一種植物乳桿菌胞外多糖及其用于拮抗蠟樣芽孢桿菌腸毒素毒性的用圖
【專利摘要】本發明提供了一種植物乳桿菌胞外多糖及其用于拮抗蠟樣芽孢桿菌腸毒素毒性的用途。該多糖以制備方法表征，由于匹配了溫和的純化條件，因此其分子結構得到有效保留，所得產物結構成分單一、結構明確，同時具有較高的純度和收率。此外，本發明通過實驗手段意外發現，在該植物乳桿菌胞外多糖存在條件下，蠟樣芽孢桿菌腸毒素對小腸上皮細胞的毒性受到明顯抑制，具體表現為小腸上皮細胞活力得到有效保持，而且這種保護作用具有一定的廣譜性。基于該植物乳桿菌胞外多糖的以上新性質，本發明確定了其作為蠟樣芽孢桿菌腸毒素拮抗劑、乃至蠟樣芽孢桿菌腸毒素中毒治療藥物的新用途，其療效確切，起效快速，具有廣闊的應用前景。CCTCCNO:M2028
【專利說明】
一種植物乳桿菌胞外多糖及其用于拮抗蠟樣芽孢桿菌腸毒素毒性的用途
技術領域
[0001]本發明涉及微生物技術領域，進一步涉及微生物代謝產物的分離純化及其醫藥用途，具體涉及一種植物乳桿菌胞外多糖及其用于拮抗蠟樣芽孢桿菌腸毒素毒性的用途。
【背景技術】
[0002]乳酸菌胞外多糖(Exopolysaccharide，EPS)，泛指乳酸菌代謝過程中分泌到細胞外的糖類化合物。由于乳酸菌胞外多糖具有良好的流變性、而且能賦予發酵食品良好的口感和風味，因此可作為食品工業的膠凝劑、穩定劑、保鮮劑和乳化劑等，目前已廣泛用于乳制品、飲料、糕點、糖果、冰激凌等食品的生產。此外，有研究表明EPS具有抗腫瘤、降低膽固醇、延緩衰老、調節腸道菌群平衡等作用，因此EPS可能是乳酸菌益生作用的物質基礎之一。
[0003]植物乳桿菌(LactobaciIIus pIantarum)，屬同型發酵乳酸菌，革蘭氏陽性，兼性好氧。該菌株被證明具有耐酸、耐膽鹽、抗致病菌、調節腸道菌群平衡的作用，同時有研究表明上述耐酸能力及益生作用可能與其胞外多糖有關。植物乳桿菌胞外多糖呈混雜形式存在，并非性質均一的單一化合物;而多糖作為分子結構復雜且龐大的糖類物質，無論由糖單位種類和次序所決定的一級結構變化，還是由氫鍵及其他非共價作用所決定的次級結構變化，均可造成其理化性質的差異，因此為研究植物乳桿菌多糖的性質，首先應當明確其物質分型、獲得不同類別植物乳桿菌胞外多糖的純品，從而明確其物質基礎，進而探討不同植物乳桿菌胞外多糖的性質。
[0004]蠟樣芽孢桿菌是引起食物中毒的常見致病菌，能夠引起的食物中毒類型主要分為腹瀉和嘔吐癥狀，其中腹瀉主要與菌株分泌的腸毒素相關，而嘔吐主要由菌株產生嘔吐毒素引起，有文獻報道，蠟樣芽孢桿菌腸毒素能導致真核細胞死亡。現有技術中對蠟樣芽孢桿菌腸毒素中毒病例的治療主要分為多通過抗生素療法和對癥治療，其中對癥治療主要在于緩解癥狀、維持機體電解質平衡;而抗生素療法盡管可以直接殺滅微生物，但由于該疾病的直接抗原物質是蠟樣芽孢桿菌的代謝產物(腸毒素)而非蠟樣芽孢桿菌本身，因此該療法起效較慢，治療效果不理想。現有技術中，直接降低蠟樣芽孢桿菌腸毒素致病力的療法或藥物未見報道。

【發明內容】

[0005]本發明旨在針對現有技術的技術缺陷，提供一種植物乳桿菌胞外多糖，以解決現有技術中缺乏上述植物乳桿菌胞外多糖的技術問題。
[0006]本發明要解決的另一技術問題是現有技術中，植物乳桿菌胞外多糖作為一種多糖混合物，其中成分不明確。
[0007]本發明要解決的再一技術問題是該植物乳桿菌胞外多糖難以制備。
[0008]本發明要解決的又一技術問題是常規方法所制備的該植物乳桿菌胞外多糖，其純度較低。
[0009]本發明同時提供了上述植物乳桿菌胞外多糖用于拮抗蠟樣芽孢桿菌腸毒素毒性的用途，以解決現有技術中難以直接降低蠟樣芽孢桿菌腸毒素致病力的技術問題。
[0010]本發明要解決的又一技術問題是該植物乳桿菌胞外多糖的用途較為局限。
[0011 ]為實現以上技術目的，本發明采用以下技術方案:
[0012]—種植物乳桿菌胞外多糖，所述植物乳桿菌胞外多糖是通過以下方法制備的:
[0013]I)取植物乳桿菌發酵液，固液分離取上清；
[0014]2)向步驟I)所述上清液中加入乙醇，醇沉，固液分離取沉淀，以8?14KDa截留分子量的透析袋透析，取透析袋內容物干燥，即為粗多糖；
[0015]3)以含有40?60mM Tris-HCl、5?15mM MgSO4.7H20的溶液作為粗多糖溶解液，溶解步驟2)所述粗多糖，而后加入核酸酶DNAse type_I至終濃度2?3yg/mL，水解；
[0016]4)而后加入蛋白酶Pronase E至終濃度40?60yg/mL，酶解；
[0017]5)而后加入三氯乙酸至終濃度10?15%(w/v)，20?40min后固液分離取上清，透析，取透析袋內容物即為所述植物乳桿菌胞外多糖。
[0018]作為優選，步驟I)所述的發酵液是植物乳桿菌厭氧發酵22?26h時的發酵液;更優的，發酵時間是24h。
[0019]作為優選，步驟2)中乙醇的加入量是所述上清液體積的1.5?2.5倍;更優的，乙醇加入量是所述上清液體積的2倍.[°02°]作為優選，步驟3)中粗多糖的終濃度為4?6mg/L;更優的，是5mg/L。
[0021]作為優選，步驟3)所述水解是在35?39°C條件下持續4?8h;更優的，是在37°C條件下持續6h。
[0022]作為優選，步驟4)所述酶解是在35?39°C條件下持續16?20h;更優的，是在37°C條件下持續18h。
[0023]作為優選，步驟5)透析前，先調節上清液pH至4?5，再透析;更優的，調節pH至4.5;最優的，所述調節是利用10mol/L的NaOH溶液實現的。
[0024]在以上任一技術方案基礎上優選的，步驟I)所述的植物乳桿菌，是保藏編號為CCTCC M 2014170的植物乳桿菌。此時該多糖用于人體具有確切的安全保證
[0025]在以上任一技術方案基礎上優選的，所述的固液分離，是以10000?HOOOrpm的轉速離心15?25min。
[0026]在以上任一技術方案基礎上優選的，透析的持續時間是60?84h;更優的，透析的持續時間是72h。在此基礎上進一步優選的，透析的過程中每天更換透析袋外的超純水2次。
[0027]作為優選，步驟I)所述的發酵液，是以MRS培養基發酵獲得的。
[0028]作為優選，步驟I)所述的發酵液，是在35?39°C條件下發酵獲得的；更優的發酵溫度為37°C。
[0029]作為優選，步驟2)所述的干燥是冷凍干燥。
[0030]作為優選，步驟3)所述粗多糖溶解液的pH值為7.2?7.8;更優的，其pH為7.5。
[0031]作為優選，步驟5)中三氯乙酸加入后的終濃度為12%(w/v),加入三氯乙酸后持續30min再進行固液分離。
[0032]本發明同時提供了上述植物乳桿菌胞外多糖用于抑制蠟樣芽孢桿菌腸毒素對小腸上皮細胞毒性的應用。
[0033]在該應用基礎上優選的，所述蠟樣芽孢桿菌腸毒素是細胞毒素K。所述細胞毒素K是指由蠟樣芽胞桿菌產生的、通常稱之為CytK的毒素。
[0034]在該應用基礎上優選的，所述蠟樣芽孢桿菌腸毒素是溶血性腸毒素HBL。
[0035]在該應用基礎上優選的，所述蠟樣芽孢桿菌腸毒素是非溶血性腸毒素Nhe。
[0036]在該應用基礎上優選的，所述抑制蠟樣芽孢桿菌腸毒素對小腸上皮細胞毒性是緩解在蠟樣芽孢桿菌腸毒素存在條件下小腸上皮細胞活力降低趨勢。
[0037]在該應用基礎上優選的，所述應用是將植物乳桿菌胞外多糖溶液在蠟樣芽孢桿菌腸毒素存在條件下與小腸上皮細胞直接接觸;更優的，所述植物乳桿菌胞外多糖溶液的濃度是0.5?1.5mg/mL;最優的，所述植物乳桿菌胞外多糖溶液的濃度是lmg/mL。
[0038]本發明同時提供了上述植物乳桿菌胞外多糖用于制備蠟樣芽孢桿菌腸毒素中毒治療藥物的應用。
[0039]作為優選，所述藥物的劑型是口服劑。
在以上技術方案中，保藏編號為CCTCC M 2014170的生物材料的保藏單位是“中國典型培養物保藏中心”，其地址為“湖北省武漢市武昌區八一路299號武漢大學校內”，該生物材料的保藏日期為2014年4月28日，其分類命名是植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)。
[0040]在以上技術方案中，抑制蠟樣芽孢桿菌腸毒素對小腸上皮細胞毒性，可以是蠟樣芽孢桿菌腸毒素與本發明植物乳桿菌胞外多糖共孵育小腸上皮細胞；當然亦可以是在蠟樣芽孢桿菌腸毒素存在條件下向其中加入本發明植物乳桿菌胞外多糖，從而抑制其對小腸上皮細胞的毒性。在以上技術方案中，所述細胞活力是指存活細胞的數量水平，并不一定以活細胞的具體數目或細胞密度進行表征，而是可以通過本技術領域中用于反應細胞活力的任一參數進行評價;本發明中，用于評價細胞活力的指標可以選擇MTT法。
[0041 ]本發明所提供的植物乳桿菌胞外多糖，以乙醇沉淀法直接于植物乳桿菌發酵液中沉淀多糖，而后經透析去除小分子雜質，并先后利用酶解方法去除核酸及蛋白雜質，再利用三氯乙酸沉淀雜蛋白，固液分離取上清后執行透析，從而獲得純化的目標多糖。通過以上制備方法所表征的多糖，由于匹配了溫和的純化條件因此其分子結構得到有效保留，所得產物結構成分單一、結構明確，同時具有較高的純度和收率。
[0042]此外，本發明通過實驗手段意外發現，在該植物乳桿菌胞外多糖存在條件下，蠟樣芽孢桿菌腸毒素對小腸上皮細胞的毒性受到明顯抑制，具體表現為小腸上皮細胞活力得到有效保持，而且這種保護作用具有一定的廣譜性。基于該植物乳桿菌胞外多糖的以上新性質，本發明確定了其作為蠟樣芽孢桿菌腸毒素拮抗劑、乃至蠟樣芽孢桿菌腸毒素中毒治療藥物的新用途，其療效確切，起效快速，具有廣闊的應用前景。
【附圖說明】
[0043]圖1是本發明實施例1中，在孔板上以MTT法檢測三種蠟樣芽孢桿菌上清液孵育后的小腸上皮細胞的顯色圖。
[0044]圖2是本發明實施例1中，胞外多糖不存在條件下，三株蠟樣芽孢桿菌上清液分別孵育小腸上皮細胞后，細胞活力的MTT法檢測結果。
[0045]圖3是本發明實施例1中，胞外多糖存在條件下，三株蠟樣芽孢桿菌上清液分別孵育小腸上皮細胞后，細胞活力的MTT法檢測結果。
[0046]在以上圖1?圖3中:Nhe/HBL/CytK部分是同時產Nhe、HBL、CytK三種毒素的菌株ATCC14579;HBL/CytK部分是同時產HBL、CytK兩種毒素的菌株ATCC10987;Nhe部分是產Nhe毒素的一株錯樣芽孢桿菌，其內部編號為JX0061LY。
[0047]圖4是本發明實施例1中，以不同濃度的蠟樣芽孢桿菌ATCC14579上清液孵育小腸上皮細胞后，細胞活力的MTT法檢測結果。其中實驗組是蠟樣芽孢桿菌ATCC14579上清液、本發明植物乳桿菌胞外多糖二者共孵育小腸上皮細胞的實驗結果；對照組是蠟樣芽孢桿菌ATCC14579上清液單獨孵育小腸上皮細胞的實驗結果。
[0048]圖5是本發明實施例1中，以不同濃度的蠟樣芽孢桿菌ATCC10987上清液孵育小腸上皮細胞后，細胞活力的MTT法檢測結果。其中實驗組是蠟樣芽孢桿菌ATCC10987上清液、本發明植物乳桿菌胞外多糖二者共孵育小腸上皮細胞的實驗結果；對照組是蠟樣芽孢桿菌ATCC10987上清液單獨孵育小腸上皮細胞的實驗結果。
[0049]圖6是本發明實施例1中，以不同濃度的蠟樣芽孢桿菌JX0061LY上清液孵育小腸上皮細胞后，細胞活力的MTT法檢測結果。其中實驗組是蠟樣芽孢桿菌JX0061LY上清液、本發明植物乳桿菌胞外多糖二者共孵育小腸上皮細胞的實驗結果；對照組是蠟樣芽孢桿菌JX0061LY上清液單獨孵育小腸上皮細胞的實驗結果。
【具體實施方式】
[0050]以下將對本發明的【具體實施方式】進行詳細描述。為了避免過多不必要的細節，在以下實施例中對屬于公知的結構或功能將不進行詳細描述。
[0051]以下實施例中所使用的近似性語言可用于定量表述，表明在不改變基本功能的情況下可允許數量有一定的變動。因此，用“大約”、“左右”等語言所修正的數值不限于該準確數值本身。在一些實施例中，“大約”表示允許其修正的數值在正負百分之十(10%)的范圍內變化，比如，“大約100”表示的可以是90至IjllO之間的任何數值。此外，在“大約第一數值到第二數值”的表述中，大約同時修正第一和第二數值兩個數值。在某些情況下，近似性語言可能與測量儀器的精度有關。
[0052]除有定義外，以下實施例中所用的技術和科學術語具有與本發明所屬領域技術人員普遍理解的相同含義。
[0053]以下實施例中所用的試驗試劑耗材，如無特殊說明，均為常規生化試劑;所述實驗方法，如無特殊說明，均為常規方法；以下實施例中的定量試驗，均設置三次重復實驗，結果取平均值;以下實施例中的％，如無特別說明，均為質量百分含量。
[0054]實施例1
[0055]1.1植物乳桿菌胞外多糖的提取、純化
[0056]植物乳桿菌在MRS培養基中37 °(:厭氧培養24h，12000 X g離心20min，棄沉淀，上清用截留分子量為8000?14000Da的透析袋透析3天，每天換超純水2次。冷凍干燥后，用50mMTris-HCUlOmM MgSO4.7H20(pH7.5)對粗多糖進行溶解(終濃度為5mg/mL)，采用終濃度為2.5yg/mL的核酸酶DNAse七7?6-1(05025，3丨8111&)在37°(:對核酸進行水解611。水解后的粗多糖采用終濃度為50yg/mL的蛋白酶Pronase E(165921，Roche)在37°C對蛋白質進行酶解18h。蛋白酶處理后，用終濃度為12%的三氯乙酸處理30min，12000Xg離心20min獲得的上清需調節pH至4.0?5.0，繼續透析3天，每天換水2次。
[0057]1.2不同蠟樣芽孢桿菌所產腸毒素對Caco-2細胞活力的影響
[0058]取10yL Caco-2細胞(104個)至96孔細胞培養板，5%⑶2條件下37°C培養至形成單層貼壁細胞(約12h)。對三株蠟樣芽孢桿菌的腸毒素進行2倍七個梯度稀釋(用培養基DMEM稀釋)，用三株菌的同一濃度的腸毒素分別對單層細胞進行處理，每個濃度重復三次。其中實驗組再繼續添加20yL胞外多糖溶液(終濃度為lmg/mL )05% CO2條件下37 °C孵育6h。添加終濃度為lmg/mL的MTT(0.5 % )，在5 % CO2條件下37 °C孵育4h，輕輕吸掉上清，接著每孔加入150yL 二甲基亞砜，慢速振蕩1min，用酶標儀測定三株蠟樣芽孢桿菌的腸毒素處理細胞后在490nm的吸光值，結果如圖2、圖3所示。
[0059]由圖2、3均可以發現，隨著毒素濃度的降低，細胞活力升高，說明細胞活力和毒素的濃度有關，而且圖3升高趨勢更為明顯，體現出以上植物乳桿菌胞外多糖對蠟樣芽孢桿菌腸毒素毒性的拮抗作用。
[0060]1.3以上制備的植物乳桿菌胞外多糖對Caco-2細胞活力保護作用
[0061 ] 取10yL Caco-2細胞(104個)至96孔細胞培養板，5%⑶2條件下37°C培養至形成單層貼壁細胞(約12h)。實驗分成對照組和實驗組，對照組分別用不同梯度稀釋的腸毒素對細胞進行誘導處理，實驗組分別用不同梯度稀釋的腸毒素處理的同時添加20yL終濃度為11^/1^胞外多糖溶液。5%0)2條件下37°(:孵育611。添加終濃度為111^/1^的組'1'(0.5%)，在5%(:02條件下37°(:孵育411，輕輕吸掉上清，接著每孔加入15(^1^二甲基亞砜，慢速振蕩1min，用酶標儀測定細胞在不同濃度毒素的處理下490nm的吸光值變化，結果如圖4?6所不O
[0062]由圖4?6均可以發現，存在胞外多糖的實驗組的細胞活力顯著高于不存在胞外多糖的對照組。這表明本發明植物乳桿菌胞外多糖對蠟樣芽孢桿菌腸毒素的毒性具有確切的抑制作用，而且這種抑制作用具有一定的廣譜性。
[0063]實施例2
[0064]—種植物乳桿菌胞外多糖，該植物乳桿菌胞外多糖是通過以下方法制備的:
[0065]I)取植物乳桿菌發酵液，固液分離取上清；
[0066]2)向步驟I)所述上清液中加入乙醇，醇沉，固液分離取沉淀，以SKDa截留分子量的透析袋透析，取透析袋內容物干燥，即為粗多糖；
[0067]3)以含有40mM Tris_HCl、5mM MgSO4.7H20的溶液作為粗多糖溶解液，溶解步驟2)所述粗多糖，而后加入核酸酶DNAse type-1至終濃度2yg/mL，水解；
[0068]4)而后加入蛋白酶Pronase E至終濃度40yg/mL，酶解；
[0069]5)而后加入三氯乙酸至終濃度10%(w/v)，20min后固液分離取上清，透析，取透析袋內容物即為所述植物乳桿菌胞外多糖。
[0070]在以上技術方案的基礎上，滿足以下條件:
[0071]步驟I)所述的發酵液是植物乳桿菌厭氧發酵22h時的發酵液。步驟2)中乙醇的加入量是所述上清液體積的1.5倍。步驟3)中粗多糖的終濃度為4mg/L。步驟3)所述水解是在35°C條件下持續4hο步驟4)所述酶解是在35°C條件下持續16h。步驟5)透析前，先調節上清液pH至4，再透析。
[0072]實施例3
[0073]—種植物乳桿菌胞外多糖，該植物乳桿菌胞外多糖是通過以下方法制備的:
[0074]I)取植物乳桿菌發酵液，固液分離取上清；
[0075]2)向步驟I)所述上清液中加入乙醇，醇沉，固液分離取沉淀，以14KDa截留分子量的透析袋透析，取透析袋內容物干燥，即為粗多糖；
[0076]3)以含有60mM Tris-HCl、15mM MgSO4.7H20的溶液作為粗多糖溶解液，溶解步驟2)所述粗多糖，而后加入核酸酶DNAse type_I至終濃度3yg/mL，水解；
[0077]4)而后加入蛋白酶Pronase E至終濃度60yg/mL，酶解；
[0078]5)而后加入三氯乙酸至終濃度15%(w/v)，40min后固液分離取上清，透析，取透析袋內容物即為所述植物乳桿菌胞外多糖。
[0079]在以上技術方案的基礎上，滿足以下條件:
[0080]步驟I)所述的發酵液是植物乳桿菌厭氧發酵26h時的發酵液。步驟2)中乙醇的加入量是所述上清液體積的2.5倍。步驟3)中粗多糖的終濃度為6mg/L。步驟3)所述水解是在39°C條件下持續8h。步驟4)所述酶解是在39°C條件下持續20h。步驟5)透析前，先調節上清液pH至5，再透析。
[0081 ] 實施例4
[0082]—種植物乳桿菌胞外多糖，該植物乳桿菌胞外多糖是通過以下方法制備的:
[0083]I)取植物乳桿菌發酵液，固液分離取上清；
[0084]2)向步驟I)所述上清液中加入乙醇，醇沉，固液分離取沉淀，以10?12KDa截留分子量的透析袋透析，取透析袋內容物干燥，即為粗多糖；
[0085]3)以含有45mM Tris_HCl、8mM MgSO4.7H20的溶液作為粗多糖溶解液，溶解步驟2)所述粗多糖，而后加入核酸酶DNAse type-1至終濃度2.5yg/mL，水解；
[0086]4)而后加入蛋白酶Pronase E至終濃度45yg/mL，酶解；
[0087]5)而后加入三氯乙酸至終濃度13%(w/v)，25min后固液分離取上清，透析，取透析袋內容物即為所述植物乳桿菌胞外多糖。
[0088]在以上技術方案的基礎上，滿足以下條件:
[0089]步驟2)中乙醇的加入量是所述上清液體積的2.2倍。步驟3)所述水解是在38°C條件下持續5h。步驟5)透析前，先調節上清液pH至4.7，再透析。步驟I)所述的植物乳桿菌，是保藏編號為CCTCC M 2014170的植物乳桿菌。
[0090]實施例5
[0091]—種植物乳桿菌胞外多糖，該植物乳桿菌胞外多糖是通過以下方法制備的:
[0092]I)取植物乳桿菌發酵液，固液分離取上清；
[0093]2)向步驟I)所述上清液中加入乙醇，醇沉，固液分離取沉淀，以1KDa截留分子量的透析袋透析，取透析袋內容物干燥，即為粗多糖；
[0094]3)以含有55mM Tris-HCl、13mM MgSO4.7H20的溶液作為粗多糖溶解液，溶解步驟
2)所述粗多糖，而后加入核酸酶DNAse type_I至終濃度2.8yg/mL，水解；
[0095]4)而后加入蛋白酶Pronase E至終濃度55yg/mL，酶解；
[0096]5)而后加入三氯乙酸至終濃度14%(w/v)，35min后固液分離取上清，透析，取透析袋內容物即為所述植物乳桿菌胞外多糖。
[0097]以上對本發明的實施例進行了詳細說明，但所述內容僅為本發明的較佳實施例，并不用以限制本發明。凡在本發明的申請范圍內所做的任何修改、等同替換和改進等，均應包含在本發明的保護范圍之內。
【主權項】
1.一種植物乳桿菌胞外多糖，其特征在于所述植物乳桿菌胞外多糖是通過以下方法制備的: 1)取植物乳桿菌發酵液，固液分離取上清； 2)向步驟I)所述上清液中加入乙醇，醇沉，固液分離取沉淀，以8?14KDa截留分子量的透析袋透析，取透析袋內容物干燥，即為粗多糖； 3)以含有40?60mMTris-HCl、5?15mM MgSO4.7H20的溶液作為粗多糖溶解液，溶解步驟2)所述粗多糖，而后加入核酸酶DNAse type_I至終濃度2?3yg/mL，水解； 4)而后加入蛋白酶PronaseE至終濃度40?60yg/mL，酶解； 5)而后加入三氯乙酸至終濃度10?15%(w/v)，20?40min后固液分離取上清，透析，取透析袋內容物即為所述植物乳桿菌胞外多糖。2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟2)中乙醇的加入量是所述上清液體積的1.5?2.5倍。3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟3)中粗多糖的終濃度為4?6mg/L。4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟5)透析前，先調節上清液pH至4?5，再透析。5.根據權利要求1?4任一項所述的制備方法，其特征在于步驟I)所述的植物乳桿菌，是保藏編號為CCTCC M 2014170的植物乳桿菌。6.權利要求1所述植物乳桿菌胞外多糖用于抑制蠟樣芽孢桿菌腸毒素對小腸上皮細胞毒性的應用。7.根據權利要求6所述的應用，其特征在于所述蠟樣芽孢桿菌腸毒素是細胞毒素K。8.根據權利要求6所述的應用，其特征在于所述蠟樣芽孢桿菌腸毒素是溶血性腸毒素HBL09.根據權利要求6所述的應用，其特征在于所述蠟樣芽孢桿菌腸毒素是非溶血性腸毒素 Nhe ο10.權利要求1所述植物乳桿菌胞外多糖用于制備蠟樣芽孢桿菌腸毒素中毒治療藥物的應用。
【文檔編號】A61P31/04GK105837699SQ201610202595
【公開日】2016年8月10日
【申請日】2016年4月5日
【發明人】魏華, 張志鴻, 許恒毅, 何麗華, 陶雪瑩, 徐鋒, 江美玲
【申請人】南昌大學