專利名稱：一種靶向抗癌轉移化學藥物padm及制備方法和用途的制作方法
技術領域：
本發明屬于化學藥物領域，本發明涉及一種靶向Cath印sin B (Cat B)抗癌轉移的化合物PADM(Ac-Phe-Lys-PABC-ADM · HCl)，同時涉及該靶向治療藥物的制備方法，還涉及其在治療胃癌腹膜轉移癌中的應用，PADM在胃癌腹膜轉移癌裸鼠模型中能高效抑制腹膜轉移癌形成，并顯著降低毒副作用，具有開發成治療胃癌腹膜轉移癌及其它高表達Cat B惡性腫瘤藥物的應用價值。
背景技術：
胃癌是最常見的全球性惡性腫瘤，尤其是發展中國家，在男性腫瘤患者中胃癌發生率和死亡率分列第二和第三，女性患者中發生和死亡率均列第四。在我國，胃癌死亡率位列各大腫瘤第三位。胃癌綜合防治與人民群眾的生命健康息息相關。早期胃癌可以通過根治性手術治療得要很好的治療。但在我國，由于缺少必要的早期篩查計劃，且公眾自我預防意識不足，約80%的胃癌患者在確診或手術探查時已經發生重要臟器，尤其是腹腔內種植轉移。傳統胃癌治療方法包括手術治療、局部放療、輔助化療等，這些方案在一定程度上能夠延長患者生存期。但國際合作研究，包括INT-0116試驗、 MAGIC試驗以及ACTS-GC試驗均表明，單純手術治療或手術聯合術前或術后放化療，不能夠控制腹腔內復發轉移。MAGIC試驗表明含有蒽環類抗癌藥物如阿霉素(AdriamycimADM)的化療方案對胃癌有效。阿霉素作為一種重要的傳統化療藥物，毒副作用嚴重，主要包括心臟毒性、骨髓抑制、肝臟毒性等，臨床應用嚴重受限。國內外大量研究表明組織蛋白酶B(Cath印sin B，Cat B)與胃癌等惡性實體瘤侵襲轉移密切相關。Cat B具有以下主要特性，即主要分布于惡性腫瘤細胞胞漿及包膜表面，在腫瘤侵襲前鋒部位含量最高，而正常組織細胞表達水平極低或不表達，同時Cat B能夠特異酶解特定修飾肽段Wre-Lys。本發明即基于Cat B的特性，在ADM分子上合成添加一段Cat B特異酶解修飾基，形成新藥 PADM(Ac-Phe-Lys-PABC-ADM 'HCl)。PADM本身不具細胞殺傷能力，在外周血中穩定，對正常或不表達Cat B細胞無(低)毒副作用；而在腫瘤組織尤其在腫瘤侵襲前鋒部位，大量高活性Cat B特異酶解修飾肽段釋放大量ADM分子；ADM被腫瘤細胞攝取，從而實現靶向殺傷腫瘤細胞的目的。通過化學合成修飾ADM分子形成PADM，其具有靶向作用于Cat B,發揮抗癌及癌轉移作用，有望改善胃癌患者生存質量，控制復發轉移，延長患者生存期。

發明內容
本發明的目的是在于提供了一種靶向作用于Cat B的抗癌轉移化學藥 PADM(Ac-Phe-Lys-PABC-ADM 'HCl)。PADM易于合成，在血液中穩定存在，在腫瘤組織中能夠發揮高效殺傷腫瘤細胞并抗癌轉移，同時顯著降低毒副作用。PADM對高表達Cat B惡性腫瘤組織具有靶向殺傷作用，具備阿霉素高效抗癌功能，避免了阿霉素嚴重心臟毒性。
本發明的另一個目的是在于提供了一種靶向抗癌轉移化學藥物PADM的制備方法。該方法操作方便易行，條件穩定，易于生產和制備高純度PADM。操作方便，經濟適用，具有很好的靶向抗癌能力。本發明的再一個目的是在于提供了一種靶向抗癌轉移化學藥物PADM在胃癌腹膜轉移癌治療中的用途，PADM在胃癌腹膜轉移癌裸鼠模型中能高效抑制腹膜轉移癌形成，與傳統阿霉素相比，顯著降低毒副作用。為了實現上述的目的，本發明采用以下技術措施一種靶向抗癌轉移化學藥物PADM，其具體分子式為C52H59N5O16. HC1，其具體結構為 Ac-Phe-Lys-PABC-ADM · HCl，經過純化分析得到高純度PADM鹽酸鹽。結構為
權利要求
1. 一種靶向抗癌轉移化學藥物PADM，其分子式為C52H59N5016.HC1，結構為
2.根據權利要求1所述的一種靶向抗癌轉移化學藥物PADM，其特征在于，所述的結構式為Ac-Wie-Lys-PABC。
3.權利要求1所述的一種靶向抗癌轉移化學藥物PADM的制備方法。其步驟是(1) Fmoc-Lys芴甲氧羰基-賴氨酸在500ml三頸反應瓶中加入Fmoc-Lys鹽酸鹽、無水二氯甲烷、二異丙基乙胺和三甲基氯硅烷，將此混合物加熱至80°C回流并保持1小時，然后將混合物冷卻至4°C，爾后加入二異丙基乙胺31ml，3. Ieq和4_甲氧基三苯甲基氯18. 29g, 1. 05eq，將反應混合物在25°C下攪拌15小時，溶劑蒸發后，將殘留物用pH = 5緩沖溶液、7』C 和鹽水洗滌3次，然后用硫酸納干燥、過濾，蒸發后得到淺黃色粉末狀產品；O) Lys賴氨酸在250ml圓底三頸反應瓶內加入第一步的中間體Fmoc-Lys (MMT)、二氯甲烷和乙腈，然后再加入二乙胺，反應混合物在25°C下攪拌2小時，蒸餾除去溶劑，殘留物用熱乙腈洗滌，然后加入特丁基甲醚處理，固體產物用二氯甲烷和甲醇溶解1 1得到一混合溶液；(3)Ac-Phe-Lys乙酰基-苯丙胺酰基-賴氨酸在一個250ml的三頸圓底燒瓶內加入水和1，2- 二甲氧基乙烷，于氮氣保護下加入上一步反應產物Lys和氫氧化鋰，然后在攪拌中加入Ac-Phe-OSu溶液70ml 1，2- 二甲氧基乙烷，反應混合物攪拌4小時成為一均相溶液，反應進行到18小時后，蒸發至干，殘留物用乙酸乙酯提取，用pH = 4緩沖溶液洗滌，再用水和鹽水洗滌，干燥濃縮后產生淺黃色固體產物；(4)Ac-Phe-Lys-PABOH乙酰基-苯丙胺酰基-賴氨基-對氨基苯甲醇在一個250ml三頸圓底燒瓶中加入Ac-Phe-Lys、二氯甲烷和特丁基二碳酸酯，于氮氣保護下再加入吡啶，反應混合物在25°C下攪拌15分鐘后，加入對氨基苯甲醇，反應混合物在25°C下攪拌18小時后，蒸發溶劑至干，殘留物在高真空下干燥后，用特丁基甲醚處理，固體產物用特丁基甲醚連續洗滌5次；(5)Ac-Phe-Lys-PAB-PNP乙酰基-苯丙胺酰基-賴氨基-對氨基苯甲氧基-對硝基苯碳酸酯在氮氣保護下，往一個250ml三頸圓底燒瓶中加入Ac-Phe-Lys-PABOH、二對硝基苯碳酸酯和新鮮分子篩，爾后在25°C下再加入二氯甲烷和二異丙基乙胺，反應混合物在25°C 下攪拌18小時，爾后過濾除去固體雜質，濾液蒸干后于高真空下干燥6小時，粗產品經重結晶進一步純化，固體產物經過濾，洗滌；(6)Ac-Phe-Lys-PABC-ADM乙酰基-苯丙胺酰基-賴氨基-對氨基芐氧羰基-阿霉素 在氮氣保護下，往一個250ml三頸圓底燒瓶內加入Ac-Phe-Lys (MMT)-PABC-PNP、阿霉素鹽酸鹽、二甲基甲酰胺、二異丙基乙胺，反應混合物在25°C下攪拌4 后，在加入400ml乙酸乙酯，有機相用水洗滌4次，然后蒸發至干，粗產品經層析柱純化二氯甲烷甲醇為20 1 到15 1，得到桔黃色固體產品；(7)Ac-Phe-Lys-PABC-ADM -HCl乙酰基-苯丙胺酰基-賴氨基-對氨基芐氧羰基-阿霉素鹽酸鹽在氮氣保護下往一個250ml三頸圓底燒瓶中加入1. 89g Ac-Phe-Lys-PABC_ADM、 茴香醚和二氯甲烷，反應混合物在25°C下攪拌中加入二氯醋酸，反應混合物在攪拌2小時后倒入乙酸乙酯中，然后在攪拌2小時，所得桔黃色固體經過濾后再用乙酸乙酯洗滌5次， 固體粗產品溶解在甲醇中，所得溶液經過離子交換樹脂住，所含產品組分離后蒸發至干，殘留物經二氯甲烷處理后經過濾得到最終產品。
4.權利要求1所述的一種靶向抗癌轉移化學藥物PADM在制備治療或預防胃癌腹膜轉移癌藥物中的應用。
全文摘要
本發明公開了一種靶向抗癌轉移化學藥物PADM及制備方法和用途，其具體結構為Ac-Phe-Lys-PABC-ADM·HCl，經過純化分析得到高純度PADM鹽酸鹽。步驟是(1)Fmoc-Lys(MMT)，(2)Lys(MMT)，(3)Ac-Phe-Lys(MMT)，(4)Ac-Phe-Lys(MMT)-PABOH，(5)Ac-Phe-Lys(MMT)-PAB-PNP，(6)Ac-Phe-Lys(MMT)-PABC-ADM，(7)Ac-Phe-Lys-PABC-ADM·HCl，殘留物經二氯甲烷處理后經過濾得到最終產品。一種靶向抗癌轉移化學藥物PADM在制備治療或預防胃癌腹膜轉移癌藥物中的應用。簡單易行，工藝穩定，產率比較高，PADM具有高效抗癌功能。
文檔編號C07K1/18GK102504013SQ20111030092
公開日2012年6月20日 申請日期2011年9月28日 優先權日2011年9月28日
發明者李雁, 洪亞平, 瑞蒙德.費斯通, 邵麗華 申請人:李雁