檢查點抑制劑和治療劑的組合以治療癌癥的制作方法
【專利摘要】本公開內容至少部分源于下述開創性認知：連續地、以任一次序地或基本上同時地包括檢查點抑制劑和治療劑的一個或多個周期和/或劑量的組合治療方案在治療一些受試者中的癌癥中可以是更有效的，和/或可以起始、使實現、增加、增強或延長免疫細胞的活性和/或數目，或通過腫瘤的醫學有益應答。
【專利說明】檢查點抑制劑和治療劑的組合以治療癌癥
[0001 ]與相關申請的交叉參考
[0002] 本申請根據35USC§119(e)要求于2013年11月5日提交的美國申請系列61/900， 309,以及于2013年11月5日提交的美國申請系列61/900,355的優先權利益。先前申請的公 開內容視為本申請的部分，并且通過引用的方式全文并入本申請的公開內容。
[0003] 發明背景 發明領域
[0004] 本發明一般涉及治療癌癥，并且更具體而言，涉及使用檢查點抑制劑和治療劑的 組合治療癌癥的方法。
[0005] 背景信息
[0006] 越來越多的證據表明智勝機體的免疫應答的能力代表腫瘤發展的標志。像這樣， 研究者已開始著眼于用靶向試劑恢復免疫應答的方法，從而基本上通過治療免疫系統來間 接治療癌癥。用于實現這點的一種特別有希望的策略是靶向所謂的免疫檢查點，其充當對 免疫系統的T細胞的關閉開關。
[0007] 使現有免疫應答"解鎖"或使免疫應答的起始解鎖的檢查點抑制劑療法在治療受 試者亞組中的癌癥方面是非常有效的。然而，受試者亞組是相對小的群體，僅構成大約25% 的癌癥受試者群體(即，"響應受試者群體"）。相應地，雖然檢查點抑制劑在治療響應受試者 群體中的癌癥方面是非常有效的，但大約75%的癌癥受試者不響應該療法。此外，即使在響 應群體中，應答也不一定是完全的或最佳的。
[0008] 因為免疫檢查點中的許多通過特異性受體和配體對之間的相互作用調節，所以單 克隆抗體或其它試劑可以用于阻斷該相互作用且阻止免疫抑制。近年來最受矚目的兩種檢 查點受體是ctla-4和ro-i。
[0009] CTLA-4、PD-1及其配體是共信號傳導分子的CD28-B7家族的成員，其在T細胞功能 及其它細胞功能的所有階段自始至終起重要作用。PD-1受體在活化T細胞(和B細胞)的表面 上表達，并且在正常情況下，與其配體(PD-L1和PD-L2)結合，所述配體在抗原呈遞細胞例如 樹突狀細胞或巨噬細胞的表面上表達。該相互作用將信號發送到T細胞內，并且基本上將其 關閉或抑制其。癌細胞通過在其表面上驅動高水平的PD-L1表達來利用這種系統。這允許其 獲得ro-i途徑的控制，并且關閉可能進入腫瘤微環境的表達ro-i的τ細胞，因此壓制抗癌免 疫應答。
[0010] 第一類免疫療法伊匹木單抗(Yervoy)(靶向T細胞表面上的細胞毒性T淋巴細胞相 關抗原4(CTLA-4)的單克隆抗體)被批準用于黑素瘤的治療。現在，針對程序性死亡-1(PD- 1)T細胞受體或其配體(PD-L1或TO-L2)的新靶向免疫療法可以證明比伊匹木單抗更有效且 甚至更安全。另外的檢查點靶還可以證明是有效的，例如HM-3、LAG-3、各種B-7配體、CHK 1 和CHK2激酶、BTLA、A2aR及其它。
[0011] 目前，至少七種檢查點抑制劑試劑在臨床試驗中。其中有全人和人源化的單克隆 抗ro-i抗體，以及全人抗ro-Li抗體，以及組合ro-L2的細胞外結構域和igGi的融合蛋白。這 些試劑各自設計為阻斷PD-1及其配體之間的相互作用，并且因此使T細胞(或其它細胞）的 開/關保持在"開"的位置上，盡管它們各自具有略微不同的作用機制。
[0012]用于癌癥治療的另一種策略是組合檢查點抑制劑與治療劑。生物治療劑包括抗體 和疫苗已證明在癌癥治療中是有效的。檢查點抑制劑和治療劑(例如生物制品）的組合可以 增強或延長受試者中的抗腫瘤應答。進一步地，生物治療劑與檢查點抑制劑一起施用可以 增強或延長檢查點抑制劑的效應，使得受試者能夠響應檢查點抑制劑，或使得能夠減少檢 查點抑制劑的毒性或劑量。
[0013]因此，存在開發在非響應性受試者群體和響應受試者群體兩者中起始或增強檢查 點抑制劑的有效性的方法和組合療法的需要。本發明公開了起始、使實現、增強或改善抗腫 瘤免疫應答的方法和組合療法，以隨后使實現、增強或改善針對檢查點抑制劑的受試者或 腫瘤應答。
[0014] 發明概述
[0015] 本公開內容至少部分源于下述開創性認知：連續地、以任一次序地或基本上同時 地包括檢查點抑制劑和治療劑的一個或多個周期和/或劑量的組合治療方案在治療一些受 試者中的癌癥中可以是更有效的，和/或可以起始、使實現、增加、增強或延長免疫細胞的活 性和/或數目，或通過腫瘤的醫學有益應答。
[0016] 相應地，在一個實施方案中，本發明提供了在有此需要的受試者中治療癌癥或者 起始、增強或延長抗腫瘤應答的方法，其包括給受試者施用與其為檢查點抑制劑的試劑組 合的治療劑。在一個方面，檢查點抑制劑是生物學治療劑或小分子。在另一個方面，檢查點 抑制劑是單克隆抗體、人源化抗體、全人抗體、融合蛋白或其組合。在一個進一步方面，檢查 點抑制劑抑制檢查點蛋白質，所述檢查點蛋白質可以是〇^-4、？01^、1^2、？01、87-!13、87- H4、BTLA、HVEM、TIM3、GAL9、LAG3、VISTA、KIR、2B4、CD160、CGEN-15049、CHK l、CHK2、A2aR、B- 7家族配體或其組合。在一個另外方面，檢查點抑制劑與可以是下述的檢查點蛋白質的配體 相互作用：CTLA-4、PDL1、PDL2、PD 1、B7-H3、B7-H4、BTLA、HVEM、TIM3、GAL9、LAG3、VISTA、KIR、 2B4、CD160、CGEN-15049、CHK 1、0?2^2&1?、8-7家族配體或其組合。在一個方面，治療劑是 免疫刺激試劑、T細胞生長因子、白介素、抗體、疫苗或其組合。在一個進一步方面，白介素是 IL-7或IL-15。在一個特定方面，白介素是糖基化的IL-7。在一個另外方面，疫苗是樹突狀細 胞(DC)疫苗。
[0017] 在一個進一步方面，檢查點抑制劑和治療劑同時或以任一次序連續施用。在一個 另外方面，治療劑在檢查點抑制劑之前施用。在一個特定方面，治療劑是疫苗，并且檢查點 抑制劑是ro-ι抑制劑。在一個進一步方面，疫苗是樹突狀細胞疫苗。
[0018] 在一個方面，治療由臨床結果;通過T細胞的抗腫瘤活性增加、增強或延長;與治療 前的數目相比較，抗腫瘤T細胞或活化T細胞數目的增加，或其組合決定。在另一個方面，臨 床結果是腫瘤消退;腫瘤縮小;腫瘤壞死;通過免疫系統的抗腫瘤應答;腫瘤擴大、復發或擴 散，或其組合。在一個另外方面，治療效應通過T細胞的存在、指示T細胞炎癥的基因標記的 存在或其組合預測。
[0019] 在另一個方面，受試者患有癌癥。在一個另外方面，癌癥是任何實體瘤或液體癌 癥，包括泌尿生殖癌(例如前列腺癌、腎細胞癌、膀胱癌）、婦科癌癥(例如卵巢癌、宮頸癌、子 宮內膜癌）、肺癌、胃腸癌（例如非轉移性或轉移性結腸直腸癌、胰腺癌、胃癌、食道癌、肝細 胞癌、膽管細胞癌）、頭頸癌(例如頭頸鱗狀細胞癌）、惡性膠質母細胞瘤、惡性間皮瘤、非轉 移性或轉移性乳腺癌(例如激素難治性轉移性乳腺癌）、惡性黑素瘤、梅克爾細胞癌或骨與 軟組織肉瘤、和血液學瘤形成例如多發性骨髓瘤、急性髓性白血病、慢性髓性白血病、骨髓 增生異常綜合征和急性成淋巴細胞性白血病。在一個優選的實施方案中，疾病是非小細胞 肺癌(NSCLC)、乳腺癌（例如激素難治性轉移性乳腺癌）、頭頸癌（例如頭頸鱗狀細胞癌）、轉 移性結腸直腸癌、激素敏感性或激素難治性前列腺癌、結腸直腸癌、卵巢癌、肝細胞癌、腎細 胞癌、軟組織肉瘤或小細胞肺癌。
[0020] 在一個進一步方面，方法進一步包括在用組合療法治療之前、與用組合療法治療 同時、或在用組合療法治療之后，給受試者施用化學治療劑、靶向療法或輻射。在一個另外 方面，腫瘤可以在治療劑和檢查點抑制劑施用之前被切除。
[0021] 在另一個實施方案中，本發明提供了增強或延長檢查點抑制劑的效應，或使得受 試者能夠響應檢查點抑制劑，或使得能夠減少檢查點抑制劑的毒性或劑量的方法，其包括 給有此需要的受試者施用與檢查點抑制劑組合的治療劑，其中所述受試者患有癌癥。在一 個方面，檢查點抑制劑是生物學治療劑或小分子。在另一個方面，檢查點抑制劑是單克隆抗 體、人源化抗體、全人抗體、融合蛋白或其組合。在一個進一步方面，檢查點抑制劑抑制檢查 點蛋白質，所述檢查點蛋白質可以是CTLA-4、PDL1、roL2、PD 1、B7-H3、B7-H4、BTLA、HVEM、 TIM3、GAL9、LAG3、VISTA、KIR、2B4、CD160、CGEN-15049、CHK 1、0?2、厶2&1?、8-7家族配體或其 組合。在一個方面，檢查點抑制劑與可以是下述的檢查點蛋白質的配體相互作用:CTLA-4、 PDL1、PDL2、PD1、B7-H3、B7-H4、BTLA、HVEM、TIM3、GAL9、LAG3、VISTA、KIR、2B4、CD160、CGEN- 15049、CHK 1、011(2^2&1?、8-7家族配體或其組合。在一個另外方面，治療劑是免疫刺激試 劑、T細胞生長因子、白介素、抗體和疫苗或其組合。在一個進一步方面，白介素是IL-7或IL- 15。在一個特定方面，白介素是糖基化的IL-7。在一個方面，疫苗是樹突狀細胞(DC)疫苗。
[0022] 在一個進一步方面，檢查點抑制劑和治療劑同時或以任一次序連續施用。在一個 另外方面，治療劑在檢查點抑制劑之前施用。在一個特定方面，治療劑是疫苗，并且檢查點 抑制劑是ro-ι抑制劑。在一個進一步方面，疫苗是樹突狀細胞疫苗。
[0023] 在另一個方面，癌癥是任何實體瘤或液體癌癥，包括泌尿生殖癌（例如前列腺癌、 腎細胞癌、膀胱癌）、婦科癌癥(例如卵巢癌、宮頸癌、子宮內膜癌）、肺癌、胃腸癌(例如非轉 移性或轉移性結腸直腸癌、胰腺癌、胃癌、食道癌、肝細胞癌、膽管細胞癌）、頭頸癌(例如頭 頸鱗狀細胞癌）、惡性膠質母細胞瘤、惡性間皮瘤、非轉移性或轉移性乳腺癌(例如激素難治 性轉移性乳腺癌）、惡性黑素瘤、梅克爾細胞癌或骨與軟組織肉瘤、和血液學瘤形成例如多 發性骨髓瘤、急性髓性白血病、慢性髓性白血病、骨髓增生異常綜合征和急性成淋巴細胞性 白血病。在一個優選的實施方案中，疾病是非小細胞肺癌(NSCLC)、乳腺癌(例如激素難治性 轉移性乳腺癌）、頭頸癌(例如頭頸鱗狀細胞癌）、轉移性結腸直腸癌、激素敏感性或激素難 治性前列腺癌、結腸直腸癌、卵巢癌、肝細胞癌、腎細胞癌、軟組織肉瘤或小細胞肺癌。
[0024] 在一個進一步方面，方法進一步包括在用組合療法治療之前、與用組合療法治療 同時、或在用組合療法治療之后，給受試者施用化學治療劑、靶向療法或輻射。在一個另外 方面，腫瘤可以在治療劑和檢查點抑制劑施用之前被切除。
[0025] 在一個進一步的實施方案中，本發明提供了包含與治療劑組合的檢查點抑制劑的 藥物組合物。在一個方面，治療劑是生物制品，并且生物學治療劑是疫苗。
[0026] 在一個實施方案中，本申請提供了用于癌癥治療的組合療法，其中組合療法包括 過繼性T細胞療法和檢查點抑制劑。在一個方面，過繼性T細胞療法包含自體和/或同種異體 T細胞。在另一個方面，自體和/或同種異體T細胞靶向針對腫瘤抗原。在一個進一步方面，檢 查點抑制劑是ro-ι或roL-1檢查點抑制劑。
[0027] 在一個另外的實施方案中，本發明提供了增強抗腫瘤或抗癌免疫應答的方法，該 方法包括給受試者施用過繼性T細胞療法和檢查點抑制劑。在一個方面，過繼性T細胞療法 在檢查點抑制劑之前施用。在一個另外方面，過繼性T細胞療法在檢查點抑制劑之前1-30天 施用。在一個進一步方面，抗腫瘤應答是抑制腫瘤生長，誘導腫瘤細胞死亡、腫瘤消退，阻止 或延遲腫瘤復發、腫瘤生長、腫瘤擴散或腫瘤消除。
[0028] 在一個實施方案中，本發明提供了用于癌癥治療的組合療法的方法，其中組合療 法包括(a)治療性癌癥疫苗或過繼性T細胞療法，和(b)檢查點抑制劑。在一個方面，治療性 癌癥疫苗是樹突狀細胞疫苗。在一個特定方面，治療性癌癥疫苗是樹突狀細胞疫苗。在一個 特定方面，樹突狀細胞疫苗包括自體樹突狀細胞和/或同種異體樹突狀細胞。在特定方面， 自體或同種異體樹突狀細胞在施用于受試者之前裝載有癌抗原。在特定方面，自體或同種 異體樹突狀細胞通過直接施用于腫瘤而裝載有癌抗原。在特定方面，過繼性T細胞療法包含 自體和/或同種異體T細胞。在特定方面，自體和/或同種異體T細胞靶向針對腫瘤抗原。在特 定實施方案中，檢查點抑制劑是ro-l、PDL-l或CTLA-4檢查點抑制劑。
[0029]在另一個實施方案中，本發明提供了用于起始、維持或增強抗腫瘤免疫應答的方 法，該方法包括給受試者施用(a)治療性癌癥疫苗或過繼性T細胞療法，和(b)檢查點抑制 劑。在特定方面，治療性癌癥疫苗或過繼性T細胞療法在檢查點抑制劑之前施用。在特定實 施方案中，治療性癌癥疫苗或過繼性T細胞療法在檢查點抑制劑之前1-30天施用。在特定方 面，抗腫瘤應答是腫瘤特異性應答、臨床應答、腫瘤尺寸的減小、腫瘤特異性生物標記物的 減少、增加的四聚體染色、抗腫瘤細胞因子的增加或其組合。在一個特定方面，臨床應答是 減少的腫瘤生長和/或腫瘤尺寸的減小。在一個特定方面，治療性癌癥疫苗或過繼性T細胞 療法是癌細胞疫苗。在特定方面，過繼性T細胞療法包含自體和/或同種異體T細胞。在特定 方面，自體和/或同種異體T細胞靶向針對腫瘤抗原。在一個特定方面，治療性癌癥疫苗是樹 突狀細胞疫苗。在特定方面，樹突狀細胞疫苗包含自體樹突狀細胞和/或同種異體樹突狀細 胞。在一個特定方面，檢查點抑制劑是PD-1、PDL-1和/或CTLA-4檢查點抑制劑。在一個特定 方面，起始、維持或增強抗腫瘤免疫應答是用于癌癥的治療。
[0030]在一個進一步的實施方案中，本發明提供了用于增強檢查點抑制劑的功效，或使 得受試者能夠響應檢查點抑制劑的方法，該方法包括給受試者施用(a)治療性癌癥疫苗或 過繼性T細胞療法，和(b)檢查點抑制劑。在特定方面，30%、40%、50%、60%、70%、80%或 90%的受試者響應治療性癌癥疫苗或過繼性T細胞療法和檢查點抑制劑的施用。在特定方 面，治療性癌癥疫苗或過繼性T細胞療法活化TH1T細胞。在特定方面，過繼性T細胞療法包含 自體和/或同種異體T細胞。在特定方面，自體和/或同種異體T細胞靶向針對腫瘤抗原。在特 定方面，治療性癌癥疫苗是癌細胞疫苗或樹突狀細胞疫苗。在特定方面，樹突狀細胞疫苗包 含自體樹突狀細胞和/或同種異體樹突狀細胞。在一個特定方面，檢查點抑制劑是PD-1、 PDL-1和/或CTLA-4檢查點抑制劑。在一個特定方面，增強功效是用于癌癥的治療。在特定方 面，受試者患有癌癥。
[0031] 在一個實施方案中，本發明提供了用于治療癌癥的方法，該方法包括施用(a)治療 性癌癥疫苗或過繼性T細胞療法，和(b)檢查點抑制劑。在特定實施方案中，治療性癌癥疫苗 或過繼性T細胞療法在檢查點抑制劑之前施用。在特定方面，治療性癌癥疫苗或過繼性T細 胞療法在檢查點抑制劑之前1-30天施用。在特定方面，30%、40%、50%、60%、70%、80%或 90%的受試者響應治療性癌癥疫苗或過繼性T細胞療法和檢查點抑制劑的施用。在特定方 面，治療性癌癥疫苗或過繼性T細胞療法活化TH1T細胞。在特定方面，治療性癌癥疫苗或過 繼性T細胞療法是癌細胞疫苗或樹突狀細胞疫苗。在特定方面，癌細胞疫苗包含自體和/或 同種異體T細胞。在特定方面，自體和/或同種異體T細胞靶向針對腫瘤抗原。在特定方面，樹 突狀細胞疫苗包含自體和/或同種異體樹突狀細胞。在一個特定方面，檢查點抑制劑是PD- 1、PDL-1和/或CTLA-4檢查點抑制劑。
[0032] 在一個實施方案中，本發明提供了用于抑制腫瘤生長，或誘導腫瘤細胞死亡、腫瘤 消退或腫瘤消除的方法，該方法包括施用(a)治療性癌癥疫苗或過繼性T細胞療法，和(b)檢 查點抑制劑。在特定方面，治療性癌癥疫苗或過繼性T細胞療法在檢查點抑制劑之前施用。 在特定方面，治療性癌癥疫苗或過繼性T細胞療法在檢查點抑制劑之前1-30天施用。在特定 方面，30 %、40 %、50 %、60 %、70 %、80 %或90 %的受試者響應治療性癌癥疫苗或過繼性T細 胞療法和檢查點抑制劑的施用。在特定方面，治療性癌癥疫苗或過繼性T細胞療法活化TH1T 細胞。在特定實施方案中，治療性癌癥疫苗或過繼性T細胞療法是癌細胞疫苗或樹突狀細胞 疫苗。在特定方面，癌細胞疫苗包含自體和/或同種異體T細胞。在特定方面，自體和/或同種 異體T細胞靶向針對腫瘤抗原。在特定方面，樹突狀細胞疫苗包含自體和/或同種異體樹突 狀細胞。在一個特定方面，檢查點抑制劑是ro-l、PDL-l和/或CTLA-4檢查點抑制劑。
[0033] 在一個進一步的實施方案中，本發明提供了用于預防或延遲腫瘤復發、腫瘤生長 或腫瘤擴散的方法，該方法包括給受試者施用本文描述的治療性癌癥疫苗或過繼性T細胞 療法和檢查點抑制劑。
[0034] 在另一個實施方案中，本發明提供了用于減少檢查點抑制劑的毒性或使得能夠用 更低劑量的檢查點抑制劑獲得療效的方法，該方法包括給受試者施用本文描述的治療性癌 癥疫苗或過繼性T細胞療法和檢查點抑制劑。
[0035] 在一個另外的實施方案中，本發明提供了用于在檢查點抑制劑施用之前誘導免疫 應答的方法，該方法包括使用裝載有自體或同種異體(例如來自細胞系)腫瘤抗原的自體或 同種異體樹突狀細胞或者自體或同種異體T細胞，來起始或使實現抗腫瘤免疫應答，隨后施 用本文描述的一種或多種檢查點抑制劑。
[0036] 在一個實施方案中，本發明提供了用于在檢查點抑制劑施用之前誘導免疫應答的 方法，該方法包括使用裝載有自體或同種異體(例如來自細胞系)腫瘤抗原的自體或同種異 體樹突狀細胞或者自體或同種異體T細胞，來增強預先存在的抗腫瘤免疫應答，隨后施用本 文描述的一種或多種檢查點抑制劑。
[0037] 在另一個實施方案中，本發明提供了用于在檢查點抑制劑施用之前誘導免疫應答 的方法，該方法包括使用直接施用到腫瘤內或施用至腫瘤外周用于體內抗原裝載的自體或 同種異體樹突狀細胞，來起始或使實現抗腫瘤免疫應答，隨后施用本文描述的一種或多種 檢查點抑制劑。
[0038] 在一個進一步的實施方案中，本發明提供了用于在檢查點抑制劑施用之前誘導免 疫應答的方法，該方法包括使用直接施用到腫瘤內或施用至腫瘤外周用于體內抗原裝載的 自體或同種異體樹突狀細胞，來增強預先存在的抗腫瘤免疫應答，隨后施用本文描述的一 種或多種檢查點抑制劑。
[0039] 在一個實施方案中，本發明提供了用于在檢查點抑制劑施用之前誘導免疫應答的 方法，該方法包括使用裝載有自體腫瘤抗原的同種異體樹突狀細胞，來起始抗腫瘤免疫應 答，隨后施用本文描述的一種或多種檢查點抑制劑。
[0040] 在一個另外的實施方案中，本發明提供了用于在檢查點抑制劑施用之前誘導免疫 應答的方法，該方法包括使用裝載有自體腫瘤抗原的同種異體樹突狀細胞，來增強預先存 在的抗腫瘤免疫應答，隨后施用本文描述的一種或多種檢查點抑制劑。
[0041] 在另一個實施方案中，本發明提供了用于在檢查點抑制劑施用之前誘導免疫應答 的方法，該方法包括使用直接施用到腫瘤內或施用至腫瘤外周用于體內抗原裝載的同種異 體樹突狀細胞，來起始抗腫瘤免疫應答，隨后施用本文描述的一種或多種檢查點抑制劑。
[0042] 在一個進一步的實施方案中，本發明提供了用于在檢查點抑制劑施用之前誘導免 疫應答的方法，該方法包括使用直接施用到腫瘤內或施用至腫瘤外周用于體內抗原裝載的 同種異體樹突狀細胞，來增強預先存在的抗腫瘤免疫應答，隨后施用本文描述的一種或多 種檢查點抑制劑。
[0043] 在一個實施方案中，本發明提供了用于在檢查點抑制劑施用之前誘導免疫應答的 方法，該方法包括使用離體擴增和/或活化的自體抗腫瘤T細胞，來起始抗腫瘤免疫應答，隨 后施用本文描述的一種或多種檢查點抑制劑。
[0044] 在另一個實施方案中，本發明提供了用于在檢查點抑制劑施用之前誘導免疫應答 的方法，該方法包括使用離體擴增和/或活化的抗腫瘤T細胞，來增強預先存在的抗腫瘤免 疫應答，隨后施用本文描述的一種或多種檢查點抑制劑。
[0045] 在一個另外的實施方案中，本發明提供了用于使用(a)治療性癌癥疫苗或過繼性T 細胞療法和(b)檢查點抑制劑誘導或增強腫瘤應答的方法。在特定實施方案中，腫瘤應答是 觸發程序性細胞死亡。在特定實施方案中，腫瘤應答是腫瘤細胞數目的減少。在特定實施方 案中，腫瘤應答是腫瘤生長的速率減少。在特定實施方案中，腫瘤應答是激酶途徑的阻斷。 在特定實施方案中，腫瘤應答是TH1細胞的活化。在特定實施方案中，腫瘤應答是活化的T細 胞應答。在特定實施方案中，腫瘤應答的質量可以通過TH1與TH2應答的比率進行測量，其中 高TH1應答指示高質量應答。
[0046] 在一個進一步的實施方案中，本文描述的檢查點抑制劑可以包含一種或多種分開 的檢查點抑制劑。此外，本文描述的(a)治療性癌癥疫苗或過繼性T細胞療法和(b)檢查點抑 制劑的施用可以減少待施用于受試者或患者的檢查點抑制劑的有效量。進一步地，檢查點 抑制劑的減少的量可以減少檢查點抑制劑的毒性，并且增加受試者對檢查點抑制劑的耐 受。
[0047] 附圖簡述
[0048]圖1A-C顯示了 DC疫苗在良好建立的神經膠質瘤中促進活化淋巴細胞浸潤，而無治 療益處。（A)DC疫苗相較于對照促進淋巴細胞(CD3+)的顯著腫瘤浸潤。（B)顯著比例的這些 細胞是活化的淋巴細胞(⑶3+⑶8+⑶25+)。（C)在DC疫苗和對照組之間未記錄到存活益處。 [0049]圖2A-B顯示在DC疫苗后，在腫瘤微環境中存在抑制性髓樣細胞的增加的累積。(A) 荷瘤對照顯示腫瘤浸潤性髓樣細胞(Thyl.2-Ly6C+)的增加。該群體在用DC疫苗處理的小鼠 中顯著更多。（B)顯著百分比的這些髓樣細胞表達H)-L1 (Thy 1.2-Ly6C+ro-Ll+)。
[0050]圖3A-G顯示PD-1的阻斷阻止抑制性髓樣細胞的累積，并且促進活化淋巴細胞浸 潤，且具有治療益處。（A)在DC疫苗接種的小鼠和用佐劑抗ro-lAb處理的DC疫苗小鼠（DC疫 苗/抗ro- lAb)之間，淋巴結中的⑶8+群體中不存在差異。（B)在每個處理組的淋巴結中發現 活化CD8+CD25+T細胞的較小群體，其無統計學不同。（C，D)當與接受單獨的DC疫苗接種的組 相比較時，抑制性髓樣群體在DC疫苗/抗PD-1處理的小鼠中顯著減少。（E)與單獨的DC疫苗 接種相比較，在DC疫苗/抗PD-1處理的小鼠中存在活化細胞毒性腫瘤浸潤淋巴細胞的可比 較群體。（F)組合DC疫苗/抗Η)-1處理顯示顯著的存活益處。（G)在第75天時，用GL261鼠神經 膠質瘤的對側顱內植入物再攻擊來自（F)的存活DC疫苗/抗PD-1處理的鼠，無另外處理。當 與對照小鼠相比較時，記錄到顯著的存活益處。
[0051 ]圖4A-B顯示腫瘤裂解產物脈沖的樹突狀細胞下調ro-Ll的表達。(A)描述在裂解產 物脈沖前和后在ro-Ll表達中的變化的代表性直方圖。（B)樹突狀細胞用腫瘤裂解產物脈沖 24小時且隨后就ro-Ll表達進行分析。繪制PD-L1表達的熒光強度中值(MFI)。
[0052] 發明詳述
[0053] 本公開內容至少部分源于下述開創性認知：連續地、以任一次序地或基本上同時 地包括檢查點抑制劑和治療劑的一個或多個周期和/或劑量的組合治療方案在治療一些受 試者中的癌癥中可以是更有效的，和/或可以起始、使實現、增加、增強或延長免疫細胞的活 性和/或數目，或通過腫瘤的醫學有益應答。
[0054]在描述本文組合物和方法之前，應理解本發明并不限于所述的具體組合物、方法 和實驗條件，因為這樣的組合物、方法和條件可以改變。還應理解本文使用的術語僅用于描 述特定實施方案的目的，并且不預期是限制性的，因為本發明的范圍僅限制于所附權利要 求中。
[0055] 除非另有定義，否則本文使用的所有科學和技術術語均具有與本發明所屬領域普 通技術人員通常理解相同的含義。盡管與本文描述的那些相似或等價的任何方法和材料均 可用于本發明的實踐或測試中，但現在描述優選方法和材料。
[0056] 如本說明書和所附權利要求中使用的，單數形式"一個"、"一種"和"該/所述"包括 復數參考，除非上下文另有明確說明。因此，例如，對"方法"的提及包括在閱讀本公開內容 后對于本領域技術人員將是明顯的本文所描述的類型的一種或多種方法和/或步驟等等。
[0057] 如本文使用的，術語"治療劑"或"治療劑"指在受試者中產生治療應答的任何醫學 產品。
[0058]如本文使用的，術語"生物學治療劑"或"生物藥劑"指在生物源中制造或由生物源 提取的任何醫學產品。生物藥劑不同于化學合成的藥物產品。生物藥劑的例子包括疫苗、血 液或血液成分、過敏原、體細胞、基因療法、組織、重組治療性蛋白質、包括抗體治療劑和融 合蛋白、以及活細胞。生物制品可以由糖、蛋白質或核酸或這些物質的復雜組合組成，或可 以是活實體例如細胞和組織。生物制品從各種天然來源(人、動物或微生物）中分離，并且可 以通過生物技術方法和其它技術產生。生物學治療劑的具體例子包括但不限于免疫刺激試 劑、T細胞生長因子、白介素、抗體、融合蛋白和疫苗例如癌癥疫苗。
[0059]如本文使用的，術語"抗體"指免疫球蛋白或其部分，并且涵蓋包含抗原結合位點 的任何多肽，與來源、起源物種、生產方法和特征無關。抗體可以包括重和/或輕鏈或其片 段。本發明的抗體或其抗原結合片段、變體或衍生物包括但不限于多克隆、單克隆、多特異 性、人、人源化、靈長類動物化或嵌合的抗體、單鏈抗體、表位結合片段例如Fab、Fab'和F (ab'）2、Fd、Fv、單鏈Fv(scFv)、單鏈抗體、二硫鍵連接的Fv(sdFv)、包含VL或VH結構域的片 段、由Fab表達文庫產生的片段、以及抗獨特型(抗Id)抗體。ScFv分子是本領域已知的，并且 在例如美國專利號5,892,019中描述。本發明的免疫球蛋白或抗體分子可以具有任何類型 (例如 IgG、IgE、IgM、IgD、IgA和IgY)、種類(例如IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、IgAl和IgA2)或亞類 的免疫球蛋白分子。
[0060] 細胞表面受體是抗體療法的常見靶，并且包括表皮生長因子受體和HER2。一旦與 癌抗原結合，抗體可以誘導抗體依賴性細胞介導的細胞毒性，活化補體系統，阻止受體與其 配體相互作用，或遞送化學療法或輻射的有效載荷，所有這些均可以導致細胞死亡。批準作 為治療劑的抗體包括美羅華（利妥昔單抗）；賽尼哌（達利珠單抗）；舒萊（巴利昔單抗）； Synagis(帕利珠單抗）；類克(英利昔單抗）；赫賽汀（曲妥珠單抗）;Mylotarg(吉妥單抗奧佐 米星）；Campath(阿侖珠單抗）；澤娃靈(替伊莫單抗）；Humira(阿達木單抗）；Xolair(奧馬珠 單抗）；Bexxar(托西莫單抗-1-131) ;Raptiva(依法珠單抗）；愛必妥（西妥昔單抗）；阿瓦斯 丁（貝伐珠單抗）；Tysabri (那他珠單抗）；Actemra(托珠單抗）；維克替比（帕木單抗）； 1^^6111^8(雷珠單抗）；5〇1；[1^8(依庫珠單抗）；(^11^13(賽妥珠單抗） ；5；[1]^011；[(戈利木單 抗）；Ilaris(卡那奴單抗）；Stelara(烏司奴單抗）；Arzerra(奧法木單抗）；Prolia(地舒單 抗）；Numax(莫維珠單抗）；ABThrax(雷昔庫單抗）；Benlysta(貝利木單抗）；Yervoy(依匹木 單抗）；Adcetris (布妥昔單抗）；Per jeta(帕妥珠單抗）；Kadcyla(Ad0-曲妥珠單抗 emtansine);和Gazyva(阿托珠單抗）。
[0061] 如本文使用的，術語"融合蛋白"指嵌合分子，其包含例如具有至少一個靶結合位 點的免疫球蛋白抗原結合結構域，和至少一個異源部分（即在自然界中不與其天然連接的 部分）。氨基酸序列通常可以存在于分開的蛋白質中，其在融合多肽中聚在一起，或它們通 常可以存在于相同蛋白質中，但在融合多肽中以新排列放置。融合蛋白可以例如通過化學 合成，或通過生成和翻譯多核苷酸進行制備，在所述多核苷酸中，肽區域以所需關系編碼。
[0062] 如本文使用的，術語"靶向療法"指靶向免疫系統的任何方面的任何治療分子。
[0063] 如本文使用的，術語"癌癥"指特征在于在體外(例如經轉化的細胞)或體內的過度 增殖性細胞生長的廣泛病癥類別。可以通過本發明的組合物和方法治療或預防的病況包括 例如各種贅生物，包括良性或惡性腫瘤，各種增生等等。本發明的化合物和方法可以實現這 樣的病況中所牽涉的不希望有的過度增殖性細胞生長的抑制和/或逆轉。癌癥的具體例子 包括急性成淋巴細胞性白血病，成人;急性成淋巴細胞性白血病，兒童期；急性髓樣白血病， 成人;腎上腺皮質癌；腎上腺皮質癌，兒童期;AIDS相關淋巴瘤;AIDS相關惡性腫瘤;直腸癌； 星形細胞瘤，兒童期小腦;星形細胞瘤，兒童期大腦;膽管癌，肝外;膀胱癌;膀胱癌，兒童期； 骨癌、骨肉瘤/惡性纖維組織細胞瘤;腦干神經膠質瘤，兒童期;腦瘤，成人;腦瘤，腦干神經 膠質瘤，兒童期;腦瘤，小腦星形細胞瘤，兒童期;腦瘤，大腦星形細胞瘤/惡性神經膠質瘤， 兒童期;腦瘤，室管膜瘤，兒童期;腦瘤，髓母細胞瘤，兒童期;腦瘤，幕上原始神經外胚層腫 瘤，兒童期;腦瘤，視通路和下丘腦神經膠質瘤，兒童期;腦瘤，兒童期（其它）；乳腺癌;乳腺 癌和妊娠;乳腺癌，兒童期；乳腺癌，男性;支氣管腺瘤/類癌瘤，兒童期；類癌瘤腫瘤，兒童 期;類癌瘤腫瘤，胃腸道;癌，腎上腺皮質;癌，島細胞;原發部位不明癌；中樞神經系統淋巴 瘤，原發性;小腦星形細胞瘤，兒童期;大腦星形細胞瘤/惡性神經膠質瘤，兒童期；宮頸癌； 兒童期癌;慢性淋巴細胞性白血病;慢性髓性白血病;慢性骨髓增殖性病癥;腱鞘的透明細 胞肉瘤;結腸癌;結腸直腸癌，兒童期;皮膚T細胞淋巴瘤;子宮內膜癌;室管膜瘤，兒童期;上 皮癌，卵巢;食道癌;食道癌，兒童期;尤因(Ewing)家族腫瘤;顱外生殖細胞瘤，兒童期;性腺 外生殖細胞瘤;肝外膽管癌、眼癌，眼內黑素瘤；眼癌，視網膜母細胞瘤;膽囊癌；胃（胃部） 癌；胃（胃部)癌，兒童期；胃腸道類癌瘤;生殖細胞瘤，顱外，兒童期;生殖細胞瘤，性腺外;生 殖細胞瘤，卵巢;妊娠滋養細胞腫瘤;神經膠質瘤，兒童期腦干;神經膠質瘤，兒童期視通路 和下丘腦；多毛細胞白血病；頭頸癌;肝細胞(肝)癌，成人(原發性）；肝細胞(肝)癌，兒童期 (原發性）；何杰金氏淋巴瘤，成人；何杰金氏淋巴瘤，兒童期；在妊娠期間的何杰金氏淋巴 瘤;下咽癌；下丘腦和視通路神經膠質瘤，兒童期；眼內黑素瘤;胰島細胞癌（內分泌胰腺）； 卡波濟氏肉瘤;腎癌;喉癌;喉癌，兒童期；白血病，急性成淋巴細胞性，成人；白血病，急性成 淋巴細胞性，兒童期；白血病，急性髓樣，成人；白血病，急性髓樣，兒童期；白血病，慢性淋巴 細胞性；白血病，慢性髓性；白血病，多毛細胞;唇和口腔癌;肝癌，成人(原發性）；肝癌，兒童 期(原發性）；肺癌，非小細胞;肺癌，小細胞;成淋巴細胞性白血病，成人急性;成淋巴細胞性 白血病，兒童期急性;淋巴細胞性白血病，慢性;淋巴瘤，AIDS相關的；淋巴瘤，中樞神經系統 (原發性）；淋巴瘤，皮膚T細胞;淋巴瘤，何杰金氏，成人;淋巴瘤，何杰金氏，兒童期;淋巴瘤， 在妊娠期間的何杰金氏；淋巴瘤，非何杰金氏，成人;淋巴瘤，非何杰金氏，兒童期;淋巴瘤， 在妊娠期間的非何杰金氏；淋巴瘤，原發性中樞神經系統；巨球蛋白血癥，瓦爾登斯特倫氏 (Waldenstrom's);男性乳腺癌；惡性間皮瘤，成人;惡性間皮瘤，兒童期；惡性胸腺瘤;髓母 細胞瘤，兒童期；黑素瘤；黑素瘤，眼內；梅克爾(Merkel)細胞癌；間皮瘤，惡性;原發部位不 明鱗狀頸部轉移癌；多發性內分泌腫瘤綜合征，兒童期;多發性骨髓瘤/漿細胞腫瘤;蕈樣肉 芽腫病;骨髓增生異常綜合征；髓性白血病，慢性;髓樣白血病，兒童期急性;骨髓瘤，多發 性;骨髓增殖性病癥，慢性;鼻腔和鼻旁竇癌;鼻咽癌;鼻咽癌，兒童期;神經母細胞瘤;神經 纖維瘤;非何杰金氏淋巴瘤，成人;非何杰金氏淋巴瘤，兒童期;在妊娠期間的非何杰金氏淋 巴瘤;非小細胞肺癌；口癌，兒童期；口腔和唇癌；口咽癌;骨肉瘤/骨惡性纖維組織細胞瘤； 卵巢癌，兒童期;卵巢上皮癌;卵巢生殖細胞瘤;卵巢低潛在惡性腫瘤;胰腺癌;胰腺癌，兒童 期;胰腺癌，島細胞;鼻旁竇和鼻腔癌；甲狀旁腺癌；陰莖癌;嗜鉻細胞癌;松果體和幕上原始 神經外胚層腫瘤，兒童期；垂體瘤;漿細胞腫瘤/多發性骨髓瘤;胸膜肺母細胞瘤;妊娠和乳 腺癌；妊娠和何杰金氏淋巴瘤;妊娠和非何杰金氏淋巴瘤；原發性中樞神經系統淋巴瘤；原 發性肝癌，成人;原發性肝癌，兒童期;前列腺癌;直腸癌；腎細胞(腎)癌;腎細胞癌，兒童期； 腎盂和輸尿管，移行細胞癌;視網膜母細胞瘤;橫紋肌肉瘤，兒童期;唾液腺癌;唾液腺癌，兒 童期；肉瘤，尤因家族腫瘤；肉瘤，卡波濟氏；肉瘤(骨肉瘤)/骨惡性纖維組織細胞瘤；肉瘤， 橫紋肌肉瘤，兒童期；肉瘤，軟組織，成人；肉瘤，軟組織，兒童期;塞扎里綜合征;皮膚癌;皮 膚癌，兒童期；皮膚癌（黑素瘤）；皮膚癌，梅克爾細胞;小細胞肺癌;小腸癌;軟組織肉瘤，成 人;軟組織肉瘤，兒童期；原發部位不明鱗狀頸癌，轉移性；胃（胃部）癌；胃（胃部）癌，兒童 期；幕上原始神經外胚層腫瘤，兒童期；T細胞淋巴瘤，皮膚；睪丸癌；胸腺瘤，兒童期；胸腺 瘤，惡性；甲狀腺癌；甲狀腺癌，兒童期；腎盂和輸尿管移行細胞癌;滋養細胞瘤，妊娠期；原 發部位不明瘤，兒童期;兒童期罕見癌;輸尿管和腎盂，移行細胞癌;尿道癌;子宮肉瘤；陰道 癌;視通路和下丘腦神經膠質瘤，兒童期；外陰癌;瓦爾登斯特倫氏巨球蛋白血癥;和腎母細 胞瘤。
[0064] 如本文使用的，術語"改善存活"指患有癌癥或增殖性疾病的受試者的壽命或生活 質量的增加。例如，改善存活還包括促進癌癥緩解，預防腫瘤侵入，預防腫瘤復發，減緩腫瘤 生長，預防腫瘤生長，減小腫瘤尺寸，并減少總癌細胞計數。
[0065] 如本文使用的，術語"預防病癥"不意味著是絕對術語。相反，例如癌癥的預防指癥 狀的發作延遲，癥狀頻率的減少，與未接受本文描述的方法、組合物或治療中的至少一種的 相似受試者相比較，受試者顯示出與病癥相關的癥狀或獲得病癥的可能性減少，或減少與 癌癥相關的癥狀的嚴重性。預防因此指本領域技術人員應理解的廣泛范圍的預防措施。在 一些情況下，癥狀的頻率和嚴重性減少至非病理性水平，例如使得個體可以延遲侵入性癌 癥治療例如侵襲性化學療法和手術。
[0066] 如本文使用的，術語"治療癌癥"不意味著是絕對術語。在一些方面，本發明的組合 物和方法尋求減少腫瘤尺寸或癌細胞數目，促使癌癥進入緩解，或阻止癌細胞的尺寸或細 胞數目的生長。在一些情況下，治療導致改善的預后。
[0067] 如本文使用的，術語"需要治療的受試者"指已診斷有癌癥或細胞增殖性病癥的個 體或受試者。
[0068]術語"治療有效的"、"治療有效量"、"有效量"或"以有效的量"指促進所需生理應 答的足夠量或劑量，例如但不限于足以促進T細胞應答的量或劑量。
[0069] 如本文使用的，術語"PD-1抗體"指通過使ro-i激動來拮抗淋巴細胞的活性和/或 增殖的抗體。術語"拮抗活性"指淋巴細胞增殖或活性中至少約10%、20%、30%、40%、 50 %、60 %、70 %、80 %、90 %或更多的下降（或減少）。術語"拮抗"可以與術語"抑制性"和 "抑制"互換使用。PD-1介導的活性可以使用如本文描述的T細胞增殖測定法進行定量測定。
[0070] 本公開內容的一個方面提供了可以充當ro-i的激動劑，從而調整由ro-i調節的免 疫應答的抗體。在一個實施方案中，抗PD-1抗體可以是新型抗原結合片段。本文公開的抗 PD-1抗體能夠結合包括人ro-i且拮抗PD-1，從而抑制表達PD-1的免疫細胞的功能。在一些 實施方案中，免疫細胞是表達ro-ι的活化淋巴細胞，例如τ細胞、b細胞和/或單核細胞。
[0071] 如本文使用的，術語"腫瘤應答"指細胞應答包括但不限于觸發程序性細胞死亡。
[0072] 如本文使用的，術語"抗腫瘤應答"指免疫系統應答，包括但不限于活化T細胞以攻 擊抗原或抗原呈遞細胞。
[0073] 如本文使用的，術語"起始"指開始第一抗腫瘤應答或開始第二或"增強的"抗腫瘤 應答。
[0074] 如本文使用的，術語"使實現"指允許受試者響應或腫瘤細胞響應本文公開的治 療，其中所述受試者或腫瘤細胞先前無法響應治療或具有對治療的低應答。
[0075] 如本文使用的，術語"增強"指允許受試者或腫瘤細胞改善其響應本文公開的治療 的能力。例如，增強的應答可以包含應答性中5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、 45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95% 或 98% 或更多的增加。如本 文使用的，"增強"還可以指增加響應治療例如檢查點抑制劑療法的受試者數目。例如，增強 的應答可以指響應治療的受試者總百分比，其中百分比是5%、10%、15%、20%、25%、 30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95% 或 98% 或 更多。
[0076] 如本文使用的，術語"小分子"指低分子量(〈900道爾頓)有機化合物，其可以幫助 調節生物過程，具有在l(T9m級別上的大小。大多數藥物是小分子。
[0077] 本發明描述了基于活化適應性免疫抵抗的新型組合治療。適應性免疫抵抗機制意 味著可以阻斷誘導的免疫檢查點蛋白質的試劑將是最低限度有效的，因為它們僅在存在預 先存在的抗腫瘤免疫應答（即活化的T細胞)時才起作用。對于不具有預先存在的抗腫瘤應 答的患者，檢查點抑制劑將不是有效的。因此，可以活化抗腫瘤活性（即抗腫瘤免疫應答)且 抑制檢查點的組合治療是優選的，因為它將允許不響應單獨的任一治療的受試者獲益于組 合治療。
[0078]樹突狀細胞(DC)已顯示協調T細胞抗腫瘤應答，并且利用DC以在膠質母細胞瘤受 試者中誘導抗腫瘤免疫的主動疫苗接種策略已進行了測試。多個研究報道在DC疫苗處理后 顯著且有效的免疫應答。用內源自調節機制的佐劑調節進一步促進該免疫療法的可能性是 有利的。
[0079]樹突狀細胞是在各種淋巴樣和非淋巴樣組織中發現的抗原呈遞細胞的多樣化群 體（參見Liu，Cell 106: 259-62(2001 );Steinman，Ann.Rev. Immunol .9: 271-96( 1991))。樹 突狀細胞包括脾的淋巴樣樹突狀細胞、表皮的朗格漢斯細胞、以及血液循環中的褶皺細胞。 共同地，樹突狀細胞基于其形態、高水平的表面MHC II類表達以及在T細胞、B細胞、單核細 胞和天然殺傷細胞上表達的某些其它表面標記物的不存在而分類為一組。特別地，單核細 胞衍生的樹突狀細胞（也稱為單核細胞樹突狀細胞）通常表達⑶11c、⑶80、CD86,并且是 HLA-DR+，但是 CD14-。
[0080]相比之下，單核細胞樹突狀細胞前體(通常為單核細胞)通常為⑶14+。單核細胞樹 突狀細胞前體可以得自它們位于其中的任何組織，特別是淋巴樣組織例如脾、骨髓、淋巴結 和胸腺。單核細胞樹突狀細胞前體還可以從循環系統中分離。外周血是容易獲得的單核細 胞樹突狀細胞前體來源。臍帶血是單核細胞樹突狀細胞前體的另一個來源。單核細胞樹突 狀細胞前體可以從其中可以引發免疫應答的各種生物體中分離。這樣的生物體包括動物， 例如包括人和非人動物，例如靈長類動物、哺乳動物（包括狗、貓、小鼠和大鼠）、鳥（包括 雞）、及其轉基因物種。在某些實施方案中，單核細胞樹突狀細胞前體和/或未成熟樹突狀細 胞可以從健康受試者或需要免疫刺激的受試者中分離，例如癌癥受試者或對于其細胞免疫 刺激可以是有益或需要的其它受試者（即，具有細菌或病毒感染等等的受試者）。樹突狀細 胞前體和/或未成熟樹突狀細胞還可以得自HLA匹配的健康個體，用于部分活化和施用于需 要免疫刺激的HLA匹配的受試者。
[0081] 分離且修飾樹突狀細胞前體的方法可以在美國專利公開號20060057120中找到， 所述美國專利公開通過引用并入本文。
[0082] 免疫檢查點調節免疫系統中的T細胞功能。T細胞在細胞介導的免疫中起關鍵作 用。檢查點蛋白質與特異性配體相互作用，所述特異性配體將信號發送到T細胞內，并且基 本上關閉或抑制T細胞功能。癌細胞通過在其表面上驅動高水平的檢查點蛋白質表達來利 用這種系統，其導致在進入腫瘤微環境的T細胞的表面上表達檢查點蛋白質的T細胞的控 制，因此壓制抗癌免疫應答。像這樣，檢查點蛋白質的抑制將導致T細胞功能的恢復和針對 癌細胞的免疫應答。檢查點蛋白質的例子包括但不限于CTLA-4、PDL1、TOL2、PD 1、B7-H3、B7- 財、811^、爪^]\1、1'1]\0、641^9、1^63、￥15了4、1(11?、284(屬于0)2分子家族，并且在所有疆、丫3和 記憶CD8+ (αβ)T細胞上表達）、CD 160 (也稱為BY55)、CGEN-15049、CHK 1 和CHK2激酶、A2aR和 各種B-7家族配體。
[0083]程序性細胞死亡蛋白質l(PD-l)是288個氨基酸的細胞表面蛋白質分子，在T細胞 和前B細胞上表達，并且在其命運/分化中起作用。PD-1具有兩種配體，PD-L1和TO-L2，其為 B7家族的成員。PD-L1蛋白質響應LPS和GM-CSF處理在巨噬細胞和樹突狀細胞(DC)上是上調 的，并且在TCR和B細胞受體信號傳導后在T細胞和B細胞上是上調的，而在靜止小鼠中，PD- LlmRNA可以在心臟、肺、胸腺、脾和腎中檢測到。PD-1負面調節T細胞應答。
[0084] ro-i已顯示涉及響應慢性抗原調節T細胞活化和T細胞耐受之間的平衡。例如，PD- 1表達已在HIV感染中得到廣泛研究。在HIV1感染期間，已發現ro-i的表達在⑶4+T細胞中是 增加的。當在慢性抗原暴露的存在下觀察到T細胞功能障礙時，如在HIV感染的情況下一樣， 認為ro-ι上調與τ細胞耗盡（定義為關鍵效應子功能的進行性喪失）相關聯。PD-1上調還可 能與在慢性病毒感染期間在這些相同細胞集合中增加的細胞凋亡相關（參見Petrovas等 人，（2009) J Immunol · 183(2): 1120-32) 〇
[0085] PD-1還在腫瘤特異性逃避免疫監視中起作用。已證實PD-1在慢性髓性白血病 (CML)和急性髓性白血病(AML)兩者中的腫瘤特異性細胞毒性T淋巴細胞(CTL)中高度表達。 PD-1還在黑素瘤浸潤T淋巴細胞(TIL)中是上調的（參見Dotti(2009)Blood 114(8):1457- 58)。已發現腫瘤表達ro-l配體(PDL-l和PDL-2)，當與CTL中的PD-l上調組合時，其可以是T 細胞功能性喪失和CTL無法介導有效抗腫瘤應答中的貢獻因素。研究者已顯示在由淋巴細 胞性脈絡叢腦膜炎病毒(lcmv)慢性感染的小鼠中，抗ro-i抗體的施用阻斷H)-1-PDL相互作 用，并且能夠恢復一些T細胞功能性（增殖和細胞因子分泌），并且導致病毒負荷的減少 (Barber等人（2006)Nature 439(9):682-687)。
[0086] 腫瘤細胞自身表達PD-L1，并且被認為經由此機制限制T細胞應答。已進一步顯示 PD-1的抑制在B16黑素瘤模型中導致效應T細胞的擴增和T調節細胞群體的限制。PD-1、 CTLA-4或ID0的阻斷恢復IL-2產生，并且允許腫瘤微環境中存在的⑶8+T細胞的增殖增加。 已顯示抗TOL1治療恢復并允許抗原特異性疫苗生成的CD8+T細胞的擴增以排斥腫瘤。這些 數據表明ro-1/PD-Ll軸調節活化的腫瘤特異性T細胞。
[0087]黑素瘤中的臨床試驗已顯示伴隨抗PD-1阻斷的強抗腫瘤應答。在晚期黑素瘤、非 小細胞肺癌、前列腺癌、腎細胞癌和結腸直腸癌的情況下，使用ro-i抑制的顯著利益已得到 描述。在鼠模型中的研究已將該證據應用于神經膠質瘤療法。輔助輻射的抗ro-i阻斷在具 有神經膠質瘤的小鼠中促進細胞毒性τ細胞群體和相關的長期存活益處。當施用ido、ctla- 4和ro-Ll抑制劑的組合治療時，腫瘤浸潤Treg的減少和增加的存活已得到描述。
[0088] 存在目前在臨床試驗中測試的幾種ro-i抑制劑。CT-oii是針對ro-i的人源化igGi 單克隆抗體。近期完成了在患有彌散性大B細胞淋巴瘤(DLBCL)的受試者中的II期臨床試 驗，所述受試者已經歷自體干細胞移植。初步結果證實70%的受試者在隨訪期結束時是無 進展的，相比之下對照組中為47%，并且82%的受試者是存活的，相比之下對照組中為 62%。該試驗證實CT-oii不僅阻斷ro-i功能，它還加強天然殺傷細胞的活性，因此強化抗腫 瘤免疫應答。
[0089] BMS 936558是處于I期試驗中的靶向Η)-1試劑的全人IgG4單克隆抗體，在患有晚 期、難治性惡性腫瘤的受試者中BMS-936558的每兩周一次施用顯示持久的部分或完全緩 解。最顯著的應答率在患有黑素瘤(28 % )和腎細胞癌(27 % )的受試者中觀察到，但在患有 非小細胞肺癌(NSCLC)的受試者中也觀察到顯著的臨床活性，并且一些應答持續超過一年。 它還是相對良好耐受的；2 3級的不利事件在14%的受試者中出現。
[0090] BMS 936559是靶向ro-Ι配體ro-Ll的全人IgG4單克隆抗體。I期結果顯示該藥物的 每兩周一次施用導致持久應答，尤其是在患有黑素瘤的受試者中。客觀應答率范圍為6%_ 17%，取決于患有晚期NSCLC、黑素瘤、RCC或卵巢癌的受試者中的癌癥類型，其中一些受試 者經歷持續一年或更久的應答。
[0091] MK 3475是在五部分研究中在I期開發中的人源化IgG4抗ro-Ι單克隆抗體，所述研 究評估藥物在患有進行性、局部晚期或轉移性癌、黑素瘤或NSCLC的受試者中的給藥、安全 和耐受性。
[0092] MPDL 3280A是單克隆抗體，其也靶向H)-L1，經歷在患有BRAF V600-突變型轉移性 黑素瘤的受試者中與BRAF抑制劑維羅非尼組合的I期測試，以及在患有晚期實體瘤的受試 者中與靶向血管內皮生長因子受體(VEGFR)的貝伐珠單抗組合，連同或不連同化學療法的I 期測試。
[0093] AMP 224是第二PD-1配體PD-L2的細胞外結構域和IgGl的融合蛋白，其具有阻斷 ro-L2/ro-l相互作用的潛力。AMP-224目前作為單一療法在患有晚期癌癥的受試者中經歷I 期測試。
[0094] Medi 4736是在患有晚期惡性黑素瘤、腎細胞癌、NSCLC和結腸直腸癌的受試者中 的I期臨床測試中的抗ro-Li抗體。
[0095] CTLA4(細胞毒性T淋巴細胞相關蛋白質)是下調免疫系統的蛋白質受體。CTLA4在T 細胞的表面上發現，其導致對抗原的細胞免疫攻擊。T細胞攻擊可以通過刺激T細胞上的 CD28受體而開啟。T細胞攻擊可以通過刺激CTLA4受體而關閉。第一類免疫療法伊匹木單抗 (Yervoy)(靶向T細胞表面上的CTLA-4的單克隆抗體)被批準用于黑素瘤的治療。
[0096] 相應地，在一個實施方案中，本發明提供了在有此需要的受試者中治療癌癥或者 起始、增強或延長抗腫瘤應答的方法，其包括給受試者施用與其為檢查點抑制劑的試劑組 合的治療劑。在一個方面，檢查點抑制劑是生物學治療劑或小分子。在另一個方面，檢查點 抑制劑是單克隆抗體、人源化抗體、全人抗體、融合蛋白或其組合。在一個進一步方面，檢查 點抑制劑抑制檢查點蛋白質，其可以是CTLA-4、PDL1、PDL2、PD 1、B7-H3、B7-H4、BTLA、HVEM、 TIM3、GAL9、LAG3、VISTA、KIR、2B4、CD160、CGEN-15049、CHK 1、0?2、厶2&1?、8-7家族配體或其 組合。在一個另外方面，檢查點抑制劑與可以是下述的檢查點蛋白質的配體相互作用： CTLA-4、PDL1、PDL2、PD1、B7-H3、B7-H4、BTLA、HVEM、TIM3、GAL9、LAG3、VISTA、KIR、2B4、 CD160、CGEN-15049、CHK 1、0?2^2&1?、8-7家族配體或其組合。在一個方面，治療劑是免疫 刺激試劑、T細胞生長因子、白介素、抗體、疫苗或其組合。在一個進一步方面，白介素是IL-7 或IL-15。在一個特定方面，白介素是糖基化的IL-7。在一個另外方面，疫苗是樹突狀細胞疫 苗。
[0097] 在一個進一步方面，檢查點抑制劑和治療劑同時或以任一次序連續施用。在一個 另外方面，治療劑在檢查點抑制劑之前施用。在一個特定方面，治療劑是疫苗，并且檢查點 抑制劑是ro-Ι抑制劑。在一個進一步方面，疫苗是樹突狀細胞疫苗。
[0098] 在一個方面，治療由臨床結果;通過T細胞的抗腫瘤活性增加、增強或延長;與治療 前的數目相比較，抗腫瘤Τ細胞或活化Τ細胞數目的增加，或其組合決定。在另一個方面，臨 床結果是腫瘤消退;腫瘤縮小;腫瘤壞死;通過免疫系統的抗腫瘤應答;腫瘤擴大，復發或擴 散或其組合。在一個另外方面，治療效應通過Τ細胞的存在、指示Τ細胞炎癥的基因標記的存 在或其組合預測。
[0099] 在另一個方面，受試者患有癌癥。在一個另外方面，癌癥是任何實體瘤或液體癌 癥，包括泌尿生殖癌(例如前列腺癌、腎細胞癌、膀胱癌）、婦科癌癥(例如卵巢癌、宮頸癌、子 宮內膜癌）、肺癌、胃腸癌（例如非轉移性或轉移性結腸直腸癌、胰腺癌、胃癌、食道癌、肝細 胞癌、膽管細胞癌）、頭頸癌(例如頭頸鱗狀細胞癌）、惡性膠質母細胞瘤、惡性間皮瘤、非轉 移性或轉移性乳腺癌(例如激素難治性轉移性乳腺癌）、惡性黑素瘤、梅克爾細胞癌或骨與 軟組織肉瘤、和血液學瘤形成例如多發性骨髓瘤、急性髓性白血病、慢性髓性白血病、骨髓 增生異常綜合征和急性成淋巴細胞性白血病。在一個優選的實施方案中，疾病是非小細胞 肺癌(NSCLC)、乳腺癌（例如激素難治性轉移性乳腺癌）、頭頸癌（例如頭頸鱗狀細胞癌）、轉 移性結腸直腸癌、激素敏感性或激素難治性前列腺癌、結腸直腸癌、卵巢癌、肝細胞癌、腎細 胞癌、軟組織肉瘤或小細胞肺癌。
[0100] 在一個進一步方面，該方法進一步包括在用組合療法治療之前、與用組合療法治 療同時、或在用組合療法治療之后，給受試者施用化學治療劑、靶向療法或輻射。在一個另 外方面，腫瘤可以在治療劑和檢查點抑制劑施用之前被切除。
[0101 ]檢查點抑制劑包括以統計上顯著的方式阻斷或抑制免疫系統的抑制途徑的任何 試劑。這樣的抑制劑可以包括小分子抑制劑，或可以包括結合且阻斷或抑制免疫檢查點受 體的抗體或其抗原結合片段，或者結合且阻斷或抑制免疫檢查點受體配體的抗體。可以被 靶向用于阻斷或抑制的舉例說明性檢查點分子包括但不限于(^1^-4、？01^、^^2、？01、87- !13、87-!14、81'1^、見^]\1、641^9、1^63、1'1]\〇、￥15了4、1(11?、284(屬于002分子家族，并且在所有疆、 γ δ和記憶0)8+(αβ)Τ細胞上表達）、CD160(也稱為ΒΥ55)、CGEN-15049、CHK 1 和CHK2激酶、 A2aR和各種B-7家族配體。B7家族配體包括但不限于87-1、87-2、87-0(：、87-!11、87-!12、87- !13、87-!14、87-!15、87-!16和87-!17。檢查點抑制劑包括抗體或其抗原結合片段、其它結合蛋 白、生物學治療劑或小分子，其結合且阻斷或抑制下述中的一種或多種的活性：CTLA-4、 PDLl、PDL2、PDl、BTLA、HVEM、TIM3、GAL9、LAG3、VISTA、KIR、2B4、CD160和CGEN-15049。舉例說 明性免疫檢查點抑制劑包括曲美木單抗(CTLA-4阻斷抗體）、抗0X40、PD-L1單克隆抗體(抗 B7-Hl;MEDI4736)、MK-3475(ro-l 阻斷劑）、Nivolumab(抗抗體）、CT-011 (抗抗體）、 BY55單克隆抗體、AMP224(抗TOL1 抗體）、BMS-936559(抗TOL1 抗體）、MPLDL3280A(抗TOL1 抗 體）、MSB0010718C(抗TOL1抗體)和Yervoy/伊匹木單抗(抗CTLA-4檢查點抑制劑）。檢查點蛋 白質配體包括但不限于 PD-L1、PD-L2、B7-H3、B7-H4、CD28、CD86 和 ΤIM-3。
[0102]在一個特定實施方案中，本發明涵蓋特定類別的檢查點抑制劑的使用，其為阻斷 免疫檢查點受體程序性細胞死亡蛋白質I(ro-1)及其配體roL-1之間的相互作用的藥物。參 見A.Mullard，"New checkpoint inhibitors ride the immunotherapy tsunami，''Nature Reviews:Drug Discovery(2013)，12:489-49210-1在T細胞上表達且調節T細胞的活性。具 體地，當PD-1未與PDL-1結合時，T細胞可以銜接和殺死靶細胞。然而，當PD-1與PDL-1結合 時，它促使T細胞停止銜接和殺死靶細胞。此外，與其它檢查點不同，PD-1接近地作用，使得 PDL直接在癌細胞上過表達，這導致與ro-ι表達T細胞的結合增加。
[0103] 本公開內容的一個方面提供了其為抗體的檢查點抑制劑，其可以充當ro-i的激動 劑，從而調整由PD-1調節的免疫應答。在一個實施方案中，抗PD-1抗體可以是抗原結合片 段。本文公開的抗ro-ι抗體能夠結合人PD-1且激動PD-1的活性，從而抑制表達PD-1的免疫 細胞的功能。
[0104] 在一個特定實施方案中，本發明涵蓋特定種類的檢查點抑制劑的使用，所述檢查 點抑制劑是抑制CTLA-4的藥物。用于本發明的方法中的合適抗CTLA-4拮抗試劑包括但不限 于抗CTLA4抗體、人抗CTLA4抗體、小鼠抗CTLA4抗體、哺乳動物抗CTLA4抗體、人源化抗CTLA4 抗體、單克隆抗CTLA4抗體、多克隆抗CTLA4抗體、嵌合抗CTLA4抗體、MDX-010 (伊匹木單抗）、 曲美木單抗、抗⑶28抗體、抗CTLA4adnect in、抗CTLA4結構域抗體、單鏈抗CTLA4片段、重鏈 抗CTLA4片段、輕鏈抗CTLA4片段、激動共刺激途徑的CTLA4的抑制劑、在PCT公開號W02001/ 014424公開的抗體、在PCT公開號W02004/035607中公開的抗體、在美國公開號2005/ 0201994中公開的抗體、以及在授權的歐洲專利號EP 1212422 B1中公開的抗體。另外的 CTLA-4 抗體在美國專利號 5,811，097、5,855,887、6,051，227和6,984,720;?(：1'公開號￥0 01/14424和W0 00/37504;以及美國公開號2002/0039581和2002/086014中描述。可以用于 本發明的方法中的其它抗CTLA-4抗體包括例如公開于下述中的那些:W0 98/42752;美國專 利號6,682,736和6,207，156;!11^^七2等人，？仰。.他七1^。3(1.5(^.1]5厶，95(17):10067- 10071(1998) ;Camacho等人，J.Clin.0ncology，22(145) :Abstract Ν〇·2505(2004)(抗體 CP-675206) ;Mokyr等人，Cancer Res. ,58:5301-5304(1998)，以及美國專利號5,977,318、 6，682，736、7，109，003和7，132，281。
[0105] 另外的抗CTLA4拮抗劑包括但不限于下述:能夠破壞CD28抗原結合其同源配體的 能力，抑制CTLA4結合其同源配體的能力，經由共刺激途徑加強T細胞應答，破壞B7結合CD28 和/或CTLA4的能力，破壞B7活化共刺激途徑的能力，破壞⑶80結合⑶28和/或CTLA4的能力， 破壞CD80活化共刺激途徑的能力，破壞CD86結合CD28和/或CTLA4的能力，破壞CD86活化共 刺激途徑的能力，以及破壞一般而言共刺激途徑的活化的任何抑制劑。這種必要性包括共 刺激途徑的CD28、CD80、CD86、CTLA4以及其它成員的小分子抑制劑；針對共刺激途徑的 ⑶28、⑶80、⑶86、CTLA4以及其它成員的抗體;針對共刺激途徑的⑶28、⑶80、⑶86、CTLA4以 及其它成員的反義分子；針對共刺激途徑的〇028、0080、0086、01^4以及其它成員的 adnectin，共刺激途徑的⑶28、CD80、⑶86、CTLA4以及其它成員的RNAi抑制劑（單鏈和雙鏈 兩者），以及其它抗CTLA4拮抗劑。
[0106] 在一個特定實施方案中，本發明涵蓋特定種類的檢查點抑制劑的使用，所述檢查 點抑制劑是抑制TIM-3的藥物。阻斷TIM-3通過配體的活化導致Thl細胞活化的增加。此外， TIM-3已鑒定為由耗盡的⑶8+T細胞表達的重要的抑制受體。TIM-3也已報道為核酸介導的 抗腫瘤免疫的關鍵調節物。在一個例子中，??Μ-3已顯示在腫瘤相關樹突狀細胞(TADC)上是 上調的。
[0107] 在一個特定實施方案中，本發明涉及免疫刺激試劑、T細胞生長因子和白介素的使 用。免疫刺激試劑是通過誘導免疫系統組分中任一種的活化或增加其組分中任一種的活性 來刺激免疫系統的物質（藥物和營養素）。免疫刺激劑包括細菌疫苗、集落刺激因子、干擾 素、白介素、其它免疫刺激劑、治療疫苗、疫苗組合和病毒疫苗。
[0108] T細胞生長因子是刺激T細胞增殖的蛋白質。T細胞生長因子的例子包括11-2、兒- 7、IL-15、IL-17、IL20PIL-33。
[0109] 白介素是首先被視為由白血細胞表達的一組細胞因子。免疫系統的功能在很大程 度上取決于白介素，并且許多白介素的罕見缺陷已得到描述，全部表征自身免疫疾病或免 疫缺陷。白介素中的大多數通過輔助CD4T淋巴細胞，以及通過單核細胞、巨噬細胞和內皮細 胞合成。它們促進T和B淋巴細胞以及造血細胞的發育和分化。白介素的例子包括兒-1、幾- 2、11^-3、比-4、11^-5、11^-6、比-7、11^-8、比-9、11^-10、11^-11、幾-12、11^-13、11^-14、11^-15和11^- 17。
[0110] IL-15是結合復合物且通過復合物發信號的細胞因子，所述復合物由IL-2/IL-15 受體β鏈(⑶122)和共同的γ鏈（y-C，CD132)組成。IL-15在病毒感染后通過單核吞噬細胞 分泌。該細胞因子誘導天然殺傷細胞的細胞增殖;所述天然殺傷細胞是主要作用為殺死病 毒感染細胞的先天性免疫系統的細胞。
[0111] IL-7是由骨髓和胸腺中的基質細胞分泌的造血生長因子。IL-7刺激多潛能和多能 造血干細胞分化成淋巴樣祖細胞(與其中分化由IL-3刺激的髓樣祖細胞形成對比）。它還刺 激淋巴樣譜系中的所有細胞(B細胞、T細胞和NK細胞）的增殖。它對于B細胞成熟，T和NK細胞 存活、發育和穩態的某些階段期間的增殖是重要的。IL-7可以是糖基化的。
[0112] 在本文描述的某些方法或組合物中，另外的第三種、第四種、第五種、第六種、第七 種、第八種、第九種或第十種試劑。在某些實施方案中，另外的第三種、第四種、第五種、第六 種、第七種、第八種、第九種或第十種試劑是化學治療劑、細胞因子療法、干擾素療法(例如 INF-α)、白介素療法(例如IL-2、IL-7或IL-11)、集落刺激因子療法(例如G-CSF)、抗體療法、 病毒療法、基因療法或其組合。在某些實施方案中，另外的第三種、第四種、第五種、第六種、 第七種、第八種、第九種或第十種試劑可以在用本文描述的方法或組合物中的任一種治療 之前、與用本文描述的方法或組合物中的任一種治療同時、或在用本文描述的方法或組合 物中的任一種治療之后使用。
[0113] 癌癥治療劑或化學治療劑的例子包括烷化劑例如噻替派和環磷酰胺(CYTOXAN); 烷基磺酸鹽類例如白消安、英丙舒凡和哌泊舒凡;氮丙啶類例如苯佐替哌(benzodopa)、卡 波醌、美妥替哌（meturedopa)和烏瑞替哌（uredopa);乙撐亞胺類和甲基蜜胺類 (methylamelamines)，包括六甲蜜胺、三乙撐蜜胺、三乙撐磷酰胺、三乙撐硫代磷酰胺和三 輕甲基蜜胺（trimethylolomelamine);氮芥類例如苯丁酸氮芥、萘氮芥、 cholophosphamide、磷雌氮芥、異環磷酰胺、氮芥、鹽酸氧氮芥、美法侖、新氮芥、苯芥膽甾 醇、松龍苯芥、曲磷胺、尿啼啶氮芥;硝基脲類(nitrosureas)例如卡莫司汀、氯脲菌素、福莫 司汀、洛莫司汀、尼莫司汀、雷莫司汀;抗生素例如阿克拉霉素(aclacinomysins)、放射菌 素、authramycin、重氮絲氨酸、博來霉素、放線菌素 C、卡奇霉素、carabicin、洋紅霉素 (〇&1^11〇11^(^11)、嗜癌霉素、色霉素、放線菌素0、柔紅霉素、地托比星、6-重氮基-5-氧代-1^- 正亮氨酸、阿霉素、表柔比星、依索比星、伊達比星、麻西羅霉素、絲裂霉素、霉酚酸、諾加霉 素、橄欖霉素、派來霉素 、potfiromyc in、嘌呤霉素、三鐵阿霉素、羅多比星、鏈黑霉素、鏈唑 霉素、殺結核菌素、烏苯美司、凈司他丁、佐柔比星;抗代謝物例如甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶 (5-FU);葉酸類似物例如二甲葉酸、甲氨蝶呤、蝶羅呤、三甲曲沙；嘌呤類似物例如氟達拉 濱、6-巰基嘌呤、硫唑鳥嘌呤、硫鳥嘌呤;嘧啶類似物例如安西他濱、氮雜胞苷、6-氮雜尿苷、 卡莫氟、阿糖胞苷、雙脫氧尿苷、去氧氟尿苷、依諾他賓、氟尿苷、5-FU;雄激素類例如卡魯睪 酮、屈他雄酮丙酸酯、環硫雄醇、美雄烷、睪內酯；抗腎上腺藥(anti-adrenal)例如氨魯米 特、米托坦、曲洛司坦;葉酸補充劑例如亞葉酸(frolinic acid);醋葡醛內酯;醛磷酰胺糖 苷;氨基乙酰丙酸;安吖啶;bestrabuci 1;比生群；依達曲沙;磷胺氮芥(def of amine);秋水 仙胺;地吖醌;依氟鳥氨酸（elformithine);依利醋銨；依托格魯;硝酸鎵;羥基脲;香菇多 糖;氯尼達明；米托胍腙;米托蒽醌;莫哌達醇;硝氨丙吖啶;噴司他丁;蛋氨氮芥;吡柔比星； 鬼臼酸;2-乙基肼；甲基芐肼;PSK. RTM丙亞胺;西佐喃;鍺螺胺;細交鏈孢菌酮酸;三亞胺 醌;2，2 '，2〃-三氯三乙胺;烏拉坦;長春酰胺;氮烯咪胺;甘露醇氮芥;二溴甘露醇;二溴衛矛 醇;哌泊溴燒;gacytosine;阿拉伯糖苷（"Ara-C"）；環磷酰胺;噻替派;紫杉燒類，例如紫杉 醇（TAXOL?，Bristol-Myers Squibb Oncology，Princeton，N. J.)和多西他賽（TAX0TERE?， Rhne-Poulenc Rorer，Antony，法國）；苯丁酸氮芥；吉西他濱;6-硫鳥噪呤;疏基噪呤；甲氨 蝶呤；鉬類似物例如順鉑和卡鉑;長春堿；曲妥珠單抗、多西他賽、鉑;依托泊苷(VP-16);異 環磷酰胺;絲裂霉素 C;米托蒽醌;長春新堿;長春瑞濱;諾維本;諾消靈；替尼泊苷;道諾霉 素；氨喋呤；希羅達;伊班膦酸鹽;CPT-11;拓撲異構酶抑制劑RFS 2000;二氟甲基鳥氨酸 (DMF0);視黃酸衍生物例如Targretin ?(貝沙羅汀），Panretin?(阿利維A酸）；0NTAKT?(地 尼白介素2);埃斯波霉素;卡培他濱；以及上述任何一種的藥物學上可接受的鹽、酸或衍生 物。這個定義中還包括抗激素劑，所述抗激素劑用于調節或抑制激素對腫瘤的作用，例如抗 雌激素劑包括例如他莫昔芬、雷洛昔芬、芳香酶抑制性4(5)-咪唑、4-羥基他莫昔芬、曲沃昔 芬、那洛昔芬(keoxifene)、LY117018、奧那司酮和托瑞米芬(Fareston);以及抗雄激素劑例 如氟他胺、尼魯米特、比卡魯胺、亮丙瑞林和戈舍瑞林；以及上述任何一種的藥物學上可接 受的鹽、酸或衍生物。進一步的癌癥治療劑包括索拉非尼以及其它蛋白質激酶抑制劑例如 阿法替尼、阿西替尼、貝伐珠單抗、西妥昔單抗、克唑替尼、達沙替尼、厄洛替尼、福他替尼、 吉非替尼、伊馬替尼、拉帕替尼、樂伐替尼、莫立替尼、尼洛替尼、帕尼單抗、帕唑帕尼、哌加 他尼、蘭尼單抗、魯索利替尼、曲妥珠單抗、凡德他尼、維羅非尼、和舒尼替尼；西羅莫司（雷 帕霉素）、依維莫司以及其它mTOR抑制劑。
[0114] 另外的化學治療劑的例子包括拓撲異構酶I抑制劑(例如伊立替康、托泊替康、喜 樹堿及其類似物或代謝產物、和多柔比星）；拓撲異構酶II抑制劑(例如依托泊苷、替尼泊苷 和柔紅霉素）；烷化劑(例如美法侖、苯丁酸氮芥、白消安、噻替派、異環磷酰胺、卡莫司汀、洛 莫司汀、司莫司汀、鏈唑霉素、氮烯咪胺、氨甲蝶呤、絲裂霉素 C和環磷酰胺）；DNA嵌入劑(例 如順鉑、奧沙利鉑和卡鉑）；DNA嵌入劑和自由基生成劑例如博來霉素;和核苷模擬物(例如 5_氟尿嘧啶、卡培他濱、吉西他濱、氟達拉濱、阿糖胞苷、巰嘌呤、硫鳥嘌呤、噴司他丁和羥基 脲）。此外，破壞細胞復制的示例性化學治療劑包括:紫杉醇、多西他賽和相關類似物;長春 新堿、長春堿和相關類似物;沙利度胺、來那度胺和相關類似物(例如CC-5013和CC-4047); 蛋白酪氨酸激酶抑制劑(例如甲磺酸伊馬替尼和吉非替尼）；蛋白酶體抑制劑(例如硼替佐 米）；NF-κΒ抑制劑包括I κΒ激酶的抑制劑;結合在癌癥中過表達的蛋白質的抗體，以及已知 在癌癥中上調、過表達或活化的蛋白質或酶的其它抑制劑，所述蛋白質或酶的抑制下調細 胞復制。
[0115] 在一個特定實施方案中，本發明涉及治療疫苗的使用，包括癌癥疫苗和樹突狀細 胞疫苗。癌癥疫苗的目的是使免疫系統發動針對機體中的癌細胞的攻擊。換言之，癌癥疫苗 通過引發免疫系統攻擊機體中的癌細胞來起作用。相應地，代替預防疾病，癌癥疫苗意欲使 免疫系統攻擊已經存在的疾病。癌癥疫苗使用癌細胞、細胞的部分或純抗原，來增加針對已 經在機體中的癌細胞的免疫應答。
[0116]與傳統免疫加強療法不同，癌癥疫苗不只是改善一般而言的免疫系統，它們促使 免疫系統攻擊具有一種或多種特定抗原的細胞，并且在免疫系統中產生"攻擊記憶"。該"攻 擊記憶"允許免疫系統繼續攻擊癌細胞以阻止已進入緩解的癌癥進展和/或回復。
[0117]癌癥疫苗可以由實際癌細胞制備，所述癌細胞已從受試者中取出。一旦取出，癌細 胞就在實驗室中通常用輻射進行修飾，使得它們不能形成更多腫瘤。在實驗室中，科學家進 一步修飾癌細胞也是常見的。例如，癌細胞通常通過加入化學制品或新基因進行修飾，以使 得細胞更可能由免疫系統視為外來的。經修飾的細胞隨后注射回受試者內。免疫系統能夠 識別這些細胞上的抗原，并且通過天然生理過程找出且攻擊/殺死表達預期抗原的細胞。
[0118] 大多數疫苗是自體的。自體疫苗由取自它們以后將用于其中的相同個人的被殺死 的（例如用輻射或化學制品處理以致使癌細胞不能復制)細胞制成。換言之，細胞取自受試 者，進行修飾且隨后注射回相同受試者內。
[0119] 其它疫苗是同種異體的。同種異體疫苗由取自一個受試者的細胞制成且隨后注射 到第二個不同受試者內。雖然同種異體疫苗比自體疫苗更容易制備，但使用自體疫苗可能 是有益的，以避免外來細胞引入受試者內。
[0120] 存在多重類型的癌癥疫苗。癌癥疫苗的非限制性例子包括腫瘤細胞疫苗、抗原疫 苗、樹突狀細胞疫苗、DNA疫苗和基于載體的疫苗。
[0121]抗原疫苗通過使用一種或多種抗原來加強免疫系統，與含有數千種抗原的完整腫 瘤細胞形成對比。這些抗原一般是肽。抗原疫苗可以對于某一類型的癌癥是特異性的，因為 每個腫瘤類型可以通過特異性抗原特征譜得到鑒定。為了使這些疫苗的功效達到最大，在 疫苗中組合多重抗原可能是有益的，取決于特異性癌癥的抗原特征譜。
[0122] 樹突狀細胞疫苗通常是自體疫苗，并且必須常常對于每個受試者個別制備。用于 制備其的過程是復雜和昂貴的。醫生從血液中取出一些免疫細胞，并且使其在實驗室中暴 露于癌細胞或癌抗原，以及使其變成樹突狀細胞且幫助其生長的其它化學制品。樹突狀細 胞隨后注射回受試者內，在其中它們應引發針對機體中的癌細胞的免疫應答。樹突狀細胞 疫苗的非限制性例子是Sipuleucel-T(下文描述）。
[0123] DNA疫苗是第三種非限制性癌細胞疫苗。傳統癌細胞疫苗的一個局限性是當腫瘤 細胞或抗原作為疫苗注射到體內時，它們可以首先引起所需免疫應答，但它們隨著時間過 去可以變得較不有效。這是因為免疫系統將其識別為外來的，并且快速破壞其。如果沒有任 何進一步刺激，免疫系統通常回復至其正常的活性狀態(疫苗前）。促進持續免疫應答的一 種方式是使用DNA疫苗。
[0124] DNA是細胞中的物質，其含有細胞制備的蛋白質的遺傳密碼。載體可以改造為含有 可以注射到受試者內的特定DNA，其導致DNA由細胞吸收。一旦細胞吸收DNA，DNA就使細胞按 程序工作以制備特異性抗原，這隨后可以引發所需免疫應答。
[0125] 第四種非限制性癌癥疫苗是載體組合物。載體疫苗可以用于施用DNA疫苗的DNA。 載體是特定病毒、細菌、酵母細胞或其它結構，其可以用于使抗原或DNA進入受試者的細胞 內。載體是特別有用的，因為它們可以用于一次遞送超過一種癌抗原，這可以使得受試者的 免疫系統更可能發動應答。載體也是特別有用的，因為它們可以單獨(無需任何另外的DNA 或抗原)觸發免疫應答，當與DNA和/或抗原組合時，其將產生更強的免疫應答。
[0126] 樹突狀細胞可以直接施用到腫瘤內、在腫瘤的手術摘除或切除后施用到腫瘤床 內、在腫瘤周圍地(peri-tumorily)施用、施用到與腫瘤直接接觸的引流淋巴結內、施用到 導入或供給腫瘤或受腫瘤影響的器官的血管或淋巴管內，例如門靜脈或肺靜脈或動脈等 等。部分成熟的樹突狀細胞的施用可以與用于腫瘤的其它治療例如化學療法或放射療法同 時，或者在用于腫瘤的其它治療例如化學療法或放射療法之后。進一步地，部分成熟的樹突 狀細胞可以與另一種試劑共施用，所述試劑充當在腫瘤或者腫瘤附近或鄰近的區域內的樹 突狀細胞成熟和/或抗原加工的佐劑。此外，樹突狀細胞還可以配制或化合在緩慢釋放基質 中，用于植入在腫瘤或腫瘤床中或者在腫瘤或腫瘤床周圍的區域內，使得細胞緩慢釋放到 腫瘤或腫瘤床內，用于與腫瘤抗原接觸。
[0127] 部分成熟的樹突狀細胞還可以通過對于制劑和施用方式適當的任何方式進行施 用。例如，細胞可以與藥學可接受的載體組合，并且用注射器、導管、插管等等施用。如上，細 胞可以在緩慢釋放基質中配制。當以這種方式施用時，制劑可以通過對于使用的基質適當 的方式進行施用。本發明可應用的其它施用方法和模式是技術人員眾所周知的。
[0128] 樹突狀細胞組合物可以在個體的治療中單獨使用。此外，該組合物可以與任何其 它方法組合使用以治療腫瘤。例如，本發明的方法可以與腫瘤的手術切除、化學療法(細胞 毒性藥物、細胞凋亡劑、抗體等等）、放射療法、冷凍療法、近距離放射療法、免疫療法(抗原 特異性成熟的活化樹突細胞、NK細胞、對于腫瘤抗原特異性的抗體等的施用）等等組合使 用。這些方法中的任一種和全部均可以以任何組合來使用。組合治療可以是同時或連續的， 并且可以以如由治療醫生確定的任何次序施用。
[0129] 商購可得的癌癥疫苗的一個例子是Sipuleucel-T或Provenge?。它是用于治療 晚期前列腺癌的癌細胞疫苗，所述晚期前列腺癌無法通過傳統化學治療或激素療法治療。 對于這種疫苗，從受試者中分離受試者自身的免疫細胞，并且隨后使免疫細胞暴露于化學 制品，以使其轉換成樹突狀細胞。使樹突狀細胞暴露于前列腺酸性磷酸酶(PAP)，當再引入 受試者內時，其產生針對前列腺癌的免疫應答。特別重要的是，一旦經修飾的細胞再引入受 試者內，受試者的免疫系統就產生"攻擊記憶"，并且將受試者內的其它免疫細胞轉化成癌 癥攻擊細胞。
[0130] 樹突狀細胞疫苗的一個例子是DCVa^DCVax是一種平臺技術，其使用活化的樹突 狀細胞(免疫系統的主要細胞），并且設計為再振作和訓練免疫系統，以攻擊癌癥。DCVax使 用許多活性劑來命中癌癥上的許多革E(Liau，LM等人Journal of Neurosurgery 90:1115- 1124，1999;Prins RM等人J Immunother.2013Feb;36(2):152-7)〇
[0131] 在樹突狀細胞疫苗包括DCVax中存在使得疫苗在治療癌癥中有效的三個關鍵方 面：（1)樹突狀細胞疫苗設計為動員整個免疫系統，而不僅是該總體系統中的免疫因子的許 多不同類別中的一種。如上所述，DCVax包括活化、經訓練的樹突狀細胞，并且樹突狀細胞是 免疫系統的主要細胞，其動員或幫助整個免疫系統。完全免疫系統涉及許多類型的抗體，以 及除抗體外的許多其它種類的因子。樹突狀細胞動員全部這些不同的因子類別，包含整個 免疫系統"軍隊"，與彼此組合且處于與彼此的天然關系中。（2)樹突狀細胞疫苗設計為不只 是靶向受試者的腫瘤上的生物標記物中的一種而是全部集合，這使得腫瘤更難以突變和轉 移。（3)樹突狀細胞疫苗是個人化的，并且靶向在該受試者的腫瘤上表達的特定生物標記 物。
[0132] 為了制備用于受試者的樹突狀細胞疫苗，通過抽血獲得受試者的免疫細胞。對于 全身施用，使單核細胞分化成樹突狀細胞，成熟、活化且裝載來自受試者自身的腫瘤組織的 生物標記物。生物標記物到樹突狀細胞內的裝載"訓練"細胞關于免疫系統需要攻擊的那 些。活化的經訓練的樹突狀細胞隨后以極高純度分離，并且通過在上臂中的簡單皮內注射 施用于受試者。樹突狀細胞隨后將腫瘤生物標記物信息傳達給免疫系統因子的剩余部分(T 細胞、B細胞及其它），其隨后靶向具有這些生物標記物的細胞。
[0133] 對于瘤內施用，使單核細胞分化成樹突狀細胞且部分成熟。細胞隨后通過直接注 射到腫瘤內進行施用。在注射到腫瘤內之后，樹突狀細胞原位挑選腫瘤生物標記物，并且將 腫瘤生物標記物信息傳達給免疫系統因子的剩余部分(T細胞、B細胞及其它），其隨后靶向 具有這些生物標記物的細胞。
[0134] 重要的是，疫苗中的每種活化、經訓練的樹突狀細胞具有大的倍增效應，動員數百 種T細胞及其它免疫細胞。因此，小劑量的這樣的樹突狀細胞可以動員大且持續的免疫應 答。
[0135] 在一個實施方案中，樹突狀細胞組合物可以用作第一治療或引發劑，用于第二檢 查點抑制劑治療。通過在檢查點抑制劑之前施用樹突狀細胞組合物，免疫系統(特別是T細 胞)變得活化，這允許針對檢查點抑制劑的增強應答。
[0136] 在一個實施方案中，檢查點抑制劑首先施用以"解鎖"免疫應答的起始，隨后為癌 癥疫苗療法。例如，將檢查點抑制劑施用于受試者，隨后為樹突狀細胞組合物。
[0137] 在一個特定實施方案中，樹突狀細胞和受體受試者具有相同MHC(HLA)單體型。測 定受試者的HLA單體型的方法是本領域已知的。在一個相關實施方案中，部分成熟的樹突狀 細胞對于受體受試者是同種異體的。同種異體細胞通常對于至少一種MHC等位基因是匹配 的(例如共享至少一種而不是全部MHC等位基因）。在一個較不典型的實施方案中，樹突狀細 胞和受體受試者就彼此而言都是同種異體的，但都具有至少一種共同的MHC等位基因。
[0138] 施用包括在施用治療劑之前、與施用治療劑同時、或在施用治療劑之后，施用檢查 點抑制劑的一個或多個周期或劑量，所述治療劑例如為白介素例如IL-7或IL-5,或疫苗例 如樹突狀細胞疫苗，或反之亦然。本領域技術人員可以確定哪種治療方案在逐個受試者的 基礎上是適當的，取決于其癌癥及其免疫狀態（例如T細胞、B細胞或NK細胞活性和/或數 目）。
[0139] 檢查點抑制劑和治療劑的組合在治療一些受試者中的癌癥中可以是更有效的， 和/或可以起始、實現、增加、增強或延長免疫細胞(包括T細胞、B細胞、NK細胞和/或其它）的 活性和/或數目，或傳達通過腫瘤的醫學有益應答(包括其消退、壞死或消除）。
[0140] 在某些方面，使用裝載有自體或同種異體(例如來自細胞系）腫瘤抗原的自體或同 種異體樹突狀細胞，在檢查點抑制劑施用之前誘導免疫應答，以起始或使實現抗腫瘤免疫 應答，隨后施用檢查點抑制劑。
[0141] 在某些方面，使用裝載有自體或同種異體(例如來自細胞系）腫瘤抗原的自體或同 種異體樹突狀細胞，在檢查點抑制劑施用之前誘導免疫應答，以增強預先存在的抗腫瘤免 疫應答，隨后施用檢查點抑制劑。
[0142] 在某些方面，使用對于自體腫瘤抗原特異性的自體或同種異體T細胞，在檢查點抑 制劑施用之前誘導或增強免疫應答，以增強預先存在的抗腫瘤免疫應答，隨后施用檢查點 抑制劑。
[0143] 在某些方面，使用直接施用到腫瘤內或施用至腫瘤外周用于體內抗原裝載的自體 或同種異體樹突狀細胞，在檢查點抑制劑施用之前誘導免疫應答，以起始或使實現抗腫瘤 免疫應答，隨后施用檢查點抑制劑。
[0144] 在某些方面，使用直接施用到腫瘤內或施用至腫瘤外周用于體內抗原裝載的自體 或同種異體樹突狀細胞，在檢查點抑制劑施用之前誘導免疫應答，以增強預先存在的抗腫 瘤免疫應答，隨后施用檢查點抑制劑。
[0145] 在某些方面，使用裝載有自體腫瘤抗原的同種異體樹突狀細胞，在檢查點抑制劑 施用之前誘導免疫應答，以起始抗腫瘤免疫應答，隨后施用檢查點抑制劑。
[0146] 在某些方面，使用裝載有自體腫瘤抗原的同種異體樹突狀細胞，在檢查點抑制劑 施用之前誘導免疫應答，以增強預先存在的抗腫瘤免疫應答，隨后施用檢查點抑制劑。
[0147] 在某些方面，使用直接施用到腫瘤內或施用至腫瘤外周用于體內抗原裝載的同種 異體樹突狀細胞，在檢查點抑制劑施用之前誘導免疫應答，以起始抗腫瘤免疫應答，隨后施 用檢查點抑制劑。
[0148] 在某些方面，使用直接施用到腫瘤內或施用至腫瘤外周用于體內抗原裝載的同種 異體樹突狀細胞，在檢查點抑制劑施用之前誘導免疫應答，以增強預先存在的抗腫瘤免疫 應答，隨后施用檢查點抑制劑。
[0149] 在某些方面，使用離體擴增和或活化的自體抗腫瘤Τ細胞，在檢查點抑制劑施用之 前誘導免疫應答，以起始抗腫瘤免疫應答，隨后施用檢查點抑制劑。
[0150] 在某些方面，使用離體擴增和或活化的抗腫瘤Τ細胞，在檢查點抑制劑施用之前誘 導免疫應答，以增強預先存在的抗腫瘤免疫應答，隨后施用檢查點抑制劑。
[0151] 在本發明的某些實施方案中，治療性癌癥疫苗或過繼性Τ細胞療法在檢查點抑制 劑前按時間順序施用。在某些實施方案中，治療性癌癥疫苗或過繼性Τ細胞療法在檢查點抑 制劑施用之前1小時、2小時、3小時、4小時、5小時、6小時、7小時、8小時、9小時、10小時、11小 時、12小時、1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、15天、 16天、17天、18天、19天、20天、21天、22天、23天、24天、25天、26天、27天、28天、29天、1個月或 其任何組合施用。
[0152] 在本發明的某些實施方案中，治療性癌癥疫苗或過繼性Τ細胞療法與檢查點抑制 劑同時按時間順序施用。
[0153] 在本發明的某些實施方案中，治療性癌癥疫苗或過繼性Τ細胞療法在檢查點抑制 劑后按時間順序施用。在某些實施方案中，檢查點抑制劑在治療性癌癥疫苗或過繼性Τ細胞 療法施用之前1小時、2小時、3小時、4小時、5小時、6小時、7小時、8小時、9小時、10小時、11小 時、12小時、1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、15天、 16天、17天、18天、19天、20天、21天、22天、23天、24天、25天、26天、27天、28天、29天、1個月或 其任何組合施用。
[0154] 在上文描述的所有方面，誘導、使實現或增強抗腫瘤應答或免疫應答的方法可以 通過首先施用檢查點抑制劑，并且在其后時間點施用誘導、使實現或增強抗腫瘤應答或免 疫應答的第二試劑來完成。
[0155] 在另一個實施方案中，本發明提供了用于增強或延長檢查點抑制劑的效應，或使 得受試者能夠響應檢查點抑制劑，或使得能夠減少檢查點抑制劑的毒性或劑量的方法，其 包括給有此需要的受試者施用與檢查點抑制劑組合的治療劑，其中所述受試者患有癌癥。 在一個方面，檢查點抑制劑是生物學治療劑或小分子。在另一個方面，檢查點抑制劑是單克 隆抗體、人源化抗體、全人抗體、融合蛋白或其組合。在一個進一步方面，檢查點抑制劑抑制 檢查點蛋白質，其可以是CTLA-4、PDL1、roL2、PD 1、B7-H3、B7-H4、BTLA、HVEM、TIM3、GAL9、 LAG3、VISTA、KIR、2B4、CD160、CGEN-15049、CHK 1、(：服2、4231?、8-7家族配體或其組合。在一 個方面，檢查點抑制劑與可以是下述的檢查點蛋白質的配體相互作用:CTLA-4、PDL 1、TOL2、 PD1、B7-H3、B7-H4、BTLA、HVEM、TIM3、GAL9、LAG3、VISTA、KIR、2B4、CD160、CGEN-15049、CHK l、CHK2、A2aR、B-7家族配體或其組合。在一個另外方面，治療劑選自免疫刺激試劑、T細胞生 長因子、白介素、抗體和疫苗或其組合。在一個進一步方面，白介素是IL-7或IL-15。在一個 方面，白介素是糖基化的IL-7。在一個另外方面，疫苗是樹突狀細胞疫苗。
[0156] 在一個進一步方面，檢查點抑制劑和治療劑同時或以任一次序連續施用。在一個 另外方面，治療劑在檢查點抑制劑之前施用。在一個特定方面，治療劑是疫苗，并且檢查點 抑制劑是ro-ι抑制劑。在一個進一步方面，疫苗是樹突狀細胞疫苗。
[0157] 在另一個方面，癌癥是任何實體瘤或液體癌癥，包括泌尿生殖癌（例如前列腺癌、 腎細胞癌、膀胱癌）、婦科癌癥(例如卵巢癌、宮頸癌、子宮內膜癌）、肺癌、胃腸癌(例如非轉 移性或轉移性結腸直腸癌、胰腺癌、胃癌、食道癌、肝細胞癌、膽管細胞癌）、頭頸癌(例如頭 頸鱗狀細胞癌）、惡性膠質母細胞瘤、惡性間皮瘤、非轉移性或轉移性乳腺癌(例如激素難治 性轉移性乳腺癌）、惡性黑素瘤、梅克爾細胞癌或骨與軟組織肉瘤、和血液學瘤形成例如多 發性骨髓瘤、急性髓性白血病、慢性髓性白血病、骨髓增生異常綜合征和急性成淋巴細胞性 白血病。在一個優選的實施方案中，疾病是非小細胞肺癌(NSCLC)、乳腺癌(例如激素難治性 轉移性乳腺癌）、頭頸癌(例如頭頸鱗狀細胞癌）、轉移性結腸直腸癌、激素敏感性或激素難 治性前列腺癌、結腸直腸癌、卵巢癌、肝細胞癌、腎細胞癌、軟組織肉瘤或小細胞肺癌。
[0158] 在一個進一步方面，方法進一步包括在用組合療法治療之前、與用組合療法治療 同時、或在用組合療法治療之后，給受試者施用化學治療劑、靶向療法或輻射。在一個另外 方面，腫瘤可以在治療劑和檢查點抑制劑施用之前被切除。在一個進一步的實施方案中，本 發明提供了包含與生物學治療劑組合的檢查點抑制劑的藥物組合物。在一個方面，生物學 治療劑是疫苗。
[0159] 在特定實施方案中，使用癌細胞疫苗來誘導、起始或增強免疫應答。具體地，癌癥 疫苗可以是樹突狀細胞疫苗。在特定實施方案中，免疫應答可以使用抗腫瘤T細胞來誘導、 起始或增強。在特定實施方案中，免疫應答可以通過細胞毒性T細胞的誘導來誘導、起始或 增強。
[0160] 在特定實施方案中，本文描述的方法和組合物可以用于治療癌癥。具體地，本文描 述的方法和組合物可以用于減小實體瘤的尺寸，或減少癌癥的癌細胞數目。本文描述的方 法和組合物可以用于減慢癌細胞生長的速率。本文描述的方法和組合物可以用于停止癌細 胞生長的速率。
[0161] 如本文公開的治療劑、檢查點抑制劑、生物學治療劑或藥物組合物可以通過各種 途徑施用于個體，包括例如經□或腸胃外，例如靜脈內、肌內、皮下、眶內、囊內、腹膜內、直 腸內、腦池內、瘤內、鼻內（intravasally)、皮內或者分別使用例如皮膚貼片或透皮離子電 滲療法通過皮膚的被動或促進吸收。治療劑、檢查點抑制劑、生物學治療劑或藥物組合物還 可以施用于病理狀況的部位，例如靜脈內或動脈內進入供應腫瘤的血管內。
[0162]在實踐本發明的方法中待施用的試劑總量可以作為單一劑量以推注或通過在相 對短時間段的輸注，施用于受試者，或可以使用分級治療方案進行施用，其中在延長時間段 施用多個劑量。本領域技術人員將知道治療受試者中的病理狀況的組合物的量取決于許多 因素，包括受試者的年齡和一般健康、以及施用途徑和待施用的治療次數。考慮到這些因 素，技術人員將根據需要調整具體劑量。一般而言，最初，使用I期和II期臨床試驗測定組合 物的配制以及施用途徑和頻率。
[0163] 在某些實施方案中，檢查點抑制劑以0 ·01mg/kg、0 ·05mg/kg、0 · lmg/kg、0 · 2mg/kg、 0·3mg/kg、0·5mg/kg、0.7mg/kg、lmg/kg、2mg/kg、3mg/kg、4mg/kg、5mg/kg、6mg/kg、7mg/kg、 8mg/kg、9mg/kg、lOmg/kg或其任何組合的劑量施用。在某些實施方案中，檢查點抑制劑每周 施用一次、每周施用兩次、每周施用三次、每兩周施用一次、或每個月施用一次。在某些實施 方案中，檢查點抑制劑作為單一劑量、在兩個劑量中、在三個劑量中、在四個劑量中、在五個 劑量中、或在6個或更多個劑量中施用。
[0164] 在某些實施方案中，本文描述的方法和組合物以試劑盒的形式包裝。在某些實施 方案中，用于執行方法和使用組合物的說明書包括在試劑盒中。
[0165] 在其它實施方案中，提供了包含對于治療上述病癥有用的材料的制品。該制品包 括容器和標簽。適當的容器包括例如瓶、小瓶、注射器和試管。該容器可以由各種材料例如 玻璃或塑料制成。該容器包含對治療病況有效的組合物并可具有無菌入口（例如，容器可以 是具有塞子的靜脈注射溶液袋或小瓶，所述塞子可被皮下注射針頭刺穿）。在組合物中的活 性劑是抗體。在容器上或與容器相關聯的標簽標明組合物用于治療所選擇的病況。該制品 可以進一步包括第二個容器，所述第二個容器包含藥物學上可接受的緩沖液，例如磷酸鹽 緩沖鹽水、林格(Ringer's)溶液以及葡萄糖溶液。它可以進一步包括從商業和用戶立場上 所需要的其它材料，包括其它緩沖液、稀釋劑、過濾器、針、注射器和具有使用說明的包裝說 明書。
[0166] 如附圖和實施例中所示，神經膠質瘤微環境中的ro-1/PD-Ll負面共刺激軸得到表 征，并且記錄到與裂解產物脈沖的樹突狀細胞疫苗接種相關的增加的腫瘤浸潤調節細胞群 體(Treg，iAPC)。用佐劑抗Η)-1 Ab阻斷此機制實現細胞毒性T細胞活化和至腫瘤的運輸，并 且促進非抑制性腫瘤環境。組合DC疫苗接種和抗H)-lAb療法促進鼠神經膠質瘤模型中的顯 著長期存活。這些機制已得到描繪，且提供了利用MR和新型PET成像探針來體內非侵入性表 征免疫功能的實際臨床成像關聯物。
[0167] 具體地，附圖顯示在具有良好建立的顱內神經膠質瘤的小鼠中，腫瘤裂解產物脈 沖的DC疫苗接種仍導致活化T淋巴細胞的顯著浸潤，但沒有任何臨床利益。進一步地，抑制 性髓樣細胞群體在顱內GL261神經膠質瘤中累積，并且該群體在DC疫苗接種后顯著增加。 PD-1阻斷性抗體的佐劑處理連同腫瘤裂解產物脈沖的DC疫苗接種一起阻止抑制性髓樣細 胞在顱內GL261神經膠質瘤中的累積增加。這導致活化T淋巴細胞的瘤內累積中的顯著增 加，引人注目的存活延長，以及對腫瘤的免疫記憶生成。進一步地，腫瘤裂解產物對DC的過 夜脈沖活化這些細胞，并且導致ro-Li的表達減少，表明活化和/或成熟將減少抑制性免疫 功能，因為抑制性髓樣細胞是DC和巨噬細胞的骨髓衍生的前體群體。
[0168] 根據本公開內容，本領域技術人員應了解在所公開的具體實施方案中可以作出許 多變化或改變，并且仍獲得相同或相似結果，而不背離本發明的精神和范圍。本發明在范圍 上并不受限于本文描述的具體實施方案(其僅預期作為本發明的各方面的舉例說明），并且 功能等價的方法和組分在本發明的范圍內。事實上，本發明的各種修飾加上本文顯示且描 述的那些，根據前述描述對于本領域技術人員將變得明顯。
[0169] 提供下述實施例以進一步舉例說明本發明的實施方案，但不預期限制本發明的范 圍。雖然它們是可以使用的那些的代表，但可以備選地使用本領域技術人員已知的其它程 序、方法或技術。
[0170] 實施例1
[0171 ]神經膠質瘤微環境拒絕通過DC疫苗接種促進的抗腫瘤免疫應答
[0172] 在用GL261鼠神經膠質瘤顱內植入的C57BL/6小鼠中，可能存在有限的針對腫瘤的 內源免疫應答（圖1A)。小鼠顱內植入有GL261鼠神經膠質瘤，并且隨后在腫瘤植入后第3和 13天時，皮下施用roS(lx)或裂解產物脈沖的DC疫苗。在第16天時，在第二次處理后72小時， 對小鼠實施安樂死，并且收獲脾、淋巴和腦半球用于加工。使用裂解產物脈沖的樹突狀細胞 的疫苗接種促進CD3+淋巴細胞的顯著腫瘤浸潤，其中大多數是活化的CD8+CD25+淋巴細胞。 為了測定這些細胞群體的總體生理效應，維持兩組具有GL261神經膠質瘤的小鼠（對照和DC 疫苗處理的）且監控存活。當DC疫苗接種給予大的顱內腫瘤時，在兩組之間未記錄到存活益 處（圖1C)。
[0173] 實施例2
[0174] PD-1/ro-LlT細胞-神經膠質瘤相互作用促進抗炎性腫瘤微環境
[0175] 為了評估ro-1/PD-Ll腫瘤T細胞相互作用的效應，在抗PD-lmAb的存在下，將來自 Pmel-ITCR轉基因小鼠的gp-100特異性T細胞與GL261-gp100 鼠神經膠質瘤細胞共培養。將 24小時后收集的上清液進行加工，并且用小鼠32-plex細胞因子/趨化因子Luminex測定法 進行分析。促炎細胞因子IFNy和TNFa顯示顯著增加，而抗炎信號傳導（IL-10和IL-4)隨著 Η)-1抑制而下降。使用xCELLigence系統評估細胞毒性，所述xCELLigence系統提供通過T細 胞的腫瘤殺死的實時、基于阻抗的讀出。PD-1的抑制有效支持在10小時時間點時更大百分 比的腫瘤細胞殺死。
[0176] 實施例3
[0177] 在具有神經膠質瘤的小鼠中ro-1/PD-Ll負面共刺激軸的抑制促進抗
[0178] 腫瘤應答
[0179]假設通過疫苗接種處理促進的抗腫瘤應答通過腫瘤微環境中的PD-1/PD-L1信號 傳導得到緩和。在從DC疫苗處理的小鼠收獲的腫瘤中存在表達PD-L1的顯著抑制性髓樣群 體(Ly6C+)，其不存在于對照小鼠中。為了評估該群體，檢查對于對照和DC疫苗處理的兩種 另外療法:抗ro-lmAb處理和組合DC疫苗與抗ro-lmAb處理的組。在植入后第16天(在第二次 處理后72小時）收獲脾、淋巴和腦半球用于加工。記錄到dc疫苗/抗ro-i處理的小鼠的顯著 活化的細胞毒性til和淋巴結。雖然抑制性髓樣群體在dc疫苗/抗ro-i處理的小鼠中存留， 但當與單獨的DC疫苗處理相比較時，它是顯著減少的。在抗ro-i小鼠中，它不是顯著可檢測 的。為了評估治療益處，將小鼠植入、處理且監控存活。組合dc疫苗/抗ro-i處理顯示超過其 它組的顯著存活益處。
[0180] 利用Ly6C耗盡Ab或臨床相關CSFlr抑制藥物PLX3397來耗盡抑制性髓樣群體。在具 有GL261的小鼠中這些細胞的耗盡完全恢復在用DC疫苗/抗PD-1處理的小鼠中觀察到的存 活益處。在植入后第16天(在第二次處理后72小時)收獲脾、淋巴和腦半球用于加工。在腫瘤 微環境中這些Ly6C+PD-Ll+細胞的不存在得到證實，并且記錄到⑶3+⑶8+⑶25+活化淋巴細 胞的顯著腫瘤浸潤群體。在用DC疫苗/抗PD-1處理的小鼠中CD8+細胞的耗盡消除與該處理 相關的所有治療益處（圖4c)。組織收獲物證實全身和在腫瘤部位處的活化淋巴細胞的不存 在。
[0181] 實施例4
[0182] PET和MR成像模式的新型使用允許DC疫苗/抗Η)-1療法的非侵入
[0183] 丨生評估
[0184] 假設DC疫苗/抗PD-1療法的治療進展可以利用MRI(磁共振成像)和PET(正電子發 射斷層掃描術)成像技術進行監控。將顱內植入有GL261的小鼠分成四個處理組(無處理、DC 疫苗、抗ro-lmAb和DC疫苗/抗PD-1)，并且用[18F]-L-FAC或[18F]-D-FAC PET探針成像，以 使運輸至腫瘤的活化淋巴細胞成像。在植入后第21天時，使用Bruker 7T MR掃描儀(UCLA) 使小鼠成像，以獲得對比前和對比后T1加權像、T2圖以及動態對比增強(DCE)和動態靈敏性 對比(DSC)灌注數據。在成像后，對小鼠實施安樂死，并且收獲腦組織用于切片和IHC。將PET 和對比后T1加權MR數據共同登記，以描繪針對陽性PET探針信號的陽性MR腫瘤對比。當與其 它處理組相比較時，DC疫苗處理和DC疫苗/抗PD-1處理組顯示減少的腫瘤負荷和增加的免 疫浸潤。在等價的解剖腦組織切片上，陽性PET和MR信號分別與⑶3+和Ki-67+IHC染色關聯。
[0185] 實施例5
[0186] 材料與方法
[0187] 細胞系。鼠神經膠質瘤細胞系GL261和GL261_gp100 維持在完全DMEM(Mediatech， Inc .Herndon，VA)(補充有 10%FBS(Gemini Bio-Products，West Sacramento，CA)、1 % (v/ v)青霉素和鏈霉素 (Mediatech Cellgro，Manassas，VA))中，并且在5%C〇2的加濕大氣中在 37 °C下進行培養。
[0188] Pmel-IT細胞的體外活化。從Pmel-ITCR轉基因小鼠 （n = 2)中收獲脾和淋巴結，并 且在補充有2%?85的父￥1￥0-15(1^〇1^3，如11^『8￥1116，]\?))中，與人11^-2(10011]/11^，叱1 Preclinical Repository,Developmental Therapeutics Program)和hgp100 25_33肽 (lug/mL，NH2-KVPRNQDWL-OH，Biosynthesis，Inc.，Lewisville，TX) -起培養。在72小時后， 細胞用PBS lx進行洗滌，并且以lx 106細胞/mL的濃度在IL-2和hgp100 25-33肽中進行培 養。
[0189] PD-1的體外抑制。細胞在如上所述補充有luM抗PD-lAb(BioXCell，West Lebanon， NH)的適當培養基中進行培養。對于培養的持續時間，培養基每24小時替換為具有抗H)-lAb 的新鮮培養基制劑。
[0190] 細胞因子/趨化因子Luminex測定法。Pmel T細胞和GL261-gp100 細胞在補充有luM 抗PD-lAb的完全DMEM培養基中以10:1的效應物:靶(E: T)比共培養。在24小時后收集上清 液，并且在液氮中速凍。使用小鼠32-plex細胞因子/趨化因子Luminex測定法的分析與 Dr.Elaine Reed(UCLA)合作執行。
[0191] xCELLigence實時細胞毒性測定法D用xCELLigence Real-Time Cell Analyzer System(Acea Biotechnology，San Diego，CA)評價腫瘤細胞的細胞毒性殺死。將革EGL261- gplOO細胞鋪平板（105細胞/孔)在150yL培養基中。在腫瘤細胞貼壁至孔底部過夜后，效應 細胞(Pmel T細胞）以10:1的E:T比加入。對于對照，通過l%Triton X-100加入僅含有腫瘤 的另外孔獲得最大細胞釋放。在24小時內收集細胞指數(CI)值(相對細胞阻抗）。值針對恰 在效應細胞鋪平板之前的最大CI值標準化。計算在任何時間點的標準化Cl(nCI)與初始效 應細胞鋪平板的nCI的比例，以描繪腫瘤裂解百分比（23)。
[0192] GL261裂解產物制備。GL261神經膠質瘤細胞在完全DMEM培養基中進行培養和擴 增。隨后收獲細胞且通過幾個凍融循環進行傳代，并且隨后過濾懸浮液。裂解產物濃度使用 Bradford蛋白質測定法進行定量。
[0193] 骨髓衍生的DC和疫苗接種。來自鼠骨髓祖細胞的DC制劑如先前公開的進行制備 (Prins等人，Cancer Research 63:8487(2003))。簡言之，骨髓細胞在5%C02的加濕大氣中 在 37°C下在完全 1^]\〇(]^乜3丨6(*，111(3.!16?1(1〇11，￥4)(補充有10%?85、1%(￥八)青霉素和鏈 霉素）中培養過夜。第二天，收集非貼壁細胞，并且與鼠白介素-4(IL-4,400IU/mL，R&D Systems Minneapolis，MN)和鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF，100ng/ml，R&D Systems，Minneapolis，MN)-起鋪平板。在第4天時，貼壁細胞用具有相同細胞因子的新鮮 培養基再進料。在第7天時，將DC收獲且以lx 106細胞/ml重懸浮于完全RPMI中，并且用 GL261裂解產物（250yg/mL)進行脈沖。在第8天時，將DC收集且以2x 106細胞/ml重懸浮于 PBS lx中，并且立即制備用于以0.2ml細胞懸浮液/小鼠注射。注射在背部上的4個部位處皮 下(s. c.)給予。
[0194] 顱內神經膠質瘤植入。6-10周齡的雌性C57BL/6小鼠得自我們的機構育種群。所有 小鼠均在UCLA的AALAC批準的Animal Facility of the Division of Experimental Radiation Oncology繁育且維持在確定的無菌群病原體條件下。小鼠依照UCLA動物護理政 策和批準的動物方案進行處理。小鼠用氯胺酮/賽拉嗪的腹膜內（i.p.)注射進行麻醉。在剃 毛且切開聚維酮擦拭的頭皮后，伴隨小鼠的頭部固定在立體定向儀中，使用牙鉆在頭蓋骨 中制備前鹵橫向2.5111111的鉆孔。61^61神經膠質瘤細胞(在2以1?83中21104)用配備26號針 的無菌Hamilton注射器進行立體定向注射。顏內注射在2分鐘時期內且在硬膜下3.5mm的深 度處發生。在細胞完全輸注后將注射器保留在腦中進行另外一分鐘，并且隨后緩慢抽出以 防止細胞泄露到柔腦膜空間內。在顱內腫瘤植入后，NSG小鼠隨機化到處理組(n = 6-16)內。
[0195] 體內抗FO-lmAb處理。抗]^-lmAb在適當的處理日以250mg/kg(大約250yg/小鼠）進 行i.p.施用。
[0196] 組織收獲、免疫組織化學和流式細胞術。在第21天時從小鼠中收獲脾、淋巴結和腫 瘤。在其中需要切片和免疫組織化學的情況下，將組織置于Zinc Fixative (lx，BD Biosciences，San Jose，CA)中24小時，并且隨后轉移至70%乙醇，然后在石蠟中包埋。使脾 和淋巴結經過70um細胞過濾器，以生成單細胞懸浮液。在低滲裂解后獲得淋巴細胞，并且使 用臺盼藍拒染法進行計數。為了測定腫瘤浸潤淋巴細胞(TIL)的數目，將荷瘤半球小心地稱 重且隨后用解剖刀剁碎。組織隨后置于旋轉器上處于具有DNA酶的膠原酶中24小時，隨后使 用30%: 70%Percoll梯度分離淋巴細胞。通過臺盼藍拒染法計數在腫瘤內的小單核細胞。 大約lxlO6淋巴細胞用于染色。通過測定⑶8+細胞總數目/荷瘤半球來計算TIL。針對⑶3、 0)4、0)8、0)25小(《?3、1^6(：、^)-1和^)-1^的熒光染料綴合的抗體得自扮〇168611(1。所有?八〇3 分析均使用LSRIKBD Biosciences)來執行。門控基于同種型特異性對照抗體進行設置(數 據未示出）。數據使用Flowjo軟件進行分析。
[0197] 體內PET和MR成像。小鼠用在02/fc流下的1-3 %異氟烷進行鎮靜，并且監控呼吸。使 用TP500水栗(Gaymar Solid State)，將水循環加熱至37°C，來使小鼠保持溫暖。在掃描前1 小時進行PET探針的尾靜脈施用。PET掃描。執行尾靜脈導管插入，以在掃描期間的適當時間 點施用對比劑（釓，X u g /小鼠）。所有圖像均在具有定制的2.2 - c m R F鳥籠式線圈的7 T Bruker Biospec系統上采集。我們收集使用快速低角度拍攝(FLASH)的二維對比前T1加權 像；多層多回波(MSME)自旋回波T2加權掃描用于計算定量T2圖（16次回波，其中TE范圍為 10-160ms，間隔為10ms)，78um2平面內分辨率和1mm層面厚度；多翻轉角度3D FLASH T1加權 像用于計算對比前T1圖，使用2-20度的翻轉角度；以及高分辨率3D對比后T1加權像。
[0198] 盡管本發明已參考上述實施例進行描述，但應理解修飾和改變涵蓋在本發明的精 神和范圍內。相應地，本發明僅受限于所附的權利要求書。
【主權項】
1. 一種在有此需要的受試者中治療癌癥或者起始、增強或延長抗腫瘤應答的方法，其 包括給所述受試者施用與其為檢查點抑制劑的試劑組合的治療劑。2. 權利要求1的方法，其中所述檢查點抑制劑是生物學治療劑或小分子。3. 權利要求1的方法，其中所述檢查點抑制劑選自單克隆抗體、人源化抗體、全人抗體 和融合蛋白或其組合。4. 權利要求1的方法，其中所述檢查點抑制劑抑制選自下述的檢查點蛋白質：CTLA-4、 PDL1、PDL2、PD1、B7-H3、B7-H4、BTLA、HVEM、TIM3、GAL9、LAG3、VISTA、KIR、2B4、CD160、CGEN-15049、CHK 1、CHK2、A2aR和B-7家族配體或其組合。5. 權利要求1的方法，其中所述檢查點抑制劑與選自下述的檢查點蛋白質的配體相互 作用：CTLA-4、PDL1、PDL2、PD 1、B7-H3、B7-H4、BTLA、HVEM、TIM3、GAL9、LAG3、VISTA、KIR、2B4、 CD160、CGEN-15049、CHK 1、CHK2、A2aR 和 B-7 家族配體或其組合。6. 權利要求1的方法，其中所述治療劑選自免疫刺激試劑、T細胞生長因子、白介素、抗 體和疫苗或其組合。7. 權利要求6的方法，其中所述白介素是IL-7或IL-15。8. 權利要求7的方法，其中所述白介素是糖基化的IL-7。9. 權利要求6的方法，其中所述疫苗是樹突狀細胞疫苗。10. 權利要求1的方法，其中所述檢查點抑制劑和所述治療劑同時或以任一次序連續施 用。11. 權利要求10的方法，其中所述治療劑在所述檢查點抑制劑之前施用。12. 權利要求11的方法，其中所述治療劑是疫苗，并且所述檢查點抑制劑是PD-1抑制 劑。13. 權利要求12的方法，其中所述疫苗是樹突狀細胞疫苗。14. 權利要求1的方法，其中所述治療由臨床結果;通過T細胞的抗腫瘤活性增加、增強 或延長;與治療前的數目相比較，抗腫瘤T細胞或活化T細胞數目的增加，或其組合決定。15. 權利要求14的方法，其中所述臨床結果選自腫瘤消退;腫瘤縮小;腫瘤壞死;通過免 疫系統的抗腫瘤應答;腫瘤擴大、復發或擴散或其組合。16. 權利要求1的方法，其中治療效應通過T細胞的存在、或指示T細胞炎癥的基因標記 的存在或其組合預測。17. 權利要求1的方法，其中所述受試者患有癌癥。18. 權利要求17的方法，其中所述癌癥選自泌尿生殖癌、婦科癌癥、肺癌、胃腸癌、頭頸 癌、惡性膠質母細胞瘤、惡性間皮瘤、非轉移性或轉移性乳腺癌、惡性黑素瘤、梅克爾細胞癌 或骨與軟組織肉瘤、血液學瘤形成、多發性骨髓瘤、急性髓性白血病、慢性髓性白血病、骨髓 增生異常綜合征和急性成淋巴細胞性白血病、非小細胞肺癌(NSCLC)、乳腺癌、轉移性結腸 直腸癌、激素敏感性或激素難治性前列腺癌、結腸直腸癌、卵巢癌、肝細胞癌、腎細胞癌、胰 腺癌、胃癌、食道癌、肝細胞癌、膽管細胞癌、頭頸鱗狀細胞癌、軟組織肉瘤和小細胞肺癌。19. 權利要求1的方法，其進一步包括在用所述組合療法治療之前、與用所述組合療法 治療同時、或在用所述組合療法治療之后，給所述受試者施用化學治療劑、靶向療法或輻 射。20. -種增強或延長檢查點抑制劑的效應，或使得受試者能夠響應檢查點抑制劑，或使 得能夠減少檢查點抑制劑的毒性或劑量的方法，其包括給有此需要的受試者施用與檢查點 抑制劑組合的治療劑，其中所述受試者患有癌癥。21. 權利要求20的方法，其中所述檢查點抑制劑是生物學治療劑或小分子。22. 權利要求20的方法，其中所述檢查點抑制劑選自單克隆抗體、人源化抗體、全人抗 體和融合蛋白或其組合。23. 權利要求20的方法，其中所述檢查點抑制劑抑制選自下述的檢查點蛋白質：01^_ 4、PDL1、PDL2、PD1、B7-H3、B7-H4、BTLA、HVEM、TIM3、GAL9、LAG3、VISTA、KIR、2B4、CD160、 CGEN-15049、CHK 1、CHK2、A2aR 和 B-7 家族配體或其組合。24. 權利要求20的方法，其中所述檢查點抑制劑與選自下述的檢查點蛋白質的配體相 互作用：CTLA-4、PDLl、PDL2、PDl、B7-H3、B7-H4、BTLA、HVEM、nM3、GAL9、LAG3、VISTA、KIR、 2B4、CD160、CGEN-15049、CHK 1、CHK2、A2aR 和 B-7 家族配體或其組合。25. 權利要求20的方法，其中所述治療劑選自免疫刺激試劑、T細胞生長因子、白介素、 抗體和疫苗或其組合。26. 權利要求25的方法，其中所述白介素是IL-7或IL-15。27. 權利要求26的方法，其中所述白介素是糖基化的IL-7。28. 權利要求25的方法，其中所述疫苗是樹突狀細胞疫苗。29. 權利要求20的方法，其中所述檢查點抑制劑和所述生物學治療劑同時或以任一次 序連續施用。30. 權利要求29的方法，其中所述治療劑在所述檢查點抑制劑之前施用。31. 權利要求30的方法，其中所述治療劑是疫苗，并且所述檢查點抑制劑是PD-1抑制 劑。32. 權利要求29的方法，其中所述疫苗是樹突狀細胞疫苗。33. 權利要求20的方法，其中所述癌癥選自泌尿生殖癌、婦科癌癥、肺癌、胃腸癌、頭頸 癌、惡性膠質母細胞瘤、惡性間皮瘤、非轉移性或轉移性乳腺癌、惡性黑素瘤、梅克爾細胞癌 或骨與軟組織肉瘤、血液學瘤形成、多發性骨髓瘤、急性髓性白血病、慢性髓性白血病、骨髓 增生異常綜合征和急性成淋巴細胞性白血病、非小細胞肺癌(NSCLC)、乳腺癌、轉移性結腸 直腸癌、激素敏感性或激素難治性前列腺癌、結腸直腸癌、卵巢癌、肝細胞癌、腎細胞癌、胰 腺癌、胃癌、食道癌、肝細胞癌、膽管細胞癌、頭頸鱗狀細胞癌、軟組織肉瘤和小細胞肺癌。34. 權利要求20的方法，其進一步包括在用所述組合療法治療之前、與用所述組合療法 治療同時、或在用所述組合療法治療之后，給所述受試者施用化學治療劑、靶向療法或輻 射。35. -種藥物組合物，其包含與生物學治療劑組合的檢查點抑制劑。36. 權利要求35的組合物，其中所述生物學治療劑是疫苗。37. -種藥物組合物，其包含樹突狀細胞疫苗和PD-1抑制劑。38. -種用于癌癥治療的組合療法，其中所述組合療法包含過繼性T細胞療法和檢查點 抑制劑。39. 權利要求38的組合療法，其中所述過繼性T細胞療法包含自體T細胞。40. 權利要求39的組合療法，其中所述自體T細胞靶向針對腫瘤抗原。41. 權利要求38的組合療法，其中所述過繼性T細胞療法包含同種異體T細胞。42. 權利要求41的組合療法，其中所述同種異體T細胞靶向針對腫瘤抗原。43. 權利要求38的組合療法，其中所述檢查點抑制劑是PD-1或PDL-1檢查點抑制劑。44. 一種增強抗腫瘤或抗癌免疫應答的方法，所述方法包括給受試者施用過繼性Τ細胞 療法和檢查點抑制劑。45. 權利要求44的方法，其中所述過繼性Τ細胞療法在所述檢查點抑制劑之前施用。46. 權利要求45的方法，其中所述過繼性Τ細胞療法在所述檢查點抑制劑之前1 -30天施 用。47. 權利要求44的方法，其中所述抗腫瘤應答選自抑制腫瘤生長，誘導腫瘤細胞死亡、 腫瘤消退，阻止或延遲腫瘤復發、腫瘤生長、腫瘤擴散以及腫瘤消除。
【文檔編號】A61K39/00GK105828834SQ201480070071
【公開日】2016年8月3日
【申請日】2014年11月5日
【發明人】M·L·博施, J·K·甘耶, L·F·鮑爾斯, L·M·廖, R·M·普林斯
【申請人】同源生物服務股份有限公司, 西北生物治療藥物公司, 加利福尼亞大學董事會, Rev免疫股份有限公司