本發明屬于益生菌及其應用，具體涉及一株德氏乳桿菌乳亞種mb4及其在制備降血糖和助睡眠食品藥品中的應用。
背景技術：
：：1、德氏乳桿菌乳亞種(lactobacillus?delbrueckii?subsp.lactis)為革蘭氏陽性桿菌，屬于乳桿菌科、乳桿菌屬，大小一般為0.6～0.9μm×1.5～5μm，一般以兩端圓，單個、雙生和成長度不一的鏈存在，不運動，無鞭毛。該菌在1901年首次發現并分離得到，并以德國細菌學家m.delbrück的名字命名。菌落呈圓形，邊緣整齊，在培養基上呈乳白色，耐酸，最適生長溫度為30～40℃，主要來源于牛奶、干酪、壓縮酵母和谷物麥芽汁等外環境，以及人體的口腔、腸道和陰道等內環境中。對氧氣無特殊要求，在人體幾乎所有的分泌物中都能檢測到，因此是人體內廣泛存在的乳桿菌，也說明德氏乳桿菌乳亞種是存在于人體的正常菌株。此外，德氏乳桿菌乳亞種具有良好的耐酸和耐膽鹽特性，能在人和動物的腸胃中生存，廣泛地存在于人和動物的腸道中。2、德氏乳桿菌乳亞種是可用于生產加工的菌種之一，廣泛地存在于人和動物的腸道并隨糞便排出，是人體正常菌群的一部分，且其作為腸道正常微生物體系的重要組成并終生伴隨宿主，對于維持腸道微生態平衡有重要意義。作為腸道菌群中的乳酸菌益生菌，德氏乳桿菌乳亞種還起到幫助腸道蠕動的作用，并且還可以增強人體的消化能力以及提高免疫力。因此，德氏乳桿菌乳亞種作為一種具有極大潛力的益生性乳桿菌已成為近年研究的熱點，被廣泛用于益生產品的生產中，并且正在不斷被用來制作成適用于人和動物的益生菌制劑。3、研究表明，德氏乳桿菌乳亞種的不同菌株具有不同的益生功能：(1)mayanagi等研究發現口服含有德氏乳桿菌乳亞種wb21的片劑，能減少牙周炎病原菌的數量，調節口腔微生態平衡，并對牙周環境有一定的保護作用(mayanagi?g,kimura?m,nakaya?s,etal.probiotic?effects?of?orally?administered?lactobacillus?salivarius?wb21-containing?tablets?on?periodontopathic?bacteria:a?double-blinded,placebo-controlled,randomized?clinical?trial.j?clin?periodontol.2009jun；36(6):506-13.doi:10.1111/j.1600-051x.2009.01392.x.epub?2009apr22.pmid:19453574.)。(2)德氏乳桿菌乳亞種具有一定的吸附作用，能夠很好地在腸道表面定殖生長，進而發揮其免疫作用。比如，德氏乳桿菌乳亞種200可以改善仔豬腸道微生物并增加腸道中免疫活性細胞的數量，有益于完善仔豬的免疫系統，并激活局部免疫活性(burns?p,reinheimer?j,vinderola?g.impact?of?bile?salt?adaptation?of?lactobacillus?delbrueckiisubsp.lactis?200on?its?interaction?capacity?with?the?gut.resmicrobiol.2011oct；162(8):782-90.doi:10.1016/j.resmic.2011.07.005.epub?2011jul23.pmid:21820507.)。(3)德氏乳桿菌乳亞種kums?y33對人類脂肪來源干細胞(hadscs)分化為骨細胞過程的影響，導致alp活性、runx2和骨鈣素的表達水平以及i型膠原和fgf-23(骨細胞特異性標記物)的蛋白質水平顯著增加，表明成骨過程增強，在骨質疏松癥的預防和治療中具有積極作用，從而闡明其在預防和治療骨齡疾病中的作用(goudarzi?f,kiania,nami?y,et?al.potential?probiotic?lactobacillus?delbrueckii?subsp.lactiskums-y33?suppresses?adipogenesis?and?promotes?osteogenesis?in?human?adipose-derived?mesenchymal?stem?cell.sci?rep.2024apr?27；14(1):9689.doi:10.1038/s41598-024-60061-2.pmid:38678043；pmcid:pmc11055903.)。(4)隨著人們生活水平的不斷提高，攝入的營養也越加豐富，致使體內血清膽固醇的含量升高，從而引發高血壓、冠心病、動脈硬化等一系列的疾病。研究表明德氏乳桿菌乳亞種cgmcc?1.2625在體外對膽固醇具有降解作用(ren?d,li?c,qin?y,et?al.in?vitro?evaluation?of?the?probiotic?andfunctional?potential?of?lactobacillus?strains?isolated?from?fermented?foodand?human?intestine.anaerobe.2014dec；30:1-10.doi:10.1016/j.anaerobe.2014.07.004.epub?2014jul?19.pmid:25046742.)。4、由于德氏乳桿菌乳亞種具有來源多樣性，導致其具有基因多樣性和功能多樣性。然而，目前針對德氏乳桿菌乳亞種的分離鑒定、益生特性和代謝機制的研究依然較少，這也在一定程度上也影響了對德氏乳桿菌乳亞種的開發利用。因此，有必要根據德氏乳桿菌乳亞種的不同來源挖掘更多的新型菌株，再根據菌株的功能或者益生代謝產物確定其功效，明確其應用前景，使其更好地發揮益生作用。綜上所述，益生性德氏乳桿菌乳亞種的研究及應用具有廣闊的發展空間。技術實現思路1、為了克服上述現有技術的不足，本發明從中國廣東一名健康成年人的糞便中分離純化得到一株德氏乳桿菌乳亞種(lactobacillus?delbrueckii?subsp.lactis)mb4菌株，該菌株可產生和分泌γ-氨基丁酸，并且可抑制α-葡萄糖苷酶活性，在降血糖和助睡眠等領域具有重要的潛在應用價值。2、為了實現上述目的，本發明所采用的技術方案是：3、本發明第一方面提供了一株德氏乳桿菌乳亞種(lactobacillus?delbrueckiisubsp.lactis)mb4菌株，所述德氏乳桿菌乳亞種mb4菌株于2023年10月25日保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏號為：cctcc?no:m?20232017；所述德氏乳桿菌乳亞種mb4菌株的16s?rdna序列如seq?id?no：1所示。4、本發明第二方面提供了第一方面所述的德氏乳桿菌乳亞種(lactobacillusdelbrueckii?subsp.lactis)mb4菌株在產γ-氨基丁酸中的應用。5、本發明第三方面提供了第一方面所述的德氏乳桿菌乳亞種(lactobacillusdelbrueckii?subsp.lactis)mb4菌株在制備α-葡萄糖苷酶抑制劑中的應用。6、本發明第四方面提供了一種具有益生功能的菌劑，所述菌劑包括第一方面所述的德氏乳桿菌乳亞種(lactobacillus?delbrueckii?subsp.lactis)mb4菌株。7、優選地，所述菌劑為第一方面所述的德氏乳桿菌乳亞種(lactobacillusdelbrueckii?subsp.lactis)mb4菌株經發酵后的產物。8、優選地，在醫藥應用領域，所述菌劑還包括藥學上可接受的輔料。9、更優選地，所述輔料包括載體和賦形劑。所述賦形劑是指可用于藥學領域的稀釋劑、黏合劑、潤滑劑、崩解劑、助溶劑、穩定劑等以及一些藥用基質。所述載體是藥物領域中可得到的功能性藥用輔料，包括表面活性劑、助懸劑、乳化劑以及一些新型藥用高分子材料，如環糊精、殼聚糖、聚乳酸(pla)、聚乙醇酸聚乳酸共聚物(plga)、透明質酸等。10、優選地，在醫藥應用領域，所述菌劑的劑型包括但不限于片劑、顆粒劑、膠囊劑、滴丸劑、緩釋劑、口服液制劑、注射劑。上述劑型是指臨床上常用的劑型。藥物制劑可以經口服或胃腸外方式(例如靜脈、皮下、腹膜內或局部)給藥，如果某些藥物在胃部條件下是不穩定的，可將其制備成腸衣片劑。11、與現有技術相比，本發明的有益效果是：12、本發明從中國廣東一名健康成年人的糞便中分離純化得到一株德氏乳桿菌乳亞種(lactobacillus?delbrueckii?subsp.lactis)mb4菌株，該菌株具有多種益生功效，包括可產生和分泌γ-氨基丁酸，以及可抑制α-葡萄糖苷酶活性。因此，德氏乳桿菌乳亞種mb4菌株具有可以促進對蛋白食物的消化吸收，改善蛋白過敏；可抗抑郁和改善睡眠；降血糖和減肥等多種功能。可見，本發明新分離得到的氏乳桿菌乳亞種mb4菌株具有多種益生功效，可用于降血糖和助睡眠等領域，比如，制作成降血糖和助睡眠的藥品，具有重要的應用價值和經濟價值。當前第1頁12當前第1頁12