具有抑制血管緊張素酶作用的鼠李糖乳桿菌和用圖
【技術領域】
[0001] 本發明通過優選所獲得一種鼠李糖乳桿菌HLH20120717(Lactobacillus rhamnosusHLH20120717)，用于發酵制備具有抑制血管緊張素酶（ACE)作用的豆漿和相關 食品。
【背景技術】
[0002] 隨著世界經濟的不斷發展，人們的生活水平提高，以高血壓為代表的心血管疾病 的危害日益加重。采取一切預防措施、治療手段，控制高血壓的發生、發展，以合理應用降壓 藥物降低其患病率和死亡率已成為國際針對高血壓的共識。目前臨床上主要治療高血壓的 藥物如利尿劑、0 _受體阻斷劑、鈣通道阻斷劑、血管緊張素轉換酶抑制劑、血管緊張素II受 體阻斷劑等。但都有一定的副作用或不良反應，易引肝腎功能危害，作為預防用藥或長期服 用就更加不合理。
[0003]目前，對應高血壓的發病因素，可通過改善不良生活習慣、合理膳食、加強健康教 育等方式最大限度的預防高血壓的發生，已成為世界宣傳的重點，以功能性的食品來達到 預防、治療高血壓的雙重目的，其中益生菌及其產品的開發比較熱門。
[0004] 我國對益生菌的研究和應用起步比較晚，政府和地方高度重視，目前已被列入國 家高新技術研究發展計劃的重點支持項目。但研究和開發具有血管緊張素轉化酶（ACE)抑 制活性的益生菌制品報道還是比較少，隨著相關生物技術、保健醫學學科等研究的不斷深 入，高血壓新的生物活性成分、功能基因、功能蛋白等作用新靶點的相繼發現，為篩選出高 效降壓、安全、高活性的益生菌產品提供了基礎條件。
【發明內容】
[0005] 本發明的目的是提供一株發酵具有抑制血管緊張素酶（ACE)作用豆漿的鼠李糖 乳桿菌HLH20120717(LactobacillusrhamnosusHLH20120717)，為進一步研究開發預防 和治療高血壓的益生菌功能性保健食品和藥品提供基礎。
[0006] 上述目的通過以下技術方案實現： 一種來源于發酵豆漿具有抑制血管緊張素酶（ACE)作用的鼠李糖乳桿菌，由采集 于自然發酵豆制品中，經分離、純化、物理誘變、優選獲得的高活性菌株，菌學分類名稱 actobacillusrhamnosusHLH20120717,菌學特性為：置于37°C恒溫培養箱的培養基中進 行培養，通過培養發現稀釋濃度為10-5時菌生長較良好，菌落分散；在相同條件下菌落生 長有大有小，菌落呈圓形，乳白色，邊緣整齊，表面光滑，其中較小的菌落微黃色；保藏號為： CGMCCNo. 7084。
[0007] 所述的來源于發酵豆漿具有抑制血管緊張素酶（ACE)作用的鼠李糖乳桿菌，其菌 學特性還包括：革蘭氏染色結果呈陽性；芽孢染色菌體呈綠色；接觸酶試驗中沒有氣泡產 生；溶鈣圈法培養觀察到菌落周圍出現透明圈，具備明顯乳酸菌的特征。
[0008] 所述的來源于發酵豆漿具有抑制血管緊張素酶（ACE)作用的鼠李糖乳桿菌，經 16SrDNA部分序列在線進行BLAST比對，結果具有Lactobacillus菌屬rhamnosus菌種的 主要遺傳特性： 16SrDNA測序部分序列如下所示：
【主權項】
1. 一種來源于發酵豆漿具有抑制血管緊張素酶（AC巧作用的鼠李糖乳桿菌，其特征 是：由采集于自然發酵豆制品中，經分離、純化、物理誘變、優選獲得的高活性菌株，菌學分 類名稱actobacillus rhamnosus HLH 20120717,菌學特性為；置于37°C恒溫培養箱的培養 基中進行培養，通過培養發現稀釋濃度為1(^5時菌生長較良好，菌落分散；在相同條件下菌 落生長有大有小，菌落呈圓形，乳白色，邊緣整齊，表面光滑，其中較小的菌落微黃色；保藏 號為；CGMCC No. 7084。
2. 根據權利要求1所述的來源于發酵豆漿具有抑制血管緊張素酶（AC巧作用的鼠李糖 乳桿菌，其特征是：其菌學特性還包括：革蘭氏染色結果呈陽性；芽抱染色菌體呈綠色；接 觸酶試驗中沒有氣泡產生；溶巧圈法培養觀察到菌落周圍出現透明圈，具備明顯乳酸菌的 特征。
3. 根據權利要求1或2所述的來源于發酵豆漿具有抑制血管緊張素酶（AC巧作 用的鼠李糖乳桿菌，其特征是：經16S rDNA部分序列在線進行BLAST比對，結果具有 Lactobacillus菌屬rhamnosus菌種的主要遺傳特性： 16S rDNA測序部分序列如下所示： <110〉黑龍江大學 <120〉來源于發酵豆漿具有抑制血管緊張素酶（AC巧作用的鼠李糖乳桿菌 <141〉日期 <160>1 <210>Lactobacillus rhamnosus HLH 20120717 <211>1562 <212>RNA <213〉鼠李糖乳桿菌 <223〉n = a 或 g 或 C 或 t <400〉核巧酸序列和/或氨基酸序列
4. 根據權利要求1或2或3所述的來源于發酵豆漿具有抑制血管緊張素酶（AC巧作用 的鼠李糖乳桿菌，其特征是：所述培養基處方為：
所述的比例為重量份數比。
5. -種利用權利要求1或2或3或4所述的鼠李糖乳桿菌制作的豆漿，其特征是；將 權利要求1或2或3或4所述的菌株接種于經大豆浸泡，研磨、勻漿、煮沸，過濾、高溫滅菌 制得的豆漿中，37C -42C發酵24小時W上，制得酸豆漿。
6. -種權利要求5所述的豆漿的制作方法，其特征是： 稱取lOOg大豆清洗后放于250血自來水中于室溫下浸泡12h ;經去皮后，清水洗凈， 將浸泡好的大豆W重量比1 : 8的豆水比用組織搗碎機磨漿，加熱至沸騰10分鐘后用，H 層紗布過濾后。倒入H角燒瓶中于12rC滅菌15min，紗布封口冷卻后，無菌條件下用接種 環挑去MRS試管斜面培養的李糖乳桿菌HLH 20120717菌落五環，振搖均勻后，放置在37C 培養12小時，冷卻至室溫，后放入冰箱4C冷存，作為備用的豆漿； 同上稱取2000g大豆清洗后放于50000血自來水中于室溫下浸泡12h ;經去皮后，清 水洗凈，將浸泡好的大豆: 8重量比的豆水比用豆漿機磨漿，加熱至沸騰后，離也過濾 出去豆渣；經己±滅菌器135C滅菌10砂快速滅菌，置于清洗滅菌好的發酵罐中，按5%體
積比例加入上述備用的發酵豆漿，W 30r/min，37-4CTC的發酵2小時，而后分裝、密封到酸 奶塑料杯里，室溫發酵12小時后，放入冰箱4C冷存； 剩余部分置于清洗滅菌好的大燒杯中，紗布封口后室溫發酵24個小時W上，當抑達 到4. 9 W下，酸豆漿呈凝固狀，攬拌器將酸豆漿都攬成可流動性狀，平鋪2cm厚度的法巧盤 中，-4(TC到3(TC冷凍干燥，成松脆黃色固體狀，粉碎成100目的粉末，經凱氏定氮法測定蛋 白含量47%。密封低溫干燥保存。
7. -種將權利要求1或2或3或4所述的來源于發酵豆漿具有抑制血管緊張素酶 (AC巧作用的鼠李糖乳桿菌，用于制作抑制血管緊張素酶（ACE)、用于制作預防和治療高血 壓的保健食品和藥品的用途。
【專利摘要】具有抑制血管緊張素酶作用的鼠李糖乳桿菌和用途，隨著相關生物技術、保健醫學學科等研究的不斷深入，高血壓新的生物活性成分、功能基因、功能蛋白等作用新靶點的相繼發現，為篩選出高效降壓、安全、高活性的益生菌產品提供了基礎條件。本發明由采集于自然發酵豆制品中，經分離、純化、物理誘變、優選獲得的高活性菌株，菌學分類名稱actobacillus rhamnosus HLH 20120717，菌學特性為：置于37℃恒溫培養箱的培養基中進行培養，通過培養發現稀釋濃度為10-5時菌生長較良好，菌落分散；在相同條件下菌落生長有大有小，菌落呈圓形，乳白色，邊緣整齊，表面光滑，其中較小的菌落微黃色；保藏號為：CGMCC No.7084。本發明為進一步研究開發預防和治療高血壓的益生菌功能性保健食品和藥品提供基礎。CGMCC No.708420130104
【IPC分類】A61K35-747, C12R1-225, C12N1-20, A23C11-10, A61P9-12
【公開號】CN104593307
【申請號】CN201510088465
【發明人】鄒積宏, 劉紅梅, 賀龍惠, 袁杰利, 金濤, 姜岸
【申請人】黑龍江大學
【公開日】2015年5月6日
【申請日】2015年2月26日