專利名稱：預染多色蛋白質分子量標準試劑盒的制作方法
技術領域：
本實用新型涉及一種生物技術研究用試劑盒，尤其是涉及一種蛋白質分子量標準試劑盒。
背景技術：
目前的生物技術研究中尤其是蛋白質電泳中，需要廣泛應用蛋白質分子量標準試劑盒。常規的蛋白分子量標準試劑為非預染的蛋白混合物，在凝膠電泳的過程中無法識別，必須在電泳后經過一系列的染色處理后才能夠看到清晰的條帶。近年來，一些國外廠商開發出一些預染蛋白質分子量標準試劑盒，但是現有的這幾種商業化的預染色蛋白分子量標準試劑盒，它們所使用的染料顏色單一，在蛋白條帶不清晰的時候難以分辨，同時存在蛋白降解的問題。

發明內容
本實用新型的目的在于提供一種預染多色蛋白質分子量標準試劑盒，將該試劑盒應用于生物技術研究中，可以實時觀察電泳過程中樣品的分離狀況，具有條帶穩定、使用方便的優點。
本實用新型所述的一種預染多色蛋白質分子量標準試劑盒，包括至少一個冷凍管，其管體為圓柱形，底部為平底或錐形，管口設有螺旋蓋和密封圈，管壁上設有刻度，其容量規格為0.5或1毫升，冷凍管內裝有預染多色蛋白質分子量標準試劑。
所述的冷凍管的管體印有預染多色寬譜蛋白分子量標準或預染多色窄譜蛋白分子量標準的標識。
所述的冷凍管內裝有的預染多色蛋白質分子量標準試劑包括紅色、藍色、橘色和翠藍色的若干種組分，為不同分子量的標準蛋白質與雷馬素系列染料反應形成的化合物的混合液。
本實用新型的有益效果是整體結構簡單，便于保存、運送和使用，以及試劑的分裝；選用一些純化好的蛋白質的混合物，以及多種雷馬素染料，這些蛋白混合物與雷馬素染料共價偶聯形成的乙烯基化合物非常穩定，解決了蛋白降解的問題；可在凝膠電泳時出現強度均勻的條帶，實時觀察SDS-凝膠電泳中蛋白樣品的分離狀況，遷移情況直觀可見；可以在凝膠電泳的過程中方便地了解樣品中目標蛋白的位置，隨時決定停止電泳的時間；又可用于免疫印跡檢測和觀察免疫印跡的轉移效率。


圖1是本實用新型所述的預染多色蛋白質分子量標準試劑盒的結構示意圖。
圖2為本實用新型所述的預染多色蛋白質分子量標準試劑盒的第一種電泳圖譜。
圖3為本實用新型所述的預染多色蛋白質分子量標準試劑盒的第二種電泳圖譜。
圖4為本實用新型所述的預染多色蛋白質分子量標準試劑盒的第三種電泳圖譜。
具體實施方式
本實用新型所述的預染多色蛋白質分子量標準試劑盒，如圖1所示，包括至少一個冷凍管1，其管體11為圓柱形，底部12為平底(左圖)或錐形(右圖)，管口設有螺旋蓋13和密封圈(未示出)，管壁14上設有刻度，其容量規格為0.5毫升或1毫升，冷凍管1內裝有預染多色蛋白質分子量標準試劑。圖1為結構示意圖，不代表實際尺寸。
所述的冷凍管的管體11印有預染多色寬譜蛋白分子量標準或預染多色窄譜蛋白分子量標準的標識15。
所述的冷凍管內裝有的預染多色蛋白質分子量標準試劑包括紅色、藍色、橘色和翠藍色的若干種組分，為不同分子量的標準蛋白質與雷馬素系列染料反應形成的化合物的混合液。
蛋白混合液的組分是濃度為0.1-0.2毫克/毫升的每一種蛋白，包括胰蛋白酶抑制劑、溶菌酶、牛血清蛋白、雞血清蛋白、肌球蛋白、磷酸酶、碳酸酐酶、抑菌肽等；染料為雷馬素系列。
所述的蛋白混合液溶解在特定緩沖液中，其成分為100mM Tris-HCl(pH 6.8)、10％(w/v)SDS、40mM DTT、0.01％(w/v)溴酚蘭和10％甘油。
具體實施過程中，將單獨配制的每種標準蛋白質溶液按比例混合，制備出預染多色蛋白質分子量標準試劑，0.5毫升或1毫升裝載于冷凍管中，保存在零下20攝氏度。
使用方法使用前將試劑置于95-100℃3-5分鐘，溶解后震蕩混勻，離心后將試劑直接上樣于凝膠電泳。如果在凝膠電泳中肉眼觀察，每次加10微升預染多色蛋白分子量標準試劑；如果是免疫印跡實驗，每次加5微升試劑。
圖2為本實用新型所述的預染多色蛋白質分子量標準試劑盒的第一種電泳圖譜。如圖2所示，215kDa條帶是肌球蛋白與雷馬素亮藍R偶聯，藍色；100kDa條帶是磷酸酶與雷馬素亮藍R偶聯，藍色；80kDa條帶是牛血清蛋白與雷馬素翠藍偶聯，翠藍色；52kDa條帶是雞血清蛋白(Grade VI)與雷馬素亮藍R偶聯，藍色；46kDa條帶是雞血清蛋白(Grade V)與雷馬素亮藍R偶聯，藍色；35kDa條帶是碳酸酐酶與雷馬素亮橘3R偶聯，橘色；28kDa條帶是胰蛋白酶抑制劑與雷馬素亮藍R偶聯，藍色；18kDa條帶是溶菌酶與雷馬素亮藍R偶聯，藍色。
圖3為本實用新型所述的預染多色蛋白質分子量標準試劑盒的第二種電泳圖譜。如圖3所示，95kDa條帶是胰蛋白酶抑制劑交聯物與雷馬素亮藍R偶聯，藍色；85kDa條帶是牛血清蛋白與雷馬素亮藍R偶聯，藍色；52kDa條帶是雞血清蛋白(Grade VI)與雷馬素亮藍R偶聯，藍色；46kDa條帶是雞血清蛋白(Grade V)與雷馬素亮藍R偶聯，藍色；35kDa條帶是碳酸酐酶與雷馬素亮橘3R偶聯，橘色；28kDa條帶是胰蛋白酶抑制劑與雷馬素亮藍R偶聯，藍色；18kDa條帶是溶菌酶與雷馬素亮藍R偶聯，藍色；5kDa條帶是抑菌肽與雷馬素亮藍R偶聯，淡藍色。
圖4為本實用新型所述的預染多色蛋白質分子量標準試劑盒的第三種電泳圖譜。如圖4所示，90kDa條帶是牛血清蛋白與雷馬素亮紅F3B偶聯，紅色；52kDa條帶是雞血清蛋白(Grade VI)與雷馬素亮藍R偶聯，藍色；46kDa條帶是雞血清蛋白(Grade V)與雷馬素亮藍R偶聯，藍色；35kDa條帶是碳酸酐酶與雷馬素亮橘3R偶聯，橘色；28kDa條帶是胰蛋白酶抑制劑與雷馬素亮藍R偶聯，藍色；18kDa條帶是溶菌酶與雷馬素亮藍R偶聯，藍色。
權利要求1.一種預染多色蛋白質分子量標準試劑盒，其特征在于包括至少一個冷凍管(1)，其管體(11)為圓柱形，底部(12)為平底或錐形，管口設有螺旋蓋(13)和密封圈，管壁(14)上設有刻度，其容量規格為0.5或1毫升，冷凍管(1)內裝有預染多色蛋白質分子量標準試劑。
2.根據權利要求1所述的預染多色蛋白質分子量標準試劑盒，其特征在于所述的冷凍管的管體(11)印有預染多色寬譜蛋白分子量標準或預染多色窄譜蛋白分子量標準的標識(15)。
專利摘要本實用新型涉及一種預染多色蛋白質分子量標準試劑盒。所述的預染多色蛋白質分子量標準試劑盒包括至少一個冷凍管，其管體為圓柱形，底部為平底或錐形，管口設有螺旋蓋和密封圈，管壁上設有刻度，其容量規格為0.5或1毫升，冷凍管內裝有預染多色蛋白質分子量標準試劑。本實用新型整體結構簡單，便于保存、運送和使用，以及試劑的分裝；解決了蛋白降解的問題；可在凝膠電泳時出現強度均勻的條帶，實時觀察SDS－凝膠電泳中蛋白樣品的分離狀況，遷移情況直觀可見；可以在凝膠電泳的過程中方便地了解樣品中目標蛋白的位置，隨時決定停止電泳的時間；又可用于免疫印跡檢測和觀察免疫印跡的轉移效率。
文檔編號G01N33/50GK2874473SQ20052006714
公開日2007年2月28日 申請日期2005年11月11日 優先權日2005年11月11日
發明者侯志波 申請人:侯志波, 夏立新