專利名稱：血管緊張肽ii拮抗劑的制作方法
已知激素血管緊張肽Ⅱ是引起哺乳動物高血壓的最強的血管加壓劑之一。血管緊張肽原酶對血漿蛋白底物血管緊張肽原的作用導致產生失活十肽，即血管緊張肽Ⅰ，該血管緊張肽Ⅰ通過非選擇性的選擇血管緊張肽轉化酶(ACE)轉化而提供活性激素，即血管緊張肽Ⅱ。例如見，Regoli等，Pharm.Rev.，26，69(1974)。
血管緊張肽Ⅱ引起血管收縮和刺激導致血量和血壓兩者升高的醛固酮分泌(由腎上腺)。因此，血管緊張肽Ⅱ的抑制劑用于治療高血壓，充血性心力衰竭，與糖尿病或高血壓腎病有關的腎機能不全，和青光眼。見Garrison等，The Pharmacological Basis of Therapeutics，8th Editcon，Eds.A.G.Gilman，E.S.Goodman，T.W.Rall，A.S.Nies，and P.Taylor，Pergamon Press，New York，1990P.761-762中;和Dzau V.J.，The New Eng.J.Med.3241124-1130(1991)。
血管緊張肽Ⅱ也可以作用在其它器官，如腦(Fitzsimmons，Rev.Physiol.Biochem.Pharmacol.，87，117，(1980))。因此血管緊張肽Ⅱ的拮抗劑用于提高被某些癥狀，諸如與年齡老化有關的精神損傷或阿爾茨海默病影響的患者的識別能力和治療紊亂如焦慮。見Dennes等，Brit.J.Pharmacol.10588P(1992年4月);和Barnes，J.M.等，FASEB J.5678(1991年3月)。
此外，血管緊張肽Ⅱ作用于各種腺組織，包括腎，肝和卵巢。血管緊張肽的拮抗劑也用于治療與血管緊張肽Ⅱ活性過量或失調有關的這些組織的癥狀、紊亂或疾病。血管緊張肽Ⅱ的拮抗劑也用于治療由于非類固醇消炎藥引起的腎損害。
血管緊張肽Ⅱ具有調節細胞生長和分化速率的作用。因此，血管緊張肽Ⅱ的抑制劑用于治療過量細胞系列，如心瓣再狹窄表征的疾病。例如見，Naftilan等，J.Clin.Invest，83，1419(1989)，Kauffman等，Life Science，49223-228(1991)，和Jackson等，Nature，335，437(1988)。
某些抗高血壓劑作為ACE的抑制劑，因此它阻遏血管緊張肽Ⅱ的形成和其所導致的血壓增高。最近，公開了血管緊張肽Ⅱ的肽和非肽兩種受體拮抗劑，例如見，歐洲專利申請公開EP253310號和本文中的參考文獻，和Chiu等，J.Pharmacol.Exp.Ther.，250，867(1989)。雖然肽拮抗劑在揭示血管緊張肽Ⅱ的生理作用上具有重要作用，但它們的治療使用都因或具不完全主縮肌活性，或者代謝不穩定性或其同時具兩種缺陷而受到限制。見Ashworth R.W.Birkhaeuser Verlaq 26(1982)。
本發明提供在體內受體位點拮抗血管緊張肽Ⅱ的新的，具有潛力的有效化合物，并因此將它用于治療與血管緊張肽Ⅱ活性過量或失調有關的癥狀諸如高血壓，充血性心力衰竭，識別紊亂，與糖尿病或高血壓腎病有關的腎功能不全，青光眼，由于非類固醇消炎藥引起的腎損害，和心瓣再狹窄。
本發明提供式Ⅰ化合物
及其醫藥上可接受的鹽或溶劑化物其中R1為CO2H，SO3H2，PO3H2，CONHSO2R5或5-四唑基;
R2為H，OH，-OCOCH3，鹵，C1-C4烷基，氨基，乙酰氨基，或C1-C4烷氧基;
X為-(CH2)mNHCO-，-(CH2)mCONH-，-O-，-NH-，-CH2-，-(CH2)mCO-，或-CO(CH2)m-;
R3為C4-C9直鏈烷基，C4-C9直鏈三氟烷基，C4-C9直鏈烯基，或C4-C9直鏈三氟烯基;
R4為-CONH(C1-C4烷基)，-CONH(C1-C4三氟烷基)，-CONH(羥基-C1-C4烷基)，
R5為苯基，C1-C4烷基取代苯基，C1-C5烷基或C1-C5三氟烷基;
R6為(CH2)pR1，或C1-C4烷基;
R7為H或CH3;
R8為H或-(CH2)qR12;
R9為O或S;
R10為H，-(CH2)pR1，C1-C7烷基，C1-C7三氟烷基，鹵，取代或未取代苯基，3-吡啶基，2-嘧啶基，呋喃基，噁唑基，異噁唑基，取代或未取代稠合二環，取代或未取代稠合三環，或當m為O時，4，4-乙烯二氧基;
R11為H，OH，C1-C4烷氧基，CO2H，SO3H，PO3H2，CONHSO2R5，或四唑基;
R12為OH，NH2，或CO2H;
Y為天然氨基酸的R基;
X′為-O-，-(CH2)p-，或-S-;
m分別為0或1;
p分別為0，1，2，3或4;且q為1，2，3或4;
其條件是當R4為(g)或(h)時，R10不為H，(h)的羧基或(g)的四唑是在2位;且當R4為(g)或(h)時，m為O，和R10為H，(g)的羧基或(h)的四唑基是在2或3位;本發明也涉及到其醫藥學上可接受的鹽或溶劑化物。
本發明還提供治療高血壓的方法，它包含給需要這種治療的哺乳動物施用抗高血壓量的式Ⅰ化合物。
本發明還進一步提供治療充血性心力衰竭，與高血壓或糖尿病腎病有關的腎功能不全，心瓣再狹窄，由于非類固醇消炎藥引起的腎損害，焦慮和青光眼的方法，它包括給需要治療的哺乳動物施用藥學有效量的式Ⅰ化合物。
本發明進一步涉及的方面是提高識別能力的方法，它包含給需要提高的哺乳動物施用藥學有效量的式Ⅰ化合物。
還提供包含與一種或多種醫藥學上可接受的賦形劑，載體或稀釋劑相結合的式Ⅰ化合物的藥用制劑。
本發明的另一方面是制備優選的式Ⅰ立體異構體的方法，包括將式(ⅩⅩⅠ)化合物，
其中R3為C4-C9直鏈烷基，C4-C9直鏈三氟烷基，C4-C9直鏈烯基，或C4-C9直鏈三氟烯基;偶聯于下式化合物上
其中R6，R7，R8，R9，R10，R11，R12，和Y與前述定義相同;
還原式(ⅩⅩⅠ)化合物的硝基生成氨基咪唑;
將該氨基咪唑偶聯到下式化合物上
其中R2和R1與前述定義相同;R18為SO2或C＝O。
如上面提到的，本發明提供在體內受體位點拮抗血管緊張肽Ⅱ的式Ⅰ化合物。本發明優選如下的式Ⅰ化合物其中R4為
特別優選的本發明化合物為式Ⅰa化合物
其中R3為C4-C9直鏈烷基;R10為未取代或對位取代苯基，取代或未取代稠合二環，取代或未取代稠合三環;m為0或1;X′為-O-，-S-，或(CH2)p;且p為0，1，2，3或4。
最優選的化合物為其中X′為-O-，且R10為下式的取代苯化合物，
其中R13為-(CH2)pR1，-O(CH2)pR1，-SO2NR14R15，-(CH2)p-CONR14R15，-(CH2)pNR16SO2(C1-C4烷基或C1-C4三氟烷基)，或選自咪唑基，三唑基，四唑基，噻唑基，異噁唑基，或噁唑基的雜芳基，所述的雜芳基被-(CH2)pR1任意取代;R14和R15分別為H，C1-C4烷基，-(CH2)pCO2H或與它們鍵合的氮原子一起構成選自吡咯烷基或哌啶子基組成的一組雜環，所述的雜環任意地被-COOH取代，R16為H或C1-C4烷基。
優選化合物的例子包括下列化合物1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-順式-(4-羧基苯氧基)-L-脯氨酸1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-順式-(4-羧甲基苯氧基)-L-脯氨酸1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-順式-(4-叔丁氧苯氧基)-L-脯氨酸1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-順式-(4-甲磺酰基苯氧基)-L-脯氨酸1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-順式-(5-苯并呋喃氧基)-L-脯氨酸1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-順式-(2-萘氧基)-L-脯氨酸1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-順式-(4-羧甲氧苯氧基)-L-脯氨酸1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-順式-(2-羧基苯并呋喃-5-基氧基)-L-脯氨酸
1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-順式-((4-亞甲基膦酸)-苯氧基)-L-脯氨酸術語“C1-C4烷基”，“C1-C5烷基”，“C1-C7烷基”，和“C1-C9烷基”分別表示具有從1至4，5，7或9個碳原子的環狀，直鏈或支鏈烷基，諸如甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，異丁基，仲丁基，叔丁基，戊基，異戊基，1-甲基丁基，1-乙基丙基，新戊基，叔戊基，環戊基，正己基，異己基，4-甲基己基，環己基，環己基甲基，正庚基，叔庚基，異庚基等等。
術語“羥基-C1-C4烷基”為被羥基取代的C1-C4烷基。羥基-C1-C4烷基優選的是式HO(CH2)q-，其中q為1至4。
術語“C1-C4三氟烷基”，“C1-C5三氟烷基”，和“C1-C7三氟烷基”分別表示具有1至4，5或7個碳原子，其中伯碳被氟取代的直鏈或支鏈烷基。
術語“C4-C9直鏈烷基”表示具有4至9個碳原子的直鏈烷基。“C4-C9直鏈烷基”的例子包括正丁基，正戊基，正己基，正庚基，正辛基和正壬基。
術語“C4-C9直鏈三氟烷基”表示伯碳被氟取代的C4-C9直鏈三氟烷基。
術語“C1-C4烷氧基”和“C1-C7烷氧基”表示C1-C4或C1-C7烷基通過-O-鍵共價地鍵合到母體部分上。
術語“C1-C4三氟烷氧基”和“C1-C7三氟烷氧基”表示直鏈或支鏈C1-C4或C1-C7三氟烷基通過-O-鍵共價地鍵合到母體部分上。
術語“C4-C9直鏈烯基”表示具有4至9個碳原子和一個雙鍵的直鏈烷基。“C4-C9直鏈烯基”的例子包括正丁烯基，正戊烯基，正己烯基，正庚烯基，正辛烯基，和正壬烯基。
術語“C4-C9直鏈三氟烯基”表示伯碳原子被三個氟取代的C4-C9直鏈烯基。“C4-C9直鏈三氟烯基”的例子包括4-三氟-正-2-丁烯基，5-三氟-正-2-戊烯基，6-三氟-正-3-己烯基，7-三氟-正-4-庚烯基，8-三氟-正-6-辛烯基，和9-三氟-正-5-壬烯基。
術語“天然氨基酸的R基”表示天然氨基酸的可變區且為本行業所共識。參見，例如，Lehninger A.L.Biochemistry，2nd edition，Worth Publishers，P.73-75，1975。
術語“-(CH2)pR1”表示鍵合到R1上的直鏈烷基，支鏈烷基，或直鏈烯基，或代表R1(當p為O時)。“-(CH2)pR1”的例子包括如下基團，其中直鏈烷基，支鏈烷基或直鏈烯基部分包括亞甲基，亞乙基，三亞甲基，四亞甲基，甲基亞乙基，乙基亞乙基，2-甲基三亞甲基，亞乙烯基，亞丙烯基，和亞丁烯基。
術語“鹵”包括氟、氯、溴、和碘。
術語“取代或未取代苯基”表示苯基或被一個或多個選自下列的取代基取代的苯基-(CH2)pR1，-O(CH2)pR1，-(CF2)pCO2H，C1-C7烷基，C1-C7三氟烷基，鹵，-(CH2)pOH，氰基，苯磺酰基，苯基，苯硫基，硫代羧基，C1-C7三氟烷氧基，C1-C7烷氧基，-S(C1-C4烷基)，-SO(C1-C9烷基)，-SO2(C1-C9烷基)，-SO2NR14R15，-(CH2)pCONR14R15，-(CH2)pNR16SO2(C1-C4烷基或C1-C4三氟烷基)，或選自下列的雜芳基;咪唑基，三唑基，四唑基，噻唑基，異噁唑基或噁唑基，所述的雜芳基任意地被-(CH2)pR1取代;R14和R15分別為H，C1-C4烷基，-(CH2)pCO2H或與它們所鍵合的氮一起構成選自由吡咯烷基或哌啶子基組成的一組雜環，所述的雜環任意地被-COOH取代;R16為H或C1-C4烷基。優選取代或未取代的苯基是被一個取代基(優選-(CH2)pR1)取代的苯基。
術語“稠合雙環”表示下式穩定稠合的二環系
其中Z表示取代或未取代，飽和或非飽和5或6元環，所述的環具有相同或不同的0至3個雜原子，并且選自硫，氧和氮;且當Z含二個相鄰碳原子時，該相鄰的碳原子可以構成式-CH＝CH-CH＝CH-基團;其條件是(1)當雜環為5元環，雜原子含有不多于一個硫或兩個氧原子，則不同時含兩者;(2)當雜環為6元環時，無硫和氧存在，和(3)當雜環含一個硫或氧原子時，苯并稠合部份連在所述硫或氧原子相鄰的碳上。稠合二環可以連在提供穩定結構的任何碳上。該稠合二環可以分別由選自下列的一或兩個基團取代-(CH2)pR1，-O(CH2)pR1，-(CF2)pCO2H，C1-C7烷基，C1-C7三氟烷基，鹵，-(CH2)pOH，氰基，苯基亞磺酰基，苯基，苯硫基，硫代羧基，C1-C7三氟烷氧基，C1-C7烷氧基，-S(C1-C4烷基)，-SO(C1-C9烷基)，-SO2(C1-C9烷基)，-SO2NR14R15，-(CH2)p-CONR14R15，-(CH2)pNR16SO2(C1-C4烷基或三氟烷基)。或選自下列的雜芳基咪唑基，三唑基，四唑基，噻唑基，異噁唑基，或噁唑基，所述的雜芳基任意地被-(CH2)pR1取代;R14和R15分別為H，C1-C4烷基，-(CH2)pCO2H或與它們所鍵合的氮一起構成選自由吡咯烷基或哌啶子基組成的一組雜環，所述的雜環任意地被-COOH取代;R16為H或C1-C4烷基。
術語“稠合三環”表示下式的穩定稠合的三環系
其中Z′表示飽和或非飽和五元環，所述的環具有O或一個選自硫，氧和氮組成的一組雜原子;W表示取代或未取代，飽和和非飽和6元環，所述的環具有0至3個氮原子。該稠合三環可以連接在任意的提供穩定結構的碳上。稠合三環可被一個或二個分別選自下列的基團取代-(CH2)pR1，-O(CH2)pR1，-(CF2)pCO2H，C1-C7烷基，C1-C7三氟烷基，鹵，-(CH2)pOH，氰基，苯基亞磺酰基，苯基，苯硫基，硫代羧基，C1-C7三氟烷氧基，C1-C7烷氧基，-S(C1-C4烷基)，-SO(C1-C9烷基)，-SO2(C1-C9烷基)，-SO2NR14R15，-(CH2)p-CONR14R15，-(CH2)pNR16SO2(C1-C4烷基或三氟烷基)。或選自下列的雜芳基咪唑基，三唑基，四唑基，噻唑基，異噁唑基，或噁唑基，所述的雜芳基任意地被-(CH2)pR1取代;R14和R15分別為H，C1-C4烷基，-(CH2)pCO2H或與它們所鍵合的氮原子一起構成選自由吡咯烷基或哌啶子基組成的一組雜環，所述的雜環任意地被-COOH取代;R16為H或C1-C4烷基。
術語“C1-C4烷基取代的苯基”，表示在任意位置被前面定義的C1-C4烷基取代的苯基。
術語“酯基”是本行業所共識的。優選酯基為C1-C4烷基特別是甲基或乙基的酯基。
在本說明書中使用的術語“羧基保護基團”是指當反應在化合物的其它功能基團上進行時，通常采用來封閉或保護羧酸基團的羧酸基的酯衍生物之一。所采用的羧基保護基團的種類并不重要，只要衍生的羧酸對隨后的反應條件穩定，且可以在不破壞分子的其余部分的情況下，在適宜的時機去除即可。見E.Haslam，Protective Groups in Organic Chemistry，J.G.W.McOmie，Ed.，Plenum Press，New York，N.Y.，1973，Chapter 5，和T.W.Greone，Protective Group in Organic Synthesis，John Wiley and Sons，New York，N.Y.，1981，Chapter 5.相關的術語是“保護的羧基”，它是指保護羧基的基團。
在本說明書中使用的術語“氨基保護基團”是指當反應在化合物的其它功能基團上進行時，通常采用來封閉或保護氨基功能團的氨基的取代基。所采用的氨基保護基的種類并不重要，只要衍生的氨基對隨后的反應條件穩定，且可以在不破壞分子的其余部分的情況下，在適宜的時機去除即可。優選的保護氨基的基團為叔丁氧羰基和苯甲氧基羰基。見J.W.Barton，Protective Groups in OrganicChemistry，J.G.W.McOmie，Ed.，Plenum Press，New York，N.Y.，1973，Chapter 2，和T.W.Greene，Protective Groups in Organic Chemistry，John Wiley and Sons，New York，N.Y.，1981，Chapter 7。相關的術語“保護的氨基”定義為如前面討論的氨基保護基團取代過的氨基。
由于它們具酸性部分，則式Ⅰ化合物包括它們的醫藥學上可接受的堿加成鹽。這些鹽包括那些由無機堿，諸如銨和堿金屬和堿土金屬的氫氧化物，碳酸鹽，碳酸氫鹽等等衍生的鹽，以及由堿性有機胺諸如脂肪類和芳類胺，脂類二胺，羥烷基胺等等衍生的鹽。用于制備本發明這些鹽的堿包括氫氧化銨，碳酸鉀，碳酸氫鈉，氫氧化鈣，甲胺，二乙胺，乙二胺，環己基胺，乙醇胺等等。特別優選的是鉀和鈉鹽形式。
由于具雜環部分，式Ⅰ化合物也可作為醫藥學上可接受的酸加成鹽存在。通常采用來構成這樣的鹽的酸包括無機酸，諸如氫氯酸，氫溴酸，氫碘酸，硫酸和磷酸，以及有機酸諸如對甲苯磺酸，甲磺酸，草酸，對溴苯磺酸，碳酸，琥珀酸，檸檬酸，苯甲酸和乙酸，以及相關的無機或有機酸。因此這些醫藥學上可接受的鹽包括硫酸鹽，焦硫酸鹽，硫酸氫鹽，亞硫酸鹽，亞硫酸氫鹽，磷酸鹽，磷酸氫鹽，磷酸二氫鹽，偏磷酸鹽，焦磷酸鹽，氫氯化物，氫溴化物，氫碘化物，乙酸鹽，丙酸鹽，癸酸鹽，辛酸鹽，丙烯酸鹽，甲酸鹽，異丁酸鹽，己酸鹽，庚酸鹽，丙炔酸鹽(propiolate)，草酸鹽，丙二酸鹽，琥珀酸鹽，辛二酸鹽，癸二酸鹽，富馬酸鹽，馬來酸鹽，2-丁炔-1，4-二酸鹽，3-己炔-2，5-二酸鹽，苯甲酸鹽，氯苯甲酸鹽，羥基苯甲酸鹽，甲氧苯甲酸鹽，鄰苯二甲酸鹽，二甲苯磺酸鹽，苯基乙酸鹽，苯基丙酸鹽，苯基丁酸鹽，檸檬酸鹽，乳酸鹽，馬尿酸鹽，β-羥基丁酸鹽，乙醇酸鹽，馬來酸鹽，酒石酸鹽，甲磺酸鹽，丙磺酸鹽，萘-1-磺酸鹽，萘-2-磺酸鹽，扁桃酸鹽等等。
式Ⅰ化合物的醫藥學上可接受的鹽也可作為各種溶劑化物存在，例如與水，甲醇，乙醇，二甲基甲酰胺，乙酸乙酯等等。也可以配制成這些溶劑化物的混合物。這些溶劑化物可以來源于結晶過程的溶劑，是配制或結晶過程中的溶劑所固有的，或者偶然引入這類溶劑中的。
已知存在各種式Ⅰ化合物的立體異構形式，例如連于咪唑，R4，和R5的手性碳原子。本發明不限于任何特定的立體異構體，但包括所有可能的單獨異構體及其混合物。
作為血管緊張肽Ⅱ拮抗物的1，3-咪唑的合成和應用在美國專利US5，073，566號中描述過。該文引入本文作為參考。
式Ⅰ中R1的四唑基部分(它優選在偶聯反應時R1被保護為腈基)可以通過用堿金屬疊氮化物如疊氮化鈉，氫化銨或三乙胺氫氯化物和(任意地)氯化鋰在非活性高沸溶劑如N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中，處理氰基中間體來制備，優選溫度為約60-125℃。用三-(正丁基)錫疊氮化物或四甲基胍疊氮化物，無溶劑或加溶劑諸如四氫呋喃，二甲氧乙烷，二乙氧乙烷等來代替堿金屬疊氮化物，氯化胺，氯化鋰，和DMF，也是可取的。
式Ⅰ的羧酸通過氰基中間體(R1在偶聯反應期間被保護為腈基)水解制備。此水解反應涉及在有堿諸如氫氧化鈉或鉀存在下，在乙醇水溶液中加熱氰基衍生物。按標準方法將游離酸或四唑與適宜的堿反應制得羧酸鹽和四唑最終產物。
在R1部分含磺酰胺的式Ⅰ化合物，可以通過將R1的羧酸轉化成酰基氯，然后通過常規反應將酰基氯與烷基磺酰胺反應來制備。
含烷氧基部分(R2為烷氧基)的式Ⅰ化合物易于轉化成式Ⅰ羥基化合物。例如，可以用三溴化硼裂解烷氧基以形成羥基部分。
由公開的反應得到的所需產品，可以通過常規方法分離，優選色譜法。柱色譜是優選的方法。硅膠的高壓柱色譜和高壓反相色譜提供純化最終產物的最有效的途徑。此外，酸，四唑或鹽的結晶也可以用來純化所需的最終產物。
一種制備式Ⅰ化合物的方法，如
圖1所概括的，涉及用烷基化試劑Ⅲ將咪唑烷基化。
R3與前述定義相同。R17為經保護的羧基，(例如酯);或當R4為(a)時，R17為經保護的咪唑基。見Greene，T.W.，Protective Groups in Organic Synthesis，John Wiley & Sons，New York，1981。為制備式Ⅰ的酰胺，R17為經保護的羧基。
L為良好的離去基諸如氯、溴、碘，甲磺酰基，甲苯磺酰基等等。L也可以是羥基或是易于通過本行業已知技術轉化成良好離去基的前體。
該反應通常加入大約等摩爾量的兩種試劑(雖然其它比率，特別是其中烷基化試劑過量的比率，也可進行)。反應最好是在極性非質子傳遞溶劑中進行，其中化合物為堿金屬鹽，或者采用本行業所肯定的其它這類烷基化反應條件來進行也可。當離去基為溴或氯時，可加入催化量的碘鹽，如碘化鉀，以加速反應。優選的反應條件包括下列溴化鋰，和二甲基甲酰胺，THF中的氧化鋁載氟化鉀，二甲基甲酰胺中的碳酸氫鈉，二甲基甲酰胺中氫化鈉，碳酸鉀，碘化鉀，和甲乙酮或丙酮。反應溫度優選室溫至反應混合物的回流溫度。當采用提高的溫度時，反應通常在1-4小時內完成。
當制備式Ⅰ的酰胺時，經保護的羧基R17容易被轉化成羧酸，然后通過本行業中已知技術轉化成酰基鹵。見Greene，T.W.，Protective Groups in Organic Synthesis，P.152。例如，酸變為相應的酰基氯的轉化，可以用試劑，諸如亞硫酰氯或草酰氯任意地在非質子傳遞惰性溶劑存在下處理而完成。優選的組合法包括用亞硫酰氯處理，接著將之與四氫呋喃的碳酸鉀溶液中的胺反應，或草酰酰氯與羧酸反應。
然后式Ⅳ的酰基鹵可與所需的胺反應形成本發明的酰胺(R4為酰胺)。該反應概括在圖2中。
R3與前面定義相同。當胺(化合物Ⅴ)含有羰基時，優選在反應期間羰基被加以保護。
該圖中所采用的胺取決于所需的式Ⅰ酰胺。例如，為生成取代的脯氨酸衍生物，式Ⅳ的酰基氯可以與取代脯氨酸甲酯(Ⅴ)反應。同樣，為生成三氟丙基酰胺，將該酰基氯與三氟丙基胺反應。
化合物Ⅳ的酰基氯和胺間的偶聯反應可以通過幾種已知方法之任意一種來完成。此圖中優選的方法是將酰基鹵，優選酰基氯在有三乙胺存在的THF或二氯甲烷中與胺直接反應。
所產生的酰胺可以通過本行業已知的技術轉化成式Ⅰ化合物，見Duncia等，J.Org.Chem.562395-2400(1991)。
此外，化合物Ⅲ可以轉化成酰基氯并按圖2反應形成酰胺。此中間體然后可以根據圖1中的條件烷基化反應以形成硝基咪唑。
本發明的含羧酰胺型鍵的化合物可以根據圖3制備。
其中R1，R2，R3，R4，和m與前面定義相同。
如上面圖3中所描述的，轉換過程可以通過將羧酸偶合到胺上的幾種已知方法的任意一種來完成。例如，羧酸Ⅶ或Ⅺ可以轉換成相應的酰基鹵，特別是酰基氯，然后如前面討論的與適合的胺反應以提供酰胺Ⅸ或Ⅻ。
此外，也可以采用其它的酰胺縮合劑，諸如1，1′-羰基二咪唑或1，3-二環己基碳化二亞胺。這些試劑通常在隋性高沸點溶劑中，如二甲基甲酰胺和任意地有諸如二異丙基乙胺，羥基苯并三唑等等這類試劑存在下使用，以利于反應。
如果R4含羧基部分，該反應最好是在當羧基被保護為酯時進行。當偶聯完成時，該酯通過本行業已知的方法很容易轉化成酸。例如，酯部分可以用堿水溶液如乙醇中的2N NaOH水解。用5N HCl將PH調低到3.0。然后該酸產品可通過常規方法萃取。
式Ⅰ的含酮化合物可以通過將酸酐(化合物ⅩⅢ)或化合物Ⅶ的酰基氯與化合物ⅩⅠⅤ反應來制備，分別提供相應的酮ⅩⅤ和ⅩⅤⅠ如圖4中所述。
在上面圖4中，R2，R3，R4和m，與前面定義相同。R18為SO2或CO。R1為SO3H或CO2H。
圖4中描述的反應，通常稱為Friedel-Crafts反應。該反應是在隋性極性溶劑，諸如二甲基甲酰胺或二氯甲烷中，在有路易斯酸如氯化鋁存在下，將大約等摩爾量的化合物Ⅶ酰基氯或酸酐(ⅩⅢ)與試劑ⅩⅠⅤ反應。
按相似于上面圖4的方法，含酮式Ⅰ化合物(Ⅹ為-CO(CH2)m-)，可以通過將羧基咪唑轉換成酰基氯并將其與取代芳族化合物反應來制備。
含式Ⅰ化合物的優選酰胺可以根據下列圖5制備
圖5中，隨后通過混合兩種試劑在一種或多種惰性溶劑，如二甲基甲酰胺中將胺與適合的酸酐(ⅩⅢ)反應。該反應得出的產物與上面圖3中所得的那些相似，部份為優選的式Ⅰ化合物。此外，酸酐(ⅩⅢ)可與一當量的醇反應，提供單酸單酯(化合物Ⅶ)，可以根據圖3反應。
本發明的含胺鍵(Ⅹ為-NH-)化合物，可以通過本行業已知技術制備。例如可以采用ullman反應，即與下式化合物反應，
其中R19為咪唑保護基團如苯甲基官能團。反應是在青銅或氯化銅存在下，在吡啶或二甲基甲酰胺中進行的。所得產物可以以相似于圖1中的方式脫保護基和烷基化。
本發明含醚鍵(Ⅹ為-O-)的化合物也可以通過ullman反應制備。除了用化合物Ⅹ的羥基類似物作原料該反應相似于胺鍵的制備。
取代苯氧基脯氨酸衍生物很容易根據圖6制備。
上面的圖6中R21為氨基保護基團，優選芐酯基;R20為羧基保護基團，優選C1-C4烷基來形成酯。將酚化合物ⅩⅠⅩ根據該圖反應，制備式Ⅰ化合物，其中R10為如前面定義的取代苯基。
該反應本行業稱之為Mitsunobu反應，見Nitsunobu，O.，Synthesis 1(1981)。優選該反應在有三苯基膦和偶氮二羧酸二乙酯存在時，在非質子傳遞溶劑(如THF)中進行。在該圖的反應流程完成之時，可以將化合物ⅩⅩ去保護基以形成胺和進一步按圖2反應。
如上面提到的，本發明化合物含至少一個手性中心，它是連于咪唑，R3和R4取代基的碳原子上。所有上面的圖均提到涉及外消旋試劑和產物的反應，而每一反應均可采用手性原料來進行，以提供特定感興趣的對映體。此外，特定的異構體可以通過標準方法，諸如分級結晶，高壓液相色譜，反相色譜等等從外消旋物中分離。這些拆分操作可以就最終式Ⅰ產物，合成過程中任意階段的中間體，或最終產物和中間體的衍生物來完成。優選化合物Ⅳ在圖2的偶合反應之前將其分離成它的對映體。通過采用(-)辛可尼定作為拆解試劑的光學拆分方法將化合物Ⅳ分離。
顯然，取代的苯甲酸或取代的酸酐偶聯到咪唑基上(圖3或4)，可以在合成的任何時機進行。優選圖2的偶聯先于圖3或4。然而，本行業熟練技術人員深知反應的順序并不重要，只要采用適合的氨基或羧基保護基即可。
所有上面的圖中，優選在偶聯反應期間所有的R1基被保護的情況下反應隨后脫去保護基。例如，如果R1為四唑，反應最好是以帶氰基中間體進行。然而，本行業熟練技術人員知道，如果采用適合的反應條件，阻隔試劑等等，這些反應許多可在游離酸或四唑上進行。由于各種R1部分對水解敏感性有相當大的差異，式Ⅱ中間體轉化成具有酸和四唑兩種基團的最終產物的順序并不至關重要。
化合物Ⅱ，Ⅲ，Ⅴ，Ⅶ，Ⅷ，Ⅹ，Ⅺ，ⅩⅢ，ⅩⅠⅤ，ⅩⅧ，ⅩⅤⅠⅤ，和任何其它用來轉換它們所需的試劑，或是可從市場上購得，為本行業所知，或是可以通過本行業已知的方法制得。
下列的實施例和制備例只是為了進一步說明本發明，本發明的范圍并非只由下列實施例構成。
在下列實施例和制備例中，熔點，核磁共振譜，質譜，硅膠高壓液相色譜，N，N-二甲基甲酰胺，碳載鈀，二異丁基氫化鋁，和四氫呋喃分別縮寫成M.pt.，NMR，MS，HPLC，DMF，pd/c，DIBAL和THF。術語“NMR”和“MS”表示該光譜與所期望的結構一致。
制備例 12-羧基-6-羥基苯磺酸將2-羥基-3-甲氧苯甲酸甲酯(0.027摩爾，5.0g)加入氫化鈉(0.03摩爾，1.45g，礦物油中含50%)的50ml DMF懸浮液中，并在室溫下攪拌1小時。將40mlDMF中的二甲基硫代氨基甲酰氯(0.03moles，3.73g)于1小時時間滴加入其中。將反應攪拌18小時。加入乙酸乙酯。用鹽水徹底洗滌該溶液，干燥并凝縮。用50%乙酸乙酯的己烷溶液作洗脫液，在硅膠柱上HPLC分離殘留物，得0.9g的O-(2-甲酯基-6-甲氧苯基)-N，N-二甲基硫代氨基甲酸酯。MS.
C12H15NO4S計算值C，53.52;H，5.61;N，5.20。
實驗值C，53.35;H，5.54;N，5.07。
將O-(2-甲酯基-6-甲氧苯基)-N，N-二甲基硫代氨基甲酸酯(720mg)在220℃加熱100分鐘，并冷卻得700mg S-(2-甲酯基-6-甲氧苯基)-N，N-二甲基硫代氨基甲酸酯。MS.
C12H15NO4S計算值C，53.52;H，5.61;N，5.20。
實驗值C，53.74;H，5.60;N，4.92。
S-(2-甲酯基-6-甲氧苯基)-N，N-二甲基硫代氨基甲酸酯(14.4毫摩爾，3.9g)溶于66ml甲酸中。當需要時伴隨冷卻滴加入過氧化氫(24ml的30%液)。反應在室溫下攪拌16小時并凝縮。將甲苯(100ml)加入該殘留物中，并濃縮該甲苯溶液。將固體物于乙醚中形成漿液，并過濾得3.0g 2-甲酯基-6-甲氧苯磺酸二甲胺鹽。
在-20℃下，將2-甲酯基-6-甲氧苯磺酸二甲胺鹽(9.0毫摩爾，2.6g)滴加入三溴化硼(27毫摩爾，3.8g)的50ml二氯甲烷溶液中，并在-20℃下攪拌10分鐘和在室溫下攪拌過夜。用水猝止反應。用2N NaOH將PH調至8.0。用二氯甲烷洗滌該水溶液。用2N HCl將水層的PH調至1.0。用乙酸乙酯萃取該中間體并凝縮。用乙酸乙酯研制固體并過濾得1.6g 2-羧基-6-羥基苯磺酸。
制備例 2N-芐酯基-4-反-羥基-L-脯氨酸甲酯將氧化銀(Ⅰ)(1.08摩爾，250g)的1500ml丙酮溶液冷卻至-5℃-0℃。加入N-芐酯基-4-反-羥基-L-脯氨酸(0.5摩爾，132.6g)。將該溶液攪拌25分鐘，在25分鐘的時間里，在-6℃下加入甲基碘(1.2摩爾，170.4g)。將反應在室溫下攪拌5小時，過濾并濃縮。將中間產品溶于乙酸乙酯，經硅膠過濾并濃縮。MS.
C14H17NO5計算值C，60.21;H，6.13;N，5.01實驗值C，60.40;H，6.26;N，5.06制備例 3N-芐酯基-4-順-苯氧基-L-脯氨酸甲酯將N-芐酯基-4-反-羥基-L-脯氨酸甲酯(0.267摩爾，74.5g)，苯酚(0.282摩爾，26.5g)和三苯基膦(0.279摩爾，73.3g)溶于750ml THF，并冷卻至-3℃。在2小時的時間里滴加入疊氮二羧酸二乙酯(0.284摩爾，45ml)。在室溫下攪拌反應過夜并濃縮，用乙醚溶解殘留物，過濾并濃縮。將中間產品經用己烷中的0-40%乙酸乙酯梯度液作洗脫液在硅膠上色譜分離得41.0g。(NMR)
制備例 44-溴-叔丁氧基苯將4-溴苯酚(57.8毫摩爾，10.0g)加入-30℃的異丁烯(40ml)和二氯甲烷(50ml)的溶液中，然后冷卻至-78℃。加入三氟甲磺酸(4毫摩爾，0.35ml)。將混合物在-78℃放置4小時，然后讓其升至室溫。加入三乙胺(0.5ml)，去除溶劑。殘余物經用己烷1%乙酸乙酯作洗脫液在硅膠上色譜分離得12.4g。MS.
C10H13BrO計算值C，52.42;H，5.72。
實驗值C，52.69;H，5.67。
制備例 54-叔丁氧苯酚在-78℃將仲丁基鋰(53.2毫摩爾，41ml，1.3M己烷液)滴加入4-溴叔丁氧基苯(53.2毫摩爾，12.2g)的200ml THF液中，在-78℃攪拌1小時，在溫度保持低于-60℃時慢慢地加入到三異丙基硼酸酯(58.5毫摩爾，11.0g)的50ml THF中。讓反應混合物逐漸升溫至-20℃。加入冷卻的乙酸(80毫摩爾，9.6ml)。在溫度保持低于0℃時在15分鐘的時間里滴加入過氧化氫(58.5毫摩爾，5.9ml用5ml水稀釋的30%液)。攪拌10分鐘后，用硫酸銨溶液洗滌該溶液，干燥，并濃縮。用己烷研制殘留物并過濾得4.2g 4-叔丁氧苯酚。MS.
C10H14O2計算值C，72.26;H，8.49。
實驗值C，72.54;H，8.27。
制備例 6二乙基-(4-羥基)-苯乙基膦酸酯在-30℃，N2下，用注射器滴加正丁基鋰(15.0ml，1.6M的己烷溶液)處理亞甲基二膦酸四乙酯(6.22g，21.6mmol)的30ml無水THF溶液。所產生的溶液升溫至0℃保持30分鐘，然后再冷卻至-30℃。然后經套管將苯甲氧基苯甲醛的15ml無水THF的溶液注入。升至室溫并攪拌2小時后，倒入水(200ml)中猝止反應。將水溶液用乙酸乙酯(3×100ml)萃取。將有機相干燥(Na2SO4)，并在真空中濃縮得油狀物。將粗產物色譜分離(SiO2，25%己烷/乙酸乙酯)得6.1g(82%)的不飽和膦酸酯，為淡黃色油狀物，靜置時固化。
C19H23O4P計算值C，65.89;H，6.69。
實驗值C，66.15;H，6.59。
將來自前面反應的膦酸酯(6.1g，17.5mmol)溶于100ml無水乙醇中，并用1.15g 5%Pt/C處理。將該混合物在40psi加氫1小時，然后經過硅藻土墊。將濾液在真空中濃縮得4.5g(100%)的二乙基-(4-羥基)-苯乙基膦酸酯，為淡黃色油狀物。
制備例 7二乙基-(4-羥基)-苯基磷酸酯將4-芐氧苯酚(15.0g，75mmol)溶于100ml無水THF中并冷卻至0℃。然后將NaH(3.0g，75mmol，礦物油中60%分散體)分成幾小份注入其中。當停止放出氣體時，通過注射器滴加入二乙基氯代磷酸酯。反應攪拌1小時后，將混合物倒入H2O/乙酸乙酯(各150ml)中。分層，并用0.1N NaOH(2×100ml)洗滌有機層。將有機層干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮得淡黃色液體。色譜(SiO2，先用20%乙酸乙酯/己烷接著用40%己烷/乙酸乙酯)分離提供23.4g(93%)二乙基-(4-芐氧基)-苯基磷酸酯，為無色液體。
將二乙基-(4-芐氧基)-苯基磷酸酯(15.0g，44.7mmol)溶于150ml 30%乙酸乙酯的乙醇液中，同時還加有0.5ml濃鹽酸。該溶液中加入3.0g的10%Pt/C。將混合物在1個大氣壓下加氫18小時，然后經由硅藻土墊去除催化劑。真空中濃縮濾液，并將殘留物色譜分離(SiO2，乙酸乙酯)提供10.4g(94%)二乙基-4-羥基-苯基磷酸酯，為琥珀色液體。
制備例 8二乙基-(4-羥基)-苯膦酸酯在-78℃，N2下，于4-芐氧基溴代苯(10.0g，38mmol)的150ml無水THF溶液中滴加入正丁基鋰(26.1ml，41.8mmol，己烷的1.6M液)，滴加時間30分鐘。攪拌15分鐘，通過注射器滴加二乙基氯代磷酸酯(6.0ml，41.8mmol)。讓所得的混合物逐漸升至室溫，然后通過倒入H2O/乙酸乙酯(各200ml)猝止反應。分層，且用乙酸乙酯萃取水層(2×100ml)。將有機層干燥(Na2SO4)，并在真空中濃縮得黃色液體。色譜分離(SiO2，50-100%乙酸乙酯/己烷)提供11.1g(91%)的二乙基-(4-芐氧基)-苯膦酸酯，為無色液體。MS.
如上述實施例中描述的方法將二乙基-(4-芐氧基)-苯膦酸酯加氫。色譜提純粗還原產品提供4.3g(52%)的二乙基-(4-羥基)-苯膦酸酯，為淡黃色液體。MS.
制備例 94-(吡咯烷基磺酰基)-苯酚在室溫下于吡咯烷(17ml，237mmol)的20ml H2O溶液中，在5分鐘的時間里分批加入對氟苯磺酰氯(15g，79mmol)。1小時后，將溶液用100ml H2O稀釋，并用乙酸乙酯萃取(3×50ml)。將有機相干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮得12.3g(72%)4-(吡咯烷基磺酰)-氟苯，為無色油狀物，靜置時固化。該物無需進一步純化，用于下面反應。MS.
在室溫下，于苯甲醇(6.63ml，62.0mmol)的200ml無水DMF中，分小批量加入NaH(2.40g，60.0mmol，礦物油中的60%分散液)。攪拌30分鐘后，在10分鐘的時間里，加入4-(吡咯烷基磺酰)-氟苯(11.0g，51.2mmol)。30分鐘后形成白色沉淀物。然后用100ml H2O稀釋該反應物，并將產物用真空過濾分離。在真空中干燥固體物得14.85g(95%)4-(吡咯烷基磺酰基)-苯基芐基醚，為白色固體。MS.
將4-(吡咯烷磺酰基)苯基芐基醚(10.0g，33.1mmol)溶于100ml無水乙醇中。用2.5g的10%Pt/C處理該溶液。將混合物在40psi加氫2小時。然后讓反應混合物經過硅藻土墊去除催化劑。將濾液在真空中濃縮得6.8g(90%)4-吡咯烷基磺酰基)-苯酚，為白色固體。MS.
按相似的方式制備4-(甲基氨基磺酰基)-苯酚。
制備例 10N-(4-羥基苯酰氨基)-L-脯氨酸甲酯在0℃將L-脯氨酸甲酯氫氯化物(7.2g，43.8mmol)溶于100ml無水DMF中。于該溶液中加入三乙胺(4.2g，43.8mmol)。劇烈攪拌1小時后，過濾去除固體三乙胺鹽酸鹽。濾液中加入4-苯甲氧苯甲酸(10.0g，43.8ml)，接著加入DCC(9.9g，48.2mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌過夜。然后過濾去除固體DCC。將濾液在H2O/乙酸乙酯(各300ml)間分配。用200ml一份的水洗滌有機相幾次以去除DMF。將有機相干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮為固體殘留物，并色譜提純(SiO2，15-100%乙酸乙酯/己烷)。分離得5.3g(35%)的N-(4-芐氧苯酰氨基)-L-脯氨酸甲酯，為白色固體。MS.
將上述酰胺(10.0g，29.4mmole)溶于75ml無水乙醇中，該溶液中加入3g 10%Pd/C。將混合物在1個大氣壓下加氫5小時，然后讓反應物通過硅藻土墊去除催化劑。濃縮濾液得粗產物，N-(4-羥基苯酰氨基)-L-脯氨酸甲酯，將其色譜(SiO2，30%乙酸乙酯/己烷)純化得6.3g(86%)，為白色固體。MS.
制備例 11(R)-α-己基-4-硝基-1H-咪唑-1-乙酸(-)-辛可尼定鹽于5.89g(0.02mol)(-)-辛可尼定的80ml水懸浮液中加入2.78ml(2.02g，0.02mol)三乙胺。將混合物加溫約40-45℃。伴隨攪拌，向該加熱的懸浮液中加入10.21g(0.04ml)α-己基-4-硝基-1H-咪唑-1-乙酸外消旋混合物的40ml工業級乙醇液。(該混合物的PH根據需要加入三乙胺或加入鹽酸水溶液調到6.9-7.4)。然后將所得的懸浮液加熱至約85℃。讓所生成的溶液緩慢攪拌下逐漸冷卻至室溫。將沉淀的鹽過濾，用約30ml乙醇-水(1∶2)洗滌，并在50℃真空中干燥至恒重。該反應生成9g(R)-α-己基-4-硝基-1H-咪唑基-1-乙酸(-)-辛可尼定鹽。將部分產物轉化成游離酸，然后衍化成甲酯(重氮甲烷)并用HPLC在手性柱上分析。分析表明，從產物衍化的酸有94%的ee。用乙醇-水1∶1(1∶1體積)將產物鹽重結晶得7.4g的純鹽，ee＞99%(HPLC)，M.Pt.205℃(分解)。(NMR)。
C30H39N5O5計算值C，65.55;H，7.15;N，12.74。
實驗值C，65.32;H，7.25;N，12.74。
制備例 12(R)-α-己基-4-硝基-1H-咪唑-1-乙酸將如實施例1中描述所獲得的1份2.8g的純辛可尼定鹽與20ml 1M HCl混合。用30ml乙酸乙酯萃取所生成的懸浮液。將乙酸乙酯相干燥(Na2SO4)并濃縮至干，得0.82g(63%)(R)-α-己烷-4-硝基-1H-咪唑-1-乙酸。M.Pt.112-114℃。
實施例 1N-乙基-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛酰胺將4-硝基咪唑(0.29摩爾，32.9g，于30ml DMF液中)分批加氫化鈉(0.29摩爾，11.6g，礦物油中60%的分散體)處理，并攪拌45分鐘。將2-溴辛酸乙酯(0.29摩爾，73.1g)在1小時的時間里滴加入其中。在室溫下攪拌反應過夜，倒入冰水中，并用乙酸乙酯萃取。用鹽水洗滌有機相，干燥并濃縮得91g 2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛酸乙酯。MS.
在室溫下，將2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛酸乙酯(17毫摩爾，5.0g)和乙胺(20ml)在150ml乙醇中攪拌16小時。將反應物加入冰水中，并用乙酸乙酯萃取，用水洗滌，用硫酸鈉干燥并濃縮。靜置將油狀物結晶得3.9g N-乙基-2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)-辛酰胺。MS.
C13H22N4O3·1/4H2O計算值C，54.40;H，7.83;N，19.52。
實驗值C，54.45;H，7.73;N，19.12。
在40psi以Pd/C加氫還原N-乙基-2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛酰胺(5.3mmoles，1.5g)。將反應物過濾并濃縮。將殘留物溶于10ml THF并加入2-磺基苯甲酸環酐(5.3毫摩爾，0.98g)的10ml THF溶液中。在室溫下攪拌10分鐘之后，產物沉淀并過濾收集，用乙醚洗滌并干燥得1.1g產物。MS.
M.Pt.分解235℃。
C20H28N4O5S計算值C，55.03;H，6.46;N，12.83。
實驗值C，54.75;H，6.49;N，13.08。
實施例 2N-丙基-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛酰胺如實施例1，2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛酸乙酯(17毫摩爾，5.0g)與丙胺反應生成2.5g N-丙基-2-(硝基-1H-咪唑-1-基)辛酰胺。MS.
如實施例1將N-丙基-2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛酰胺(2.3毫摩爾，0.7g)還原成胺并與2-磺基苯甲酸環酸酐(2.3毫摩爾，0.423g)反應，得0.70g產品。MS.
M.Pt.分解235℃。
C21H30N4O5S·1.5H2O計算值C，52.78;H，6.91;N，11.71。
實驗值C，52.86;H，6.37;N，11.16。
實施例 3N-(2，2，2-三氟乙基)-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛酰胺2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛酸(7.8mmoles，2.0g)用25ml草酰氯處理，濃縮并加入到三氟乙胺氫氯酸鹽(7.8mmoles，1.06g)和三乙胺(2ml)的50ml THF溶液中。在室溫下攪拌16小時后，混合物加到水中，用乙酸乙酯提取，硫酸鈉干燥并濃縮。所得中間物在硅膠上色譜提純給出0.6g N-(2，2，2-三氟)乙基-2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛酰胺。MS.
C11H19F3N4O3計算值C，46.43;H，5.69;N，16.66實驗值
C，46.56;H，5.88，N，16.37將N-(2，2，2-三氟)乙基-2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛酰胺(1.5mmol，0.5g)用實施例1的方法還原和與2-磺基苯甲酸環酐(1.4mmoles，0.27g)反應產生500mg產物。MS.
M.Pt.257-259℃(分解)C20H25F3N4O5S·H2O計算值C，47.26;H，5.35;N，11.01實驗值C，47.39;H，5.01;N，10.82實施例4N-[2-(1-羥基-2-甲基)丙基]-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛酰胺2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛酸(3.9mmoles，1.0g)按實施例3的方法轉化成酰基氯，并與2-氨基-2-甲基-1-丙醇(5.85mmol，0.52g)反應，產生0.465g N-[2-(1-羥基-2-甲基)丙基]2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛酰胺。
N-[2-(1-羥基-2-甲基)丙基]-2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛酰胺(0.52mmoles，170mg)按實施例1方法還原并與2-磺基苯甲酸(0.52mmoles，96mg)反應，產生53mg產物。MS.
M.Pt.148-158℃
C22H32N4O6S計算值C，54.98;H，6.71;N，11.66實驗值C，51.49;H，5.53;N，8.32實施例52-[[[1-[1-[(2-氧代-1-咪唑烷基)羰基]庚基]-1H-咪唑-4-基]氨基]羰基]苯磺酸用與實施例3相同方法制備。產物產率17%。MS.
M.Pt.219-228℃C21H27N5O6S計算值C，52.82，H，5.70;N，14.66實驗值C，51.19;H，5.54;N，12.65實施例62-[[[1-[(2-硫代-1-咪唑烷基)羰基]-庚基]-1H-咪唑-4-基]氨基]羰基]苯磺酸用與實施例3相同的方法制備。產物產率11%。MS.
M.Pt.203-211℃C21H27N5O5S計算值C，51.10;H，5.51;N，14.19實驗值C，49.30;H，5.71;N，13.69
實施例7N-(2-吡啶基)-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛酰胺用與實施例3相同的方法制備，產品產率23%，MS.
M.Pt.165-173℃C23H27N5O5S計算值C，56.89;H，5.61;N，14.42實驗值C，52.50;H，4.75;N，9.72實施例8N-(2-羥基苯基)-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛酰胺用與實施例3相同的方法制備，產物產率33%。MS.
M.Pt.138-147℃C24H28N4O6S·1.25HClC，52.78;H，5.40;N，10.26實驗值C，52.75;H，5.23;N，9.93實施例9N-(2-羧基苯基)-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛酰胺N-(2-乙氧甲酰苯基)-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛酰胺用與實施例3相同的方法制備。該酯(100mg)在1ml 1N NaOH和0.2ml甲醇中室溫下水解1小時，以1N HCl酸化。所得固體過濾并干燥，產率為88%。MS.
M.Pt.163-168℃C25H28N4O7S·1.25H2O計算值C，54.49;H，5.57;N，10.17實驗值C，54.58;H，5.18;N，9.75實施例102-[4-(3-羥基-2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛酸2-羧基-6-羥基苯磺酸(1.8mmoles，400mg)溶解在15ml草酰氯中，加入1滴DMF。室溫下攪拌反應30分鐘。真空下除去溶劑，加入20ml THF。逐滴加入40ml THF中的2-(4-氨基-1H-咪唑-1-基)辛酸乙酯(在乙醇中用5%Pd/C還原1.8mmoles 2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛酸乙酯制備)的溶液和2.0mmoles三乙胺。在室溫下攪拌反應3小時，加入乙酸乙酯，溶液用水洗滌，以硫酸鈉干燥并濃縮。中間物在乙醚中形成漿狀，過濾。以含15%甲醇的二氯甲烷洗脫，在硅膠上色譜分離。所得酯于室溫下，在20ml甲醇和45ml 2N NaOH中水解2小時。除去溶液，加入水，用5N HCl調節PH值到2，產物提取到乙酸乙酯中，以硫酸鈉干燥并濃縮，得到2-[4-(3-羥基-2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛酸。MS.
M.Pt.238-240℃C18H23N3O7S·1/2H2O計算值C，49.71;H，5.50;N，9.60實驗值C，49.73;H，5.38;N，9.30實施例111-[1-氧代-1-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-D-脯氨酸以實施例21的方法制備立體異構體的混合物。
異構體A產率9% MS.
M.Pt.145-150℃C23H30N4O7S計算值C，54.53;H，5.97;N，11.06實驗值C，54.34;H，6.06;N，11.03異構體B產率5% MS.
M.Pt.148-155℃C23H30N4O7S計算值C，54.53;H，5.97;N，11.06實驗值C，54.52;H，6.08;N，10.93
實施例121-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基-4-順式-苯氧基-L-脯氨酸N-苯甲氧甲酰基-4-順式-苯氧基-L-脯氨酸甲酯(0.115moles，41g)在乙醇中經5%Pd/C催化加氫并濃縮。
2-溴代辛酸(0.116moles，26g)在冰浴溫度下逐滴加入到50ml二氯甲烷中的草酰氯溶液中;加入1滴DMF。溶液在室溫下攪拌1.5小時并濃縮。殘余物溶解在THF中，在冰浴溫度下逐滴加入到脯氨酸和三乙胺(45ml)的THF溶液中。在室溫下攪拌反應過夜，過濾并濃縮。所得油狀物溶解在乙酸乙酯中，以鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并濃縮。產物以0-30%乙酸乙酯/己烷洗脫在硅膠上色譜提純，給出26g 1-(2-溴-1-氧代)辛基-4-順式-苯氧基-L-脯氨酸甲酯。(NMR)4-硝基咪唑(66.3mmoles，7.5g)溶解在200ml DMF中。分批添加氫化鈉(75mmoles，3.0g，60%礦物油液)。攪拌溶液1小時。加入1-(2-溴-1-氧代)辛基-4-順式-苯氧基-L-脯氨酸甲酯(60mmoles，25.6g)。室溫下攪拌反應過夜，濃縮反應物，殘留物溶解在乙酸乙酯中，用鹽水洗滌二次，經硫酸鈉干燥并濃縮。中間物在硅膠上色譜分離，以25-75%乙酸乙酯/己烷洗脫。
異構體A產率40% MS.
C23H30N4O6計算值C，60.16;H，.67;N，11.95實驗值
C，60.25;H，6.59;N，12.21異構體B產率16% MS.
C23H30N4O6計算值C，60.25;H，6.59;N，12.22實驗值C，60.43;H，6.63;N，12.261-[1-氧代-2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛基]-4-順式-苯氧基-L-脯氨酸甲酯(異構體A，22.7mmoles，10.4g)用實施例1的方法在乙醇中用5%Pd/C還原并與2-磺基苯甲酸環酐(34.2mmoles，6.5g)反應產生9.2g酯。MS.該酯室溫下在25ml乙醇和100ml 1N氫氧化鈉中水解1小時并濃縮。殘留物于最小體積水中溶解，用2N HCl調節PH值至2.4。過濾出沉淀并干燥，給出6.0g產物。MS.
M.Pt.180-190℃C29H34N4O8S計算值C，58.18;H，5.72;N，9.36實驗值C，58.18;H，5.78;N，9.50異構體B用相同的步驟處理，得到產率90%的酸M.Pt.＞200℃C29H34N4O8S·1/2 H2O·1/2 NaClC，54.69;H，5.54;N，8.80實驗值C，54.21;H，5.46;N，8.77
實施例131-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]庚基]-4-順式-苯氧基-L-脯氨酸2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)庚酸(4mmoles，0.98g，用實施例1的方法制備)在25ml草酰氯中攪拌1小時并濃縮。殘留物溶解在二氯甲烷(100ml)中并逐滴加入到4-順式-苯氧基-L-脯氨酸甲酯(4mmoles，0.9g)和三乙胺(0.56ml)/100ml二氯甲烷溶液中。室溫下攪拌反應2小時，然后加到冰水中，有機層用水洗滌，經硫酸鈉干燥，濃縮。殘留物在硅膠上色譜提純，以50-75%乙酸乙酯/己烷梯度液洗脫。
異構體A中間體產率41%，MS.
異構體B中間體產率28%，MS.
異構體A進一步用與實施例12中相同的方法反應，得到酸產物。MS.
C28H32N4O8S計算值C，57.52;H，5.52;N，9.58實驗值C，56.87;H，6.13;N，10.33實施例141-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氧基-1H-咪唑-1-基]己基]-4-順式-苯氧基-L-脯氨酸用實施例12的方法制備異構體A產率48%。MS.
M.Pt.215-220℃C27H30N4O8S·H2O·NaClC，50.12;H，4.98;N，8.66實驗值C，49.79;H，4.81;N，8.71異構體B產率29%。MS.
M.Pt.210℃(分解)C27H30N4O8S·H2O計算值C，55.09;H，5.48;N，9.52實驗值C，55.39;H，5.36;N，9.15實施例151-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]8，8，8-三氟辛基]-4-順式-苯氧基-L-脯氨酸6-溴己酸(0.51moles，100g)在SF4下，于130℃加熱8小時，加入二氯甲烷。過濾溶液并濃縮。形成黑色油狀物，6-溴-1，1，1-三氟己烷被蒸餾。
B.Pt.158-164℃/760mm6-溴-1，1，1-三氟己烷(0.228moles，50g)加入到碘化鈉(51g)/250ml丙酮溶液中，室溫下攪拌1小時，過濾溶液并濃縮。殘留物在乙醚中形成漿狀，過濾并濃縮，得到碘化物56g產率92%。乙酰乙酸乙酯(0.125moles，16.45g)慢慢加入到氫化鈉(0.126moles，5.06g 60%礦物油液)中。加入碘化物(0.115moles，30.6g)。在50℃下加熱反應16小時，然后倒入冰水中。中間產物用乙酸乙酯提取，經硫酸鈉干燥并濃縮。殘留物在硅膠上色譜提純，以乙酸乙酯/己烷洗脫，得到13.3g 6，6，6-三氟己基乙酰乙酸乙酯。MS.
6，6，6-三氟己基乙酰乙酸乙酯在-35℃下加入到鈉(50mmoles，1.15g)/乙醇(150ml)溶液中，攪拌15分鐘。加入N-溴代琥珀酰亞胺(50mmoles，8.9g)。將溶液加熱到室溫并攪拌2.5小時。混合物倒入水中，中間物以己烷提取，除去溶劑。油狀物在硅膠上色譜提純，以己烷洗脫，得到13.6g 2-溴-8，8，8-三氟辛酸乙酯。MS.
如實施例1的方法，將4-硝基咪唑(43mmoles，4.86g)與氫化鈉(43mmoles，1.72g)反應，再與2-溴-8，8，8-三氟辛酸乙酯(43mmoles，13.2g)反應。所得酯在10ml甲醇和30ml 2N NaOH中水解，得到2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)-8，8，8-三氟辛酸定量產率。(NMR)所得酸用實施例13的方法進一步反應以產生1-[1-氧代-2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)-8，8，8-三氟辛基]-4-順式-苯氧基-L-脯氨酸甲酯的主體異構體。(NMR)該異構體以實施例1的方法分離。如前面所述，將一種異構體進一步反應。產物在硅膠上色譜提純，以5%甲醇/氯仿洗脫，產生1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]-8，8，8-三氟辛基]-4-順式-苯氧基-L-脯氨酸。
異構體A產率13%，MS.
C29H30F3N4O8S·0.6HCl計算值C，51.64;H，4.72;N，8.31實驗值C，51.58;H，4.80;N，8.18實施例161-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]7，7，7-三氟庚基]-4-順式-苯氧基-L-脯氨酸如實施例15的方法制備2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)-7，7，7-三氟庚酸。(NMR)。該酸進一步用實施例13的方法反應以制備1-[1-氧代-2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)-7，7，7-三氟庚基]-4-順式-苯氧基-L-脯氨酸甲酯。(NMR)該酯如15例的方法進一步反應產生1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]-7，7，7-三氟庚基]-4-順式-苯氧基-L-脯氨酸。
異構體A產率21%，MS.
C28H29F3N4O8S·0.9HCl計算值C，50.09;H，4.49;N，8.44實驗值
C，50.13;H，4.66;N，8.44異構體B產率26%，MS.
C28H29F3N4O8S計算值C，52.66;H，4.58;N，8.77實驗值C，52.80;H，4.85;N，8.63實施例171-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-順式-(3-吡啶氧基)-L-脯氨酸4-順式-(3-吡啶氧基)-L-脯氨酸甲酯(5.32mmoles，1.18g按制備3中方法制備，接著在乙醇中用5%Pd/C將N-苯甲氧甲酰基-4-順式(3-吡啶氧基)-L-脯氨酸去保護基而成)，將2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛酸(5.32mmoles，1.36g)和羥基苯并三唑(5.85mmoles，0.8g)溶解在5ml DMF中。5分鐘后加入雙環己基碳化二亞胺(5.85mmoles，1.21g)。室溫下攪拌反應60小時。加入乙酸乙酯(15ml)。過濾溶液，用水洗滌，經硫酸鈉干燥并濃縮。殘留物在硅膠上色譜提純，以1%甲醇/氯仿洗脫，產生1-[1-氧代-2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛基]-4-順式-(3-吡啶氧基)-L-脯氨酸甲酯。
異構體A0.63g;MS.
異構體B0.37g;MS.
每一種異構體按實施例1反應，產生1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-順式-(3-吡啶氧基)-L-脯氨酸。
異構體A產率3%，MS.
異構體B產率3%，MS.
實施例181-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基-4-順式-(4-甲氧基苯氧基)-L-脯氨酸N-苯甲氧甲酰基-4-順式-(4-甲氧基苯氧基)-L-脯氨酸甲酯(如制備3中的方法制備)按實施例12的方法反應以產生1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基-4-順式(4-甲氧基苯氧基)-L-脯氨酸。
異構體A產率42% MS.
C30H36N4O9S·0.5 H2O計算值C，56.50;H，5.80;N，8.78實驗值C，56.36;H，6.12;N，8.67。
實施例191-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氧基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-順式-(4-羥基苯氧基)-L-脯氨酸
N-苯甲氧甲酰基-4-順式-(4-叔丁氧苯氧基)-L-脯氨酸甲酯(用制備3中的方法制備)按實施例13反應，產生1-[1-氧代-2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛基-4-順式-(4-叔丁氧苯氧基)-L-脯氨酸。
異構體A′產率，34%.MS.
C27H38N4O7·0.8H2O計算值C，59.50;H，7.32;N，10.27實驗值C，59.60;H，7.04;N，9.98異構體B′產率，33%。MS.
C27H38N4O7計算值C，61.12;H，7.22;N，10.56實驗值C，61.37;H，7.32;N，10.59將異構體A′如實施例12進一步反應產生1-[1-氧-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-順式-(4-叔丁氧苯氧基)-L-脯氨酸乙酯。該叔丁氧苯氧基脯氨酸乙酯室溫下，在三氟乙酸(TFA，3ml)中攪拌3小時。過量的TFA被除去，將殘留物按實施例12的方法水解，得到產物。
異構體AMS.
M.Pt.180-194℃C29H34N4O9S計算值C，56.67;H，5.58;N，9.12
實驗值C，56.95;H，5.69;N，8.93實施例201-[1-氧代-2-[4-(2-羧基-3-羥基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-順式-苯氧基-L-脯氨酸1-[1-氧代-2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛基]-4-順式-苯氧基-L-脯氨酸的異構體A(1.09mmoles，0.5g，如實施例12的方法制備)，在乙醇中，以5%Pd/C催化加氫，過濾并濃縮。將殘留物溶解在25ml乙腈中，加入到3-羥基鄰苯二甲酸酐/乙腈(25ml)溶液中，室溫下攪拌2小時后，收集固體物并干燥，得產率21%酯。MS.所得酯(0.24mmoles，0.14g)在5ml乙醇和5ml 1N NaOH中溫熱15分鐘，室溫下攪拌1小時，再凝縮。將水(20ml)加入到殘留物中，用5N HCl調PH值至3.0，過濾出沉淀并干燥，得產率86%1-[1-氧代-2-[4-(2-羧基-3-羥基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-順式-苯氧基-L-脯氨酸。MS.
M.Pt.155-170℃C30H34N4O8計算值C，62.27;H，5.92;N，9.68實測值C，62.01;H，5.66;N，9.26
實施例211-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-L-脯氨酸二異丙基乙胺(39.6mmoles，5.1g)在0℃下加入到L-脯氨酸芐酯鹽酸鹽(39.6mmoles，10.1g)/DMF(20ml)溶液中，攪拌1小時。該溶液加入到2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛酸(39.6mmoles，10.1g)和羥基苯并三唑(43mmoles，5.8g)的DFM(10ml)溶液中，攪拌30分鐘，在兩小時內分批加入二環己基碳化二亞胺(43mmoles，8.97g)，加入乙酸乙酯(50ml)，將溶液過濾，經硫酸鈉干燥并濃縮。油狀物在硅膠上色譜提純，以40%乙酸乙酯/己烷洗脫，產生5.32g1-[1-氧代-2-[4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛基]-L-脯氨酸芐酯。
1-[1-氧代-1-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛基]-L-脯氨酸芐酯(2.46mmoles，0.89g，異構體A)在乙醇中用0.5g 10%Pd/C還原。過濾掉催化劑，濃縮溶液。所得胺溶解在5ml THF中。加入磺基苯甲酸酐(2.46mmoles，0.46g)，攪拌30分鐘，除去溶劑;將殘留物與乙醚一起研制。固體物溶解在3ml 1N NaOH中，攪拌2小時，用1N HCl酸化到PH為3.5。產物經過濾，然后在反相硅膠上色譜提純，產生96mg 1-[1-氧代-2-[4-2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-L-脯氨酸。MS.
M.Pt.190-195℃。
C23H30N4O7S計算值
C，54.54;H，5.97;N，11.06實測值C，54.46;H，6.03;N，11.08以類似方式處理異構體B，和115mg產物。MS.
M.Pt.163-170℃實測值C，54.37;H，6.00;N，11.96下列實施例以相似的方式制備，進一步說明下式定義的本發明化合物的合成
實施例 R 產率(%) M.P.(℃) 元素分析22 甲基 4 146-170 C30H36N4O8S·0.5H2O:計算值C,58.01;H,5.96;N,9.02實測值C,58.14;H,6.16;N,9.32.
23 乙基 3 155-165 C31H38N4O8S·1.0H2O:計算值C,57.75;H,6.25;N,8.68實測值:C,57.48;H,6.08;N,8.80.
24 i-丙基 2 175-185 C32H40N4O8S:計算值(分解) C,59.98;H,6.29;N,8.74實測值:C,59.83;H,6.46N,8.51.
25 叔丁基 3 162-270 C33H42N4O8S:計算值C,60.53;H,6.47;N,8.56實測值:C,60.92;H,6.95;N,7.73.
26 環戊基 2 172-180 C34H42N4O8S:計算值C,61.24;H,6.35;N,8.40實測值:C,61.50;H,6.47;N,8.47.
27 苯基 3 154-165 C35H38N4O8S:計算值C,62.30;H,5.68;N,8.30實測值:C,62.41;H,5.83;N,8.07.
28 F 5 150-190 C29H33F3N4O8S·1.5H2O:計算值C,55.63;H,5.43;N,8.90實測值:C,55.68;H,5.67;N,8.42.
29 CF34 155-162 C30H33N4O8S·1.5H2O:計算值C,51.94;H,5.19;N,8.00實測值:C,52.33;H,4.87;N,7.64.
30 SCH32 162-168 C30H36N4O8S2:計算值C,55.89;H,5.63;N,8.69實測值:C,55.68;H,5.56;N,8.40.
31 S(O)CH33 160-170 C30H36N4O8S·1.5H2O:計算值C,51.94;H,5.19;N,8.00實測值:C,52.33;H,4.87;N,7.64.
32 SO2CH35 170-182 Calcd for C30H36N4O10S2:計算值C,53.24;H,5.36;N,8.28實測值:C,53.30;H,5.52;N,8.25.
33 CO2H 4 185-195 C30H34N4O10S·3.0H2O:計算值C,51.71;H,5.78;N,8.04實測值:C,51.57;H,5.47;N,7.66.
34 CONH25 141-151 C30H35N5O9S:計算值C,56.15;H,5.50;N,10.91實測值:C,54.82;H,5.87;N,12.46.
35 CH2OH 1 160-172 C30H36N4O9S:計算值C,57.31;H,5.77;N,8.91實測值:C,56.85;H,5.81;N,9.3136 CH2CO2H 5 160-175 C31H36N4O10S·0.5H2O:計算值C,55.88;H,5.55;N,8.42實測值:C,55.46;H,5.81;N,8.7137 (CH2)2CO2H 3 140-148 C32H38N4O10S:計算值C,57.30;H,5.71;N,8.35實測值:C,57.03;H,5.83;N,8.2938 1-咪唑 2 175- C32H36N6O8S:計算值180(分解) C,57.82;H,5.46;N,12.64實測值:C,56.57;H,5.92;N,13.53.
48 乙基 3 155-165 C31H38N4O9S·1.0H2O:計算值C,56.3;H,6.05;N,8.47實測值:C,56.6;H,5.93;N,8.7149 i-丙基 4 138-145 C32H40N4O9S:計算值C,58.52;H,6.14;N,8.53實測值:C,56.62;H,6.23;N,8.45.
50 n-丁基 2 134-155 Calcd for C33H42N4O9S:計算值C,59.09;H,6.31;N,8.35實測值:C,58.85;H,6.31;N,8.30.
51 i-丁基 7 160- C33H42N4O9S·0.17HCl:計算值165(分解) C,58.44;H,6.28;N,8.28.
實測值:C,58.48;H,6.46;N,8.6552 環戊基 3 170- C33H42N4O9S:計算值175(分解) C,59.09;H,6.31;N,8.35實測值:C,58.97;H,6.22;N,8.2553 CF35 163- C30H33F3N4O9S:計算值165(分解) C,52.78;H,4.87;N,8.21實測值:C,53.00;H,5.01;N,8.10.
54 環戊基 7 170- C34H42N4O9S·0.4HCl:計算值175(分解) C,58.56;H,6.13;N,8.03.
實測值:C,58.61;H,6.05;N,8.18.
55 環丙基甲基 5 163- C33H40N4O9S:計算值170(分解) C,59.27;H,6.03;N,8.38實測值:C,59.01;H,5.87;N,8.55.
56 環乙基-甲基 11 170- C36H46N4O9S·9.73HCl:計算值174(分解) C,58.63;H,6.39;N,7.60.
實測值:C,58.66;H,6.13;N,7.57.
57 CH2CO2H 8 161-164 C31H36N4O11S:計算值C,55.35;H,5.39;N,8.33實測值:C,55.51;H,5.57;N,8.12.
58 C(CH3)2CO2H 1 167- C33H40N4O11S·0.72HCl:計算值175(分解) C,54.55;H,5.65;N,7.71實測值:C,54.43;H,5.59;N,8.11.
75 甲氧基 3 160-170 C31H36N8O6·1.5H2O:計算值C,57.80;H,6.10;N,17.40實測值:C,57.68;H,5.75;N,17.32.
76 叔丁氧基 17 149- C34H42N8O6·0.5HCl:計算值156(分解) C,60.32;H,6.33;N,16.55實測值:C,60.46;H,6.22;N,16.69.
77 CH2CO2H 5 135-146 C32H36N8O7·1.0H2O:計算值C,57.90;H,5.70;N,16.90實測值:C,57.87;H,5.81;N,15.40.
78 CO2H 5 157-178 C31H34N8O7:計算值C,59.04;H,5.43;N,17.77實測值:C,58.88;H,5.54;N,17.54.
79 OCH2CO2H 4 175-190 C32H36N8O8·1.5H2O:計算值C,55.89;H,5.72;N,16.29實測值:C,55.64;H,5.37;N,16.18.
80 乙基 2 133-143 C30H38N4O8-1 H2O:計算值C,61.5;H,6.45;N,8.97;
實測值:C,61.0;H,6.29;N,9.0581 OH 1 135- C30H34N4O9計算值140(分解) C,60.60;H,5.76;N,9.42實測值:C,48.81;H,4.65;N,7.14.
實施例911-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-順式-(4-亞甲基膦酸)-苯氧基)-L-脯氨酸將NaH(9.3g，232mmol，60%礦物油中的分散體)在0℃下分成小份分批加入到二甲基亞磷酸酯(22.4ml，244mmol)的無水THF(400ml)溶液中。然后經套管引入100ml無水THF中的芐氧基芐基氯(53.7g，232mmol)。所形成的混合物溫熱至室溫并攪拌過夜。真空除去溶劑，所形成的油狀物在水/乙醚(各300ml)中分配。將兩層分離，水層用乙醚提取(2×200ml)，合并有機層，干燥(Na2SO4)并濃縮，給出78克稠油狀物。色譜提純(Sio2，75%乙酸乙酯/25%己烷)給出36.6g(52%)二甲基-(4-芐氧基)-芐基膦酸酯固體殘留物。MS.
C16H19O4P計算值C，62.74;H，6.25實驗值C，62.96;H，6.23二甲基-(4-芐氧基)-芐基膦酸酯(19.4g，63mmol)的100ml含1%濃鹽酸的乙醇溶液用840mg 5%Pd/C處理。混合物在40psi下加氫30分鐘。反應混合物經硅藻土過濾，濾液真空濃縮，給出13.6g(100%)二甲基-(4-羥基)-芐基膦酸酯白色固體。M.Pt.126-129℃。
C9H13O4P計算值C，50.01;H，6.06實測值C，50.21;H，6.09將三苯基膦(10.6g，39.4mmol)和二甲基-(4-羥基)-芐基膦酸酯(7.9g，37.8mmol)在N2下，0℃時，加入到N-苯甲氧甲酰基-反式-4-羥基脯氨酸甲酯(10.0g，35.8mmol)的無水THF(400ml)溶液中。將偶氮二羧酸二乙酯(6.3ml，39.4mmol)在30分鐘期間逐滴加入到該混合物中。使反應混合物溫熱至室溫并攪拌18小時。真空除去溶劑，將殘留物色譜提純(SiO2，50-100%乙酸乙酯/己烷，給出13.3g(75%)，N-苯甲氧甲酰基-4-(順式)-(二甲基-4-氧代芐基膦酸酯)-L-脯氨酸甲酯，呈稠油狀。
C23H28NO8P計算值C，57.86;H，5.91;N，2.93
實測值C，57.66;H，6.04;N，3.02N-苯甲氧甲酰基-4-(順式)-(二甲基-4-氧代芐基膦酸酯)-L-脯氨酸甲酯(6.6g，13.8mmol)的100ml含1%濃鹽酸的乙醇溶液用1.0g 10%Pd/C處理。混合物在40psi下加氫2小時，然后經硅藻土墊過濾除去催化劑。將濾液濃縮至油狀，然后在CHCl3和飽和NaHCO3(各100ml)中分配。將兩層分離，干燥(Na2SO4)有機層，真空濃縮，給出淡黃色油狀去保護基脯氨酸酯粗產物。
在一個分離燒瓶中，將2-(4-硝基咪唑)-辛酸(3.7g，14.5mmol)溶液在25ml無水CH2Cl2中，在該溶液中加入草酰氯(1.7ml，18.9mmol)，接著加入3滴DMF。當氣體逸出停止后，真空除去溶劑，給出琥珀色油狀酰基氯(該油狀物另加20ml CH2Cl2蒸發出)。該酰基氯立即用于下面的反應。
將N，N-二異丙基乙胺(2.7ml，15.1mmol)在10℃下加入到上述脯氨酸酯的20ml無水CH2Cl2溶液中，上述酰基氯以10ml CH2Cl2溶液的形式從所附漏斗中逐滴加入。所形成的混合物溫熱至室溫，并攪拌18小時。反應物接著在乙酸乙酯/水(各200ml)中分配。分離兩層，水層用乙酸乙酯提取(3×100ml)。合并有機層，用鹽水洗滌，接著用水洗滌。然后干燥有機層(Na2SO4)并真空濃縮，給出油狀1-[1-氧代-2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛基]-4-順式-[(4-二甲基亞甲基膦酸酯)-苯氧基]-L-脯氨酸甲酯。色譜(SiO2，1%甲醇/乙酸乙酯)分離出非對映異構的辛酰胺，得到1.57g(19%)的(R，S，S)異構體，和1.225克(S，S，S)異構體以及1.12g混合物餾分。(R，S，S，)異構體數據如下MS.
C26H37N4O9P計算值C，53.79;H，6.42;N，9.65實測值C，53.26;H，6.58;N，9.18(S，S，S)異構體數據如下MS.
C26H37N4O9P計算值C，53.79;H，6.42;N，9.65實測值C，53.55;H，6.47;N，9.381.0g 5%Pd/C加入到4-硝基咪唑辛酰胺(4.0g，6.9mmol)的50ml無水乙醇溶液中，混合物在40psi下加氫30分鐘，然后混合物通過硅藻土墊除去催化劑。濾液濃縮成琥珀色油狀物，該油狀物與無水THF共沸兩次。
在一個分離燒瓶中，磺基苯甲酸酐(1.4g，7.6mmol)在N2下溶解在5ml無水THF中。于該溶液中加入上述氨基咪唑的5ml無水THF溶液。攪拌30分鐘后，該溶液與乙醚/己烷一起研制，經過濾收集到4.70g(93%)淡黃色固體磺酸。該產物，1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-順式[(4-二甲基亞甲基膦酸酯)苯氧基]-L-脯氨酸甲酯不經進一步純化用于下面的反應。M.Pt.110℃(分解)。MS.
C33H43N4O11PS計算值C，53.94;H，5.90;N，7.62實驗值C，53.66;H，5.94;N，6.85。
將三甲基甲硅烷基溴化物(5.0g，32.4mmol)于0℃下在15分鐘期間逐滴加入到上述甲基酯(4.70g，6.5mmol)的25ml無水CH2Cl2溶液中。形成的混合物溫熱至室溫并攪拌1小時。真空除去溶劑，殘留物溶解在16ml 2N NaOH中，攪拌1小時后，反應混合物用5N HCl酸化至PH＝1.0。含水物用10%乙醇/乙酸乙酯(3×50ml)提取。將有機物干燥(Na2SO4)并濃縮，給出固體殘留物，將其溶解在最小量的無水乙醇中，并用乙醚/己烷研磨。過濾分離給出2.79g(61%)本標題膦酸淡黃色固體。M.Pt.190℃(分解)。MS.
C30H37N4O11PS計算值C，52.02;H，5.38;N，8.09實測值C，51.80;H，5.42;N，7.91實施例921-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-順式[(4-N-甲亞磺酰氨基)苯氧基]-L-脯氨酸將三苯基膦(12.7g，48mmol)和4-硝基酚(6.7g，48mmol)在0℃和N2下加入到N-Boc-反式-4-羥基脯氨酸甲酯(10.0g，41mmol)的150ml無水THF溶液中。將偶氮二羧酸二乙酯(7.7ml，48mmol)在30分鐘期間逐滴加入到上述混合物中。混和物溫熱至室溫，攪拌2天后，真空除去溶劑。所得粗制油狀物依次用每份200ml甲苯和乙醚處理并經結晶除去三苯膦氧化物和二乙基偶氮二酰肼，形成的油狀物然后經色譜提純(SiO2，15-50%乙酸乙酯/己烷)，給出5.2g(34%)淡黃色油狀N-Boc-4-(順式)-(4-硝基苯氧基)-L-脯氨酸甲酯。
C17H22N2O7計算值C，55.73;H，6.05;N，7.65實測值C，55.94;H，6.09;N，7.59將1.5g 10%Pd/C加入到N-Boc-4(順式)-(4-硝基苯氧基)-L-脯氨酸甲酯(9.0g，24.7mmol)的100ml乙醇溶液中。在40psi下將該混合物加氫3小時。然后將反應通過硅藻土墊除去催化劑。真空濃縮給出一種油狀物，立即用于下面的反應。
將上述油狀物溶解在50ml無水CH2Cl2和11.5ml(65.5mmol)N，N-二異丙基乙胺中。通過一個附設漏斗將在10ml CH2Cl2中的甲磺酰氯(6.4g，55mmol)溶液滴加入到上面形成的混合物中。攪拌2小時后，反應物倒入H2O(200ml)中。水層用乙酸乙酯提取(3×100)，將有機層干燥(Na2SO4)，并真空濃縮至油狀。色譜提純(SiO2，25%乙酸乙酯/己烷)給出3.22g(27%)無色油狀N-Boc-4-(順式)-((4，-N，N-二甲亞磺酰氨基)-苯氧基)-L-脯氨酸甲酯。
C19H28N2O9S2計算值C，46.33;H，5.73;N，5.69實測值C，46.16;H，5.48;N，5.45將三氟乙酸(1.15ml，18mmol)在室溫下加入到N-Boc-4-(順式)-[(4-N，N-二甲亞磺酰氨基)-苯氧基]-L-脯氨酸甲酯(3.0g，6.1mmol)的40ml無水CH2Cl2溶液中。攪拌3小時后，在真空中除去溶劑，給出油狀物，將該油狀物在飽和碳酸氫鈉和乙酸乙酯(各100ml)中分配。將有機相干燥(Na2SO4)并濃縮給出2.27g(94%)4-(順式)-[(4-N，N-二甲亞磺酰氨基)-苯氧基]-L-脯氨酸甲酯固體物，立即用于下面的反應。
使用上述描述的方法將2-(4-硝基咪唑)辛酸(1.7g，6.7mmol)轉化成酰基氯并與上面的脯氨酸酯反應。將粗制反應混合物色譜提純(SiO2，70-100%乙酸乙酯/己烷)給出1.66g(43%)(R)-1-[1-氧代-2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛基]-4-(順式)-[(4-N，N-二甲亞磺酰氨基)-苯氧基]-L-脯氨酸甲酯白色固體。M.Pt.106-109。
C25H35N5O10S2計算值C，47.69;H，5.60;N，11.12
實測值C，47.88;H，5.51;N，11.22將0.5g 5%Pd/C加入到(R)-1-[1-氧代-2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛基]-4-(順式)-[(4-N，N-二甲亞磺酰氨基)-苯氧基]-L-脯氨酸甲酯(1.26g，2.0mmol)的50ml無水乙醇溶液中。混合物在40psi下加氫1.5小時，將混合物通過硅藻土墊除去催化劑。濃縮濾液得琥珀色油狀物，該油狀物與無水THF共沸2次。
在一個分離燒瓶中將磺基苯甲酸酐(0.40g，2.2mmol)在N2下溶解在5ml無水THF中。于該溶液中加入上述氨基咪唑的5ml無水THF溶液。攪拌30分鐘后，溶液與乙醚/己烷一起研制，經過濾收集到1.50g(95%)(R)-1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-(順式)-[(4-N，N-二甲亞磺酰氨基)-苯氧基]-L-脯氨酸甲酯淺黃色固體。該中間體不經進一步純化用于下面的反應。M.P.165-170℃。MS.
C32H41N5O12S3·1.0H2O計算值C，47.93;H，5.40;N，8.73實測值C，48.31;H，5.40;N，8.44(R)-1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-(順式)-[(4-N，N-二甲亞磺酰氨基)-苯氧基]-L-脯氨酸甲酯(0.40g，0.52mmol)在室溫下溶解在1N NaOH(3ml)和THF(2ml)中。將溶液攪拌過夜。以1N HCl調PH至1.0。沉淀形成，用10%乙醇/乙酸乙酯萃取含水物，干燥(Na2SO4)并真空濃縮，給出固體殘留物將之用MeOH乙醚一起研制，產生0.27g(75%)(R)-1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-(順式)-((4-N-甲亞磺酰氨基)-苯氧基)-L-脯氨酸白色固體。M.Pt.195-198℃.MS.
C30H37N5O10S2計算值C，52.09;H，5.39;N，10.12實測值C，51.82;H，5.47;N，10.28實施例93(R)-1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-(順式)-((4-N-三氟甲亞磺酰氨基)-苯氧基)-L-脯氨酸用類似于實施例92的方法制備(R)-1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-(順式)-((4-N-三氟甲亞磺酰氨基)-苯氧基)-L-脯氨酸。MP 145℃(分解).MS.
C30H33N5O10S2F3·1.0NaCl計算值C，46.93;H，4.84;N，9.99實測值C，46.97;H，4.58;N，9.75
實施例94(R)-1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-(順式)-[(4-N，N-甲基-甲亞磺酰氨基-苯氧基]-L-脯氨酸將N，N-二異丙基乙胺(31.0g，42.5mmol)加入到4-芐氧苯胺(21.7g，108mmol)的100ml無水CH2Cl2溶液中。混合物冷至10℃，以甲磺酰氯(18.ml，234mmol)處理。攪拌1小時后，反應物在水/乙酸乙酯中分配。通過過濾收集所形成的固體，真空中干燥給出25.7g(68%)4-芐氧基-N，N-二甲亞磺酰氨基苯棕色固體。M.Pt.212-215℃MS.
C15H17NO5S2計算值C，50.69;H，4.82;N，3.94實測值C，50.87;H，4.85;N，3.914-芐氧基-N，N-二甲基亞磺酰氨基-苯(25.0g，71.0mmol)的300ml THF溶液中加入1N NaOH(250ml)。形成的溶液在70℃下攪拌2小時，當冷卻后就用5N HCl酸化該混合物至PH＝1.0。用CHCl3提取(5×250ml)，接著干燥(Na2SO4)并真空濃縮，給出15.05g(51%)4-苯氧基-N-甲亞磺酰氨基苯白色固體。M.Pt.155-158℃，MS.
C14H15NO3S計算值C，60.63;H，5.45;N，5.05實測值C，60.59;H，5.46;N，5.01于上述化合物(15.0g，55.0mmol)的45ml無水DMF溶液中加入K2CO3(15.3g，110mmol)。該混和物中再加入MeI(11.8g，83.0mmol)，在室溫下攪拌18小時后，形成沉淀，先用水稀釋反應液，接著真空過濾收集該沉淀。真空干燥，給出15.7g(97%)4-芐氧基-N，N-甲基-甲亞磺酰氨基苯白色固體。M.Pt.175-178℃，MS.
C15H17NO3S計算值C，61.83;H，5.88;N，4.81實測值C，62.04;H，5.96;N，4.974-芐氧基-N，N-甲基-甲亞磺酰氨基苯(14.0g，48mmol)的100ml乙醇溶液中加入4.0g 5%Pd/C，混合物在40psi下加氫2小時，反應物然后通過硅藻土墊，將濾液真空濃縮，給出9.93g(100%)4-N，N-甲基-甲亞磺酰氨基酚白色固體。M.Pt.117-120℃，MS.
C8H11NO3S計算值C，47.75;H，5.51;N，6.96實測值C，47.65;H，5.28;N，6.88用與實施例92類似的方法由該物質制備本標題化合物。
實施例95(R)-1-[1-氧代-2[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-(順式)-[(4-(亞甲基-N-甲亞磺酰氨基))-苯氧基]-L-脯氨酸在N2下，于N-苯甲氧甲酰基-反式-4-羥基-L-脯氨酸甲酯(10.0g，35.8mmol)的200ml無水THF溶液中加入三苯基膦(10.6g，39.4mmol)和4-氰基酚(4.7g，39.4mmol)。該溶液冷卻至0℃，并用偶氮二羧酸二乙酯(6.3ml，39.4mmol)處理(在30分鐘期間逐滴加入)。反應被加溫至室溫并攪拌2天。真空除去溶劑，將殘留物色譜提純(SiO2，30%乙酸乙酯/己烷)，給出12.1g(89%)N-苯甲氧酰基-4-(順式)-(4-氰基苯氧基)-L-脯氨酸甲酯無色油狀物。
MS.
C21H20N2O5計算值C，66.31;H，5.30;N，7.36實測值C，66.10;H，5.34;N，7.50N-苯甲氧甲酰基-4-(順式)-4-氰基苯氧基)-L-脯氨酸甲酯(3.8g，10mmol)的75ml甲醇溶液中加入COCl2(2.6g，20mmol)。該溶液冷卻至0℃，然后用NaBH4(3.8g，100mmol)處理(分成小份分批加入)。攪拌2小時后，，加入50ml 3N HCl。攪拌該溶液15分鐘后，反應物在H2O/乙醚(各200ml)中分配。將兩層分離，水相用乙醚提取(2×100ml)，然后用濃NH4OH溶液將水相調成堿性，用乙酸乙酯提取(3×100ml)，接著干燥(Na2SO4)，真空濃縮，給出3.50g(90%)N-苯甲氧基甲酰基-4-(順式)-[(4-氨甲基)-苯氧基]-L-脯氨酸甲酯油狀物。該物不經純化用于下面的反應。MS.
C21H24N2O5計算值C，65.61;H，6.29;N，7.29實測值C，65.87;H，6.04;N，7.03N-苯甲氧甲酰基-4-(順式)-[(4-氨甲基)-苯氧基]-L-脯氨酸甲酯(0.90g，2.34mmol)的15ml無水CH2Cl2溶液中，加入N，N-二異丙胺(0.6ml，3.4mmol)，將該溶液冷卻至0℃，然后，加入甲磺酰氯(0.22ml，2.8mmol)的5ml CH2Cl2溶液進行處理。攪拌1.5小時后，反應物在乙酸乙酯/水(各50ml)中分配。將兩層分離，水層以乙酸乙酯提取(2×50ml)，將有機層干燥(Na2SO4)并真空濃縮得到油狀粗產物。色譜提純(SiO2，50/50乙酸乙酯/己烷)給出0.74g(70%)N-苯甲氧甲酰基-4-(順式)-[(4-亞甲基-N-甲亞磺酰氨基))-苯氧基]-L-脯氨酸甲酯無色油狀物。MS.
室溫下，于(-)-辛可尼定(48.0g，163mmol)的880ml蒸餾水溶液中加入2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛酸(83.0g，326mmol)的440ml乙醇溶液。于該混合物中加入三乙胺(11.7ml)。然后，將混合物加熱到80℃，滴加入三乙胺(5-10ml)保持PH在6.9-7.1之間。在PH穩定在7.01之后，使溶液冷卻至室溫，靜置過夜，便產生(R)-2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)-辛酸-辛可尼定鹽晶體。晶體鹽經過濾收集，然后將該鹽在乙酸乙酯/水(各200ml)中制成懸濁液，于其中加入1N HCl(750ml)，將兩層分離，水層用乙酸乙酯提取(2×500ml)，合并有機層，干燥(Na2SO4)并真空濃縮，給出29.9g(72%)(R)-2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛酸灰白色固體物。M.Pt.116-118℃C11H17N3O4計算值C，51.76;H，6.71;N，16.46實測值C，51.89;H，6.76;N，16.20[α]D-29.9(C1.00，乙醇)通過將酸轉化為其甲酯(重氮甲烷)，接著用手性柱進行HPLC分析測定的對映體過剩量為96%(R)-2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛酸(16.0g，63.0mmol)溶解在1L無水甲醇中，于該溶液中加入pTSOH(300mg)，將反應物加熱回流16小時。當冷卻后即真空除去溶劑，給出油狀物，將其溶解在300ml乙酸乙酯中，該溶液用飽和NaHCO3溶液洗滌(2×250ml)，將有機相干燥(Na2SO4)并真空濃縮，得到13.2g(78%)(R)-甲基-2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛酸酯琥珀色油狀物。
C12H19N3O4計算值C，53.32;H，7.11;N，15.60
實測值C，53.23;H，7.05;N，15.39(R)-甲基-2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)辛酸酯(13.0g，45.7mmol)溶解在150ml無水乙醇中，該溶液中加入2.0g 10%Pd/C。混合物在40psi下加氫2小時，將反應物通過硅藻土墊除去催化劑。濾液濃縮成油狀物，該油狀物用無水THF(100ml)蒸發2次。粗產物溶液在100ml無水THF中，并用KOAc(4.44g)和K2CO3(3.12g)處理。該混合物中加入磺基苯甲酸酐(8.83g，47.7mmol)。反應攪拌4小時后形成沉淀，混合物用THF(100ml)稀釋，過濾收集固體，真空干燥，給出22.5g(R)-甲基-[(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]-辛酸酯鉀鹽。該物質不需進一步提純即用于下面的反應。
上述鉀鹽(22.5g)溶解在200ml水和100ml乙醇的混合物中，該溶液中加入1N NaOH(53ml)，將反應液攪拌3小時。真空除去乙醇，用5N HCl酸化水溶液至PH＝1.5。該溶液用10%乙醇/乙酸乙酯提取(3×200ml)，將有機層干燥(Na2SO4)并真空濃縮，給出8.65g(兩步得46%)(R)-[(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]-辛酸白色固體。MS.
C18H23N3O6S計算值C，52.80;H，5.66;N，10.26實測值C，52.53;H，5.59;N，10.27
N-苯甲氧甲酰基-4-(順式)-[(4-(亞甲基-N-甲亞磺酰氨基))-苯氧基]-L-脯氨酸甲酯(1.5g，3.25mmol)的50ml無水乙醇溶液中加入0.5g 5%Pd/C。該混合物在40psi下加氫1.5小時。然后將反應混合物通過硅藻土墊，將濾液真空濃縮，給出1.07g 4-(順式)-[(4-(亞甲基-N-甲亞磺酰氨基))苯氧基]-L-脯氨酸甲酯油狀物。MS.該物質立即用于下面的反應。
上述胺的10ml無水DMF溶液中加入(R)-[(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]-辛酸(1.00g，2.45mmol)和羥基苯并咪唑(0.37g，2.77mmol)，該混合物冷卻至0℃，然后用二環己基碳化二亞胺(0.56g，2.70mmol)處理。所得溶液溫熱至室溫，并攪拌48小時。過濾除去二環己基脲后，濾液用100ml乙酸乙酯稀釋并用水洗滌幾次。將有機層干燥(Na2SO4)并真空濃縮至油狀物，色譜提純(SiO2，5%甲醇/CHCl3)給出0.84g(34%)(R)-1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-(順式)-[(4-(亞甲基-N-甲亞磺酰氨基))-苯氧基]-N-脯氨酸甲酯白色固體。M.Pt.150℃(分解)。
C32H41N5O10S2計算值C，53.40;H，5.74;N，9.73實測值C，53.66;H，5.97;N，9.50(R)-1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-(順式)-[(4-(亞甲基-N-甲亞磺酰氨基))-苯氧基]-L-脯氨酸甲酯(0.37g，0.52mmol)溶解在1N NaOH(3.0ml)和THF(7ml)的混合物中，將該溶液攪拌1小時，然后真空除去THF，水溶液以1N HCl酸化至PH＝1.0，以5%乙醇/乙酸乙酯提取兩次，接著干燥(Na2SO4)有機層并濃縮，產生固體殘留物，用乙醇/乙酸乙酯-乙醚研制，給出0.26g(74%)(R)-1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基]-4-(順式)-[(4-(亞甲基-N-甲亞磺酰氨基))-苯氧基]-L-脯氨酸灰白色固體。M.Pt.172-176C31H39N5O10S2計算值C，52.75;H，5.57;N，9.92實測值C，52.54;H，5.53;N，10.15如前面所討論的，式Ⅰ化合物是一種潛在有效的血管緊張肽Ⅱ的拮抗劑。有代表性的式Ⅰ化合物阻止血管緊張肽Ⅱ受體鍵合的能力，用腎上腺腎小球(glomeralosa)試驗測定。拮抗誘導血管收縮的血管緊張肽的能力以兔主動脈試驗系統評估。
腎上腺腎上球(Glomerulosa)試驗系統Ⅰ125-血管緊張肽Ⅱ對腎上腺膜的鍵合在96孔濾板中常規進行。腎上腺膜由差速離心從鼠腎上腺的被膜(Capsular)部分(連接腎小球(glomerulosal)層)制備。簡介如下在PH7.5和4℃下，使用polytron設定于5檔20秒鐘，將被膜在含有蔗糖，250mM;MgCl2，1mM;Tris 5mM的溶液中勻漿化。所得勻漿在4℃下輕輕地攪拌15分鐘，然后于1000×g，4℃離心10分鐘。上清液在4℃下30，000×g時離心30分鐘，形成的沉淀再懸浮在50mM Tris中。膜制備物在-70℃下以等分樣貯藏直到被使用。Ⅰ125-血管緊張肽Ⅱ對腎上腺膜的鍵合于室溫下在含有親水聚偏氟乙烯膜(0.45μl，Millipore-GV multiscreen)的96孔板中進行90分鐘。每250μl培養物含有下列物質(最終濃度)tris，50mM;NaCl，120mM;MgCl25mM;二硫蘇糖醇，1mM;牛血清清蛋白0.05%;Ⅰ125-血管緊張肽Ⅱ，0.1nM;腎上腺膜蛋白，8-15μg。拮抗劑以10nM到100μM濃度加入。非特異鍵合在0.1μM Sar1，Ile8血管緊張肽Ⅱ存在下測定。
鍵合由真空過濾測定。陷在漏器中的受體-配體復合物用300μl冰-冷洗液(tris，50mM;NaCl，120mM;MgCl2，5mM;二硫蘇糖醇，1mM)洗滌3次。將濾盤干燥，推擠出并以52%效率用γ計數器計數。特異鍵合占總鍵合的96%(約150fmol血管緊張肽Ⅱ/mg蛋白質)。Ⅰ125血管緊張肽Ⅱ50%的鍵合被每種化合物取代時的抑制劑的摩爾濃度(ⅠC50)用4參數計算術模型(Non Lin，SAS Institute)來計算。數據以用Cheng Prusofl方程式計算的KI表示，參見Cheng et al Biochem.Pharmacol.223099(1973)。
兔主動脈試驗系統New Zaaland白兔(Hazelton，2-3Kg)將其頸脫位宰殺。取出胸主動脈，清除多余的脂肪和連接組織。組織環(3mm寬)被安裝在2個L形不銹鋼掛鉤之間的10ml組織浴中。較低的鉤固定在靜止桿上，較高的鉤連接到強力移位換能器(Grass model FT.0.3)上。浴室保持在37℃，用95%O2/5%CO2通氣，并含有下列組合物生理溶液(mM)NaCl，117;葡萄糖，5.6;NaH2PO4，1.0;MgSO4，0.7;KCl，5.2;CaCl2，1.8;NaHCO3，26;吩妥胺鹽酸鹽，0.003。
該組織環用2g張力平衡1小時，在平衡期間，每15分鐘溢流洗滌組織一次，然后環與10-8M血管緊張肽Ⅱ(AⅡ)接觸并使其緊縮直至達到穩定狀態。然后每15分鐘洗滌1次持續1小時。如此每小時重復這一過程直到AⅡ應答穩定。此后便獲得對AⅡ(10-10-10-7M)的累積濃度應答曲線。在得到濃度應答曲線后，每2分鐘洗滌組織一次直到達到基線張力為止，然后每15分鐘一次洗滌30分鐘。在重復對AⅡ濃度應答曲線之前，加入在10μl體積DMSO中的化合物并培養30分鐘。對AⅡ的收縮量以在對照曲線(第一AⅡ濃度應答曲線)獲得的最大收縮的百分比表示。對每一曲線的EC50′S(收縮組織至1/2對照最大值的濃度)用4參數計算術模型(NonLin，SAS Institute)計算。每一被試化合物的效力數據以pA2表示(pA2被定義為-logKB，這里KB＝[拮抗劑的摩爾濃度]/[(有拮抗劑的EC50/無拮抗劑的EC50)-1])。
使用上述方法，本發明有代表性的化合物均被評估，并發現具有活性，該活性用兔主動脈試驗系統，測得至少4.1的pA2。因而證實了本發明的化合物作為有效血管緊張肽Ⅱ拮抗劑的實用性。
表1腎上腺Glomulosa 兔主動脈例子 (KI,μm) (pA2)1 10.3 5.72 8.2 6.13 9.6 5.44 12.1 6.05 178 6.36 * 6.37 6.8 5.88 13.0 5.89 12.4 6.610 2.93 7.211 * 6.7* 6.612 * 9.2* 8.213 * 7.2* 6.914 * 7.5* 6.915 * 8.5* 7.216 * 7.317 * 7.8
18 * 9.719 * 8.920 * 8.521 * 7.2* 6.322 * 9.423 * 8.824 * 7.625 * 6.926 * 8.627 * 8.028 * 8.729 * 7.530 * 9.231 * 8.932 * 8.933 * 9.034 * 8.535 * 8.736 * 9.437 * 9.438 * 8.939 * 9.040 * 9.341 * 9.842 * 8.943 * 9.144 * 8.345 * 9.646 * 8.747 * 9.0
48 * 9.249 * 8.650 * 8.751 * 7.952 * 8.453 * 8.054 * 8.655 * 9.456 * 7.557 * 9.558 * 9.159 * 9.260 * 7.861 * 8.562 * 9.063 * 8.864 * 5.765 * 8.766 * 8.267 * 8.268 * 9.369 * 9.370 * 9.371 * 7.672 * 8.573 * 6.874 * 7.075 * 9.076 * 7.577 * 8.878 * 8.5
79 * 9.380 * 8.181 * 8.882 * 9.583 * 8.984 * 8.085 * 8.986 * 9.187 * 7.588 * 8.289 * 7.590 * 7.791 * 10.192 * 9.993 * 8.994 * 9.695 * 9.8＊表示未獲得數據這里使用的術語“藥學上有效量”代表本發明的能在哺乳動物中阻斷血管緊張肽Ⅱ受體的化合物的量。按照本發明所施用的化合物的特定劑量，當然將依據所涉及的特定情況來確定，包括所使用的具體化合物，給藥途徑、被治療的特定癥狀和類似要考慮的因素，可通過各種途徑將化合物給藥，包括口服，直腸，透皮吸收、皮下，靜脈內，肌肉或鼻內等。典型的日劑量含有約0.01mg/Kg到約20mg/Kg的本發明的活性化合物，優選的日劑量約0.05到10mg/Kg，理想的約0.1到約5mg/Kg。這里使用的“治療(treating)”一詞描述以消除疾病，病癥或紊亂為目的的對病人的護理和治療。
“treating”一詞包括施用本發明的化合物預防癥狀出現，減輕癥狀，消除疾病，病癥或紊亂。
本文使用的“提高認識功能”一詞指在需要這種治療的病人中促進其記憶力和認識力。例如包括因年齡老化，相關的腦力損傷和阿爾茨海默(Alzheimer′s)病而使病人認識能力喪失。
施用之前，式Ⅰ的化合物最好被制成制劑，因此，本發明的另外的實施方案是含有一種式Ⅰ化合物和一種或多種藥物上可接受的載體，稀釋劑或賦形劑的藥物制劑。
本藥物制劑使用公知的方法和已知的易得到的成分制備。在制備本發明的組合物時，活性成分通常與載體混合，或被載體稀釋，或封裝在載體中，該載體以膠囊、香囊、低或其它容器形式使用。當載體用作稀釋劑時，它可以是固體，半固體或液體，作為活性成分的媒介物，賦形劑或介質。因此，該組合物的形式可以是片劑、丸劑、粉劑、錠劑、香囊、扁形膠囊、酏劑、混懸劑、乳劑、溶液、糖漿、氣霧劑(固體或在溶液介質中)、含有高達10%(重量)活性化合物的軟膏、軟和硬明膠膠囊、栓劑、無菌注射液和滅菌包裝粉劑。
合適載體、賦形劑和稀釋劑的一些例子包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、淀粉、阿拉伯膠、磷酸鈣、藻酸鹽、(西)黃蓍膠、明膠、硅酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素、水糖漿、甲基纖維素、羥基苯甲酸甲酯和丙酯、滑石粉、硬脂酸鎂和礦物油。制劑還可包括潤滑劑、乳化劑和混懸劑、防腐劑、甜味劑或芳香劑。本發明的組合物可配制成給病人施藥后能提供快速、持續或延遲釋放活性成分的各種制劑。優選組合物制成單位劑量形式，每劑含有約5到約500mg，更通常約25到300mg活性組分。“單位劑量形式”一詞指適于作為人體受試者和其它哺乳動物單元劑量的物理分離單位，每單位含有計算好的預定量的活性物質及結合合適的藥用載體以產生理想的治療效果。
下列制劑實施例僅僅是說明性的，并不企圖在任何程度上限定本發明的范圍。
制劑1使用下面的成分制備硬膠囊含量(mg/囊)1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基-4-順式-(2-萘氧基)-L-脯氨酸 250干淀粉 200硬脂酸鎂 10共 460mg將上述組分混合，以460mg的量填充到硬膠囊中。
制劑2使用下面的成分制備片劑含量(mg/囊)1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基-4-順式((4-亞甲基膦酸)-苯氧基)-L-脯氨酸 250纖維素，微晶 400二氧化硅，煙(霧)化 10硬脂酸 5共 665mg將各種組分混合壓制成重665mg的片。
制劑3制備含下列成分的氣霧劑溶液含量(mg/囊)1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基)-4-順式-(4-叔丁氧苯氧基)-L-脯氨酸 0.25乙醇 29.75氣霧劑基質22(氯二氟甲烷) 70.00共 100.00
將活性化合物與乙醇混合，于混合物中加入部分氣霧劑基質22，冷至-30℃并轉移到一個填充裝置中，然后將所需的量裝進一個不銹鋼容器中，用剩下的氣霧劑基質稀釋，然后將閥門元件裝配在容器上。
制劑4用如下方法制備含60mg活性成分的片劑含量(mg/囊)1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基-4-順式-(4-甲磺酰苯氧基)-L-脯氨酸 60mg淀粉 45mg微晶纖維素 35mg聚乙烯吡咯烷酮(配成10%水溶液) 4mg羧甲基淀粉鈉 4.5mg硬脂酸鎂 0.5mg滑石 1mg共 150mg活性成分，淀粉和纖維素過U.S.篩45號篩網充分混合。將聚乙烯吡咯烷酮溶液與上述粉末混合(該粉末然后又過U.S.篩14號篩網)。這樣得到的顆粒在50℃下干燥并過U.S.篩18號篩網。預先過U.S.篩60號篩網的羧甲基淀粉鈉、硬脂酸鎂和滑石加入到顆粒中，混合物，在壓片機上壓成重150mg的片。
制劑5用如下方法制備含80mg藥物的膠囊。
含量(mg/囊)1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基-4-順式-(5-苯并呋喃氧基)-L-脯氨酸 80mg淀粉 59mg微晶纖維素 59mg硬脂酸鎂 2mg共 200mg將活性成分，纖維素，淀粉和硬脂酸鎂混合過U.S.篩45號篩網，以200mg量裝入硬膠囊中。
制劑6含有225mg活性成分的栓劑可用以下方法制備含量(mg/囊)1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基-4-順式-(5-苯并硫代苯氧基)-L-脯氨酸 225mg飽和脂肪酸甘油酯 2，000mg2，225mg將活性活性成分過U.S.篩60號篩網并將其懸浮在用最低限度加熱預先熔化的飽和脂肪酸甘油酯中。混和物倒入標定為2g重量的栓劑模型中，使其冷卻。
制劑7每5ml劑量含50mg藥物的懸浮液用如下方法制備含量(mg/囊)1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基-4-順式-(4-羧甲基苯氧基)-L-脯氨酸 50mg羧甲基纖維素鈉 50mg糖漿 1.25ml苯甲酸溶液 0.10ml香味劑 q.v著色劑 q.v加純水至總量 5ml藥物過U.S.篩45號篩網并與羧甲基纖維素鈉和糖漿混合形成軟膏，苯甲酸溶液、香味劑和著色劑用一些水稀釋，并在攪拌下加入到軟膏中，然后加入足量的水至所需體積。
制劑8按如下方法制備靜脈內制劑含量(mg/囊)1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基-4-順式-(4-羥基苯氧基)-L-脯氨酸 250mg等滲壓鹽水 1000ml上述成分的溶液對需要治療的病人以1ml/每分鐘的速率靜脈內給藥。
權利要求
1.一種下式化合物或其醫藥學上可接受的鹽或溶劑化物
其中R1為CO2H，SO3H2，PO3H，CONHSO2R5或5-四唑基；R2為H，-OH，-OCOCH3，鹵，C1-C4烷基，氨基，乙酰氨基，或C1-C4烷氧基；X為-(CH2)mNHCO-，-(CH2)mCONH-，-O-，-NH-，-CH2-，-(CH2)mCO-，或-CO(CH2)m-；R3為C4-C9直鏈烷基，C4-C9直鏈三氟烷基，C4-C9直鏈烯基，或C4-C9直鏈三氟烯基；R4為-CONH(C1-C4烷基)，-CONH(C1-C4三氟烷基)，-CONH(羥基-C1-C4烷基)，
R5為苯基，C1-C4烷基取代的苯基，C1-C5烷基，或C1-C5三氟烷基；R6為(CH2)pR1，或C1-C4烷基；R7為H或CH3；R8為H或-(CH2)qR12；R9為O或S；R10為H，-(CH2)pR1，C1-C7烷基，C1-C7三氟烷基，鹵，取代或未取代的苯基，3-吡啶基，2-嘧啶基，呋喃基，噁唑基，異噁唑基，取代或未取代稠合二環，取代或非取代稠合三環，或當m為0時，4，4-亞乙基二氧基；R11為H，OH，C1-C4烷氧基，CO2H，SO3H，PO3H2，CONHSO2R5，或四唑基；R12為OH，NH2，或CO2H；Y為天然氨基酸的R基；X′為-O-，-(CH2)p-，或-S-；m分別為0或1；p分別為0，1，2，3或4；和q為1，2，3，或4；其條件是當R4為(g)或(h)，而R10不為H時，(h)的羧基或(g)的四唑基是在2位；和當R4為(g)或(h)，m為0，而R10為H時，(g)的羧基或(h)的四唑基是在2或3位。
2.權利要求1的化合物，其中R4為
其條件是R10不為H時，羧基是在2位;和當m為O，而R10為H時，羧基是在2或3位。
3.一種式Ⅰa的化合物或其醫藥學上可接受的鹽或溶劑化物
其中R3為C4-C9直鏈烷基;R10為未取代或對位取代的苯基，取代或未取代稠合二環，或取代或未取代的稠合三環;m為0或1;X′為-O-，-S-，或(CH2)p;而p為0，1，2，3或4。
4.(R)-1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基-4-順式-(4-羧甲基苯氧基)-L-脯氨酸或其醫藥學上可接受的鹽或溶劑化物。
5.(R)-1-[1-氧代-2-[4-(2-磺基苯甲酰基)氨基-1H-咪唑-1-基]辛基-4-順式-((4-亞甲基膦酸)-苯氧基)-L-脯氨酸或其醫藥學上可接受的鹽或溶劑化物。
6.一種藥用制劑，包含如權利要求1至5任意之一的化合物或醫藥學上可接受的鹽或溶劑化物作為活性成分，與一種或多種醫藥學上可接受的載體，稀釋劑，或賦形劑結合。
7.一種制備權利要求1至5任意之一的化合物的方法，它包含水解下式化合物
其中R1′為CO2R′，SO3H，PO3H2，CONHSO2R5或5-四唑基;R2為H，-OH，-OCOCH3，鹵，C1-C4烷基，氨基，乙酰氨基，或C1-C4烷氧基;X為-(CH2)mNHCO-，-(CH2)mCONH-，-O-，-NH-，-CH2-，-(CH2)mCO-，或-CO(CH2)m-;R3為C4-C9直鏈烷基，C4-C9直鏈三氟烷基，C4-C9直鏈烯基，或C4-C9直鏈三氟烯基;R4′為(CH2)pR1′，-CONH(C1-C4烷基)，-CONH(C1-C4三氟烷基)，-CONH(羥基-C1-C4烷基)，
R5為苯基，C1-C4烷基取代的苯基，C1-C5烷基，或C1-C5三氟烷基;R6為(CH2)pR1′，或C1-C4烷基;R7為H或CH3;R8為H或-(CH2)qR12;R9為O或S;R10′為H，-(CH2)pR1′，C1-C7烷基，C1-C7三氟烷基，鹵，取代或未取代的苯基，3-吡啶基，2-嘧啶基，呋喃基，或由苯環稠合5或6元環組成的取代或未取代稠合二環環系;其條件是R4′為(g)或(h)且R10′不為H時，酯或四唑基是在2位;并且當R4′為(g)或(h)，m為O，且R10′為H時，酯或四唑基是在2或3位;R11′為H，OH，C1-C4烷氧基，CO2H，SO3R′，PO3H2，CONHSO2R5，或四唑基;R12′為OH，NH2，或CO2R′;Y為天然氨基酸的R基;X′為-O-，-(CH2)p-，或-S-;R′為酯基m分別為0或1;p分別為0，1，2，3或4;和q為1，2，3，或4;其條件是R1′或R4′含有一個或多個-CO2R′官能團。
8.根據權利要求7的方法制備的權利要求1至5任意之一所要求保護的化合物。
9.一種下式的化合物
其中R1′為CO2R′，SO3H，PO3H2，CONHSO2R5或5-四唑基;R2為H，-OH，-OCOCH3，鹵，C1-C4烷基，氨基，乙酰氨基，或C1-C4烷氧基;X為-(CH2)mNHCO-，-(CH2)mCONH-，-O-，-NH-，-CH2-，-(CH2)mCO-，或-CO(CH2)m-;R3為C4-C9直鏈烷基，C4-C9直鏈三氟烷基，C4-C9直鏈烯基，或C4-C9直鏈三氟烯基;R4′為(CH2)pR1′，-CONH(C1-C4烷基)，-CONH(C1-C4三氟烷基)，-CONH(羥基-C1-C4烷基)，
R5為苯基，C1-C4烷基取代的苯基，C1-C5烷基，或C1-C5三氟烷基;R6′為(CH2)pR1′，或C1-C4烷基;R7為H或CH3;R8為H或-(CH2)qR12;R9為O或S;R10′為H，-(CH2)pR1′，C1-C7烷基，C1-C7三氟烷基，鹵，取代或未取代的苯基，3-吡啶基，2-嘧啶基，呋喃基，或由苯環稠合5或6元環組成的取代或未取代稠合二環環系;其條件是R4′為(g)或(h)且R10′不為H時，酯或四唑基是在2位;和當R4′為(g)或(h)，m為O，且R10′為H時，酯或四唑基是在2或3位;R11′為H，OH，C1-C4烷氧基，CO2H，SO3R′，PO3H2，CONHSO2R5，或四唑基;R12′為OH，NH2，或CO2R′;Y為天然氨基酸的R基;X′為-O-，-(CH2)p-，或-S-;R′為酯基;m分別為0或1;p分別為0，1，2，3或4;和q為1，2，3，或4;其條件是R1′或R4′含有一個或多個-CO2R′官能團。
全文摘要
本發明提供新的苯基和雜環衍生物，其藥用制劑和用其拮抗哺乳動物中血管緊張肽II受體的方法。
文檔編號C07D233/58GK1085897SQ93107578
公開日1994年4月27日 申請日期1993年6月3日 優先權日1992年6月3日
發明者D·B·博伊, S·L·賴弗, A·D·帕考維茨, J·K·里爾, K·L·豪澤, W·S·馬歇爾, W·普法弗, R·L·西蒙, M·I·施坦堡, 竹內久美子, K·J·弗拉舍, C·A·懷特西 申請人:伊萊利利公司