專利名稱：選擇性雌激素受體亞型調節劑及其合成方法和醫藥用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及一類以雌激素受體為靶標的化合物及其合成方法和醫藥用途。更具體而言，本發明涉及以預防和治療老年癡呆、中樞神經系統紊亂等與雌激素受體相關的疾病以及與年齡相關的神經退化疾病為目的而開發的選擇性雌激素受體亞型調節劑及其合成發法和其醫藥用途。

背景技術：
雌激素受體(estrogen receptor，ER)分為ERα和ERβ兩種亞型，它們在DNA結合區(DBD)有96％的同源性，因此這兩種亞型對DNA有相似的親和力；而在配體結合區(LBD)，兩種亞型只有60％的同源性，提示它們在協同因子的識別和響應上可能存在很大差別；在N末端的A/B區，兩種亞型只顯示了18％的同源性，而且ERβ的A/B區比ERα的A/B區短(分別為530和595個氨基酸殘基)；兩種亞型的組織分布也不相同，ERα在子宮、卵巢、睪丸、垂體、腎、附睪和腎上腺中有高度或中度表達，ERβ則主要分布在前列腺、卵巢、肺、膀胱、腦和血管中。ER兩種亞型存在的這些不同使得研究出只對某一種ER亞型有激動作用而對另一亞型無作用或有拮抗作用的藥物成為可能，所以選擇性雌激素受體亞型調節劑(SERM)的研究也就應運而生。所謂“選擇性”是指SERM在某些組織(如骨、肝、心血管系統)中表現為激動劑，而在另外一些組織(如腦和乳腺)中表現為拮抗劑，且在子宮中可以是激動劑，也可以是拮抗劑。SERM類藥物主要用于預防和治療骨質疏松、乳腺癌以及神經系統疾病。因此尋求有效的SERM是許多藥物化學家的興趣所在。


發明內容
本發明公開了一類選擇性雌激素受體亞型調節劑。
本發明的另一目的還提供該類調節劑的合成方法。
本發明的再一目的是提供了該類選擇性雌激素受體調節劑在制備治療和/或預防中樞神經系統紊亂及與年齡相關的神經退化疾病的藥物中的應用。
本發明的化合物具有如下的母體結構，結構通式如下

或
其中(I)和(II)中的R1為H、鹵素或硝基； (III)中的R1為H時，R2為H、C1～C12烷基、環烷基、酰基或磺酰基；或R1為鹵素或胺基時，R2為H。
其中優選的化合物是 此 外還合成了以下四個類似物IV1～IV4。

IV-1 IV-2 IV-3 IV-4 本發明還提供上述通式化合物(I)、(II)、(III)、(IV)的制備方法，包括如下步驟 一.通式化合物的制備 路線1
反應條件(a)堿(b)還原；(c)催化氫化；(d)N-烷基化； (e)N-酰基化；(f)芳構化；(g)脫保護基R 如路線1所示，通式化合物(I)、(II)、(III)及化合物(IV-1)的合成方法包括 在堿性條件下，取代的鄰硝基苯甲醛或鄰氨基苯甲醛與芳基乙腈衍生物縮合成丙烯腈類化合物A，A經過脫保護基R后為生成(I)； 該丙烯腈類化合物A經雙鍵還原成丙腈類化合物B，B經過脫保護基R后生成(II)； B在催化氫化條件下關環生成3-取代的1，2，3，4-四氫喹啉衍生物C，C經過脫保護基R后生成(III)； 對四氫喹啉衍生物C的氮進行烷基化生成D，D經過脫保護基R后生成(III)； 對四氫喹啉衍生物C的氮進行酰基化生成E，E經過脫保護基R后生成(III)； 對四氫喹啉衍生物C的氮進行芳構化生成F，F經過脫保護基R后生成(IV-1)。
在本發明所提供的合成方法中，(a)～(c)步驟的合成方法參見申請號為200610024644.X的專利。
其中，(d)步驟中的條件NaBH4、羧酸/四氫呋喃、0℃-回流或鹵代烴、氫化鈉/DMF、室溫。
其中，(e)步驟中的條件酰氯、三乙胺/CH2Cl2，、室溫或酸酐、三乙胺/CH2Cl2、室溫。
其中，(f)步驟中的合成方法參見申請號為200610025014.4的專利。
其中，(g)步驟脫去保護基R可以用BBr3/CH2Cl2、EtSNa/DMF、48％HBr或AlCl3/EtSH。
路線2
(IV-2) (IV-3) (IV-3) 反應條件(h)三乙胺，醋酸酐；(i)催化氫化；(j)勞維森試劑； (k)甲酰肼；(l)脫保護基R 如路線2所示，化合物(IV-2)、(IV-3)、(IV-4)的合成方法包括 由取代的鄰硝基苯甲醛與取代的苯乙酸在堿性條件下縮合，生成丙烯酸類化合物中間體G； 丙烯酸類化合物中間體G在催化氫化條件下關環生成環酰胺類化合物H，H經過脫保護基R后生成(IV-2)； 環酰胺類化合物H經勞維森試劑作用形成硫酰胺衍生物I，I經過脫保護基R生成(IV-3)； 硫酰胺衍生物I經甲酰肼在環己醇中回流合成了三氮唑類似物J，J經過脫保護基R生成(IV-4)。
其中(1)步驟脫去保護基的條件為BBr3/CH2Cl2、EtSNa/DMF、48％HBr或AlCl3/EtSH。
藥理實驗證明本發明的選擇性雌激素受體調節劑對ERβ有較強的選擇性，某些化合物對ERα表現為拮抗作用，而對ERβ表現為激動作用。因此在治療各種炎癥及老年癡呆等方面有廣闊的前景。
有益效果 本發明設計及合成的選擇性雌激素受體調節劑結構新穎，操作簡便，易于工業生產。藥理實驗表明是有效的ERβ選擇性雌激素受體調節劑，可用于治療與ERβ相關的疾病。

具體實施例方式 下面結合實施例對本發明的結構和制備方法作進一步闡述，但不限制本發明。
制備實施例 (1).(Z)-2-(4-羥基-苯基)-3-(4-羥基-2-硝基-苯基)-丙烯腈(I)-1
a)(Z)-2-(4-甲氧基-苯基)-3-(4-甲氧基-2-硝基-苯基)-丙烯腈 將0.23g(10mmol)鈉完全溶于50mL無水乙醇中，攪拌下加入1.81g(10mmol)2-硝基-4-甲氧基苯甲醛和1.47g(10mmol)4-甲氧基苯乙腈，室溫攪拌4h，過濾，無水乙醇洗滌得亮黃色固體2.3g，產率77％。
M.p.143-144℃。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ3.86(s，3H)，3.94(s，3H)，6.97(d，J＝8.8Hz，2H)，7.28(m，1H)，7.64(d，J＝8.8Hz，2H)，7.85(s，1H)，7.91(d，J＝8.5Hz，1H).MS(EI)m/e(％)310(80 M+)，293(100)，149(65)，122(70)。
b)(Z)-2-(4-羥基-苯基)-3-(4-羥基-2-硝基-苯基)-丙烯腈(I)-1 將0.23g(0.75mmol)步驟(1)-(a)中制備的(Z)-2-(4-甲氧基-苯基)-3-(4-甲氧基-2-硝基-苯基)-丙烯腈溶于5mL無水二氯甲烷中，冷卻至-10℃，滴加1.0g(0.4mL，4mmol)三溴化硼，室溫攪拌12小時，加水水解，加入2molL-1的氫氧化鈉溶液至不溶物完全溶解，再用2molL-1的鹽酸溶液調節pH＝7，用乙酸乙酯萃取三次，有機相用無水硫酸鎂干燥，濃縮，殘余物經硅膠柱分離(乙酸乙酯/石油醚，體積比1/2)得淡黃色固體0.21g，收率99.2％。
M.p.269-270℃。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)δ6.89(d，J＝8.4Hz，2H)，7.28(dd，J＝2.6Hz，8.5Hz，1H)，7.53(d，J＝8.4Hz，2H)，7.54(s，1H)，7.78(d，J＝8.4Hz，1H)，7.96(s，1H).MS(EI)m/e(％)282(62M+)，265(100)，135(65)，135(75)。
(2).(z)-2-(3-氟-4-羥基-苯基)-3-(4-羥基-2-硝基-苯基)-丙烯腈(I)-2
除使用2.5mmol 2-硝基-4-甲氧基苯甲醛和2.5mmol的3-氟-4-甲氧基苯乙腈代替10mmol 2-硝基-4-甲氧基苯甲醛和10mmol 4-甲氧基苯乙腈外，使用(I)-1中相同的制備方法合成(I)-2。
a)(z)-2-(3-氟-4-甲氧基-苯基)-3-(4-甲氧基-2-硝基-苯基)-丙烯腈 M.p.142-143℃。1HNMR(300 MHz，CDCl3)δ3.94(s，3H)，3.95(s，3H)，7.02(t，J＝8.6Hz，1H)，7.28(dd，J＝2.5Hz，8.6Hz，1H)，7.4 -7.44(m，1H)，7.45-7.47(m，1H)，7.71(d，J＝2.7Hz，1H)，7.85(s，1H)，7.88(d，J＝8.7Hz，1H).MS(EI)m/e(％)328(97M+)，311(100)，149(88)，122(90)。
b)(z)-2-(3-氟-4-羥基-苯基)-3-(4-羥基-2-硝基-苯基)-丙烯腈(I)-2 M.p.256-257℃。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)δ7.08(t，J＝8.8Hz，1H)，7.27(dd，J＝2.7Hz，8.5Hz，1H)，7.34(dd，J＝2.2Hz，7.9 Hz，1H)，7.51(d，J＝2.5 Hz，1H)，7.55(d，J＝2.2Hz，1H)，7.78(d，J＝8.4Hz，1H)，8.05(s，1H).MS(EI)m/e(％)300(50 M+)，283(65)，149(100)。
(3).2-(4-羥基-苯基)-3-(4-羥基-2-硝基-苯基)-丙腈(II)-1
a)2-(4-甲氧基-苯基)-3-(4-甲氧基-2-硝基-苯基)-丙腈 將0.31g(1mmol)(Z)-2-(4-甲氧基-苯基)-3-(4-甲氧基-2-硝基-苯基)-丙烯腈溶于10mL無水四氫呋喃中，冰水浴下分批加入0.057g(1.5mmol)硼氫化鈉，室溫攪拌，TLC監測無原料后，1mol L-1HCl淬滅，減壓濃縮除去四氫呋喃，而后乙酸乙酯萃取，飽和氯化鈉溶液洗滌，有機相無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮得黃色固體0.31g，產率100.0％。
M.p.107-109℃。1HNMR(300 MHz，CDCl3)δ3.15(dd，J＝10.3Hz，13.5Hz，1H)，3.43(dd，J＝5.2Hz，13.2Hz，1H)，3.82(s，3H)，3.88(s，3H)，4.28(dd，J＝5.3Hz，10.1Hz，1H)，6.92(d，J＝8.7Hz，2H)，7.14(dd，J＝2.9Hz，8.6Hz，1H)，7.33(d，J＝8.3Hz，1H)，7.34(d，J＝8.8Hz，2H)，7.57(d，J＝2.7Hz，1H).MS(EI)m/e(％)312(7 M+)，166(100)，146(85)。
b)2-(4-羥基-苯基)-3-(4-羥基-2-硝基-苯基)-丙腈(II)-1 M.p.21 5-216℃。1HNMR(300 MHz，DMSO-d6)δ3.26-3.28(m，2H)，4.31-4.37(m，1H)，6.77(d，J＝8.4Hz，2H)，7.09(dd，J＝2.4Hz，8.2Hz 1H)，7.16(d，J＝8.7Hz，2H)，7.3 1(d，J＝8.5Hz，1H)，7.39(d，J＝2.5Hz，1H).MS(EI)m/e(％)284(5 M+)，152(76)，133(100)。
(4).(Z)-2-(3-氟-4-羥基-苯基)-3-(4-羥基-2-硝基-苯基)-丙腈(II)-2
除使用2.0mmol(Z)-2-(3-氟-4-甲氧基-苯基)-3-(4-甲氧基-2-硝基-苯基)-丙烯腈代替1mmol(Z)-2-(4-甲氧基-苯基)-3-(4-甲氧基-2-硝基-苯基)-丙烯腈外，使用(II)-1中相同的制備方法合成(II)-2。
a)2-(3-氟-4-甲氧基-苯基)-3-(4-甲氧基-2-硝基-苯基)-丙腈 M.p.118-119℃。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ3.12(dd，J＝10.4Hz，13.5Hz，1H)，3.43(dd，J＝5.3Hz，13.5，1H)，3.88(s，3H)，3.91(s，3H)，4.28(dd，J＝5.2Hz，10.3Hz，1H)，6.97(t，J＝8.6Hz，1H)，7.13-7.15(m，1H)，7.16(d，J＝2.6Hz，1H)，7.20(d，J＝2.1Hz，1H)，7.33(d，J＝8.6Hz，1H)，7.59(d，J＝2.7Hz，1H).MS(EI)m/e(％)330(5 M+)，166(100)。
b)2-(3-氟-4-羥基-苯基)-3-(4-羥基-2-硝基-苯基)-丙腈(II)-2 M.p.212-213℃。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)δ3.27-3.39(m，2H)，4.39(t，J＝7.8Hz，1H)，6.93-6.98(m，2H)，7.07-7.16(m，2H)，7.31(d，J＝8.5Hz，1H)，7.39(d，J＝2.4Hz，1H).MS(EI)m/e(％)302(5 M+)，152(100)。
(5).2-(3-硝基-4-羥基-苯基)-3-(4-羥基-2-硝基-苯基)-丙腈(II)-3
除用2.0mmol(Z)-2-(3-硝基-4-甲氧基-苯基)-3-(4-甲氧基-2-硝基-苯基)-丙烯腈代替1mmol(Z)-2-(4-甲氧基-苯基)-3-(4-甲氧基-2-硝基-苯基)-丙烯腈外，使用(II)-1中相同的制備方法合成(II)-3。
a)2-(3-硝基-4-甲氧基-苯基)-3-(4-甲氧基-2-硝基-苯基)-丙腈 M.p.217-219℃。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ3.17(dd，J＝10.6Hz，13.4Hz，1H)，3.45(dd，J＝5.3Hz，13.5Hz，1H)，3.89(s，3H)，3.99(s，3H)，4.37(dd，J＝5.2Hz，10.6 Hz，1H)，7.13-7.19(m，2H)，7.35(d，J＝8.6Hz，1H)，7.60(d，J＝2.6Hz，1H)，7.65(dd，J＝2.4Hz，8.7Hz，1H)，7.90(d，J＝2.1Hz，1H).MS(EI)m/e(％)357( 5 M+)，166(100)，108(37)。
b)2-(3-硝基-4-羥基-苯基)-3-(4-羥基-2-硝基-苯基)-丙腈(II)-3 M.p.255-256℃。1HNMR(300 MHz，DMSO-d6)δ3.27-3.39(m，2H)，4.51-4.56(m，1H)，7.08(dd，J＝2.8Hz，8.6Hz，1H)，7.16(d，J＝9.0Hz，1H)，7.31(d，J＝8.5Hz，1 H)，7.39(d，J＝2.8Hz，1H)7.52(dd，J＝2.2Hz，8.5Hz，1H)，7.84(d，J＝2.2Hz，1H).MS(EI)m/e(％)329(5 M+)，152(100)。
(6).7-羥基-3-(4-羥基-苯基)-1，2，3，4-四氫喹啉(III)-1
a)7-甲氧基-3-(4-甲氧基-苯基)-1，2，3，4-四氫喹啉 將4.50g(14.5mmol)2-(4-甲氧基-苯基)-3-(4-甲氧基-2-硝基-苯基)-丙腈溶于5mL無水四氫呋喃中，加入1.36g 10％Pd/C，室溫催化氫化48h，過濾，減壓濃縮除去四氫呋喃，硅膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚，體積比1/10)得白色固體2.9g，產率74.3％。
M.p.146-147℃。1HNMR(300 MHz，CDCl3)δ2.92-2.97(m，2H)，3.26-3.31(m，2H)，3.59-3.61(m，1H)，3.75(s，3H)，3.81(s，3H)，6.53(dd，J＝2.4Hz，8.3Hz，1H)，6.6(d，J＝2.2Hz，1H)，6.89(d，J＝8.8Hz，2H)，7.00(d，J＝8.5Hz，1H)，7.19(d，J＝8.7Hz，2H).MS(EI)m/e(％)269(100M+)，148(55)。
b)7-羥基-3-(4-羥基-苯基)-1，2，3，4-四氫喹啉(III)-1 M.p.228-229℃。1HNMR(300 MHz，DMSO-d6)δ2.61-2.83(m，3H)，3.0-3.07(m，1H)，3.15-3.21(m，1H)，5.87(dd，J＝2.2Hz，7.8Hz，1H)，5.92(d，J＝2.4Hz，1H)，6.63(d，J＝8.2Hz，1H)，6.69(d，J＝8.4Hz，2H)，7.04(d，J＝8.3Hz，2H).MS(EI)m/e(％)241(100 M+)，149(60)，134(65)。
(7).3-(3-氟-4-羥基-苯基)-7-羥基-1，2，3，4-四氫喹啉(III)-2
除用2.0mmol 2-(3-氟-4-甲氧基-苯基)-3-(4-甲氧基-2-硝基-苯基)-丙腈代替14.5mmol 2-(4-甲氧基-苯基)-3-(4-甲氧基-2-硝基-苯基)-丙腈外，使用(III)-1中相同的制備方法合成(III)-2。
a)3-(3-氟-4-甲氧基-苯基)-7-甲氧基-1，2，3，4-四氫喹啉 M.p.136-137℃。1HNMR(300 MHz，CDCl3)δ2.87-2.91(m，2H)，3.06-3.16(m，1H)，3.26(t，J＝10.7Hz，1H)，3.43-3.48(m，1H)，3.75(s，3H)，3.88(s，3H)，6.20(d，J＝2.5Hz，1H)，6.3 1(dd，J＝2.5Hz，8.2Hz，1H)，6.88-6.92(m，1H)，6.94-6.99(m，3H).MS(EI)m/e(％)287(100M+)，148(50)。
b)3-(3-氟-4-羥基-苯基)-7-羥基-1，2，3，4-四氫喹啉(III)-2 M.p.221-222℃。1HNMR(300 MHz，DMSO-d6)δ2.67-2.71(m，2H)，2.77-2.88(m，1H)，3.05(t，J＝10.5Hz，1H)，5.88(dd，J＝2.3Hz，7.9Hz，1H)，5.92(d，J＝2.1Hz，1H)，6.64(d，J＝8.2Hz，1 H)，6.84-6.88(m，2H)，7.04(d，J＝13.1Hz，1H).MS(EI)m/e(％)259(95M+)，149(100)，57(90)。
(8).3-(3-胺基-4-羥基-苯基)-7-羥基-1，2，3，4-四氫喹啉(III)-3
除了使用2.0mmol 2-(3-硝基-4-甲氧基-苯基)-3-(4-甲氧基-2-硝基-苯基)-丙腈代替14.5mmol 2-(4-甲氧基-苯基)-3-(4-甲氧基-2-硝基-苯基)-丙腈外，使用(III)-1中相同的制備方法合成(III)-3。
a)3-(3-胺基-4-甲氧基-苯基)-7-甲氧基-1，2，3，4-四氫喹啉 M.p.152-152.5℃。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ2.86-2.92(m，2H)，3.01-3.12(m，1H)，3.26(t，J＝11.0Hz，1H)，3.44-3.49(m，1H)，3.75(s，3H)，3.83(s，3H)，6.30(d，J＝2.4Hz，1H)，6.35(dd，J＝2.2Hz，8.2Hz，1H)，6.60-6，64(m，2H)，6.75(d，J＝7.9Hz，1H)6.93(d，J＝8.2Hz，1H).MS(EI)m/e(％)284(100M+)，149(60)，136(50)。
b)3-(3-胺基-4-羥基-苯基)-7-羥基-1，2，3，4-四氫喹啉(III)-3 M.p.236-238℃。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.61-2.66(m，3H)，2.93-3.00(m，1H)，3.11-3.15(m，1H)，5.85(dd，J＝2.5Hz，8.0Hz，1H)，5.88(d，J＝2.0Hz，1H)，6.27(dd，J＝2.0Hz，8.2Hz，1H)，6.46(d，J＝2.3Hz，1H)，6.54(d，J＝8.0Hz，1H)，6.60(d，J＝8.0Hz，1H).MS(EI)m/e(％)256(100M+)，122(65)。
(9).7-羥基-3-(4-羥基-苯基)-1-甲基-1，2，3，4-四氫喹啉(III)-4
a)7-甲氧基-3-(4-甲氧基-苯基)-1-甲基-1，2，3，4-四氫喹啉 在氮氣保護下，將0.27g(1mmol)7-甲氧基-3-(4-甲氧基-苯基)-1，2，3，4-四氫喹啉((III)-1a)溶于10mL無水四氫呋喃，冷卻至0℃，加入硼氫化鈉0.27g(7.5mmol)及3mL甲酸，升溫至70♀反應12小時，減壓除去溶劑，殘余物加入水，用1molL-1氫氧化鈉溶液調節pH至弱堿性，二氯甲烷萃取，有機相無水硫酸鎂干燥，濃縮，殘余物經硅膠柱分離(乙酸乙酯/石油醚，1/10)得淡白色固體0.25g，收率88％。
M.p.99-100℃。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ2.90-2.93(m，2H)，2.95(s，3H)，3.31(d，6.1，2H)，3.14-3.20(m，1H)，3.80(s，3H)，3.81(s，3H)，6.30(s，2H)，6.88(d，J＝8.6Hz，2H)，6.93(d，J＝8.1Hz，1H)，7.16(d，J＝8.9Hz，2H).MS(EI)m/e(％)283(100M+)，162(35)。
b)7-羥基-3-(4-羥基-苯基)-1-甲基-1，2，3，4-四氫喹啉(III)-4 M.p.203-204℃。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.70-2.73(m，2H)，2.78(s，3H)，2.93(s，1H)，3.11-3.15(m，2H)，5.98-6.00(m，2H)，6.68-6.70(m，3H)，7.05(d，J＝8.0Hz，2H)，8.96(s，1H)，9.36(s，1H).MS(EI)m/e(％)255(100 M+)，148(75)。
(10).7-羥基-3-(4-羥基-苯基)-1-乙基-1，2，3，4-四氫喹啉(III)-5
除了使用3mL乙酸代替3mL甲酸外，使用(III)-4中相同的制備方法合成(III)-5。
a)7-甲氧基-3-(4-甲氧基-苯基)-1-乙基-1，2，3，4-四氫喹啉 M.p.77-78℃。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ1.15(t，J＝7.2，3H)，2.88-2.91(m，2H)，3.03-3.15(m，1H)，3.20-3.33(m，3H)，3.40-3.51(m，1H)，3.80(s，3H)，3.81(s，3H)，6.18(dd，J＝2.6 Hz，8.1Hz，1H)，6.23(d，J＝2.2Hz，1H)，6.89(d，J＝8.5Hz，2H)，6.91(d，J＝8.1Hz，1H)，7.17(d，J＝8.4Hz，2H).MS(EI)m/e(％)297(100M+)，282(85)，121(60)。
b)7-羥基-3-(4-羥基-苯基)-1-乙基-1，2，3，4-四氫喹啉(III)-5 M.p.174-175℃。1HNMR(300 MHz，DMSO-d6)δ1.01(t，J＝6.6Hz，3H)，2.64-2.78(m，2H)，3.09-3.19(m，2H)，3.52-3.60(m，3H)，5.87-5.94(m，1H)，6.02(s，1H)，6.67-6.70(m，3H)，7.05(d，J＝8.2 Hz，2H)，8.91(s，1H)，9.36(s，1H).MS(EI)m/e(％)269(100 M+)，254(95)。
(11).7-羥基-3-(4-羥基-苯基)-1-丙基-1，2，3，4-四氫喹啉(III)-6
(III)-6 除了使用3mL丙酸代替3mL甲酸外，使用(III)-4中相同的制備方法合成(III)-6。
a)7-甲氧基-3-(4-甲氧基-苯基)-1-丙基-1，2，3，4-四氫喹啉 M.p.84-85℃。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ0.93(t，J＝7.3Hz，3H)，1.52-1.71(m，2H)，2.86-2.93(m，2H)，3.03-3.36(m，5H)，3.79(s，3H)，3.81(s，3H)，6.15-6.26(m，2H)，6.88(d，J＝8.5Hz，2H)，6.89(m，1H)，7.1 6(d，J＝8.7，2H).MS(EI)m/e(％)311(50 M+)，282(100)。
b)7-羥基-3-(4-羥基-苯基)-1-丙基-1，2，3，4-四氫喹啉(III)-6 M.p.144-145℃。1HNMR(300 MHz，DMSO-d6)δ0.84(t，J＝7.4Hz，3H)，1.43-1.55(m，2H)，2.60-2.78(m，2H)，2.80-2.90(m，1H)，2.99-3.09(m，1H)，3.14-3.25(m，3H)，5.88(dd，J＝1.8Hz，7.6Hz，1H)，5.99(d，J＝2.0Hz，1H)，6.64(m，1H)，6.67(d，J＝8.6Hz，2H)，7.03(d，J＝8.8Hz，2H).MS(EI)m/e(％)283(55 M+)，254(100)。
(12).7-羥基-3-(4-羥基-苯基)-1-環丙甲基-1，2，3，4-四氫喹啉(III)-7
除了使用3mL環丙甲酸代替3mL甲酸外，使用(III)-4中相同的制備方法合成(III)-7。
a)7-甲氧基-3-(4-甲氧基-苯基)-1-環丙甲基-1，2，3，4-四氫喹啉 M.p.97-98℃。
1HNMR(300 MHz，CDCl3)δ0.20-0.25(m，2H)，0.52-0.55(m，2H)，0.92-0.94(m，1H)，2.91-3.07(m，3H)，3.08-3.20(br，1H)，3.41-3.45(br，3H)，3.80(s，3H)，3.81(s，3H)，6.20-6.46(m，2H)，6.89(d，J＝8.8Hz，2H)，6.93(m，1H)，7.17(d，J＝8.8 Hz，2H).MS(EI)m/e(％)323(100M+)，149(50)，121(50)。
b)7-羥基-3-(4-羥基-苯基)-1-環丙甲基-1，2，3，4-四氫喹啉(III)-7 M.p.124-125℃。
1HNMR(300 MHz，DMSO-d6)δ0.17(m，2H)，0.41-0.43(m，2H)，0.75-0.80(m，1H)，2.60-2.75(m，2H)，2.75-2.89(m，2H)，3.24-3.29(m，3H)，5.88(m，1H)，6.11(s，1H)，6.67-6.70(m，3H)，7.05(d，J＝8.3Hz，2H)，8.92(s，1H)，9.36(s，1H).MS(EI)m/e(％)295(60 M+)，149(50)，115(100)。
(13).7-羥基-3-(4-羥基-苯基)-1-甲磺酰基-1，2，3，4-四氫喹啉(III)-8
a)7-甲氧基-3-(4-甲氧基-苯基)-1-甲磺酰基-1，2，3，4-四氫喹啉 0℃時，將0.095g(0.825mmol)甲磺酰氯滴加到0.209g(0.75mmol)7-甲氧基-3-(4-甲氧基-苯基)-1，2，3，4-四氫喹啉((III)-1a)，0.085g(0.825mmol)三乙胺的四氫呋喃溶液中，室溫攪拌2小時，減壓除去四氫呋喃，直接硅膠柱分離(乙酸乙酯/石油醚，1/5)得白色固體0.135g，收率51.9％。
M.p.135.5-136℃。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ2.83(s，3H)，2.87-3.20(m，3H)，3.50-3.60(m，1H)，4.22-4.30(m，1H)，3.80(s，3H)，3.81(s，3H)，6.68(dd，J＝2.3Hz，8.2Hz，1H)，6.88(d，J＝8.8Hz，2H)，7.09(d，J＝8.4Hz，1H)，7.17(d，J＝8.7Hz，2H)，7.40(d，J＝2.4Hz，1H).MS(EI)m/e(％)347(60 M+)，214(80)，121(100)。
b)7-羥基-3-(4-羥基-苯基)-1-甲磺酰基-1，2，3，4-四氫喹啉(III)-8 M.p.23 1-232℃。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.69-2.89(m，2H)，2.98(s，3H)，3.36-3.50(m，2H)，3.92-4.05(m，1H)，6.51(dd，J＝2.5Hz，8.3Hz，1H)，6.72(d，J＝8.5Hz，2H)，7.00(d，J＝8.1Hz，1H)，7.12(d，J＝2.6Hz，1H)，7.13(d，J＝8.6 Hz，2H).MS(EI)m/e(％)319(5M+)，200(100)，121(75)。
(14).7-羥基-3-(4-羥基-苯基)-1-甲酰基-1，2，3，4-四氫喹啉(III)-9
除了使用5mmol乙酸酐和15mmol甲酸代替0.825mmol甲磺酰氯外，使用(III)-8中相同的制備方法合成(III)-9。
a)7-甲氧基-3-(4-甲氧基-苯基)-1-甲酰基-1，2，3，4-四氫喹啉 M.p.112-113℃。1HNMR(300 MHz，CDCl3)δ2.84-3.17(m，3H)，3.33-3.41(m，1H)，3.81(s，3H)，3.83(s，3H)，4.38-4.42(m，1H)，6，71(dd，J＝2.4Hz，8.5Hz，1H)， 6.74(d，J＝2.4Hz，1H)，6.88(d，J＝8.7Hz，2H)，7.12(d，J＝8.3Hz，1H)，7.17(d，J＝8.7Hz，2H).MS(EI)m/e(％)297(100M+)，134(70)。
b)7-羥基-3-(4-羥基-苯基)-1-甲酰基-1，2，3，4-四氫喹啉(III)-9 M.p.238-239℃。1HNMR(300 MHz，DMSO-d6)δ2.78-2.95(m，2H)，3.23-3.33(m，1H)，3.97-4.06(m，2H)，4.07-4.15(m，1H)，6.55(dd，J＝2.4Hz，8.1Hz，1H)，6.71(d，J＝8.4Hz，2H)，6.78(d，J＝2.3Hz，1H)，7.03(d，J＝8.0Hz，1H)，7.10(d，J＝8.7Hz，2H)，8.78(s，1H).MS(EI)m/e(％)269(100M+)。
(15).7-羥基-3-(4-羥基-苯基)-1-乙酰基-1，2，3，4-四氫喹啉(III)-10
除了使用0.825mmol乙酰氯代替0.825mmol甲磺酰氯外，使用(III)-8中相同的制備方法合成(III)-10。
a)7-甲氧基-3-(4-甲氧基-苯基)-1-乙酰基-1，2，3，4-四氫喹啉 M.p.102-103℃。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ2.21(s，3H)，2.80-2.89(m，1H)，2.99-3.14(m，2H)，3.56-3.64(m，1H)，3.79(s，3H)，3.81(s，3H)，4.11-4.22(m，1H)，6，71(dd，J＝2.4Hz，8.5Hz，1H)，6.74(d，J＝2.4Hz，1H)，6.86(d，J＝8.6Hz，2H)，7.08(d，J＝8.5Hz，1H)，7.14(d，J＝8.5Hz，2H).MS(EI)m/e(％)3 11(5 M+)，149(100)。
b)7-羥基-3-(4-羥基-苯基)-1-乙酰基-1，2，3，4-四氫喹啉(III)-10 M.p.201-202℃。1HNMR(300 MHz，DMSO-d6)δ2.09(s，3H)，2.68-2.78(m，1H)，2.82-3.04(m，2H)，3.40-3.52(m，1H)，3.98-4.06(m，1H)，6.53(dd，J＝2.4Hz，8.3Hz，1H)，6.70(d，J＝8.4Hz，2H)，6.78(d，J＝2.3Hz，1H)，7.03(d，J＝8.5Hz，1H)，7.07(d，J＝8.4Hz，2H).MS(EI)m/e(％)283(100 M+)，241(65)，134(55)。
(16).7-羥基-3-(4-羥基-苯基)-1-丙酰基-1，2，3，4-四氫喹啉的制備(III)-11
除了使用0.825mmol丙酰氯代替0.825mmol甲磺酰氯外，使用(III)-8中相同的制備方法合成(III)-11。
a)7-甲氧基-3-(4-甲氧基-苯基)-1-丙酰基-1，2，3，4-四氫喹啉的制備 M.p.89-90℃。1HNMR(300 MHz，CDCl3)δ1.14(t，J＝7.4Hz，3H)，2.50(q，J＝7.2Hz，2H)，2.80-2.89(m，1H)，2.99-3.1 8(m，2H)，3.57-3.62(m，1H)，3.80(s，3H)，3.81(s，3H)，4.11-4.20(m，1H)，6，71(dd，J＝2.5Hz，8.5Hz，1H)，6.74(d，J＝2.4Hz，1H)，6.86(d，J＝8.7Hz，2H)，7.08(d，J＝8.4Hz，1H)，7.15(d，J＝8.6 Hz，2H).MS(EI)m/e(％)325(100M+)，269(100)。
b)7-羥基-3-(4-羥基-苯基)-1-丙酰基-1，2，3，4-四氫喹啉(III)-11 M.p.204-205℃。1HNMR(300 MHz，DMSO-d6)δ0.94(t，J＝7.4Hz，3H)，2.36-2.41(m，2H)，2.62-2.73(m，1H)，2.83-2.93(m，2H)，3.41-4.46(m，1H)，3.87-3.91(m，1H)，6.51(dd，J＝2.4Hz，8.3Hz，1H)，6.67(d，J＝8.5Hz，2H)，6.78(d，J＝2.3Hz，1H)，6.96(d，J＝8.4Hz，1H)，7.03(d，J＝8.5Hz，2H).MS(EI)m/e(％)297(70 M+)，241(100)，134(45)。
(17).7-羥基-3-(4-羥基-苯基)-1-環丙甲酰基-1，2，3，4-四氫喹啉(III)-12
除了使用0.825mmol環丙甲酰氯代替0.825mmol甲磺酰氯外，使用(III)-8中相同的制備方法合成(III)-12。
a)7-甲氧基-3-(4-甲氧基-苯基)-1-環丙甲酰基-1，2，3，4-四氫喹啉 M.p.106-107℃。1HNMR(300 MHz，CDCl3)δ0.80(m，2H)，1.12(m，2H)，2.00-2.09(m，1H)，2.80-2.91(m，1H)，2.99-3.18(m，2H)，3.57(dd，J＝10.0Hz，12.7Hz，1H)，3.79(s，3H)，3.81(s，3H)，4.25(dd，J＝0.9Hz，5.4Hz，1H)，6.70(dd，J＝2.6Hz，8.3Hz，1H)，6.85(d，J＝8.9Hz，2H)，7.05(d，J＝2.5Hz，1H)，7.10(d，J＝8.3Hz，1H)，7.15(d，J＝8.8Hz，2H).MS(EI)m/e(％)337(95 M+)，269(100)。
b)7-羥基-3-(4-羥基-苯基)-1-環丙甲酰基-1，2，3，4-四氫喹啉(III)-12 M.p.267-268℃。1HNMR(300 MHz，DMSO-d6)δ0.81(m，4H)，1.97-2.01(m，1H)，2.62-2.78(m，1H)，2.86-2.93(m，2H)，3.41-4.46(m，1H)，4.00-4.08(m，1H)，6.55(dd，J＝2.4Hz，8.2Hz，1H)，6.68(d，J＝8.6Hz，2H)，6.91(d，J＝2.4Hz，1H)，7.02(d，J＝8.2Hz，1H)，7.06(d，J＝8.5Hz，2H).MS(EI)m/e(％)309(40 M+)，241(100)，84(75)。
(18).7-羥基-3-(4-羥基-苯基)-1-(4-(2-(1-哌啶基)乙氧基))苯甲酰基-1，2，3，4-四氫喹啉(III)-13
除了使用0.825mmol4-(2-(1-哌啶基)乙氧基)苯甲酰氯代替0.825mmol甲磺酰氯外，使用(III)-8中相同的制備方法合成(III)-13。
a)7-甲氧基-3-(4-甲氧基-苯基)-1-(4-(2-(1-哌啶基)乙氧基))苯甲酰基-1，2，3，4-四氫喹啉 M.p.166-168℃。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ 1.63-1.71(m，4H)，1.82-1.97(m，4H)，2.20-2.37(m，2H)，2.71-2.84(m，2H)，2.91-3.02(m，1H)，3.07-3.25(m，2H)，3.54(s，3H)，3.71(dd，J＝9.1Hz，12.6Hz，1H)，3.79(s，3H)，4.24(dd，J＝4.7Hz，12.6Hz，1H)，4.54-4.60(m，2H)，6.45-6.46(m，1H)，6.63(dd，J＝2.2Hz，8.4Hz，1H)，6.79(d，J＝8.8Hz，2H)，6.86(d，J＝8.4Hz，2H)， 7.08(d，J＝8.3Hz，1H)，7.1 5(d，J＝8.6Hz，2H)，7.33(d，J＝8.9Hz，2H).MS(EI)m/e(％)500(10 M+)，98(100)。
b)7-羥基-3-(4-羥基-苯基)-1-(4-(2-(1-哌啶基)乙氧基))苯甲酰基-1，2，3，4-四氫喹啉(III)-1 3 M.p.135-136℃。1HNMR(300 MHz，DMSO-d6)δ1.49-1.55(m，2H)，1.63-1.69(m，4H)，2.66-2.74(m，4H)，2.90-2.98(m，3H)，3.03-3.12(m，2H)，3.73(dd，J＝8.0Hz，12.4Hz，1H)，4.06(dd，J＝4.4Hz，12.7Hz，1H)，4.17(t，J＝5.6Hz，2H)，6.33-6.36(m，1H)，6.52(dd，J＝2.3Hz，8.1 Hz，1H)，6.70(d，J＝9.0Hz，2H)，6.88(d，J＝8.7Hz，2H)，7.02-7.06(m，3H)，7.25(d，J＝8.7Hz，2H).MS(EI)m/e(％)472(1 5 M+)，98(100)。
(19).7-羥基-3-(4-羥基-苯基)喹啉(IV-1)
a)7-甲氧基-3-(4-甲氧基-苯基)喹啉 氮氣保護下，0.27g(1mmol)7-甲氧基-3-(4-甲氧基-苯基)-1，2，3，4-四氫喹啉及54mg 10％Pd/C加熱至270℃反應3小時，冷卻，加入甲醇，過濾，減壓濃縮除去溶劑得白色固體，0.26g，收率100％。
M.p.142-143℃。1HNMR(300 MHz，CDCl3)δ3.88(s，3H)，3.98(s，3H)，7.05(d，J＝8.8Hz，2H)，7.22(dd，J＝2.4Hz，8.9Hz，1H)，7.47(d，J＝2.4Hz，1H)，7.63(d，J＝8.9 Hz，2H)，7.75(d，J＝9.0Hz，1H)，8.20(d，J＝2.3Hz，1H)，9.07(d，J＝2.3Hz，1H).MS(EI)m/e(％)265(100M+)，250(60)。
b)7-羥基-3-(4-羥基-苯基)喹啉的制備 M.p.185-186℃。1HNMR(300 MHz，DMSO-d6)6.94(d，J＝8.8Hz，2H)，7.35(d J＝8.3Hz，2H)，7.71(d，J＝8.9Hz，2H)，8.03(d，J＝8.8Hz，21.7Hz，2H)，8.87(s，1H)，920(dd，J＝2.1Hz，16.0Hz，1H).MS(EI)m/e(％)236(25 M+)，208(65)。
(20).7-羥基-3-(4-羥基-苯基)-3，4-二氫-1H-喹啉-2-酮(IV-2)
a)7-甲氧基-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氫-1 H-喹啉-2-酮 1.81g(10mmol)2-硝基-4-甲氧基苯甲醛，2.41g(14.5mmol)4-甲氧基苯乙酸，5mL乙酸酐(54mmol)及1g(10mmol)三乙胺的混合物回流15分鐘，冷卻到90℃，加入5mL水，冷卻至20℃，橙紅色固體析出，過濾，水洗，乙醇重結晶得橙色固體(E)-3-(4-甲氧基-2-硝基-苯基)-2-(4-甲氧基-苯基)-丙烯酸.取1.65g(5mmol)(E)-3-(4-甲氧基-2-硝基-苯基)-2-(4-甲氧基-苯基)-丙烯酸溶于50mL四氫呋喃及10mL甲醇的混和溶劑中，加入0.165g 10％Pd/C，室溫催化氫化12小時，過濾，濃縮至干得白色固體1.41g，收率100％. M.p.182-183℃。1HNMR(300 MHz，DMSO-d6)δ3.00-3.06(m，2H)，3.68(s，3H)，3.69(s，3H)，3.72-3.79(m，1H)，6.45-6.47(m，1H)，6.49-6.51(m，1H)，6.82(d，J＝9.0Hz，2H)，7.05(d，J＝8.1Hz，1H)，7.10(d，J＝8.5Hz，2H).MS(EI)m/e(％)283(100 M+)，149(55)，57(50)。
b)7-羥基-3-(4-羥基-苯基)-3，4-二氫-1H-喹啉-2-酮 M.p.＞300℃。1HNMR(300 MHz，DMSO-d6)δ2.91-3.10(m，2H)，3.57-3.62(m，1H)，6.30(dd，J＝2.4Hz，8.0Hz，1H)，6.34(d，J＝2.1Hz，1H)，6.65(d，J＝8.6Hz，2H)，6.92(d，J＝8.1Hz，1H)，6.97(d，J＝8.6Hz，2H).MS(EI)m/e(％)255(100M+)，122(50)。
(21).7-羥基-3-(4-羥基-苯基)-3，4-二氫-1H-喹啉-2-硫酮(IV-3)
a)7-甲氧基-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氫-1H-喹啉-2-硫酮 0.283g(1mmol)7-甲氧基-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氫-1H-喹啉-2-酮和0.243g(0.6mmol)勞維森試劑懸浮于10mL無水甲苯中，回流5小時，濃縮至干，殘留物硅膠柱層析(二氯甲烷/甲醇，50/1)得黃色固體1.948g，產率96.4％。M.p.179-180℃。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ3.00(dd，J＝6.1Hz，16.1Hz，1H)，3.24(dd，J＝6.3Hz，15.9Hz，1H)，3.74(s，3H)，3.78(s，3H)，4.27(t，J＝6.0Hz，1H)，6.44-6.47(m，1H)，6.60-6.62(m，1H)，6.78(d，J＝8.5Hz，2H)，7.04(d，J＝8.2Hz，1H)，7.13(d，J＝8.6Hz，2H).MS(EI)m/e(％)299(100M+)。
b)7-羥基-3-(4-羥基-苯基)-3，4-二氫-1 H-喹啉-2-硫酮 M.p.262-264℃。1HNMR(300 MHz，DMSO-d6)δ2.81(dd，J＝4.1Hz，16.2Hz，1H)，3.08(dd，J＝6.3Hz，16.1Hz，1H)，4.11(dd，J＝4.0Hz，5.9Hz，1H)，6.41(dd，J＝2.4 Hz，7.9Hz，1H)，6.57-6.59(m，2H)，6.60(s，1H)，6.90-6.94(m，3H).MS(EI)m/e(％)271(25 M+)，149(30)，61(100)。
(22).8-羥基-4-(4-羥基-苯基)-4，5-二氫-[1，2，4]三唑[4，3-a]喹啉(IV-4)
a)8-甲氧基-4-(4-甲氧基-苯基)-4，5-二氫-[1，2，4]三唑[4，3-a]喹啉 在氮氣保護下，0.299g(1mmol)7-甲氧基-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氫-1H-喹啉-2-硫酮，0.079g(1.2mmmol)甲酰肼溶于5mL環己醇中，回流5小時，減壓除去溶劑，殘留物硅膠柱層析(二氯甲烷/甲醇，50/1)得淺棕色固體，0.277g，產率90.2％。M.p.90-92.5℃。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ3.16-3.31(m，2H)，3.75(s，3H)，3.86(s，3H)，4.51(t，J＝7.1Hz，1H)，6.78(d，J＝2.5Hz，1H)，6.82(d，J＝8.8Hz，2H)6.96(d，J＝2.5Hz，1H)，7.16(d，J＝8.5Hz，2H)，7.25(d，J＝8.6Hz，1H)，8.71(s，1H).MS(EI)m/e(％)307(5M+)，84(100)。
b)8-羥基-4-(4-羥基-苯基)-4，5-二氫-[1，2，4]三唑[4，3-a]喹啉 M.p.205℃分解。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)δ3.05-3.18(m，2H)，4.44(t，J＝6.8Hz，1H)，6.65(d，J＝8.9Hz，2H)，6.68(d，J＝2.2，1H)6.95(d，J＝8.6Hz，2H)，7.16-7.19(m，2H)，9.24(s，1H).MS(EI)m/e(％)278(25M-1+)，210(100)。
試驗實施例 (1)受體結合實驗 應用昆蟲表達系統體外表達人源ER-β，在合適條件下分離制備ER-β。基于放射性受體-配基競爭結合原理，加入一定濃度[3H]標記的雌二醇(Estradiol)作為陽性對照物，篩選與該受體具有結合活性的小分子配基。
化合物濃度梯度均用DMSO稀釋。實驗在96孔板中進行，每孔中加入Assay buffer(由ER binding buffer，ERα或ERβ，[3H]17β-estradiol配制而成)225μL和25μL轉板后的被測化合物，振蕩混勻，在4℃孵育12h。然后每孔加入200μL6.25％HA混合液，振蕩混勻，4℃孵育10min。將混合物離心終止反應(2500rpm，3-5min)，棄去上清，加入閃爍液，用Wallac MicroBeta Trilux 1450-023液閃儀測定。該試驗重復了三次。
表1體外雌激素受體競爭性結合試驗 表1結果表明該類選擇性雌激素受體調節劑在nM濃度下與ER受體有較強的結合力，其中I-2與Genistein相比對ERβ有較強的選擇性。可用于治療與選擇性ERβ相關的疾病，是潛在的預防治療與年齡相關的神經退化疾病，如老年癡呆等疾病的藥物。[Zhao，L.and Brinton，R.D.J.Med.Chem.2005，48，3463-3466] (2)酵母雙雜交實驗 酵母雙雜交法是利用核激素受體和輔激活蛋白之間的配體依賴作用而建立起來的實驗系統。基于此原理，將ER-LBD與DNA-BD融合，輔激活蛋白SRC-I與DNA-AD融合，利用分子克隆手段來構建質粒；ER-LBD與輔激活蛋白SRC-I相互作用，導致BD與AD在空間上接近，從而激活UAS(酵母轉錄因子GAL4效應基因的上游激活序列)調節下游的lac-z報告基因表達，產生α-半乳糖苷酶。因此，α-半乳糖苷酶的活性大小就和ER與輔激活蛋白SRC-I之間的相互作用強度大小一致。而ER與輔激活蛋白之間的相互作用則取決配體的出現。只有在激動劑存在的條件下，ER才能與輔激活蛋白結合，引起BD與AD在空間上接近，從而激活lac-z報告基因表達，產生α-半乳糖苷酶。
酵母轉化采用乙酸鋰法。經乙酸鋰法處理后的雙雜交酵母(酵母菌株選用AH109)接種到SD(亮氨酸和色氨酸缺陷型)液體培養基中，于30℃，250rpm搖船中培養，當其OD600吸光值達到1.0左右時，用亮氨酸和色氨酸缺陷型培養基將酵母菌稀釋50倍，然后將配體(1μL，DMSO溶解)或DMSO(1μL，做為對照)加到稀釋后的酵母液中(999μL)；另外做拮抗劑是將1μL的配體和1μL的雌激素同時加到稀釋后的酵母中(998μL)。振蕩搖勻后，在30℃孵育16h。取200μL于96孔酶標板中，600nm處測吸光值，以加入樣品溶液的培養液作為空白對照，然后3000rpm離心30min，取上清液16μL，加到另一個含有assay buffer(48μL，16μL 100mM PNP-α-Gal+32μL 0.5M醋酸鈉，pH4.5)的96孔酶標板中，在30℃孵育60min后，加入136μL，1M Na2CO3溶液終止反應。在410nm處測吸光值，最后用下式計算出相對的α-半乳糖苷酶的活性[milliunits/(ml×cell)]。
α-半乳糖苷酶的活性＝OD410×Vf×1000/[(ξ×b)×t×Vi×OD600] t＝加入assay bufferfu孵育的時間(min) Vf＝最后測定的體積(200) Vi＝離心后取的上清的體積(16) OD600＝過夜培養后菌的600nm處的吸光值 ξ×b＝對硝基酚-α-D-吡喃半乳糖在410nm每摩爾的吸光值×光程＝10.5(ml mol-1；Yeast Protocols Handbook PT3024-1，Clontech). 以下是通過酵母雙雜交實驗方法來測定各化合物對ER-LBD兩種亞型和SRC-I相互作用的不同影響。
表2酵母雙雜交實驗結果 結果表明該類選擇性雌激素受體調節劑對ERβ有一定的選擇性，其中III-6和III-7對ERα表現為拮抗作用，而對ERβ表現為激動作用，III-1和IV-1中“---”表示對ERα作用很弱。以上實驗結果至少重復三次。進一步說明該類選擇性雌激素受體調節劑作為ERβ激動劑是潛在的用于治療由于子宮內膜癌及乳腺癌的刺激導致的情緒、認知及記憶方面的副作用引起的疾病的藥物。[Schopfer，U.；Schoeffter，P.；Bischoff，S.；etal.J.Med.Chem.2002，45，1399.]
權利要求
1.一類具有如下結構通式(I)、(II)或(III)或具有結構式(IV-1)、(IV-2)、(IV-3)或(IV-4)的選擇性雌激素受體亞型調節劑
其中(I)和(II)中的R1為H、鹵素或硝基；
(III)中的R1為H時，R2為H、C1～C12烷基、環烷基、酰基或磺酰基；或R1為鹵素或胺基時，R2為H。
2.如權利要求1所述的選擇性雌激素受體亞型調節劑，其特征在于，所述的選擇性雌激素受體亞型調節劑為具有如下結構的化合物
3.一種權利要求1或2所述的選擇性雌激素受體亞型調節劑的合成方法，其中結構通式為(I)、(II)或(III)或結構式為(IV-1)的化合物的合成路線如下
反應條件(a)堿；(b)還原；(c)催化氫化；(d)N-烷基化；
(e)N-酰基化；(f)芳構化；(g)脫保護基R
該合成方法包括在堿性條件下，取代的鄰硝基苯甲醛或鄰氨基苯甲醛與芳基乙腈衍生物縮合成丙烯腈類化合物A，A經過脫保護基R后為生成(I)；該丙烯腈類化合物A經雙鍵還原成丙腈類化合物B，B經過脫保護基R后生成(II)；B在催化氫化條件下關環生成3-取代的1，2，3，4-四氫喹啉衍生物C，C經過脫保護基R后生成(III)；對四氫喹啉衍生物C的氮進行烷基化生成D，D經過脫保護基R后生成(III)；對四氫喹啉衍生物C的氮進行酰基化生成E，E經過脫保護基R后生成(III)；對四氫喹啉衍生物C的氮進行芳構化生成F，F經過脫保護基R后生成(IV-1)；
其中，(d)步驟中的條件為NaBH4，羧酸/四氫呋喃，0℃-回流或鹵代烴，氫化鈉/DMF，室溫；
其中，(e)步驟中的條件為酰氯、三乙胺/CH2Cl2、室溫或酸酐、三乙胺/CH2Cl2、室溫；
其中，(g)步驟脫去保護基R的條件為BBr3/CH2Cl2、EtSNa/DMF、48％HBr或AlCl3/EtSH；
(IV-2)、(IV-3)或(IV-4)的合成路線為
反應條件(h)三乙胺，醋酸酐；(i)催化氫化；(j)勞維森試劑；
(k)甲酰肼；(l)脫保護基R
該合成方法包括由取代的鄰硝基苯甲醛與取代的苯乙酸在堿性條件下縮合，生成丙烯酸類化合物中間體G；丙烯酸類化合物中間體G在催化氫化條件下關環生成環酰胺類化合物H，H經過脫保護基R后生成(IV-2)；環酰胺類化合物H經勞維森試劑作用形成硫酰胺衍生物I，I經過脫保護基R生成(IV-3)；硫酰胺衍生物I經甲酰肼在環己醇中回流合成了三氮唑類似物J，J經過脫保護基R生成(IV-4)；
其中(l)步驟脫去保護基的條件為BBr3/CH2Cl2，、EtSNa/DMF、48％HBr或AlCl3/EtSH。
4.一種如權利要求1或2所述的選擇性雌激素受體調節劑在制備治療和/或預防中樞神經系統紊亂及與年齡相關的神經退化疾病的藥物中的應用。
全文摘要
本發明涉及一類選擇性雌激素受體亞型調節劑及其合成方法和用途。本發明設計及合成的選擇性雌激素受體調節劑結構新穎，制備工藝操作簡便，易于工業生產。藥理實驗表明是有效的ERβ選擇性雌激素受體調節劑，可用于治療與ERβ相關的疾病，因此在治療各種炎癥及老年癡呆等方面有廣闊的前景。
文檔編號A61K31/277GK101147737SQ20061011642
公開日2008年3月26日 申請日期2006年9月22日 優先權日2006年9月22日
發明者陳五紅, 楊春皓, 謝毓元, 旭 沈, 王明偉 申請人:中國科學院上海藥物研究所