一種同時測定利格列汀和二甲雙胍含量的高效液相色譜法
【技術領域】
[0001]本發明涉及醫藥領域，具體涉及一種同時測定利格列汀和二甲雙胍含量的高效液相色譜法。
【背景技術】
[0002]利格列汀，英文名linagliptin，化學名為8_[ (3R) -3-氛基-1-呢啶基]~1~ (2_ 丁炔基)-3，7- 二氫-3-甲基-1-[ (4-甲基-2-喹唑啉基)甲基]-1H-嘌呤-2，6-二酮。利格列汀是由勃林格殷格翰與禮來退出的新型二肽基肽酶抑制劑，用于治療2-型糖尿病，利格列汀單方制劑于2013年4月在我國上市；鹽酸二甲雙胍，英文名Metformin hydrochloride，化學名為1，1-二甲基雙胍鹽酸鹽。鹽酸二甲雙胍片臨床使用已有50多年歷史，作為最廣泛使用的降糖藥物之一，用于控制糖尿病及其并發癥。
[0003]專利CN 102596191與CN103391771中將鹽酸二甲雙胍與利格列汀制成復方制劑，鹽酸二甲雙胍與利格列汀聯合使用治療2型糖尿病，可以安全、有效地降糖，改善胰島B細胞功能，不良反應的發生率低。且復方制劑每日I次口服，增加患者依從性，該藥上市后前景良好。
[0004]美國FDA于2012年I月30日批準利格列汀鹽酸二甲雙胍片“ JENTADUET0 ”上市，規格為利格列汀2.5mg，二甲雙胍500mg、850mg和lOOOmg，由于2-型糖尿病具有復雜的發病機制，大多數2-型糖尿病患者需要接受一種以上的藥物治療以降低其血糖水平。JENTADUET0獲得批準，為那些需要一種以上藥物治療，而且適合接受利格列汀和二甲雙胍的患者提供了很好的治療選擇，“JENTADUET0”于2014年12月30日在我國申報生產，近期將上市。
[0005]利格列汀與二甲雙胍同時測定的含量分析方法尚無文獻報道。為了保證該復方制劑研發和生產過程中質量控制的需要，我們通過大量實驗，摸索了一套同時檢測利格列汀與鹽酸二甲雙胍的方法，在嚴格進行了方法驗證后，確保該方法科學嚴謹，能夠滿足研發及生產中含量控制的需求。

【發明內容】

[0006]本發明的目的在于針對現有技術的不足，現提供一種能夠同時測定利格列汀和二甲雙胍含量的高效液相色譜法。
[0007]為實現上述目的，本發明的技術方案是:一種同時測定利格列汀和二甲雙胍含量的高效液相色譜法，其創新點在于:所述色譜條件為:選用以辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，檢測波長225?230nm，柱溫35?45°C，流速0.8?1.2ml/min ;采用反相高效液相色譜法，所述流動相為添加離子對試劑的緩沖鹽溶液與極性有機溶劑，所述添加離子對試劑的緩沖鹽溶液為A相，所述極性有機溶劑為B相，所述流動相中A相的離子對試劑為庚烷磺酸鈉，緩沖鹽為磷酸二氫鉀；所述流動相中B相的有機溶劑為乙腈。
進一步的，所述A相中添加的離子對試劑庚燒磺酸鈉的加入量為10?30mmol/L，所述流動相中A相的添加離子對試劑的緩沖鹽溶液的pH值為3?4。
[0008]本發明另一個目的是公開一種同時測定利格列汀和二甲雙胍含量的高效液相色譜法，其創新點在于:所述具體操作步驟如下:
(1)選取利格列汀二甲雙胍片10片，所述利格列汀二甲雙胍片的規格為2.5/500mg，置與1000ml量瓶中，加入乙腈溶劑，溶解并稀釋至刻度線，搖勾，所述乙腈溶劑中乙腈與水的體積比為1:1;
(2)精密量取2mL步驟(1)中所得混合液，放置于100mL容量瓶中，加入乙腈溶劑，溶解并稀釋至刻度線，搖勻，作為供試液，所述乙腈溶劑中乙腈與水的體積比為1:1 ;
(3)另取鹽酸二甲雙胍2.5mg和利格列汀對照品500mg，加入乙腈溶劑，溶解稀釋至刻度，配制成含鹽酸二甲雙胍0.lmg/ml，含量利格列汀0.5yg/ml的溶液，作為對照液，所述乙腈溶劑中乙腈與水的體積比為1:1 ;
(4)分別量取供試液及對照溶液10μ 1，注入色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積計算并折干，即得。
[0009]本發明的有益效果如下:本發明采用了反相高效液相色譜法，通過制備供試液和對照液，并且分別量取供試液及對照溶液10 μ 1，注入色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積計算并折干，即完成了定利格列汀和二甲雙胍含量的測試，填補了目前定利格列汀和二甲雙胍含量的測試分析方法尚無的空缺，本發明可以滿足研發和生產的需求，為利格列汀藥物的早日上市提供了必要的技術支持。
【附圖說明】
[0010]圖1為本發明實施例1的二甲雙胍和利格列汀的色譜圖。
[0011]圖2為本發明實施例2的二甲雙胍和利格列汀的色譜圖。
[0012]圖3為本發明實施例3的二甲雙胍和利格列汀的色譜圖。
【具體實施方式】
[0013]以下由特定的具體實施例說明本發明的實施方式，熟悉此技術的人士可由本說明書所揭露的內容輕易地了解本發明的其他優點及功效。
[0014]實施例1
一種同時測定利格列汀和二甲雙胍含量的高效液相色譜法，色譜條件為:選用以辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，檢測波長225nm，柱溫35°C，流速0.8ml/min ;采用反相高效液相色譜法，流動相為添加離子對試劑的緩沖鹽溶液與極性有機溶劑，添加離子對試劑的緩沖鹽溶液為A相，極性有機溶劑為B相，流動相中A相的離子對試劑為庚烷磺酸鈉，緩沖鹽為磷酸二氫鉀；流動相中B相的有機溶劑為乙腈。
A相中添加的離子對試劑庚烷磺酸鈉的加入量為10mmol/L，流動相中A相的添加離子對試劑的緩沖鹽溶液的pH值為3。
[0015]一種同時測定利格列汀和二甲雙胍含量的高效液相色譜法，具體操作步驟如下:
(1)選取利格列汀二甲雙胍片10片，利格列汀二甲雙胍片的規格為2.5/500mg，置與
1000ml量瓶中，加入乙腈溶劑，溶解并稀釋至刻度線，搖勻，乙腈溶劑中乙腈與水的體積比為 1:1 ; (2)精密量取2mL步驟(I)中所得混合液，放置于10mL容量瓶中，加入乙腈溶劑，溶解并稀釋至刻度線，搖勻，作為供試液，乙腈溶劑中乙腈與水的體積比為1:1 ;
(3)另取鹽酸二甲雙胍2.5mg和利格列汀對照品500mg，加入乙腈溶劑，溶解稀釋至刻度，配制成含鹽酸二甲雙胍0.lmg/ml，含量利格列汀0.5yg/ml的溶液，作為對照液，乙腈溶劑中乙腈與水的體積比為1:1 ;
(4)分別量取供試液及對照溶液10μ 1，注入色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積計算并折干，即得。
[0016]本實施