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一種基于多重PCR技術聯合毛細管電泳鑒定病原微生物的試劑盒

文檔序(xu)號:39427144發布(bu)日期:2024-09-20 22:24閱讀:來源:國(guo)知局

技術特征:

1.一(yi)種(zhong)發夾引(yin)物(wu)(wu)對(dui)的組(zu)合,其特征在于,所述組(zu)合包含一(yi)種(zhong)或多種(zhong)發夾引(yin)物(wu)(wu)對(dui),所述發夾引(yin)物(wu)(wu)對(dui)由一(yi)個(ge)正向發夾引(yin)物(wu)(wu)和一(yi)個(ge)反向發夾引(yin)物(wu)(wu)組(zu)成;

2.如(ru)權利要求1所(suo)述(shu)的組合,其特征在于,所(suo)述(shu)正向(xiang)(xiang)發夾(jia)序列(lie)中(zhong),所(suo)述(shu)正向(xiang)(xiang)連接(jie)序列(lie)的核苷(gan)酸(suan)序列(lie)為:aggca;和/或,所(suo)述(shu)正向(xiang)(xiang)互補序列(lie)包含如(ru)seq?id?no:6所(suo)示的核苷(gan)酸(suan)序列(lie);和/或,

3.如權利(li)要求1或2所述的組(zu)合(he),其特(te)征(zheng)在于,所述正(zheng)向特(te)異性序(xu)列包含以下任一核苷酸序(xu)列:

4.一(yi)(yi)種(zhong)引(yin)(yin)物對(dui)(dui)(dui)組合(he),其特征在于,所(suo)述(shu)引(yin)(yin)物對(dui)(dui)(dui)組合(he)包括一(yi)(yi)種(zhong)或多種(zhong)引(yin)(yin)物對(dui)(dui)(dui),所(suo)述(shu)引(yin)(yin)物對(dui)(dui)(dui)包括一(yi)(yi)條正向引(yin)(yin)物和一(yi)(yi)條反(fan)向引(yin)(yin)物,其中所(suo)述(shu)正向引(yin)(yin)物包含以下任一(yi)(yi)核苷酸序列:

5.如權(quan)利(li)要求4所(suo)(suo)述的引物(wu)(wu)對組(zu)合(he),其特征在于(yu),所(suo)(suo)述正(zheng)向引物(wu)(wu)和(he)/或所(suo)(suo)述反向引物(wu)(wu)還包含熒光標(biao)記(ji);優選所(suo)(suo)述熒光標(biao)記(ji)位(wei)于(yu)所(suo)(suo)述正(zheng)向引物(wu)(wu)的5’末(mo)端和(he)/或所(suo)(suo)述熒光標(biao)記(ji)選自(zi)fam、hex和(he)rox中的一種或多種;

6.一種試劑(ji)盒(he),其特征在于,所述試劑(ji)盒(he)包(bao)含(han)如權利要求1-3任(ren)一項(xiang)所述的組合;

7.一種鑒定(ding)微生物的方法(fa),其(qi)特征在于(yu),所(suo)述(shu)方法(fa)包括(kuo):

8.如權利(li)要求7所(suo)述的方法,其特征在于(yu),在步驟(1)所(suo)述擴增的擴增體系中,所(suo)述正向發(fa)夾(jia)引物(wu)和/或反向發(fa)夾(jia)引物(wu)與所(suo)述正向通用引物(wu)和/或反向通用引物(wu)的濃度比為1:80-1:125;

9.如(ru)權利要求7或(huo)8所述(shu)的方法(fa),其特征(zheng)在于(yu),步驟(2)中所述(shu)的鑒定使用的方法(fa)為(wei)毛細管電(dian)泳技術;

10.如權利(li)要(yao)求1-3任一項所述的組合、如權利(li)要(yao)求4或5所述的引物對組合、和/或如權利(li)要(yao)求6所述的試劑盒在鑒定(ding)微(wei)生物中的應用(yong);


技術總結
本發明公開了一種基于多重PCR技術聯合毛細管電泳鑒定病原微生物的試劑盒。所述試劑盒包括發夾引物對的組合,以擴增待測樣本中的核酸,聯合毛細管電泳鑒定所述待測樣本中微生物的種類。本發明提供的試劑盒用于基于多重PCR技術聯合毛細管電泳進行病原微生物的檢測,可同時針對細菌、真菌和病毒共計28種呼吸道病原微生物進行檢測,較病原體多聯檢試劑盒的檢測有更好的分辨率、準確度和通量,并能實現檢測結果的自動化識別和報告,簡化操作和節省時間。

技術研發人員:李志強,張晨,王偉,毛良偉,潘智勇
受保護的技術使用者:武漢大學中南醫院
技術研發日:
技術公布日:2024/9/19
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