專利名稱：環脂肽物的脫酰化方法
技術領域：
本發明涉及到酶技術。
具體地講，本發明涉及使環狀脂肽物的酰基側鏈脫酰化的新型酰基酶以及用它進行脫酰化的方法。
進一步講，本發明涉及由微生物Co1eophoma sp.F-11899株(FERM BP-2635)所產生的、使FR901379物質(特開平3-184921號公報記錄)及其類似物的酰基側鏈脫酰化的新型酰基酶，以及用該酶進行脫酰化的方法。
背景技術：
需要能夠使環脂肽物，具體而言，需要能夠使上述FR901379物質及其類似體的酰基側鏈有效脫酰化的酰基酶。
發明公開本發明的發明者們為了得到能夠使FR901379物及棘白菌素B，棘孢曲菌素A等FR901379物的類似體為代表的環脂肽物的酰基側鏈脫酰化的新型酰基酶進行了大量研究。結果他們新發現一種微生物環圈鏈霉菌(Streptomyces anulatus)產生的酰基酶；使有效地進行目的脫酰化成為可能。
以下說明該新型環狀脂肽酰基酶及用該酶進行脫酰化方法的特征。
首先，對本發明環狀脂肽酰基酶的生產菌進行說明。
具體而言新型環狀脂肽酰基酶的生產菌為鏈霉菌屬的環圈鏈霉菌No.4811株、環圈鏈霉菌No.8703株或鏈霉菌屬類6907株。
以下為這些菌株的特征。
命名為環圈鏈霉菌No.4811的新型環狀脂肽酰基酶的生產菌菌株(以后略稱為No.4811)是從福島縣采集的土壤樣品中新分離出的。以下為No.4811的菌學性狀。各種培養基上的特征No.4811株在酵母浸膏-麥芽浸膏瓊脂、燕麥粉瓊脂、無機鹽-淀粉瓊脂、甘油-天冬酰胺瓊脂、蛋白胨-酵母浸膏-鐵瓊脂及酪氨酸瓊脂培養基上30℃培養14天后在光學和掃描電鏡下觀察到的發育特征列在表1。參照1978年的Methuen Handbook of Colour,Methuen,London的命名法對顏色進行命名。
表1 No.4811株在各種培養基上培養的特征培養基培養性狀酵母浸膏-麥芽浸膏瓊脂 G良好(ISP-2) A豐富、黃灰色(2B2)R茶色(7F4)S少量、茶色燕麥粉瓊脂G良好普通(ISP-3) A豐富、黃灰色(2C3)R茶色(7F4)S微量、茶色無機鹽-淀粉瓊脂 G良好(ISP-4) A豐富、黃灰色(2C3)R黃茶色(5E4)S無甘油-天冬酰胺瓊脂 G良好(ISP-5) A豐富、黃灰色(2C3)R茶色(6E4)S無蛋白胨-酵母浸膏-鐵瓊脂G普通(ISP-6) A貧乏、白色R亮茶色(6D5)S無酪氨酸瓊脂G普通(ISP-7) A普通、黃灰色(2B2)R茶色(7F4)S無省略代號；G生長A氣菌絲R生長里面的色S可溶性色素氣菌絲的顏色從黃灰色到綠色，生長里面的色從黃茶色到茶色，可溶性色素為淺茶色，菌體內色素及可溶性色素均非pH敏感性。未見到類黑素的產生。生理學特征No.4811株的生理學特征總結在表2中。表2 No.4811株的生理學特征條件 性質生長溫度范圍 4.0-35.0℃明膠液化 +乳凝固 ±乳蛋白胨化 +淀粉分解 +類黑素產生 -碳源利用性D-葡萄糖 +L-阿拉伯糖 +D-木糖 +肌醇 -甘露醇 +D-果糖 +L-鼠李糖 ±蔗糖 -棉子糖 -+陽性±弱陽性-陰性No.4811株的營養菌絲發育良好，有不規則分枝但無斷裂。從營養菌絲延伸長出的氣菌絲呈單純分枝，形成長的孢子鏈。氣菌絲的形狀為直狀、曲狀，按Pridham等(Pridham,T.G等實用微生物學(Appl.Microbiol).6:54,1958)屬于RF型。一個孢子鏈由20個以上的孢子構成。孢子的表面光滑，0.5～0.7×0.7～1.1μm大小，呈圓柱型。
未觀察到菌核、孢子囊、游走孢子。細胞壁類型依照Becker等(Becker,BM.P.Lechevalier,R.E.Gordon and H.A.lechevalier通過整個細胞水解物的紙層析來快速區分諾卡菌屬和鏈霉菌屬實用微生物學，12:421-423,1964)、山口(Yamaguchi,T.形態獨特放線菌的細胞壁組分的比較細菌學雜志，89:444-453,1965)等的方法，對全菌體的分解物進行分析，結果表明細胞壁的氨基酸中存在LL-二氨基庚二酸，因此認為該菌株的細胞壁類型為I型。
從以上的形態觀察及化學分析的結果來看，若按Pridham等(Pridham,T.G.等實用微生物學，6:54,1958)的分類，No.4811株屬于鏈霉菌屬。在這里將該菌株與文獻Shirling等(Shirling,E.B.和D.Gottlieb鏈霉菌類的典型培養物的合作描述。2．研究1的種類描述。國際系統細菌學雜志。18:69-189,1968；Shirling,E.B.和D.GottIieb鏈霉菌類的典型培養物的合作描述。3．研究1和2其它種類的描述。國際系統細菌學雜志。18:279-392,1968；Shirling,E.B.和D.Gottlieb鏈霉菌類的典型培養物的合作描述。4．研究2、3和4的種類描述。國際系統細菌學雜志。19:391-512,1969)Skerman等(Skerman,V.BV.McGowan andP.H.A.Sneath統一細菌名單。修改版。美國微生物學聯合會。華盛頓特區。1989及Moore等(Moore,W.EE.P.Cato andL.V.H.Moore細菌和酵母分類變化索引。美國微生物學聯合會。華盛頓特區；1992)中記載的鏈霉菌屬進行了比較。結果所記載的環圈鏈霉菌的性質與本株的性質基本一致。鑒于此，確定No.4811株為環圈鏈霉菌，命名為環圈鏈霉菌No.4811。
該環圈鏈霉菌No.4811株于平成7年12月27日以FERM P-15377保藏于通商產業省工業技術院生命工學工業技術研究所(郵區305茨城縣筑波市東1-1-3)，后又根據布達佩斯條約于平成9年2月3日以FERM BP-5808轉移保藏。
命名為環圈鏈霉菌No.4811株的新型環脂肽酰基酶的生產菌菌株(以下略稱作No.8703)是從福島縣采集的土壤樣品中新分離出的。以下為No.8703株的菌學性狀。各種培養基上的特征No.8703株在酵母浸膏-麥芽浸膏瓊脂、燕麥粉瓊脂、無機鹽-淀粉瓊脂、甘油-天冬酰胺瓊脂、蛋白胨-酵母浸膏-鐵瓊脂及酪氨酸瓊脂培養基上30℃培養14天后在光學和掃描電鏡下觀察到的發育特征總結在表3中。參照1978年的Methuen Handbook of Colour,Methuen,London的命名法對顏色進行命名。
表3 No.8703株在各種培養基上培養的特征培養基培養性狀酵母浸膏-麥芽浸膏瓊脂 G良好(ISP-2) A豐富、黃灰色(2B2)R灰茶色(5F4)S無燕麥粉瓊脂G普通(ISP-3) A豐富、黃灰色(2C3)R灰茶色(4C4)S無無機鹽-淀粉瓊脂 G良好(ISP-4) A豐富、黃灰色(2C3)R暗灰色(1F6)S無甘油-天冬酰胺瓊脂 G良好(ISP-5) A豐富、黃灰色(2C3)R茶青色 (4E5)S無蛋白胨-酵母浸膏-鐵瓊脂G普通(ISP-6) A貧乏、白色R黃茶色(5D5)S無酪氨酸瓊脂G普通(ISP-7) A普通、黃灰色(2B2)R茶色(7F4)S無省略代號；G生長A氣菌絲R生長里面的色S可溶性色素氣菌絲的顏色從黃灰色到綠色，生長在里面的色從黃茶色到茶色，可溶性色素為淺茶色，菌體內色素及可溶性色素均無pH敏感性。在胰蛋白胨-酵母浸膏肉湯、蛋白胨-酵母浸膏-鐵瓊脂及酪氨酸瓊脂上可看到類黑素。生理學特征No.8703株的生理學特征總結在表4中。表4 No.8703株的生理學特征條件 性質生長溫度范圍 4.0-35.0℃明膠液化 +乳凝固 ±乳蛋白胨化 +淀粉分解 +類黑素產生 -碳源利用性D-葡萄糖 +L-阿拉伯糖 +D-木糖 +肌醇 -甘露醇 +D-果糖 +L-鼠李糖 +蔗糖 -棉子糖 -+陽性±弱陽性-陰性該菌株未利用肌醇、蔗糖和棉子糖。乳蛋白胨化。生長發育的溫度范圍為4.0-35℃。
No.8703株的營養菌絲發育良好，有不規則的分枝但無斷裂。從營養菌絲延伸長出的氣菌絲呈單純分枝，形成長的孢子鏈。氣菌絲的形狀為直狀、曲狀，按Pridham等(Pridham,T.G等實用微生物學(Microbiol.6:54,1958)的分類屬于RF型。一個孢子鏈由20個以上的孢子組成。孢子表面光滑，呈圓柱型。孢子的大小為0.5～0.8×0.6～1.1μm。未觀察到菌核、孢子囊及游走孢子。細胞壁類型依照Becker等(Becker,BM.P.Lechevalier,R.E.Gordon and H.A.lechevalier通過整個細胞水解物的紙層析來快速區分諾卡菌屬和鏈霉菌屬實用微生物學，12:421-423,1964)、山口(Yamaguchi,T.形態獨特放線菌的細胞壁組分的比較細菌學雜志，89:444-453,1965)等的方法，對全菌體的分解物進行分析，結果表明細胞壁的氨基酸中存在LL-二氨基庚二酸，因此認為該菌株的細胞壁類型為I型。
從以上的形態觀察及化學分析的結果來看，若按Pridham等(Pridham,T.G.等實用微生物學，6:54,1958)的分類，No.8703株屬于鏈霉菌屬。在這里將該菌株與文獻Shirling等(Shirling,E.B.和D.Gottlieb鏈霉菌類的典型培養物的合作描述。2．研究1的種類描述。國際系統細菌學雜志。18:69-189,1968；Shirling,E.B.和D.Gottlieb鏈霉菌類的典型培養物的合作描述。3．研究1和2其它種類的描述。國際系統細菌學雜志。18:279-392,1968；Shirling,E.B.和D.Gottlieb鏈霉菌類的典型培養物的合作描述。4．研究2、3和4的種類描述。國際系統細菌學雜志。19:391-512,1969)Skerman等(Skerman,V.BV.McGowan andP.H.A.Sneath統一細菌名稱表。修改版。美國微生物學聯合會。華盛頓特區。1989及Moore等(Moore,W.EE.P.Cato andL.V.H.Moore細菌和酵母命名變化索引。美國微生物學聯合會。華盛頓特區；1992)中記載的鏈霉菌屬進行了比較。結果所記載的環圈鏈霉菌的性質與本株的性質基本一致。鑒于此，確定No.8703株為環圈鏈霉菌，命名為環圈鏈霉菌No.8703。
該環圈鏈霉菌No.8703株于平成8年3月8日以FERM P-15507保藏于通商產業省工業技術院生命工學工業技術研究所(郵區305茨城縣筑波市東1-1-3)，后又根據布達佩斯條約于平成9年2月3日以FERM BP-5810轉移保藏。
命名為環圈鏈霉菌No.6907株的新型環狀脂肽酰基酶的生產菌菌株(以下略稱作No.6907)是從福島縣采集的土壤樣品中新分離出的。以下為No.6907株的菌學性狀。各種培養基上的特征No.6907株在酵母浸膏-麥芽浸膏瓊脂、燕麥粉瓊脂、無機鹽-淀粉瓊脂、甘油-天冬酰胺瓊脂、蛋白胨-酵母浸膏-鐵瓊脂及酪氨酸瓊脂培養基上30℃培養14天后在光學和掃描電鏡下觀察到的發育特征總結在表5中。參照1978年的Methuen Handbook of Colour,Methuen,London的命名法對顏色進行命名。
表5 No.4811株在各種培養基上培養的特征培養基 培養性狀酵母浸膏-麥芽浸膏瓊脂 G良好(ISP-2)A豐富、黃灰色(白4A2)R灰橙色(5B6)S無燕麥粉瓊脂 G普通(ISP-3)A豐富、青灰色(22C2)R亮茶色(4D4)S無無機鹽-淀粉瓊脂G良好(ISP-4)A豐富、青灰色(19C2)R茶色(6F4)S無甘油-天冬酰胺瓊脂 G良好(ISP-5)A豐富、青灰色(22B2)R赤味茶色(8E4)S無蛋白胨-酵母浸膏-鐵瓊脂 G普通(ISP-6)A無R灰茶色(9F3)S褐色酪氨酸瓊脂 G良好(ISP-7)A普通、黃白色(4A2)R暗品紅色(13F3)S褐色省略代號；G生長A氣菌絲R生長里面的色S可溶性色素氣菌絲的顏色從黃灰色到青灰色，生長在里面的色從亮茶色到茶色，菌體內色素無pH敏感性。在胰白胨-酵母浸膏肉湯、蛋白胨-酵母浸膏-鐵瓊脂及酪氨酸瓊脂上可看到類黑素。生理學特征No.6907株的生理學特征總結在表6中。表6 No.6907株的生理學特征條件性質生長溫度范圍9.0-40.0℃明膠液化 +乳凝固 +乳蛋白胨化 -淀粉分解 +類黑素產生 +碳源利用性D-葡萄糖 +L-阿拉伯糖 +D-木糖 +肌醇 +甘露醇 +D-果糖 +L-鼠李糖 +蔗糖 +棉子糖 ++陽性±弱陽性-陰性該菌株利用了試驗中所有的碳源肌醇、蔗糖和棉子糖。未進行乳蛋白胨化。生長發育的溫度范圍為9.0-40.0℃。
No.6907株的營養菌絲發育良好，有不規則分枝但無斷裂。從營養菌絲延伸長出的氣菌絲呈單純分枝，形成長的孢子鏈。氣菌絲的形狀為直狀、曲狀或不完整的環狀，按Pridham等(Pridham,T.G等實用微生物學(Appl.Microbiol).6:54,1958)屬于RF或RA型。一個孢子鏈由20個以上的孢子構成。孢子的表面光滑，0.5～0.7×0.7～1.3μm大小，呈圓柱型。未觀察到菌核、孢子囊、游走孢子。細胞壁類型依照Becker等(Becker,BM.P.Lechevalier,R.E.Gordon and H.A.lechevalier通過整個細胞水解物的紙層析來快速區分諾卡菌屬和鏈霉菌屬實用微生物學，12:421-423,1964)、山口(Yamaguchi,T.形態獨特放線菌的細胞壁組分的比較細菌學雜志，89:444-453,1965)等的方法，對全菌體的分解物進行分析，結果表明細胞壁的氨基酸中存在LL-二氨基庚二酸，因此認為該菌株的細胞壁類型為I型。
從以上的形態觀察及化學分析的結果來看，若按Pridham等(Pridham,T.G.等實用微生物學，6:54,1958)的分類，No.6907株屬于鏈霉菌屬。在這里將該菌株與文獻Shirling等(Shirling,E.B.和D.Gottlieb鏈霉菌類的典型培養物的合作描述。2．研究1的種類描述。國際系統細菌學雜志。18:69-189,1968；Shirling,E.B.和D.Gottlieb鏈霉菌類的典型培養物的合作描述。3．研究1和2其它種類的描述。國際系統細菌學雜志。18:279-392,1968；Shirling,E.B.和D.Gottlieb鏈霉菌類的典型培養物的合作描述。4．研究2、3和4的種類描述。國際系統細菌學雜志。19:391-512,1969)Skerman等(Skerman,V.BV.McGowan andP.H.A.Sneath統一細菌名稱表。修改版。美國微生物學聯合會。華盛頓特區。1989及Moore等(Moore,W.EE.P.Cato andL.V.H.Moore細菌和酵母命名變化索引。美國微生物學聯合會。華盛頓特區；1992)中記載的鏈霉菌屬進行了比較。結果未能鑒定到種。鑒于此，將該菌命名為鏈霉菌類No.6907。
該鏈霉菌類No.6907株于平成8年3月8日以FERM P-15506保藏于通商產業省工業技術院生命工學工業技術研究所(郵區305茨城縣筑波市東1-1-3)，后又根據布達佩斯條約于平成9年2月3日以FERM BP-5809轉移保藏。
該發明中所講“環狀脂肽物”指含有多肽環，該環上側鏈含有“酰基氨基”，該物質也可有其它的側鏈。
該“環狀脂肽物”的代表例為FR901379物質，該物質是微生物Coleophoma sp.F-11899株(FERM BP-2635)產生的。具有抗真菌活性的已知物(特開平3-184921號公報記載)，具有下面的結構式〔Ⅰa〕。

此外，FR901379的類似體是下面普通式〔Ⅰ〕中所示的化合物或其鹽類。

〔式中，R1為酰基，R2為羥基或酰基氧基，R3為氫或羥基，R4為氫或羥基，R5為氫或羥基磺酰基氧基，R6為氫或氨基甲酰基〕該發明的新型環狀脂肽酰基酶是鏈霉菌菌屬的細菌產生的酰基酶，它能使環狀脂肽物側鏈的“酰氨基”脫酰化而形成“氨基”，具體地講它能使物質FR901379或其鹽的棕櫚酰側鏈或者使含有物質FR901379、上述普通式〔Ⅰ〕中所示的FR901379類似體或其鹽的酰基側鏈脫酰化，從而形狀環狀肽物質，具體地講形成下面結構式〔Ⅱa〕中所示的化合物(FR179642物質)或其鹽或

表含有物質FR179642如下面普通式〔Ⅱ〕所示的FR179642類似體或其鹽。

〔式中R2、R3、R4、R5及R6代表與前面相同的基團〕。
化合物〔Ⅰ〕和〔Ⅱ〕的優選鹽為常規應用的單鹽或二鹽，金屬鹽如堿金屬鹽(例如鈉鹽、鉀鹽等)，堿土類金屬鹽(例如鈣鹽、鎂鹽等)，銨鹽，具有有機堿的鹽(例如三甲胺鹽，三乙胺鹽，吡啶鹽，甲基吡啶鹽，二環己胺鹽，N,N′-二芐基乙烯二胺鹽等)，有機酸加成鹽(如甲酸鹽、乙酸鹽、三氟醋酸鹽，馬來酸鹽，酒石酸鹽、甲磺酸鹽、苯磺酸鹽、甲苯磺酸鹽等)，無機酸加成鹽(例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽等)，氨基酸(如精氨酸，天冬氨酸、谷氨酸)等的鹽。
優選的“低級烷基”是含有1～6個碳原子的直鏈或分枝狀烷基，如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、戊基、異戊基和己基。其它優選含1～4個碳原子的烷基，最優選甲基。
優選的“高級烷基”包括碳原子數為7～20的直鏈或分枝狀烷基，如庚基、辛基、3,5-二甲基辛基、3,7-二甲基辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基，十三烷基，十四烷基，十五烷基，十六烷基，十七烷基，十八烷基，十九烷基和二十烷基。
優選的“低級烷氧基”包括直鏈或分枝狀的烷氧基，如甲氧基，乙氧基，丙氧基，異丙氧基，丁氧基，異丁氧基，叔丁氧基，戊氧基，叔戊氧基，新戊氧基，己氧基和異己氧基。
優選的“高級烷氧基”包括直鏈或分枝狀的烷氧基，如庚氧基，辛氧基，3,5-二甲基辛氧基，3,7-二甲基辛氧基，壬氧基，癸氧基，十一烷氧基，十二烷氧基，十三烷氧基，十四烷氧基，十六烷氧基，十七烷氧基，十八烷氧基，十九烷氧基，二十烷氧基等。
優選的“芳香基”包括任選含有低級烷基的苯基(如苯，苯基，甲苯基等)、萘基和蒽基等。
優選的“酰胺基”或“酰基”的酰基部分包括由羧酸，碳酸，氨基甲酸或硫酸衍生的脂肪酰基，芳香酰基、雜環酰基、芳香基置換的脂肪酰基，雜環置換的脂肪酰基。
優選的“酰基”包括低級鏈烷酰基(如甲酰基，乙酰基，丙酰基，丁酰基，異丁酰基，戊酰基，己酰基，新戊酰基等)，它可有1個或多個(優選1～3個)合適的替代物，如芳香基(例如苯基，萘基，蒽基等)，而該基團可有一個或多個(優選1～3)適合的替代物如鹵素(例如氟、氯、溴、碘等)、羥基、所講高級烷氧基、所講芳香基等；所講低級烷氧基；氨基酸；保護氨基酸〔優選的酰胺如低級烷氧基羰基氨基(例甲氧羰基氨基、乙氧羰基氨基、丙氧羰基氨基、丁氧羰基氨基、叔丁氧羰基氨基、戊氧羰基氨基、己氧羰基氨基等)等〕；二(低級)烷基氨基(例如二甲基氨基、N-甲基乙氨基、二乙氨基、N-丙基丁氨基、二戊氨基、二己氨基等)；低級烷氧亞氨基(例如甲氧亞氨基、乙氧亞氨基、丙氧亞氨基、丁氧亞氨基、叔丁氧亞氨基、戊氧亞氨基、己氧亞氨基等)；芳香(低級)烷氧亞氨基(例如芐氧亞氨基、苯基乙氧亞氨基，二苯甲基氧亞氨基等)如苯基(低級)烷氧亞氨基。該基團有一個或多個(優選1-3)適合的替代物如所講高級烷氧基；雜環硫基(優選吡啶硫基)，具有一個或多個(優選1-3個)優選的取代基，知高級烷基(例庚基、辛基、2-乙基己烷、壬基、癸基、3,7-二甲基辛基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十五烷基、3-甲基-10-乙基十二烷基、十六烷基、十七烷基、十八烷基、十九烷基、二十烷基等)；雜環基團(例如噻吩基、咪唑基、吡唑基、呋喃基、四唑基、噻唑基、噻二唑基等)、它具有一個或多個(優選1-3個)合適的取代基，如胺、上述保護胺、上述高級烷基等等；高級鏈烷酰基(例如庚酰基、辛酰基、壬酰基、癸酰基、十一烷酰基、十二烷酰基、十三烷酰基、十四烷酰基、十五烷酰基、棕櫚酰基、10,12-二甲基十四烷酰基、十七烷酰基、十八烷酰基、十九烷酰基、二十烷酰基等)；低級鏈烯酰基(例如丙烯酰基、甲基丙烯酰基、丁烯酰基、3-戊烯酰基、5-己烯酰基等)，可含有一個或多個(優選1-3)優選的取代基，如所講芳香基，它可任選地含有一個或多個(優選1-3)優選的取代基如所講高級烷氧基等；高級鏈烯酰基(例如4-庚烯酰基，3-辛烯酰基，3,6-癸烯酰基，3,7,11-三甲基-2,6,10-十二烷烯酰基，4,10-十七烷烯酰基，等)；低級烷氧碳酰基(例甲氧碳酰基，乙氧碳酰基，丙氧碳酰基，丁氧碳酰基，叔丁氧碳酰基，戊氧碳酰基，己氧碳酰基等)；高級烷氧羰基(例庚氧羰基，辛氧羰基，2-乙基己氧羰基，壬氧羰基，癸氧羰基，3,7-二甲基辛氧羰基，癸氧羰基，十二烷氧羰基，十三烷氧羰基，十四烷氧羰基，十五烷氧羰基，3-甲基-10-乙基十二烷氧羰基，十六烷氧羰基，十七烷氧羰基，十八烷氧羰基，十九烷氧羰基，二十烷氧羰基等)；芳香基氧羰基(例苯氧羰基，萘氧羰基等)；芳香基乙醛酰基(例苯基乙醛酰基、萘基乙醛酰基等)；可以含一個或多個取代基的芳香(低級)烷氧羰基，例如有硝基或低級烷氧基取代基的苯基烷氧羰基(例芐氧羰基，苯基乙氧羰基，對一硝基芐氧羰基，對-甲氧基芐氧羰基等)；低級烷基磺酰基(例甲基磺酰基，乙基磺酰基、丙基磺酰基，異丙基磺酰基、戊基磺酰基、丁基磺酰基等)；芳基磺酰基(例如苯基磺酰基、萘基磺酰基等)，它可含有一個或多個(優選1-3)優選的取代基，如所講低級烷基、所講高級烷氧基等等；芳香基(低級)烷基磺酰基(例如芐基磺酰基、苯乙基磺酰基、二苯甲基磺酰基等)，例如苯(低級)烷基磺酰基；及芳酰基(例如芐酰基、萘酰基、蒽羰基等)，它可有一個或多個(優選1-5)優選的取代基，如所講鹵素；低級烷基(例如甲基、乙基、丙基、丁基、叔丁基、戊基、己基等)；所講高級烷基；低級烷氧基(例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、己氧基等)，它可有一個或多個(優選1-10)合適的取代基，如所講的低級烷氧基、所講的鹵素、芳香基等等；高級烷氧基(例如庚氧基、辛氧基、2-乙基己氧基、壬氧基、癸氧基、3,7-二甲基辛氧基、十一烷氧基、十二烷氧基、十三烷氧基、十四烷氧基、十五烷氧基、3-甲基-10-乙基十二烷氧基、十六烷氧基、十七烷氧基、十八烷氧基、十九烷氧基、二十烷氧基等等)，它們含有一個或多個(優選1-17)優選的取代基，如上述鹵素等等；高級鏈烯氧基(如3-庚烯氧基，7-辛烯氧基、2,6-辛二烯氧基、5-壬烯氧基、1-癸烯氧基、3,7-二甲基-6-辛烯氧基、3,7-二甲基-2,6-辛二烯氧基、8-十一烯氧基、3,6,8-十二三烯氧基、5-十三烯氧基、7-十四烯氧基、1,8-十五-戊-十二烯氧基、15-十六烯氧基、11-十七烯氧基、7-十八烯氧基、10-十九烯氧基、18-二十烯氧基等)；羧基；上述芳香基可含有一個或多個(優選1-3)合適的取代基，如上述高級烷氧基等；芳氧基(例如苯氧基、萘氧基、蒽氧基等等)，它可含有一個或多個(優選1-3)合適的取代基，如上述低級烷氧基和上述高級烷氧基。
上述“酰基”的實例中，優選高級鏈烷酰基，最優選的是棕櫚酰基。
“酰氧基”中合適的“酰基”可為前面所提到的“酰基”基團。
優選的“酰氧基”包括低級鏈烷酰氧基(例甲酰氧基、乙酰氧基、丙酰氧基、丁酰氧基、異丁酰氧基、戊酰氧基、己酰氧基、新戊酰氧基等)或磷酰氧基。
本發明的新型環狀脂肽酰基酶可通過在培養基中培養象環圈鏈霉菌No.4811株(FERM BP-5808)、環圈鏈霉菌No.8703株(FERM BP-5810)、或鏈霉菌類No.6907株(FERM BP-5809)等屬于鏈霉菌屬的酰基酶生產菌株而獲得。
通常情況下是在含有可同化的碳源和氮源的水性培養基中，優選在通氣良好的條件下如振蕩培養、深部培養等條件下培養該新型的酰基酶生產菌株而產生該酰基酶。
培養基中優選的碳源為葡萄糖、木糖、甘油、淀粉、糊精等碳水化合物。其它的碳源可有麥芽糖、鼠李糖、棉子糖、阿拉伯糖、甘露糖、水楊苷、琥珀酸鈉鹽等等。
優選的氮源有酵母浸膏、蛋白胨、麩質粉、棉子粉、大豆粉、谷物浸液、干酵母、小麥胚芽、羽毛粉、花生粉等以及硝酸銨、硫酸銨、磷酸銨等的銨鹽、尿素、氨基酸等無機或有機氮化合物等。
若碳源和氮源優選聯合應用的時候，通常使用含有適量生長因子和一定量的無機營養物的低純度物質，沒有必要使用純化物。根據需要可向培養基中添加碳酸鈉或碳酸鈣、磷酸鈉或磷酸鉀、氯化鈉或氯化鉀、碘化鈉或碘化鉀、鎂鹽、銅鹽、鈷鹽等無機鹽。特別是當培養基中產生明顯氣泡時，有必要加入液體石蠟、脂肪油、植物油、礦物油或者硅等消泡劑。
大量生產該新型酰基酶時，優選深部通氣培養的條件，小量生產時可在燒瓶或瓶中進行振蕩培養或表面培養。此外，當在大型罐內培養時為了避免新型酰基酶的生產線中的生長延遲，優選應用微生物前培養將細菌接種到生產罐中。即，在較少量的培養基上接種微生物的孢子或菌絲，培養該接種培養物，首先生產前培養接種物，然后將所培養的前培養接種物無菌轉移到大容量發酵罐中。生產該前培養接種物的培養基可與生產新型酰基酶所使用的培養基基本上一致也可不同。
可用多種方法進行培養混合物的攪拌及通氣。可用推進器或類似的攪拌裝置進行攪拌，或轉動或振蕩發酵器、選用各種泵裝置，或者向培養基中通入滅菌空氣。可將滅菌空氣通過發酵混合物進行通氣。
發酵通常在大約20℃～32℃的溫度范圍，優選25～30℃、pH6～8、進行50-150小時，但可依據發酵條件及發酵規模進行優選的調整。
可用回收其它已知生物活性物質時通常使用的方法從培養基中回收這樣所生產的新型酰基酶。在培養菌絲中及濾液中可找到所生產的新型酰基酶，因此，培養肉湯經過濾或離心所得的菌絲及濾液經傳統的方法進行分離、純化、如減壓濃縮，冷凍干燥，常用溶劑的抽提，pH調整，陰離子交換樹脂或陽離子交換樹脂、非離子吸附樹脂等常用樹脂的處理，活性炭、硅酸、硅膠、纖維素、鋁等常用吸附劑的處理、結晶、再結晶等可得到該新型酰基酶。
以下列舉實施例來具體說明由環圈鏈霉菌No.4811株、環圈鏈霉菌No.8703株、鏈霉菌類No.6907株生產酰基酶的情況，但該發明并不局限于此。實施例1-1
環圈鏈霉菌No.4811株產生的酰基酶的制備將30ml由玉米淀粉1％、葡萄糖1％、花生粉0.5％、大豆粉0.5％、干酵母0.5％、碳酸鈣0.2％組成的種子培養基分別注入到100ml三角燒瓶中，120℃滅菌20分鐘，接種1-2鉑環量的環圈鏈霉菌No.4811株的斜面瓊脂培養物，30℃振蕩培養3天作為種子培養。
接著將蔗糖4％、花生粉1％、干酵母1％、磷酸二氫鈉0.05％、磷酸二氫鉀0.12％、硫酸鎂·7H2O 0.025％組成的生產培養基的pH調整到6.5，將100ml該生產培養基注入到500ml三角燒瓶中120℃滅菌20分鐘，將前述種培養物2ml接種其上，30℃振蕩培養3天作為酵母培養液。實施例1-2環圈鏈霉菌No.8703株產生的酰基酶的制備將30ml玉米淀粉1％、葡萄糖1％、花生粉0.5％、大豆粉0.5％、干酵母0.5％、碳酸鈣0.2％組成的種子培養基注入到100ml三角燒瓶中，120℃滅菌20分鐘，接種1-2鉑環量的環圈鏈霉菌No.8703株斜面瓊脂培養物，30℃振蕩培養3天作為種培養。
然后將蔗糖4％、花生粉1％、干酵母1％、磷酸二氫鈉0.05％、磷酸氫二鉀0.12％、硫酸鎂·7H2O 0.025％組成的生產培養基的pH調整為6.5，將該生產培養基100ml注入到500ml三角燒瓶中，120℃滅菌20分鐘，接種2ml前述種培養于其上，30℃振蕩培養3天作為酵母培養液。實施例1-3鏈霉菌類No.6907株生產的酰基酶的制備將30ml由可溶性淀粉6％、脫脂大豆粉4％、碳酸鈣0.5％組成的種子培養基注入到100ml三角燒瓶中，120℃滅菌20分鐘，接種鏈霉菌類No.6907株斜面瓊脂培養的1-2鉑環量，30℃振蕩培養3天作為種培養。
然后將蔗糖4％、花生粉1％、干酵母1％、磷酸鈣0.5％組成的生產培養基的pH調整到6.5，將該生產培養基100ml注入到500ml三角燒瓶中，120℃滅菌20分鐘，接種2ml前述種培養于其上，30℃振蕩培養4天作為酵母培養液。實施例1-4屬于鏈霉菌菌屬的保存株生產酰基酶的制備對于(財)發酵研究所(大阪市淀川區十三本町2-17-85)分給的屬于鏈霉菌菌屬的保存株，采用與實施例1-1相同的方法，可得到與環圈鏈霉菌No.4811株相同的酵母培養液。
灰色鏈霉菌灰色亞種(Streptomyces griseus subsp.griseus)IFO 13189接著是用本發明的新型環狀脂肽酰基酶對環狀脂肽抗真菌物(例如FR901379及其類似體)的酰基側鏈進行脫酰化的方法，對此進行詳細說明。
本發明脫酰化的實施可如下進行。
將屬于鏈霉菌菌屬、生產新型酰基酶的微生物接種到適當的培養基上，約20-35℃振蕩培養數日，以此作酵母培養液。將該培養液加入到底物FR901379等環狀脂肽物中，45～60℃。pH保持約6.0～9，通過高速液相色譜(HPLC)來檢測，分離FR179642等物的環狀肽核。
列舉以下實施例來對本發明的脫酰化方法進行具體說明，但本發明并不局限于此。實施例2-1向實施例1-1中所得的環圈鏈霉菌No.4811株的培養液700μl中加入FR901379物的水溶液(100mg/ml)100μl(FR901379物10mg；8.35μmol)、甲醇100μl和緩沖液(0.5M磷酸二氫鉀-磷酸氫二鈉緩沖液；pH6.0)100μl,30℃反應30分鐘，反應終了后加4％醋酸1ml終止反應，加入2ml甲醇，用濾膜(0.45μm)過濾，除去高分子蛋白等之后，通過HPLC、在210nm處監測生成的FR179642物、測定酰基酶活性。
HPLC由波長可變的UV檢測器(島津SPD-10A)、泵(島津LC-10AD)及積分裝置(島津C-R6A)構成，使用LiChrospher100RP-18(e)(250mm×4mmi.d.、粒徑5μm)作固相，以3％己腈/0.5％磷酸二氫銨作移動相，以1ml/分的流速洗脫物質FR179642。FR179642的保持時間大約為6.3分鐘。以該結果來計算物質FR179642的生成量，為730μg(0.78μmol)。實施例2-2向700μl實施例1-2中所得的環圈鏈霉菌No.8703株的培養液中加入物質FR901379的水溶液(100mg/ml)100μl(FR901379物10mg；8.35μmol)、甲醇100μl和緩沖液(0.5M磷酸二氫鉀-磷酸氫二鈉緩沖液；pH6.0)100μl,30℃反應30分鐘。反應終了后，加入4％醋酸1ml終止反應，加入2ml甲醇，用濾膜(0.45μm)過濾，除去高分子蛋白后，通過HPLC在210nm處監測所生成的FR179642物并測定酰基酶活性。
HPLC由波長可變的UV檢測器(島津SPD-10A)、泵(島津LC-10AD)及積分裝置(島津C-R6A)構成，使用LiChrospher100RP-18(e)(250mm×4mmi.d.、粒徑5μm)作固相，以3％乙腈/0.5％磷酸二氫鈉作移動相，以1ml/分的流速洗脫物質FR179642。物質FR179642的保持時間約為6.3分鐘。用該結果計算FR179642的生成量，為830μg(0.89μmol)。實施例2-3將FR901379物的水溶液(100mg/ml)100μl(FR901379物為10mg38.35μmol)100μl、甲醇100μl和緩沖液(0.5M磷酸二氫鉀-磷酸氫二鈉緩沖液；pH6.0)100μl加入到實施例1-3中所得的鏈霉菌類No.6907株的培養液700μl中，30℃反應30分鐘。反應終了后加入4％醋酸1ml終止反應，加入2ml甲醇，用濾膜(0.45μm)過濾，除去高分子蛋白質等物后，通過HPLC于210nm監測生成的FR179642物并測定其酰基酶活性。
HPLC由波長可變的UV檢測器(島津SPD-10A)、泵(島津LC-10AD)及積分裝置(島津C-R6A)構成，LiChrospher100RP-18(e)(250mm×4mmi.d.、粒徑5μm)作固相，以3％乙腈/0.5％磷酸二氫鈉作移動相，以1ml/分的流速洗脫物質FR179642。FR179642的保持時間約6.3分鐘。以該結果計算FR179642的生成量為560μg(0.60μmol)。用Lineweaver-Burk法測定時Km值為257μm,Vmax為14.3U/mg-蛋白質。實施例2-4將棘孢曲菌素A的二甲基亞砜溶液(100mg/ml)100μl(棘孢曲菌素A10mg；9.65μmol)含有1.2M KCl的500mM磷酸二氫鉀-磷酸氫二鈉緩沖液(pH7.0)500μl、水300μl加入到實施例1-3中所得的鏈霉菌類No.6907株的培養液100μl中，40℃反應15分鐘。用4％醋酸1ml終止反應，加入甲醇2ml后用濾膜(0.45μm)過濾除去高分子蛋白，之后通過HPLC于210nm監測所生成的棘孢曲菌素A核物質并測定酰基酶活性。HPLC由波長可變的UV檢測器(島津SPD-10A)、泵(島津LC-10AD)及積分裝置(島津C-R6A)構成，使用LiChrospher 100RP-18(e)(4mm×250mmi.d.、粒徑5μm(Merck))作固相，以4％乙腈/1％磷酸二氫銨作移動相，以1ml/分的流速洗脫棘孢曲菌素A核物質。棘孢曲菌素A核物質的保持時間約8.7分鐘。以該結果計算棘孢曲菌素A核物質的生成量為370μg(0.47μmol)。用Lineweaver-Burk法測定時Km值為279μm,Vmax為16.8U/mg-蛋白質。實施例2-5將棘白菌素B的二甲基亞砜溶液(100mg/ml)100μl(棘白菌素B為10mg；9.43μmol)100μl、含1.2M KCl500mM磷酸二氫鉀-磷酸氫二鈉緩沖液(pH7.0)500μl、水300μl加入到實施例1-3中所得的鏈霉菌類No.6907株的培養液100μl中，40℃反應15分鐘。用1ml 4％醋酸終止反應，加入2ml甲醇后用濾膜(0.45μm)過濾，除去高分子蛋白質等，之后通過HPLC于210nm監測生成的棘白菌素B核物質并測定酰基酶活性。HPLC由波長可變的UV檢測器(島津SPD-10A)、泵(島津LC-10AD)及積分裝置(島津C-R6A)構成，用LiChrospher 100RP-18(e)(4mm×250mmi.d.、粒徑5μm(Merck))作固定相，以4％乙腈/1％磷酸二氫銨作移動相，以1 ml/分的流速洗脫棘白菌素B核物質。棘白菌素B核物質的保持時間約8.7分鐘。以該結果計算棘白菌素B核物質的生成量為90μg(0.11μmol)。用Lineweaver-Burk法測定時Km值為146μm,Vmax為7.85U/mg-蛋白質。
應用鏈霉菌屬的本發明新型酰基酶的生產菌所生產的酰基酶對環狀脂肽抗真菌物(例物質FR901379)的酰基側鏈進行脫酰化過程中的特征在下面論述。
這些數據是應用實施例2-1、2-2或2-3中所述的實施方法、改變緩沖液的種類(0.5M檸檬酸鈉緩沖液、0.5M磷酸二氫鉀-磷酸氫二鈉緩沖液和Tris-HCl緩沖液的適當組合)、反應溫度、甲醇的添加濃度等而得到的。各種酰基酶的活性以反應終了時物質FR179642的濃度(用HPLC測定)表示。
反應時的最適pH試驗1-1環圈鏈霉菌No.4811株生產酰基酶的最適pH

試驗1-2環圈鏈霉菌No.8703株生產酰基酶的最適pH

試驗1-3鏈霉菌類6970株生產酰基酶的最適pH

試驗2-2環圈鏈霉菌No.8703株生產酰基酶的最佳溫度

試驗2-3環圈鏈霉菌No.6907株生產酰基酶的最佳溫度

以上結果表明，在本發明實施例中對于每一酰基酶反應時的最佳溫度為40-60℃。
反應時添加甲醇的效果試驗3-1用環圈鏈霉菌No.4811株生產的酰基酶進行反應時甲醇的效果

試驗3-2用環圈鏈霉菌No.8703株生產的酰基酶進行反應時甲醇的效果

試驗3-3鏈霉菌類No.6907株生產的酰基酶進行反應時甲醇的效果

以上結果表明，在本發明的實施例中對于每一酰基來講，向反應液中加入5-20％的甲醇，活性會提高1.6～2.2倍。
下面對由培養鏈霉菌屬的酰基酶的生產菌而得到的環狀脂肽酰基酶進行具體說明。·由鏈霉菌類6907株而來的酰基酶的特征1)作用能催化FR901379及棘白菌素B、棘孢曲菌素A等FR901379物的類似體所代表的環狀脂肽物的脂質酰基部分脫酰化。2)最佳pH:pH8～93)作用優選的溫度范圍50℃附近4)抑制、活化及穩定性甲醇反應液中的含量到10％時呈濃度依賴性活化作用，此濃度以上為抑制作用。5)分子量純化的該酶經SDS-PAGE后分出2帶。
大片段肽；61kD
小片段肽；19kD6)結晶構造純化的蛋白質量少，未得到結晶。7)氨基酸分析N末端氨基酸序列大片段肽；Ser-Asn-Ala-Val-Ala-Phe-Asp-Gly-Ser-Thr-Thr-Val-Asn-Gly-Arg-Gly-Leu-Leu-Leu-Gly小片段肽；Gly-Ser-Gly-Leu-Ser-Ala-Val-Ile-Arg-Tyr-Thr-Glu-Tyr-Gly-Ile-Pro-His-His-Val-Ala8)底物特異性對FR901379、棘白菌素B及棘孢曲菌素A有催化作用。但對FR901469無效。
為了對本發明的酰基酶進行具體說明，列舉了以下實施例，但本發明并不局限于此。酰基酶的純化實施例3低溫下、用1.5M KCl攪拌抽提實施例1-3中所得的鏈霉菌類No.6907株的培養液，用No.2濾紙所得的抽提濾液在UF膜(旭化成；AIP-1010)上脫鹽(20mM Tris-HCl緩沖液(pH9)置換，過HP-20柱所得流出液上DEAE-Toyopearl柱(Cl-型)，用含0.3M NaCl的20mM Tris-HCl緩沖液(pH9)洗脫。向活性級分中添加、溶解0.5M相當量的(NH4)2SO4，過Phenyl-Toyopeanl柱，用含0.1M NaCl的50mM Tris-HCl緩沖液(pH8)洗脫。用DF膜(旭化成；SIP-0013)將所得活性級分脫鹽濃縮(20mMTris-HCl緩沖液(pH9)置換)，在YMC-Diol柱上進行凝膠過濾(移動相含0.2M NaCl的0.1M磷酸二氫鉀-磷酸氫二鈉緩沖液pH7.0)，再由用遞相系的Cosmosil 5C4-AR-300柱對活性級分進行分離純化(移動相(A液)0.5％三氟醋酸。(B液)0.5％三氟醋酸-80％乙腈、A∶B=60∶40→40∶60(線性梯度))。該純化的酰基酶經SDS-PAGE分出2條帶。由此得到分子量為61kD和19kD的2種肽。底物特異性FR901469物是由真菌No.11243株(FERMBP-3373)所產生的、具有抗真菌活性的已知物質(WO92/19468號公報記載)，是具有下面結構式〔Ⅲ〕

的化合物。
與本發明的新型酰基酶同樣具有脫酰化作用的來源于猶他游動放線菌(Actinoplanes utahensis)的酰基酶(特開平4-228072號公報記載)對前面所講化合物FR901469或其鹽具有催化活性，能產生下面結構式〔Ⅳ〕<p>試驗1-3鏈霉菌類6970株生產酰基酶的最適pH

以上結果表明，本發明的實施中對于每一酰基酶來講反應在弱酸性(pH4附近)以上進行，pH值一高反應速度就上升。
反應的最適溫度試驗2-1環圈鏈霉菌No.4811株生產酰基酶時的最佳溫度

生產FR901379物的Coleophoma sp.F-11899株及生產本發明酰基酶的環圈鏈霉菌No.4811株、環圈鏈霉菌No.8703株及鏈霉菌類No.6907株保藏于通商產生省工業技術院生命工學工業技術研究所(茨城縣筑波市東1-1-3)。
微生物 保藏號Coleophoma sp.F-11899株 FERM BP-2635Streptomyces anulatus No.4811株 FERM BP-5808Streptomyces anulatus No.8703株 FERM BP-5810Streptomyces sp.No.6907株FERM BP-5809No.11243株 FERM BP-337權利要求
1．由鏈霉菌屬菌而來的環脂肽酰基酶。
2．權利要求1的酰基酶，它能催化通式〔Ⅰ〕
〔式中，R1為酰基，R2為羥基或酰氧基，R3為氫或羥基，R4為氫或羥基，R5為氫或羥基磺酰氧基，及R6為氫或氨基甲酰基〕所示的環狀脂肽化合物或其鹽中R1的酰基脫酰化，能產生通式〔Ⅱ〕
〔式中，R2、R3、R4、R5和R6代表與前相同的基團〕中所示的環肽化合物或其鹽。
3．權利要求2的酰基酶，其特征在于權利要求2中R5為羥基磺酰氧基和R6為氨基甲酰基。
4．權利要求1的酰基酶，其特征在于酰基酶的生產菌為環圈鏈霉菌。
5．權利要求1的酰基酶，其特征在于酰基酶的生產菌為環圈鏈霉菌No.4811株。
6．權利要求1的酰基酶，其特征在于酰基酶的生產菌為環圈鏈霉菌No.8703株。
7．權利要求1的酰基酶，其特征在于酰基酶的生產菌為鏈霉菌類No.6907株。
8．具有下列性質的權利要求1的酰基酶1)作用催化FR901379及棘白菌素B、棘孢曲菌素A等FR901379物類似體所代表的權利要求1的環脂肽物的脂質酰基部分脫酰化；2)最佳pH:pH8～9；3)作用優選的溫度范圍50℃附近4)抑制、活化及穩定性甲醇反應液中含量達10％呈濃度依賴性的活化作用，濃度高于此則呈抑制作用；5)分子量大片段肽61kD小片段肽19kD6)氨基酸分析N末端氨基酸序列大片段肽Ser-Asn-Ala-Val-Ala-Phe-Asp-Gly-Ser-Thr-Thr-Val-Asn-Gly-Arg-Gly-Leu-Leu-Leu-Gly小片段肽；Gly-Ser-Gly-Leu-Ser-Ala-Val-Ile-Arg-Tyr-Thr-Glu-Tyr-Gly-Ile-Pro-His-His-Val-Ala7)底物特異性對FR901379、棘白菌素B及棘孢曲菌素A有催化作用，但對FR901469無作用。
9．權利要求8的酰基酶，其特征在于酰基酶的生產菌為鏈霉菌類No.6907株。
10．生產權利要求1的酰基酶的屬于鏈霉菌屬的酰基酶生產菌。
11．生產權利要求1的酰基酶的環圈鏈霉菌生產菌。
12．環圈鏈霉菌No.4811。
13．環圈鏈霉菌No.8703。
14．鏈霉菌類No.6907。
15．環肽物或其鹽的制備方法，它是通過將環脂肽物或其鹽與生產菌為鏈霉菌屬的酰基酶的粗提或純化酶液接觸，對其脂質部分進行脫酰化而形成的。
16．通式〔Ⅱ〕
〔式中，R2、R3、R4、R5和R6代表與后相同的基團〕中所示環肽化合物或其鹽的制備方法，其特征在于通式〔Ⅰ〕
〔式中，R1為酰基，R2為羥基或酰氧基，R3為氫或羥基，R4為氫或羥基，R5為氫或羥基磺酰氧基，及R6為氫或氨基甲酰基〕所示的環脂肽化合物或其鹽在水性溶劑中與培養屬于鏈霉菌屬的酰基酶生產菌所得的酰基酶的粗提或純化酶液接觸進行。
17．權利要求16的制備方法，其特征在于權利要求16的式中R5為羥基磺酰氧基，及R6為氨基甲酰基。
18．權利要求15的制備方法，其特征在于酰基酶的生產菌為環圈鏈霉菌。
19．權利要求15的制備方法，其特征在于酰基酶的生產菌為環圈鏈霉菌No.4811。
20．權利要求15的制備方法，其特征在于酰基酶的生產菌為環圈鏈霉菌No.8703。
21．權利要求15的制備方法，其特征在于酰基酶的生產菌為鏈霉菌類No.6907。
全文摘要
環脂肽酰基酶,它能有效地使環脂肽化合物,具體而言,它能使下面通式[Ⅰ]中所示的FR901379物及其類似體的酰基側鏈脫酰化,以及用該酰基酶制備環脂肽物的方法。通式[Ⅰ]如右式[式中,R
文檔編號C07K7/56GK1218507SQ9719447
公開日1999年6月2日 申請日期1997年3月6日 優先權日1996年3月8日
發明者上田聰, 田中美穗, 江崎正美, 坂本憲俊, 橋本正治, 大煙暢敬, 平井勝, 山下道雄 申請人:藤澤藥品工業株式會社