用于篩選抗癌癥醫藥組合物的多肽分子及其應用的制作方法
【專利摘要】本發明提供至少一種多肽分子，用于檢測樣品中三磷酸腺苷結合盒運輸蛋白抗體的含量，進而篩選出富含三磷酸腺苷結合盒運輸蛋白抗體的樣品，作為毒殺抗藥性癌細胞的抗癌癥醫藥組合物。
【專利說明】用于篩選抗癌癥醫藥組合物的多化分子及其應用 【【技術領域】】
[0001] 本發明涉及一種用于篩選癌癥醫藥組合物的多膚分子及其應用，特別是涉及一 種用于篩選H磯酸腺巧結合盒運輸蛋白抗體（anti-ATP binding-cassette transporter antibody)的多膚分子及其應用。 【【背景技術】】
[0002] 化學治療煙lemotherapy)是中晚期癌癥的主要治療方法。一般而言，癌癥病人在 經過一段時間的化學治療后，雖然大多數的癌細胞都會死亡，但仍有少數未被成功毒殺的 癌細胞會留存在體內，數量約在1〇 8?1〇9之間。該些留存的癌細胞會表達大量的H磯酸 腺巧結合盒運輸蛋白（ATP binding-cassette transporter, W下簡稱ABC運輸蛋白），并將 ABC運輸蛋白運送到細胞膜上，W執行排除細胞內化學治療藥物的工作。亦即，留存的癌細 胞會利用ABC運輸蛋白將癌細胞內的化學治療藥物轉移到細胞外，從而使化學治療藥物不 再能有效攻擊該些留存的癌細胞。此即臨床上所謂的癌細胞抗藥性，亟待找尋化學治療W 外的方法毒殺該些具有抗藥性的癌細胞。
[0003] 文獻 Sarkadi B, Homolya L, Szakdcs G, Vdradi A. Human multidrug resistance ABCB and ABCG transporters:participation in a chemoimmunity defense system. Physiol 民ev. 2006, 86 (4) : 1179-1236中提及與癌細胞抗藥性有關的ABC運輸蛋白，主要包括下列亞 家族（subfamily):
[0004] S鱗酸腺昔結合盒運輸蛋白亞家族 B(ATP-binding cassette protein subfamily B) :例如ABCBl，又稱為多重抗藥性蛋白1 (multi drug resistance proteinl，簡稱MDRl)，亦 稱為P酷蛋白（permeability glycoprotein);又例如ABCB4(又稱為MDR3);另外還有例如 ABCB11，是 Pgp 的同系家族（Sister of Pgp)。
[0005] S鱗酸腺昔結合盒運輸蛋白亞家族 C(ATP-binding cassette protein subfamily C) :例如 ABCCl，又稱為多重抗藥性相關蛋白 1 (multi drug resistance related proteinl， 簡稱MRP]_);又例如ABCC2,又稱為多重抗藥性相關蛋白2 (multi drug resistance related protein2,簡稱 MRP2);可能還包括 ABCC3 -6、ABCC10 - 11。
[0006] S鱗酸腺昔結合盒運輸蛋白亞家族 G(ATP-binding cassette protein subfamily G):例如ABCG2,又稱為雙層恩抗藥性蛋白（mitoxantrone resistance protein,簡稱MXR)， 亦稱為乳癌抗藥性蛋白化reast cancer resistance protein,簡稱BCRP)。
[0007] 美國專利US7785812揭露一種毒殺抗藥性癌細胞的方法，其利用表達在抗藥性 癌細胞表面的大量ABC運輸蛋白進行標靴攻擊。其W人為方式制造ABC運輸蛋白抗體 (anti-ATP binding-cassette transporter antibody)，且利用該 ABC 運輸蛋白抗體攜帶足 W毒殺細胞么藥物，形成一抗體標靴藥物。則，該抗體標靴藥物藉由ABC運輸蛋白抗體而結 合在抗藥性癌細胞上，并W其所攜帶的藥物在抗藥性癌細胞周圍進行毒殺作用。
[000引然而，無論是直接制備ABC運輸蛋白抗體或是先制備ABC運輸蛋白后再用W篩選 ABC運輸蛋白抗體，其中制備ABC運輸蛋白抗體/ABC運輸蛋白的過程都必需考慮其是否能 被折疊成正確構形，制備過程中要考慮的因素既困難又復雜，使成本難w降低。此外，依現 有技術所制備的ABC運輸蛋白抗體，僅能辨識一種ABC運輸蛋白，難W適用于所有種類的抗 藥性癌細胞。再者，現有技術利用藥物對抗藥性癌細胞進行毒殺，長期下來，將對身體及腎 臟造成不小的負擔。 【
【發明內容】
】
[0009] 鑒于現有技術的缺陷，本發明提供一種制備簡單的多膚分子，W取代結構復雜的 ABC運輸蛋白，作為篩選ABC運輸蛋白抗體的主要依據。
[0010] 另外，本發明提供多種多膚分子及其組合，使能篩選出含有多種ABC運輸蛋白抗 體的醫藥組合物，從而能適用于各種不同種類的抗藥性癌細胞。
[0011] 本發明亦提供一種對身體及腎臟負擔較小的癌癥醫藥組合物，W對抗抗藥性癌細 胞。
[0012] 在一個較佳實施例中，本發明提供一種多膚分子，該多膚分子的氨基酸序列如 下：
[0013] 包含 SEQ ID NO ;1 序列、SEQ ID NO ;2 序列、SEQ ID NO ;3 序列、SEQ ID NO ;4 序列、 SEQ ID NO ;5序列、SEQ ID NO ;6序列W及SEQ ID NO ;7序列中之一者或其組合；或
[0014] 包含將（a)的氨基酸序列進行一個或多個氨基酸之取代、刪除或添加后之一衍生 序列；其中，包含該衍生序列之一衍生多膚分子可與至少一種H磯酸腺巧結合盒運輸蛋白 之抗體（anti-ATP binding-cassette transporter antibody)結合。
[0015] 在一個較佳實施例中，該衍生多膚分子與該至少一種H磯酸腺巧結合盒運輸蛋白 之抗體間的結合力，大于磯酸鹽緩沖液（Phosphate Buffered Saline,簡稱PBS ;抑7. 4)與 該至少一種H磯酸腺巧結合盒運輸蛋白之抗體間的結合力。
[0016] 在一個較佳實施例中，該可被結合之至少一種H磯酸腺巧結合盒運輸蛋白之抗體 系一引發癌癥化學治療抗藥性之H磯酸腺巧結合盒運輸蛋白之抗體。
[0017] 本發明亦提供一種多膚分子之用途，其系用于篩選出一癌癥醫藥組合物，其中該 多膚分子之氨基酸序列如下：
[0018] 包含 SEQ ID NO ;1 序列、SEQ ID NO ;2 序列、SEQ ID NO ;3 序列、SEQ ID NO ;4 序列、 SEQ ID NO ;5序列、SEQ ID NO ;6序列、W及SEQ ID NO ;7序列中之一者或其組合；或
[0019] 包含將（a)的氨基酸序列進行一個或多個氨基酸之取代、刪除或添加后之一衍生 序列；其中，包含該衍生序列之一衍生多膚分子可與至少一種H磯酸腺巧結合盒運輸蛋白 之抗體（anti-ATP binding-cassette transporter antibody)結合。
[0020] 在一個較佳實施例中，該被篩選之癌癥醫藥組合物系分離自人體之一血液、一血 漿、或一血清中之至少一者。
[0021] 在一個較佳實施例中，系用于篩選出含有至少一種引發癌癥化學治療抗藥性之H 磯酸腺巧結合盒運輸蛋白之抗體之一癌癥醫藥組合物。
[0022] 在一個較佳實施例中，該被篩選出之該癌癥醫藥組合物，系可引發一免疫 細胞之抗體依賴性細胞介導的細胞毒殺作用（antibody-dependent cell-mediated c}ftotoxicity)者，W攻擊一癌細胞。
[0023] 在一個較佳實施例中，該被篩選之該癌癥醫藥組合物，系可引發一自然殺手細胞 (化化ral killer cells)之抗體依賴性細胞介導的細胞毒殺作用者，W攻擊具有化學治療 藥物抗藥性之一癌細胞。
[0024]本發明另外提供一種分離（或純化）之抗體或人工生產之抗體，可與如下所述之 多膚分子結合：
[00巧]包含 SEQ ID NO ;1 序列、SEQ ID NO ;2 序列、SEQ ID NO ;3 序列、SEQ ID NO ;4 序列、 SEQ ID NO ;5序列、SEQ ID NO ;6序列、W及SEQ ID NO ;7序列中之一者或其組合之多膚分子； 或
[0026] 包含將（a)的氨基酸序列進行一個或多個氨基酸之取代、刪除或添加后所衍生 之一衍生多膚分子，且該衍生多膚分子可與至少一種H磯酸腺巧結合盒運輸蛋白之抗體 (anti-ATP binding-cassette transporter antibody)結合D
[0027] 在一個較佳實施例中，系可引發一免疫細胞之抗體依賴性細胞介導的細胞毒殺作 用者。
[0028] 在一個較佳實施例中，系可引發一自然殺手細胞之抗體依賴性細胞介導的細胞毒 殺作用。
[0029] 本發明更提供一種癌癥藥物或癌癥醫藥組合物，包含至少一種上述之分離之抗體 或人工生產之抗體。
[0030] 在一個較佳實施例中，本發明提供一種檢測方法，系W-多膚分子作為一探 針，檢測一樣品中之H磯酸腺巧結合盒運輸蛋白之抗體（anti-ATP binding-cassette transporter antibody)含量，其中該多膚分子之氨基酸序列如下：
[0031] 包含 SEQ ID NO ;1 序列、SEQ ID NO ;2 序列、SEQ ID NO ;3 序列、SEQ ID NO ;4 序列、 SEQ ID NO ;5序列、SEQ ID NO ;6序列、W及SEQ ID NO ;7序列中之一者或其組合；或
[0032] 包含將界定于（a)之氨基酸序列進行一個或多個氨基酸之取代、刪除或添加后之 一衍生序列；其中，包含該衍生序列之一衍生多膚分子可與至少一種H磯酸腺巧結合盒運 輸蛋白之抗體（anti-ATP binding-cassette transporter antibody)結合。
[0033] 在一個較佳實施例中，系利用酵素免疫吸附法、西方墨點法、生物芯片法、磁珠分 離暨定量方式、W及其它探針檢測方式之至少一者，檢測該樣本中之H磯酸腺巧結合盒運 輸蛋白之抗體含量。
[0034] 在一個較佳實施例中，其至少包括下列步驟：
[00巧]涂覆（coating)該多膚分子至一容器中；
[0036] 去除該容器中之一第一息浮液；
[0037] 置入該樣品之一適當濃度樣本至該容器中；
[0038] 去除該容器中之一第二息浮液；
[0039] 置入一第二抗體；
[0040] 去除該容器中之一第H息浮液；W及
[0041] 檢測該容器中之該第二抗體之含量。
[0042] 在一個較佳實施例中，該容器系96孔盤。
[0043] 在一個較佳實施例中，該樣品系分離自人體之一血液、一血漿或一血清中之至少 一者。 【【專利附圖】

【附圖說明】】
[0044] 圖1 ;系一方塊流程圖，表示出本案檢測ABC運輸蛋白抗體含量之一方法實施例。
[0045] 圖2 ;系一方塊流程圖，表示出利用本案多膚分子純化ABC運輸蛋白抗體之一方法 實施例。 【【具體實施方式】】
[0046] 鑒于現有技術的限制及缺陷，本發明提供至少一種篩選癌癥醫藥組合物之多膚分 子及其應用方法，系W構形簡單的多膚分子篩選富含抗體的醫藥組合物，并透過人體固有 之機制毒殺具有抗藥性之癌細胞。
[0047] 已知自然殺手細胞（化化ral killer cells ;通常被定義為CD3-CD56+亞群的淋己 細胞）在人類免疫系統上扮演對抗癌細胞的重要角色，主要系通過抗體依賴性細胞介導的 細胞毒殺作用（antibody-dependent cell-mediated c}ftotoxicity，簡稱 ADCC)殺死癌細 胞。詳言之，當癌細胞表達ABC運輸蛋白（因而具有抗藥性），而被身體內或外來的ABC運 輸蛋白抗體結合時，自然殺手細胞表面的CD16分子【化濁III ;系抗體固定區（化agment of constant region)之受體，會專一性結合于所有人類抗體之固定區】會辨識并結合至該ABC 運輸蛋白抗體的固定區（例如IgG抗體的固定區），繼而引發自然殺手細胞之抗體依賴性細 胞介導的細胞毒殺作用（ADCC作用），亦即，釋放丙型干擾素（IFN-Y )等細胞因子而毒殺該 抗藥性癌細胞。
[0048] 依發明人多年之經驗及研究結果，認為應能揃取現有技術W ABC運輸蛋白為標祀 之優點，去除需制備構形復雜之抗體/蛋白質W及利用藥物毒殺之兩種缺點，發展出一種 更簡便、對身體負擔較小之毒殺癌細胞方法。亦即，研發一種線性多膚抗原，W篩選含有多 種ABC運輸蛋白抗體之醫藥組合物，并透過人體自然殺手細胞之自然機制攻擊抗藥性癌細 胞，W解決現有技術之各種問題。
[0049] W下提供利用本發明之實施例之詳細說明書，W及本發明之技術及特點。然本實 施例并非用W限定本發明，任何熟悉此技術者，在不脫離本發明之精神和范圍內，當可作各 種之更動與潤飾。
[0050] 實施例一；ABC運輸蛋白線性多膚分子的設計
[0051] 利用生物信息學方法，從各種ABC運輸蛋白（系能引發化學治療抗藥性之該些ABC 運輸蛋白）序列中，找尋與人類白血球抗原化uman leukocyte antigen,簡稱HLA ;即人類 之Major histocompatibility complex,簡稱MHC)有較高親和力的序列位置。W此方法找 出的線性多膚序列較可能剛好位于ABC運輸蛋白表面，而能取代ABC運輸蛋白，專一性地與 ABC運輸蛋白抗體結合。
[005引經過一系列的設計改良及實驗篩選，研發出7種ABC運輸蛋白線性多膚分子（多 膚分子一般由20?50個氨基酸組成，但不W此為限），即SEQ ID NO ;1、SEQ ID NO ;2、SEQ ID NO ;3、沈Q ID NO ;4、沈Q ID NO ;5、沈Q ID NO ;6、W 及沈Q ID NO ;7。此 7 種 ABC 運輸 蛋白線性多膚分子之其中一種或其組合，可與至少一種ABC運輸蛋白之抗體（anti-ATP binding-cassette transporter antibody)結合，而能篩選出癌癥醫藥組合物。尤其，此7 種ABC運輸蛋白線性多膚分子之其中一種或其組合，可與至少一種引發癌癥化學治療抗藥 性之ABC運輸蛋白之抗體結合，W篩選出能對抗抗藥性癌細胞之癌癥醫藥組合物。
[0053] 其中，該些ABC運輸蛋白線性多膚分子與該至少一種ABC運輸蛋白之抗體間的結 合力，大于磯酸鹽緩沖液（Phosphate Buffered Saline,簡稱PBS ;抑7. 4)與該至少一種ABC 運輸蛋白之抗體間的結合力。
[0054] 實施例二；制備ABC運輸蛋白線性多膚分子
[00巧]W化學法合成該些ABC運輸蛋白線性多膚分子，純度須大于95%。可委巧勝膚 合成服務公司合成該些ABC運輸蛋白線性多膚分子。 申請人:系委巧明欣生物科技有限公 司（地址：臺北市南港區園區街3號10樓之1 ;電話；02-26557128 ;網址；//www. missionbio. com. tw/)制備該7種ABC運輸蛋白線性多膚分子。
[0056] 將合成的ABC運輸蛋白線性多膚分子溶于67%的己酸中巧mg線性多膚分子/I血 之67%己酸），于-2(TC之低溫冰箱中保存。
[0057] 實施例H ;篩選癌癥醫藥組合物
[0058] 將上述7種ABC運輸蛋白線性多膚分子之至少一種與樣品（例如分離自人體之 一血液、一血漿、或一血清中之至少一者）混合，檢測樣品中ABC運輸蛋白線性多膚分子暨 ABC運輸蛋白抗體復合物（W下簡稱多膚分子暨抗體復合物）之含量。多膚分子暨抗體 復合物含量較多者，代表原樣品中含有大量引發癌癥化學治療抗藥性之ABC運輸蛋白之抗 體，可作為癌癥醫藥組合物，W引發自然殺手細胞之抗體依賴性細胞介導的細胞毒殺作用 (antibody-cbpendent cell-mediated 巧totoxicity)，殺死表現 ABC 運輸蛋白之抗藥性癌 細胞。
[0059] 其中，可利用酵素免疫吸附法巧nzyme-linked immunosorbent assay,簡稱EILISA) 或其它利用多膚分子為探針之檢測方式（例如西方墨點法、生物芯片法、磁珠分離暨定量 方式），檢測樣品中ABC運輸蛋白抗體之含量，W篩選適合作為癌癥醫藥組合物之樣品，尤 指W篩選含有至少一種引發癌癥化學治療抗藥性之ABC運輸蛋白之抗體的一種癌癥醫藥 組合物。W下W酵素免疫吸附法為例進行詳細說明：
[0060] 請參閱圖1，其系一方塊流程圖，表示出本案檢測ABC運輸蛋白抗體含量之一方法 實施例。本發明一種檢測ABC運輸蛋白抗體含量的較佳實施方法至少包括：
[006。 步驟S1 ;涂覆（coating)多膚分子至一容器中；
[0062] 步驟S2 ;去除該容器中之一第一息浮液；
[0063] 步驟S3 ;置入一樣品之一適當濃度樣本至該容器中；
[0064] 步驟S4 ;去除該容器中的一第二息浮液；
[0065] 步驟S5 ;置入一第二抗體；
[006引步驟S6 ;去除該容器中的一第立息浮液；W及 [0067] 步驟S7 ;檢測該容器中之該第二抗體之含量。
[006引較佳者，步驟S1中之該容器，系96孔盤，但不W此為限。W 96孔盤為例，步驟S1 系在96孔盤的一第一孔及一第二孔中，加入100 y L之ABC運輸蛋白線性多膚分子，并在96 孔盤的一第H孔及一第四孔中，加入100 y L之植物性蛋白多膚分子，4C涂覆（coating) 8 小時（或 overnight)。
[0069] 其中，該ABC運輸蛋白線性多膚分子及該植物性蛋白多膚分子已先W磯酸鹽緩沖 液（Phosphate Buffered Saline,簡稱 PBS ;抑7. 4)稀釋至 5 ?20 y g/mL。且該 ABC 運輸蛋 白線性多膚分子系 SEQ ID NO ;1、SEQ ID NO ;2、SEQ ID NO ;3、SEQ ID NO ;4、SEQ ID NO ;5、SEQ ID NO ;6、W及SEQ ID NO ;7中之至少一者或其組合。
[0070] W涂覆ABC運輸蛋白線性多膚分子之該第一孔為實驗組，涂覆植物性多膚分子之 該第H孔為對照組，涂覆ABC運輸蛋白線性多膚分子之該第二孔為第一空白對照組，涂覆 植物性多膚分子之該第四孔為第二空白對照組。
[0071] 再則，步驟S2系去除該第一孔、第二孔、第H孔、第四孔中之第一息浮液。較佳者， 去除第一息浮液后，再W磯酸鹽緩沖液（PH7. 4)清洗H次。
[0072] 此外，步驟S3中之該樣品系分離自人體之一血漿（或一血液、一血清，但不W此 為限）。該適當濃度樣本系該血漿（或該血液、該血清，但不W此為限）經磯酸鹽緩沖液 (抑7. 4)稀釋100?200倍后所制成。步驟S3中，系于該第一孔及該第H孔中加入100 uL 該適當濃度樣本，該第二孔及該第四孔中則加入100 y L磯酸鹽緩沖液（pH7. 4)，并于適當 溫度下作用一段時間。較佳者，于室溫作用2小時。
[0073] 步驟S4系去除該第一孔、第二孔、第H孔、第四孔中之第二息浮液。較佳者，去除 第二息浮液后，再W磯酸鹽緩沖液（PH7. 4)清洗H次。
[0074] 步驟S5中的該第二抗體系可與人類ABC運輸蛋白抗體專一性結合之抗體，例如兔 抗人免疫球蛋白 G 抗體（Anti-Human 1肖6(化 specific) antibody produced in r油bit)或山 羊抗人免疫球蛋白 G 抗體（Anti-Human 1肖6(化 specific) antibody produced in goat)。步 驟S5中，系加入例如200 uL適當濃度之該第二抗體（例如W磯酸鹽緩沖液（PH7. 4)稀釋 10000倍），并于適當溫度下作用一段時間。較佳者，于室溫作用2小時。
[00巧]步驟S6系去除該第一孔、第二孔、第H孔、第四孔中之第H息浮液。較佳者，去除 第H息浮液后，再W磯酸鹽緩沖液（PH7. 4)清洗H次至五次。
[0076] 步驟S7之檢測原理，系利用該第二抗體攜帶的一酵素，將一化合物轉換為一 呈色化合物，則該第二抗體之含量與該酵素的量及呈色深淺呈正比，可藉由檢測顏色深 淺而回推該第二抗體之含量。較佳者，該第二抗體攜帶的該酵素，可將四甲基聯苯胺 (Tetramethy化enzidine，簡稱TMB)轉換為藍色產物。抑或是，步驟S7之檢測原理，系利用 該第二抗體攜帶的一英光物質進行檢測，藉由檢測英光強度而回推該第二抗體的含量。
[0077] 于該第二抗體攜帶的酵素能將TMB轉換為藍色產物的實施例中，步驟S7之具體步 驟系于該第一孔、第二孔、第H孔、第四孔中加入100 y L TMB，反應20分鐘，再加入50 y L2M H2SO4終止反應。W 450nm為檢測波長，630nm為參考波長，測定吸光值（0D值），并計算特 異性結合指數（specific binding index,簡稱 SBI):
[0078] SBI =(實驗組之吸光值一第一空白對照組之吸光值）/(對照組之吸光值一第二 空白對照組之吸光值）
[0079] W SBI作為篩選樣品（例如分離自人體之一血液、一血漿、或一血清之至少一者， 但不W此為限）之參考數值，凡是比值大于1. 5者，可作為治療癌癥的醫藥組合物，用于引 導自然殺手細胞之「抗體依賴性細胞介導的細胞毒殺作用（即ADCC作用）」。
[0080] 為充分掲露利用本醫藥組合物之方法，依本發明人多年的經驗及發明研究結果可 知，該醫藥組合物之劑量及方法為；每次化學療程可輸入150?300mL該醫藥組合物一次。
[0081] 實施例四；純化ABC運輸蛋白抗體
[0082] 請參閱圖2,其系一方塊流程圖，表示出利用本案多膚分子純化ABC運輸蛋白抗體 之一方法實施例。
[0083] 步驟Sll ;制備帶有一多膚分子之一磁珠，形成一磁珠多膚分子；
[0084] 步驟S12 ;混合該磁珠多膚分子與一樣品，而得一混合液；
[0085] 步驟S13 ;將該混合液通過受有一磁力之一管柱（column);
[0086] 步驟S14 ;將一緩沖液注入該管柱中，W分離一磁珠多膚分子暨抗體復合物中的 該磁珠多膚分子及一 ABC運輸蛋白抗體。
[0087] 其中，步驟 S11 中之該多膚分子系 SEQ IDN0 ;1、SEQ IDN0 ;2、SEQ IDN0 ;3、SEQ ID NO ;4、SEQ ID NO ;5、SEQ ID NO ;6、W及SEQ ID NO ;7中之至少一者。步驟Sll可委巧磁珠廠 商代為執行，例如委巧臺灣圓點奈米技術股份有限公司（地址：桃園縣桃園市龍壽街81巷 12 弄 2 號；電話；03-3607555 ;網址；//www. tanbead. com/)代為執行。
[0088] 步驟S12中，該混合液中帶有一磁珠多膚分子暨抗體復合物。
[0089] 執行步驟S13之過程中，該混合液中的該磁珠多膚分子暨抗體復合物會受磁力影 響而吸附在該管柱上。
[0090] 步驟S14中，該緩沖液應選用能打斷該磁珠多膚分子與該ABC運輸蛋白抗體之連 結關系者。若步驟S11是委巧磁珠廠商進行，則該廠商會一并提供合適的緩沖液。
[0091] W此方式純化之ABC運輸蛋白抗體，可引發自然殺手細胞之抗體依賴性細胞介導 的細胞毒殺作用，且可進一步用于制備癌癥藥物或制備癌癥醫藥組合物。
[0092] 本案提供之一種用于篩選抗癌癥醫藥組合物之多膚分子即SEQ ID NO ;1、SEQ ID NO ;2、沈Q ID NO ;3、沈Q ID NO ;4、沈Q ID NO ;5、沈Q ID NO ;6、W及沈Q ID NO ;7 中之至少一 者，亦或是，一種由20?50個氨基酸組成之多膚分子，其序列包含SEQ ID NO ;1、SEQ ID NO : 2、SEQ ID NO ;3、SEQ ID NO ;4、SEQ ID NO ;5、SEQ ID NO ;6、W及沈Q ID NO ;7 中之至少一者。
[0093] 應能理解的是，一種衍生多膚分子，系將界定于SEQ ID NO ;1、SEQ ID NO ;2、SEQ ID NO ;3、SEQ ID NO ;4、SEQ ID NO ;5、SEQ ID NO ;6、W及 SEQ ID NO ;7 中之序列進行一個或多個 氨基酸之取代、刪除或添加后所衍生，且能與至少一種H磯酸腺巧結合盒運輸蛋白之抗體 結合者，亦應包含于本案之申請專利范圍內。
[0094] W上所述僅為本發明之較佳實施例，并非用W限定本發明之申請專利范圍，因此 凡其它未脫離本發明所掲示之精神下所完成之各種更動或潤飾等，均應包含于本案之申請 專利范圍內。
【權利要求】
1. 一種多肽分子，其氨基酸序列如下： (a) 包含 SEQ ID NO :1 序列、SEQ ID NO :2 序列、SEQ ID NO :3 序列、SEQ ID NO :4 序列、 SEQ ID NO :5序列、SEQ ID NO :6序列以及SEQ ID NO :7序列中之一者或其組合；或 (b) 包含將（a)的氨基酸序列進行一個或多個氨基酸之取代、刪除或添加后之一衍生 序列；其中，包含該衍生序列之一衍生多肽分子可與至少一種三磷酸腺苷結合盒運輸蛋白 之抗體結合。
2. 如權利要求1所述的多肽分子，其中該衍生多肽分子與該至少一種三磷酸腺苷結合 盒運輸蛋白之抗體間的結合力，大于PH7. 4的磷酸鹽緩沖液與該至少一種三磷酸腺苷結合 盒運輸蛋白之抗體間的結合力。
3. 如權利要求1所述的多肽分子，其中該可被結合之至少一種三磷酸腺苷結合盒運輸 蛋白之抗體是一引發癌癥化學治療抗藥性之三磷酸腺苷結合盒運輸蛋白之抗體。
4. 一種多肽分子的用途，其用于篩選出一癌癥醫藥組合物，其中該多肽分子之氨基酸 序列如下： (a) 包含 SEQ ID NO :1 序列、SEQ ID NO :2 序列、SEQ ID NO :3 序列、SEQ ID NO :4 序列、 SEQ ID NO :5序列、SEQ ID NO :6序列以及SEQ ID NO :7序列中之一者或其組合；或 (b) 包含將（a)的氨基酸序列進行一個或多個氨基酸之取代、刪除或添加后之一衍生 序列；其中，包含該衍生序列之一衍生多肽分子可與至少一種三磷酸腺苷結合盒運輸蛋白 之抗體結合。
5. 如權利要求4所述的多肽分子的用途，其中該被篩選之癌癥醫藥組合物是分離自人 體的血液、血漿和血清中至少一者。
6. 如權利要求4所述的多肽分子的用途，其用于篩選出含有至少一種引發癌癥化學治 療抗藥性之三磷酸腺苷結合盒運輸蛋白之抗體之一癌癥醫藥組合物。
7. 如權利要求6所述的多肽分子的用途，其中被篩選出之該癌癥醫藥組合物，可引發 一免疫細胞之抗體依賴性細胞介導的細胞毒殺作用，以攻擊一癌細胞。
8. 如權利要求6所述的多肽分子的用途，其中被篩選之該癌癥醫藥組合物，可引發一 自然殺手細胞之抗體依賴性細胞介導的細胞毒殺作用，以攻擊具有化學治療藥物抗藥性之 一癌細胞。
9. 一種分離或純化的抗體或人工生產之抗體，可與如下所述之多肽分子結合： (a) 包含 SEQ ID NO :1 序列、SEQ ID NO :2 序列、SEQ ID NO :3 序列、SEQ ID NO :4 序列、 SEQ IDN0 :5序列、SEQ IDN0 :6序列、以及SEQ IDN0 :7序列中之一者或其組合之多肽分子； 或 (b) 包含將（a)的氨基酸序列進行一個或多個氨基酸之取代、刪除或添加后所衍生之 一衍生多肽分子，且該衍生多肽分子可與至少一種三磷酸腺苷結合盒運輸蛋白之抗體結 合。
10. 如權利要求9所述的分離或純化之抗體或人工產生之抗體，其可引發一免疫細胞 之抗體依賴性細胞介導的細胞毒殺作用。
11. 如權利要求10所述的分離或純化之抗體或人工產生之抗體，其可引發一自然殺手 細胞之抗體依賴性細胞介導的細胞毒殺作用。
12. -種癌癥藥物或癌癥醫藥組合物，包含至少一種如權利要求9所述之分離的抗體 或人工生產之抗體。
13. -種檢測方法，其以一多肽分子作為一探針，檢測一樣品中之三磷酸腺苷結合盒運 輸蛋白之抗體含量，其中該多肽分子之氨基酸序列如下： (a) 包含 SEQ ID NO :1 序列、SEQ ID NO :2 序列、SEQ ID NO :3 序列、SEQ ID NO :4 序列、 SEQ ID NO :5序列、SEQ ID NO :6序列、以及SEQ ID NO :7序列中之一者或其組合；或 (b) 包含將（a)的氨基酸序列進行一個或多個氨基酸之取代、刪除或添加后之一衍生 序列；其中，包含該衍生序列之一衍生多肽分子可與至少一種三磷酸腺苷結合盒運輸蛋白 之抗體結合。
14. 如權利要求13所述的檢測方法，其利用酵素免疫吸附法、西方墨點法、生物芯片 法、磁珠分離暨定量方式以及其它探針檢測方式之至少一者，檢測該樣本中之三磷酸腺苷 結合盒運輸蛋白之抗體含量。
15. 如權利要求13所述的檢測方法，其至少包括下列步驟： (a) 涂覆該多肽分子至一容器中； (b) 去除該容器中的第一懸浮液； (c) 置入一樣品之一適當濃度樣本至該容器中； (d) 去除該容器中的第二懸浮液； (e) 置入一第二抗體； (f) 去除該容器中的第三懸浮液；以及 (g) 檢測該容器中之該第二抗體之含量。
16. 如權利要求15所述的檢測方法，其中該容器是96孔盤。
17. 如權利要求13所述的檢測方法，其中該樣品是分離自人體的血液、血漿和血清中 之至少一者。
【文檔編號】A61P35/00GK104513303SQ201410298474
【公開日】2015年4月15日 申請日期:2014年6月26日 優先權日:2013年9月27日
【發明者】李光輝 申請人:李光輝