一種從油橄欖葉中提取橄欖苦苷的方法
【專利摘要】本發明公開了一種從油橄欖葉中提取橄欖苦苷的方法，屬于植物提取技術領域。本發明將預處理油橄欖葉粉末通過粳米和糯米發酵液進行提取，并加入纖維素酶以及果膠酶，使得油橄欖葉粉末中有效成份進一步釋放，之后經過離心分離，旋蒸濃縮并干燥，從而得到從油橄欖葉中提取橄欖苦苷的方法。實例證明，本發明操作簡單易行，原料簡單易得，利用粳米和糯米發酵液代替有機溶解，使得得到的橄欖苦苷中無任何有機溶劑殘留物，安全健康，最終使得從油橄欖葉中提取得到的橄欖苦苷純度高達85％以上，得率達到90％以上，可廣泛可用于食品、藥品的生產，適合工業化生產。
【專利說明】
一種從油橄欖葉中提取橄欖苦苷的方法
技術領域
[0001]本發明公開了一種從油橄欖葉中提取橄欖苦苷的方法，屬于植物提取技術領域。
【背景技術】
[0002]橄欖苦苷是一種裂環環烯醚萜苷類化合物，在至少25種木犀科植物中存在。橄欖苦苷又是一個具有較強生物活性的化合物，文獻報道其具有顯著的抗真菌、抗炎、抗病毒、抗氧化、抗癌和降血糖等多種生物活性，另外，橄欖苦苷還具有抗心律失常和解痙作用，是一種作用效果較好的血管緊張素轉化酶抑制劑;橄欖苦苷還能夠激活胃蛋白酶并降低其他霉的活性;橄欖苦苷還能減少肝細胞中由離子誘導的脂質過氧化作用產生的丙醛酸。
[0003]橄欖苦苷具有以下的功效:1、可以阻止細胞和病毒的生長，并刺激免疫系統中重要細胞的活性，以抵抗感染;2、對膀胱和微菌感染也極為有效;3、它有抗氧化能力，能減輕低密度脂蛋白的氧化程度，預防冠心病，動脈樣硬化的發生;4、保持健康的血壓和膽固醇水平，有舒緩血管平滑肌，降低血壓的能力。
[0004]橄欖苦苷使用具有廣闊的前景，具體包括:1、制藥，用于制造治療病毒、細菌、寄生蟲和吸血蟲等所引起的疾病的新藥，和治療感冒的新藥;2、護膚品，用于護膚品中可以促進肌膚原蛋白再生，自然抵御由氧化而導致肌膚的破壞。
[0005]提取方法主要有熱提取、超聲波輔助提取、微波輔助提取等。這些方法均存在一定的技術缺陷，例如耗能大、耗材多、提取溫度高導致橄欖苦苷易分解等。
[0006]另外，采用現有的提取方法從油橄欖葉中提取橄欖苦苷，提取物中橄欖苦苷的含量一般在10?40%，提取效果不佳，提取物中的橄欖苦苷含量較低，且橄欖葉的利用度不高;且在提取的過程中，有機溶劑消耗大，有些溶解帶有毒性，使得得到的產品中有機溶劑殘留量大，不能夠廣泛應用。
【發明內容】
[0007]本發明主要解決的技術問題:針對目前傳統方法在提取橄欖苦苷的過程中，有機溶劑消耗大，使得得到的產物中含有大量有機溶劑殘留物，不能夠廣泛應用，另外提取物中橄欖苦苷的含量較低，提取效果不佳的現狀，提供了一種將預處理油橄欖葉粉末通過粳米和糯米發酵液進行提取，并加入纖維素酶以及果膠酶，使得油橄欖葉粉末中有效成份充分釋放，之后經過離心分離，旋蒸濃縮并干燥，從而得到從油橄欖葉中提取橄欖苦苷的方法。該方法操作簡單易行，原料簡單易得，利用粳米和糯米發酵液代替有機溶解，使得得到的橄欖苦苷中無任何有機溶劑殘留物，安全健康，最終使得從油橄欖葉中提取得到的橄欖苦苷純度高達85%以上，得率達到90%以上，可廣泛可用于食品、藥品的生產，適合工業化生產。
[0008]為了解決上述技術問題，本發明所采用的技術方案是:
(I)稱取300?500g新鮮油橄欖葉，用去離子水洗滌3?5次，去除表面殘留污物后，用液氮冷卻處理3?5min，迅速取出，立即將其平鋪于石磨磨盤上，研磨5?lOmin，收集研磨所得物料，將其轉入密閉容器中，在室溫條件下，減壓至60?70kPa真空度，保壓10?20min，得預處理油橄欖葉粉末，備用；
(2)依次稱取0.8?1.0kg粳米和3?5kg糯米，人工混勻后，用去離子水洗滌3?5次，再將其轉入蒸籠中，在90?95°C條件下蒸煮60?80min，隨后將其平鋪于竹席上，自然冷卻至45 ?55°C;
(3)將冷卻后的粳米和糯米轉入盛有4?6L去離子水的發酵罐中，再加入15?30g釀酒酵母粉，用消毒的木棍攪拌10?20min后，將發酵罐密封，并在發酵罐周圍鋪設I?3層草稻草，密封發酵8?10個月，收集上清液；
(4)在反應爸中，依次加入600?800mL上述上清液，60?80g步驟(I)備用預處理油橄欖葉粉末，2?3g纖維素酶和2?3g果膠酶，加熱升溫至37?45°C，啟動攪拌器，以600?800r/min轉速攪拌反應3?5h，再將其轉入超聲振蕩儀，以200?400W功率超聲處理40?60min ；
(5)待超聲處理結束，離心分離，收集上清液，將其置于旋轉蒸發器中，于75?85°C下，旋蒸濃縮3?4h，得濃縮液，再將其轉入真空干燥箱中，在60?80 °C干燥16?24h，即得橄欖苦苷。
[0009]本發明的應用方法是:將本發明制得的橄欖苦苷放入護膚乳液中，其中每100?20011^乳液中加入5?1(^，充分混合均勻，使用時，取3?5mL混合液涂抹臉部，建議每天早晚潔面后涂抹，堅持使用10?15天，可明顯感覺皮膚細膩彈性，長期使用可以促進肌膚原蛋白再生，可自然抵御由氧化而導致肌膚的破壞。
[0010]本發明的有益效果是:
(1)本發明方法獨特新穎，在操作過程中，利用液氮冷卻橄欖葉，使得細胞中水瞬間凝結成冰，通過研磨施壓使橄欖葉細胞壁破裂，細胞中有效成分得以釋放；
(2)本發明中利用低溫降低水解酶活性，保護油橄欖葉中有效成份不易水解，另外研磨后立即減壓，使冰升華，去除水份，并加入纖維素酶和果膠酶，使其中有效成份更加得到釋放，提尚提取率；
(3 )本發明最終得到的橄欖苦苷中無任何有機溶劑殘留物，安全健康，純度高達85 %以上，得率達到90%以上，可廣泛可用于食品、藥品的生產。
【具體實施方式】
[0011]首先稱取300?500g新鮮油橄欖葉，用去離子水洗滌3?5次，去除表面殘留污物后，用液氮冷卻處理3?5min，迅速取出，立即將其平鋪于石磨磨盤上，研磨5?lOmin，收集研磨所得物料，將其轉入密閉容器中，在室溫條件下，減壓至60?70kPa真空度，保壓10?20min，得預處理油橄欖葉粉末，備用；隨后依次稱取0.8?1.0kg粳米和3?5kg儒米，人工混勻后，用去離子水洗滌3?5次，再將其轉入蒸籠中，在90?950C條件下蒸煮60?80min，隨后將其平鋪于竹席上，自然冷卻至45?55°C ;之后將冷卻后的粳米和糯米轉入盛有4?6L去離子水的發酵罐中，再加入15?30g釀酒酵母粉，用消毒的木棍攪拌10?20min后，將發酵罐密封，并在發酵罐周圍鋪設I?3層草稻草，密封發酵8?10個月，收集上清液;接下來在反應釜中，依次加入600?800mL上述上清液，60?80g上述備用預處理油橄欖葉粉末，2?3g纖維素酶和2?3g果膠酶，加熱升溫至37?45°C，啟動攪拌器，以600?800r/min轉速攪拌反應3?5h，再將其轉入超聲振蕩儀，以200?400W功率超聲處理40?60min ；最后待超聲處理結束，離心分離，收集上清液，將其置于旋轉蒸發器中，于75?85°C下，旋蒸濃縮3?4h，得濃縮液，再將其轉入真空干燥箱中，在60?80°C干燥16?24h，即得橄欖苦苷。
[0012]實例I
首先稱取300g新鮮油橄欖葉，用去離子水洗滌3次，去除表面殘留污物后，用液氮冷卻處理3min，迅速取出，立即將其平鋪于石磨磨盤上，研磨5min，收集研磨所得物料，將其轉入密閉容器中，在室溫條件下，減壓至60kPa真空度，保壓lOmin，得預處理油橄欖葉粉末，備用;隨后依次稱取0.8kg粳米和3kg糯米，人工混勻后，用去離子水洗滌3次，再將其轉入蒸籠中，在90°C條件下蒸煮60min，隨后將其平鋪于竹席上，自然冷卻至45°C;之后將冷卻后的粳米和糯米轉入盛有4L去離子水的發酵罐中，再加入15g釀酒酵母粉，用消毒的木棍攪拌1min后，將發酵罐密封，并在發酵罐周圍鋪設I層草稻草，密封發酵8個月，收集上清液;接下來在反應爸中，依次加入600mL上述上清液，60g上述備用預處理油橄欖葉粉末，2g纖維素酶和2g果膠酶，加熱升溫至37 °C，啟動攪拌器，以600r/min轉速攪拌反應3h，再將其轉入超聲振蕩儀，以200W功率超聲處理40min;最后待超聲處理結束，離心分離，收集上清液，將其置于旋轉蒸發器中，于75°C下，旋蒸濃縮3h，得濃縮液，再將其轉入真空干燥箱中，在60°C干燥16h，即得橄欖苦苷。
[0013]本實例操作簡單易行，將本發明制得的橄欖苦苷放入護膚乳液中，其中每10mL乳液中加入5g，充分混合均勻，使用時，取3mL混合液涂抹臉部，建議每天早晚潔面后涂抹，堅持使用10天，可明顯感覺皮膚細膩彈性，長期使用可以促進肌膚原蛋白再生，可自然抵御由氧化而導致肌膚的破壞。
[0014]實例2
首先稱取400g新鮮油橄欖葉，用去離子水洗滌4次，去除表面殘留污物后，用液氮冷卻處理4min，迅速取出，立即將其平鋪于石磨磨盤上，研磨Smin，收集研磨所得物料，將其轉入密閉容器中，在室溫條件下，減壓至65kPa真空度，保壓15min，得預處理油橄欖葉粉末，備用;隨后依次稱取0.9kg粳米和4kg糯米，人工混勻后，用去離子水洗滌4次，再將其轉入蒸籠中，在93°C條件下蒸煮70min，隨后將其平鋪于竹席上，自然冷卻至50°C;之后將冷卻后的粳米和糯米轉入盛有5L去離子水的發酵罐中，再加入25g釀酒酵母粉，用消毒的木棍攪拌15min后，將發酵罐密封，并在發酵罐周圍鋪設2層草稻草，密封發酵9個月，收集上清液;接下來在反應爸中，依次加入700mL上述上清液，70g上述備用預處理油橄欖葉粉末，2.5g纖維素酶和2.5g果膠酶，加熱升溫至42°C，啟動攪拌器，以700r/min轉速攪拌反應4h，再將其轉入超聲振蕩儀，以300W功率超聲處理50min;最后待超聲處理結束，離心分離，收集上清液，將其置于旋轉蒸發器中，于80°C下，旋蒸濃縮3.5h，得濃縮液，再將其轉入真空干燥箱中，在70 °C干燥22h，即得橄欖苦苷。
[0015]本實例操作簡單易行，將本發明制得的橄欖苦苷放入護膚乳液中，其中每150mL乳液中加入Sg，充分混合均勻，使用時，取4mL混合液涂抹臉部，建議每天早晚潔面后涂抹，堅持使用13天，可明顯感覺皮膚細膩彈性，長期使用可以促進肌膚原蛋白再生，可自然抵御由氧化而導致肌膚的破壞。
[0016]實例3
首先稱取500g新鮮油橄欖葉，用去離子水洗滌5次，去除表面殘留污物后，用液氮冷卻處理5min，迅速取出，立即將其平鋪于石磨磨盤上，研磨1min，收集研磨所得物料，將其轉入密閉容器中，在室溫條件下，減壓至70kPa真空度，保壓20min，得預處理油橄欖葉粉末，備用;隨后依次稱取1.0kg粳米和5kg糯米，人工混勻后，用去離子水洗滌5次，再將其轉入蒸籠中，在95°C條件下蒸煮80min，隨后將其平鋪于竹席上，自然冷卻至55°C;之后將冷卻后的粳米和糯米轉入盛有6L去離子水的發酵罐中，再加入30g釀酒酵母粉，用消毒的木棍攪拌20min后，將發酵罐密封，并在發酵罐周圍鋪設3層草稻草，密封發酵10個月，收集上清液;接下來在反應爸中，依次加入800mL上述上清液，80g上述備用預處理油橄欖葉粉末，3g纖維素酶和3g果膠酶，加熱升溫至45 °C，啟動攪拌器，以800r/min轉速攪拌反應5h，再將其轉入超聲振蕩儀，以400W功率超聲處理60min;最后待超聲處理結束，離心分離，收集上清液，將其置于旋轉蒸發器中，于85°C下，旋蒸濃縮4h，得濃縮液，再將其轉入真空干燥箱中，在80°C干燥24h，即得橄欖苦苷。
[0017]本實例操作簡單易行，將本發明制得的橄欖苦苷放入護膚乳液中，其中每200mL乳液中加入10g，充分混合均勻，使用時，取5mL混合液涂抹臉部，建議每天早晚潔面后涂抹，堅持使用15天，可明顯感覺皮膚細膩彈性，長期使用可以促進肌膚原蛋白再生，可自然抵御由氧化而導致肌膚的破壞。
【主權項】
1.一種從油橄欖葉中提取橄欖苦苷的方法，其特征在于具體操作步驟為: (I)稱取300?500g新鮮油橄欖葉，用去離子水洗滌3?5次，去除表面殘留污物后，用液氮冷卻處理3?5min，迅速取出，立即將其平鋪于石磨磨盤上，研磨5?lOmin，收集研磨所得物料，將其轉入密閉容器中，在室溫條件下，減壓至60?70kPa真空度，保壓10?20min，得預處理油橄欖葉粉末，備用； (2)依次稱取0.8?1.0kg粳米和3?5kg糯米，人工混勻后，用去離子水洗滌3?5次，再將其轉入蒸籠中，在90?95°C條件下蒸煮60?80min，隨后將其平鋪于竹席上，自然冷卻至.45 ?55°C; (3)將冷卻后的粳米和糯米轉入盛有4?6L去離子水的發酵罐中，再加入15?30g釀酒酵母粉，用消毒的木棍攪拌10?20min后，將發酵罐密封，并在發酵罐周圍鋪設I?3層草稻草，密封發酵8?10個月，收集上清液； (4)在反應爸中，依次加入600?800mL上述上清液，60?80g步驟(I)備用預處理油橄欖葉粉末，2?3g纖維素酶和2?3g果膠酶，加熱升溫至37?45°C，啟動攪拌器，以600?800r/min轉速攪拌反應3?5h，再將其轉入超聲振蕩儀，以200?400W功率超聲處理40?60min ； (5)待超聲處理結束，離心分離，收集上清液，將其置于旋轉蒸發器中，于75?85°C下，旋蒸濃縮3?4h，得濃縮液，再將其轉入真空干燥箱中，在60?80 °C干燥16?24h，即得橄欖苦苷。
【文檔編號】A23L33/105GK106046078SQ201610484367
【公開日】2016年10月26日
【申請日】2016年6月28日
【發明人】郭舒洋, 張明, 許博偉
【申請人】郭舒洋