一種用于治療骨肉瘤的皮下注射用原位凝膠的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于醫藥領域，具體涉及一種用于治療骨肉瘤的皮下注射用原位凝膠。
【背景技術】
[0002] 骨肉瘤是兒童和青少年常見的原發骨惡性腫瘤，其發病率約為3/100萬，其中約 80%~90%的骨肉瘤發生于四肢長管狀骨干骺端，尤其是股骨遠端、脛骨近端和肱骨近端。20 世紀70年代以前，對骨肉瘤一般采取截肢手術的方法進行治療，其5年生存率仍不足20%，且 截肢給患者生活帶來極大的不便。
[0003] 化療藥物的出現，為骨肉瘤的治療提供了新的方法。阿霉素、順鉑、甲氨蝶呤、長春 新堿、環磷酰胺等均對骨肉瘤表現出良好的治療作用，可顯著延長骨肉瘤患者生存期(牛曉 輝，徐海榮.骨肉瘤的化療進展.中國癌癥雜志.2012年第22卷第9期，第663-668頁）。其中 阿霉素和順鉑對骨肉瘤的治療效果更佳，已被廣泛用于骨肉瘤的治療，術前及術后也可聯 合手術使用（汪新媛，田京.骨肉瘤化療研究進展.國際骨科學雜志.2010年第31卷第3 期.159-161頁.）。
[0004] 然而，化療藥物通常臨床用藥劑量較大，且具有顯著的毒性作用，如阿霉素存在心 臟毒性、骨髓抑制、消化道和腎臟毒性等，其中以心臟毒性尤為危險。阿霉素引起心臟毒性 的機制目前尚不明確。
[0005] 國內已報道水飛薊賓、蛇床子素等中藥中發現的活性成分對阿霉素心肌毒性具有 保護作用。但，迄今為止，尚缺乏理想的藥物能夠降低阿霉素毒性，同時維持或增強其療效。
[0006] 改變給藥途徑和提高藥物對瘤組織的靶向性是避免化療藥物在體內向非瘤組織 分布，提高其療效，降低其安全性的方法之一。

【發明內容】

[0007] 針對上述現有技術，本發明的目的提供一種用于治療骨肉瘤的皮下注射用原位凝 膠。
[0008] 為實現上述的目的，本發明采用的技術方案為： 一種用于治療骨肉瘤的皮下注射用原位凝膠，由醫藥學上可接受的輔料和以下重量比 的原料制成:鹽酸阿霉素25~50重量份、HIV-I-TAT蛋白47-57多肽片段卜4重量份。
[0009] 作為本發明的皮下注射用原位凝膠的一個優選方案，所述原料的重量比為:鹽酸 阿霉素28重量份、HIV-I-TAT蛋白47-57多肽片段2重量份。
[0010] 作為本發明的皮下注射用原位凝膠的另一優選方案，所述原料的重量比為:鹽酸 阿霉素48重量份、HIV-I-TAT蛋白47-57多肽片段3重量份。
[0011] 作為本發明的皮下注射用原位凝膠的又一優選方案，所述原料的重量比為:鹽酸 阿霉素34重量份、HIV-I-TAT蛋白47-57多肽片段2重量份。
[0012] 作為本發明的皮下注射用原位凝膠的再一優選方案，所述原料的重量比為:鹽酸 阿霉素40重量份、HIV-I-TAT蛋白47-57多肽片段3重量份。
[0013] 作為本發明技術方案的進一步優化，上述皮下注射用原位凝膠中所述醫藥學上可 接受的輔料包括泊洛沙姆P407、泊洛沙姆P188、羥丙基甲基纖維素 K4M和去離子水;所述皮 下注射用原位凝膠的制備方法包括如下步驟： 1) 取處方量鹽酸阿霉素、HIV-I-TAT蛋白47-57多肽片段加入去離子水，制成配液A，配 液A中阿霉素濃度為10mg/ml; 2) 向配液A中依次加入泊洛沙姆P407、泊洛沙姆P188、羥丙基甲基纖維素 K4M，充分攪 拌，分散均勻，得配液B，配液B中泊洛沙姆P407的重量百分比為18~40%，泊洛沙姆P188的重 量百分比為1. 〇~3.0%，羥丙基甲基纖維素 K4M的重量百分比為0.2~1.0%; 3) 將配液B液4°C下溶脹24 h，過0.22 μπι微孔濾膜，分裝即得。
[0014] 作為上述制備方法的進一步優化，上述步驟2)中，配液B中泊洛沙姆Ρ407的重量百 分比為20%，泊洛沙姆Ρ188的重量百分比為1.2%，羥丙基甲基纖維素 Κ4Μ的重量百分比為 0.3% 〇
[0015] 本發明的技術方案中所述的HIV-I-TAT蛋白47-57多肽片段，氨基酸序列為 YGRKKRRQRRR，CAS號為191936-91-1，屬于已上市產品，這是本領域技術人員所公知的。
[0016] 在治療過程中，可將本發明的皮下注射用原位凝膠通過瘤周皮膚進行皮下注射給 藥或在腫瘤患處進行瘤內注射。局部給藥尤其是皮下注射給藥在患處附近或患病部位給藥 更有利于藥物到達患處，這對本領域技術人員而言是公知的常識。
[0017] 本發明的發明人在研究中發現，Hiv-I-TAT蛋白47-57多肽片段對鹽酸阿霉素具有 顯著的增效減毒作用，其中采用原位凝膠形式進行皮下注射給藥的增效減毒效果更優。本 發明的用于治療骨肉瘤的皮下注射用原位凝膠對阿霉素具有緩釋效果，能夠提高藥物在骨 肉瘤組織的分布，提高阿霉素的療效，同時降低阿霉素的毒性。
【具體實施方式】
[0018] 下面結合實施例對本發明作進一步的解釋。應當理解的是，以下實施例僅用于解 釋本發明，而不是限制本發明的保護范圍。
[0019] 實施例1用于治療骨肉瘤的皮下注射用原位凝膠的制備 1) 取鹽酸阿霉素280g、HIV-1-TAT蛋白47-57多肽片段20g，加入去離子水，制成配液A， 配液A中阿霉素濃度為10mg/ml; 2) 向配液A中依次加入泊洛沙姆P407、泊洛沙姆P188、羥丙基甲基纖維素 K4M，充分攪 拌，分散均勻，得配液B，配液B中泊洛沙姆P407的重量百分比為20%，泊洛沙姆P188的重量百 分比為1.2%，羥丙基甲基纖維素 K4M的重量百分比為0.3%; 3) 將配液B液4°C下溶脹24 h，過0.22 μπι微孔濾膜，分裝即得。
[0020] 實施例2用于治療骨肉瘤的皮下注射用原位凝膠的制備 1) 取鹽酸阿霉素480g、HIV-1-TAT蛋白47-57多肽片段30g，加入去離子水，制成配液Α， 配液A中阿霉素濃度為10mg/ml; 2) 向配液A中依次加入泊洛沙姆P407、泊洛沙姆P188、羥丙基甲基纖維素 K4M，充分攪 拌，分散均勻，得配液B，配液B中泊洛沙姆P407的重量百分比為20%，泊洛沙姆P188的重量百 分比為1.2%，羥丙基甲基纖維素 K4M的重量百分比為0.3%; 3) 將配液B液4°C下溶脹24 h，過0.22 μπι微孔濾膜，分裝即得。
[0021]實施例3用于治療骨肉瘤的皮下注射用原位凝膠的制備 1) 取鹽酸阿霉素340g、HIV-1-TAT蛋白47-57多肽片段20g，加入去離子水，制成配液A， 配液A中阿霉素濃度為10mg/ml; 2) 向配液A中依次加入泊洛沙姆P407、泊洛沙姆P188、羥丙基甲基纖維素 K4M，充分攪 拌，分散均勻，得配液B，配液B中泊洛沙姆P407的重量百分比為20%，泊洛沙姆P188的重量百 分比為1.2%，羥丙基甲基纖維素 K4M的重量百分比為0.3%; 3) 將配液B液4°C下溶脹24 h，過0.22 μπι微孔濾膜，分裝即得。
[0022]實施例4用于治療骨肉瘤的皮下注射用原位凝膠的制備 1) 取鹽酸阿霉素400g、HIV-1-TAT蛋白47-57多肽片段30g，加入去離子水，制成配液Α， 配液A中阿霉素濃度為10mg/ml; 2) 向配液A中依次加入泊洛沙姆P407、泊洛沙姆P188、羥丙基甲基纖維素 K4M，充分 攪拌，分散均勻，得配液B，配液B中泊洛沙姆P407的重量百分比為20%，泊洛沙姆P188的 重量百分比為1.2%，羥丙基甲基纖維素 K4M的重量百分比為0.3%; 3) 將配液B液4°C下溶脹24 h，過0.22 μπι微孔濾膜，分裝即得。
[0023]實施例5用于治療骨肉瘤的皮下注射用原位凝膠的制備 1) 取鹽酸阿霉素290g、HIV-1-TAT蛋白47-57多肽片段30g，加入去離子水，制成配液Α， 配液A中阿霉素濃度為10mg/ml; 2) 向配液A中依次加入泊洛沙姆P407、泊洛沙姆P188、羥丙基甲基纖維素 K4M，充分 攪拌，分散均勻，得配液B，配液B中泊洛沙姆P407的重量百分比為20%，泊洛沙姆P188的 重量百分比為1.2%，羥丙基甲基纖維素 K4M的重量百分比為0.3%; 3) 將配液B液4°C下溶脹24 h，過0.22 μπι微孔濾膜，分裝即得。
[0024]實施例6用于治療骨肉瘤的皮下注射用原位凝膠的制備 1) 取鹽酸阿霉素290g、HIV-1-TAT蛋白47-57多肽片段20g，加入去離子水，制成配液Α， 配液A中阿霉素濃度為10mg/ml; 2) 向配液A中依次加入泊洛沙姆P407、泊洛沙姆P188、羥丙基甲基纖維素 K4M，充分 攪拌，分散均勻，得配液B，配液B中泊洛沙姆P407的重量百分比為20%，泊洛沙姆P188的 重量百分比為1.2%，羥丙基甲基纖維素 K4M的重量百分比為0.3%; 3) 將配液B液4°C下溶脹24 h，過0.22 μπι微孔濾膜，分裝即得。
[0025] 實施例7用于治療骨肉瘤的皮下注射用原位凝膠的制備 1) 取鹽酸阿霉素290g、HIV-1-TAT蛋白47-57多肽片段20g，加入去離子水，制成配液Α， 配液A中阿霉素濃度為10mg/ml; 2) 向配液A中依次加入泊洛沙姆P407、泊洛沙姆P188、羥丙基甲基纖維素 K4M，充分 攪拌，分散均勻，得配液B，配液B中泊洛沙姆P407的重量百分比為20%，泊洛沙姆P188的 重量百分比為1.2%，羥丙基甲基纖維素 K4M的重量百分比為0.3%; 3) 將配液B液4°C下溶脹24 h，過0.22 μπι微孔濾膜，分裝即得。
[0026] 實施例8用于治療骨肉瘤的皮下注射用原位凝膠的制備 1) 取鹽酸阿霉素300g、HIV-1-TAT蛋白47-57多肽片段20g，加入去離子水