a和94b.在0℃下在氮氣氣氛下向在CH2Cl2中的93(2.2g，8.53mmol)中，加入(COCl)2(0.82mL，9.38mmol)和一滴DMF。在0℃下攪拌反應1小時。在0℃下在氮氣氣氛下向這產生的酰氯溶液滴加(S)-(-)-4-芐基-2-噁唑烷二酮(oxazolidione)(1.66g，9.37mmol)，DMAP(1.09g，8.92mmol)和三乙胺(1.88mL，13.49mmol)在CH2Cl2中的溶液。在加入后，將混合物在室溫下攪拌2小時。通過加入飽和NH4Cl水溶液猝滅反應，用EtOAc(25mL×3)萃取，用水EtOAc(25mL×3)、鹽水洗滌，通過MgSO4干燥。真空濃縮產生粗制產物，其通過硅膠柱色譜法(己烷/EtOAc 19/1-10/1)純化，提供化合物94a(926mg)和94b(1.27g)。NB94a和94b的立體化學分配是隨機的。化合物94a1H NMR(CDCl3)δ1.26(d，J＝6.9Hz，3H)，1.61-1.80(m，2H)，1.80-1.95(m，7H)，1.99(t，J＝7.3Hz，2H)，2.80(dd，J＝9.6，J＝13.3Hz，1H)，2.91(t，J＝7.4Hz，2H)，3.33(dd，J＝3.2，13.3Hz，1H)，3.71-3.75(m，1H)，4.15-4.23(m，2H)，4.70-4.78(m，1H)，7.05-7.37(m，9H)。質譜(ESI+)m/e＝418(M+1)。[α]26＝+54.85(c＝0.60，CH2Cl2)。化合物94b1H NMR(CDCl3)δ1.21(d，J＝6.9Hz，3H)，1.25-1.95(m，9H)，2.01(t，J＝7.4Hz，2H)，2.75(m，1H)，2.90(t，J＝7.3Hz，2H)，3.32-3.41(m，1H)，3.73-3.78(m，1H)，4.12-4.22(m，2H)，4.73-4.77(m，1H)，7.05-7.39(m，9H)。質譜(ESI+)m/e＝418(M+1)。[α]26＝+10.12(c＝0.60，CH2Cl2)化合物95a.在0℃下向攪拌的94a(900mg，2.16mmol)在THF(30mL)和H2O(10mL)中的溶液中，加入H2O2(30％，1.8mL，17.7mmol)和氫氧化鋰一水合物(360mg，8.55mmol)。使反應升溫至室溫過夜，用飽和Na2SO3水溶液猝滅，用10％HCl酸化。用EtOAc(15mL×3)萃取混合物，用水(5mL×2)、鹽水洗滌，通過MgSO4干燥。真空濃縮提供粗制產物，其通過硅膠柱色譜法(己烷/EtOAc 8/1)純化，提供化合物95a(500mg)，為白色固體。1H NMR(CDCl3)δ1.24(d，J＝7.0Hz，3H)，1.61-1.85(m，10H)，1.95-2.0(m，2H)，2.30-2.40(m，1H)，2.88-2.92(m，2H)，7.05-7.20(m，4H)。質譜(ESI+)m/e＝258(M)化合物95b.以類似于以上關于94a向95a轉化所述的方式，由94b制備化合物95b(ent-95a)。
Ex.8-4.在0℃下在氮氣氣氛下向無水AlCl3(484mg，3.63mmol)在CH2Cl2(5mL)中的懸浮液中，滴加2-溴異丁酰基溴(0.21mL，1.70mmol)。在攪拌混合物5分鐘后，滴加化合物95a(376mg，1.46mmol)在CH2Cl2(20mL)中的溶液。在0℃下攪拌1小時后，將混合物傾倒入冰水中，用CH2Cl2(15mL×3)萃取。相繼用水、飽和NaHCO3和鹽水洗滌合并的有機層，通過MgSO4干燥，真空濃縮。向該剩余物中，加入2-甲基-4，5-二氨基-6-羥基嘧啶(PD Landauer等，J.Chem.Soc.，1953，3721)(250mg，1.54mmol)，1N HCl(5mL，5mmol)，水(5mL)和EtOH(25mL)。在回流下加熱反應混合物過夜。將反應混合物冷卻至室溫，通過蒸發去除EtOH。用飽和NH4Cl水溶液稀釋剩余物，用EtOAc(15mL×3)萃取。相繼用水和鹽水洗滌合并的有機層，通過MgSO4干燥，真空濃縮。向剩余物中，加入MeOH/THF/H2O(15mL，1/1/1)和氫氧化鋰一水合物(200mg，4.77mmol)，在45℃攪拌混合物40小時。真空去除MeOH，用2N HCl酸化剩余物。該混合物用EtOAc(15mL×3)萃取，用水、鹽水洗滌，通過MgSO4干燥。真空濃縮提供粗制產物，其通過HPLC(反相)純化以提供化合物Ex.8-4(65.6mg)，為白色固體。1H NMR(DMSO-d6)δ1.07(d，J＝7.0Hz，3H)，1.15-1.35(m，1H)，1.50-1.81(m，6H)，1.63(s，6H)，1.96(t，J＝7.5Hz，2H)，2.21(m，1H)，2.34(s，3H)，2.45-2.55(m，2H)，2.88(t，J＝7.5，2H)，7.25(m，1H)，7.51-7.54(m，4H)，12.0(bs，1H)。質譜(ESI+)m/e＝449(M+1)。
Ex 8-5.化合物Ex.8-5(ent-Ex.8-4)以類似于以上由95a制備Ex.8-4的方式制備。
實施例8-6 該化合物以與實施例8相同的方式獲得。1H NMR(DMSO-d6)δ1.14-1.23(m，2H)，1.47-1.80(m，15H)，1.96(t，J＝7.3Hz，2H)，2.15(d，J＝7.0Hz，2H)，2.32(s，3H)，2.87(t，J＝7.3Hz，2H)，7.10(s，br，2H)，7.24(d，J＝7.8Hz，1H)，7.43-7.50(m，2H)。
實施例8-7 該化合物以與實施例8相同的方式獲得。1H NMR(DMSO-d6)δ1.39-1.45(m，2H)，1.47-1.55(m，2H)，1.60-1.75(m，10H)，1.94(t，J＝7.2Hz，2H)，2.03(m，1H)，2.38(d，J＝7.3Hz，2H)，2.87(t，J＝7.3Hz，2H)，7.35(s，br，1H)，7.44(d，J＝8.0Hz，1H)，7.52(d，J＝8.0Hz，1H)，7.57(s，1H)，7.77(s，br，1H)。
實施例9 化合物97。以類似于關于1向2的轉化(實施例2)所述的方式，由4-苯基環己酮和膦酰丙酸三乙酯制備化合物96。以類似于關于2向3的轉化(實施例2)所述的方式，由96制備化合物97。
化合物98.向攪拌的97(2.86g，11mmol)在甲醇(83mL)中的溶液中，加入在水(28mL)中的氫氧化鋰(2.62g，110mmol)。在回流下加熱混合物2小時，使其冷卻至室溫，真空去除甲醇。用二乙醚洗滌水溶液，用1N HCl酸化至pH1，用二乙醚(3x)萃取。干燥(MgSO4)合并的有機物，過濾并真空濃縮，提供98(2.31g)，為白色固體。1H NMR(CDCl3)δ1.23(d，J＝7.2Hz，3H)，1.29-1.33(m，2H)，1.42-1.59(m，2H)，1.69-1.80(m，2H)，1.85-2.00(m，3H)，2.30-2.39(m，1H)，2.45-2.60(m，1H)，7.21-7.34(m，5H)。
化合物99a和99b.向攪拌的98(13.5g，58.1mmol)在DCM(225mL)中的溶液中，加入3滴DMF。將混合物冷卻至0℃，滴加草酰氯(5.58mL，63.91mmol)。在室溫下攪拌混合物2小時，在0℃下滴加至含有(S)-4-芐基-2-噁唑烷二酮(10.81g，61mmol)，DMAP(7.1g，58.1mmol)，Et3N(20.24mL，145.3mmol)和DCM(100mL)的單獨容器中。使混合物升溫至室溫，在室溫下攪拌12小時。加入水(300mL)。分離有機層，用1N HCl(200mL)，飽和碳酸氫鈉水溶液(200mL)和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾和真空濃縮。通過快速色譜法純化剩余物(硅膠5-40％EtOAc，在己烷中；梯度洗脫)，提供99a(11.48g)，為白色晶體，和99b(10.75g)，為白色泡沫。NB99a和99b的立體化學分配是隨機的。化合物99a1H NMR(CDCl3)δ1.17-1.34(m，5H)，1.45-2.01(m，7H)，2.49(tt，J＝12.3Hz，J＝3.5Hz，1H)，2.81(dd，J＝9.6Hz，J＝13.2Hz，1H)，3.33(dd，J＝3.2Hz，J＝13.4Hz，1H)，3.74(quin，J＝7.0Hz，1H)，4.19-4.25(m，2H)，4.70-4.76(m，1H)，7.19-7.39(m，10H)。
化合物99b1H NMR(CDCl3)δ1.21(d，J＝6.9Hz，3H)，1.25-2.02(m，9H)，2.51(tt，J＝12.1Hz，J＝3.4Hz，1H)，2.74(dd，J＝10.0Hz，J＝13.2Hz，1H)，3.40(dd，J＝3.4Hz，J＝13.2Hz，1H)，3.78(quin，J＝6.8Hz，1H)，4.12-4.21(m，2H)，4.72-4.79(m，1H)，7.19-7.39(m，10H)。
化合物100a.在0℃下，向攪拌的99a(10.48g，26.8mmol)在THF(400mL)和水(125mL)中的溶液中，加入氫氧化鋰(1.28g，53.6mmol)和3％過氧化氫(10.7mL)。將混合物在0℃下攪拌75分鐘，加入亞硫酸鈉水溶液(14.75g，在80mL水中)，接著加入0.5M碳酸氫鈉水溶液(270mL)。用DCM洗滌水層，用5N HCl酸化至pH1，用EtOAc萃取。干燥(MgSO4)乙酸乙酯層，過濾和真空濃縮，以提供100a(1g)，為白色固體。
從DCM層中可以獲得另外的物質。1H NMR(CDCl3)δ1.22(d，J＝7.2Hz，3H)，1.23-1.33(m，2H)，1.50-1.56(m，2H)，1.58-1.65(m，1H)，1.87-2.01(m，4H)，2.38(quin，J＝6.8Hz，1H)，2.50(tt，J＝3.2Hz，J＝12.0Hz，1H)，7.18-7.33(m，5H)。
化合物100b.以類似于以上從99a制備100a的方式，從99b制備化合物100b(ent-100a)。
化合物101a.以類似于關于3向4轉化(實施例2)所述的方式，從100a制備化合物101a。1H NMR(CDCl3)δ1.23(d，J＝7.2Hz，3H)，1.29-1.33(m，2H)，1.42-1.59(m，2H)，1.69-1.80(m，2H)，1.85-2.00(m，3H)，2.30-2.39(m，1H)，2.45-2.60(m，1H)，7.21-7.34(m，5H)。
化合物101b.以類似于以上從100a制備101a的方式，從100b制備化合物101b(ent-101a)。
Ex.9.以類似于關于4向Ex.2轉化所述的方式，從101a和4，5-二氨基-6-羥基-2-甲基嘧啶(P.D.Landauer等，J.Chem.Soc.，1953，3721.)制備Ex.9。1H NMR(CDCl3)δ1.24(d，J＝6.8Hz，3H)，1.25-1.30(m，2H)，1.48-1.59(m，3H)，1.71(s，6H)，1.91-2.00(m，4H)，2.36-2.40(m，1H)，2.46(s，3H)，2.51-2.57(m，1H)，7.27(d，J＝8.4Hz，2H)，7.55(d，J＝8.4Hz，2H)。質譜(ESI+)m/e＝423.3(M+1)。
Ex.9-2。以類似于以上從101a制備Ex.9的方式，從101b制備Ex.9-2(ent-Ex.9)。
實施例9-3
以與實施例9相同的方式獲得該化合物。1H NMR(DMSO-d6)δ1.10-1.20(m，2H)，1.42-1.90(m，13H)，2.17(d，J＝6.8Hz，2H)，2.45-2.60(m，1H)，7.34(d，J＝8Hz，2H)，7.36(brs，1H)，7.71(d，J＝8Hz，2H)，7.74(brs，1H)，12.04(brs，1H)。
通過上述提供的方法的組合制備在表10中提供的化合物。
表1
表1
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表10
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表10
表10
實施例10本實施例描述可以用于鑒定具有DGAT活性的化合物的測定。
許多體外測定系統可以用于測定DGAT活性的調節。這些測定系統的實例利用昆蟲細胞過量表達系統，組織微粒體制劑和細胞培養物。在昆蟲細胞過量表達和組織微粒體制劑測定系統中，系統本身提供活性測量的酶源。這些測量通常使用放射性標記底物進行，其中產生的放射性標記產物隨后通過薄層色譜法(TLC)分離(參見，例如Cases，等Proc.Natl.Acad.Sci.(1998)9513018和Cases，等J.Biol.Chem.(2001)27638870)。
通過比較，基于細胞培養物的測定系統通過將活細胞與放射性標記的脂肪酸溫育來測量甘油三酯的胞內合成。放射性標記的脂肪酸用于甘油三酯的生物合成。甘油三酯然后可以使用有機溶劑從細胞中提取和通過薄層色譜法分離，以確定放射性標記摻入的水平，這是酶活性的量度(參見例如，Cases，等J.Biol.Chem.(2001)27638870)。
基于細胞的測定在優選細胞測定中，將人結腸腫瘤CaCO2，人肝細胞癌HepG2，或小鼠脂肪細胞3T3-L1細胞(未分化或分化，如下所述)在24孔平板中培養至匯合。培養基用無血清的培養基替換，將細胞溫育另外24-48小時。接著，用含有400μM油酸(與BSA復合，2∶1摩爾∶摩爾)和各種劑量的化合物的無血清的培養基替換培養基，終體積為200μL/孔。將細胞溫育30分鐘，之后將0.1μCi14C油酸直接加入細胞，溫育繼續10-30分鐘，這取決于細胞類型。用1mL PBS洗滌細胞兩次，在37℃風干10分鐘。用0.5mL己烷∶異丙醇(3∶2v/v)萃取細胞脂質5分鐘兩次。蒸發脂質提取物至干燥，用于TLC，該TLC使用己烷∶二乙醚∶乙酸(80∶20∶1v/v)為溶劑。觀察放射性條帶，通過曝露于X-射線膠卷或phosphorimager屏定量。
通過將匯合細胞在含有10％血清、胰島素(10μg/mL)、地塞米松(1μM)、異丁基甲基黃嘌呤(IBMX，0.5mM)和三碘甲腺原氨酸(T3，10nM)的培養基中溫育，來誘導3T3-L1細胞分化成脂肪細胞。2天后，將細胞維持在含有血清、胰島素、T3和BRL49653(1μM)的培養基中4-10天。
生化測定可以用于鑒定DGAT抑制劑的優選測定涉及高通量篩選閃爍親近測定法(SPA)。在該測定中，從人肝cDNA文庫中克隆人DGAT1。將PCR用于在序列的最5’末端增加限制性位點和標記表位和在3’末端增加限制性位點。之后，使用Bac-to-Bac桿狀病毒表達系統_(Invitrogen)可以產生人標記標簽(FT)DGAT1桿狀病毒。將昆蟲細胞(例如，sf9，sf21，或High Five)感染24-72小時，通過離心收集。將細胞沉淀重懸浮在均化緩沖液中并使用均化裝置如Microfluidizer裂解。通過在45,000rpm下超離心1小時收集全細胞膜。
將小等分試樣(0.2μg/孔)的膜與10μM化合物或氯化汞(作為抑制的陽性對照)在酶底物、二油酰甘油(200μM)的存在下在384孔平板中溫育，終體積為50μL/孔。通過加入放射性底物，14C酰基輔酶A(25μM，如癸酰CoA，棕櫚酰CoA，油酰CoA)開始反應，在室溫下溫育2小時。通過加入在氯化汞中的麥胚凝集素(WGA)SPA珠(0.2mg)終止反應。使細胞膜與珠偶聯過夜。可以使用例如化學發光圖像平板讀數器(CLIPR)或TopCount裝置測量信號。
發現通過上述測定評估的本發明的化合物具有DGAT-抑制活性。參見下表11。
表11
*圖注“+”表示IC50值＞0.1μM“++”表示0.1μM≥IC50值≥0.01μM“+++”表示IC50值＜0.01μM
在本說明書中引用的所有出版物和專利申請通過參考結合于此，如同每個單獨的出版物或專利申請被具體地和單獨地被指示通過參考結合。盡管為了理解清楚，上述發明已經通過舉例說明和實施例的方式在某些細節上描述，但對于本領域技術人員顯而易見的是，根據本發明的教導可以在不背離后附權利要求的精神或范圍下對其進行某些修改和改進。
權利要求
1.一種通式(I)的化合物或其藥用鹽，前藥或立體異構體， 其中X選自C(R1)和N；Y選自C(R1)，C(R2)(R2)，N和N(R2)；Z選自O和S；W1是取代或未取代的成員，該成員選自環(C3-C8)烷基，雜環(C3-C8)烷基，芳基和雜芳基；W2是取代或未取代的成員，該成員選自環(C3-C8)烷基，雜環(C3-C8)烷基，芳基和雜芳基；L1選自鍵，(C1-C4)亞烷基，(C2-C4)亞鏈烯基，O和N(Ra)C(O)；L2選自鍵，O，(C1-C4)亞烷基，(C2-C4)亞鏈烯基，(C1-C4)雜亞烷基和N(Ra)C(O)；下標m為0或1；任選地，當m為1和L2是鍵時，W2上的取代基可以與W1上的取代基結合形成與W1和螺稠合或與W2稠合的5-，6-或7-元環，其中所述環是飽和的或不飽和的并且含有0，1或2個選自N，O和S的雜原子作為環成員；每個R1獨立地選自H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，氟代(C1-C8)烷基，芳基，芳基(C1-C4)烷基，C(O)Ra，CO2Ra和C(O)NRaRb；每個R2獨立地選自H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，氟代(C1-C8)烷基，C(O)Ra，CO2Ra，C(O)NRaRb，芳基和芳基(C1-C4)烷基；R3和R4獨立地選自H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，C(O)Ra，CO2Ra，C(O)NRaRb和(C1-C4)亞烷基-ORa；任選地，R3和R4可以結合形成3-，4-，5-或6-元螺環；任選地，R2，R3或R4可以與W1結合形成5-，6-或7-元稠環，該稠環含有0-3個選自N，O和S的雜原子；R5和R6獨立地選自H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，C(O)Ra和CO2Ra；任選地，R5和R6可以與氮原子結合形成5-，6-或7-元環；任選地，當X是C(R1)時或當Y包括R1或R2基團時，R5或R6可以與R1或R2結合形成5-，6-或7-元稠環，該稠環含有連接R5或R6的氮原子；R7選自H，(C1-C8)烷基，鹵代(C1-C4)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，C(O)Ra，ORa和NRaRb；任選地，當X是C(R1)時，R7可以與R1結合形成5-，6-或7-元稠環；每個Ra和Rb獨立地選自H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，氟代(C1-C8)烷基，芳基和芳基(C1-C4)烷基；和虛線表示任選的鍵；條件是所述化合物不同于 其中R8選自H，NO2，Cl，甲氧基，甲基和苯基。
2.權利要求1的化合物，其中X是N。
3.權利要求2的化合物，其中Z是O。
4.權利要求3的化合物，其中L1是鍵和W1是取代的或未取代的成員，該成員選自苯，吡啶，噻吩，噁唑，噻唑，苯并噁唑，苯并噻唑，苯并呋喃，苯并噻吩，(C4-C7)環烷，(C5-C7)環烯，1，2，3，4-四氫化萘和1，2-二氫化茚。
5.權利要求4的化合物，其中W1是取代的或未取代的成員，該成員選自苯，吡啶，噻吩，1，2，3，4-四氫化萘和1，2-二氫化茚。
6.權利要求5的化合物，其中下標m為1。
7.權利要求5的化合物，其中下標m為1且L2為鍵。
8.權利要求7的化合物，其中W2是取代的或未取代的成員，該成員選自苯，吡啶，(C4-C7)環烷，(C5-C7)環烯，吡咯烷，哌啶，哌嗪和嗎啉。
9.權利要求4的化合物，其中R5和R6獨立地選自H，(C1-C8)烷基，C(O)Ra和CO2Ra。
10.權利要求9的化合物，其中R5和R6獨立地選自H和(C1-C8)烷基。
11.權利要求10的化合物，其中R3和R4獨立地選自H和(C1-C8)烷基。
12.權利要求11的化合物，其中R7選自H，(C1-C8)烷基，鹵代(C1-C4)烷基，OH和NRaRb，其中Ra和Rb獨立地選自H和(C1-C8)烷基。
13.權利要求11的化合物，其中R7是H，(C1-C8)烷基或鹵代(C1-C4)烷基。
14.一種藥物組合物，包含藥用賦形劑和通式(I)的化合物或其藥用鹽、前藥或立體異構體 其中X選自C(R1)和N；Y選自C(R1)，C(R2)(R2)，N和N(R2)；Z選自O和S；W1是取代的或未取代的成員，該成員選自環(C3-C8)烷基，雜環(C3-C8)烷基，芳基和雜芳基；W2是取代的或未取代的成員，該成員選自環(C3-C8)烷基，雜環(C3-C8)烷基，芳基和雜芳基；L1選自鍵，(C1-C4)亞烷基，(C2-C4)亞鏈烯基，O和N(Ra)C(O)；L2選自鍵，O，(C1-C4)亞烷基，(C2-C4)亞鏈烯基，(C1-C4)雜亞烷基和N(Ra)C(O)；下標m是0或1；任選地，當m為1和L2是鍵時，W2上的取代基可以與W1上的取代基結合形成與W1和螺稠合或與W2稠合的5-，6-或7-元環，其中所述環是飽和的或不飽和的并且含有0，1或2個選自N，O和S的雜原子作為環成員；每個R1獨立地選自H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，氟代(C1-C8)烷基，芳基，芳基(C1-C4)烷基，C(O)Ra，CO2Ra和C(O)NRaRb；每個R2獨立地選自H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，氟代(C1-C8)烷基，C(O)Ra，CO2Ra，C(O)NRaRb，芳基和芳基(C1-C4)烷基；R3和R4獨立地選自H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，C(O)Ra，CO2Ra，C(O)NRaRb和(C1-C4)亞烷基-ORa；任選地，R3和R4可以結合形成3-，4-，5-或6-元螺環；任選地，R2，R3或R4可以與W1結合形成5-，6-或7-元稠環，該稠環含有0-3個選自N，O和S的雜原子；R5和R6獨立地選自H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，C(O)Ra和CO2Ra；任選地，R5和R6可以與氮原子結合形成5-，6-或7-元環；任選地，當X是C(R1)時或當Y包括R1或R2基團時，R5或R6可以與R1或R2結合形成5-，6-或7-元稠環，該稠環含有連接R5或R6的氮原子；R7選自H，(C1-C8)烷基，鹵代(C1-C4)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，C(O)Ra，ORa和NRaRb；任選地，當X是C(R1)時，R7可以與R1結合形成5-，6-或7-元稠環；Ra和Rb各自獨立地選自H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，氟代(C1-C8)烷基，芳基和芳基(C1-C4)烷基；和虛線表示任選的鍵；條件是所述化合物不同于 其中R8選自H，NO2，Cl，甲氧基，甲基和苯基。
15.權利要求14的藥物組合物，其中X是N。
16.權利要求15的藥物組合物，其中Z是O。
17.權利要求16的藥物組合物，其中L1是鍵和W1是取代的或未取代的成員，該成員選自苯，吡啶，噻吩，噁唑，噻唑，苯并噁唑，苯并噻唑，苯并呋喃，苯并噻吩，(C4-C7)環烷，(C5-C7)環烯，1，2，3，4-四氫化萘和1，2-二氫化茚。
18.權利要求17的藥物組合物，其中W1是取代的或未取代的成員，該成員選自苯，吡啶，噻吩，1，2，3，4-四氫化萘和1，2-二氫化茚。
19.權利要求18的藥物組合物，其中下標m為1。
20.權利要求18的藥物組合物，其中下標m為1且L2為鍵。
21.權利要求20的藥物組合物，其中W2是取代的或未取代的成員，該成員選自苯，吡啶，(C4-C7)環烷，(C5-C7)環烯，吡咯烷，哌啶，哌嗪和嗎啉。
22.權利要求17的藥物組合物，其中R5和R6獨立地選自H，(C1-C8)烷基，C(O)Ra和CO2Ra。
23.權利要求22的藥物組合物，其中R5和R6獨立地選自H和(C1-C8)烷基。
24.權利要求23的藥物組合物，其中R3和R4獨立地選自H和(C1-C8)烷基。
25.權利要求24的藥物組合物，其中R7選自H，(C1-C8)烷基，鹵代(C1-C4)烷基，OH和NRaRb，其中Ra和Rb獨立地選自H和(C1-C8)烷基。
26.權利要求24的藥物組合物，其中R7是H，(C1-C8)烷基或鹵代(C1-C4)烷基。
27.一種治療疾病或病癥的方法，所述疾病或病癥選自肥胖癥，糖尿病，神經性厭食癥，貪食癥，惡病質，X綜合征，胰島素抗性，高血糖，高尿酸血癥，高胰島素血癥，血膽固醇過多，血脂過多，血脂異常，混合性血脂異常，血甘油三酯過多，非酒精性脂肪肝病，動脈粥樣硬化，動脈硬化，急性心力衰竭，充血性心力衰竭，冠狀動脈病，心肌病，心肌梗死，心絞痛，高血壓，低血壓，中風，局部缺血，缺血性再灌注損傷，動脈瘤，再狹窄，脈管狹窄，實體瘤，皮膚癌，黑素瘤，淋巴瘤，乳腺癌，肺癌，結直腸癌，胃癌，食管癌，胰腺癌，前列腺癌，腎癌，肝癌，膀胱癌，子宮頸癌，子宮癌，睪丸癌和卵巢癌，該方法包含向需要其的受治療者給藥有效量的通式(I)的化合物或其藥用鹽、前藥或立體異構體 其中X選自C(R1)和N；Y選自C(R1)，C(R2)(R2)，N和N(R2)；Z選自O和S；W1是取代或未取代的成員，該成員選自環(C3-C8)烷基，雜環(C3-C8)烷基，芳基和雜芳基；W2是取代或未取代的成員，該成員選自環(C3-C8)烷基，雜環(C3-C8)烷基，芳基和雜芳基；L1選自鍵，(C1-C4)亞烷基，(C2-C4)亞鏈烯基，O和N(Ra)C(O)；L2選自鍵，O，(C1-C4)亞烷基，(C2-C4)亞鏈烯基，(C1-C4)雜亞烷基和N(Ra)C(O)；下標m為0或1；任選地，當m為1和L2是鍵時，W2上的取代基可以與W1上的取代基結合形成與W1和螺稠合或與W2稠合的5-，6-或7-元環，其中所述環是飽和的或不飽和的并且含有0，1或2個選自N，O和S的雜原子作為環成員；每個R1獨立地選自H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，氟代(C1-C8)烷基，芳基，芳基(C1-C4)烷基，C(O)Ra，CO2Ra和C(O)NRaRb；每個R2獨立地選自H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，氟代(C1-C8)烷基，C(O)Ra，CO2Ra，C(O)NRaRb，芳基和芳基(C1-C4)烷基；R3和R4獨立地選自H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，C(O)Ra，CO2Ra，C(O)NRaRb和(C1-C4)亞烷基-ORa；任選地，R3和R4可以結合形成3-，4-，5-或6-元螺環；任選地，R2，R3或R4可以與W1結合形成5-，6-或7-元稠環，該稠環含有0-3個選自N，O和S的雜原子；R5和R6獨立地選自H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，C(O)Ra和CO2Ra；任選地，R5和R6可以與氮原子結合形成5-，6-或7-元環；任選地，當X是C(R1)時或當Y包括R1或R2基團時，R5或R6可以與R1或R2結合形成5-，6-或7-元稠環，該稠環含有連接R5或R6的氮原子；R7選自H，(C1-C8)烷基，鹵代(C1-C4)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，C(O)Ra，ORa和NRaRb；任選地，當X是C(R1)時，R7可以與R1結合形成5-，6-或7-元稠環；Ra和Rb各自獨立地選自H，(C1-C8)烷基，(C2-C8)鏈烯基，(C2-C8)炔基，氟代(C1-C8)烷基，芳基和芳基(C1-C4)烷基；和虛線表示任選的鍵；條件是所述化合物不同于 其中R8選自H，NO2，Cl，甲氧基，甲基和苯基。
28.按照權利要求27的方法，其中所述化合物是口服給藥的。
29.按照權利要求27的方法，其中所述化合物是與另外的活性劑聯合給藥的。
30.按照權利要求29的方法，其中所述另外的活性劑選自抗高血脂藥，血漿HDL-升高劑，抗高膽固醇血癥藥，HMG-CoA還原酶抑制劑，HMG-CoA合成酶抑制劑，胰脂肪酶抑制劑，SNRI，食欲抑制劑，PPAR調節劑，MTP抑制劑，CETP抑制劑，鯊烯環氧酶抑制劑，鯊烯合成酶抑制劑，酰基-輔酶A膽固醇酰基轉移酶抑制劑，維生素B3，膽固醇吸收抑制劑，膽汁酸多價螯合劑陰離子交換樹脂，低密度脂蛋白受體誘導劑，fibrate，普羅布考，維生素B6，維生素B12，抗氧化劑維生素，β-阻斷劑，血管緊張素II拮抗劑，血管緊張素轉化酶抑制劑，血小板聚集抑制劑，血纖蛋白原受體拮抗劑，阿司匹林，phentiramines，β3腎上腺素能受體激動劑，磺脲類，雙胍，α-葡糖苷酶抑制劑，胰島素促分泌素，胰島素和護肝劑。
31.按照權利要求27的方法，其中所述疾病或病癥選自糖尿病，肥胖癥和X綜合征。
32.按照權利要求27的方法，其中所述疾病或病癥是肥胖癥。
33.按照權利要求27的方法，其中所述疾病與DGAT相關。
34.按照權利要求27的方法，其中所述疾病受DGAT調節。
35.按照權利要求27的方法，其中所述化合物干涉DGAT和配體之間的相互作用。
36.按照權利要求27的方法，其中所述受治療者選自人，大鼠，狗，牛，馬和小鼠。
37.按照權利要求27的方法，其中所述受治療者是人。
38.按照權利要求27的方法，其中X是N。
39.按照權利要求38的方法，其中Z是O。
40.按照權利要求39的方法，其中L1是鍵和W1是取代的或未取代的成員，該成員選自苯，吡啶，噻吩，噁唑，噻唑，苯并噁唑，苯并噻唑，苯并呋喃，苯并噻吩，(C4-C7)環烷，(C5-C7)環烯，1，2，3，4-四氫化萘和1，2-二氫化茚。
41.按照權利要求40的方法，其中W1是取代的或未取代的成員，該成員選自苯，吡啶，噻吩，1，2，3，4-四氫化萘和1，2-二氫化茚。
42.按照權利要求41的方法，其中下標m為1。
43.按照權利要求41的方法，其中下標m為1且L2為鍵。
44.按照權利要求43的方法，其中W2是取代的或未取代的成員，該成員選自苯，吡啶，(C4-C7)環烷，(C5-C7)環烯，吡咯烷，哌啶，哌嗪和嗎啉。
45.按照權利要求40的方法，其中R5和R6獨立地選自H，(C1-C8)烷基，C(O)Ra和CO2Ra。
46.按照權利要求45的方法，其中R5和R6獨立地選自H和(C1-C8)烷基。
47.按照權利要求46的方法，其中R3和R4獨立地選自H和(C1-C8)烷基。
48.按照權利要求47的方法，其中R7選自H，(C1-C8)烷基，鹵代(C1-C4)烷基，OH和NRaRb，其中Ra和Rb獨立地選自H和(C1-C8)烷基。
49.按照權利要求47的方法，其中R7是H，(C1-C8)烷基或鹵代(C1-C4)烷基。
50.權利要求1的化合物，該化合物選自 和
51.權利要求1的化合物，該化合物選自
52.一種具有選自Ia，Ib，Ic，Id，Ie，If和Ig的通式的化合物。
53.一種具有選自Ih，Ii，Ij和Ik的通式的化合物。
54.一種具有選自Il，Im，In，Io，Ip和Iq的通式的化合物。
55.一種具有選自Ir，Is，It，Iu，Iv，Iw，Ix和Iy的通式的化合物。
全文摘要
本發明提供用于治療或預防代謝和細胞增殖疾病或病癥的化合物，藥物組合物和方法。特別是，本發明提供調節與脂質代謝和細胞增殖有關的蛋白質的活性的化合物。
文檔編號A61K31/542GK1753897SQ200380109107
公開日2006年3月29日 申請日期2003年11月21日 優先權日2002年11月22日
發明者B·M·福克斯, 古川升, 郝小林, 飯尾清誠, 稻葉隆之, S·M·杰克遜, F·凱澤, M·拉貝爾, 李克學, 松井拓也, D·L·麥克明, 小川暢也, S·M·魯本斯坦, 佐川勝一, 杉本和幸, 鈴木雅博, 田中正浩, 葉國森, 吉田厚仁, 張健 申請人:日本煙草產業株式會社