本發明屬(shu)于藥物中間體合成(cheng)，具體地，涉及一(yi)種tbs保(bao)護的鳥(niao)苷衍生物的制備方法。

背景技術：

1、糖環(huan)上tbs取代(dai)的(de)(de)核(he)(he)苷常作為制備寡核(he)(he)苷酸(suan)單(dan)(dan)體(ti)(ti)的(de)(de)重要基礎原(yuan)料，其(qi)進一步衍生的(de)(de)亞磷酸(suan)酰胺單(dan)(dan)體(ti)(ti)是核(he)(he)酸(suan)藥(yao)物(wu)研發的(de)(de)基石。核(he)(he)苷單(dan)(dan)體(ti)(ti)不僅應用(yong)于核(he)(he)酸(suan)藥(yao)物(wu)的(de)(de)合(he)(he)成(cheng)，mrna疫苗、引物(wu)/探針、質(zhi)粒等合(he)(he)成(cheng)都(dou)需要有核(he)(he)苷單(dan)(dan)體(ti)(ti)的(de)(de)參與。

2、現有技術，如(ru)wo2009116044關(guan)于tbs單(dan)取代的(de)鳥苷衍(yan)(yan)生物(wu)制備方(fang)法基(ji)本上(shang)是先(xian)對(dui)(dui)(dui)5’-oh進行dmtr保護(hu)，然(ran)(ran)后(hou)對(dui)(dui)(dui)2’,3’-位進行上(shang)tbs，再經過柱層析(xi)將兩(liang)個異構體分(fen)開，然(ran)(ran)后(hou)脫除(chu)保護(hu)基(ji)，得(de)tbs單(dan)取代的(de)鳥苷衍(yan)(yan)生物(wu)。該方(fang)法純化難度較(jiao)大(da)，且(qie)2’,3’-位在硅膠中容易互相轉(zhuan)化，較(jiao)難獲(huo)得(de)兩(liang)種單(dan)一位置的(de)化合物(wu)。而對(dui)(dui)(dui)于化合物(wu)iia和iib的(de)獲(huo)得(de)則(ze)難度更大(da)，wo2022123501實(shi)施例51提到，化合物(wu)iib的(de)獲(huo)得(de)，需要(yao)經過高級別(bie)的(de)硅膠來純化，且(qie)收率也(ye)只(zhi)有13％。對(dui)(dui)(dui)于化合物(wu)iia和iiia則(ze)未(wei)有文(wen)獻披露。

技術實現思路

1、本發明的(de)(de)目的(de)(de)在于提(ti)供一種tbs保護的(de)(de)鳥苷衍(yan)生物的(de)(de)制備方法，以解決背景技(ji)術中提(ti)及的(de)(de)技(ji)術問題。

2、本發明的目的可以(yi)通過以(yi)下技術方案實(shi)現：

3、一種tbs保護的鳥(niao)苷衍生物的制(zhi)備方(fang)法，合成路徑如下所(suo)示(shi)：

4、

5、包括以下步驟：

6、(1)n6-異丁(ding)酰基鳥苷(化合(he)物(wu)(wu)i)與(yu)tbscl(叔丁(ding)基二甲基氯硅烷)或tbsotf(叔丁(ding)基二甲硅基三(san)氟甲磺酸酯(zhi))反應生成化合(he)物(wu)(wu)iia和化合(he)物(wu)(wu)iib；

7、(2)化(hua)(hua)合物(wu)(wu)iia和化(hua)(hua)合物(wu)(wu)iib選(xuan)擇性脫(tuo)除5’-tbs生成(cheng)化(hua)(hua)合物(wu)(wu)iiia和化(hua)(hua)合物(wu)(wu)iiib。

8、具體的，步驟(1)操作(zuo)如下：

9、按比例將n6-異丁(ding)(ding)(ding)酰基鳥(niao)苷(gan)(化(hua)合物(wu)i)、tbscl(叔丁(ding)(ding)(ding)基二甲(jia)基氯硅烷(wan))或tbsotf(叔丁(ding)(ding)(ding)基二甲(jia)硅基三氟甲(jia)磺酸(suan)酯)加入(ru)(ru)反應容(rong)器(qi)中，再加入(ru)(ru)咪唑或吡啶(ding)作為(wei)催(cui)化(hua)劑進行反應，后處理，生成化(hua)合物(wu)iia和化(hua)合物(wu)iib；n6-異丁(ding)(ding)(ding)酰基鳥(niao)苷(gan)(化(hua)合物(wu)i)：催(cui)化(hua)劑：tbscl的摩爾比為(wei)1:(5～10):(2.5～3)，反應溫度為(wei)20～80℃；

10、需(xu)要(yao)補充說明的是(shi)，若選擇吡(bi)啶作(zuo)為催(cui)(cui)化劑(ji)，則無需(xu)加入(ru)溶(rong)(rong)劑(ji)，吡(bi)啶作(zuo)為催(cui)(cui)化劑(ji)的同時(shi)可作(zuo)為溶(rong)(rong)劑(ji)；若選擇咪(mi)唑作(zuo)為催(cui)(cui)化劑(ji)，需(xu)要(yao)加入(ru)dmf作(zuo)為反應溶(rong)(rong)劑(ji)。

11、其(qi)中，將(jiang)dmf作為(wei)溶劑(ji)的(de)后處理(li)方式(shi)為(wei)：反應結(jie)束后，加入醇類溶劑(ji)，攪拌析(xi)(xi)晶，過濾得化合物(wu)iia，過濾后的(de)母(mu)液(ye)進行回收(shou)；其(qi)中，所述析(xi)(xi)晶溫度為(wei)-5～-25℃；

12、進一(yi)步地，對(dui)母(mu)液進行回(hui)收(shou)的方式為(wei)：母(mu)液倒入純化(hua)(hua)水中，析(xi)出(chu)固體，然(ran)后加入醇類溶劑(ji)回(hui)流10-24小時，然(ran)后降溫析(xi)出(chu)化(hua)(hua)合(he)物iia；

13、其中，將吡(bi)啶作為(wei)溶劑(ji)(ji)的(de)后處理方式為(wei)：減壓濃縮除去吡(bi)啶，然后加入醇類(lei)溶劑(ji)(ji)進行攪拌結晶，過濾得化合(he)物iia和化合(he)物iib，結晶后的(de)母液(ye)進行回收；其中，所述(shu)結晶溫度(du)為(wei)-5～-25℃。

14、進一步地，對結晶(jing)后(hou)的母液進行回(hui)收的方(fang)式為：減壓濃縮(suo)除(chu)去1/3-1/2的溶(rong)劑，升溫(wen)(wen)回(hui)流10-24h，然后(hou)降溫(wen)(wen)析晶(jing)，過濾(lv)得化合物iia，母液繼續回(hui)收。

15、進一步地，對母(mu)液進行回收的方式為：減壓濃縮至干，然后(hou)加入(ru)混合溶劑(ji)升溫(wen)至40-80℃進行轉晶，然后(hou)降(jiang)至室溫(wen)析晶，過(guo)濾得化合物(wu)iib，所述化合物(wu)iib純(chun)度≥90％；

16、進一(yi)步地，所述混(hun)合溶劑(ji)中的(de)一(yi)種溶劑(ji)選自甲基叔丁基醚(mi)、乙醚(mi)、環(huan)戊基甲醚(mi)其中的(de)一(yi)種，另一(yi)種溶劑(ji)選自正己烷、環(huan)己烷、正庚烷中的(de)一(yi)種。

17、進一(yi)步地，所述醇(chun)類溶劑選(xuan)自甲醇(chun)、乙醇(chun)、異丙(bing)醇(chun)中(zhong)的一(yi)種，優選(xuan)乙醇(chun)。

18、具體(ti)的，步驟(2)操作如下：

19、以有機(ji)酸水(shui)溶液為反應(ying)溶劑，加入(ru)步驟(zou)(1)得到的產物(wu)(化(hua)(hua)合物(wu)iia或化(hua)(hua)合物(wu)iib)，溶解(jie)后保溫反應(ying)，后處理(li)，得到化(hua)(hua)合物(wu)iiia或iiib。

20、進一(yi)步地，所述(shu)反應(ying)溶(rong)劑中酸含量為70～90％。

21、進一步地，所(suo)述有機酸(suan)(suan)選(xuan)自三氟乙酸(suan)(suan)、三氯乙酸(suan)(suan)、二氯乙酸(suan)(suan)中的(de)一種或兩種以上，優(you)選(xuan)三氟乙酸(suan)(suan)。

22、進一步地，所述反應溫度為-10～5℃。

23、進一(yi)步地，后(hou)處理方式(shi)為：往反(fan)應液中加入(ru)有(you)(you)機(ji)溶劑和水攪拌(ban)分(fen)層，得(de)有(you)(you)機(ji)相(xiang)，有(you)(you)機(ji)相(xiang)再用飽(bao)和碳酸(suan)(suan)鈉洗滌3-4次，然后(hou)硫酸(suan)(suan)鈉干(gan)(gan)燥，過濾濃縮至干(gan)(gan)，重(zhong)結(jie)晶，得(de)到產物；所述有(you)(you)機(ji)溶劑選自乙酸(suan)(suan)乙酯、二氯甲(jia)烷、2-甲(jia)基四氫(qing)呋(fu)喃中的(de)一(yi)種，優選乙酸(suan)(suan)乙酯。

24、進一步地，重結(jie)晶(jing)的結(jie)晶(jing)溶劑選自乙(yi)(yi)(yi)腈、異丙(bing)醇、乙(yi)(yi)(yi)酸乙(yi)(yi)(yi)酯、乙(yi)(yi)(yi)酸異丙(bing)酯中的一種(zhong)，優選乙(yi)(yi)(yi)酸乙(yi)(yi)(yi)酯。

25、本發(fa)明(ming)(ming)在制(zhi)備化(hua)(hua)(hua)合物(wu)ii時，使(shi)(shi)用(yong)醇類溶劑(ji)(ji)(ji)對(dui)(dui)反(fan)應液(ye)直接析(xi)晶，可(ke)(ke)選擇性的(de)(de)獲(huo)得(de)3’5’-tbs產(chan)物(wu)，而使(shi)(shi)2’5’-tbs的(de)(de)異構(gou)體留在母液(ye)中(zhong)。然后(hou)(hou)對(dui)(dui)母液(ye)進行(xing)回收(shou)，使(shi)(shi)母液(ye)里的(de)(de)大部(bu)分(fen)2’5’-tbs的(de)(de)異構(gou)體在醇類溶劑(ji)(ji)(ji)回流(liu)的(de)(de)作(zuo)用(yong)下再次轉化(hua)(hua)(hua)成3’5’-tbs，最后(hou)(hou)使(shi)(shi)兩(liang)者比例接近1:1，然后(hou)(hou)降溫使(shi)(shi)3’5’-tbs產(chan)物(wu)從溶劑(ji)(ji)(ji)中(zhong)析(xi)出，再次獲(huo)得(de)化(hua)(hua)(hua)合物(wu)iia。母液(ye)可(ke)(ke)以重(zhong)復套(tao)用(yong)進行(xing)產(chan)品回收(shou)，使(shi)(shi)得(de)最終產(chan)物(wu)iia的(de)(de)收(shou)率達到60％。此外，剩余(yu)的(de)(de)iib可(ke)(ke)以通過濾除iia后(hou)(hou)的(de)(de)濃縮液(ye)在非(fei)質子性溶劑(ji)(ji)(ji)中(zhong)進行(xing)結晶，從而達到回收(shou)iib的(de)(de)方法。使(shi)(shi)用(yong)本發(fa)明(ming)(ming)的(de)(de)化(hua)(hua)(hua)合物(wu)ii進行(xing)脫除5’-tbs，然后(hou)(hou)結晶獲(huo)得(de)化(hua)(hua)(hua)合物(wu)iiia和(he)iiib。化(hua)(hua)(hua)合物(wu)iiia和(he)iiib可(ke)(ke)作(zuo)為(wei)制(zhi)備亞(ya)磷酰(xian)胺(an)單(dan)體的(de)(de)重(zhong)要(yao)起始原(yuan)料。

26、本發明的(de)有益效果：

27、本(ben)發明提供的tbs鳥苷衍生物的制備(bei)方法，其合成路線(xian)簡(jian)(jian)單，反應(ying)條件溫和(he)，使用(yong)簡(jian)(jian)單的結晶操作就可以去除(chu)極性相近異構體，利用(yong)iia與化(hua)合物iib在醇(chun)類溶劑(ji)中(zhong)容易發生轉化(hua)的特點，實現化(hua)合物ii的循環回(hui)收(shou)。

技術特征：

1.一種(zhong)tbs保護的鳥苷(gan)衍生物的制備方法，其(qi)特征在于，包括(kuo)以下(xia)步驟：

2.根據權利要求1所述的(de)一種tbs保護的(de)鳥苷衍(yan)生物的(de)制備方(fang)法，其特征在(zai)于，步驟(1)操(cao)作如下：

3.根據權利要(yao)求2所述的一種tbs保護的鳥苷衍(yan)生物(wu)的制(zhi)備方法，其(qi)特(te)征在于，n6-異丁酰基鳥苷：催化(hua)劑：tbscl的摩爾比為(wei)1:(5～10):(2.5～3)，反應溫度(du)為(wei)20～80℃。

4.根據權利要(yao)求2所述的(de)一種tbs保護的(de)鳥苷衍生物的(de)制備方法，其特征在于，將dmf作為(wei)(wei)溶劑的(de)后(hou)處理方式為(wei)(wei)：反應結束后(hou)，加入醇類溶劑，攪拌析晶，過(guo)濾得(de)化合物iia，過(guo)濾后(hou)的(de)母液進行回收；其中，所述析晶溫(wen)度為(wei)(wei)-5～-25℃；

5.根據權利要求2所述的一種tbs保護的鳥苷衍生(sheng)物的制備方法，其特征在于，將吡(bi)啶作為溶劑(ji)的后(hou)處理方式為：減壓(ya)濃縮除去(qu)吡(bi)啶，然(ran)后(hou)加(jia)入醇類溶劑(ji)進行攪(jiao)拌結(jie)(jie)晶(jing)，過濾得化合物iia和化合物iib，結(jie)(jie)晶(jing)后(hou)的母液進行回收；其中，所述結(jie)(jie)晶(jing)溫度為-5～-25℃；

6.根據權利要求5所(suo)述(shu)的(de)一種(zhong)tbs保護的(de)鳥苷衍生物的(de)制備方法，其特(te)征在于(yu)，所(suo)述(shu)混合溶(rong)劑(ji)中的(de)一種(zhong)溶(rong)劑(ji)選自(zi)甲基(ji)叔(shu)丁基(ji)醚、乙醚、環戊基(ji)甲醚其中的(de)一種(zhong)，另一種(zhong)溶(rong)劑(ji)選自(zi)正己烷、環己烷、正庚(geng)烷中的(de)一種(zhong)。

7.根據權利(li)要求4或5所(suo)述的(de)一(yi)(yi)種tbs保護的(de)鳥苷(gan)衍生物的(de)制備(bei)方法，其特(te)征在(zai)于(yu)，所(suo)述醇(chun)類溶劑選自(zi)甲醇(chun)、乙醇(chun)、異丙醇(chun)中的(de)一(yi)(yi)種。

8.根據權(quan)利(li)要(yao)求(qiu)1所述的(de)一(yi)種tbs保護(hu)的(de)鳥苷(gan)衍生物(wu)的(de)制備方(fang)法(fa)，其(qi)特征在于，步驟(2)操作如下(xia)：

9.根(gen)據權(quan)利(li)要求8所(suo)述的(de)一種tbs保護的(de)鳥苷衍生物的(de)制備方法，其特征(zheng)在于，所(suo)述反應溶劑(ji)中酸(suan)(suan)含量為70～90％；所(suo)述有機(ji)酸(suan)(suan)選自三氟乙(yi)酸(suan)(suan)、三氯乙(yi)酸(suan)(suan)、二(er)氯乙(yi)酸(suan)(suan)中的(de)一種或兩種以上；所(suo)述反應溫度為-10～5℃。

10.根據權利要求8所(suo)述(shu)的一種tbs保護的鳥(niao)苷衍生物的制(zhi)備方(fang)法(fa)，其(qi)特征(zheng)在于，后處理方(fang)式為：往反(fan)應(ying)液中加(jia)入有機溶(rong)劑和水攪(jiao)拌分(fen)層，得(de)有機相(xiang)，有機相(xiang)再用(yong)飽和碳酸鈉洗滌3-4次，然后硫酸鈉干燥(zao)，過濾濃縮至干，重結晶，得(de)到產(chan)物；

技術總結
本發明公開了一種TBS保護的鳥苷衍生物的制備方法，屬于藥物中間體合成技術領域。包括以下步驟：(1)N6?異丁酰基鳥苷與TBSCl或TBSOTf反應生成化合物IIa和化合物IIb；(2)選擇性脫除5’?TBS生成化合物IIIa和化合物IIIb。本發明在制備化合物II時，使用醇類溶劑對反應液直接析晶，可選擇性的獲得3’5’?TBS產物，而使2’5’?TBS的異構體留在母液中。然后對母液回收，使母液里的大部分2’5’?TBS異構體在醇類溶劑回流的作用下再次轉化成3’5’?TBS，獲得化合物IIa。此外，剩余的IIb可以通過濾除IIa后的濃縮液在非質子性溶劑中進行結晶，從而達到回收。最后進行脫除5’?TBS，獲得化合物IIIa和IIIb。終產物可作為制備亞磷酰胺單體的重要起始原料。

技術研發人員：胡海文,黃鑫,吳悅昌,楊勇
受保護的技術使用者：安徽美華高科制藥有限公司
技術研發日：
技術公布日：2024/9/19