專利名稱：新的可用作免疫抑制劑的碳環腺苷類似物的制作方法
這是1990年9月14日提交的申請(編號07/582，280)的部分繼續申請。
本發明涉及某些可作為免疫抑制劑應用的碳環腺苷類似物。
免疫涉及到對體內存在的外源性抗原物質的識別和處理。通常抗原是以顆粒物質(如細胞，細菌等等)或大分子蛋白質或多糖分子的形式存在。抗原被免疫系統識別為“非己”物質，即與動物自身成份相比是不同的或外來的。潛在的抗原可能是多種物質，常為蛋白質，這些物質最常位于細胞的外表面。例如，潛在的抗原可在以下物質表面被發現，這些物質有花粉微粒，組織移植物，動物寄生蟲，病毒和細菌。一旦抗原物質被免疫系統識別為“非己”，天然的(非特異性的)和/或獲得性免疫反應可以被起動并被特異性免疫細胞，抗體和補體系統的作用所保持。在某些條件下，包括某些疾病狀態，動物的免疫系統將自身成份識別為“非己”物質并起動對“自身”物質的免疫反應。
一種免疫反應可通過天然的或獲得性的機制由免疫系統來實現，兩種機制均有細胞介導和體液因素參與。免疫反應的天然機制涉及參與非特異免疫反應的那些機制，包括補體系統和類髓細胞本身，如巨噬細胞，肥大細胞和多形核白細胞(PMN)，參與對某些細菌，病毒，損傷組織和其它抗原的反應。這些天然機制提供了所謂天然免疫。免疫反應的獲得性機制涉及淋巴細胞(T和B細胞)和抗體介導的那些機制，這種反應可選擇性地針對數以千計的不同的“非己”物質而進行。這種獲得性機制提供了所謂的獲得性免疫，并導致特異性記憶和適應于動物自身環境的不斷變化的反應類型。獲得性免疫可以僅由淋巴細胞和抗體本身完成，或更常見由淋巴細胞和抗體與天然免疫機制的補體系統和類髓細胞的相互作用來完成，抗體提供了獲得性免疫反應的體液因素，而T細胞提供了獲得性免疫反應的細胞介導因素。
免疫反應的天然機制涉及巨噬細胞和多形核白細胞的吞噬作用，通過這一作用，外源性物質或抗原被上述細胞吞食并處理。此外，巨噬細胞可通過其細胞毒性作用殺傷某些外源細胞。補體系統由各種肽和酶組成，也參與天然免疫。它們能吸附于外源物質或抗原上，這樣可以促進巨噬細胞和多形核白細胞的吞噬作用或促進細胞溶解或產生炎癥反應。
免疫反應的獲得性機制涉及由B淋巴細胞(或B細胞)分泌的抗體對特異性抗原的作用以及各種T淋巴細胞(或T細胞)對特異性抗原，對B細胞，對其它T細胞和對巨噬細胞的作用。
負責獲得性免疫體液方面的抗體是血清球蛋白，它由B細胞分泌，對不同抗原具有廣泛的特異性。抗體的分泌是對特異性抗原識別的反應。抗體可以結合并中和細菌毒素，能結合于病毒，細菌或其它“非己”細胞的表面，并因此促進多形核白細胞和巨噬細胞的吞噬作用。此外，抗體能活化補體系統，后者可進一步加強針對特異性抗原的免疫反應。
淋巴細胞是血液中的小細胞，它們通過血循環進入組織，再通過淋巴系統回到血中。有兩種主要的淋巴細胞亞群叫做B細胞和T細胞。B細胞和T細胞均起源于相同的類淋巴干細胞，B細胞在骨髓分化，T細胞在胸腺分化。淋巴細胞擁有某些限制性受體，后者允許每個細胞針對特異性抗原反應，這為獲得性免疫反應的特異性奠定了基礎。此外，淋巴細胞壽命相對較長，在接受適當的信號后，具有克隆增殖的能力，這一特點為獲得性免疫的記憶方面提供了基礎。
B細胞是負責獲得性免疫體液方面的淋巴細胞，作為對特異外源性抗原的識別反應，B細胞將分泌特異性抗體，后者可與特異性抗原結合。對于毒素，抗體可中和抗原，或對于其它抗原，抗體可以促進吞噬。抗體也參與激活補體系統，后者可以使針對入侵抗原的免疫反應進一步加強。
T細胞是負責獲得性免疫細胞介導方面的淋巴細胞。有三種主要的T細胞類型，即細胞毒性T細胞，輔助性T細胞和抑制性T細胞。細胞毒性T細胞可探測和破壞感染了特異性病毒抗原的細胞。輔助性T細胞具有多種調節功能。當一種特異性病毒抗原被識別時，輔助性T細胞能促進或增強通過合適B細胞針對抗原的抗體反應，也能促進或增強通過巨噬細胞抗原的吞噬作用。抑制性T細胞具有抑制針對特殊抗原的免疫反應的作用。
細胞介導的免疫反應被T細胞通過各種調節信使化合物抑制和監視，這些化合物由類髓細胞和淋巴細胞分泌。通過分泌這些調節信使化合物，T細胞能調節其它免疫細胞，如B細胞，巨噬細胞，多形核白細胞和其它T細胞的增殖和活化。例如，當結合了外源性抗原后，巨噬細胞或其它抗原提呈細胞能分泌白細胞介素-1(IL-1)，后者可活化輔助性T細胞。T細胞又轉過來分泌某些淋巴因子，包括白細胞介素-2(IL-2)和γ-干擾素。這些細胞因子在細胞介導免疫反應中具有多種調節作用。淋巴因子是一個由T細胞(有時由B細胞)所產生之分子的大家族。它們包括IL-2，可促進T細胞克隆增殖;MAF或巨噬細胞活化因子，可增強許多巨噬功能，包括吞噬作用，細胞內的殺傷和分泌各種細胞毒性因子;NAF或中性粒細胞活化因子，可增強多形核白細胞的許多功能，包括吞噬，氧基團的產生，殺菌，增強趨化性和增加細胞因子的產生;MIF或巨噬細胞移動抑制因子，限制巨噬細胞的運動，使之集中在T細胞附近;γ-干擾素，由活化的T細胞產生，能對許多細胞產生廣泛的作用，包括抑制病毒復制，誘導Ⅱ類組織相容性分子的表達，使細胞活化，以利于結合和呈遞抗原，巨噬細胞的活化，細胞生長抑制，誘導許多類髓細胞系分化。
活化的巨噬細胞和多形核白細胞在細胞介導的獲得性免疫過程中，能使免疫反應增強，其特征在于使反應性氧中間體的生成增加。這種使反應性氧中間體生成增加或呼吸作用突然增加被稱為“待發”。某些淋巴因子如γ干擾素，能在巨噬細胞和多形核白細胞中，引起這種反應性氧中間體呼吸作用突然增加。因此，淋巴因子，如γ-干擾素，是由T細胞分泌，行使活化巨噬細胞和多形核白細胞的功能，結果使細胞介導的免疫反應增強。
免疫反應可以是速發的或遲發的反應類型。遲發型超敏反應是在抗原激發后24-48小時內在免疫反應患者體內出現的炎癥反應。它主要是細胞介導的免疫反應的結果。而速發型超敏反應，如過敏性休克或局部過敏壞死反應(阿圖斯反應)，是抗原激發后幾分鐘至幾小時內在免疫反應患者體內出現的炎癥反應，它主要是抗體介導的免疫反應的結果。
免疫系統特別是細胞介導的免疫，識別“自己”和“非己”抗原的能力，對于免疫系統特異性防御入侵微生物的功能是至關重要的。“非己”抗原是那些在體內經檢測可與動物自身成份區別或為外源性的物質上的抗原;而“自己”抗原是那些在體內經檢測不能與動物自身成份區別的抗原。盡管免疫反應主要是防御致病的外源性物質的，但它不能區分外源性物質是有利的還是有害的，對這兩者它都進行破壞。
在某些情況下，如對于同種異體移植或在“移植物抗宿主”病中，抑制免疫反應將大大有助于防止對有利的外源組織和器官的排斥。同種異體組織和器官是來自相同物種但遺傳學上不同成員的組織和器官。“移植物抗宿主”病發生在被移植的組織部位，例如移植的骨髓含有供體同種異體T細胞，其可引起對受體自身組織的免疫反應。雖然體液和細胞介導免疫反應在同種異體組織和器官的排斥反應中均起作用，但主要的影響機制是細胞介導的免疫反應。因此，免疫反應的抑制，特別是細胞介導免疫反應的抑制對于防止這種同種移植的組織和器官的排斥反應是有益的。例如，環孢霉素A是目前使用的治療接受同種異體移植物患者和移植物抗宿主病的免疫抑制劑。
有時個體的免疫反應比入侵微生物或外源性物質對自身造成更嚴重的損傷和不適，如變態反應時，此時需要抑制免疫反應。
有時免疫機制對一個人自身的某些部分變為敏感，引起對這些部分的干擾甚至破壞。區別“自己”和“非己”的能力被損害，機體開始破壞自身，這樣能導致自身免疫病，如類風濕關節炎，胰島素依賴性糖尿病(此病為胰島β細胞的自身免疫性破壞，胰島負責分泌胰島素)，某些溶血性貧血，風濕熱，甲狀腺炎，潰瘍性結腸炎，重癥肌無力，腎小球腎炎，變態反應性腦脊髓炎，病毒性肝炎后的持續性神經和肝臟破壞，多發性硬化和系統性紅斑狼瘡。某些類型的自身免疫系由于通常不暴露于淋巴細胞的部位的創傷所引起，如神經組織或眼的晶體。當這些部位的組織暴露于淋巴細胞時，它們的表面蛋白能做為抗原，激發抗體產生和細胞免疫反應，繼之造成這些組織的破壞。其它的自身免疫病發生于機體暴露于與自身組織抗原性相似，即交叉反應的抗原之后。風濕熱是這類病中的一個例子，引起該病的鏈球菌抗原與人心臟組織有交叉反應，抗體不能區分細菌抗原和心肌抗原，帶有這些抗原的細胞均可以被破壞。在這些自身免疫病中，免疫系統的抑制將有益于減少或消除疾病的作用。某些這種自身免疫病，如胰島素依賴性糖尿病，多發性硬化和類風濕關節炎的特征在于它們是細胞介導自身免疫反應的結果，而且可能系由于T細胞的作用[參看Sinha，et al.Science 248，1380(1990)]。其它的如重癥肌無力和系統性紅斑狼瘡的特征在于它們是體液自身免疫反應的結果[Ⅰd]。
因此，免疫反應的抑制對治療自身免疫病是有益的。更重要的是對于細胞介導免疫反應的抑制將有助于治療因T細胞活化而導致的自身免疫病，這類病包括胰島素依賴性糖尿病，多發性硬化和類風濕關節炎。對體液免疫反應的抑制將有益于治療T細胞非依賴性自身免疫病，如重癥肌無力和系統性紅斑狼瘡。
本發明提供了新的式(1)化合物、或其藥物學上可接受的鹽
式中，在環戊烷環上的羥基取代基是與雙環取代基相關的順式構型;Y3，Y7，Y8和Y9各自獨立地為氮或CH基團;Q是氨基，鹵素或氫，Z是氫，鹵素或氨基。
本發明還提供了一種實現免疫抑制的方法，更確切地說，一種抑制獲得性免疫的方法。當患者需要時，可給予有效免疫抑制劑量的式(1)化合物。
此外，本發明提供了一種含有有效免疫抑制劑量的式(1)化合物的藥物組合物。該組合物以混合物形式或以與一種或多種藥物學上可接受的載體或賦形劑相結合的其它形式存在。
這里使用的術語“鹵素”指單價的碘，溴，氯或氟基團。術語“氮”指三價的氮基團，術語“CH基團”指次甲基基團。
這里使用的術語“藥物學上可接受的鹽”指式(1)化合物的酸加成鹽，與形成鹽之前相比化合物的毒性并未增加。藥物學上可接受的鹽的代表性實例是通過用相應的酸處理式(1)化合物制得的鹽。這些酸是氫溴酸，鹽酸，硫酸，磷酸，硝酸，甲，乙，丙酸，琥珀酸，乙醇酸，乳酸，蘋果酸，酒石酸，檸檬酸，抗壞血酸，α-氧代戊二酸，谷氨酸，天冬氨酸，順式丁烯二酸，羥基順式丁烯二酸，丙酮酸，苯乙酸，苯甲酸，對氨基苯甲酸，氨茴酸，對羥基苯甲酸，鄰羥基苯甲酸，對氨基鄰羥基苯甲酸，甲磺酸，乙磺酸，羥乙磺酸，亞乙基二磺酸，鹵苯磺酸，甲苯磺酸，萘磺酸和磺胺酸。鹽酸鹽作為式(1)化合物的藥物學上可接受的鹽是優選的。
應明確的是式(1)化合物的環戊烷環上的羥基取代基具有與雙環取代基相關的順式構型。此外，應明確式(1)的這些化合物可能以各種立體異構體的構型形式存在。當然，式(1)化合物包含和包括各自的立體異構體及其外消旋混合物。
制備式(1)化合物的總的合成步驟見合成路線A。其中，Y9是氮。
合成路線A
B＝保護基團，L＝離去基團。
在步驟a中，(1R，4S)-順式-1-乙酸基-2-環戊烯-4-醇(2)的4-羥基反應部位被一個羥基保護基團(B)所保護，形成對應的4-羥基被保護的(1R，4S)-順式-1-乙酸基-2-環戊烯-4-醇(3)。使用的特定羥基保護基團可以是許多常用羥基保護基團之一，這些基團是已知的并且有文獻可查。特定保護基團的選擇和使用是本領域的技術人員熟知的。一般來說，保護基團的選擇應以其能在后面的合成步驟中充分地保護羥基，并易于在不引起所需產物降解的條件下除去為原則。
合適的羥基保護基團的代表性實例是四氫吡喃基，甲氧甲基，叔丁基二甲基甲硅烷基，甲氧乙氧基-甲基，乙酸基等等。首選的化合物(2)的4-羥基部分的保護基團為2-四氫吡喃基團。當需要用2-四氫吡喃基在化合物(2)的4-羥基處進行保護時，(2)可與3，4-二氫-2H-吡喃在三氟乙酸存在下反應，生成相應的(1R，4S)-順式-1-乙酸基-4-(2-四氫吡喃氧基)-2-環戊烯。
在步驟b中，4-羥基被保護的-(1R，4S)-順式-1-乙酸基-2-環戊烯-4-醇(3)中的1-乙酸基被水解，用適當的離去基團(L)衍生所得的1-羥基形成相應的2-環戊烯衍生物(4)。(3)的1-乙酸基首先用堿水解，如可使用溶于甲醇或乙醇的氫氧化鉀，氫氧化鈉或氫氧化銨。然后，用離去基團(L)對水解后衍生物的1-羥基進行衍生。所用的特定離去基團可以是已知的并且有文獻可查的許多常用的離去基團之一。特定離去基團的選擇和使用是本領域的技術人員熟知的。一般來說，離去基團的選擇應以其能充分促進自身被一合適的核苷堿衍生物取代而獲得一個構型穩定的產物為原則。合適的離去基團的代表性實例是triflate，對溴苯磺酰基，甲苯磺酰基，甲磺酰基等等。對于步驟b來說，首先的離去基團是甲磺酰基。
例如，當需要將4-羥基被保護的(1R，4S)-順式-乙酸基-2-環戊烯-4-醇(3)轉變為相應的4-羥基被保護的(1R，4S)-順式-1-甲磺酰氧基-2-環戊烯-4-醇時，(3)可被溶于乙醇的氫氧化鉀水解，然后形成的游離乙醇可被分離出來，(3)通過在三乙胺存在下用甲磺酰氯處理轉變為相應的4-羥基被保護的(1R，4R)-順式-1-甲磺酰氧基-2-環戊烯-4-醇。
在步驟c中，1位上帶有離去基團和4位上帶有被保護羥基的2-環戊烯衍生物(4)，通過所需核苷堿(其中Y9是氮)取代得到相應的具有穩定構型的3-羥基被保護的碳環核苷類似物(5)。例如，當需要將4-羥基被保護的(1R，4S)-順式-1-甲磺酰氧基-2-環戊烯-4-醇轉變為相應的3-羥基被保護的(1R，3S)-順式-1-(9-腺嘌呤基)-4-環戊烯-3-醇時，甲磺酰氧基衍生物可在氫化鈉存在下用腺嘌呤處理。
在步驟d中，3-羥基被保護的碳環核苷類似物(5)按已知的和有文獻可查的標準方法和技術脫去保護基，產生相應的碳環核苷類似物(6)。例如，當3-羥基被2-四氫吡喃所保護時，3-羥基的保護基團可通過酸(如鹽酸)處理而被除去。
在步驟e中，碳環核苷類似物(6)通過催化氫化，如可在氧化鉑存在下用氫處理轉變為相應的碳環腺苷類似物(1a)。
Y9是氮的式(1)化合物可選擇下述合成路線A的縮短路線來制備。(1S，4R)-順式-1-乙酸基-2-環戊烯-4-醇的4-羥基反應部位可用合成路線A步驟b中敘述的合適的離去基團(L)衍生。在替代合成路線中，首選的離去基團是甲磺酰基團。這樣形成了1位上帶有乙酸基，4位上帶有離去基團(如甲磺酰基)的2-環戊烯衍生物。然后，用需要的核苷堿(其中Y9是氮)，按合成路線A步驟C描述的方法來取代，形成相應的3-羥基被保護的碳環核苷類似物(5)。以后，根據合成路線A步驟d和e制備式(1)化合物，其中Y9是氮。
下面的實例描述了如合成路線A所述的典型合成方法。這里的實例只是為了便于理解而做的說明，并未打算在任何方面限制本發明的范圍。下面實例中用的術語具有所示意義“g”指克，“mmol”為毫摩爾，“ml”為毫升，“DMF”指二甲基甲酰胺，“℃”為攝氏溫度，“mg”為毫克，“N”代表溶液的當量濃度，“psi”代表磅/每平方英寸，“THF”指四氫呋喃。
實例1(1S，3R)-順式-1-(9-腺嘌呤基)-3-羥基環戊烷鹽酸鹽步驟a(1R，4S)-順式-1-乙酸基-4-(2-四氫吡喃氧基)-2-環戊烯攪拌下述溶液，在20ml二氯甲烷中，溶解(1R，4S)-順式-1-乙酸基-2-環戊烯-4-醇(1克，7.0毫摩爾)，加3，4-二氫-2H-吡喃(0.6克，7.1毫摩爾)和5滴三氟乙酸。攪拌此混合液24小時。用50毫升二氯甲烷稀釋混合液后，用飽和碳酸氫鈉提取，然后用鹽水提取。用硫酸鈉干燥有機層，真空除去溶劑，生成標題化合物(1.58克)。
步驟b(1R，4S)-順式-1-甲磺酰氧基-4-(2-四氫吡喃氧基)-2-環戊烯將(1R，4S)-順式-1-乙酸基-4-(2-四氫吡喃氧基)-2-環戊烯(3.0克，13毫摩爾)溶于50毫升無水乙醇。向該溶液中加入氫氧化鉀(0.8克，14毫摩爾)并攪拌混合液3小時。濃縮混合液后，過硅膠柱(10克)，用乙酸乙酯/己烷(1∶1)液洗脫。除去溶劑，生成(1R，4S)-順式-4-(2-四氫吡喃氧基)-2-環戊烯-1-醇，為無色油狀物(2.38克)。
將(1R，4S)-順式-4-(2-四氫吡喃氧基)-2-環戊烯-1-醇(1.2克，6.6毫摩爾)溶于25毫升二氯甲烷，向此溶液中加甲磺酰氯(1.13克，9.9毫摩爾)和三乙胺(0.93克，9.2毫摩爾)。攪拌反應液45分鐘，然后用水、鹽水提取反應混合液，用硫酸鈉干燥有機層。濃縮此溶液，生成標題化合物(1.62克，產率94%)，為黃色油狀物。
步驟c(1R，3S)-順式-1-(9-腺嘌呤基)-3-(2-四氫吡喃氧基)-4-環戊烯將氫化鈉(80%，0.57克，19.8毫摩爾)在60℃時加入攪拌的溶于100毫升二甲基甲酰胺的腺嘌呤(2.67克，19.8毫摩爾)混懸液。60℃攪拌3小時后，加(1R，4S)-順式-1-甲磺酰氧基-4-(2-四氫吡喃氧基)-2-環戊烯(1.62克，6.2毫摩爾)并繼續在60℃攪拌1小時。冷卻反應混合物至室溫并攪拌過夜。第二天，加熱反應混合液至60℃，6小時，然后冷卻至室溫過夜。真空除去二甲基甲酰胺，在攪拌的二氯甲烷和水中浸溶殘余物。除去有機層，用鹽水提取，然后用硫酸鈉干燥。真空除去溶劑，殘余物溶于二氯甲烷。將溶液過硅膠柱(10克)，用二氯甲烷/乙醇(19∶1)液洗脫，生成標題化合物(500毫克，產率26.7%)。
步驟d(1R，3S)-順式-1-(9-腺嘌呤基)-3-羥基-4-環戊烯鹽酸鹽溶解(1R，3S)-順式-1-(9-腺嘌呤基)-3-(2-四氫吡喃氧基)-4-環戊烯(0.5克，1.7毫摩爾)于50毫升蒸餾水和1.5毫升6當量鹽酸中。在室溫攪拌此混合液12小時，然后真空濃縮至干。將殘余物浸溶于含足量氫氧化銨的乙醇溶液，加入等體積的二氯甲烷(氯化銨沉淀)。將混合液過硅膠柱(50克，70-230目)，用二氯甲烷/甲醇(4∶1)液洗脫，以每份40毫升的量回收標題化合物。合并含純物質的各部分并濃縮至干。用乙醇溶解殘余物并加足量的6當量鹽酸調pH至1。濃縮溶液至干，生成標題化合物(230毫克，產率62%)。
步驟e(1S，3R)-順式-1-(9-腺嘌呤基)-3-羥基環戊烷鹽酸鹽溶解(1R，3S)-順式-1-(9-腺嘌呤基)-3-羥基-4-環戊烯鹽酸鹽(230毫克，0.99毫摩爾)于25毫升甲醇和75毫升蒸餾水中，加氧化鉑(Ⅳ)(50毫克)并在30磅/平方英寸氫存在下氫化混合物3.5小時。經硅藻土板過濾混合液并濃縮濾液至干。將產物溶于甲醇，溶液過20克硅膠柱，用二氯甲烷∶甲醇(9∶1)液洗脫。濃縮含產物的部分至干并溶于甲醇，用6當量鹽酸調pH至1。將這種物質濃縮至干，生成標題化合物(210毫克，產率83%)。365＝+24.4℃(甲醇，1.0毫克/毫升)。
H1-NMR(DMSO/TMS)δ＝8.7(s，1H)，8.5(s，1H)，5.02(m，1H)，4.3(m，1H)，2.4-1.8(m，6H)。
以下化合物可采用與上面實例1中類似的方法制備，使用易獲得的起始物質(1S，3R)-順式-1-[9-(3-去氮雜腺嘌呤基)]-3-羥基環戊烷鹽酸鹽(1S，3R)-順式-1-[9-(7-去氮雜腺嘌呤基)]-3-羥基環戊烷鹽酸鹽(1S，3R)-順式-1-(9-嘌呤基)-3-羥基環戊烷鹽酸鹽(1S，3R)-順式-1-[9(8-氮雜腺嘌呤基)]-3-羥基環戊烷鹽酸鹽(1S，3R)-順式-1-[9-(2-氨基嘌呤基)]-3-羥基環戊烷鹽酸鹽(1S，3R)-順式-1-[9-(2，6-二氨基嘌呤基)]-3-羥基環戊烷鹽酸鹽(1S，3R)-順式-1-[9-(2-氨基-6-氯嘌呤基)]-3-羥基環戊烷鹽酸鹽用于上述合成路線的起始物質，包括(1R，4S)-順式-1-乙酸基-2-環戊烯-4-醇，腺嘌呤，7-去氮雜腺嘌呤，嘌呤，8氮雜腺嘌呤，2-氨基嘌呤，2，6-二氨基嘌呤和2-氨基-6-氯嘌呤均容易獲得或可按已知的和有文獻可查的常規方法和技術制備。
制備Y8和Y9均為CH基團的式(1)化合物的總合成過程見合成路線B。
合成路線B
在步驟a中，2-環戊烯衍生物(4)與甲基甲基亞磺酰甲基硫中的鈉離子反應，生成相應的1-取代衍生物(7)。
在步驟b中，(7)的鈉離子與合適的嘧啶或吡啶衍生物反應，如5-氨基-4，6-二氯嘧啶，繼之水解，生成相應的酮衍生物(8)。
在步驟c中，酮衍生物(8)通過與合適的Wittig試劑反應，如φ3P＝CH2OCH3[methoxymethyl triphenylphosphylidine chlo-ride]，在正丁基鋰存在下轉變為相應的烯醇酯(9)。
在步驟d中，烯醇酯(9)在酸(如鹽酸)的存在下被環化，根據已知的并且有文獻可查的標準技術除去3-羥基保護基團，生成6-取代碳環核苷類似物(10)。
在步驟e中，6-取代碳環核苷類似物用合成路線A，步驟e介紹的方法加以氫化，產物為6-取代核苷衍生物(16)。當前述6-取代碳環核苷類似物(10)在第6位攜帶一個氯時，根據已知的和有文獻可查的標準技術，6-氯衍生物可轉變為6-氨基或6-氫衍生物。
下面的實例介紹了按合成路線B進行的典型合成方法。這一實例僅是為了便于理解而做的說明，并未打算在任何方面限制本發明的范圍。
實例2(1S，3R)-順式-1-[9-(9-去氮雜腺嘌呤基)]-3-羥基環戊烷鹽酸鹽步驟a(1R，4S)-順式-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-1-[甲基(1-甲基亞磺酰基-1-甲基硫)]-2-環戊烯在0℃，將甲基甲基亞磺酰甲基硫(1.2當量)攪拌溶解于四氫呋喃溶液，加正丁基鋰(1.2當量)并攪拌15分鐘。在15分鐘內，在0℃至25℃下，滴加(1R，4S)-順式-1-甲磺酰氧基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-2-環戊烯(1當量)于四氫呋喃的溶液并攪拌幾小時。用水稀釋反應液，由乙酸乙酯或二氯甲烷提取，然后用水，鹽水洗有機層，經硫酸鈉干燥。再將溶液濃縮至干，生成標題化合物的粗產品。
步驟b(1R，4S)-順式-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-1-[羰基(4-[5-氨基-6-氯嘧啶])]-2-環戊烯在0℃，攪拌(1R，4S)-順式-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-1-[甲基(1-甲基亞磺酰基-1-甲基硫)]-2-環戊烷(1當量)于四氫呋喃的溶液，加正丁基鋰并繼續攪拌15分鐘。在15分鐘內，滴加5-氨基-4，6-二氯嘧啶(1.1當量)于四氫呋喃的溶液并在室溫下攪拌反應混合液24小時。用水稀釋反應液，用乙酸乙酯或二氯甲烷提取，經水、鹽水洗有機層，用硫酸鈉干燥。將溶液濃縮至干，生成標題化合物的粗產品。用硅膠柱純化標題化合物，洗脫液為乙酸乙酯/己烷。
步驟c(1R，4S)-順式-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-1-[亞乙基-1-(4-[5-氨基-6-氯嘧啶])-2-甲氧基]-2-環戊烯在0℃，攪拌methoxymethyl triphen ylphosphylidine chloride(1.2當量)于四氫呋喃的溶液，加入正丁基鋰(1.2當量)后攪拌1小時。在15分鐘內，0℃下加(1R，4S)-順式-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-1-[羰基(4-[5-氨基-6-氯嘧啶])]-2-環戊烷(1當量)于四氫呋喃的溶液并攪拌過夜。濃縮反應混合物至干，將殘余物溶于二乙醚。冷卻至0℃1小時，經過濾除去沉淀物物氯化鋰和氧化三苯膦)。濃縮濾液，得到標題化合物粗品。用硅膠柱純化標題化合物，洗脫液為乙酸乙酯/己烷。
步驟d(1R，3S)-順式-1-[9-(9-去氮雜腺嘌呤基)]-3-羥基-4-環戊烯鹽酸鹽溶解(1R，4S)-順式-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-1-[亞乙基-1-(4-[5-氨基-6-氯嘧啶])-2-甲氧基]-2-環戊烯于甲醇水溶液和足量的6當量鹽酸，室溫攪拌4小時。用氫氧化銨中和產物，將反應混合液濃縮至干，生成(1R，3S)-順式-3-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-1-[9-(6-氯-9-去氮雜嘌呤基)]-4-環戊烯。用硅膠柱純化產物，洗脫液為二氯甲烷/乙醇。
將(1R，3S)-順式-3-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-1-[9-(6-氯-9-去氮雜嘌呤基)]-4-環戊烯封入一個含甲醇和無水氨的密閉容器中24小時，需要時可加熱。除去溶劑，將產物過Dowex 50WTM柱，用稀氫氧化銨洗脫。濃縮洗脫液至干，在水中浸溶，用6當量鹽酸酸化，攪拌4小時。濃縮溶液至干，生成標題化合物。
步驟e(1S，3R)-順式-1-[9-(9-去氮雜腺嘌呤基)]-3-羥基環戊烷鹽酸鹽溶解(1R，3S)-順式-1-[9-(9-去氮雜腺嘌呤基)]-3-羥基-4-環戊烯鹽酸鹽于乙醇/水(1∶1)液中并加入氧化鉑。在充滿氫(35磅/平方英寸)的帕爾氫化器中反應12小時。過濾除去催化劑，濃縮濾液至干，生成標題化合物。
制備Y9為CH基團而Y8為氮的式(1)化合物的總合成方法見合成路線C。
合成路線C
在步驟a中，按合成路線B描述的方法制備的酮衍生物(8)被轉變為相應的肟衍生物，然后被環化為相應的8-氮雜-9-去氮雜-6-取代核苷衍生物(11)。這一轉化是通過將肟與二乙基偶氮二羧化物(DEAD)和三苯膦反應而實現的。此外，(8)的3-羥基保護基團可根據已知的和有文獻可查的標準技術除去。
在步驟b中，8-氮雜-9-去氮雜-6-取代核苷衍生物(11)通過使用合成路線A步驟e描述的氫化方法，被轉變為相應的8-氮雜-9-去氮雜-6-取代-碳環腺嘌呤衍生物(1c)。當后者在第6位帶有一個氯時，可根據已知的和有文獻可查的標準技術，將6-氯衍生物轉變為6-氨基或6-氫衍生物。
實例3(1S，3R)-順式-1-[9-(8-氮雜-9-去氮雜腺嘌呤基)]-3-羥基環戊烷鹽酸鹽步驟a(1R，3S)-順式-1-(9-(8-氮雜-9-去氮雜腺嘌呤基)]-3-羥基-4-環戊烯鹽酸鹽向(1S，4S)-反式-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-1-[羰基(4-[5-氨基-6-氯嘧啶])]-2-環戊烯(1當量)和鹽酸羥胺(1.2當量)的無水乙醇溶液中加入氫氧化鈉溶液(1.2當量)。2小時后加水，收集和干燥由此而形成的固體(肟中間產物)。溶解肟中間產物(1當量)于二氯甲烷，繼之為DEAD(二乙基偶氮二羧化物)(1.2當量)和三苯膦(1.1當量)。讓混合液反應2小時，生成(1R，3S)-順式-3-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-1-(9-[8-氮雜-6-氯-9-去氮雜嘌呤基])-4-環戊烯。用水、鹽水提取反應混合物。用硫酸鈉干燥有機層，濃縮至干，加入乙醚沉淀氧化三苯膦。過濾除去沉淀，在硅膠柱上純化產品，用乙酸乙酯/己烷液洗脫。
將(1R，3S)-順式-3-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-1-(9-[8-氮雜-6-氯-9-去氮雜嘌呤基])-4-環戊烯封入含甲醇和無水氨的密閉容器中24小時，必要時加熱。除去溶劑，將產品過Dowex 50WTM柱，用稀氫氧化銨液洗脫。將洗脫液濃縮至干，在水中浸溶，用6當量鹽酸酸化，攪拌4小時。將溶液濃縮至干，得到標題化合物。
步驟b(1S，3R)-順式-1-[9-(8-氮雜-9-去氮雜腺嘌呤基)]-3-羥基環戊烷鹽酸鹽溶解(1R，3S)-順式-1-[9-(8-氮雜-9-去氮雜腺嘌呤基)]-3-羥基-4-環戊烯鹽酸鹽于乙醇/水(1∶1)中并加入氧化鉑。在充滿氫(35磅/平方英寸)的帕爾氫化器中反應12小時。過濾除去催化劑，濃縮濾液至干，生成標題化合物。
總之，當需要合成式(1)化合物的相應的(1R，3S)對映體時，應采用與上述相類似的方法。所不同的是中間產物(2)的4-羥基未接保護基團(以便在乙酸基水解后可在1位接離去基團)，而是在4位接了一合適的離去基團，保留1-乙酸基團或1位上其它合適的保護基團。
例如，制備Y9為氮的式(1)化合物相應的(1R，3S)對映體的總合成步驟見合成路線D。
合成路線D
L＝離去基團在步驟a中，(1R，4S)-順式-1-乙酸基-2-環戊烯-4-醇(2)的4-羥基部分被一個合適的離去基團(L)采用合成路線A中描述的方法衍生，形成相應的2-環戊烯衍生物(4a)。合適的離去基團的代表性實例為triflate，對溴苯磺酰基，甲苯磺酰基，甲磺酰基等等。首選的離去基團是甲磺酰基。
在步驟b中，2-環戊烯衍生物(4a)在4位上帶一離去基團，在1位有一乙酸基團，被需要的核苷堿(其中Y是氮)所取代，生成相應的保持原構型的1-乙酸基-碳環核苷類似物(5a)。這一反應可按合成路線A的取代反應進行。
在步驟c中，1-乙酸基碳環核苷類似物(5a)的1-乙酸基可根據已知的和文獻中可查到的標準方法和技術除去，生成相應的不飽和碳環核苷類似物(6a)。例如，1-乙酸基可被堿，如碳酸鉀處理除去。
在步驟d中，不飽和碳環核苷類似物(6a)按已知的和文獻中可查到的標準方法進行氫化。生成相應的碳環核苷類似物(Ⅰd)。
下面的實例介紹了合成路線D描述的典型合成法。這一實例僅是為了便于理解而做的說明，并未打算從任何方面限制本發明的范圍。
實例4(1R，3S)-順式-1-(9-腺嘌呤基)-3-羥基-4-環戊烷鹽酸鹽步驟a(1S，4R)-順式-1-甲磺酰氧基-4-乙酸基-2-環戊烯溶解(1R，4S)-順式-1-乙酸基-2-環戊烯-4-醇(1.42克，10.0毫摩爾)于40毫升二氯甲烷。向此溶液中加入甲磺酰氯(3.72克，30.0毫摩爾)和三乙胺(3.63克，30.0毫摩爾)并攪拌4.5小時。用水、鹽水提取混合物。用硫酸鈉干燥有機層，濃縮溶液，生成黃色油狀標題化合物(2.09克，產率95%)，產物立即用于下一反應。
步驟b(1S，3R)-順式-1-(9-腺嘌呤基)-3-乙酸基-4-環戊烯在60℃攪拌溶于50毫升二甲基甲酰胺的腺嘌呤(4.1克，30.0毫摩爾)混懸液，加入氫化鈉(60%，1.0克，30.0毫摩爾)，60℃攪拌3小時后，向溶液中加入(1S，4R)-順式-1-甲磺酰氧基-4-乙酸基-2-環戊烯(2.09克，9.5毫摩爾)并在60℃繼續攪拌16小時。真空除去二甲基甲酰胺，在攪拌著的二氯甲烷水溶液中浸溶殘余物，除去有機層，用鹽水提取，用硫酸鈉干燥有機層。真空除去溶劑，殘余物溶解于二氯甲烷中。溶液過硅膠柱(40克)，用氯仿/甲醇(9∶1)洗脫，生成標題化合物(1.07克)(產率33%)。
步驟c(1S，3R)-順式-1-(9-腺嘌呤基)-3-羥基-4-環戊烯溶解(1S，3R)-順式-1-(9-腺嘌呤基)-3-乙酸基-4-環戊烯(0.5克，1.7毫摩爾)于25毫升甲醇中，然后加3毫升水和600毫克碳酸鉀。室溫下攪拌此混合液1小時。然后真空濃縮混合液至干。在乙醇中浸溶固體以沉淀碳酸鉀，過濾混合液。加等量的二氯甲烷，將混合液過硅膠柱(50克，70-230目)，然后用二氯甲烷/甲醇(4∶1)洗脫。收集各部分(40毫升)，濃縮含純物質的部分，干燥后生成標題化合物(257毫克，產率62%)。
步驟d(1R，3S)-順式-1-(9-腺嘌呤基)-3-羥基-4-環戊烷鹽酸鹽溶解(1S，3R)-順式-1-(9-腺嘌呤基)-3-羥基-4-環戊烯(50毫克，0.2毫摩爾)于50毫升乙醇和15毫升蒸餾水中，再加50毫克氧化鉑(Ⅳ)并在氫氣(30磅/平方英寸)存在下氫化3.5小時。經硅藻土板過濾混合液，將濾液濃縮至干，生成標題化合物(41毫克，產率82%)。365＝-24℃(甲醇，0.29毫克/毫升)H1-NMR(DMSO/TMS)δ＝8.7(s，1H)，8.5(s，1H)，5.02(m，1H)，4.3(m，1H)，2.4-1.8(m，6H)。
本發明進一步提供了一種實現免疫抑制的方法，更確切地說，一種抑制獲得性免疫，在患者需要時，可給予有效免疫抑制量的式(1)化合物。
這里使用的術語“患者”指患病的溫血動物，如哺乳動物，如患自身免疫病或“移植物抗宿主”病，或被移植的同種異體組織或器官有被排斥的危險，應明確的是，人，大鼠和小鼠都包括在“患者”的范疇。
將式(1)化合物給予患者，在其體內引起免疫抑制作用，更確切地說，將式(1)化合物給患者后引起患者體內獲得性免疫的抑制。換句話說，通過用式(1)化合物治療患者，與未治療患者相比，患者的獲得性免疫反應被阻止或抑制了。
當患者患有自身免疫病，“移植物抗宿主”病或為了防止已移植的同種異體組織或器官被排斥時，需要用免疫抑制劑(如式(1)化合物)治療。術語“自身免疫病”是指其中免疫反應在患者體內是針對他們自身成份的，引起不希望的和沉淀是極度衰弱性疾病的病癥和狀態。
患自身免疫病的患者，如患有類風濕關節炎，胰島素依賴性糖尿病，某些溶血性貧血，風濕熱，甲狀腺炎，潰病性結腸炎，重癥肌無力，腎小球腎炎，變態反應性腦脊髓炎，某些病毒性肝炎后的持續性神經和肝臟破壞，多發性硬化和系統性紅斑狼瘡均需要用免疫抑制劑如式(1)化合物治療。類風濕關節炎，胰島素依賴性糖尿病和多發性硬化的特征在于是細胞介導自身免疫反應的結果而且可能是由于T細胞的作用。重癥肌無力和系統性紅斑狼瘡的特征在于是體液自身免疫反應的結果。因此，對患上述疾病的患者給予式(1)化合物治療，將特別有助于防止疾病的進一步加重或惡化。對自身免疫病早期患者的治療，如對類風濕關節炎，胰島素依賴性糖尿病，多發性硬化，重癥肌無力或系統性紅斑狼瘡的治療在防止疾病進一步惡化為更嚴重的狀態特別有效。例如，胰島素依賴性糖尿病是一種自身免疫病，認為是由針對分泌胰島素的胰島的β細胞的自身免疫反應所引起。在胰島β細胞完全破壞之前對患胰島素依賴性糖尿病早期患者的治療可預防和阻止分泌β-細胞的剩余胰島的進一步破壞，因而可特別有效地防止疾病的進展。應明確的是，患其它自身免疫病早期患者的治療也將特別有助于預防或阻止疾病狀態進一步自然發展成更嚴重的狀態。
已接受或即將接受同種異體組織或器官移植物，如接受同種異體腎，肝，心，皮膚，骨髓的患者，也是需要免疫抑制劑如式(1)化合物進行預防性治療的患者。免疫抑制劑將防止受者的獲得性免疫反應排斥供者的同種異體組織或器官。同樣患“移植物抗宿主”病的患者也需要用免疫抑制劑如式(1)化合物進行治療。免疫抑制劑將防止被移植的組織或器官的獲得性免疫反應排斥受者的同種異體組織或器官。
基于標準的臨床和實驗室試驗和技術，一名主治醫師，作為在醫學領域有技術專長的人，能很容易地確定患者是否要用象式(1)化合物那樣的免疫抑制劑治療。
式(1)化合物的有效免疫抑制劑量是在單獨或多次給藥時，能夠導致一種免疫抑制作用，特別是獲得性免疫反應抑制作用的藥物劑量。免疫抑制作用指一種減慢、阻斷、抑制、防止獲得性免疫反應的進一步表達。
式(1)化合物的有效劑量可由主治醫師利用已知的技術并觀察在類似情況下的結果，很容易地確定。在確定有效劑量時，要考慮許多因素，包括哺乳動物的種類，大小，年齡，健康狀況，患何種疾病，疾病的嚴重程度，患者個體的反應性，使用的特定化合物，給藥的方式，所用制劑的生物利用率特點，選擇的用藥方案，并用的藥物及其它情況，但不限于此。
式(1)化合物的有效免疫抑制劑量預計在每天每公斤體重0.1毫克至500毫克之間。最好能選在每天每公斤體重1毫克至50毫克之間。
在對患者進行治療時，式(1)化合物可以在保持其生物利用率達有效量水平以上為前提采用任何藥物劑型和給藥方式。如給藥可口服或非腸胃途徑。例如，式(1)化合物可口服給藥，可皮下，肌肉，靜脈，皮面，鼻腔吸入，直腸等途徑給藥。口服給藥一般是優選的。制藥學領域的技術人員可根據所選化合物的具體特性，所治療疾病的情況，疾病的分期和其它有關因素，選擇適當的藥物劑型和給藥途徑。
化合物可單獨給藥，或以與藥學上可接受的載體或賦形劑結合的藥物組合物的形式給藥。賦形劑的比例和性質由所選化合物的溶解性和化學特性，給藥途徑的選擇和標準藥物的應用情況來確定。本發明化合物本身是有效成份，為了穩定，便于結晶，增加溶解性等目的，可以藥物學上可接受的酸加成鹽的形式配制和給藥。
在另一實施方案中，本發明提供了含式(1)化合物的組合物，其以混合物或與一種或多種惰性載體，相結合的形式存在。這些組合物是有用的，例如，作為測定標準品，作為大批量生產的便利方法，或作為藥物組合物。式(1)化合物可測定的量可通過本領域技術人員所熟知和掌握的標準檢測方法和技術測定。式(1)化合物的可測定量一般約為組合物重量的0.001%到約75%。惰性載體可為任何不會降解或不會與式(1)化合物發生共價反應的物質。合適的惰性載體實例為水，水緩沖液如那些在高效液相色譜分析中通常使用的緩沖液，有機溶劑如乙腈，乙酸乙酯，己烷等等，和藥物學上可接受的載體或賦形劑。
更確切地說，本發明提供了含有效免疫抑制量的式(1)化合物的藥物組合物，其以混合物或與一種或多種藥物學上可接受的載體或賦形劑相結合的形式存在。
藥物組合物是按照藥學領域已知的方法配制的。載體或賦形劑可以是可作為活性成份的媒介物或介質的固體，半固體或液體物質。合適的載體或賦形劑是本領域眾所周知的。藥物組合物應適合于口服和腸胃外使用，包括局部應用，可以采用片劑，膠囊，栓劑，溶液，混懸液等形式給藥。
本發明化合物可口服給藥，例如與惰性稀釋劑或與可食用的載體一起，可將它們裝進明膠膠囊或壓成藥片。為了口服給藥，化合物中可摻入賦形劑。使用的劑型有片劑，錠劑，膠囊，酏劑，混懸劑，糖漿劑，糯米紙囊劑，口香糖劑等等。這些制劑應含至少4%的本發明化合物，即活性成份，但可根據特定的劑型改變含量，比較容易達到的是占單位重量的4%-70%之間，化合物在組合物中所含的量是以能獲得適當劑量為準的。根據本發明優先選擇的組合物和制劑被制備，以便每一口服劑量單位劑型含本發明化合物5.0至300毫克。
片劑，丸劑，膠囊劑，錠劑等也可含一或多種下面的佐劑∶粘合劑如微晶纖維素，黃蓍樹膠或明膠，賦形劑如淀粉或乳糖，崩解劑如藻酸，Primogel，玉米淀粉等，潤滑劑如硬脂酸鎂或Sterotex，滑移劑如膠態二氧化硅，甜味劑如蔗糖或糖精等可以加入，或增香劑如薄荷，水楊酸甲酯，或橙香劑。當藥物劑型為膠囊時，除含上述類型物質之外它還可含一種液體載體，如聚乙二醇或脂肪油。其它藥物劑型可含有其它各種物質，用以修飾藥物單位的物理形式，如作為包衣。因此，片劑或丸劑可用糖，蟲膠，或其它腸包衣劑包被。糖漿劑除可含本發明化合物外，可含蔗糖作為甜味劑和含某種防腐劑，染料和著色劑，香味劑。制備這些不同的組合物所使用的物質應是藥物學上純的，在使用的量上是非毒性的。
為了腸胃外治療用藥，包括局部給藥，可將本發明化合物制成一種溶液或混懸液。這些制劑應含至少0.1%的本發明化合物，但含量可在它們重量的1%至約50%之間變化。本發明化合物在這種藥物組合物中的量是以獲得適當劑型為準。根據本發明優選的藥物組合物和制劑被制備，以便腸胃外劑型單位劑量含5.0至100毫克本發明化合物。
溶液或懸浮液還包括一種或多種下面列出的佐劑無菌稀釋劑如注射用水，生理鹽水，固定油，聚乙二醇，甘油，丙二醇或其它合成溶劑，抗菌劑如芐醇或羥苯甲酸甲酯，抗氧化劑如抗壞血酸或亞硫酸氫鈉，螯合劑如乙二胺四乙酸，緩沖液如乙酸鹽，檸檬酸鹽或磷酸鹽，和調節肌肉的正常張力劑如氯化鈉或葡萄糖。腸胃外制劑可封入安瓿，一次性注射器或多倍劑量的玻璃或塑料小瓶。
結構上相關的化合物的任何基團均具有特定的一般性用途，在其最終應用中，優選的某些基團和構型如下Y3是氮的式(1)化合物。Y7是氮的式(1)化合物。Y8是CH基團的式(1)化合物。Y9是氮的式(1)化合物。此外，還有Q是氨基而Z是氫的式(1)化合物。
下面的式(1)化合物是特別優選的(1S，3R)-順式-1-(9-腺嘌呤基)-3-羥基環戊烷鹽酸鹽;
(1R，3S)-順式-1-(9-腺嘌呤基)-3-羥基環戊烷鹽酸鹽。
下面的研究說明式(1)化合物的用途。這些研究僅為易于理解而做說明，并未打算從任何方面限制本發明的范圍。這里使用的術語具有所示的意義“μM”代表微摩爾濃度，“Units”代表國際上接受的蛋白質測量單位，“S.D”代表標準差，“nmol”代表毫微摩爾，“ng”代表毫微克。
分離大鼠腹腔巨噬細胞在細胞培養基中培養，方法與Edwards所述基本相同[Science239，769(1988)]，巨噬細胞與有調理作用的酵母多糖(3毫克/毫升)(具有刺激微粒的作用)和重組大鼠γ干擾素(rrIFN-r)(1000Units/ml)(具有活化細胞的淋巴因子作用)一起，在各種濃度的(1S，3R)-順式-1-(9-腺嘌呤基)-3-羥基環戊烷(0至1000μM)存在下溫育。用超氧離子(O-2)測定法，測定巨噬細胞激活的程度，方法與Edwards等描述的一致[Science239，769(1988)]。研究結果表明(1S，3R)-順式-1-(9-腺嘌呤基)-3-羥基-4-環戊烯能有效地抑制大鼠巨噬細胞在體外的活化(IC50為2.5μM)。
對以大鼠炎癥氣囊模型法獲得的大鼠多形核白細胞用25ng/囊重組人白細胞介素-1(γHuIL-1)激發，基本上根據Esser等的方法[Internat.J.Tissue Reactions Ⅺ，291(1989)]。多形核白細胞與作為刺激液的佛波醇肉豆蔻酸乙酸酯(200ng/ml)和作為刺激性淋巴因子的γγIFN-γ(1000 Units/ml)或作為刺激性細胞因子的γHuIL-1(500Units/ml)一起，在各種濃度的(1S，3R)-順式-1-(9-腺嘌呤基)-3-羥基環戊烷(0至1000μM)的存在下溫育。通過超氧離子(O-2)測定法測定巨噬細胞的激活程度，方法如Edwards等所述[Science239，769(1988)]。以上研究結果表明(1S，3R)-順式-1-(9-腺嘌呤基)-3-羥基環戊烷可有效地抑制γγ-IFN-1對大鼠多形核白細胞在體外的激活(IC50為0.001μM)，并有效地抑制γHuIL-1對大鼠多形核白細胞在體外的激活(IC50為0.001μM)。
權利要求
1.制備下式化合物或其藥物學上可接受的鹽的方法
式中，在環戊烷環上的羥基取代基是與雙環取代基相關的順式構型，Y3，Y7，Y8和Y9各自獨立地為氮或CH基團，Q是氨基，鹵素或氫，Z是氫，鹵素或氨基，該方法包括對相應的環戊烯基衍生物進行催化氫化。
2.權利要求1所述的方法，其中催化氫化是在氧化鉑存在下進行的。
3.權利要求1所述的方法，其中所生產的化合物為(1S，3R)-順式-1-(9-腺嘌呤基)-3-羥基環戊烷。
4.權利要求1所述的方法，其中所生產的化合物為(1R，3S)-順式-1-(9-腺嘌呤基)-3-羥基環戊烷。
5.對于需要的患者使用有效的免疫抑制劑量的權利要求1化合物實現免疫抑制的方法。
6.對于需要的患者使用有效的免疫抑制劑量的權利要求1化合物實現獲得性免疫抑制的方法。
7.根據權利要求6的方法，其中患者需要對同種異體移植物排斥反應進行治療。
8.根據權利要求6的方法，其中患者需要對自身免疫病進行治療。
9.根據權利要求8的方法，其中自身免疫病為胰島素依賴性糖尿病。
10.根據權利要求8的方法，其中自身免疫病為多發性硬化。
11.根據權利要求8的方法，其中自身免疫病為類風濕關節炎。
12.根據權利要求8的方法，其中自身免疫病為重癥肌無力。
13.根據權利要求8的方法，其中自身免疫病為系統性紅斑狼瘡。
14.一種含有可檢測劑量的權利要求1化合物的藥物組合物，其可為混合物形式，或是與惰性載體相結合的其他形式。
15.一種含有有效免疫劑量的權利要求1化合物的藥物組合物，其可為混合物形式，或是與一種或多種藥物學上可接受的載體或賦形劑相結合的其它形式。
全文摘要
本發明涉及式(1)的新的碳環腺嘌呤核苷化合物，或其藥物學上可接受的鹽以及它們作為免疫抑制劑的使用。式中，在環戊烷環上的羥基取代基是與雙環取代基相關的順式構型，Y
文檔編號C07D473/34GK1059909SQ9110893
公開日1992年4月1日 申請日期1991年9月14日 優先權日1990年9月14日
發明者戴為·R·伯施盯, 卡爾·K·艾底華斯, 羅那德·E·艾瑟, 都格啦斯·L·科爾 申請人:馬理昂默里爾多公司