傷口更多血供。
[0072] 募集免疫系統、形成新血管(血管發生)和激活成纖維細胞的整個過程被總體地認 為是肉芽形成過程一一即：肉芽組織藉此產生的過程。在某些情況下，為了最終獲得存在于 正常、健康、光滑皮膚中的所需籃網狀形式，該肉芽必須被消解。這使得必須減慢成纖維細 胞，因為不再需要額外的膠原，以及必須減慢免疫系統，因為炎癥需要消退以使皮膚中的紅 痕可消褪。此外，血管發生需要被逆轉，即：在開始時愈合傷口所需的血管和毛細血管目前 需要消失以防止生成難看的永久性紅色瘢痕。令人驚奇的是，松弛素不僅增加并且加速消 退形成的肉芽，而且其還促進新血管盡早消失，留下平滑的皮膚且沒有紅痕。特別是，松弛 素治療顯著地降低瘢痕形成并增加皮膚的健康的籃網狀形式的外觀。
[0073] 此外，松弛素可促進瘀傷和潰瘍中的傷口愈合。這樣的傷口優選全身治療，因為局 部用松弛素治療不像進入開放性傷口或濕傷口那樣容易地進入封閉性傷口。然而，開放性 傷口和濕傷口優選局部治療，通過沖洗和/或直接注射治療(如實施例1的豬皮膚研究中所 說明的）。
[0074] 松弛素治療預防和減少瘢痕形成
[0075]瘢痕包括纖維組織并在損傷或傷口后替代正常皮膚。瘢痕形成是傷口愈合過程的 自然部分，而瘢痕幾乎在所有皮膚損傷后均產生。每年在發達國家，1億患者留下瘢痕，其中 一些造成了相當的健康以及心理問題，作為結果，在創傷后進行5500萬例選擇性手術和 2500萬例手術。有估計1100萬例瘢痕疙瘩和400萬例燒瘢痕，其中70%發生在兒童中。有異 常皮膚瘢痕的人可能面對身體、審美、心理學和社會后果，這可能與重要的感情及財務成本 有關。盡管瘢痕經常被認為是輕微的，但它們可能毀損面容并在審美上造成不快和引起嚴 重的癢、觸痛、疼痛、睡眠障礙、焦慮、抑郁和擾亂日常活動。其他心理學后果包括創傷后應 激反應的發展、自尊的喪失和程式化，導致降低生活質量。由于皮膚瘢痕使身體變形的結果 可能使人殘疾。盡管媒體指示是相反的，但因為瘢痕組織的復雜和不可預知的性質，瘢痕仍 然不能被輕易去除(Bayat等人,Clinical Review-BMJ，326:88，2003)。松弛素提供了不僅 通過加速傷口愈合過程，而且在瘢痕形成開始前減少瘢痕形成來治療這樣的瘢痕的方法。
[0076] 瘢痕通常由于面部整形外科手術形成，所述面部整形外科手術包括但不限于:皺 紋切除術、眼瞼成形術、鼻成形術、耳成形術、頦成形術、除褶整容、前額提升、眉毛提升、面 部瘢痕修正、面部瘢痕去除、激光手術、皮膚表面再建、皺紋處理、血漿皮膚再生、面部脂肪 移植術、皮膚收緊、紋身去除和毛發置換術。此外，面部整形外科手術會經常導致腫脹、瘀傷 和瘢痕形成。因而，松弛素特別適用于整形外科和整復外科。腫脹是面部對損傷的自然反 應，且當面部開始自身愈合前會消退，其可能就在手術后出現數天或者可能持續數周或更 長時間。瘀傷也是由于面部受變化作用時，在面部外科手術后的自然反應，且通常在手術后 恢復的最初幾天最顯著。而大部分瘀傷會在幾周內消失，完全愈合可能需要數月或更長，這 取決于個體。瘢痕形成仍是面部整形外科的另一種令人不快的副作用，因為瘢痕通常在變 得較不顯著前會持續數月保持粉紅。因此，本發明通過加速傷口愈合和減少瘢痕形成，有利 于經歷面部整形外科手術的患者，特別對有瘢痕形成和瘀傷的患者有幫助。
[0077] 瘢痕還通常由于全身整形外科手術形成，所述全身整形外科手術包括但不限于： 腹壁成形術、乳房縮小、乳房增大、身體提升操作、蜘蛛靜脈治療、妊娠紋治療、脂肪抽吸術、 去除過多皮膚術、蜂窩組織減少治療、體形塑造、身體表面再建和身體植入物。全身整形外 科也經常導致腫脹、瘀傷和瘢痕形成。腫脹是對損傷的機體反應，且當機體開始自身愈合前 通常消退，其可能就在手術后出現數天或者直至數周或更長。當機體受變化作用時，瘀傷通 常作為全身手術操作的結果發生。瘀傷通常在手術后恢復的最初幾天最顯著但可能持續更 長。而大部分瘀傷會在幾周內消失，完全愈合可能需要數月或數年。瘢痕形成也是全身整形 外科手術的一種令人不快的副作用，因為瘢痕通常在變得較不顯著前會持續數月保持粉 紅。因此，本發明通過加速傷口愈合和減少瘢痕形成，也有利于經歷全身整形外科手術的患 者，特別對有瘢痕形成和瘀傷的患者有幫助。
[0078] 瘢痕形成和發紅也是去除紋身的常見副作用。其他副作用包括起泡、感染和膚色 喪失。因此，本發明提供了最小化去除紋身的某些副作用的方法，特別地，提供了通過減少 皮膚發紅（即：如上文所討論的松弛素的抗血管發生作用）以及通過減少一些可能源自紋身 去除操作的瘢痕來最小化副作用的方法。
[0079] 松弛素組合物和制劑
[0080]松弛素和松弛素類似物被配制為用于本發明的方法中的藥物。任何能夠刺激與生 物學或藥學活性的松弛素(如:合成松弛素、重組松弛素)或松弛素激動劑(如:松弛素類似 物或松弛素樣調節劑)對松弛素受體的結合有關的生物反應的組合物或化合物都可用作本 發明的藥物。關于制劑和給藥的一般細節詳述在科學文獻中（參見R e m i n g t ο η ' s Pharmaceutical Sciences ,Maack Publishing Co ,Easton Pa·)。可根據本領域已知的任 何用于生產藥物制劑的方法制備含藥學活性的松弛素的藥物制劑。可以配制本發明的方法 中使用的含藥學活性的松弛素或松弛素激動劑的制劑用于任何傳統可接受的方式給藥，其 包括但不限于：局部、靜脈內、全身、皮下、肌內、舌下，以及通過吸入或注射、沖洗或滲透栗 給藥。說明性實例詳述于下文中。
[0081]在一個優選實施方案中，在局部應用至已保護的傷口時，松弛素可作為沖洗液向 開放性傷口施用，和/或在傷口修復的任何階段全身施用。認為制劑可被注射至傷口部位或 瘢痕附近，或者霜劑將被擦進傷口部位或瘢痕中以延長停留時間和滲透。通過沖洗進行治 療包括例如向傷口部位緩慢滴注0.5ml在乙酸鈉中的I.Omg/ml松弛素溶液。在其他實施方 案中，松弛素向傷口滴注松弛素溶液的范圍可以是向傷口部位滴注約〇. 5ml至約5. Oml或者 更多的約1.0至約5.Omg/ml的松弛素溶液。沖洗傷口，例如在損傷后每日一次，持續七天。在 另一實施方案中，沖洗傷口，例如在損傷后每日兩次或更多次，持續約七天。在另一實施方 案中，在損傷后每周或每月一次，持續更長或更短時間沖洗傷口。可根據損傷的嚴重性和患 者的情況調節用于松弛素給藥的劑量。
[0082] 在另一實施方案中，松弛素可被局部施用，例如遞送0.5ml的0.5或2.5mg/ml松弛 素的制劑，所述制劑由76.5 % 20mM乙酸鈉緩沖液、0.17 %對羥基苯甲酸甲酯、0.03 %對羥基 苯甲酸丙酯、5 %丙二醇、5 %乙醇、1 %HED 250HX和在乙酸鈉緩沖液中的12.285 %松弛素組 成。處理傷口例如每天兩次持續2周，接著每天處理一次持續3周。當藥物被局部遞送時，該 制劑含有丙二醇和乙醇。此外，發明人還觀察到當所述制劑包含滲透促進劑(其可被粘在濕 傷口上）時，松弛素的效能增強。滲透促進劑包括但不限于:物理的（如:微針陣列）、化學的 (如：乙醇、甘油單乙基醚、甘油單酯、肉豆蔻酸異丙酯等)或者物理和化學促進劑的組合。例 如，發明人還注意到加入粘膜粘附性滲透促進劑例如殼聚糖，增加了松弛素經過齒齦組織 的滲透（參見Squier等人；Mucoadhesive vehicl es for the delivery of relaxin across oral mucosa,The International Association for Dental Research，2006年6 月28日-7月I日，布里斯班，澳大利亞）。
[0083] 在另一優選實施方案中，在全身途徑后，通過滲透輸液栗以5.3ug/kg/小時直接遞 送松弛素至傷口以獲得約20ng/ml的全身濃度。
[0084] 在另一優選實施方案中，松弛素可通過靜脈注射遞送至傷口部位，其中所述制劑 含有的藥學活性的松弛素或松弛素激動劑可以是無菌注射劑的形式，例如無菌可注射的水 性或油性混懸劑。該混懸劑可根據已知領域使用那些已在上文提及的適合的分散劑或潤濕 劑以及助懸劑來配制。所述無菌注射劑也可為在無毒的胃腸外可接受的稀釋劑或溶劑中的 無菌可注射的溶液劑或混懸劑。在可接受的載體和溶劑中，可使用的是水和林格液(等滲氯 化鈉）。此外，無菌固定油可按常規用作溶劑或助懸介質。為此目的，可應用任何溫和的固定 油包括合成的甘油單酯或甘油二酯。此外，脂肪酸例如油酸也可用于注射劑的制備。
[0085] 本發明的含水混懸劑含有松弛素，與適于制備含水混懸劑的賦形劑混合。這樣的 賦形劑包括助懸劑，例如:羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、藻酸鈉、聚乙 烯吡咯烷酮、西黃蓍膠和阿拉伯膠，以及分散劑或潤濕劑例如天然存在的磷脂(如卵磷脂）、 烯烴氧化物與脂肪酸的縮合產物(如聚氧乙烯硬脂酸酯）、環氧乙烷與長鏈脂肪醇的縮合產 物(如十七乙烯氧基鯨蠟醇）、環氧乙烷與得自脂肪酸和己糖醇的偏酯的縮合產物(如聚氧 乙烯山梨糖醇單油酸酯)或環氧乙烷與得自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的縮合產物(如聚氧 乙烯去水山梨糖醇單油酸酯）。所述含水混懸劑也可含有一種或多種防腐劑例如對羥基苯 甲酸乙酯或對羥基苯甲酸丙酯，一種或多種著色劑、一種或多種矯味劑和一種或多種甜味 劑例如蔗糖、阿斯巴甜或糖精。制劑可被調節重量摩爾滲透壓濃度。
[0086] 可通過在植物油例如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油中或者在礦物油例如液體 石蠟中懸浮松弛素來配制油混懸劑。所述油混懸劑可含有增稠劑，例如蜂蠟、固體石蠟或鯨 蠟醇。可加入甜味劑以提供可口的口服制劑。這些制劑可通過加入抗氧化劑如抗壞血酸進 行保存。
[0087] 適于通過加入水制備含水混懸劑的本發明的可分散的粉末和顆粒可由松弛素與 分散、助懸和/或潤濕劑以及一種或多種防腐劑進行制備。合適的分散或潤濕劑以及助懸劑 由那些上文中公開的進行例示。也可存在另外的賦形劑例如甜味劑、矯味劑和著色劑。
[0088] 本發明的藥物制劑也可為水包油的乳劑形式。油相可為植物油例如橄欖油或花生 油，礦物油例如液體石蠟，或者這些的混合物。合適的乳化劑包括天然存在的樹膠例如阿拉 伯膠和西黃蓍膠、天然存在的磷脂例如大豆卵磷脂、得自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯例 如去水山梨糖醇單油酸酯，以及這些偏酯與環氧乙烷的縮合產物例如聚氧乙烯去水山梨糖 醇單油酸酯。該乳劑也可包含甜味劑和矯味劑。糖漿劑和酏劑可與甜味劑例如甘油、山梨醇 或蔗糖進行配制。這樣的制劑也可包含緩和劑、防腐劑、矯味劑或著色劑。
[0089] 松弛素制劑的給藥和劑量方案
[0090] 本發明的方法中使用的含藥學活性的松弛素的制劑可按任何傳統可接受的方式 給藥，其包括但不限于:靜脈內、皮下、肌內、舌下、局部、口服以及通過吸入給藥。給藥會隨 著藥物的藥代動力學和其他性質以及患者的健康狀況而改變。一般的指導原則在下文提 出。
[0091] 本發明的方法促進傷口和損傷的愈合并減少瘢痕形成。足以實現這些效應的單獨 的或與另一藥學活性劑（例如NSAID或抗生素）聯用的松弛素的量被認為是治療有效劑量 (如:促進愈合的藥學可接受的量）。
[0092] 本領域的狀態允許臨床醫生為每個單獨的動物或人類個體確定松弛素的劑量方 案。作為說明性實例，當實踐本發明的方法時施用的含有藥學活性的松弛素的制劑的劑量 方案，可根據下文提供的對于松弛素的指導確定所述劑量方案，即：劑量時間表和劑量水 平。具體而言，所述的個體每天按約10至lOOOyg/kg個體體重的量接受藥學活性的H2人類松 弛素(如:合成的、重組的）。在一個實施方案中，松弛素的劑量為10、30、100和250yg/kg/天。 在另一實施方案中，這些劑量導致松弛素的血清濃度分別為約3、10、30和751^/111匕在另一 實施方案中，持續施用松弛素以保持松弛素的血清濃度從約0.5至約500ng/mL，更優選從約 0.5至約300ng/mL，且最優選從約3至約75ng/mL。可能的范圍為約1至約50ng/mL，其中優選 的血清濃度為20ng/mL。
[0093]作為一般指導原則，期望藥學活性的H2人類松弛素（如:合成的、重組的）的日劑量 通常為每天約10至l〇〇〇yg/kg個體體重的量，且最優選每天約96〇yg/kg個體體重的量。根據 個體，松弛素給藥采取持續特定時間段或者按照需要持續給藥，以便在個體中獲得穩定性。
【具體實施方式】
[0094]
[0095] 下述具體實施例用來說明本發明而不應被解釋為限制權利要求的范圍。
[0096] 實施例1
[0097]豬的皮膚傷口研究
[0098]動物研究概述:在選擇合適的動物用于該研究時，選擇豬是因為豬皮膚和人類皮 膚之間的解剖學相似性。事實上，豬傷口愈合已被用于模擬人類皮膚的許多研究中 (Sullivan等人,Wound Repai