脂后的石斛粉末。
[0036](5)將步驟(4)所得的脫脂后的石斛粉末裝入亞臨界水提取裝置中，亞臨界水與石斛粉末的液固比為25mL/g，提取壓力為l.0MPa，提取溫度為140°C，提取時間為20min，提取2次，得到混合液B。
[0037]所述的亞臨界水提取裝置為TGYF-A型不銹鋼高壓提取器。
[0038](6)將混合液B，放入離心機的離心管中，在轉速5000r/min下離心5min后，取下離心管，得到上清液B和沉淀物B。
[0039](7)將4倍體積的無水乙醇加入上清液B，在溫度為4°C下靜置8h，得到混合液C。
[0040](8)將混合液C，放入離心機的離心管中，在轉速5000r/min下離心5min后，取下離心管，得到上清液C和沉淀物C。
[0041](8)將沉淀物C依次用4倍體積的無水乙醇、丙酮和乙醚洗滌，得到石斛多糖。
[0042]本發明提出的一種利用亞臨界水提取石斛多糖的方法，得到的石斛多糖收率為23.36%，純度為98.21%，體外抗氧化活性測定結果顯示，在石斛多糖濃度為1.0mg/mL時，對羥基自由基和ABTS自由基清除能力最強，清除率達到了 100%，對超氧陰離子自由基清除率達到了 60%以上。
[0043]實施例2:
一種利用亞臨界水提取石斛多糖的方法，具體包括以下步驟:
(I)將石斛粉碎，過60目篩，得到石斛粉末。
[0044](2)將步驟(I)所得的石斛粉末用90%乙醇浸泡，在80°C下回流脫脂45min，得到混合液A。
[0045](3)將混合液A，放入離心機的離心管中，在轉速4000r/min下離心1min后，取下離心管，得到上清液A和沉淀物A。
[0046](4)將殘渣A放于90°C電熱恒溫鼓風干燥箱中干燥7h，得到脫脂后的石斛粉末。
[0047](5)將步驟(4)所得的脫脂后的石斛粉末裝入亞臨界水提取裝置中，亞臨界水與石斛粉末的液固比為35mL/g，提取壓力為2.0MPa，提取溫度為110°C，提取時間為30min，提取I次，得到混合液B。
[0048]所述的亞臨界水提取裝置為TGYF-A型不銹鋼高壓提取器。
[0049](6)將混合液B，放入離心機的離心管中，在轉速4000r/min下離心1min后，取下離心管，得到上清液B和沉淀物B。
[0050](7)將6倍體積的無水乙醇加入上清液B，在溫度為3°C下靜置6h，得到混合液C。
[0051](8)將混合液C，放入離心機的離心管中，在轉速4000r/min下離心1min后，取下離心管，得到上清液C和沉淀物C。
[0052](8)將沉淀物C依次用5倍體積的無水乙醇、丙酮和乙醚洗滌，得到石斛多糖。
[0053]本發明提出的一種利用亞臨界水提取石斛多糖的方法，得到的石斛多糖收率為20.67%，純度為91.50%，體外抗氧化活性測定結果顯示，在石斛多糖濃度為1.0mg/mL時，對羥基自由基和ABTS自由基清除能力最強，清除率達到了 100%，對超氧陰離子自由基清除率達到了 60%以上。
[0054]實施例3:
一種利用亞臨界水提取石斛多糖的方法，具體包括以下步驟:
(I)將石斛粉碎，過80目篩，得到石斛粉末。
[0055](2)將步驟(I)所得的石斛粉末用80%乙醇浸泡，在70°C下回流脫脂60min，得到混合液A。
[0056](3)將混合液A，放入離心機的離心管中，在轉速3000r/min下離心15min后，取下離心管，得到上清液A和沉淀物A。
[0057](4)將殘渣A放于105°C電熱恒溫鼓風干燥箱中干燥5h，得到脫脂后的石斛粉末。
[0058](5)將步驟(4)所得的脫脂后的石斛粉末裝入亞臨界水提取裝置中，亞臨界水與石斛粉末的液固比為15mL/g，提取壓力為0.5MPa，提取溫度為160°C，提取時間為lOmin，提取3次，得到混合液B。
[0059]所述的亞臨界水提取裝置為TGYF-A型不銹鋼高壓提取器。
[0060](6)將混合液B，放入離心機的離心管中，在轉速3000r/min下離心15min后，取下離心管，得到上清液B和沉淀物B。
[0061](7)將3倍體積的無水乙醇加入上清液B，在溫度為5°C下靜置10h，得到混合液C。
[0062](8)將混合液C，放入離心機的離心管中，在轉速3000r/min下離心15min后，取下離心管，得到上清液C和沉淀物C。
[0063](8)將沉淀物C依次用3倍體積的無水乙醇、丙酮和乙醚洗滌，得到石斛多糖。
[0064]本發明提出的一種利用亞臨界水提取石斛多糖的方法，得到的石斛多糖收率為22.84%，純度為95.77%，體外抗氧化活性測定結果顯示，在石斛多糖濃度為1.0mg/mL時，對羥基自由基和ABTS自由基清除能力最強，清除率達到了 100%，對超氧陰離子自由基清除率達到了 60%以上。
【主權項】
1.一種利用亞臨界水提取石斛多糖的方法，其特征在于該方法具體包括以下步驟: (1)將石斛粉碎，過20?80目篩，得到石斛粉末； (2)將步驟(I)所得的石斛粉末用80%?95%乙醇浸泡，在70?90°C下回流脫脂30?60min，得到混合液A ； (3)將混合液A，放入離心機的離心管中，在轉速3000?5000r/min下離心5?15min后，取下離心管，得到上清液A和沉淀物A ; (4)將殘渣A放于70?105°C電熱恒溫鼓風干燥箱中干燥5?10h，得到脫脂后的石斛粉末； (5)將步驟(4)所得的脫脂后的石斛粉末裝入亞臨界水提取裝置中，亞臨界水與石斛粉末的液固比為15?45mL/g，提取壓力為0.5?2.0MPa,提取溫度為100?160°C，提取時間為5?30min，提取I?3次，得到混合液B ； (6)將混合液B，放入離心機的離心管中，在轉速3000?5000r/min下離心5?15min后，取下離心管，得到上清液B和沉淀物B ; (7)將3?6倍體積的無水乙醇加入上清液B，在溫度為I?5°C下靜置5-10h，得到混合液C ； (8)將混合液C，放入離心機的離心管中，在轉速3000?5000r/min下離心5?15min后，取下離心管，得到上清液C和沉淀物C ; (9)將沉淀物C依次用3?6倍體積的無水乙醇、丙酮和乙醚洗滌，得到石斛多糖。
2.根據權利要求1所述的一種利用亞臨界水提取石斛多糖的方法，其特征在于，所述的亞臨界水提取裝置為TGYF-A型不銹鋼高壓提取器。
3.根據權利要求1所述的一種利用亞臨界水提取石斛多糖的方法，其特征在于，得到的石斛多糖收率為20.67?23.36%，純度為91.50?98.21%。
【專利摘要】本發明公開一種利用亞臨界水提取石斛多糖的方法，屬于天然活性成分提取領域。先將石斛原料粉碎，脫脂，干燥后放入亞臨界水提取裝置，在溫度100～160℃、壓力0.5～2.0MPa、亞臨界水與石斛粉末的液固比為15～45mL/g條件下，提取5～30min，提取1～3次，然后收集提取液，加入無水乙醇，靜置后離心得到的沉淀即為粗品，再依次通過無水乙醇、丙酮和乙醚洗滌得到石斛多糖。本發明采用先進的亞臨界水提取技術提取石斛多糖，提取時間短，提取效率高，得到的石斛多糖具有顯著的抗氧化活性，該方法綠色無污染，對設備要求低，易于工業化生產。
【IPC分類】C08B37-00
【公開號】CN104861081
【申請號】CN201510294926
【發明人】劉靜, 雷建都, 王璐瑩, 李思亞, 劉旺衢, 祁祺, 胡鑫
【申請人】北京林業大學
【公開日】2015年8月26日
【申請日】2015年6月2日