通過具有組氨酸的水性制劑在弱酸性至中性pH穩定的免疫球蛋白的制作方法
【專利說明】通過具有組氨酸的水性制劑在弱酸性至中性pH穩定的免 疫球蛋白
[0001] 本申請是申請日為2011年09月16日、申請號為201180044452. 4 (國際申請號為 PCT/US2011/052053)、名稱為通過具有組氨酸的水性制劑在弱酸性至中性pH穩定的免疫 球蛋白的發明專利申請的分案申請。
[0002] 相關申請的交叉引用
[0003] 本申請要求美國臨時申請號61/384,209(其于2010年9月17日提交，并為所有 目的將其申請的內容以其整體通過引用的方式明確地納入本文）的權益。
【背景技術】
[0004] 生物學通過生物過程創造醫藥產品，包括從天然來源（例如人類血漿）分 離配制品和重組DNA技術。在醫療保健和制藥行業內，對患者的治療和整體收入增 長，生物學產品正變得越來越重要（GoodmanM.NatRevDrugDiscov. (2009)Nov; 8(11) :837)。一類重要的生物藥物是治療性蛋白質，無論是從天然來源分離的，還是重 組產生的。例如，通過從匯集的人類血漿中分離，制備血漿蛋白質，用于治療性地給藥， (例如GAMMAGARDLIQUID?[IVIG，ImmuneGlobulinIntravenous(Human) 10 % ]; BaxterInternational,Deerfield,IL)和重組的方式（例如ADVATE?[AntihemophilicFactor(Recombinant)，Plasma/Albumin-FreeMethod]；Baxter International,Deerfield,IL)〇
[0005]治療性蛋白質的給藥主要通過靜脈（IV)、皮下（S?和肌肉內給藥，但是也可以根 據所述治療性蛋白質和待治療的病情，使用其它給藥途徑。大多數免疫球蛋白按照較大體 積靜脈給藥，可以通過所述靜脈途徑迅速遞送，以提供需要的IgG生理水平，以便有效地 治療各種疾病，如原發性免疫缺陷（PID)、免疫（先天的）血小板減少性紫癜（ITP)和川崎 綜合征。由于IV給藥的性質，通過這條路線的治療過程是緩慢的、及時的過程，導致患者依 從性的問題。
[0006] 治療性蛋白質的皮下（S?給藥是靜脈給藥的替代途徑。與靜脈注射相比，SQ給 藥有以下幾個優點。例如，它可以降低全身性反應的發生率，不要求有時困難的IV途徑，并 給出了患者更大的獨立性。
[0007] 為了提高患者依從性，提供在液體中蛋白質（準備用于制劑），是方便的。然而， 當在中性或接近中性的pH值時配制，許多人或人源化治療性蛋白質是不穩定的。蛋白質 存在的各種降解途徑，尤其是在液體制劑中，意味著化學和物理性質的不穩定。化學不穩 定性，包括脫氨、聚集、剪切的肽骨架和蛋氨酸殘基的抗氧化。物理性質的不穩定現象，包 括，例如，聚合。蛋白質不穩定性，特別是在弱酸性至中性pH值不穩定蛋白質的問題尤其嚴 重。為了解決這些問題，靜脈給藥的免疫球蛋白都已經被配制成酸性pH，有效地提高他們 在所述制劑中的穩定性（配制成酸性pH值的產品，例如，Gamunex(Talecris)，Gammagard Liquid(Baxter)或Privigen(CSL)。
[0008] 為了解決這些問題，治療性蛋白質通常配制成在酸性pH，這有效地增加了它們在 所述制劑中的穩定性。不幸的，科學類出版物已經報道，例如，酸性水性配制物的肌肉內給 藥能導致疼痛感，并且潛在地導致組織損傷（Steenetal.，2001;Slukaetal.，2000,為 所有目的，其公開以其整體通過參考的方式并入本文）。在其他情況下，其中水性制劑已被 發現不能充分地穩定所述治療性蛋白質，使用凍干制劑（其在在給藥前必須再生）。在這兩 種情況下，這些因素給患者可以導致不太滿意的藥物給藥經驗和/或不便，導致患者的依 從性降低。
[0009] 美國專利號6, 267, 958描述了凍干單克隆抗體的制劑，所述單克隆抗體制劑具有 低濃度的、pH6. 0或7. 0的組氨酸緩沖劑（例如5-10mM)，和二糖（即蔗糖或者海藻糖）； 所述二糖摩爾濃度為所述單克隆抗體摩爾濃度100至1500的倍。然而，所述單克隆抗體制 劑在缺乏所述二糖時是不穩定的，如被在再生期間高水平的聚集（當與單獨的組氨酸配制 時，）證明的。
[0010] 美國專利申請出版號2010/0015157描述了具有pH5. 5或6. 5、低濃度組氨酸乙酸 鹽緩沖劑（即10_20mM)，以及非離子表面活性劑和/或二糖（蔗糖或海藻糖）的單克隆抗 體制劑。然而，所述單克隆抗體制劑在缺乏非離子表面活性劑和/或二糖類時是不穩定的， 如通過高濁度和水平的抗體聚集（在與組氨酸單獨配制時的組合物中觀察到）所證明的。
[0011] 因此，有需要一種技術，開發制劑和配制方法，以使這些易變的治療性蛋白質在水 性組合物（在弱酸性至中性pH)中穩定。本發明滿足這些和其他需要，在其他方面，提供免 疫球蛋白組合物，與組氨酸在弱酸性至中性pH配制時使所述易變的治療性蛋白質穩定。
[0012] 發明概述
[0013] 本發明部分地是基于以下意外發現：在免疫球蛋白組合物中包括組氨酸，并配制 成弱酸性至中性，使所述制劑顯著地穩定。
[0014] 有利的是，本文提供的所述儲存穩定的水性免疫球蛋白組合物，在不同溫度下長 期保持穩定（例如一年或更久），而沒有將額外的賦形劑和糖類納入作為包含物。
[0015] 與先前描述的單克隆抗體組合物相反，所述單克隆抗體組合物使用低濃度的組氨 酸（即，從5mM至20mM)在弱酸性到中性pH配制，本發明所提供的所述水性免疫球蛋白組 合物用中度到高濃度的組氨酸（即從50mM到500mM)配制；本發明所述的水性免疫球蛋白 組合物在弱酸性到中性pH值、缺乏表面活性劑（例如，非離子表面活性劑等，例如聚山梨酯 80)和糖類（例如，二糖類，如蔗糖和海藻糖）的情況下是穩定的。使用更少的成分配制所述 免疫球蛋白制劑可能是有益的，因為急性腎功能衰竭或不足已經與使用IVIG與蔗糖、麥芽 糖和葡萄糖一起配制相聯系（MMWRMorbMortalWklyR印.1999Jun25 ;48 (24): 518-21 ; Kwanetal.HongKongMedJ.2005Feb; 11(1): 45-9)。相似地，嚴重的過敏性反應可能會 在患者中發生，所述患者給藥與聚山梨酯80配制的IVIG。事實上，Hizentrak(1臟?6 GlobulinSubcutaneous(Human), 20 % 液體；CSLBehringAG,Bern,Switzerland)在 這種患者中是禁忌的，所述患者對給藥人免疫球蛋白或者Hizentra(例如聚山梨酯 80(HizentraPrescribingInformation)的成分是過敏的。進一步地，穩定地配制在弱酸 性至中性的免疫球蛋白的能力，允許制備藥物組合物，所述藥物組合物可以皮下地或肌肉 內給藥，而沒有疼痛和潛在的組織損傷（其與在酸性pH配制的組合物的SQ和IM給藥相 關）。
[0016] 在一個方面中，本發明提供儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物，其包含：（a)免 疫球蛋白；（b)從50mM至500mM的組氨酸；（c)從OmM至10mM的堿金屬陽離子；以及（d)從 5. 5 至 7. 0 的pH。
[0017] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 組合物含有從150mM至350mM的組氨酸。
[0018] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 組合物含有從225mM至275mM的組氨酸。
[0019] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 組合物含有從OmM至ImM的堿金屬陽離子。
[0020] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 組合物含有從10mM至400mM的氯離子。
[0021] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 組合物含有從l〇〇mM至200mM的氯離子。
[0022] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 組合物的pH為從5. 5至6. 5。
[0023] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 組合物的pH為6. 1±0. 2。
[0024] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 組合物進一步包含抗氧化劑。
[0025] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 組合物不含有表面活性劑或者糖。
[0026] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 組合物在惰性氣體中儲存。
[0027] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 組合物在惰性氣體中儲存，所述惰性氣體選自：氮氣、氬氣、二氧化碳、氦氣、氪氣和氙氣。
[0028] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 組合物儲存在氮氣中。
[0029] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 組合物儲存在氬氣中。
[0030] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 免疫球蛋白為多克隆免疫球蛋白。
[0031] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 免疫球蛋白為單克隆免疫球蛋白。
[0032] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 免疫球蛋白為IgG免疫球蛋白。
[0033] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 免疫球蛋白從匯集的人類血漿富集。
[0034] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 免疫球蛋白為重組免疫球蛋白。
[0035] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 免疫球蛋白的濃度為50±5g/L。
[0036] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 免疫球蛋白的濃度小于50g/L。
[0037] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 免疫球蛋白的濃度至少50g/L。
[0038] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 免疫球蛋白的濃度為從50g/L至150g/L。
[0039] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 免疫球蛋白的濃度為l〇〇±l〇g/L。
[0040] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 免疫球蛋白的濃度至少為l〇〇g/L。
[0041] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 免疫球蛋白的濃度為150±15g/L。
[0042] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 免疫球蛋白的濃度為從150g/L至250g/L。
[0043] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 免疫球蛋白的濃度為200±20g/L。
[0044] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，所述 免疫球蛋白的濃度至少為200g/L。
[0045] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，其中 當所述組合物儲存在從38°C至42°C下，其穩定為期至少一個月。
[0046] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，當所 述組合物儲存在從38°C至42°C下，其穩定為期至少三個月。
[0047] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，當所 述組合物儲存在從38°C至42°C下，其穩定為期至少6個月。
[0048] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，當所 述組合物儲存在從28°C至32°C下，其穩定為期至少6個月。
[0049] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，當所 述組合物儲存在從28°C至32°C下，其穩定為期至少1年。
[0050] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，當所 述組合物儲存在從28°C至32°C下，其穩定為期至少2年。
[0051] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，只要 所述免疫球蛋白在聚集態中的百分比保持低于2| %，所述組合物被認為是穩定的。
[0052] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，只要 所述免疫球蛋白在所述聚集態中的百分比為從〇%至2%并且所述免疫球蛋白在所述單體 狀態中的百分比為從85%至100%，那么所述組合物被認為是穩定的。
[0053] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，具有 所述相同成分的組合物，但其配制為PH4. 8,當其儲存在從38°C至42°C下，其是穩定的為期 小于1個月。
[0054] 在上文提供的所述儲存穩定的、水性免疫球蛋白組合物的具體實施方案中，具有 所述相同成分的組合物，但其配制為PH4. 8,當其儲存在從28°C至32°C下，其是穩定的為 期小于6個月。
[0055] 在一個方面中，本發明提供穩定免疫球蛋白組合物的方法，所述方法包括配制pH 為在5. 5和7.0之間的所述組合物，其中所述配制的組合物包含：(a)免疫球蛋白；(b)從 50mM至500mM的組氨酸；以及（c)從OmM至10mM的堿金屬陽離子。
[0056] 在上文提供的所述方法的具體實施方案中，所述配制的組合物含有從150mM至 350mM的組氨酸。
[0057] 在上文提供的所述方法的具體實施方案中，所述配制的組合物含有從225mM至 275mM的組氨酸。
[0058] 在上文提供的所述方法的具體實施方案中，所述配制的組合物含有從OmM至ImM 的堿金屬陽離子。
[0059] 在上文提供的所述方法的具體實施方案中，所述配制的組合物含有從10mM至 400mM的氯離子。
[0060] 在上文提供的所述方法的具體實施方案中，所述配制的組合物含有從100mM至 200mM的氯離子。
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