專利名稱：一種新型血管緊張素Ⅱ的1型受體拮抗劑的制備及其降血壓、抗腫瘤等應用的制作方法
專利說明一種新型血管緊張素Ⅱ的1型受體拮抗劑的制備及其降血壓、抗腫瘤等應用 本發明涉及醫藥化學領域，具體地說涉及一類具有預防和治療高血壓及其他心腦腎血管疾病、偏頭痛、肺動脈高壓等疾病以及有效地抑制多種原位癌，如乳腺癌、前列腺癌、胰腺癌、肝癌等腫瘤細胞的增殖、遷移的藥物。

背景技術：
腎素-血管緊張素系統(RAS)是調節血壓和電解質平衡的重要因素。由肝臟分泌的血管緊張素原，在腎素的作用下，轉化為血管緊張素I(Ang I)。Ang I在血管緊張素轉化酶(ACE)作用下生成血管緊張素II(Ang II)。Ang II的受體主要有Ang II 1型受體(AT1受體)、AngII2型受體(AT2受體)兩種受體亞型。目前認為Ang II的生理作用主要是由AT1受體介導的。當Ang II和AT1受體作用時，導致心血管收縮加強、心肌血管平滑肌肥厚、腎鈉重吸收增加；當Ang II和AT2受體作用時，使細胞增殖下降、血漿精氨酸加壓素(AVP)水平下降、對收縮血管物質的反應下降。
1970年Marshall等人合成了第一個受體拮抗劑非肽類化合物沙拉新(Sarala-sinSarl-Ala8-Ang II)，它與Ang II的結構十分相似，其對離體組織有專屬性拮抗作用。但在臨床實際應用中，由于存在口服無效，代謝不穩定，并具有部分Ang II激動作用而受到限制。1982年，日本武田制藥公司在研究咪唑乙酸類化合物的利尿降壓作用時，首先發現S-8307能夠抑制Ang II誘發的兔動脈收縮和升壓效應，雖然活性較弱，但屬于Ang II受體專一性拮抗劑，且沒有Saralasin的激動效應。80年代末期，Dupont公司(Med.Rev.1992，12149-158)和Smithkline Beecham(Drugs of the fixture.1992，17575-593)公司的研究人員，利用假定的AngII活性構象的兩種不同分子模型，將Ang II的C-末端區域與S-8307排列比較，對S-8307進行了系列的結構修飾，以增強與受體的親和力，結果分別得到了兩種不同結構類型的、都具有較高活性的化合物Dup-753(Losartan)和SK&F-108566(Eprosartan)，Losartan于1994年在瑞典上市(Drugs of the Future.1997，221079-1085)，Eprosartan于1997年在德國上市(Drugs ofthe future.1996，21(8)794-798)。
非肽類Ang II受體拮抗劑以其與Ang II受體親和力強、選擇性高、口服有效、作用時間長等優點而被看好，是一類很有前途的降壓藥。目前上市的非肽類Ang II受體拮抗劑有氯沙坦(Losartan)、纈沙坦(Valsartan)、坎地沙坦(Candesartan)、伊貝沙坦(Irbesartan)、奧美沙坦(Olmesartan)、替米沙坦(Telmisartan)和伊普沙坦(Eprosartan)。
近年來研究表明，Ang II不僅具有調節血壓的作用，還具有促進心肌細胞、神經細胞、嗜鉻細胞、成纖維細胞以及多種上皮來源的細胞(如血管內皮細胞、肺泡上皮細胞等)增殖的功能，Ang II在腫瘤的發生發展過程中起著重要作用。
目前，絕大多數的抗腫瘤藥具有較強的毒副作用，而AT1受體拮抗劑是毒副作用相對較小的一類抗腫瘤藥。AT1受體拮抗劑特異性地抑制1型受體的活性，從而產生比較理想的抑制腫瘤血管生成、腫瘤生長和轉移的作用。2005年Yamagishi等(J Urol，2005，173(2)441-441)發現AT1受體拮抗劑坎地沙坦(candesartan)可抑制前列腺癌細胞在體外及裸鼠體內的增殖；卵巢癌病人(Clin Cancer Res，2005，11(7)2686-2694)經坎地沙坦治療可顯著降低患者體內血管內皮生長因子(VEGF)水平和腹水體積，為晚期卵巢癌患者的治療提供了新的治療方法；口服坎地沙坦用于治療鼠腎癌細胞向肺轉移模型可以有效抑制癌細胞向肺擴散，同時降低體內VEGF水平(Cancer Res 2002，62(15)4176-4179)。AT1受體拮抗劑毒副作用小、靶向性好、特異性高，通過抑制血管生成、炎癥發生及細胞信號轉導等多種途徑抑制腫瘤的發生與生長，能在分子水平上高效地抑制腫瘤活性。與絕大多數抗腫瘤藥物相比，AT1受體拮抗劑是一種前景好的抗腫瘤的新藥。
目前上市藥物和進入臨床試驗的化合物中大多數都包含了四氮唑基團，但由于四氮唑的合成和代謝存在一定的缺陷，如其合成需要用到有毒性及易爆炸的疊氮化合物，在體內它容易以葡萄糖苷酸化的形式被代謝，導致化合物體內存在時間縮短(Drug Metab Dispos，1993，21792-799)。而且化合物中含有2個酸性基團時(四氮唑和羧基)，由于其極性大，一般口服生物利用度不高，需要形成前藥以提高口服性(Bioorg Med Chem Lett，1944，4201-206)。


發明內容
為尋找制備方便，并具有更佳AT1受體拮抗效果的新藥，本發明合成了一種氨基酸聯苯化合物，該化合物在降血壓和抑制腫瘤細胞生長等方面均優于依貝沙坦。
本發明的原理是利用5-氧代-1，2，4-噁二唑與羧基具等電位性(Annu Rep MedChem，1986，21283-291)、比四氮唑有更好的親脂性、口服生物利用度更高、合成路線安全的特點，將聯苯與氨基酸、噁二唑有機地連接起來，設計合成了化合物1，結構為
化合物1 本發明還提供了該化合物的制備方法，該方法的具體步驟為 氨基酸與甲醇在氯化亞砜作用下發生酯化反應生成氨基酸甲酯鹽酸鹽；該氨基酸甲酯鹽酸鹽與2’-氰基-4-溴甲基聯苯發生烷基化反應，爾后與酰氯發生酰化反應，生成N-[4-(2-氰基苯基)芐基]-N-烷酰基-L-氨基酸甲酯；該酰化產物與鹽酸羥胺反應后，與氯甲酸酯反應，然后加熱環合，生成N-[4-(2-(5-氧代-1，2，4-噁二唑)苯基)芐基]-N-烷酰基-L-氨基酸甲酯繼爾將甲酯水解，制得氨基酸聯苯化合物。
經進一步的研究發現，上述化合物對高血壓、心腦腎血管疾病、偏頭痛、肺動脈高壓以及原位癌如胃癌、胰腺癌、卵巢癌、前列腺癌、肺癌、膀胱癌、肝癌、腎癌、乳腺癌、宮頸癌、結腸癌等疾病可能具有較好的預防或治療作用。因此，本發明的化合物可用于制備預防或治療高血壓的藥物以及抗腫瘤的藥物。

具體實施例方式 實施例1 該化合物N-[4-(2-(5-氧代-1，2，4-噁二唑)苯基)芐基]-N-丙酰基-L-纈氨酸的制備方法具體包括以下步驟 步驟1合成(L)-纈氨酸甲酯鹽酸鹽 常溫下向50mL三頸燒瓶中加入5.0mL無水甲醇，攪拌，緩慢滴加1.0mL氯化亞砜(13.9m mol)，滴加完畢后，攪拌30min，加入1.0g(L)-纈氨酸(8.55m mol)，攪拌過夜，減壓蒸除溶劑。用甲醇-乙醚(1∶5)重結晶，得無色針狀固體1.35g，收率94.8％，mp128-132℃。
步驟2合成N-[4-(2-氰基苯基)芐基]-L-纈氨酸甲酯 在N2保護條件下，將2.0g(L)-纈氨酸甲酯鹽酸鹽(12.0m mol)溶于15.0mL DMF中，攪拌，滴加5mL三乙胺(39.1m mol)，然后加入3.0g 2’-氰基-4-溴甲基聯苯(11.0m mol)。
70℃反應，反應2h，迅速冷卻，加入15.0mL蒸餾水，乙酸乙酯20.0mL萃取兩次。合并有機相，飽和碳酸氫鉀(KHCO3)溶液洗兩次，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，得黃色油狀物。柱層分離，洗脫劑(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)，得無色油狀液體3.28g，收率84.8％。1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ7.78-7.25(m，8H，Ph-H)，3.90，3.65(two d，2H，J＝13.5Hz，-NH-CH2-)，3.74(s，3H，-OCH3)，3.05(d，1H，J＝6.3Hz，-CO-CH(CH3)2-)，1.94(m，1H，-CH2-NH-)，0.96，0.97(two d，6H，J＝6.6Hz，-CH-(CH3)2；MS(m/z)323.2[M+1]+，345.2[M+Na]+。
步驟3合成N-[4-(2-氰基苯基)芐基]-N-丙酰基-L-纈氨酸甲酯 將3.8g N-[4-(2-氰基苯基)芐基]-L-纈氨酸甲酯(11.8m mol)溶于31.0mL甲苯，滴加5.0mL三乙胺(39.1m mol)和0.09g DMAP(0.7m mol)，滴加3.3g(35.6m mol)正丙酰氯，氮氣保護，反應1h，升溫至45℃，繼續反應1h。反應結束后，冷卻，加入15.0mL蒸餾水，有機相依次用1.0mol/L鹽酸、5.0％的碳酸氫鈉(NaHCO3)、去離子水洗，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，得黃色油狀物。柱層分離，洗脫劑(石油醚-乙酸乙酯＝8∶1)，白色液體3.35g，收率74.9％。1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ7.72-7.26(m，8H，Ph-H)，5.04(dd，1H，-Ph-CH2-)，4.68(s，1H，-N-CH(CH3)2)，4.15(dd，1H，-Ph-CH2-)，3.40(d，3H，-O-CH3)，2.43-2.30(m，3H，-CO-CHCH2(CH3)2-，-CH2CH3)，1.28-0.84(m，9H，-CH(CH3)2，-CH2CH3)；MS(m/z)379.2[M+1]+，401.2[M+Na]+。
步驟4合成N-[4-((2-(N-羥基)脒基)苯基)芐基]-N-丙酰基-L-纈氨酸甲酯 3.7g N-[4-(2-氰基苯基)芐基]-N-丙酰基-L-纈氨酸甲酯(9.9m mol)溶于60.0mL DMSO中，加入2.76g鹽酸羥胺(39.7m mol)和10.1mL三乙胺(61.2m mol)，90℃反應16h，冷卻后用水(15.0mL)稀釋，乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，得黃色油狀物。柱層分離，洗脫劑(石油醚-乙酸乙酯＝2∶1)，得白色固體1.38g，收率34.4％。1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ7.71-7.15(m，8H，Ph-H)，4.98(d，1H，-Ph-CH2-)，4.75(d，2H，-C-NH2)，4.63(s，1H，-N-CH(CH3)2)，4.15(m，1H，-Ph-CH2-)，4.04(d，2H，-N-CH2-)，4.43(s，2H，-NH2)，3.39(s)，3.37(d，3H，-O-CH3)，2.62-2.25(m，3H，-CO-CHCH2(CH3)2-，-CH2CH3)，1.27-0.86(m，9H，-CH(CH3)2，-CH2CH3)；MS(m/z)410[M-1]-。
步驟5合成N-[4-((2-(N-異丁酸酐基)脒基)苯基)芐基]-N-丙酰基-L-纈氨酸甲酯 1.8g N-[4-(2-氰基苯基)芐基]-N-丙酰基-L-纈氨酸甲酯(4.4m mol)于20.0mL DMF中，加入0.43mL吡啶(5.3m mol)，攪拌，逐滴加入0.53mL氯甲酸異丁酯(4.4m mol)，常溫下攪拌2h，將反應液倒入15.0mL水中，乙酸乙酯萃取，蒸餾水洗滌，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干溶劑，得黃色油狀物。柱層分離，洗脫劑(石油醚-乙酸乙酯＝4∶1)，得無色固體1.96g，收率87.4％。1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ7.64-7.15(m，8H，Ph-H)，5.01-4.96(m，1H，-Ph-CH2-)，4.69(d，2H，-C-NH2)，4.31-4.09(m，1H，-Ph-CH2-)，4.01(d，2H，-CH-(CH3)2，-CH-(CH3)2)，3.40(d，3H，-O-CH3)，2.38-2.25(m，3H，-CO-CHCH2(CH3)2-，-CH2CH3)，2.00(d，2H，-CH2(CH3)2)，1.27-0.83(m，15H，-CH(CH3)2，-CH2CH3，-CH(CH3)2)；LRMS(m/z)512[M+1]+。
步驟6N-[4-(2-(5-氧代-1，2，4-噁二唑)苯基)芐基]-N-丙酰基-L-纈氨酸甲酯 1.46g N-[4-(2-(5-氧代-1，2，4-噁二唑)苯基)芐基]-N-丙酰基-L-纈氨酸甲酯(2.85m mol)溶于10mL無水氯化鈣干燥的二甲苯，攪拌，加熱回流5h，減壓蒸干溶劑，得黃色液體，重結晶(石油醚-乙酸乙酯＝6∶1)，得白色結晶物0.983g，收率78.7％。1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ9.26(s，1H，-NH-)，7.76-7.18(m，8H，Ph-H)，4.88-4.83(m，1H，-Ph-CH2-)，4.63(s，1H，-N-CH(CH3)2)，4.31-4.00(m，1H，-Ph-CH2-)，3.40(d，3H，-O-CH3)，2.57-2.03(m，3H，-CO-CHCH2(CH3)2-，-CH2CH3)，1.15-0.82(m，9H，-CH(CH3)2，-CH2CH3)；MS(m/z)438[M+1]+，460[M+Na]+。
步驟7N-[4-(2-(5-氧代-1，2，4-噁二唑)苯基)芐基]-N-丙酰基-L-纈氨酸 0.962g N-[4-(2-(5-氧代-1，2，4-噁二唑)苯基)芐基]-N-丁酰基-L-纈氨酸(2.2m mol)溶于0.5mL DMF中，加入6.0mL 2mol/L NaOH溶液，加入1.0mL甲醇，70.0℃攪拌3h，用2.0mol/L鹽酸調節pH至3，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干溶劑，得淺紅色固體。柱層分離，洗脫劑(氯仿-甲醇＝50∶1)，得白色固體0.81g，收率86.3％，熔點79.1-82.4℃。1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ7.97-7.18(m，8H，Ph-H)，4.71-4.62(m，1H，-Ph-CH2-)，4.23-4.19(d，1H，-N-CH(CH3)2)，3.72(d，1H，-Ph-CH2-)，2.81-2.42(m，3H，-CO-CHCH2(CH3)2-，-CH2CH3)，1.23-0.96(m，9H，-CH(CH3)2，-CH2CH3)；LRMS(m/z)424[M+1]+，446[M+Na]+。
實施例2降壓藥物活性篩選實驗 實驗動物自發性高血壓大鼠(SHR)30只，健康，雄性，購自上海必凱實驗動物有限公司，合格證號滬動合證證字第152號； 受試藥品降壓活性化合物N-[4-(2-(5-氧代-1，2，4-噁二唑)苯基)芐基]-N-丙酰基-L-纈氨酸(化合物1)。
陽性對照藥伊貝沙坦，臨床用量為150mg/kg，設人體重為60kg，人用劑量為15/6mg/kg，換算為大鼠劑量15mg/kg。
實驗方法選用30只自發性高血壓大鼠(SHR)模型，分為空白組，陽性對照組，化合物1給藥組，用小動物無創傷血壓換能器經載波放大之后連至MPA-HBBS型清醒自由活動動物血壓記錄分析系統(上海，奧爾科特)，四肢皮下插入針形電極，連接到交流放大器用于監測標準二導聯心電圖。股動脈插管法測量清醒大鼠主動脈平均動脈壓(MAP)，收縮壓(SAP)，舒張壓(DAP)，心率(HR)及心電圖(ECG)。
試驗時將待試化合物配制成濃度為15mg/kg的水溶液。陽性對照藥伊貝沙坦，試驗時配制成濃度為15mg/kg的水溶液。
試驗前SHR采取股動脈進行手術，過夜恢復。第二天SHR連接多道生理信號系統，在線連續檢測檢測血壓，記錄給藥前及給藥后血壓值變化。
數據處理所有實驗數據均以均數±標準差(x±SD)表示，用藥后各組間血壓比較用完全隨機設計的方差分析，如各組總體均數不等，再用多個樣本均數間的多重比較，即q檢驗進行處理。
實驗結果血壓測試結果以治療前后血壓差值作為變量，各組均值比較有顯著差異(P＜0.01)，再經多樣本均數的q檢驗證明，化合組1組與空白組比較均有極顯著差異(P＜0.01)，化合物1組給藥后2h內血壓降低值與陽性對照組比較均有顯著差異(P＜0.05)，降壓效果顯著，說明化合物1優于陽性對照伊貝沙坦。
表1.實驗后各組血壓比較(x±SD N＝10)
注與空白組比較*P＜0.01，**P＜0.01；與陽性對照組比較#P＜0.05，##P＜0.01 實施例3對小鼠S180肉瘤的活性實驗 受試動物遠交昆明株小鼠平均體重18～24g，S180肉瘤種鼠(中國科學院藥物研究所提供)。
受試藥物化合物1、依貝沙坦和氯沙坦在無菌條件下將上述藥物溶于最小量吐溫-80中的生理鹽水稀釋至10mg/mL溶液備用。
化合物1對小鼠S180肉瘤抗腫瘤活性實驗無菌條件下于小鼠前胸部皮下接種S180肉瘤，待腫瘤長至直徑4～6mm時，選取生長良好、無潰瘍具半球狀單一腫瘤的小鼠，按同窩同性別隨機分組，每組8只，小鼠口服給藥，并以藥物溶劑作為空白對照，將依貝沙坦、氯沙坦配成相同濃度溶液作為陽性對照，給藥后14天，處死小鼠，剝離腫瘤，稱重，并與對照組比較抑制率。

式中，T給藥組平均瘤重；C對照組平均瘤重。
實驗結果見表2，化合物對S180肉瘤具有明顯的抑制作用。
表2.化合物1對S180肉瘤的抑制作用 實施例4對小鼠3L肺癌的活性實驗 受試動物遠交昆明株小鼠平均體重18～24g。
受試藥物化合物1、依貝沙坦和氯沙坦在無菌條件下將上述藥物溶于最小量吐溫-80中的生理鹽水稀釋至10mg/mL溶液備用。
化合物1對小鼠3L肺癌抗腫瘤活性實驗無菌條件下于小鼠前胸部皮下接種3L肺癌細胞，待腫瘤長至直徑4～6mm時，選取生長良好、無潰瘍具半球狀單一腫瘤的小鼠，按同窩同性別隨機分組，每組8只，小鼠口服給藥，并以藥物溶劑作為空白對照，將依貝沙坦、氯沙坦配成相同濃度溶液作為陽性對照，給藥后14天，處死小鼠，剝離腫瘤，稱重，并與對照組比較抑制率。

式中，T給藥組平均瘤重；C對照組平均瘤重。
實驗結果見表3，化合物1對肺癌腫瘤具有明顯的抑制作用。
表3.化合物1對3L肺癌腫瘤的抑制作用 實施例5對荷瘤裸鼠的抗腫瘤活性實驗 受試動物裸鼠平均6周齡，體重18～24g。
受試藥物化合物1、依貝沙坦和氯沙坦在無菌條件下將上述藥物溶于最小量吐溫-80中的生理鹽水稀釋至0.5mg/mL溶液備用。
化合物1對荷瘤裸鼠的抗腫瘤活性實驗無菌條件下于裸鼠前胸腋下接種卵巢癌細胞B01018，待腫瘤長至直徑4～6mm時，選取生長良好、無潰瘍具半球狀單一腫瘤的小鼠，按同窩同性別隨機分組，每組8只，小鼠口服給藥，并以藥物溶劑作為空白對照，將依貝沙坦、氯沙坦配成相同濃度溶液作為陽性對照給藥后28天，處死小鼠，剝離腫瘤，稱重，并與對照組比較抑制率。

式中，T給藥組平均瘤重；C對照組平均瘤重。
實驗結果見表4，化合物1對卵巢癌腫瘤具有明顯的抑制作用。
表4.化合物1對卵巢癌腫瘤的抑制作用 實施例6對荷瘤裸鼠的抗腫瘤活性實驗 受試動物裸鼠平均6周齡，體重18～24g。
受試藥物化合物1、依貝沙坦和氯沙坦在無菌條件下將上述藥物溶于最小量吐溫-80中的生理鹽水稀釋至0.5mg/mL溶液備用。
化合物1對荷瘤裸鼠的抗腫瘤活性實驗無菌條件下于裸鼠前胸腋下接種前列腺癌細胞DU145，待腫瘤長至直徑4～6mm時，選取生長良好、無潰瘍具半球狀單一腫瘤的小鼠，按同窩同性別隨機分組，每組8只，小鼠口服給藥，并以藥物溶劑作為空白對照，將依貝沙坦、氯沙坦配成相同濃度溶液作為陽性對照給藥后4周，處死小鼠，剝離腫瘤，稱重，并與對照組比較抑制率。

式中，T給藥組平均瘤重；C對照組平均瘤重。
實驗結果見表5，化合物1對前列腺癌腫瘤具有明顯的抑制作用。
表5.化合物1對前列腺癌腫瘤的抑制作用 實施例7對荷瘤裸鼠的抗腫瘤活性實驗 受試動物裸鼠平均6周齡，體重18～24g。
受試藥物化合物1、依貝沙坦和氯沙坦在無菌條件下將上述藥物溶于最小量吐溫-80中的生理鹽水稀釋至0.5mg/mL溶液備用。
化合物1對荷瘤裸鼠的抗腫瘤活性實驗無菌條件下于裸鼠前胸部腋下接種胃癌細胞MKN-28，待腫瘤長至直徑4～6mm時，選取生長良好、無潰瘍具半球狀單一腫瘤的小鼠，按同窩同性別隨機分組，每組8只，小鼠口服給藥，并以藥物溶劑作為空白對照，將依貝沙坦、氯沙坦配成相同濃度溶液作為陽性對照給藥后28天，處死小鼠，剝離腫瘤，稱重，并與對照組比較抑制率。

式中，T給藥組平均瘤重；C對照組平均瘤重。
實驗結果見表6，化合物1對胃癌腫瘤具有明顯的抑制作用。
表6.化合物1對胃癌腫瘤的抑制作用
權利要求
1、一種氨基酸聯苯化合物，其特征在于該化合物是N-[4-(2-(5-氧代-1，2，4-噁二唑)苯基)芐基]-N-丙酰基-L-纈氨酸，其結構為
2、氨基酸聯苯化合物制備方法包括如下步驟
1)合成(L)-纈氨酸甲酯鹽酸鹽
常溫下，向50mL三頸燒瓶中加入5.0～7.0mL無水甲醇，攪拌，緩慢滴加1～1.5mL氯化亞砜，滴加完畢后，攪拌30min，加入(L)-纈氨酸(8.2～8.7m mol)，攪拌過夜，減壓蒸除溶劑，重結晶。
2)合成N-[4-(2-氰基苯基)芐基]-L-纈氨酸甲酯
在N2保護條件下，將(L)-纈氨酸甲酯鹽酸鹽(12.0～15.0m mol)溶于15mL有機溶劑中，常溫下攪拌，滴加30.0m mol～50.0m mol的有機胺，然后加入11～20m mol的2’-氰基-4-溴甲基聯苯。70℃反應1～2h，反應液倒入蒸餾水中，用乙酸乙酯萃取，干燥，減壓蒸除溶劑，柱層分離。
3)合成N-[4-(2-氰基苯基)芐基]-N-丙酰基-L-纈氨酸甲酯
將10.0～15.0m mol N-[4-(2-氰基苯基)芐基]-L-纈氨酸甲酯溶于30.0～50.0mL有機溶劑，滴加30.0m mol～50.0m mol有機胺和0.7～1.0m mol 4-二甲氨基吡啶(DMAP)，滴加30.0～50.0m mol正丙酰氯，反應1～2h。反應液倒入蒸餾水中，有機相依次用鹽酸、飽和的碳酸氫鈉(NaHCO3)溶液、去離子水洗，干燥，減壓蒸除溶劑，柱層分離。
4)合成N-[4-((2-(N-羥基)脒基)苯基)芐基]-N-丙酰基-L-纈氨酸甲酯
9.0～12.0m mol N-[4-(2-氰基苯基)芐基]-N-丙酰基-L-纈氨酸甲酯溶于60.0～80.0mL二甲基亞砜(DMSO)中，加入35.0～40.0m mol鹽酸羥胺和60.0～80.0m mol的有機胺，加熱反應16h。反應液用水稀釋，乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，柱層分離。5)合成N-[4-((2-(N-異丁酸酐基)脒基)苯基)芐基]-N-丙酰基-L-纈氨酸甲酯
4.4～5.2m mol N-[4-(2-氰基苯基)芐基]-N-丙酰基-L-纈氨酸甲酯于20.0～40.0mL(N，N-二甲基甲酰胺)DMF中，加入5.0～8.0m mol有機溶劑，常溫下逐滴加入4.0～6.0m mol氯甲酸酯，冰浴攪拌2h，將反應液倒入水中，乙酸乙酯萃取，干燥，減壓蒸干溶劑，柱層分離。
6)合成N-[4-(2-(5-氧代-1，2，4-噁二唑)苯基)芐基]-N-丙酰基-L-纈氨酸甲酯
2.5～3.0m mol N-[4-(2-(5-氧代-1，2，4-噁二唑)苯基)芐基]-N-丙酰基-L-纈氨酸甲酯溶于10.0～20.0mL無水氯化鈣干燥的二甲苯，加熱回流5h，減壓蒸干溶劑，重結晶。
7)合成N-[4-(2-(5-氧代-1，2，4-噁二唑)苯基)芐基]-N-丙酰基-L-纈氨酸
2.0～3.0m mol N-[4-(2-(5-氧代-1，2，4-噁二唑)苯基)芐基]-N-丁酰基-L-纈氨酸溶于0.5～1.2mL DMF中，加入6mL 2.0～5.0mol/L氫氧化鈉(NaOH)溶液，加入1.0～5.0mL甲醇，70℃攪拌3h，用2.0mol/L鹽酸調節pH至3左右，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干溶劑，柱層分離。
3、根據權利要求2所述的氨基酸聯苯化合物制備方法，其特征在于所述步驟1)中，重結晶的體系為甲醇∶乙醚的體系，混合比例范圍為1∶8～1∶4。
4、根據權利要求2所述的氨基酸聯苯化合物制備方法，其特征在于所述步驟2)中，有機溶劑為DMF、乙腈或丙酮，但又不限于這些溶劑。
5、根據權利要求2所述的氨基酸聯苯化合物制備方法，其特征在于所述步驟3)中，有機溶劑為甲苯、二氯甲烷、氯仿、四氯化碳或四氫呋喃(THF)，但又不限于這些溶劑。
6、根據權利要求2所述的氨基酸聯苯化合物制備方法，其特征在于所述步驟4)中，柱層析分離中的填充劑為硅膠，洗脫劑為石油醚∶乙酸乙酯或石油醚∶二氯甲烷的混合溶劑，混合比例范圍為1∶1～4∶1。
7、根據權利要求2所述的氨基酸聯苯化合物制備方法，其特征在于所述步驟4)中，反應的溫度為90～130℃。
8、根據權利要求2所述的氨基酸聯苯化合物制備方法，其特征在于所述步驟2)、3)、4)中，中的有機胺為三乙胺、三丙胺或N，N-二異丙基乙胺，但又不限于這些有機胺。
9、根據權利要求2所述的氨基酸聯苯化合物制備方法，其特征在于所述步驟5)中，氯甲酸酯為氯甲酸異丁酯、氯甲酸異丙酯、氯甲酸丁酯、氯甲酸丙酯、氯甲酸乙酯或氯甲酸甲酯，但又不限于這些氯甲酸酯。
10、根據權利要求2所述的氨基酸聯苯化合物制備方法，其特征在于所述步驟5)中，有機溶劑為吡啶、甲醇、氯仿、二氯甲烷或四氯化碳，但又不限于這些溶劑。
11、根據權利要求2所述的氨基酸聯苯化合物制備方法，其特征在于所述步驟5)中，柱層析分離中的填充劑為硅膠，洗脫劑為石油醚∶乙酸乙酯或石油醚∶二氯甲烷的混合溶劑，混合比例范圍為3∶1～6∶1。
12、根據權利要求2所述的氨基酸聯苯化合物制備方法，其特征在于所述步驟6)中，重結晶的體系為石油醚∶乙酸乙酯或石油醚∶二氯甲烷的體系，混合比例范圍為6∶1～10∶1。
13、根據權利要求2所述的氨基酸聯苯化合物制備方法，其特征在于所述步驟7)中，NaOH的摩爾濃度范圍為2～5mol/L。
14、權利要求氨基聯苯化合物在制備預防和治療高血壓、冠心病、心腦腎血管疾病、偏頭痛、肺動脈高壓等疾病的藥物，還可以有效地抑制原位癌，如胃癌、胰腺癌、卵巢癌、前列腺癌、肺癌、膀胱癌、肝癌、腎癌、乳腺癌、宮頸癌、結腸癌的增殖和遷移，但又不限于這些腫瘤。
全文摘要
本發明公開了一種新型氨基酸聯苯化合物，該化合物是由聯苯與氨基酸、噁二唑有機地連接起來而成，是血管緊張素II的1型受體拮抗劑，該化合物可用于制備預防或治療高血壓、冠心病、心腦腎血管疾病、偏頭痛、肺動脈高壓等疾病的藥物，也可以有效地抑制原位癌，如胃癌、胰腺癌、卵巢癌、前列腺癌、肺癌、膀胱癌、肝癌、腎癌、乳腺癌、宮頸癌、結腸癌等的增殖、遷移。
文檔編號C07D271/00GK101638393SQ20091019500
公開日2010年2月3日 申請日期2009年9月2日 優先權日2009年9月2日
發明者陳志龍, 溫彩紅, 朱林鋒, 娟 田, 梁麗莎, 丁志樓, 達雅靜 申請人:陳志龍