專利名稱：高純度二丁酰環磷腺苷鈣及其制備方法
技術領域：
本發明涉及藥物合成領域，具體為高純度的二丁酰環磷腺苷鈣及其制備方法。
背景技術：
二丁酰環磷腺苷鈣是一種核苷酸類衍生物，作為G蛋白偶聯型受體藥物，可同時激活蛋白激酶A和蛋白激酶C，蛋白激酶是一種別構酶，由兩個催化亞基和兩個調節亞基組成，催化亞基具有催化蛋白質(或酶)磷酸化作用。故二丁酰環磷腺苷鈣可催化人體內最基本的生物化學代謝——氧化磷酸化反應和三羧酸循環，使大多數蛋白質和酶類產生活性，激活人體各種反應，同時產生大量ATP，改善細胞和能量代謝，從而實現其促進神經再生、轉化異常細胞、擴張血管、舒張平滑肌、改善心肌缺血等作用。二丁酰環磷腺苷鈣是第二信使環磷腺苷(cAMP)的換代產品，由于cAMP不易透過細胞膜，而且進入細胞內的cAMP很快地被細胞內之磷酸二酯酶水解，故制成磷酸腺苷的衍生物，環磷酸腺苷雙丁酰酯對細胞的滲透性比cAMP強，且能對抗機體內磷酸二酶的破壞作用，故其作用時間和速度均比cAMP持久和迅速。是新一代細胞功能激活劑，營養與治療的
彡口口 二丁酰環磷腺苷鈣可以治療因G蛋白功能失調引起的各種疾病，蛋白功能失調可以表現為功能增強或下降，導致某些心血管疾病如:心絞痛、心肌梗塞、心肌炎、心源性休克、免疫遺傳性疾病紅斑狼瘡和銀屑病等。中國專利CN 100457770C公開了一種二丁酰環磷腺苷鈣的精制方法。通過在粗品中加入甲醇和丙酮，進行分離純化，最終得到純度> 98%的二丁酰環磷腺苷鈣干粉。較之市售的現有廣品，純度有了很大 提聞。

發明內容
本發明，經過特殊純化工藝，將目標物二丁酰環磷腺苷鈣的純度提升至99%以上，且單個雜質量均小于0.2%，與市售產品，上海第一生化藥業生產的二丁酰環磷腺苷鈣原料藥相比，純度提高顯著。二丁酰環磷腺苷鈣藥物，原料純化困難，現有產品純度較低，一般為80-95%，難以滿足醫療需要，且雜質較多，含量較高。本發明的目的，在于提供一種高純度的二丁酰環磷腺苷鈣。本發明另一目的，在于提供一種高純度的二丁酰環磷腺苷鈣的制備方法，其特征在于，采取特殊的純化工藝，噴霧干燥技術，和柱層析技術，得到高純度的目標產品。二丁酰環磷腺苷鈣的合成方法，一般以環磷腺苷為起始原料，經正丁酸酐酰化后，再成鈣鹽而制得。《最新生化藥物制備技術》(中國醫藥科技出版社2001年三月第一版246-248頁)提供了詳細的合成方法(見

圖1)。(I)成鹽。cAMP與三乙胺按比例投料，溶解后，減壓濃縮，加入無水吡啶，振搖脫水減壓抽干，干燥得cAMP-乙胺鹽。(2)酰化、水解。上述cAMP-乙胺鹽，加入無水吡啶和丁酐，避光反應6-7天，酰化反應完全后，加入蒸餾水，低溫水解2-3小時，減壓濃縮，先后加入二倍量乙醚，3倍量蒸餾水提取，取水層，減壓濃縮成漿狀物，再用乙醚提取兩次，抽取乙醚，用無水乙醇溶解成糖漿狀。(3)成鈣鹽。上述糖漿狀物加入無水氯化鈣，減壓濃縮至干，加入無水乙醇和乙醚，析出過濾，洗滌，減壓干燥，即得二丁酰環磷腺苷鈣。上述方法所得產品，收率84%。工藝操作繁瑣、勞動強度大，收率較低且產品質量較差，經過檢測最大單雜超過4%，水分含量約6%，且存在殘留的丁酸等其他雜質，嚴重影響用藥的安全性。日本專利JP51113896中，提出了新的合成方法。將環磷酰苷直接與正丁酸酐反應，產物水解后，洗滌除去丁酸，再過離子交換樹脂柱，即得二丁酰環磷腺苷鈉。由于采用直接酰化法，并結合使用離子交換樹脂等處理，縮短了工藝周期。具體見圖2。但結果收率很低，雜質問題也沒有很好的解決。同時只能得到二丁酰環磷腺苷鈉，而不是鈣鹽。針對現有二丁酰環磷腺苷鈣原料制備工藝中存在的問題，我們在大量實驗摸索的基礎上，提出了一種新的二丁酰環磷腺苷鈣制備方法(見圖3)。環磷腺苷先與三乙胺成鹽，再酰化；產物用醚洗去酸酐，并經水提取，得到二丁酰環磷腺苷三乙胺鹽的水溶液；直接噴霧干燥，得到類白色的二丁酰環磷腺苷三乙胺鹽固體粉末。再與等當量的氯化鈣在乙醇水溶液中成鹽，減壓蒸餾濃縮至干，得到二丁酰環磷腺苷鈣粗品。粗品過硅膠柱層析，以二氯甲烷-無水甲醇洗脫；使用平面薄層法監控，棄去最初的雜質餾分，收集含二丁酰環磷腺苷鈣的組分，減壓濃縮至干，即得二丁酰環磷腺苷鈣產品O本發明提供的二丁酰環磷腺苷鈣制備方法，其特征在于，采用噴霧干燥技術和柱層析純化分離技術。本發明采用了噴霧干燥技術，保證快速干燥，避免了在有水存在的情況下長時間造成的降解，從而將雜質引入最終產品。影響噴霧干燥結果的幾個重要參數是進口溫度，進料速度，霧化壓力等。本發明噴霧干燥過程避免引入雜質，不采用助干劑。溶劑選用水。將進口溫度，進料速度，霧化壓力三個參數作為考察因素，以干燥后粉末含水量以及產物純度含量驗證干燥效果和產物受破壞程度，進行正交試驗，因素水平及試驗結果見表1,表2。表I 噴霧干 燥工藝因素水平表
權利要求
1.高純度環磷腺苷鈣，其特征在于制備方法中，采用了噴霧干燥技術和柱層析技術。
2.權利要求1所述的噴霧干燥技術，其特征在于，進口溫度為105°C-120°C，不采用助干劑，溶劑選用水。
3.權利要求1所述的柱層析技術，選用的填料為硅膠，200-300目。
4.權利要求1所述的柱層析技術，洗脫液包含但不限于水、甲醇、無水甲醇、乙醇、無水乙醇、異丙醇、正丙醇、乙腈、二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮、乙酸乙酯、乙酸甲酯、甲酸乙酯、甲酸甲酯、1，4-二氧六環、四氫呋喃、甲基叔丁基醚、石油醚，其中一種或多種混合物。
5.權利要求4所述的柱層析技術，洗脫液為甲醇-二氯甲烷、無水乙醇-二氯甲烷混合物，混合比例為10: 1-60:1。
全文摘要
本發明涉及一種高純度二丁酰環磷腺苷鈣及其制備方法。二丁酰環磷腺苷鈣藥物原料純化困難，現有產品純度較低80-95%，難以滿足醫療需要。因此，本發明將傳統制備工藝進行改進，采用了噴霧干燥和柱層析分離純化技術，得到了高純度的二丁酰環磷腺苷鈣藥物，純度99%以上，最大雜質含量降低到0.2%以下。
文檔編號C07H1/00GK103242403SQ201210206760
公開日2013年8月14日 申請日期2012年6月21日 優先權日2012年6月21日
發明者關屹, 閆冬, 李銀博 申請人:遼寧億靈科創生物醫藥科技有限公司, 關屹