專利名稱：：用作平滑肌細胞增殖抑制劑的苯并咪唑衍生物的制作方法
技術領域：
：本發明涉及可用作平滑肌細胞增殖抑制劑的苯并咪唑衍生物，并涉及這些化合物和含有這些化合物的藥物組合物在治療與平滑肌細胞過度增殖有關的疾病或病癥如再狹窄方面的應用，本發明還涉及這些化合物的制備方法。在這些如高血壓誘發的血管改型，血管再狹窄，以及動脈粥樣硬化的病理過程中，血管平滑肌細胞的增殖和定向遷移是造成血管閉塞的重要因素(Gibbons，G.H.；Dzau，V.J.；NEJM，1994；3301431)。基于致病過程的病因學，所有這些病理過程均稱之為過度增殖性血管疾病。血管閉塞發生在內膜平滑肌細胞增殖引起的狹窄之后(Clowes，A.W.；Reidy，M.A.；血管外科學雜志(J.Vasc.Surg.)，1991，13885)。內膜平滑肌細胞增殖的根本原因在于導致內皮和細胞外基質破壞的血管平滑肌細胞損傷(Schwartz，S.M.，人體病理學(HumanPathology)，1987；18240；Fingerle，J.，動脈硬化癥(Arteriosclerosis)，1990；101082)。通常，動脈壁細胞處于封閉負控制之下并處于低基礎增殖狀態或處于靜止非增殖狀態。在血管損傷后，生長因子和細胞因子的釋放導致平滑肌細胞增殖和遷移(Fagin，J.A.；Forrester，J.S.，TrendsinCardiovascularMed.，1992；290.；Shiratani，M.，；Yui，Y.；Kawai，C.，Endothelium，1993；15)。致使內膜增生的血管損傷可由免疫反應或由浸入性心血管手術引起。動脈粥樣硬化癥是生物物質介導的血管損傷的常見形式，并繼發成狹窄。血管平滑肌細胞的異常增殖具有在內皮損傷部位上產生導致阻塞性新內膜損傷的動脈粥樣硬化斑塊的病理特征(Ross，R.，自然(Nature)，1993362；801；Cascells，W.，循環(Circulation)，1992；86723)。引起內膜增生的物理損傷可能發生在血管成形手術、器官移植外科手術和其它破壞血管完整性的血管浸入手術之后(Clowes，A.W.；Reidy，M.A.，血管外科學雜志(J.Vasc.Surg.)，1991；13885；Isik，F.F.；McDonald，T.O.；Ferguson，M.；Yanaka，E.，美國病理學雜志(Am.J.Pathol.)，1992；1411139)。對于冠狀動脈狹窄的治療，經皮經腔冠狀動脈成形術已被廣泛接受。在這種手術中，內皮被損傷并與各種造血性的或在損傷部位釋放的化學引誘劑和促細胞分裂劑接觸。這些物質中，血小板衍生的生長因子(PDGF)被認為在平滑肌細胞增殖和趨化性過程中起著重要作用(Reidy，M.A.；Fingerle，J.；Lindner，V.；循環(Circulation)，199386(supplIII)III-43；Ferns，G.A.A.；Raines，E.W.；Sprugel，K.H.；Montani，A.S.；Reidy，M.A.；Ross，R.；科學(Science)，1991；2531129.；Jawien，A.等人，臨床研究雜志(J.Clin.Invest.)，1992；89507；Nabel，E.G.等人，臨床研究雜志(J.Clin.Invest.)，1993；911822)。在血管成形手術后的3至6個月內，大約有30-40％患者的血流量明顯降低，這是由于應答此手術過程中造成的血管損傷而引起的再狹窄的結果。這些患者隨后需要進行第二次手術(Pepine，C.，循環(Circulation)，1990；811753.；Hardoff，R.J.，美國心臟學院雜志(J.Am.Coll.Cardiol.)，1990；151486)。因此，限制再狹窄過程的藥物具有顯著優點。能抑制血管平滑肌細胞增殖、特別是能抑制PDGF刺激增殖的藥物將用于治療血管增殖性疾病(Molloy，C.J.，DrugDev.Res.，1993；29148；Newby，A.C.；George，S.J.，心血管研究(Cardiovasc.Res.)，1993；271173)。DE4,129,603中公開了用作膠原誘導血小板聚集和纖蛋白原抑制劑的稠合雜環化合物，它們還可用于“經腔血管成形術的治療”中。US5,387,600中公開了用于治療動脈粥樣硬化的2-硫代取代的苯并咪唑。US5,026,705公開了作為增強肌收縮力劑的2-苯乙烯基苯并咪唑基噠嗪酮，它們可用于治療充血性心力衰竭。US5,200,422中公開了一族用作鉀通道開啟劑的1-(取代苯基或萘基)-2H-苯并咪唑-2-酮類化合物。US4,814,329中公開了用于治療血脂蛋白過多癥和抑制動脈粥樣硬化和血栓形成的5-取代-2-硫羰或取代-硫代的苯并咪唑衍生物。US5,376,665中公開了一組可用于治療糖尿病和血脂過多癥的4-(苯并咪唑-2-基和苯并噻唑-2-基)-氨基甲酰基或氨磺酰基-芐基膦酸酯衍生物。US4,859,684公開了一組可用于治療雄激素依賴性疾病的1H-咪唑-1-基甲基取代的苯并咪唑化合物。其中公開的一些中間體化合物為本發明的苯甲酰基苯并咪唑化合物，但該文獻中并沒有公開這些化合物具有生物或治療活性。根據本發明，提供了一組苯甲酰基苯并咪唑化合物(式I)和其還原產物(式II)以及含有這些化合物的藥物組合物以及使用這些化合物治療涉及平滑肌細胞過度增殖的疾病如再狹窄的方法。因此，本發明提供了式I或式II化合物的可藥用鹽其中R為C1-C6烷基，苯基，被下述基團取代的苯基或芐基鹵素、羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-鹵代烷氧基、三氟甲基或C1-C6烷基；R2為氫，鹵素，C1-C6烷氧基或C1-C6烷基；R1為氫，C1-C6烷基，C6-C10芳基，C7-C12芳烷基，或被一個或多個鹵原子、羧基、C2-C6烷氧羰基或C7-C12芳氧基羰基取代的芐基；其條件是式II化合物的可藥用鹽不包括α-(3-氟苯基)-2-甲基-1H-苯并咪唑-5-甲醇一鹽酸鹽或2-甲基-α-苯基-1H-苯并咪唑-5-甲醇鹽酸鹽。本發明的另一方面提供了下述式I或式II化合物或它們的可藥用鹽其中R為C1-C6烷基，取代苯基或取代芐基，其中所述取代基為一個或多個羥基、C1-C6烷氧基、三氟甲氧基、或C1-C6烷基；R2為氫；R1為氫，芐基或被一個或多個鹵原子、羧基、C2-C6烷氧羰基或C7-C12芳氧基羰基取代的芐基；其條件是，在式I中，當R1和R2為氫時，R不為對甲氧基苯基。本發明的另一方面提供了下述式I化合物或其可藥用鹽其中R為C1-C6烷基，苯基，芐基，被一個或多個下述基團取代的苯基或芐基羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-鹵代烷氧基、三氟甲基或C1-C6烷基；R2為氫，鹵素，C1-C6烷氧基或C1-C6烷基；R1為氫，C1-C6烷基，C6-C10芳基，C7-C12芳烷基，或被一個或多個鹵原子、羧基、C2-C6烷氧羰基或C7-C12芳氧基羰基取代的芐基，其條件是當R1和R2為氫時，R不為苯基或對甲氧基苯基。優選的化合物為這些式I或式II化合物或它們的可藥用鹽，其中R為C1-C6烷基，苯基或被一個或多個下述基團取代的苯基羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-鹵代烷氧基或C1-C6烷基；R2為氫；R1為氫，或被一個或多個鹵原子、羧基或C2-C6烷氧羰基取代的芐基。當R為烷基時，優選為甲基、乙基、丙基或丁基。當R為苯基或芐基時，它們優選被甲氧基、三氟甲氧基、己基或羥基取代。當R1為芐基時，其上的取代基優選為鹵素、羧基或烷氧羰基。當R1被烷氧羰基取代時，取代基優選為甲氧羰基或乙氧羰基。當R、R1或R2上的取代基為鹵素時，鹵素優選為氟或氯。R2優選氫。特別優選的化合物是·(苯基-(2-丙基-1H-苯并咪唑-5-基)-甲酮或其可藥用鹽。·4-(5-苯甲酰基-2-丙基-苯并咪唑-1-基甲基)-苯甲酸乙酯或其可藥用鹽。·4-(6-苯甲酰基-2-丙基-苯并咪唑-1-基甲基)-苯甲酸乙酯或其可藥用鹽。·4-(6-苯甲酰基-2-丙基-苯并咪唑-1-基甲基)-苯甲酸或其可藥用鹽。·4-(5-苯甲酰基-2-丙基-苯并咪唑-1-甲基)-苯甲酸或其可藥用鹽。·4-[5-(羥基-(苯基)-甲基)-2-丙基-苯并咪唑-1-基甲基]苯甲酸或其可藥用鹽。·[1-(3，4-二氯芐基)-2-丙基-1H-苯并咪唑-5-基]-苯基-甲酮或其可藥用鹽。·[2-(4-羥基-3-甲氧基-苯基)-1H-苯并咪唑-5-基]-苯基-甲酮或其可藥用鹽。·[2-(4-己氧基-3-甲氧基-苯基)-1H-苯并咪唑-5-基]-苯基-甲酮或其可藥用鹽。·(苯基-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-1H-苯并咪唑-5-基]-甲酮或其可藥用鹽。·[2-(3，4-二甲氧基芐基)-1H-苯并咪唑-5-基]-苯基-甲酮或其可藥用鹽。本發明化合物可按下述反應流程中所示的一般反應步驟制備亞氨基醚鹽酸鹽(1)通過合適的腈與醇和氯化氫在大約0℃下反應制備。在回流的乙醇中反應(1)和3，4-二氨基二苯酮，得到相應的2位被取代的苯甲酰基苯并咪唑(2)，其中R1為氫。利用氫化鈉作為堿，在二甲基甲酰胺中采用烷基、芳基或芳烷基鹵烷基化(2)，得到位置異構體(regioisomers)(3a，3b)。這些異構體可通過重結晶和色譜法分離。苯甲酰基苯并咪唑可進一步在乙醇中用硼氫化鈉還原，得到相應的醇(4a，4b)。因此，本發明的再一方面提供了制備如前所述的式I或式II化合物的方法，該方法包括(a)使式RCN腈與醇和氯化氫反應，產生式(1)化合物，其中R的定義如上，(b)將式1化合物與下式3，4-二氨基二苯酮在回流的醇中反應其中R2的定義如上，產生相應的式(2)化合物，(c)任選地用烷基、芳基或芳烷基鹵化物在堿存在下烷基化式(2)化合物，得到異構體(3a，3b)，(d)任選地通過重結晶和色譜法分離上述異構體，(e)并任選地將式(I)化合物與還原劑進一步反應，得到相應的式(II)化合物。可藥用的酸加成鹽衍生自這些有機和無機酸如乙酸，乳酸，檸檬酸，富馬酸，酒石酸，琥珀酸，馬來酸，丙二酸，鹽酸，氫溴酸，磷酸，硝酸，硫酸，甲磺酸，甲基苯磺酸，以及已知的可接受的類似酸。對于具有酸性取代基的化合物如羧酸化物，可藥用鹽還包括堿金屬鹽(鈉或鉀鹽)，堿土金屬鹽(鈣或鎂鹽)以及銨鹽。本發明包括僅由本發明苯并咪唑類化合物本身或它們與賦形劑(即無藥理作用的可藥用物質)一起組成的藥物組合物。這種組合物適用于治療平滑肌細胞過度增殖表征的疾病，其中所述的增殖最常見的是由血管整復外科和移植，如氣囊插入血管成形術，血管移植外科，冠狀動脈分流術，和心臟移植引起的。其它其中存在有不希望的血管增殖的病癥包括高血壓，哮喘，和充血性心力衰竭。因此，本發明化合物適于治療這些疾病和病癥。本發明化合物可系統施用，例如可通過靜脈注射方式，典型的劑量為0.1-10mg/kg/h，連續施用5-30天，或以低于靜脈注射的劑量皮下注射方式或以高于靜脈注射的劑量口服方式施用。如果合適的話，采用適當的連續釋放裝置如支持基質，采用經膜、經皮或其它局部施用途徑，還可實現本發明化合物的定域傳送。本發明的組合物可與常規賦形劑一同配制，所述賦形劑是例如填料、崩解劑、粘結劑、潤滑劑、矯味劑等。它們按常規方式配制。本發明化合物可單獨或與固體或液體藥用載體一同施用于需要這種治療的患者。適用的固體載體可包括一種或多種也可以作為矯味劑、潤滑劑、增溶劑、懸浮劑、填料、助流劑，壓片助劑、粘結劑或片劑崩解劑的物質或膠囊包封材料。對于粉劑，載體為能與細碎活性成分混合的細碎固體。而就片劑而言，可將活性成分以適當比例與具有需要壓制特性的載體混合，并壓制成具有所需形狀和大小的片劑。粉劑和片劑優選含有多至99％的活性成分。合適的固體載體包括，例如，磷酸鈣、硬脂酸鎂、滑石、蔗糖、乳糖、糊精、淀粉、纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、聚乙烯吡咯烷酮、低熔點蠟和離子交換樹脂。液體載體可用于制備溶液、懸浮液、乳劑、糖漿和酏劑。本發明的活性成分可溶于或懸浮在可藥用液體載體中，這些載體是例如水、有機溶劑、這兩類溶劑的混合物或可藥用的油或脂肪。液體載體中可包含其它合適的藥用添加劑如增溶劑、乳化劑、緩沖劑、防腐劑、甜味劑、矯味劑、懸浮劑、增稠劑、著色劑、粘度調節劑、穩定劑或滲透調節劑。適合口服和非腸道給藥用的液體載體的合適例子包括水(特別是含有上述添加劑如纖維素衍生物，優選羧甲基纖維素鈉的溶液)，醇(包括一元醇和多元醇如二元醇)及其衍生物，以及油(如精制椰子油和花生油)。對于非腸道給藥，載體還可以為油酯如油酸乙酯和肉豆蔻酸異丙酯。無菌液體載體可用于非腸道給藥用的無菌液態組合物中。滅菌溶液或懸浮液形式的液體藥物組合物可通過如肌內、腹膜內或皮下注射施用。滅菌溶液還可以通過靜脈內注射施用。口服施用的組合物可以是液體或固體組合物形式。優選的藥物組合物為單位劑量形式，如片劑或膠囊。在這種形式中，組合物可被細分成含有適當量活性成分的均分單位劑量；單位劑量形式可以是包裝組合物，例如包裝粉劑、小瓶、安瓿、預填裝注射器或含有液體的小囊(sachets)。單位劑量形式可以是，例如，膠囊或片劑本身，或可以是適當數量任何這類組合物的包裝形式。因此，本發明的又一方面是提供了藥物組合物，其中包括本文所述的式I或式II化合物以及可藥用載體。治療患有平滑肌細胞增殖相關疾病的特定患者所用的劑量必須由主治醫生本人決定。其它可變的影響因素包括特定病癥和疾病的嚴重程度、患者的年齡和反應情況。本發明化合物適用于預防哺乳動物的平滑肌細胞增殖。因此，本發明提供了治療哺乳動物、特別是預防哺乳動物平滑肌細胞增殖的方法，包括給這種哺乳動物口服或非腸道施用本文所述的式I或式II化合物。本發明還提供了本文所述的式I或II化合物在治療哺乳動物、特別是在預防哺乳動物的平滑肌細胞增殖中的應用，包括給這種哺乳動物口服或非腸道施用本文所述的式I或式II化合物。如下所述，采用離體豬主動脈平滑肌細胞，按照改進的Castellot等人(J.Biol.Chem257(19)11256(1982))的方法，測定本發明化合物抑制平滑肌細胞增殖的能力將已仔細去除了脂肪組織的新鮮豬主動脈用含2％抗生素-抗菌素(100x)液體(每毫升含10,000單位青霉素(堿)，10,000μg鏈霉素(堿)，和25μg兩性霉素B；此溶液通過使用青霉素G(鈉鹽)、硫酸鏈霉素和商標為Fungizone的兩性霉素B溶于0.85％鹽水配成，購自GibcoLaboratories，GrandIslandBiologicalCo.，GrandIsland，NY)的無菌磷酸鹽緩沖的鹽水溶液沖洗。然后將組織在含有I型膠原酶，165U/mL；III型彈性蛋白酶，15U/mL；BSA，2mg/mL；和大豆胰蛋白酶，0.375mg/mL的10-15mL酶溶液中消化，接著在5％CO2氣氛中于37℃溫育10至15分鐘。經此處理之后，通過用鑷子去皮除去外表面外膜。爾后沿縱向切割動脈并鋪開，刮去內皮層。將細胞的中層在酶溶液沖洗并置于含有10mL酶溶液的新制100mm培養皿內。用小剪刀將細胞中層切碎并在30mL新鮮酶溶液中于37℃下酶切消化2-3小時。消化之后，利用帶火焰拋光吸頭的無菌巴氏吸管或帶200-1000μL無菌吸管吸頭的Eppendorf吸管均化中層組織。隨后以8000rpm離心懸浮液10分鐘，將沉淀懸浮在4-6mL新鮮酶溶液內并移入到4-6個帶有通氣瓶塞的100mm瓶內。然后使細胞生長至融合用0.25％胰蛋白酶分裂。采用SMC肌動蛋白的抗體測定細胞的純度和總數量。在次融合條件下，在早期傳代(一般3-7次傳代)階段測定細胞數。使培養物在16mm(24孔)多孔培養板中于補加有10％胎牛血清和2％抗生素/抗菌素的199培養基中生長。在次融合條件下，將細胞在已知成分的無血清淋巴細胞培養基(AIM-V；Gibco)中靜置培養24-48小時，隨后開始試驗。通過向除去血清的同步細胞中加入試驗化合物、3H-胸苷和血清或特異性生長因子，啟動標準試驗步驟。對于每種細胞類型，使生長因子和血清刺激物最佳化。將試驗化合物以50倍稀釋加到每一孔中(20μL/孔)并將培養板在5％CO2氣氛下于37℃溫育24-36小時。將試驗化合物溶于50％乙醇中并以1、10和100μM濃度進行測定。作為對照，在其中RG50872為5μM濃度的每一細胞標本條件下，常規測定RG50872(Bilder，G.A.等人，Am.J.CellPhysiol.，1991；260C721)。當實驗完成時，將培養板置于冰上，用冰冷的PBS洗滌三次，并在冰冷的10％三氯乙酸(TCA)中孵育30分鐘以除去酸溶蛋白。將每孔中的溶液移入到含有0.4NHCl(500μL/瓶，用于中和NaOH)的閃爍瓶內，并用水(500μL)沖洗每孔兩次，達到2mL/閃爍瓶總體積。將閃爍瓶在閃爍計數器上計數測定，無論是對照組還是試驗樣品，均一式三份。對照組(100％)值由最大刺激細胞得到(由生長因子或血清刺激物產生的結果)。試驗值由經生長因子或血清最大刺激并被試驗化合物處理過的細胞得到(測定中所用的血小板衍生生長因子為人重組PDGF-AB，購自UpstateBiotechnologyInc.，LakePlacid，NY)。數值以對照的百分數表示，并由這些數值測定ICX50。為辨別細胞毒性和化合物預防增殖的能力，采用商業化改進的MTT測定法測試受試化合物。簡短地說，是將細胞在24孔培養板中培養至70-80％融合。在開始試驗之前，將細胞除血清24-48小時。為確保MTT測定法監測的是細胞毒性而不是增殖作用，在潮濕的CO2培養箱中，于37℃下，將細胞用50mM受試化合物在不含血清的新鮮培養基中溫育24小時。當化合物處理完成后，加入MTT指示染料在37℃溫育4小時。然后加溶細胞，并將每孔中的等份液樣轉移到96孔培養板中供分析用。采用ELISA平板讀數器記錄570nm波長處的吸光度(參考波長630nm)。結果以存活百分率報道，采用無藥物(100％存活率)和預加溶(0％存活率)標準。如表I中的數據所示，本發明化合物為有效的平滑肌細胞增殖抑制劑。表1</tables>對于本發明的代表性化合物以及它們的制備方法，下面提供了非限制性的說明實施例。實施例1步驟1丁亞氨酸乙酯鹽酸鹽在冰浴中冷卻丁腈(34.5g，；0.5mol)的乙醇(25g；0.54mol)溶液。然后將此冰冷溶液用氯化氫氣體飽和。再冷凍反應混合物18小時。真空蒸除過量乙醇。然后用少量乙醚處理殘留油。收集無色固體，得到標題化合物(23g；30％收率)。該產物用于本實施例步驟2的反應中。1HNMR(DMSO-d6；200MHz)δ12.22(br.s，1H)，11.33(br.s，1H)，4.46(q，2H)，2.62(t，2H)，1.65(m，2H)，1.32(t，3H)，和0.92ppm(t，3H).步驟2苯基-(2-丙基-1H-苯并咪唑-5-基)-甲酮將3，4-二氨基二苯酮(21.2g；0.1mol)和丁亞氨酸乙酯鹽酸鹽(22.7g；0.15mol)的乙醇(500mL)混合物加熱回流6小時。環境溫度攪拌混合物18小時。蒸除溶劑并將殘留物通過硅膠快速色譜純化(乙酸乙酯/己烷；1∶1)。用乙酸乙酯結晶，得到12g(45％收率)標題化合物，為灰白色固體，m.p.131-132℃。元素分析C17H16N2O計算值C，77.25；H，6.10；N，10.60.實測值C，77.20；H，6.06；N，10.72.質譜(EI；M+)m/z264.1HNMR(DMSO-d6；400MHz)δ12.56(br.s，1H)，7.84(s，1H)，7.73(m，2H)，7.65(m，1H)，7.60(s，2H)，7.56(t，2H)，2.82(t，2H)，1.80(m，2H)和0.95ppm(t，3H).實施例2步驟14-(5-苯甲酰基-2-丙基-苯并咪唑-1-基甲基)-苯甲酸甲酯(A)和4-(6-苯甲酰基-2-丙基-苯并咪唑-1-基甲基)苯甲酸甲酯(B)氮氣氛下，將苯基-(2-丙基-1H-苯并咪唑-5-基)甲酮(12.1g；45.8mmol)溶于DMF(300mL)。然后分批加入氫化鈉(60％油分散物，3.7g；92.0mmol)。隨后環境溫度攪拌混合物0.5小時。加入4-溴甲基苯甲酸甲酯(10.5g；45.8mmol)。攪拌反應混合物4小時，然后加入水(50mL)。真空濃縮混合物。隨后將殘留物通過硅膠快速色譜純化(乙酸乙酯/己烷；1∶1)，得到標題化合物。首先洗脫出化合物(A)，得到8.3g(44％收率)白色固體，m.p.115-117℃。元素分析C26H24N2O3計算值C，75.71；H，5.86；N，6.79.實測值C，75.77；H，5.98；N，6.61.質譜(PBEI；M+)m/z412.1H-NMR(DMSO-d6；400MHz)δ7.95(t，3H)，7.73(d，2H)，7.59-7.68(m，3H)，7.56(t，2H)，7.23(d，2H)，5.67(s，2H)，3.82(s，2H)，2.82(t，2H)，1.74(m，2H)，和0.92ppm(t，3H).位置異構體的確認基于1H-NMR(NOE)測定。隨后洗脫出化合物(B)，得到3.8g(20％)白色固體，m.p.142-144℃。元素分析C26H24N4O3計算值C，75.71；H，5.86；N，6.79.實測值C，75.72；H，6.00；N，6.63.質譜(PBEI；M+)m/z412.1H-NMR(DMSO-d6；400MHz)δ7.92(d，2H)，7.82(s，1H)，7.73(d，1H)，7.58-7.64(m，4H)，7.48(t，2H)，7.20(d，2H)，5.68(s，2H)，3.83(s，2H)，2.87(t，2H)，1.77(m，2H)，和0.94PPM(T，3H).位置異構體的確認基于1H-NMR(NOE)測定。步驟24-(5-苯甲酰基-2-丙基-苯并咪唑-1-基甲基)-苯甲酸乙酯將4-(5-苯甲酰基-2-丙基-苯并咪唑-1-基甲基)-苯甲酸甲酯(2.0g)在乙醇合氯化氫(100mL)中加熱回流24小時。蒸除溶劑。殘留物溶于新蒸餾乙醇(100mL)中。所得溶液用碳脫色。過濾混合物并蒸發。將殘留物溶于乙酸乙酯并依次用飽和碳酸氫鈉溶液和水洗滌。蒸發有機相。殘留物用乙酸乙酯/己烷結晶，得到1.2g(57％收率)標題化合物，為白色固體，m.p.126-128℃。元素分析C27H26N2O3計算值C，76.03；H，6.14；N，6.57.實測值C，76.04；H，6.12；N，6.56.質譜(EI；M+)m/z426.1H-NMR(DMSO-d6；400MHz)δ7.95(s，1H)，7.92(d，2H)，7.73(d，2H)，7.62-7.68(m，3H)，7.53-7.59(m，2H)，7.22(d，2H)，5.67(s，2H)，4.28(q，2H)，2.82(t，2H)，1.74(m，2H)，1.28(t，3H)，和0.92ppm(t，3H).實施例34-(6-苯甲酰基-2-丙基-苯并咪唑-1-基甲基)-苯甲酸乙酯按照實施例2步驟2中所述方法，采用1.5g4-(6-苯甲酰基-2-丙基-苯并咪唑-1-基甲基)苯甲酸甲酯，制備標題化合物。經乙酸乙酯/己烷結晶后，得到0.9g(57％收率)標題化合物，為白色固體，m.p.124-126℃。元素分析C27H26N2O3計算值C，76.03；H，6.14；N，6.57.實測值C，75.94；H，6.08；N，6.54.質譜(EI；M+)m/z426.1H-NMR(DMSO-d6；400MHz)δ7.92(d，2H)，7.81(s，1H)，7.72(d，1H)，7.58-7.65(m，4H)，7.49(t，2H)，7.20(d，2H)，5.68(s，2H)，4.29(q，2H)，2.88(t，2H)，1.77(m，2H)，1.29(t，3H)，和0.94ppm(t，3H).實施例44-(6-苯甲酰基-2-丙基-苯并咪唑-1-基甲基)苯甲酸將氫氧化鉀溶液(1.0g/10mL水)加到4-(6-苯甲酰基-2-丙基-苯并咪唑-1-基甲基)-苯甲酸甲酯(1.0g)的甲醇(25mL)溶液內。加熱回流混合物3小時。隨后冷卻反應混合物至環境溫度。真空蒸除甲醇。殘留物用水(30mL)稀釋，爾后用乙酸乙酯(24mL)提取。水相用1NHCl酸化。收集所沉淀出的固體并風干，得到標題化合物(0.6g，63％收率)，為白色固體，m.p.295-296℃。元素分析C25H22N2O3計算值C，75.36；H，5.57；N，7.03.實測值C，75.03；H，5.65；N，6.86.質譜(PBEI；M+)m/z398.1H-NMR(DMSO-d6；400MHz)δ13.0(brs，1H)，7.91(d，2H)，7.82(s，1H)，7.72(d，1H)，7.58-7.64(m，4H)，7.47(t，2H)，7.18(d，2H)，5.67(s，2H)，2.88(t，2H)，1.78(m，2H)，和0.94ppm(t，3H).實施例54-(5-苯甲酰基-2-丙基-苯并咪唑-1-基甲基)-苯甲酸按照實施例4步驟1中所述方法，采用1.0g4-(5-苯甲酰基-2-丙基-苯并咪唑-1-基甲基)苯甲酸甲酯，制備標題化合物。得到0.65g(67％收率)標題化合物，為白色固體，m.p.125-128℃。元素分析C25H22N2O3計算值C，75.36；H，5.57；N，7.03.實測值C，74.96；H，5.79；N，6.72.質譜(PBCI+；[M+H])m/z399.1H-NMR(DMSO-d6；400MHz)δ12.96(brs，1H)，7.95(s，1H)，7.90(d，2H)，7.73(dd，2H)，7.60-7.68(m，3H)，7.56(t，2H)，7.20(d，2H)，5.67(s，2H)，2.83(dd，2H)，1.75(m，2H)，和0.93ppm(t，3H).實施例6步驟14-[6-(羥基-(苯基)-甲基)-2-丙基-苯并咪唑-1-基甲基]-苯甲酸乙酯向4-(6-苯甲酰基-2-丙基苯并咪唑-1-基甲基)-苯甲酸乙酯(1.5g；3.5mmol)的乙醇(50mL)溶液中加入硼氫化鈉(1.0g；29.4mmol)。環境溫度攪拌4小時后，加入丙酮(20mL)。蒸除溶劑。殘留物溶于乙酸乙酯內并水洗。蒸發有機相，得到標題化合物(0.9g，60％收率)，為白色固體，該產物無需進一步純化而直接用于步驟2中。步驟24-[5-(羥基-(苯基)-甲基)-2-丙基-苯并咪唑-1-基甲基]-苯甲酸將氫氧化鉀溶液(1.0g/10mL水)加到4-[6-(羥基-(苯基)-甲基)-2-丙基-苯并咪唑-1-基甲基]-苯甲酸乙酯(0.5g)的乙醇(40mL)溶液內。加熱回流混合物4小時。蒸除溶劑。殘留物溶于水中并用1NHCl中和。過濾收集固體并干燥，得到標題化合物的一水合物(0.3g，60％收率)，m.p.146-149℃。元素分析C25H24N2O3·H2O計算值C，71.75；H，6.26；N，6.69.實測值C，71.78；H，5.86；N，6.39.質譜(DCI+[M+H]+m/z401.1H-NMR(DMSO-d6；400MHz)δ12.96(brs，1H)，7.89(d，2H)，7.50(m，2H)，7.31(d，2H)，7.23(t，2H)，7.16(t，4H)，5.86(br.s，1H)，5.74(s，1H)，5.58(s，2H)，2.81(t，2H)，1.73(m，2H)，和0.91(t，3H).實施例7步驟14-[5-(羥基-(苯基)-甲基)-2-丙基-苯并咪唑-1-基甲基]-苯甲酸乙酯按照實施例6步驟1中所述方法，采用1.5g4-(5-苯甲酰基-2-丙基苯并咪唑-1-基甲基)-苯甲酸乙酯，制備標題化合物。得到1.0g(67％收率)標題化合物。該產物未經進一步純化而直接用于步驟2中。步驟24-[5-(羥基-(苯基)-甲基)-2-丙基-苯并咪唑-1-基甲基]-苯甲酸鹽酸鹽將氫氧化鉀溶液(1.0g/10mL水)加到4-[5-(羥基-(苯基)-甲基)-2-丙基-苯并咪唑-1-基甲基]-苯甲酸乙酯(0.5g)的乙醇(30mL)溶液內。加熱回流混合物4小時。蒸除溶劑。殘留物溶于溫水(50mL)中，所得溶液用濃HCl酸化。過濾收集沉淀出的固體并干燥，得到(0.4g，75％收率)標題化合物，為一鹽酸鹽一水合物，系白色固體，m.p.209-212℃。元素分析C25H24N2O3·HCl·H2O計算值C，66.00；H，5.98；N，6.16；Cl，7.81.實測值C，65.90；H，5.82；N，6.15；Cl，8.20.質譜(EI；M+)m/z400.1H-NMR(DMSO-d6；400MHz)δ13.0(brs，1H)，7.90(d，2H)，7.82(s，1H)，7.64(d，1H)，7.47(d，1H)，7.39(d，2H)，7.28-7.34(q，4H)，7.19(t，1H)，6.12(brs，1H)，5.89(s，1H)，5.81(s，2H)，3.14(t，2H)，1.77(m，2H)和0.92ppm(t，3H).實施例8[1-(3，4-二氯-芐基)-2-丙基-1H-苯并咪唑-5-基]-苯基-甲酮將苯基-(2-丙基-1H-苯并咪唑-5-基)甲酮(5.28g；0.02mol)的DMF(80mL)溶液在氮氣氛下攪拌。加入氫化鈉(60％油分散物，0.8g；0.02mol)。隨后環境溫度攪拌0.5小時，再分批加入3，4-二氯芐基溴(4.8g；0.02mol)。混合物在80-90℃下攪拌3.5小時，然后環境溫度攪拌18小時。真空蒸除溶劑。殘留物用乙酸乙酯(300mL)提取并水洗(2×200ml)。蒸發有機相。通過硅膠快速色譜純化(乙酸乙酯/己烷；1∶9至1∶3)。經乙酸乙酯重結晶后，得到標題化合物(4.2g；50％收率)，為白色固體，m.p.168-169℃。元素分析C24H20Cl2N2O計算值C，68.09；H，4.76；N，6.62.實測值C，67.70；H，4.46；N，6.49.質譜(DEI；M+)m/z422，424，426.1H-NMR(DMSO-d6；400MHz)δ7.94(d，1H)，7.73(d，2H)，7.64-7.72(m，3H)，7.59(m，1H)，7.56(t，2H)，7.47(d，1H)，6.98(dd，1H)，5.59(s，2H)，2.84(t，2H)，1.76(m，2H)和0.94ppm(t，3H)。實施例9步驟14-羥基-3-甲氧基苯甲亞氨酸乙酯鹽酸鹽在冰浴中冷卻4-羥基-3-甲氧基芐腈(10g，；67mmol)的乙醇(60mL)溶液。然后將此冰冷溶液用氯化氫飽和。繼續冷凍反應混合物18小時。過濾收集沉淀，得到7.2g(47％收率)無色固體標題化合物，此產物用于下步反應中。m.p.151-154℃。1H-NMR(DMSO-d6；200MHz)δ11.78(s，1H)，10.9(s，1H)，7.8(s，1H)，7.6(d，1H)，6.98(d，1H)，4.5(q，2H)，3.8(s，3H)和1.4ppm(t，3H).步驟2[2-(4-羥基-3-甲氧基-苯基)-1H-苯并咪唑-5-基]-苯基-甲酮環境溫度攪拌3，4-二氨基二苯酮(2.12g；10mmol)和4-羥基-3-甲氧基-苯甲亞氨酸乙酯鹽酸鹽(2.31g；10mmol)在乙醇(70mL)中的混合物18小時。過濾分離所形成的黃色固體。用乙醇重結晶，得到862mg(26％收率)標題化合物的鹽酸鹽，為奶油色固體，m.p.261℃(分解)。元素分析C21H16N2O3·HCl計算值C，66.23；H，4.50；N，7.35.實測值C，65.69；H，4.37；N，7.18.1H-NMR(DMSO-d6；400MHz)δ8.08(s，1H)，8.02(s，1H)，7.85-7.92(m，3H)，7.8(d，2H)，7.7(t，1H)，7.6(t，2H)，7.08(d，1H)，3.9(s，3H)，3.8ppm(s，1H).實施例10步驟14-己氧基-3-甲氧基芐腈10分鐘內，向氫化鈉(60％油分散物)(4.8g；0.11mol)的DMF(40mL)懸浮液中滴加入4-羥基-3-甲氧基芐腈(14.9g；0.1mol)的DMF(40mL)溶液。加完之后，環境溫度攪拌反應混合物30分鐘，然后加入溴己烷(16.5g；0.1mol)的DMF(20mL)溶液。環境溫度攪拌反應混合物18小時。濃縮含DMF的反應混合物，得到殘留物。向殘留物中加入水(100mL)，過濾收集固體，得到8.2g(35％收率)標題化合物，為白色固體。1H-NMR(DMSO-d6；200MHz)δ7.45(s，1H)，7.42(s，1H)，7.1(d，1H)，4.0(t，2H)，3.8(s，3H)，1.6-1.8(m，2H)，1.2-1.5(m，8H)和0.9ppm(t，3H).步驟24-己氧基-3-甲氧基-苯甲亞氨酸甲酯鹽酸鹽按照實施例9步驟1中所述方法，采用4-己氧基-3-甲氧基芐腈(4.0g；17mmol)和甲醇為原料，制得標題化合物(3.1g；60％收率)。1H-NMR(DMSO-d6；200MHz)δ11.6(s，1H)，7.8-7.7(d，2H)，7.2(d，1H)，4.13(s，3H)，4.1(t，2H)，3.82(s，3H)，1.6-1.8(m，2H)，1.2-1.5(m，8H)，0.85ppm(t，3H).步驟3[2-(4-己氧基-3-甲氧基-苯基)-1H-苯并咪唑-5-基]-苯基-甲酮環境溫度攪拌3，4-二氨基二苯酮(1.49g；6.6mmol)和4-己氧基-3-甲氧基-苯甲亞氨酸甲酯鹽酸鹽(2.0g；6.6mmol)在甲醇(50mL)中的混合物72小時。過濾收集所形成的沉淀，得到1.4g(50％收率)標題化合物，為奶油色固體，m.p.150-153℃。元素分析C27H28N2O3計算值C，75.68；H，6.59；N，6.54.實測值C，75.67；H，6.59；N，6.54.質譜(EI；M+)m/z428.1H-NMR(DMSO-d6；400MHz)δ7.85-7.9(d，1H)，7.71-7.8(m，4H)，7.62-7.7(dd，3H)，7.6(t，2H)，7.15(d，1H)，4.1(t，2H)，3.89(s，3H)，1.7-1.8(m，2H)，1.38-1.46(m，2H)，1.26-1.35(m，4H)，0.88ppm(t，3H).實施例11步驟14-三氟甲氧基-苯甲亞氨酸甲酯鹽酸鹽采用實施例9步驟1中所述方法，由5.0g(26mmol)4-三氟甲氧基芐腈和50mL甲醇制得4.0g標題化合物，收率59％，m.p.148-151℃。步驟2苯基-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-1H-苯并咪唑-5-基]甲酮按照實施例10步驟3中所述方法，采用4-三氟甲氧基-苯甲亞氨酸甲酯鹽酸鹽(2.0g；7.8mmol)制備標題化合物。經甲醇重結晶后，得到1.5g(52％)灰白色固體。m.p.215-217℃。元素分析C21H13N2O2F3計算值C，65.97；H，3.43；N，7.33.實測值C，66.09；H，3.28；N，7.34.1H-NMR(DMSO-d6；200MHz)δ13.5(d，1H)，8.3-8.4(d，2H)，7.9-8.1(d，1H)，7.7-7.9(m，5H)，7.5-7.6ppm(m，4H).實施例12步驟13，4-二甲氧基苯基-乙亞氨酸甲酯鹽酸鹽按照實施例9步驟1中所述方法，采用3，4-二甲氧基苯基乙腈(10g；56mmol)/甲醇(150mL)，制備標題化合物，得到7.8g(54％收率)標題化合物，并用于下步反應中。步驟2[2-(3，4-二甲氧基芐基)-1H-苯并咪唑-5-基]-苯基-甲酮環境溫度攪拌3，4-二甲氧基苯基-乙亞氨酸甲酯鹽酸鹽(2.5g；10mmol)和2，3-二氨基二苯酮(2.1g；10mmol)在甲醇(70mL)的混合物72小時。濃縮反應混合物至干，加水。將固體(2.3g)通過硅膠快速色譜純化(CH2Cl2/MeOH；9∶1)，得到膠狀固體。將其溶于乙醚中，加入乙醚-HCl，得到米色固體標題化合物，系鹽酸鹽五水合物(250mg)，m.p.172-175℃。元素分析C23H20N2O3HCl.5H2O計算值C，66.97；H，5.23；N，6.79.實測值C，67.11；H，4.84；N，6.77.質譜(EI；M+)m/z372.1H-NMR(DMSO-d6；400MHz)δ8.0(s，1H)，7.84-7.9(m，2H)，7.68-7.77(m，3H)，7.55-7.61(m，2H)，7.2(s，1H)，6.93-7.01(m，2H)，4.42(s，2H)，3.79(s，3H)，3.77ppm(s，3H).權利要求1.式I或式II化合物的可藥用鹽其中R為C1-C6烷基，苯基，芐基，被一個或多個下述基團取代的苯基或芐基羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-鹵代烷氧基、三氟甲基或C1-C6烷基；R2為氫，鹵素，C1-C6烷氧基或C1-C6烷基；R1為氫，C1-C6烷基，C6-C10芳基，C7-C12芳烷基，或被一個或多個鹵原子、羧基、C2-C6烷氧羰基或C7-C12芳氧基羰基取代的芐基；其條件是式II化合物的可藥用鹽不包括α-(3-氟苯基)-2-甲基-1H-苯并咪唑-5-甲醇一鹽酸鹽或2-甲基-α-苯基-1H-苯并咪唑-5-甲醇鹽酸鹽。2.式I化合物或其可藥用鹽其中R為C1-C6烷基，苯基，芐基，被一個或多個下述基團取代的苯基或芐基羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-鹵代烷氧基、三氟甲基或C1-C6烷基；R2為氫，鹵素，C1-C6烷氧基或C1-C6烷基；R1為氫，C1-C6烷基，C6-C10芳基，C7-C12芳烷基，或被一個或多個鹵原子、羧基、C2-C6烷氧羰基或C7-C12芳氧基羰基取代的芐基；其條件是當R1和R2為氫時，R不為苯基或對甲氧基苯基。3.式I或式II化合物或它們的可藥用鹽其中R為C1-C6烷基，取代苯基或取代芐基，其中所述取代基為一個或多個羥基，C1-C6烷氧基，三氟甲基，或C1-C6烷基；R2為氫；R1為氫，芐基或被一個或多個鹵原子、羧基、C2-C6烷氧羰基或C7-C12芳氧基羰基取代的芐基；其條件是，在式I中，當R1和R2為氫時，R不為對甲氧基苯基。4.根據權利要求1，2或3的化合物，其中R為C1-C6烷基，苯基，被一個或多個下述基團取代的苯基或芐基羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-鹵代烷氧基或C1-C6烷基；R2為氫；R1為氫或被一個或多個鹵原子、羧基或C2-C6烷氧羰基取代的芐基。5.下列化合物苯基-(2-丙基-1H-苯并咪唑-5-基)-甲酮或其可藥用鹽；4-(5-苯甲酰基-2-丙基-苯并咪唑-1-基甲基)-苯甲酸乙酯或其可藥用鹽；4-(6-苯甲酰基-2-丙基-苯并咪唑-1-基甲基)-苯甲酸乙酯或其可藥用鹽；4-(6-苯甲酰基-2-丙基-苯并咪唑-1-基甲基)-苯甲酸或其可藥用鹽；4-(5-苯甲酰基-2-丙基-苯并咪唑-1-基甲基)-苯甲酸或其可藥用鹽；4-[5-(羥基-(苯基)-甲基)-2-丙基-苯并咪唑-1-基甲基]苯甲酸或其可藥用鹽；[1-(3，4-二氯芐基)-2-丙基-1H-苯并咪唑-5-基]-苯基-甲酮或其可藥用鹽；[2-(4-羥基-3-甲氧基-苯基)-1H-苯并咪唑-5-基]-苯基-甲酮或其可藥用鹽；[2-(4-己氧基-3-甲氧基-苯基)-1H-苯并咪唑-5基]-苯基-甲酮或其可藥用鹽；苯基-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-1H-苯并咪唑-5-基]-甲酮或其可藥用鹽；[2-(3，4-二甲氧基芐基)-1H-苯并咪唑-5-基]-苯基-甲酮或其可藥用鹽。6.一種藥物組合物，包括下述式I或式II化合物或它們的可藥用鹽，以及可藥用載體其中R為C1-C6烷基，苯基，芐基，被一個或多個下述基團取代的苯基或芐基羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-鹵代烷氧基、三氟甲基或C1-C6烷基；R2為氫，鹵素，C1-C6烷氧基或C1-C6烷基；R1為氫，C1-C6烷基，C6-C10芳基，C7-C12芳烷基，或被一個或多個鹵原子、羧基、C2-C6烷氧羰基或C7-C12芳氧基羰基取代的芐基。7.一種治療哺乳動物的方法，包括給這種哺乳動物口服或非腸道施用下述式I或式II化合物或它們的可藥用鹽其中R為C1-C6烷基，苯基，芐基，被下述基團取代的苯基或芐基羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-鹵代烷氧基、三氟甲基或C1-C6烷基；R2為氫，鹵素，C1-C6烷氧基或C1-C6烷基；R1為氫，C1-C6烷基，C6-C10芳基，C7-C12芳烷基，或被一個或多個鹵原子、羧基、C2-C6烷氧羰基或C7-C12芳氧基羰基取代的芐基。8.根據權利要求7的方法，其中所述治療方法是用于預防哺乳動物平滑肌細胞增殖。9.根據權利要求8的方法，其中所述的平滑肌細胞增殖在血管成形術之后表現為再狹窄。10.用于治療哺乳動物的下述式I或式II化合物或它們的可藥用鹽其中R為C1-C6烷基，苯基，芐基，被下述基團取代的苯基或芐基羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-鹵代烷氧基、三氟甲基或C1-C6烷基；R2為氫，鹵素，C1-C6烷氧基或C1-C6烷基；R1為氫，C1-C6烷基，C6-C10芳基，C7-C12芳烷基，或被一個或多個鹵原子、羧基、C2-C6烷氧羰基或C7-C12芳氧基羰基取代的芐基。11.如權利要求10中所述的化合物，所述化合物用于治療與平滑肌細胞增殖有關的疾病或病癥。12.根據權利要求3、4或5的化物，所述化合物用于治療哺乳動物。13.根據權利要求3、4或5的化合物，所述化合物用于治療與平滑肌細胞增殖有關的疾病或病癥。14.根據權利要求11或13的化合物，其中所述平滑肌細胞增殖在血管成形術之后表現為再狹窄。15.制備下述式I或II化合物的方法其中R為C1-C6烷基，苯基，被下述基團取代的苯基或芐基羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-鹵代烷氧基、三氟甲基或C1-C6烷基；R2為氫，鹵素，C1-C6烷氧基或C1-C6烷基；R1為氫，C1-C6烷基，C6-C10芳基，C7-C12芳烷基，或被一個或多個鹵原子、羧基、C2-C6烷氧羰基或C7-C12芳氧基羰基取代的芐基；該方法包括(a)使式RCN的腈與醇和氯化氫反應，產生式(1)化合物其中R的定義如上；(b)將式1化合物與下式3，4-二氨基二苯酮在回流的醇中反應其中R2的定義如上，產生相應的式(2)化合物；(c)任選地用烷基、芳基或芳烷基鹵化物在堿存在下烷基化式(2)化合物，得到異構體(3a，3b)；(d)任選地通過重結晶和色譜法分離上述異構體；(e)并任選地將式(I)化合物與還原劑進一步反應，得到相應的式(II)化合物。全文摘要本發明公開了式(Ⅰ)或(Ⅱ)化合物和它們的可藥用鹽:其中R代表烷基,苯基或取代苯基;R文檔編號C07D235/18GK1192205SQ96195888公開日1998年9月2日申請日期1996年6月3日優先權日1995年6月6日發明者H·M·艾羅達,C·西-伊爾,T·S·蘇爾科斯基申請人:美國家用產品公司