專利名稱：多肽治療劑口服給藥的緩釋配方及其使用方法
技術領域：
本發明涉及適合口服給藥、含有多肽的組合物，其中包括白介素-11。
背景技術：
重組人類白介素-11(rhIL-11)是含有177個氨基酸的非糖基化多肽。多肽不含有半胱氨酸殘基，并是高堿性的(PI＞10.5)。rhIL-11是一組人類生長因子，其中包括人生長激素(hGH)和粒細胞集落刺激因子(G-CSF)。
rhIL-11可以用做化學治療支持劑，并且與其它癌癥治療結合給藥，以增加血小板含量。經證實，rhIL-11還具有炎效果，可以用于治療多種病癥，例如節段性回腸炎和潰瘍性結腸炎。通常，IL-11通過皮下注射方式給藥。皮下注射配方必須是無菌的，相對于其它給藥線路價格昂貴。此線路既不方便施用，又會造成受試體不適。此外，皮下注射還與多種并發癥有關，例如注射區域的局部組織損傷與感染。
發明概述本發明部分基于可口服給藥受試體rhIL-11組合物的發現。
一方面，本發明提供了具有治療效果的、緩釋口服藥劑組合物，其中含有生物活性多肽、腸溶衣(例如甲基丙烯酸共聚物)，任選含有至少一種賦形劑。在一些具體實施方式
中，生物活性多肽具有下述一種或者多種特性不含有N-連接糖基化位點、含有不多于一個半胱氨酸、具有堿性的pI值；在一些具體實施方式
中，多肽不含有半胱氨酸殘基。
優選的多肽是IL-11。本發明文中所用指的是生物活性多肽IL-11。然而，可以理解，有關IL-11的本發明技術特征也適用于含有其它生物活性多肽的組合物與方法。
在一
具體實施例方式
中，本發明組合物還含有惰性核。惰性核可以是，例如，由糖、淀粉、微晶纖維素或者其它藥用可接受的惰性賦形劑構成的顆粒、小球或者珠子。優選的惰性核是碳水化合物，例如單糖、二糖、或者多糖，即含有三個或者多個糖分子的聚合物。適合的碳水化合物實例是蔗糖。在一些具體實施方式
中，蔗糖占到組合物的60-75重量％。
當生物活性多肽是IL-11，IL-11層優選配有穩定劑，例如甲硫氨酸、甘氨酸、聚山梨醇酯80和磷酸鹽緩沖液，和/或藥用可接受粘合劑，例如羥丙基甲基纖維素、聚烯吡酮或者羥丙基纖維素。本發明組合物還含有一種或者多種藥用賦形劑。藥用賦形劑包括，例如粘合劑、崩解劑、填充劑、增塑劑、潤滑劑、助流劑、包衣、和懸浮劑/分散劑。
優選的粘合劑是羥丙基甲基纖維素(HPMC)。HPMC優選占到本發明組合物的3-7重量％。
優選的助流劑是滑石粉。在一些具體實施方式
中，助流劑占到本發明組合物的5-10重量％。
增塑劑可以包括，例如檸檬酸三乙酯、聚乙二醇、鄰苯二甲酸二丁酯、三乙酸甘油酯、dibutyl sebucate、丙二醇。優選的增塑劑是檸檬酸三乙酯。例如，檸檬酸三乙酯可以占到本發明組合物的1-2重量％。
優選的表面活性劑是聚山梨醇酯80。聚山梨醇酯80可以占到本發明組合物的0.015-0.045重量％。
在一些
具體實施例方式
中，本發明組合物可以用做多層微粒系統，其中包括采用膠囊藥劑形式的多層腸溶衣與IL-11層包裹的顆粒。腸溶包衣的IL-11顆粒包括惰性核、例如碳水化合物小球，IL-11層與腸溶衣層。腸溶衣層含有例如PH值決定的共聚物、增塑劑、防粘劑/助流劑。優選的聚合物包括，例如甲基丙烯酸共聚物、苯二甲酸醋酸纖維素、苯二甲酸羥丙甲基纖維素、苯二甲酸聚乙酸乙烯酯、紫膠、琥珀酸乙酸羥丙甲基纖維素、羧甲基纖維素。
優選的是，惰性密封層出現在本發明組合物中做為IL-11層與腸溶衣層的屏障。惰性密封涂層可以是，例如羥丙甲基纖維素、紫烯吡酮、羥丙基纖維素、或者另一種藥用可接受的粘合劑。
適合的緩釋聚合物包括，例如氨基甲丙烯酸共聚物(EudragitRL，Eudragit RS)、乙基纖維素、或者羥丙甲基纖維素。在一些具體實施方式
中，甲基丙烯酸共聚物是pH值決定的陰離子共聚物，在pH大于5.5條件下溶解。甲基丙烯酸共聚物以懸液方式使用，并且占到本發明組合物的10-20重量％。優選的甲基丙烯酸共聚物是EUDRAGITL 30 D-55。
在優選的具體實施方式
中，腸溶包衣的片劑形式包括IL-11、填充劑微晶體纖維素(微晶纖維素PH 102)、崩解劑Explotab、磷酸鈉緩沖液、抗氧化劑甲硫氨酸、表面活性劑聚山梨醇酯80、潤滑劑硬脂酸鎂、腸溶衣涂層。
在一優選具體實施方式
中，緩釋片劑藥劑形式包括IL-11、填充劑(例如微晶體纖維素(微晶纖維素PH102)和蔗糖)、基質生成聚合物(羥丙甲基纖維素Methocel K4M Prem，MethocelK100LV，LH，CR，Premium)、助流劑(例如硅酸鹽)、磷酸鈉緩沖液、抗氧化劑甲硫氨酸、表面活性劑(例如聚山梨醇酯80)、潤滑劑(例如硬脂酸鎂)。
在另一
具體實施例方式
中，本發明組合物含有甘氨酸。在一些具體實施方式
中，甘氨酸占到本發明組合物的1-4重量％。
本發明組合物還任選含有抗氧化劑。適合的抗氧化劑實例是甲硫氨酸。在一些具體實施方式
中，甲硫氨酸占到本發明組合物的0.1-0.5重量％。
IL-11可以采用由天然IL-11離析的提純蛋白形式。此外，IL-11多肽還可以采用多肽的重組形式，例如重組的人類IL-11(rhIL-11)。
在另一方面，本發明提供了具有治療效果的、緩釋口服劑型的多層微粒組合物，其中包括IL-11多肽、第一密封層、腸溶衣層、第二密封層。優選的密封層是HPMC。本發明組合物的腸溶衣層可以是，例如甲基丙烯酸共聚物。優選的甲基丙烯酸共聚物在pH大于5.5的條件下可溶，例如EUDRAGITL 3。
本發明還提供了一種緩釋組合物，其中含有IL-11多肽、腸溶衣(例如甲基丙烯酸共聚物)，還任選含有至少一種賦形劑。在一具體實施方式
中，本發明組合物還含有惰性核。惰性核可以是，例如由糖、淀粉、微晶纖維素或者其它藥用可接受的惰性賦形劑構成的顆粒、小球或者珠子。優選的惰性核是碳水化合物，例如單糖、二糖、或者多糖，即含有三個或者多個糖分子的聚合物。適合的碳水化合物實例是蔗糖。在一些具體實施方式
中，蔗糖占到組合物的60-75重量％。
本發明還提供了將IL-11多肽給藥受試體的方法，該方法通過將用量上足以引發受試體生理反應的含有文中所述IL-11多肽的藥用組合物口服給藥于受試體。在一些具體實施方式
中，在受試體小腸內引發反應。
上述方法中所用的受試體可以是，例如人，非人類的靈長類動物，狗，貓，馬，奶牛，豬，羊，兔，大鼠，或者小鼠。
另一方面，本發明提供了一種治療或者預防受試體炎癥的方法，該方法通過將含有IL-11的口服組合物給藥于受試體。在一些具體實施方式
中，所述炎癥與潰瘍性結腸炎、節段性回腸炎有關。
除非另有說明，本說明書所用的全部技術與科技名詞具有與本領域普通技術人員通常理解的相同含義。盡管在實施或者檢測本發明中可以使用與文中所述等同或者相似的方法與材料，適合的方法與材料將在下文進行描述。文中所述的所有文獻、專利申請、專利以及其它參考資料的全部內容通過引述合并于本文。在發生沖突的情況下，以含有定義的本發明說明書為準。此外，材料、方法和實例僅對本發明進行說明，并非對本發明加以限制。
參見下文的詳細說明與權利要求，本發明的其它技術特征與優點將會顯而易見。


圖1是適合口服給藥的多層微粒IL-11配方的示意圖。
圖2是適合口服給藥多層微粒IL-11配方制備過程的示意圖。
發明詳述本發明提供了適合口服給藥生物活性多肽的配方。在一些具體實施方式
中，生物活性多肽不含有糖基化位點(例如既缺少氮連接的糖基化位點，又缺少氧連接的糖基化位點，或者同時缺少兩種位點)，不含有半胱氨酸殘基，和/或具有堿性的pI值。糖基化缺乏的原因既可以是天然多肽缺乏糖基化位點，也可以是蛋白被設計成為缺少這些位點。此外，還可以使用例如糖基化酶處理這些多肽，從而減少或者去除糖基化殘基。相似的是，半胱氨酸殘基的缺乏可以出現在天然多肽序列中，也可以出現在天然半胱氨酸殘基已經被刪除或者由非半胱氨酸殘基替代的多肽變異體中。
配方中使用的優選多肽是白介素-11(IL-11)。此蛋白是多效性的細胞因子，可以刺激原始淋巴造血前體細胞，并且可以與其它造血生長因子協同作用，從而刺激巨核細胞的增殖與成熟。IL-11詳細記錄在1991年3月30日公開的國際申請PCT/US90/06803，以及1993年6月1日公開的美國專利No.5215895。克隆的人類IL-11以前記錄在1990年3月30日出版的ATCC，10801University Boulevard，Manassas，Va 20110-2209，under ATCC No.68284。此外，如1993年12月14日公開的美國專利No.5270181所述，以及1994年3月8日公開的美國專利No.5292646所述，IL-11還可以與另一種蛋白重組制成融合蛋白。采用現有常規的基因工程技術，可以在多種宿主細胞中制備IL-11。此外，可以從多種細胞系獲得IL-11，例如人類肺成纖維細胞系、MRC-5(ATCC Accession No.CCL 171 and Paul et al)、人類滋養層細胞系、TPA30-1(ATCC Accession No.CRL 1583)。在Proc Natl AcadSci USA 877512(1990)中記載的是編碼人類IL-11的cDNA，以及推導出的氨基酸序列(氨基酸1-199)。美國專利No.5292646記載了去脯氨酸型的IL-11，其中成熟型IL-11(氨基酸22-199)的N末端脯氨酸已經被去除(氨基酸23-199)。本領域技術人員可以理解，按照本發明可以使用保留IL-11活性的任何形式IL-11。
除了重組技術外，還可以通過公知常規的化學合成方法制備IL-11。以合成方式構造本發明多肽的方法在本領域技術人員中眾所周知。由于具有與天然細胞因子多肽相同的第一、第二或者第三結構和構象特征，可以預料合成構造的細胞因子多肽序列擁有通常所具有的生物活性。在本發明方法中，還可以使用復制或者部分復制其功能的、合成構造的細胞因子多肽序列或者其片段。因此，可以使用本發明所用天然提純細胞因子的生物活性替代品或者免疫替代品。
對于蛋白、肽或者這些細胞因子的DNA序列、或者其活性片段的修飾也可以產生應用于本發明方法的蛋白。本領域技術人員可以使用公知的技術，制備此類修飾的細胞因子。在細胞因子序列中，例如IL-11序列中，重要的修飾可以包括在編碼序列中替換、插入、或者刪除一個或者多個選定的氨基酸殘基。關于替換、插入或者刪除的誘變技術在本領域技術人員中眾所周知(參見美國專利No.4,518,584)。
如文中所述具有治療效果的、細胞因子多肽序列的其它特定變異可以包括，例如插入一個或者多個糖基化位點。通過刪除、取代、或者向肽序列或者核苷酸或者DNA序列加入氨基酸，可以向序列插入天冬門酰胺連接的糖基化識別位點。可以在通過加入氧連接碳水化合物進行修飾的分子內任何位點實現上述變化。此類修改的核苷酸或者肽序列的表達生成了在上述位點糖基化的變異體。
本領域技術人員可以很容易地制成所選細胞因子序列的其它類似物與派生物；經認定，此類似物與派生物全部地或者部分地保留或者延長了其活性。此類的一種修飾是在細胞因子序列上現有的賴氨酸殘基上附著聚乙二醇(PEG)，或者使用常規技術向序列插入一個或者多個賴氨酸殘基、或者可以與PEG或者PEG衍生物反應的其它氨基酸殘基，從而確保附著PEG部分。
這些選定細胞因子的其它類似物還可以是以編碼細胞因子DNA序列的等位變異為特征，或者以編碼細胞因子DNA序列的誘導變異為特征。可以認定，上述參考文獻中公開的所有類似物都類似地適用于本發明，其中包括以能夠在嚴格雜交條件下或者非嚴格雜交條件下雜交所述細胞因子序列的DNA序列為特征的類似物(Sambrook et al，Molecular Cloning.A Laboratory Mannual，2d edit，Cold Spring Harbor Laboratory，New York(1989))。
還可以認定，融合分子適用于本文公開的組合物與方法，融合分子是通過將一種細胞因子的序列或者序列的生物活性片段融合到另一種細胞因子或者似蛋白質治療劑，例如融合到IL-6的IL-11(參見，例如在1992年3月19日公開的PCT/US91/06186(WO92/04455)中記錄的融合方法)。此外，按照本發明方法，細胞因子組合可以結合給藥。
因此，在本發明方法的說明中IL-11只作為名稱提及，本領域技術人員可以理解，IL-11包括由本領域當前公開序列制成的蛋白，以及以充分保留相似活性的上述修飾為特征的蛋白。
圖1展示了優選多層微粒IL-11配方的示意圖。在中心糖球表面上包裹了一個含有rhIL-11的涂層。按順序將羥丙甲基纖維素(HPMC)密封層包裹在rhIL-11藥物涂層上。此HPMC密封層由甲基丙烯酸共聚物(例如，Eudragit L20D-55)與腸溶衣層包裹，并且整個小球由第二或者最終的HPMC密封層包裹。
可以采用任何業內公知的方法制備口服IL-11配方。適合方法的實例包括對蔗糖小球實施流化床噴霧，直接壓縮，濕顆粒合成法。在下文的實施例中對本發明組合物的制備方法進行說明。
圖2展示了制備適合口服給藥多層微粒IL-11顆粒優選方法的流程圖。在流化床涂布機中，按順序施加藥物層、密封層、腸溶衣層和第二密封層。優選檢測每個步驟的溫度與配方質量。
流程圖說明，將糖球加入流化床涂布機后，再用含有rhIL-11、二元磷酸鈉、一元磷酸鈉、甘氨酸、聚山梨醇酯80、甲硫氨酸、羥丙甲基纖維素(HPMC)和純凈水的藥物層包裹，形成涂層。接著，施加含有Eudragit、滑石粉、氫氧化鈉、檸檬酸三乙酯和純凈水的腸溶衣層。然后，施加HPMC和純凈水構成的密封涂層，隨后施用滑石粉作為抗靜電劑。后續的步驟包括，例如在2-8攝氏度下儲存180天。
合成適合口服給藥配方的工藝在本領域眾所周知，并且記載在下列文獻中例如Bergstrand等人的美國專利No.6428810，Chen等人的美國專利No.6077541，Ullah等人的美國專利No.6331316，Chen等人的美國專利No.6174548和Anderson等人的美國專利No.6207682。
本發明配方可以以任何適當的形式給藥，例如以膠囊、藥袋、片劑或者懸液形式使用。
本發明配方可以用于治療經證實IL-11具有療效的多種癥狀。優選的癥狀是炎性腸疾病(IBD)。此癥狀是以造成下述臨床癥狀的慢性腸炎為特征的例如腹瀉、出血、腹痛、發燒、關節疼痛和重量減輕。對于這些癥狀，范圍既包括輕微癥狀又包括嚴重癥狀，既可以從初始的輕微不適逐漸溫和地發展加重，又可以劇烈強度的方式忽然爆發。
在大部分病人群體中IBD是慢性疾病的普遍原因。IBD表現出兩種不同的形式潰瘍性結腸炎(UC)和節段性回腸炎(CD)。盡管兩種病癥的臨床表現非常相似，與上部胃腸道相反UC主要涉及結腸與直腸的炎癥。相反的是，節段性回腸炎影響上部小腸消化段的大部分區域，因此更大可能地引發吸收障礙，并且伴隨慢性維生素與營養物質的缺乏。
文中所述的口服IL-11配方可以與治療炎性腸疾病的其它藥劑結合給藥。其它藥劑包括，例如皮質類固醇，免疫抑制劑，英夫利昔單抗，和有助于控制炎癥的美沙拉秦。美沙拉秦包括例如抑氮磺胺吡啶和5-ASA試劑，例如安薩科、奧柳氮鈉、或者頗得斯安。此外，口服IL-11配方還可以與抗生素結合給藥，其中包括例如氨必西林、磺胺、頭孢菌素、四環素、或者甲硝噠唑。
考慮改變藥物作用的各種因素，例如病人身體狀況、體重、性別、膳食以及病癥的嚴重程度、給藥時間與其它臨床因素后，主治醫生可以決定涉及治療上述癥狀方法中的服藥方式。通常，每日服藥應該在1-30毫克多肽范圍內。
在下述非限定的實施例中對本發明進行深入闡述。
具體實施例方式
實施例1.rhIL對于各種配方賦形劑與抗氧化劑的相容性對于含有表1所列配方賦形劑與抗氧化劑的rhIL-11片劑，進行相容性研究。研究的賦形劑包括填充劑、崩解劑、緩沖劑、助流劑和潤滑劑。采用直接壓縮方式，制備含有上述賦形劑的rhIL-11片劑。收集凍干的rhIL-11，再使用#30篩目的篩子過濾，再轉移到盛有其它所有賦形劑、大小適中的小瓶中。通過旋轉小瓶2-3分鐘混合材料。對于包括硬脂酸鎂的配方(F1、F2、F4-F8)，此時加入硬脂酸鎂后，再持續混合0.5-1分鐘。
每個片劑稱重為150mg，含有2.5mg的rhIL-11(加入由冷凍干燥小瓶中冷凍濃縮物制備成的凍干粉末，該濃縮物含有數量上相當于5mg的rhIL-11以及磷酸鈉和甘氨酸)。在40℃/75％RH條件下靜止放置片劑，在初始、2周與4周時間點采用反相HPLC法，測定其強度與Met58氧化％。通常，研究的所有配方顯示出Met58氧化％的增長。當在40℃/75％RH條件下靜止放置4周時，含有硬脂酸的配方(F3)中rhIL-11的強度降低，由初始的90.4％降低到64.1％。對于此配方，在此過程中Met58氧化％還是從4.4％增加到18.8％。與不含交聚維酮的配方(F1)相比，含有交聚維酮的所有配方(F4，F7和F8)獲得了更高的Met58初始氧化％。在40℃/75％RH條件下經過4周儲存后，在含有交聚維酮的配方中檢測出Met58氧化％又增長10％。
設計第二種研究，用于檢測抗氧化劑的潛在優點。研究評價的抗氧化劑是甲硫氨酸、抗壞血酸和EDTA。研究的片劑配方含有作為濃縮物加入的2.5mg rhIL-11、磷酸鈉、微晶纖維素、和硬脂酸鎂。其它成份匯集在表2。先采用高切力顆粒法，再壓縮制備片劑。在40℃/75％RH條件下靜止放置片劑，在初始、2周與4周時間點測定其Met58氧化％。含有交聚維酮、但不含任何其它抗氧化劑的配方(W1)獲得了最高的Met58氧化％。配方W2、W4和W5含有作為抗氧化劑的甲硫氨酸。在40℃/75％RH條件下靜止放置4周后，這些配方表現出Met58氧化％的3-4％小幅增長。EDTA未表現出可以對氧化作用提供額外保護(W5)。經發現，抗壞血酸不具有與甲硫氨酸(W3)相同的效果。在rhIL-11片劑配方中甲硫氨酸表現為最有效的抗氧化劑。
基于賦形劑的相容性與抗氧化劑的研究結果，選擇出最終的片劑配方。表3顯示了所用的配方。為了防止高切力顆粒的藥物緩慢釋放，采用流化床顆粒法制備此配方的rhIL-11片劑。片劑首先由HPMC層密封，再由含有EudragitL30D、滑石粉、檸檬酸三乙酯的水性懸液腸衣層包裹，最后再次由HPMC層密封。
實施例2在片劑制備過程中rhIL-11膠囊的完整性在片劑加工過程中檢查施加壓力下rhIL-11的完整性。使用不同的壓力，用于評價片劑制備壓力對rhIL-11完整性的效果。這些片劑的重量為150mg，含有2.5mg rhIL-11(凍干粉末)、EXPLOTAB、微晶纖維素、NU-TAB、硅酸鹽和硬脂酸鎂。直接將片劑壓縮成2.4、4.0、7.5或者12.5KP的硬度。通過測定恢復％、多體％、Met58氧化％、相關％，以及通過T-10生物測定法測定rhIL-11的特定活性，可以測定出蛋白的完整性。表4的檢測結果表明，對于壓縮成不同硬度等級的rhIL-11片劑，恢復％、多體％、Met58氧化％、相關％未發生變化。相似的是，不同配方混合物與片劑的特定活性都在說明書表述的范圍內(表5)。這說明，壓力并未造成研究配方中rhIL-11化學或者物理的不穩定性。
實施例3腸溶包衣的rhIL-11片劑的穩定性在40℃/75％RH與室溫條件下，使用HDPE瓶測定采用流化床顆粒法制備的腸溶包衣片劑的穩定性。穩定性實驗包括恢復％、Met58氧化％、相關％的測定。測定結果匯集在表6中。當在室溫與40℃/75％RH條件下儲存時，不同時間點下測定得出，rhIL-11的強度、腸溶包衣片劑的Met58氧化％、相關％未發生改變。
在微溶解裝置中，攪拌速度在50或者100rpm條件下，使用50ml甘氨酸/磷酸鹽溶解介質，進行溶解實驗。先將涂布片劑放置在0.1N HCl中2小時，再放置在甘氨酸/磷酸鹽溶解介質中1小時，然后，檢測涂布片劑對rhIL-11的釋放。溶解結果表明，在0.1N HCl中的兩小時內rhIL-11的釋放量小于1％。這表明，5％的腸溶衣層充分提供了對抗胃消化的保護。當在pH7的甘氨酸/磷酸鹽緩沖溶液介質中進行溶解實驗時，腸溶衣溶解并且rhIL-11得到釋放。如前文對未經涂布片劑所述，在50rpm下藥物未得到完全釋放。
實施例4直接壓縮配方此研究的目的聚焦在開發大約5小時內釋放IL-11的持續釋放片劑配方。按下述步驟制備直接壓縮配方。收集凍干的rhIL-11，再使用#30篩目的篩子過濾，然后，轉移到盛有除硬脂酸鎂外其它所有賦形劑、大小適中的小瓶中。通過旋轉小瓶2-3分鐘混合材料。在此時加入硬脂酸鎂，再持續混合0.5-1分鐘。稱重用量等同于2.5mg rhIL-11的最終混合物，再使用KiKusowi片劑擠壓機壓縮。硬度調節在7-10kp。
在含有甲硫氨酸、甘氨酸、聚山梨醇酯80的pH7.0、37℃的150ml磷酸鹽緩沖液中，使用50RPM的USP攪拌法，實施溶解。在預定時間間隔內取出1ml樣品，再用新鮮介質進行更換。室溫下使用Vydac C4柱(2.1×150mm，窄口徑)，進行分析。流速是0.5ml每分鐘。在214nm處進行檢測。使用梯度系統，0.1體積％TFA作為流動相A，含有0.1體積％TFA的80％乙腈作為流動相B。
表7展示了由直接壓縮制備的片劑配方。視覺測定這些配方的溶解過程，從而使片劑在溶解介質中的物理行為特征化。與配方2和3的片劑相比，配方1片劑表現出更快的侵蝕過程。配方2片劑表現出最慢的侵蝕過程。所有配方的片劑都顯著膨脹。溶解5-6小時后，配方1片劑近乎完全侵蝕。在相同的期間內，侵蝕掉大約2/3的配方2片劑與1/3的配方3片劑。
對于上述檢測結果的一種解釋是由于片劑的HPMC含量造成的。當HPMC水合物形成凝膠時，就可以起到屏障作用，控制基質的溶解與侵蝕。當HPMC含量增高時，凝膠結構會變得更加堅固與緊密。這樣就增加了片劑表面凝膠層的粘度與厚度。因此，基質片劑的溶解速度放慢。這些實驗結果說明，從配方1和2的釋放藥物是最佳選擇。
實施例5濕顆粒配方采用高切力法或者流化床法，制備濕顆粒配方。除了持續釋放的聚合物與硬脂酸鎂外，可以在其它賦形劑中加入rhIL-11溶液。顆粒經干燥后，使用#30篩目的篩子過濾，再與聚合物與硬脂酸鎂混合。稱重用量等同于2.5mg rhIL-11的最終混合物，再使用KiKusowi片劑擠壓機壓縮。將硬度調節在7-10kp。
在含有甲硫氨酸、甘氨酸、聚山梨醇酯80的pH7.0、37℃的150ml磷酸鹽緩沖液中，使用50RPM的USP攪拌法，實施溶解。在預定的時間間隔內取出1ml樣品，再更換新鮮介質。室溫下使用Vydac C4柱(2.1×150mm，窄口徑)，進行分析。流速是0.5ml每分鐘。在214nm處進行檢測。使用梯度系統，0.1體積％TFA作為流動相A，含有0.1體積％TFA的80％乙腈作為流動相B。
參見圖8，使用由高切力技術獲得的顆粒，制備持續釋放配方。將部分藥溶液加入除了聚合物與硬脂酸鎂外的所有其它賦形劑的混合物中。接著，對濕混合物進行干燥。重復3次上述循環，從而獲得目標藥物的加載量。然后，將聚合物加入混合物中，接著加入硬脂酸鎂。經發現，由此配方制成片劑在溶解介質中的物理行為與含有相似HPMC含量的直接壓縮配方表現出的物理行為相似。對由高切力顆粒制備的直接釋放片劑的研究表明，獲得rhIL-11的完全釋放是很困難的。對由流化床顆粒制備的片劑研究表明，在檢測制備并釋放rhIL-11的所有技術中，此方法最適用于rhIL-11顆粒。
表9展示了由流化床顆粒制備的3種持續釋放片劑組合物。流化床顆粒含有rhIL-11混合物、微晶纖維素PH102、一元磷酸鈉、二元磷酸鈉、甲硫氨酸、聚山梨醇酯80。在這些研究中，由于發現蔗糖是造成儲存過程中直接釋放片劑脫色的原因，因此在直接壓縮與高切力顆粒配方中使用甲硫氨醇替代蔗糖。
實施例6緩沖液濃度對rhIL-11溶解的影響研究緩沖液濃度50mM和100mM對rhIL-11溶解的影響。保持在溶解介質中甘氨酸、甲硫氨酸、聚山梨醇酯80的濃度不變。在兩種介質中進行配方6-8(表9)片劑的溶解實驗。在100mM介質中，溶解速度明顯更快，并近乎完全溶解。另一方面，在50mM介質中，5小時后從片劑釋放了僅15％的rhIL-11。
為了理解上述檢測結果，繼續觀察兩種介質中溶解片劑出現的變化。在100mM介質中片劑表現出顯著的膨脹與快速的侵蝕。片劑大約在溶解5小時后消失。另一方面，在50mM介質中片劑膨脹，但是經過5小時溶解后表現出極小程度的侵蝕。這應該歸因于HPMC凝膠結構強度敏感于離子濃度的事實。在溶解介質中磷酸鹽緩沖液濃度的增加，造成了離子濃度的增長，從而降低了HPMC凝膠結構的強度與緊密度。
實施例7聚合物及其粘度等級的影響在100mM磷酸鹽介質中配方6表現出快速的初始溶解速率。配方6含有作為緩釋聚合物的甲基纖維素K4M PREM。為了降低初始溶解速率，在配方中加入更高粘度等級的HPMC(甲基纖維素K15 M PREM)。配方7和8的片劑表現出改進的溶解行為。與配方7相比，由配方8表現出更高的溶解速率歸因于配方7片劑不含的顆粒外微晶體纖維素(微晶纖維素PH102)的崩解特性。
單獨使用PEO或者與HPMC結合使用，制備基質片劑配方。對于這些配方中某些配方侵蝕與溶解的測定，優選采用目視測定。由于PEO的大分子量，采用HPLC分析這些配方的溶解樣品是很困難的。
制備并測定在50mM磷酸鹽介質中表現出最佳釋放rhIL-11效果的樣品配方。制備并測定各種配方。對這些配方侵蝕與溶解的監測說明，使用20-30％甲基纖維素K100 LV，LH，CR Premium作為持續釋放的聚合物，從而獲得具有可接受溶解行為的配方。表10展示了這些配方的組合物。
測定配方9和10中rhIL-11的溶解。2小時后rhIL-11的溶解速度明顯放慢。有時溶解2小時后觀測到藥物濃度降低。不完全釋放應當歸因于某些配方賦形劑對rhIL-11的吸收。在對立即釋放的片劑與珠劑的觀察中也出現上述現象。
為了改善rhIL-11的釋放，更換配方中的緩沖液以及溶解介質，由磷酸納換成磷酸銨。當從配方12中去除顆粒外磷酸鈉時，使用磷酸銨制備配方11。在使用磷酸銨制備的介質中，進行配方11和12的溶解實驗。觀測到的溶解結果表明，經過5小時溶解在保持了可接受溶解效果的情況下，藥物的釋放量增加。
實施例8rhIL-11緩釋多層顆粒小球的制備工藝采用包括下述步驟的工藝，制備rhIL-11腸溶包衣小球溶解并稀釋rhIL-11藥物；向小球施加rhIL-11層；施加密封層；施加腸溶衣層；施加最后的密封層；施用滑石粉。多層顆粒小球的成份匯集在表11中。
室溫下將rhIL-11與稀釋緩沖液(4mM一元磷酸鈉，6mM二元磷酸鈉，0.3M甘氨酸，pH7.0)混合，獲得10mg/ml的最終濃度。稀釋的rhIL-11與羥丙甲基纖維素(10％溶液)、甲硫氨酸、聚山梨醇酯80、純凈水混合，生成藥物層溶液。
在流化床涂布機中，保持進口溫度47-53℃，排出氣體溫度在30-45℃，供應的氣體流速在350-550CFM，噴灑速率在35-85克/分鐘，霧化氣體在30-40PSI的條件下，將藥物層溶液(大約40,600克)施加到大約20,000克的糖球上。
將密封層溶液(大約2900克)施加到藥物層包裹的小球上。密封層溶液是由純凈水中7.5重量％的羥丙甲基纖維素溶液構成。與施加藥物涂層時相同，使用流化床涂布機，保持進口溫度47-53℃，排出氣體溫度在30-55℃，供應的氣體流量在400-500CFM，噴灑速率在25-45克/分鐘，霧化氣體在30-40PSI。此密封層的功能是在rhIL-11蛋白核與酸性腸溶包衣環境之間提供惰性屏障。
然后，向密封的藥物涂層小球施加腸溶衣層溶液(大約30,900g)。使用流化床涂布機，保持進口溫度32-38℃，排出氣體溫度在25-40℃，供應的氣體流量在550-700CFM，噴灑速率在45-85克/分鐘，霧化氣體在25-35PSI。腸溶衣層的功能是提供抵抗胃酸性pH的屏障。
向腸溶包衣的小球施加第二密封涂層(大約3880g)。密封層溶液是由純凈水中7.5重量％的羥丙甲基纖維素溶液構成。與前述相同，使用流化床涂布機，保持進口溫度32-38℃，排出氣體溫度在25-40℃，供應的氣體流量在550-700CFM，噴灑速率在25-45克/分鐘，霧化氣體在25-35PSI。此最后密封層的功能是消除由腸溶衣層造成的顆粒與顆粒之間的潛在粘合力。此密封層可溶于酸，并且在溶解實驗第一步驟中被去除。在施加最后密封層后，進行工藝過程中的強度實驗，從而確定膠囊的目標填充重量。
在完成施加最后密封涂層的步驟后，向流化床涂布機加入滑石粉。將密封的rhIL-11腸溶包衣小球與滑石粉混合30-60秒，用以消除靜電。接著，從流化床涂布機卸下滑石粉處理的小球，放入帶有2個干燥劑袋的雙聚乙烯襯的容器中，其中一個干燥劑袋放在兩個聚乙烯袋之間，一個放在聚乙烯袋外面。然后，將小球裝入膠囊中。
實施例9腸溶包衣多層顆粒的rhIL-11小球的穩定性在2-8℃長期儲存0-6個月的條件下，測定腸溶包衣多層顆粒小球(采用流化床顆粒法制成)的穩定性。穩定性實驗包括測定強度、恢復％、Met58氧化％、相關％。表X顯示，當在2-8℃下儲存0-6個月，不同時間點上rhIL-11的強度、腸溶包衣片劑的Met58氧化％、相關％未發生變化。
在25℃/60％RH加速儲存條件下儲存0-6個月，測定腸溶包衣多層顆粒小球(采用流化床顆粒法制成)的穩定性。測得的數據匯集在表13中。
實施例10rhIL-11對HLA-B27鼠慢性腹瀉的治療效果從Taconic Farms(Germantown，NY)購得雄性轉基因HLA-B27鼠，在控制條件下(21℃；50±10％濕度；12小時光明/黑暗循環)單獨飼養。獲得10周大的HLA-B27鼠，飼養在動物設施中直到其40周大(350±40g，n＝12)。在40周大時，轉基因鼠患有表現為慢性腹瀉的腸炎。使用年齡匹配的非轉基因Fisher 344鼠作為對照(370±20g，n＝6)，此鼠是從Charles RiverLaboratories Inc(Wilmington，MA)購得，經遺傳設計載有許多高度復制的人類主要組織相容性復合體類1等位基因B27和β2-微球蛋白基因。Fisher 344鼠表現健康，大便稠度正常。在rhIL-11給藥以前，在所有的HLA-B27鼠中都觀察到未形成小球的稀便和腹瀉。
rhIL-11多層顆粒每100mg含有大約1mg的rhIL-11，然而蔗糖多層顆粒作為安慰劑使用。在兩周治療期間內每隔一天將相當于500μg rhIL-11/kg、單一劑量的腸溶包衣rhIL-11多層顆粒口服給藥，產生積累效果后觀察腹瀉癥狀。3組動物涉及此次研究包括HLA-B27鼠(n＝6)的一個實驗組接受rhIL-11治療；由HLA-B27鼠(n＝6)的賦形劑對照組接受安慰劑的治療；由年齡匹配F344鼠(n＝6)組成的健康對照鼠接受安慰劑的治療。在口服給藥rhIL-11的2周內對動物們每天稱重，rhIL-11或者安慰劑都未曾引導體重的顯著變化。
所有HLA-B27鼠都表現出結腸炎的臨床癥狀。每天觀察其大便特征，并以正常、柔軟或者腹瀉為特征。在將rhIL-11或者安慰劑給藥治療HLA-B27鼠以前或者過程中，記錄的結果是正常為0，柔軟并形成小球為1，柔軟并未形成小球為2，腹瀉為3。計算每天記錄的平均值，從而使大便稠度特征化。
口服給藥rhIL-11顯著抑制了腹瀉的癥狀，即治療的前9天后，大便特征向正常、柔軟但是正常形成小球轉變。對于接受安慰劑治療的HLA-B27鼠，觀察到大便特征沒有變化。相同的是，安慰劑治療未曾對健康的F344鼠的正常大便特征產生影響。
實施例11rhIL-11對HLA-B27鼠腸炎的治療效果如上文實施例10所述，向實驗鼠口服給藥rhIL-11。然后，檢測實驗鼠的腸炎癥狀。在最后一次給藥rhIL-11和安慰劑的4小時后，對所有實驗鼠實施安樂死，并立即摘取其空腸與結腸。
經認定，由中性白細胞特定表達的綠過氧物酶(MPO)是炎性細胞侵入的標記。將腸組織提取物MPO活性作為炎癥的指標。從摘取組織中提取全厚的空腸與結腸樣品(100-150mg)用于收縮實驗，并立即冷凍在液氮中。樣品儲存在-80℃條件下，然后對全套實驗樣品同時分析其MPO活性。在溴化六十二烷基三甲基銨磷酸鹽緩沖液(pH6)中進行均漿化處理，然后從組織均漿中提取MPO。使用3，3’，5，5’-四甲基聯苯胺微孔過氧化物酶基質系統(Sigma Chemical Co，St.Louis，MO)和辣根過氧化物酶作為有關標準，測定10μl樣品的MPO活性。按照有關標準的活性(毫微克辣根過氧化物酶)表達MPO活性，即在室溫下10分鐘內轉換相同用量的3，3’，5，5’-四甲基聯苯胺基質。數據以毫微克為單位表達，并標準化為每克濕重組織。
與用安慰劑治療的非轉基因Fisher 344鼠相比，用安慰劑治療的HLA-B27鼠的小腸MPO活性增長了2.3倍，其結腸MPO活性增長了3.8倍。采用rhIL-11治療的HLA-B27鼠在空腸與結腸中MPO活性顯著降低。在用rhIL-11治療兩周后，MPO活性降低到與非轉基因Fisher 344鼠相似的水平。相反的是，使用安慰劑治療的相同周期內，HLA-B27鼠空腸與結腸的MPO活性沒有表現出顯著的下降。
實施例12rhIL-11治療對HLA-B27鼠腸炎組織測定的影響在口服給藥rhIL-11和安慰劑后，從HLA-B27鼠采集空腸與結腸樣品。將樣品浸泡在10％中性-緩沖型福爾馬林中，處理，再嵌入石蠟中，獲得5μm厚的切片。用蘇木精與曙紅染色制成載玻片標本的切片，然后用光學顯微鏡觀察，是否有潰瘍、炎癥侵入、透壁損傷、纖維癥的存在。以遮光的方式檢測載玻片，并如下記錄每個參數0-2對應潰瘍與纖維癥；0-3對應炎癥與深度損傷。沒有病狀記錄為0。根據Boughton-Smith等人(1998)所述的方法計算總成績，作為單個參數的總成績(最大值為10)。
大便特性的改善(參見上文實施例10)與結腸粘膜的痊愈有關。每隔一日使用腸溶包衣rhIL-11的治療造成了HLA-B27轉基因鼠組織損傷的減少。從接受rhIL-11治療的實驗鼠結腸提取的切片可以看出，組織損傷成績顯著降低。
實施例13rhIL-11對基部收縮活性的實際影響采集空腸片段(大約5cm末梢到Treitz韌帶)與結腸片段(大約4cm末梢到回盲腸結合處)，然后放入冰凍的氧化克雷布斯溶液中。通過輕柔地沿著縱向方向剝離肌肉，可以從小腸片段分割出縱向的肌肉條。在解剖顯微鏡的幫助下，沿著肌肉方向切下肌肉條(10-12mm長)，肌肉條兩端用絲制外科縫線(型號3-0)固定。肌肉條垂直放入10ml器官水浴，一端固定，另一端栓在等距力傳感器上(Radnoti Glass Technology Inc，Monrovia，CA)。水浴充滿了克雷布斯溶液，并保持在37℃，用95％氧氣與5％二氧化碳曝氣。每隔30分鐘通過灌注改換溶液。允許每個平滑肌條在零張力下平衡20分鐘，然后以0.2g為力增量連續加載，直到獲得最佳的靜止張力。經認定，靜止張力隨著負載而增長。允許肌肉條另外平衡20分鐘。在最佳張力條件下實施所有實驗，使用Maclab數據獲得系統(AD Instruments Ltd，CastleHill，Australia)，記錄等距收縮。
對于F344對照鼠空腸縱向肌肉，在最佳張力下記錄的基部活性是以低靜止張力(3.1±0.8nM/mm2)和在18±5循環/分鐘頻率下表現出自發的低振幅收縮為特征的。在從安慰劑治療的F344鼠、安慰劑治療的HLA-B27鼠、或者rhIL-11治療的HLA-B27鼠肌肉記錄的基部活性之間，不存在顯著的差別。當將rhIL-11(1-10,000ng/ml)加入水浴溶液時，從Fisher344鼠與HLA-B27鼠提取的空腸肌肉中，沒有發現基部活性的顯著變化。相應地，當將rhIL-11(1-10,000ng/ml)加入水浴溶液時，由碳酰膽堿(0.1μM)引發的收縮沒有變化。
無論是否存在自發收縮，由安慰劑治療的對照F344鼠摘取的結腸縱向肌肉都表現出低靜止張力(2.4±0.3mN/mm2)。對于接受安慰劑或者rhIL-11的F344鼠和HLA-B27鼠的肌肉，靜止張力與自發收縮相似。向水浴溶液加入rhIL-11(1-10,000ng/ml)，未對Fisher344鼠或者HLA-B27鼠結腸的自發收縮或者響應碳酰膽堿(1μM)的收縮表現出敏銳的作用。
實施例14rhIL-11治療對受體-獨立腸肌肉收縮的影響測定rhIL-11治療對受體-獨立腸肌肉收縮的影響。增加水浴溶液中KCl的濃度，可以引發受體-獨立膜的去極化，造成肌肉收縮。引發從Fisher 344鼠和HLA-B27鼠摘取的空腸或者結腸肌肉條的最大收縮，需要濃度為60-80mM KCl。然而，與安慰劑治療的Fisher 344鼠肌肉產生的活性張力相比，安慰劑治療的HLA-B27鼠肌肉產生的活性張力更弱一些。使用rhIL-11對HLA-B27鼠的治療，增強了由高濃度KCl誘導的空腸與結腸肌肉的最大收縮。此外，從安慰劑治療的Fisher344鼠摘取的肌肉對高濃度KCl的響應，與從rhIL-11治療的HLA-B27鼠摘取的肌肉對高濃度KCl的響應相比，兩者之間沒有顯著差別。
實施例15rhIL-11治療對膽堿功能腸肌肉收縮的影響測定rhIL-11治療對膽堿功能腸肌肉收縮的影響。獲得了在碳酰膽堿條件下空腸與結腸縱向肌肉的完全劑量響應曲線。從HLA-B27空腸獲取的縱向肌肉表現出異常的收縮響應。將從安慰劑治療的HLA-B27鼠獲取的肌肉與安慰劑治療的Fisher 344鼠肌肉相比，其響應碳酰膽堿濃度增長產生的最大活性張力明顯更弱一些。收縮響應的降低伴隨著劑量響應曲線向碳酰膽堿更低濃度方向轉移。相應地，與由Fisher 344鼠空腸獲得的EC50相比，安慰劑治療的HLA-B27鼠空腸肌肉對應碳酰膽堿的EC50值更小一些。用rhIL-11治療HLA-B27轉基因鼠，造成了碳酰膽堿誘導的空腸肌肉最大張力的顯著增強。除了顯著增強以外，最大響應的幅度仍舊小于安慰劑治療的Fisher 344鼠肌肉的最大收縮。與安慰劑治療的HLA-B27鼠相比，用rhIL-11治療的HLA-B27鼠空腸對應碳酰膽堿的EC50值顯著減少；并與Fisher 344鼠空腸的EC50值相似。
安慰劑治療HLA-B27鼠的結腸肌肉響應碳酰膽堿產生的最大活性張力小于安慰劑治療的Fisher 344鼠結腸肌肉產生的最大活性張力。rhIL-11治療后，與安慰劑治療的HLA-B27鼠相比，rhIL-11治療的HLA-B27鼠結腸肌肉受碳酰膽堿誘導產生的最大張力顯著增加；并且與安慰劑治療的Fisher 344鼠結腸產生的最大張力相似。與空腸相反，從安慰劑治療的F334鼠和HLA-B27鼠、以及rhIL-11治療的HLA-B27鼠結腸肌肉獲得的對應碳酰膽堿濃度效應曲線具有相似的作用線，EC50值之間未表現出顯著的差別。
實施例16rhIL-11治療對神經介導腸肌肉收縮的影響對于空腸的縱向肌肉，EFS(0.5ms脈沖持續時間，5Hz，5s訓練持續時間)誘導出收縮響應。在刺激過程中張力增長到達峰值，刺激訓練結束后又下降到靜止水平。在整個實驗過程中，對EFS響應具有可重現性。在阿托品(1μM)和胍乙腚(10μM)存在的條件下，EFS誘導了低幅度的非腎上腺素非膽堿(NANC)的收縮響應。未觀察到舒張現象。單獨使用胍乙腚不能對EFS誘導的收縮產生影響；因此，對照響應與NANC部分之間的差別代表了EFS誘導收縮的膽堿功能部分(阿托品敏感部分)。測定rhIL-11治療對對照與NANC神經介導收縮的影響。與安慰劑治療的Fisher 344鼠相比，從安慰劑治療的HLA-B27鼠空腸肌肉獲得對于EFS的對照響應具有更小的幅度，然而兩者NANC收縮幅度之間沒有顯著的差別。使用rhIL-11對HLA-B27的口服治療使對照EFS誘導的收縮幅度標準化，并且沒有對NANC響應產生顯著的影響。河豚毒素(1μM)完全廢止了對照與NANC對EFS的響應，說明這些響應是由腸神經元的活化造成的。
對于結腸肌肉，EFS誘導了收縮響應，其受到阿托品與胍乙錠部分抑制，說明此收縮響應是NANC收縮。與空腸相似的是，結腸肌肉保持了相對低水平的靜止張力，并且沒有觀察到任何舒張響應。與安慰劑治療的F344鼠相比，從安慰劑治療的HLA-B27鼠獲得的肌肉對于EFS的對照響應降低。與空腸形成對比，NANC收縮的幅度也顯著降低。使用rhIL-11對HLA-B27鼠的治療明顯增加了對照EFS誘導收縮的幅度，并且使NANC響應正常化。不管上述恢復，與安慰劑治療的F344鼠相比，經治療的HLA-B27鼠仍保持更低的幅度。由EFS誘導的對照與NANC收縮都可以被河豚毒素(1μM)廢止。
其它
具體實施例方式
其它具體實施方式
記錄在權利要求書中。
表1.賦形劑相容性的研究中使用的配方

表2.研究選擇抗氧化劑的配方

表3.流化床顆粒制備的裝載rhIL-11的片劑配方成份 毫克/片劑顆粒內rhIL-11(相當于2.5毫克的濃縮物)5.561微晶纖維素PH112 92.50無水Na2HPO48.5無水NaH2PO46.5甲硫氨酸 1.00聚山梨醇酯80 0.339顆粒外微晶纖維素PH112 73.5無水Na2HPO44.25無水NaH2PO43.25Explotab 4.00硬酯酸鎂 0.60總計 200涂層Eudragit L 30D5％
表4.物理壓力對rhIL-11完整性的影響

a由RP-HPLC測定；b由分子排阻色譜法測定。
表5.T-10生物測定法測定的體外生物活性(rhIL-11直接壓縮片劑)

Sp Act特定活性；IC Sp Act固有對照特定活性表6.rhIL-11腸溶包衣片劑(由流化床顆粒法制成)的穩定性

表7直接壓縮制備的緩釋片劑配方

*每個片劑含有2.5毫克rhIL-11。
表8由高切力濕顆粒法制備的緩釋片劑配方的組合物

*每個片劑含有作為本體溶液加入的2.5毫克rhIL-11。
表9.使用高等級粘度HPMC采用流化床顆粒法制備的緩釋片劑配方組合物

*由流化床顆粒制備，等同于每片劑2.5mg rhIL-11。
表10.使用低粘度等級的HPMC和多種磷酸鹽緩沖液、采用流化床顆粒法制備的緩釋片劑配方組合物

*采用流化床顆粒法制成，相當于2.5毫克rhIl-11。
表11.rhIL-11緩釋多層顆粒膠囊的組合物

添加超量10％的rhIL-11，用于補償制備過程中的損失。
表12.rhIL-11緩釋膠囊，5毫克/膠囊在2-8℃下長期儲存0-18個月

表13.rhIL-11緩釋膠囊，5毫克/膠囊在25℃下長期儲存0-18個月

權利要求
1.一種含有具有治療效果、緩釋口服藥劑形式生物活性多肽的藥用組合物，其中所述組合物含有生物活性多肽，其中所述的多肽具有下述的一種或者多種特性不含有N-連接糖基化位點、含有不多于一個半胱氨酸、具有堿性的pI值；至少一種粘合劑；至少一種增塑劑；至少一種助流劑；甲基丙烯酸共聚物。
2.權利要求1的組合物，其中所述多肽具有下述的兩種或者多種特性不含有N-連接糖基化位點、含有不多于一個半胱氨酸、具有堿性的pI值。
3.權利要求1的組合物，其中所述多肽不含有N-連接糖基化位點、含有不多于一個半胱氨酸、具有堿性的pI值。
4.權利要求1的組合物，其中所述多肽不含有半胱氨酸。
5.一種含有具有治療效果、緩釋口服藥劑形式白介素-11(“IL-11”)多肽的藥用組合物，其中所述組合物含有白介素-11多肽；至少一種粘合劑；至少一種增塑劑；至少一種助流劑；甲基丙烯酸共聚物。
6.權利要求5的藥用組合物，還含有碳水化合物。
7.權利要求6的藥用組合物，其中所述碳水化合物包括蔗糖。
8.權利要求6的藥用組合物，其中所述碳水化合物占所述藥用組合物的60-75重量％。
9.權利要求9的藥用組合物，還含有甘氨酸。
10.權利要求9的藥用組合物，其中所述甘氨酸占所述藥用組合物的1-4重量％。
11.權利要求9的藥用組合物，還含有甲硫氨酸。
12.權利要求11的藥用組合物，其中甲硫氨酸占所述組合物的0.1-0.5重量％。
13.權利要求1的藥用組合物，其中所述甲基丙烯酸共聚物是PH決定的陰離子共聚物，并且在PH大于5.5條件下溶解。
14.權利要求13的藥用組合物，其中所述甲基丙烯酸共聚物以懸液方式使用。
15.權利要求13的藥用組合物，其中所述甲基丙烯酸共聚物占藥用組合物的10-20重量％。
16.權利要求9的藥用組合物，其中所述IL-11多肽具有人類IL-11多肽的氨基酸序列。
17.權利要求9的藥用組合物，其中所述IL-11多肽是重組制成的IL-11多肽。
18.權利要求16的藥用組合物，其中所述IL-11多肽是重組制成的IL-11多肽。
19.權利要求5的藥用組合物，其中所述至少一種粘合劑是羥丙基甲基纖維素(HPMC)。
20.權利要求5的藥用組合物，其中HPMC濃度占組合物的3-7％。
21.權利要求5的藥用組合物，其中所述至少一種助流劑是滑石粉。
22.權利要求21的藥用組合物，其中滑石粉濃度占所述組合物的5-10％。
23.權利要求5的藥用組合物，其中所述至少一種增塑劑是檸檬酸三乙酯或者聚山梨醇酯-80。
24.權利要求23的藥用組合物，其中所述檸檬酸三乙酯占藥用組合物的1-2重量％。
25.權利要求23的藥用組合物，其中所述聚山梨醇酯-80占藥用組合物的0.015-0.045重量％。
26.權利要求5的藥用組合物，其中所述至少一種增塑劑是檸檬酸三乙酯。
27.一種含有具有治療效果、緩釋口服藥劑形式生物活性多肽的藥用組合物，其中所述的生物活性多肽具有下述的一種或者多種特性不含有N-連接糖基化位點、含有不多于一個半胱氨酸、具有堿性的pI值，并且所述活性多肽由第一密封層、腸溶衣層、第二密封層充分包裹，其中腸溶衣層充分地排布在第一與第二密封層之間。
28.一種含有具有治療效果、緩釋口服藥劑形式白介素-11(“IL-11”)多肽的藥用組合物，其中所述IL-11多肽由第一密封層、腸溶衣層、第二密封層充分包裹，其中腸溶衣層充分地排布在第一與第二密封層之間。
29.權利要求28的藥用組合物，其中在第一與第二密封層中至少一個密封層是HPMC。
30.權利要求28的藥用組合物，其中第一與第二密封層含有HPMC。
31.權利要求28的藥用組合物，其中所述的腸溶衣層含有甲基丙烯酸共聚物。
32.權利要求28的藥用組合物，其中所述的IL-11多肽包裹在碳水化合物上。
33.權利要求32的藥用組合物，其中所述的碳水化合物是蔗糖。
34.權利要求28的藥用組合物，還含有甲硫氨酸。
35.權利要求28的藥用組合物，還含有甘氨酸。
36.權利要求28的藥用組合物，還含有助流劑。
37.權利要求36的藥用組合物，其中所述的助流劑是滑石粉。
38.權利要求28的藥用組合物，其中所述的組合物以膠囊或者片劑形式使用。
39.權利要求38的藥用組合物，其中所述組合物以片劑形式使用。
40.權利要求28的藥用組合物，其中所述的組合物以膠囊形式使用。
41.權利要求40的藥用組合物，其中所述的膠囊是凝膠膠囊。
42.一種將生物活性多肽給藥受試體的方法，該方法包括將用量上足以引發受試體生理反應的權利要求1藥用組合物口服給藥于受試體。
43.一種將白介素-11(“IL-11”)多肽給藥受試體的方法，該方法包括將用量上足以引發受試體生理反應的權利要求5藥用組合物口服給藥于受試體。
44.權利要求43的方法，其中所述的IL-11多肽引發了受試體小腸的生理反應。
45.權利要求43的方法，其中所述受試體是人類。
46.權利要求43的方法，其中所述IL-11多肽作為組合物的成份用藥，該組合物含有至少一種粘合劑；至少一種增塑劑；至少一種助流劑；甲基丙烯酸共聚物。
47.權利要求43的方法，其中所述白介素-11(IL-11)多肽是重組的人類IL-11。
48.一種治療受試體炎性腸疾病的方法，該方法包括將有效劑量的IL-11口服給藥于受試體。
49.權利要求48的方法，其中所述的炎性疾病是潰瘍性結腸炎。
50.權利要求48的方法，其中所述的炎性疾病是節段性回腸炎。
51.權利要求48的方法，其中所述受試體是人類。
52.權利要求48的方法，其中所述IL-11多肽作為組合物成份用藥，該組合物含有至少一種粘合劑；至少一種增塑劑；至少一種助流劑；甲基丙烯酸共聚物。
全文摘要
適合口服給藥、含有多肽的組合物，其中包括治療性多肽，例如白介素－11。
文檔編號A61K9/22GK1688293SQ03823669
公開日2005年10月26日 申請日期2003年9月16日 優先權日2002年9月16日
發明者尼古拉斯·W·沃內, 麗貝卡·科瓦爾, 阿溫德·S·納吉, 拉瑪奧·S·查特拉帕利, 埃里克·J·本杰明 申請人:韋思公司