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一種重組人AMPAR1融合蛋白及其制備方法和應用與流程

文檔序號:39427078發布日(ri)期(qi):2024-09-20 22:24閱讀:來源(yuan):國知局

技術特征:

1.一種重組(zu)(zu)(zu)人ampar1融(rong)(rong)合(he)(he)(he)蛋(dan)(dan)白(bai),所述重組(zu)(zu)(zu)人ampar1融(rong)(rong)合(he)(he)(he)蛋(dan)(dan)白(bai)是(shi)由(you)融(rong)(rong)合(he)(he)(he)蛋(dan)(dan)白(bai)1與融(rong)(rong)合(he)(he)(he)蛋(dan)(dan)白(bai)2形成的二聚體(ti)結構,其中(zhong),融(rong)(rong)合(he)(he)(he)蛋(dan)(dan)白(bai)1由(you)ampar1胞外區1、ampar1胞外區3和兔(tu)疫球(qiu)蛋(dan)(dan)白(bai)fc段依次(ci)(ci)連接組(zu)(zu)(zu)成;融(rong)(rong)合(he)(he)(he)蛋(dan)(dan)白(bai)2由(you)ampar2胞外區1、ampar2胞外區3和兔(tu)疫球(qiu)蛋(dan)(dan)白(bai)fc段依次(ci)(ci)連接組(zu)(zu)(zu)成。

2.根據權利要(yao)求(qiu)1所(suo)述(shu)的重組人(ren)ampar1融合蛋白,其特征在于,上(shang)述(shu)各區段(duan)通過(guo)連接肽(tai)連接,所(suo)述(shu)連接肽(tai)選(xuan)自(zi)ggggs連接肽(tai)。

3.根據權利要求1所述(shu)的(de)重組人ampar1融(rong)合(he)蛋白(bai),其特征在于(yu),所述(shu)融(rong)合(he)蛋白(bai)1的(de)氨(an)基酸序列如(ru)seq?id?no:1所示,融(rong)合(he)蛋白(bai)2的(de)氨(an)基酸序列如(ru)seq?id?no:2所示。

4.一種(zhong)編(bian)(bian)碼重(zhong)組人ampar1融(rong)合(he)蛋白的(de)核苷酸序列,其特征在于(yu),所述(shu)核苷酸序列包(bao)括編(bian)(bian)碼融(rong)合(he)蛋白1的(de)序列和編(bian)(bian)碼融(rong)合(he)蛋白2的(de)序列,所述(shu)序列選自(zi)下(xia)列方式中的(de)一種(zhong):

5.一種表(biao)達載(zai)體(ti),其特征在(zai)于(yu),所(suo)述表(biao)達載(zai)體(ti)中包括權利要(yao)求4所(suo)述的編(bian)碼重組人ampar1融合蛋白(bai)的核苷(gan)酸(suan)序列。

6.一種(zhong)由權利要求5所(suo)述的表達(da)載體轉化的轉化細胞。

7.一種重組人ampar1融合蛋白的(de)制(zhi)備方(fang)法(fa),其特征在于(yu),所述方(fang)法(fa)為培(pei)養權利要求6所述的(de)轉化細(xi)胞,誘導表達,獲得重組人ampar1融合蛋白。

8.根(gen)據權利要求(qiu)7所述的(de)制備方法,其特(te)征在于,將(jiang)seq?id?no:3所示的(de)基因整合到(dao)(dao)質(zhi)粒(li)中,構建(jian)得到(dao)(dao)重(zhong)組(zu)質(zhi)粒(li)1;將(jiang)seq?id?no:4所示的(de)基因整合到(dao)(dao)質(zhi)粒(li)中,構建(jian)得到(dao)(dao)重(zhong)組(zu)質(zhi)粒(li)2;將(jiang)所述質(zhi)粒(li)經轉化(hua)、提取、酶切(qie)鑒(jian)定(ding)后轉染至(zhi)宿主細胞(bao)得到(dao)(dao)轉化(hua)細胞(bao),培養(yang)轉化(hua)細胞(bao),誘(you)導表達,分離純(chun)化(hua),獲得重(zhong)組(zu)人ampar1融合蛋白。

9.一種權利要求(qiu)1-3任一所(suo)述的(de)重組人(ren)ampar1融合蛋(dan)白在制備自(zi)身免疫性腦炎診斷試劑和/或(huo)試劑盒中(zhong)的(de)應(ying)用。

10.一種用(yong)于診斷抗ampar1型(xing)腦炎的(de)流式細胞分(fen)析試劑盒,其特(te)征在(zai)于,所(suo)述試劑盒包括如下組分(fen):


技術總結
本發明公開一種重組人AMPAR1融合蛋白及其制備方法和應用,屬于重組蛋白制備技術領域。本發明通過對AMPAR1蛋白結構特征和抗原表位分析驗證,選擇具有明顯抗原性結構區域,選擇具備AMPAR1蛋白的特異性功能表位的部分制備融合蛋白,同時兼顧選擇片段的溶解性問題,使制備得到的融合蛋白不僅可以顯著提高檢測的敏感度,而且溶解度較好,易于后期大規模生產純化。

技術研發人員:劉寶強,李峰,周翔,賈文剛,何熲
受保護的技術使用者:上海康黎診斷技術有限公司
技術研發日:
技術公布日:2024/9/19
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