本(ben)發明屬于生(sheng)物醫(yi)藥(yao)材料制(zhi)備領域，涉及(ji)一(yi)種基于殼寡(gua)糖的聚(ju)電解(jie)質(zhi)止血粉的制(zhi)備方法。
背景技術：
現(xian)代醫療理論證明傷口愈合是(shi)細胞(bao)(bao)與細胞(bao)(bao)、細胞(bao)(bao)與細胞(bao)(bao)基(ji)質以及與可(ke)溶性介質間(jian)相互(hu)作(zuo)用(yong)的(de)(de)(de)連續動(dong)態過程。創面的(de)(de)(de)修復(fu)與局部組織的(de)(de)(de)營養、微(wei)環(huan)境、生長因子含量、微(wei)循(xun)環(huan)、低氧條件(jian)、感染等多種因素的(de)(de)(de)相互(hu)作(zuo)用(yong)有關，醫用(yong)敷料可(ke)以起到關鍵性的(de)(de)(de)作(zuo)用(yong)。作(zuo)為高(gao)科(ke)技醫用(yong)敷料的(de)(de)(de)一個主要理論基(ji)礎，1962年英國科(ke)學家發(fa)現(xian)的(de)(de)(de)“濕法療法”認為當傷口的(de)(de)(de)表(biao)面維持在一個濕潤的(de)(de)(de)微(wei)環(huan)境中時，上(shang)皮細胞(bao)(bao)的(de)(de)(de)遷移明顯(xian)地加快，傷口的(de)(de)(de)愈合速度比干(gan)燥環(huan)境下快。
血(xue)(xue)液(ye)為(wei)人(ren)體(ti)重(zhong)要(yao)的(de)物質，出血(xue)(xue)如(ru)不被及時(shi)有效制止(zhi)，會(hui)造(zao)成(cheng)機體(ti)衰弱，大量出血(xue)(xue)將導(dao)致失血(xue)(xue)性休(xiu)克(ke)甚至死亡，因此(ci)無論戰時(shi)火線或院前急救都需要(yao)一種能快(kuai)速、有效止(zhi)血(xue)(xue)，減(jian)輕止(zhi)血(xue)(xue)過(guo)程對患(huan)肢血(xue)(xue)循環造(zao)成(cheng)的(de)不利影響的(de)止(zhi)血(xue)(xue)方法。研(yan)發具(ju)有快(kuai)速止(zhi)血(xue)(xue)能力的(de)創傷(shang)敷料是(shi)世(shi)界各國特別是(shi)軍(jun)方十分(fen)關注(zhu)的(de)研(yan)究(jiu)領域。
止(zhi)(zhi)血(xue)(xue)(xue)材(cai)(cai)(cai)料(liao)從作(zuo)用機制上有(you)(you)多(duo)種類型。如含有(you)(you)纖維蛋白原、凝血(xue)(xue)(xue)酶等止(zhi)(zhi)血(xue)(xue)(xue)材(cai)(cai)(cai)料(liao)直(zhi)接(jie)或間(jian)接(jie)提供外來的(de)凝血(xue)(xue)(xue)成(cheng)分加速凝血(xue)(xue)(xue)過程；馬鈴薯淀(dian)粉(fen)(fen)、沸(fei)石等通過材(cai)(cai)(cai)料(liao)的(de)物理或化(hua)學作(zuo)用使凝血(xue)(xue)(xue)成(cheng)分濃縮、聚集(ji)而加速凝血(xue)(xue)(xue)；氰基丙烯酸酯等材(cai)(cai)(cai)料(liao)對組(zu)織有(you)(you)很強的(de)粘著力，可以直(zhi)接(jie)封閉創面達到止(zhi)(zhi)血(xue)(xue)(xue)目(mu)的(de)。現在市場上主要(yao)的(de)止(zhi)(zhi)血(xue)(xue)(xue)材(cai)(cai)(cai)料(liao)有(you)(you)以殼聚糖為(wei)主要(yao)材(cai)(cai)(cai)料(liao)德國(guo)的(de)BioCer和(he)英國(guo)的(de)Celox止(zhi)(zhi)血(xue)(xue)(xue)王，以淀(dian)粉(fen)(fen)型可吸(xi)收(shou)多(duo)聚糖為(wei)主要(yao)材(cai)(cai)(cai)料(liao)美國(guo)的(de)PerClot和(he)Arista止(zhi)(zhi)血(xue)(xue)(xue)粉(fen)(fen)，以沸(fei)石為(wei)主要(yao)成(cheng)分美國(guo)的(de)QuikClot止(zhi)(zhi)血(xue)(xue)(xue)粉(fen)(fen)，以蒙脫石為(wei)主要(yao)材(cai)(cai)(cai)料(liao)的(de)WoundStat止(zhi)(zhi)血(xue)(xue)(xue)材(cai)(cai)(cai)料(liao)，及結(jie)合了介孔硅、殼聚糖和(he)聚乙烯的(de)新型止(zhi)(zhi)血(xue)(xue)(xue)材(cai)(cai)(cai)料(liao)TraumaStat等。
理(li)(li)想(xiang)的局部止(zhi)血(xue)(xue)(xue)材(cai)料應有(you)止(zhi)血(xue)(xue)(xue)迅速(su)、毒性及(ji)組織反應輕(qing)、生物(wu)相(xiang)容性好(hao)、降解迅速(su)、使用方(fang)面(mian)(mian)、價(jia)格便宜(yi)、加速(su)組織愈合及(ji)能適應不(bu)(bu)同部位(wei)和(he)不(bu)(bu)同類型出血(xue)(xue)(xue)止(zhi)血(xue)(xue)(xue)等要(yao)求。但(dan)現有(you)常規的止(zhi)血(xue)(xue)(xue)方(fang)法和(he)止(zhi)血(xue)(xue)(xue)藥物(wu)還遠不(bu)(bu)能滿足這些要(yao)求。無機類 止(zhi)血(xue)(xue)(xue)材(cai)料在(zai)生物(wu)安全性方(fang)面(mian)(mian)往(wang)往(wang)存在(zai)一定缺陷(xian)。多(duo)孔沸石和(he)馬鈴薯(shu)淀粉在(zai)吸收血(xue)(xue)(xue)液(ye)中的水(shui)分后(hou)會大(da)量放熱，造(zao)成創面(mian)(mian)組織傷害(hai)。纖維(wei)蛋(dan)白(bai)類止(zhi)血(xue)(xue)(xue)材(cai)料環境適應性差(cha)(cha)，保質期短，價(jia)格昂貴(gui)。具(ju)有(you)三維(wei)網狀結構的多(duo)糖(tang)止(zhi)血(xue)(xue)(xue)材(cai)料吸水(shui)速(su)度(du)慢、吸水(shui)倍率低，吸水(shui)后(hou)形成的凝(ning)膠粘性差(cha)(cha)，不(bu)(bu)能對破損的組織、血(xue)(xue)(xue)管(guan)產(chan)生有(you)效(xiao)的粘性封堵，止(zhi)血(xue)(xue)(xue)效(xiao)果還不(bu)(bu)理(li)(li)想(xiang)。
甲(jia)殼素廣泛存(cun)在(zai)于(yu)(yu)海(hai)洋甲(jia)殼動(dong)物外殼、軟體動(dong)物內(nei)骨骼、昆(kun)蟲翅膀、菌類及藻類細胞壁內(nei)，是(shi)地球(qiu)上(shang)的(de)蘊藏量僅次于(yu)(yu)纖維素的(de)天然多(duo)糖(tang)(tang)和第二大可再(zai)生(sheng)資源。殼聚糖(tang)(tang)為甲(jia)殼素在(zai)強(qiang)堿(jian)溶液中脫乙酰化的(de)產物，是(shi)天然多(duo)糖(tang)(tang)中惟一大量存(cun)在(zai)的(de)帶正(zheng)電荷堿(jian)性氨基多(duo)糖(tang)(tang)，具有(you)特殊的(de)物理、化學和生(sheng)理活性，且無毒，可生(sheng)物降解，生(sheng)物相容(rong)性好，被認為是(shi)“人體第六生(sheng)命要素”。
殼(ke)(ke)(ke)聚(ju)糖(tang)易(yi)于(yu)溶解(jie)在(zai)大多(duo)數有機酸和無(wu)機酸中，但不溶于(yu)水(shui)。殼(ke)(ke)(ke)寡糖(tang)是殼(ke)(ke)(ke)聚(ju)糖(tang)分子量降解(jie)到(dao)3000以下，主要(yao)由2～10個(ge)氨基葡(pu)萄糖(tang)連(lian)接(jie)而成(cheng)的低聚(ju)糖(tang)。殼(ke)(ke)(ke)寡糖(tang)具有水(shui)溶性(xing)好、生物活(huo)性(xing)高(gao)、功(gong)能作用大、易(yi)被人(ren)體吸收(shou)等突(tu)出特(te)點和許(xu)多(duo)獨(du)特(te)的功(gong)能，是甲殼(ke)(ke)(ke)素(su)、殼(ke)(ke)(ke)聚(ju)糖(tang)系列(lie)產(chan)品(pin)的高(gao)級(ji)產(chan)品(pin)，應用領域已經涉及到(dao)化學、醫(yi)藥、食品(pin)、化妝品(pin)、農(nong)業、環保、畜禽(qin)業等諸多(duo)方面，應用前景(jing)廣闊。
大量(liang)研究發現殼寡糖(tang)具有(you)許(xu)多生(sheng)理功能(neng)(neng)，如(ru)能(neng)(neng)夠調節(jie)動物腸道內微(wei)生(sheng)物代謝活動，改善(shan)腸道微(wei)生(sheng)物區系分布，增強有(you)益菌(jun)(jun)生(sheng)長；促進(jin)抗體生(sheng)成(cheng)、提(ti)高機體的(de)免(mian)疫活性(xing)，抑制腫瘤生(sheng)長；殼寡糖(tang)分子在質子化后能(neng)(neng)與細(xi)(xi)(xi)菌(jun)(jun)的(de)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)膜作(zuo)用，干擾細(xi)(xi)(xi)菌(jun)(jun)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)膜功能(neng)(neng)，造成(cheng)細(xi)(xi)(xi)菌(jun)(jun)體內細(xi)(xi)(xi)胞(bao)質流失，表現出明顯的(de)抗菌(jun)(jun)抑菌(jun)(jun)作(zuo)用；具有(you)降低血(xue)壓血(xue)糖(tang)、血(xue)脂，吸附膽固醇(chun)，從而(er)有(you)效地降低肝臟和(he)(he)血(xue)清中(zhong)膽固醇(chun)；強化肝臟功能(neng)(neng)，防止(zhi)痛風和(he)(he)胃(wei)潰(kui)瘍(yang)；增強免(mian)疫力和(he)(he)抗疾(ji)病能(neng)(neng)力。作(zuo)為一種(zhong)生(sheng)物相容性(xing)好、無(wu)(wu)免(mian)疫原(yuan)性(xing)、無(wu)(wu)刺激(ji)性(xing)的(de)多功能(neng)(neng)材料，殼寡糖(tang)不僅具有(you)非(fei)常(chang)強的(de)抑菌(jun)(jun)能(neng)(neng)力，而(er)且具有(you)加速凝血(xue)、促進(jin)創傷愈合、抑制瘢痕形成(cheng)等多種(zhong)功能(neng)(neng)。
殼寡糖(tang)分子(zi)中氨基的(de)(de)pKa值大(da)約(yue)為6.5，當溶液(ye)的(de)(de)pH值低(di)于6.0時(shi)，殼寡糖(tang)分子(zi)的(de)(de)氨基質(zhi)(zhi)子(zi)化(hua)顯正電(dian)性(xing)。因此當調節溶液(ye)的(de)(de)pH值在3.0至6.0區間時(shi)，帶正電(dian)荷的(de)(de)殼寡糖(tang)分子(zi)能(neng)夠(gou)同聚(ju)陰離子(zi)電(dian)解(jie)質(zhi)(zhi)或雙性(xing)聚(ju)電(dian)解(jie)質(zhi)(zhi)分子(zi)通過庫(ku)侖相互作用(yong)力而瞬時(shi)形(xing)成一(yi)種(zhong)無規則的(de)(de)復合物(wu)。這種(zhong)復合物(wu)為一(yi)種(zhong)非平(ping)衡狀態，隨(sui)著時(shi)間的(de)(de)推移(yi)，通過氫鍵、范德瓦耳斯力、電(dian)荷轉(zhuan)移(yi)及疏水締合作用(yong)力等其它次級相互作用(yong)而逐漸形(xing)成更穩定的(de)(de)復合物(wu)。利用(yong)這種(zhong)聚(ju)電(dian)解(jie)質(zhi)(zhi)復合物(wu)形(xing)成的(de)(de)三維(wei)網(wang)絡結構，在材(cai)料(liao)制備(bei)過程(cheng)中可以避免使用(yong)如戊二醛(quan)等有一(yi)定毒性(xing)的(de)(de)化(hua)學(xue)交聯劑，并能(neng)夠(gou)較 好(hao)的(de)(de)保留聚(ju)電(dian)解(jie)質(zhi)(zhi)材(cai)料(liao)本身優異的(de)(de)性(xing)能(neng)，在生物(wu)領(ling)域中具(ju)有重要的(de)(de)應用(yong)前景。
技術實現要素：
本發明目(mu)的(de)在(zai)于提(ti)供一種基于殼寡糖的(de)聚電解質止(zhi)血(xue)粉(fen)的(de)制備方法(fa)，獲得的(de)聚電解質止(zhi)血(xue)粉(fen)表(biao)現(xian)出優異的(de)止(zhi)血(xue)功能，解決現(xian)有(you)常(chang)規的(de)止(zhi)血(xue)方法(fa)和止(zhi)血(xue)藥物(wu)不能滿足要求等問題(ti)。
本發明的技術方案是：
一種(zhong)基于(yu)殼(ke)(ke)寡糖的(de)聚(ju)電(dian)(dian)解(jie)質(zhi)(zhi)止血粉(fen)的(de)制(zhi)備方法，首(shou)先配制(zhi)含(han)有殼(ke)(ke)寡糖和陰(yin)離子(zi)聚(ju)電(dian)(dian)解(jie)質(zhi)(zhi)或(huo)(huo)兩(liang)性聚(ju)電(dian)(dian)解(jie)質(zhi)(zhi)的(de)溶液(ye)，調節該(gai)聚(ju)電(dian)(dian)解(jie)質(zhi)(zhi)溶液(ye)的(de)pH值使(shi)殼(ke)(ke)寡糖分子(zi)帶(dai)正電(dian)(dian)荷并與陰(yin)離子(zi)聚(ju)電(dian)(dian)解(jie)質(zhi)(zhi)或(huo)(huo)兩(liang)性聚(ju)電(dian)(dian)解(jie)質(zhi)(zhi)通過庫侖力相互作用形成復(fu)合(he)物，聚(ju)電(dian)(dian)解(jie)質(zhi)(zhi)復(fu)合(he)物經干燥粉(fen)碎后得到殼(ke)(ke)寡糖聚(ju)電(dian)(dian)解(jie)質(zhi)(zhi)止血粉(fen)。
所(suo)述的(de)(de)(de)基(ji)于殼寡糖(tang)的(de)(de)(de)聚電(dian)解質止血粉的(de)(de)(de)制備方法，具體(ti)步(bu)驟(zou)如下：
1)制備含(han)有(you)殼寡糖和陰離(li)子聚(ju)電解(jie)質或兩性(xing)聚(ju)電解(jie)質的聚(ju)電解(jie)質混合(he)物水(shui)溶(rong)液；
2)調(diao)節聚(ju)(ju)電解(jie)質(zhi)(zhi)混合(he)(he)物(wu)水溶液的(de)pH值至3.0～6.0區間(jian)，使殼寡(gua)糖(tang)(tang)分子的(de)氨基質(zhi)(zhi)子化(hua)并(bing)顯正(zheng)電性；帶正(zheng)電荷的(de)殼寡(gua)糖(tang)(tang)分子同陰離(li)子聚(ju)(ju)電解(jie)質(zhi)(zhi)或兩性聚(ju)(ju)電解(jie)質(zhi)(zhi)通過庫侖力相互作用，形成聚(ju)(ju)電解(jie)質(zhi)(zhi)復合(he)(he)物(wu)；
3)聚電(dian)解(jie)質復合物經干燥粉碎后，得到殼寡糖聚電(dian)解(jie)質止血粉。
所述的(de)基于殼寡(gua)糖的(de)聚(ju)(ju)電解(jie)質(zhi)止血粉的(de)制備(bei)方法，步(bu)驟(zou)1)聚(ju)(ju)電解(jie)質(zhi)混合(he)物水溶液中，殼寡(gua)糖分子量(liang)在500～5000，脫(tuo)乙酰度為60％～100％，含(han)量(liang)為所述溶液總(zong)質(zhi)量(liang)的(de)0.1～13wt.％。
所述的基于殼寡糖的聚電解質止血粉的制備方法，步驟1)聚電解質混合物水溶液中，陰離子聚電解質或兩性聚電解質為具有良好生物相容性的含有-COO-、-SO3-、-O-CS2-、-O-PO32-陰離子(zi)(zi)基團的(de)(de)天(tian)然、半合成(cheng)或(huo)合成(cheng)的(de)(de)有(you)機高分子(zi)(zi)材料，陰離子(zi)(zi)聚電解(jie)質或(huo)兩性聚電解(jie)質的(de)(de)含(han)量為所(suo)述總質量的(de)(de)0.3～20wt.％。
所述的(de)(de)基(ji)于殼寡糖(tang)的(de)(de)聚(ju)(ju)(ju)(ju)電解質(zhi)(zhi)止血粉的(de)(de)制備方法，采用的(de)(de)陰離子聚(ju)(ju)(ju)(ju)電解質(zhi)(zhi)或(huo)兩(liang)性聚(ju)(ju)(ju)(ju)電解質(zhi)(zhi)為(wei)透明質(zhi)(zhi)酸(suan)(suan)(suan)、硫(liu)酸(suan)(suan)(suan)軟骨素、硫(liu)酸(suan)(suan)(suan)皮(pi)膚素、硫(liu)酸(suan)(suan)(suan)角質(zhi)(zhi)素、肝素、海藻酸(suan)(suan)(suan)鈉(na)、黃原膠(jiao)、卡拉(la)(la)膠(jiao)、果膠(jiao)、阿拉(la)(la)伯樹膠(jiao)、刺(ci)梧桐膠(jiao)、黃耆膠(jiao)、木質(zhi)(zhi)素磺酸(suan)(suan)(suan)鈉(na)、羧化淀(dian)粉、羧甲基(ji)纖(xian)維素、聚(ju)(ju)(ju)(ju)丙烯酸(suan)(suan)(suan)、聚(ju)(ju)(ju)(ju)甲基(ji)丙烯酸(suan)(suan)(suan)、聚(ju)(ju)(ju)(ju)苯乙(yi)烯磺酸(suan)(suan)(suan)、聚(ju)(ju)(ju)(ju)乙(yi)烯磺酸(suan)(suan)(suan)、聚(ju)(ju)(ju)(ju)乙(yi)烯膦酸(suan)(suan)(suan)、羧甲基(ji)殼聚(ju)(ju)(ju)(ju)糖(tang)、丙烯酸(suan)(suan)(suan)乙(yi)烯吡啶共聚(ju)(ju)(ju)(ju)物、核酸(suan)(suan)(suan)、蛋白質(zhi)(zhi)中的(de)(de)一種或(huo)兩(liang)種以上(shang)。
所述(shu)的(de)基于殼寡糖(tang)的(de)聚(ju)(ju)電(dian)解質(zhi)止血粉的(de)制備方法(fa)(fa)，步驟2)調(diao)節(jie)聚(ju)(ju)電(dian)解質(zhi)混合(he)物水溶(rong)液(ye)的(de)pH值(zhi)至3.0～6.0區間時，采用在(zai)聚(ju)(ju)電(dian)解質(zhi)混合(he)物水溶(rong)液(ye)中加入質(zhi)子釋放劑、酸性溶(rong)劑或聚(ju)(ju)電(dian)解質(zhi)混合(he)物水溶(rong)液(ye)在(zai)酸性氣氛(fen)中處理方法(fa)(fa)中的(de)一(yi)種或兩(liang)種以(yi)上。
所(suo)述的(de)基(ji)于殼寡糖的(de)聚電解質止血粉的(de)制備方法(fa)，質子釋放(fang)劑(ji)采(cai)(cai)用(yong)(yong)葡萄糖酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)內(nei)酯，加入量(liang)為(wei)(wei)(wei)聚電解質混合物水溶液總質量(liang)的(de)0.05～5wt.％，處(chu)(chu)理時(shi)間(jian)為(wei)(wei)(wei)10分鐘(zhong)至(zhi)(zhi)8小時(shi)；酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)性溶液為(wei)(wei)(wei)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)的(de)水或(huo)(huo)醇水溶液，采(cai)(cai)用(yong)(yong)無(wu)機(ji)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)或(huo)(huo)有機(ji)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)：鹽(yan)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、硫酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、磷(lin)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、硝酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、甲(jia)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、乙酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、丙(bing)(bing)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、丁酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、辛酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、己二(er)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、乙二(er)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、丙(bing)(bing)二(er)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、丁二(er)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、馬來酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、酒石酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、苯甲(jia)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、苯乙酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、鄰苯二(er)甲(jia)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、對(dui)苯二(er)甲(jia)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、戊(wu)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、己酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、癸酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、硬(ying)脂酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、軟脂酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、丙(bing)(bing)烯酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、酒石酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、蘋果(guo)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、枸椽酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、抗壞血酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)，處(chu)(chu)理時(shi)間(jian)為(wei)(wei)(wei)0.5小時(shi)至(zhi)(zhi)20小時(shi)；酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)性氣氛(fen)采(cai)(cai)用(yong)(yong)鹽(yan)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、硝酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、甲(jia)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、乙酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、丙(bing)(bing)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)、乙二(er)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)易于揮發(fa)的(de)無(wu)機(ji)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)或(huo)(huo)有機(ji)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)，處(chu)(chu)理時(shi)間(jian)為(wei)(wei)(wei)20分鐘(zhong)至(zhi)(zhi)18小時(shi)。
所述的(de)基于殼寡(gua)糖的(de)聚電解質止血粉的(de)制備方法，步驟3)聚電解質復合物(wu)經過常(chang)壓(ya)干(gan)(gan)(gan)燥(zao)、減(jian)壓(ya)干(gan)(gan)(gan)燥(zao)、噴(pen)霧干(gan)(gan)(gan)燥(zao)、流化干(gan)(gan)(gan)燥(zao)、冷凍干(gan)(gan)(gan)燥(zao)、紅外線干(gan)(gan)(gan)燥(zao)、干(gan)(gan)(gan)燥(zao)劑干(gan)(gan)(gan)燥(zao)或(huo)微波干(gan)(gan)(gan)燥(zao)等干(gan)(gan)(gan)燥(zao)技(ji)術(shu)中的(de)一種(zhong)或(huo)幾(ji)種(zhong)干(gan)(gan)(gan)燥(zao)。
所述(shu)的(de)(de)基于殼(ke)寡糖的(de)(de)聚(ju)(ju)電(dian)解質止血粉(fen)的(de)(de)制備方法(fa)，步(bu)驟3)干燥后的(de)(de)聚(ju)(ju)電(dian)解質復合物(wu)經過粉(fen)碎機、球磨機或(huo)破碎機使顆粒(li)細化(hua)，得到殼(ke)寡糖聚(ju)(ju)電(dian)解質止血粉(fen)。
本發明的優點(dian)及有(you)益(yi)效(xiao)果是：
1、本發明利用殼(ke)寡(gua)(gua)糖可以在中(zhong)(zhong)性水中(zhong)(zhong)溶(rong)(rong)解(jie)的(de)(de)特(te)性，配制含有(you)殼(ke)寡(gua)(gua)糖和陰離(li)子(zi)聚(ju)(ju)電(dian)解(jie)質(zhi)(zhi)或兩性聚(ju)(ju)電(dian)解(jie)質(zhi)(zhi)的(de)(de)聚(ju)(ju)電(dian)解(jie)質(zhi)(zhi)混合(he)物水溶(rong)(rong)液。通(tong)(tong)過調節該溶(rong)(rong)液的(de)(de)pH值使殼(ke)寡(gua)(gua)糖分子(zi)的(de)(de)氨基質(zhi)(zhi)子(zi)化并帶上(shang)正電(dian)荷(he)，與溶(rong)(rong)液中(zhong)(zhong)的(de)(de)陰離(li)子(zi)聚(ju)(ju)電(dian)解(jie)質(zhi)(zhi)或兩性聚(ju)(ju)電(dian)解(jie)質(zhi)(zhi)通(tong)(tong)過庫侖力相互作用形成復(fu)(fu)合(he)物。復(fu)(fu)合(he)物經干燥粉碎后得到殼(ke)寡(gua)(gua)糖聚(ju)(ju)電(dian)解(jie)質(zhi)(zhi)止血粉。
2、本發明(ming)利用這種聚電解質復合(he)物(wu)形(xing)成的(de)(de)(de)三維網絡結構(gou)，避免了(le)使用(如(ru)戊(wu)二醛(quan)等)有一定(ding)毒性(xing)的(de)(de)(de)化學交(jiao)聯(lian)劑，并能(neng)夠較好(hao)的(de)(de)(de)保(bao)留殼寡糖等聚電解質材料本身優異的(de)(de)(de)性(xing)能(neng)，表現出(chu)明(ming)顯的(de)(de)(de)優點：具有抑菌(jun)性(xing)和(he)(he)優異的(de)(de)(de)止(zhi)血(xue)(xue)(xue)功能(neng)；止(zhi)血(xue)(xue)(xue)粉顆粒小，比表面積大，吸液(ye)能(neng)力(li)強，能(neng)快速(su)吸收(shou)血(xue)(xue)(xue)液(ye)中的(de)(de)(de)水(shui)分(fen)，濃縮血(xue)(xue)(xue)小板和(he)(he)凝血(xue)(xue)(xue)因子；在吸水(shui)膨脹后(hou)粘附于創(chuang)面，封堵創(chuang)面破裂的(de)(de)(de)毛細血(xue)(xue)(xue)管；止(zhi)血(xue)(xue)(xue)后(hou)在創(chuang)面形(xing)成水(shui)凝膠(jiao)體，為傷口提供良好(hao)的(de)(de)(de)潤濕環境，促進創(chuang)面愈合(he)；對(dui)傷口無刺激，具備良好(hao)的(de)(de)(de)生(sheng)物(wu)相容(rong)性(xing)和(he)(he)生(sheng)物(wu)可降解性(xing)。
具體實施方式
在(zai)具體實施方式中，本(ben)發(fa)明基(ji)于(yu)(yu)殼寡糖的(de)聚(ju)電(dian)解(jie)質(zhi)(zhi)(zhi)止(zhi)血粉的(de)制備方法，首(shou)先將殼寡糖和具有(you)生物(wu)相容性的(de)陰離(li)(li)子(zi)聚(ju)電(dian)解(jie)質(zhi)(zhi)(zhi)或兩性聚(ju)電(dian)解(jie)質(zhi)(zhi)(zhi)溶于(yu)(yu)去離(li)(li)子(zi)水。通(tong)(tong)過降低(di)溶液(ye)的(de)pH值，使殼寡糖分子(zi)的(de)氨基(ji)質(zhi)(zhi)(zhi)子(zi)化并帶(dai)上正電(dian)荷，并與陰離(li)(li)子(zi)聚(ju)電(dian)解(jie)質(zhi)(zhi)(zhi)或兩性聚(ju)電(dian)解(jie)質(zhi)(zhi)(zhi)通(tong)(tong)過庫侖力相互作用形成復合物(wu)。聚(ju)電(dian)解(jie)質(zhi)(zhi)(zhi)復合物(wu)經干燥粉碎后得到殼寡糖聚(ju)電(dian)解(jie)質(zhi)(zhi)(zhi)止(zhi)血粉。其具體步驟為：
1)制備含有殼寡糖和陰離子聚電解質或兩性聚電解質的聚電解質混合物水溶液。陰離子聚電解質或兩性聚電解質為具有良好生物相容性的含有-COO-、-SO3-、-O-CS2-、-O-PO32-等(deng)陰離子基(ji)(ji)團的(de)天然、半合(he)成或合(he)成的(de)有(you)機(ji)高分子材料，如(ru)透明質酸(suan)(suan)(suan)、硫酸(suan)(suan)(suan)軟骨素(su)(su)、硫酸(suan)(suan)(suan)皮膚素(su)(su)、硫酸(suan)(suan)(suan)角質素(su)(su)、肝素(su)(su)、海藻酸(suan)(suan)(suan)鈉、羧甲(jia)基(ji)(ji)纖(xian)維素(su)(su)、黃(huang)原膠(jiao)(jiao)、卡拉膠(jiao)(jiao)、果膠(jiao)(jiao)、阿拉伯樹膠(jiao)(jiao)、刺梧(wu)桐膠(jiao)(jiao)、黃(huang)耆膠(jiao)(jiao)(黃(huang)芪膠(jiao)(jiao)Gum tragacanth)、木質素(su)(su)磺酸(suan)(suan)(suan)鈉、羧化(hua)淀(dian)粉、聚丙烯酸(suan)(suan)(suan)、聚甲(jia)基(ji)(ji)丙烯酸(suan)(suan)(suan)、聚苯乙(yi)烯磺酸(suan)(suan)(suan)、聚乙(yi)烯磺酸(suan)(suan)(suan)、聚乙(yi)烯膦酸(suan)(suan)(suan)、羧甲(jia)基(ji)(ji)殼(ke)聚糖、丙烯酸(suan)(suan)(suan)乙(yi)烯吡啶共聚物、核酸(suan)(suan)(suan)、蛋白質等(deng)中的(de)一種(zhong)或兩種(zhong)以上；
2)采用(yong)在聚(ju)(ju)電解(jie)(jie)質(zhi)(zhi)混(hun)合物水(shui)溶(rong)液中加入(ru)質(zhi)(zhi)子(zi)(zi)釋放劑、酸性(xing)溶(rong)劑或聚(ju)(ju)電解(jie)(jie)質(zhi)(zhi)混(hun)合物水(shui)溶(rong)液在酸性(xing)氣氛中處理(li)等(deng)方法(fa)中的(de)一種(zhong)或兩種(zhong)以上(shang)，調節聚(ju)(ju)電解(jie)(jie)質(zhi)(zhi)混(hun)合物水(shui)溶(rong)液的(de)pH值至3.0～6.0區間，使殼寡糖分子(zi)(zi)的(de)氨基被質(zhi)(zhi)子(zi)(zi)化顯正電性(xing)。帶正電荷(he)的(de)殼寡糖分子(zi)(zi)同帶負電荷(he)的(de)陰(yin)離子(zi)(zi)聚(ju)(ju)電解(jie)(jie)質(zhi)(zhi)或兩性(xing)聚(ju)(ju)電解(jie)(jie)質(zhi)(zhi)通過庫(ku)侖(lun)力相互作用(yong)，形成聚(ju)(ju)電解(jie)(jie)質(zhi)(zhi)復合物；
3)聚(ju)電(dian)解質(zhi)復合物經干燥、粉(fen)(fen)碎(sui)后，得到殼寡糖聚(ju)電(dian)解質(zhi)止(zhi)血粉(fen)(fen)。
為使本(ben)發明的技術方(fang)案和優點更加清楚，下面將結合具(ju)體實施方(fang)案進行詳細描述。
實施例1
10克(ke)殼(ke)寡糖、13克(ke)聚(ju)(ju)丙烯酸鈉和1g葡(pu)萄糖酸內酯在(zai)(zai)1升去(qu)離(li)子水中溶解，50℃下保(bao)溫10小時。聚(ju)(ju)電(dian)解質復合物在(zai)(zai)50℃鼓風干燥(zao)機(ji)中干燥(zao)60小時后，采用球(qiu)磨(mo)機(ji)球(qiu)磨(mo)1小時得到殼(ke)寡糖聚(ju)(ju)電(dian)解質止(zhi)(zhi)血(xue)(xue)粉(fen)。該止(zhi)(zhi)血(xue)(xue)粉(fen)具(ju)有良好的生(sheng)物相容性(xing)和抑菌性(xing)，表現出(chu)(chu)優異的止(zhi)(zhi)血(xue)(xue)功能(neng)。本實施(shi)例的體外(wai)凝血(xue)(xue)指數測定表明(ming)，體外(wai)凝血(xue)(xue)指數<41％；家兔耳動脈出(chu)(chu)血(xue)(xue)模型的止(zhi)(zhi)血(xue)(xue)效果(guo)檢測結(jie)果(guo)表明(ming)，止(zhi)(zhi)血(xue)(xue)時間<97秒。
實施例2
10克(ke)殼寡糖、10克(ke)透(tou)明(ming)質酸和1g葡萄(tao)糖酸內酯在1升去離(li)子水(shui)中溶解(jie)，50℃ 下保(bao)溫(wen)10小時(shi)。聚(ju)電解(jie)質復合物(wu)在50℃鼓風干(gan)(gan)燥機中干(gan)(gan)燥60小時(shi)后，采用球磨(mo)(mo)機球磨(mo)(mo)1小時(shi)得到(dao)殼寡糖聚(ju)電解(jie)質止(zhi)(zhi)血(xue)(xue)(xue)粉。該止(zhi)(zhi)血(xue)(xue)(xue)粉具有(you)良好的生物(wu)相容(rong)性和抑(yi)菌(jun)性，表現出(chu)優(you)異的止(zhi)(zhi)血(xue)(xue)(xue)功能。本實施例的體外凝血(xue)(xue)(xue)指(zhi)數(shu)測定表明(ming)，體外凝血(xue)(xue)(xue)指(zhi)數(shu)<56％；家(jia)兔(tu)耳動脈(mo)出(chu)血(xue)(xue)(xue)模(mo)型(xing)的止(zhi)(zhi)血(xue)(xue)(xue)效果檢測結果表明(ming)，止(zhi)(zhi)血(xue)(xue)(xue)時(shi)間<140秒。
實施例3
10克殼寡糖、10克透明質(zhi)(zhi)酸和3g葡(pu)萄(tao)糖酸內酯在1升去離(li)子水中溶解(jie)，50℃下保(bao)溫(wen)10小(xiao)(xiao)時。聚(ju)電解(jie)質(zhi)(zhi)復(fu)合物在30℃鼓風(feng)干(gan)燥機中干(gan)燥60小(xiao)(xiao)時后，采用球(qiu)磨機球(qiu)磨1小(xiao)(xiao)時得到殼寡糖聚(ju)電解(jie)質(zhi)(zhi)止血(xue)(xue)(xue)粉。該止血(xue)(xue)(xue)粉具有良好(hao)的生物相(xiang)容性和抑菌性，表(biao)現出優異的止血(xue)(xue)(xue)功能。本實施例的體(ti)外(wai)凝血(xue)(xue)(xue)指數測定表(biao)明，體(ti)外(wai)凝血(xue)(xue)(xue)指數<48％；家兔(tu)耳動脈(mo)出血(xue)(xue)(xue)模型的止血(xue)(xue)(xue)效果檢測結果表(biao)明，止血(xue)(xue)(xue)時間<;90秒。
實施例4
10克殼(ke)寡糖(tang)、12克阿拉伯樹(shu)膠和(he)1g葡萄糖(tang)酸內酯在1升去離子水中(zhong)溶解(jie)，50℃下保溫10小時。聚電(dian)解(jie)質復合物(wu)在50℃鼓風干燥機(ji)中(zhong)干燥60小時后，采用球(qiu)磨(mo)機(ji)球(qiu)磨(mo)1小時得到殼(ke)寡糖(tang)聚電(dian)解(jie)質止(zhi)(zhi)(zhi)血(xue)(xue)粉。該止(zhi)(zhi)(zhi)血(xue)(xue)粉具有良(liang)好的(de)生物(wu)相容(rong)性和(he)抑菌性，表現出優異(yi)的(de)止(zhi)(zhi)(zhi)血(xue)(xue)功能。本實(shi)施例的(de)體外凝血(xue)(xue)指數測定表明，體外凝血(xue)(xue)指數<60％；家兔耳動脈出血(xue)(xue)模型的(de)止(zhi)(zhi)(zhi)血(xue)(xue)效果檢測結(jie)果表明，止(zhi)(zhi)(zhi)血(xue)(xue)時間(jian)<170秒。
實施例5
30克殼寡(gua)糖(tang)、15克海藻酸(suan)鈉(na)和3g葡萄糖(tang)酸(suan)內(nei)酯在(zai)(zai)1升去離子水中溶解，50℃下保溫10小(xiao)時。聚電解質復合物在(zai)(zai)50℃鼓風干燥(zao)機中干燥(zao)60小(xiao)時后，采用球磨(mo)機球磨(mo)1小(xiao)時得到殼寡(gua)糖(tang)聚電解質止血(xue)粉(fen)。該止血(xue)粉(fen)具有良好(hao)的(de)生(sheng)物相容性和抑(yi)菌性，表(biao)現出優異的(de)止血(xue)功(gong)能(neng)。本實施例的(de)體外凝血(xue)指(zhi)數(shu)測定(ding)表(biao)明，體外凝血(xue)指(zhi)數(shu)<50％；家(jia)兔耳動(dong)脈出血(xue)模型的(de)止血(xue)效果(guo)檢測結果(guo)表(biao)明，止血(xue)時間(jian)<121秒。
實施例6
25克殼寡糖(tang)、18克羧(suo)化淀(dian)粉(fen)(fen)和(he)1g葡萄糖(tang)酸內酯在(zai)1升去離(li)子(zi)水中溶解(jie)，50℃下(xia)保溫(wen)10小時(shi)。聚(ju)電(dian)(dian)解(jie)質(zhi)復合物在(zai)50℃鼓風(feng)干(gan)燥機中干(gan)燥60小時(shi)后，采(cai)用球磨機球磨1小時(shi)得到(dao)殼寡糖(tang)聚(ju)電(dian)(dian)解(jie)質(zhi)止血(xue)(xue)(xue)粉(fen)(fen)。該止血(xue)(xue)(xue)粉(fen)(fen)具(ju)有良好的(de)生物相(xiang)容性(xing)和(he)抑菌性(xing)，表現(xian)出(chu)優異(yi)的(de)止血(xue)(xue)(xue)功能。本實(shi)施例的(de)體外(wai)凝血(xue)(xue)(xue)指(zhi)數測(ce)定表明(ming)，體外(wai)凝血(xue)(xue)(xue)指(zhi)數<70％；家兔耳動脈(mo)出(chu)血(xue)(xue)(xue)模型(xing)的(de)止血(xue)(xue)(xue)效果檢測(ce)結果表明(ming)，止血(xue)(xue)(xue)時(shi)間<160秒。
實施例7
10克殼寡糖、13克聚丙烯酸鈉(na)在1升去離子(zi)水(shui)(shui)中溶解(jie)。10mL鹽酸溶液(摩 爾濃度0.1M)注入到(dao)聚電(dian)解(jie)質混合物水(shui)(shui)溶液中，在室溫下處理4小時。聚電(dian)解(jie)質復合物在真(zhen)空干燥(zao)箱中干燥(zao)40小時后，采用(yong)球磨(mo)機球磨(mo)1小時得到(dao)殼寡糖聚電(dian)解(jie)質止血(xue)粉。該止血(xue)粉具有良好的(de)(de)(de)生物相容性和抑菌性，表現出(chu)優異的(de)(de)(de)止血(xue)功能。本實施例的(de)(de)(de)體外凝血(xue)指數(shu)測(ce)(ce)定表明，體外凝血(xue)指數(shu)<50％；家兔耳動(dong)脈(mo)出(chu)血(xue)模(mo)型(xing)的(de)(de)(de)止血(xue)效果檢測(ce)(ce)結果表明，止血(xue)時間<130秒。
實施例8
10克殼寡糖、13克聚(ju)丙烯酸(suan)鈉在1升去離子水中溶(rong)解，然(ran)后放入乙酸(suan)氣氛中，在室溫下處理8小(xiao)時。聚(ju)電解質復合物在50℃鼓(gu)風干(gan)(gan)燥機中干(gan)(gan)燥60小(xiao)時后，采用球磨(mo)機球磨(mo)1小(xiao)時得到殼寡糖聚(ju)電解質止血(xue)(xue)粉。該止血(xue)(xue)粉具有良好(hao)的(de)生物相容性和抑菌性，表(biao)現出(chu)優異的(de)止血(xue)(xue)功能(neng)。本實(shi)施例的(de)體外凝血(xue)(xue)指數(shu)測(ce)定表(biao)明(ming)，體外凝血(xue)(xue)指數(shu)<55％；家兔耳動(dong)脈出(chu)血(xue)(xue)模型的(de)止血(xue)(xue)效果檢測(ce)結果表(biao)明(ming)，止血(xue)(xue)時間(jian)<140秒。
實施例9
15克殼(ke)寡糖、18克羧甲(jia)基纖維素(su)在1升去(qu)離子(zi)水(shui)中(zhong)溶解(jie)(jie)，然(ran)后放入乙酸(suan)氣氛中(zhong)，在室溫下處理8小時。聚(ju)電解(jie)(jie)質復合物(wu)在50℃鼓風干燥機中(zhong)干燥60小時后，采用球磨(mo)機球磨(mo)1小時得到殼(ke)寡糖聚(ju)電解(jie)(jie)質止(zhi)(zhi)血粉。該止(zhi)(zhi)血粉具有良好的(de)(de)生物(wu)相容性(xing)和(he)抑(yi)菌性(xing)，表(biao)現出優(you)異的(de)(de)止(zhi)(zhi)血功能。本實施(shi)例的(de)(de)體外凝血指(zhi)數測定表(biao)明(ming)，體外凝血指(zhi)數<70％；家兔耳動脈(mo)出血模型的(de)(de)止(zhi)(zhi)血效(xiao)果(guo)檢測結(jie)果(guo)表(biao)明(ming)，止(zhi)(zhi)血時間<180秒(miao)。
實施例10
10克(ke)殼(ke)寡糖(tang)溶解于500mL蒸(zheng)餾(liu)水中。13克(ke)聚丙(bing)烯(xi)酸(suan)(suan)鈉溶解于400mL蒸(zheng)餾(liu)水中。5g葡(pu)萄(tao)糖(tang)酸(suan)(suan)內酯溶解于100mL蒸(zheng)餾(liu)水中。合并殼(ke)寡糖(tang)、聚丙(bing)烯(xi)酸(suan)(suan)鈉和葡(pu)萄(tao)糖(tang)酸(suan)(suan)內酯溶液，50℃下保(bao)溫10小(xiao)時(shi)。聚電解質復合物在(zai)紅外線(xian)干燥機中干燥28小(xiao)時(shi)后，采用球磨機球磨1小(xiao)時(shi)得到殼(ke)寡糖(tang)聚電解質止(zhi)血(xue)粉。該止(zhi)血(xue)粉具有良好的(de)生(sheng)物相容(rong)性(xing)和抑菌性(xing)，表(biao)現(xian)出優異的(de)止(zhi)血(xue)功能。本實施例的(de)體(ti)外凝血(xue)指(zhi)數測定表(biao)明，體(ti)外凝血(xue)指(zhi)數<60％；家(jia)兔耳動脈出血(xue)模型的(de)止(zhi)血(xue)效果檢(jian)測結果表(biao)明，止(zhi)血(xue)時(shi)間(jian)<110秒。