一種二丁酰環磷腺苷鈣的制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及藥物合成技術領域，特別涉及一種二丁酰環磷腺苷鈣的制備方法。
【背景技術】
[0002] 二丁酰環磷腺苷鈣為環磷腺苷（cAMP)的衍生物。由于cAMP不易透過細胞膜，而 且進入細胞內的cAMP很快地被細胞內之磷酸二酯酶水解，故制成環磷酸腺苷的衍生物。環 磷酸腺苷雙丁酰酯對細胞的滲透性比cAMP強，且能對抗機體內磷酸二酯酶的破壞作用，故 其作用時間和速度均比cAMP持久和迅速，是具有更佳體內藥物濃度分布和代謝動力學特 性的新一代產品。二丁酰環磷腺苷鈣可以在體內參與細胞能量代謝和蛋白質合成，從而保 護瀕死的細胞，加速修復過程，使腎小管的完整性得以保護，進而改善腎內血流動力學和循 環，增加腎血流量，達到保護腎臟功能的作用。二丁酰環磷腺苷鈣具有廣泛的細胞活化功 能，可參與人體內糖、脂肪、蛋白質三大代謝的調節，對擴張血管，舒張平滑肌，改善心肌缺 血缺氧，特別對心肌細胞的損傷修復及減輕缺血區再灌注的損傷有著十分重要的作用。二 丁酰環磷腺苷鈣作為一種治療與營養兼顧的心血管制劑，應用在老年穩定型心絞痛人群 中，療效肯定，能提高生活質量。近期藥理學研究表明，G蛋白偶聯受體信號通路中存在 cAMP調控作用，因此二丁酰環磷腺苷鈣還可能適用于與細胞凋亡和遺傳免疫性等相關的疾 病治療。
[0003] 二磷酸腺苷鈣作為蛋白酶致活劑，目前臨床上主要用于治療心血管疾病如心絞 痛、急性心肌梗死的輔助治療，亦可用于心肌炎、心源性休克、手術后網膜下出血和銀肩病， 并可輔助其他抗癌藥治療白血病。
[0004] 目前多采用化學合成方法制備二丁酰環磷腺苷鈣，但是存在以下缺點：（1)酰化 反應時間很長，收率較低（60%左右），生產效率較低（8~10天）；（2)提取過程粗糙，導致 產品純度較低（液相純度85% )，影響產品療效。
[0005] 因此，提供一種收率高、純度好、生產周期短，利于工業化生產的二丁酰環磷腺苷 鈣的制備方法具有現實意義。

【發明內容】

[0006] 有鑒于此，本發明提供一種二丁酰環磷腺苷鈣的制備方法。該方法與傳統工藝相 比較，生產周期由原來的9~10天縮短至3-4天，粗品收率提高至78~82%，純化后收率 提高至90~94%，反應總收率提高至70~75%。本發明采用連續洗滌的方法，再經過反 相萃取，獲得的二丁酰環磷腺苷其液相色譜純度達到98~98. 5%。
[0007] 為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：
[0008] 本發明提供了一種二丁酰環磷腺苷鈣的制備方法，包括以下步驟：
[0009] 步驟1 :獲得環磷腺苷三乙胺鹽；
[0010] 步驟2 :在非質子溶劑中將所述環磷腺苷三乙胺鹽與正丁酸酐混合，在有機堿催 化下發生酰化反應，水解，收集二丁酰環磷腺苷；
[0011] 所述酰化反應為30°C~80°C下避光反應20~36h ;
[0012] 步驟3 :取所述二丁酰環磷腺苷成鹽，即得。
[0013] 在本發明的一些實施例中，步驟2優選在氮氣保護的條件下發生酰化反應。
[0014] 在本發明的一些實施例中，以g/mL/mL計，步驟2所述酰化反應中所述環磷腺苷三 乙胺鹽、所述正丁酸酐、所述非質子溶劑的質量體積比為1 :4~10 :50~60。
[0015] 在本發明的一些實施例中，步驟2中所述非質子溶劑為四氫呋喃、1，4_二氧六環、 N，N-二甲基甲酰胺、乙腈、或吡啶中的一種或兩者以上的混合物。所有適用于酰化反應的 非質子溶劑都在本發明的保護范圍內，在此不作限定。
[0016] 本發明所述的技術方案中，所述的有機堿是4-二甲氨基吡啶、三乙胺、或二異丙 基乙基胺。
[0017] 作為優選，步驟1具體為：將三乙胺鹽與水混合后，再與環磷腺苷混合，制得環磷 腺苷三乙胺鹽。
[0018] 作為優選，步驟1中所述再與環磷腺苷混合之后還包括第一純化的步驟。
[0019] 在本發明的一些實施例中，所述第一純化具體為在50°C下真空干燥獲得固體，將 非質子溶劑溶解所述固體，濃縮、干燥。凡是能夠達到純化效果的操作均在本發明的保護范 圍內，本發明在此不作限定。
[0020] 在本發明的一些實施例中，步驟3中所述成鹽具體為將鈣鹽與醇-水混合溶液混 合后，與所述二丁酰環磷腺苷的醇混合發生成鹽反應。
[0021] 作為優選，步驟3所述成鹽之后還包括第二純化的步驟。
[0022] 在本發明的一些實施例中，所述第二純化具體為取所述成鹽反應的溶液過濾，收 集濾渣與醇混合后，于0°C與醚混合、過濾，收集濾渣，干燥。凡是能夠達到純化效果的操作 均在本發明的保護范圍內，本發明在此不作限定。
[0023] 在本發明的一些實施例中，步驟2中所述收集二丁酰環磷腺苷具體為于25°C~ 45°C減壓濃縮除去溶劑后，加30-50倍體積的水，用醚洗滌水相2次，40°C~60°C減壓蒸餾， 再用二氯甲烷萃取剩余水相，合并有機相，減壓蒸餾除去二氯甲烷，得二丁酰環磷腺苷。
[0024] 本發明所述的技術方案中，所述的醇為乙醇、丙醇、丁醇、或異丁醇。
[0025] 本發明所述的技術方案中，所述的醚為乙醚、異丙醚、或甲基叔丁基醚。
[0026] 具體的，本發明提供的二丁酰環磷腺苷鈣的制備方法可以為：
[0027] 第一步，環磷腺苷三乙胺鹽的制備：
[0028] 將三乙胺鹽與純化水攪拌均勻，投入環磷腺苷，攪拌完全溶解，混合液在50°C下真 空干燥，得固體。用非質子溶劑溶解上述固體，再此濃縮旋干，得環磷腺苷三乙胺鹽。
[0029] 第二步，二丁酰環磷腺苷的制備：
[0030] 取一定量的環磷腺苷與正丁酸酐，以非質子溶劑為溶劑，一定溫度下避光反應一 段時間，加水水解1~3h，25°C~45°C減壓濃縮除去溶劑，加水到一定體積，有機溶劑洗滌 水相，水相50°C減壓蒸餾，再以二氯甲烷萃取剩余水相，合并有機相，減壓除去二氯甲燒，得 到微粘的淡黃色二丁酰環磷腺苷固體；
[0031] 第三步，二丁酰環磷腺苷鈣的制備：
[0032] 取一定量的二丁酰環磷腺苷溶于一定體積的醇類溶劑中；取一定量的氯化鈣溶于 醇類溶劑與水的混合液中；將兩溶液混合，室溫15~35°C反應lOmin過濾，減壓除去醇類 溶劑和水，再以相同醇類溶劑溶解，低溫加入醚類溶劑，過濾，即得高純度二丁酰環磷腺苷 鈣白色粉末或類白色粉末；
[0033] 本發明具有如下特點：
[0034] 1.生產周期短，收率高。
[0035] 2.采用多步洗滌和反相萃取工藝，大大提高了二丁酰環磷腺苷及其鈣鹽的純度。
[0036] 本發明提供的一種二丁酰環磷腺苷鈣的制備方法，包括以下步驟：獲得環磷腺苷 三乙胺鹽；在非質子溶劑中將所述環磷腺苷三乙胺鹽與正丁酸酐混合，在有機堿催化下發 生酰化反應，水解，收集二丁酰環磷腺苷；所述酰化反應為30°C~80°C下避光反應20~ 36h ;取所述二丁酰環磷腺苷成鹽，即得。本發明以環磷腺苷為原料，與三乙胺在非質子溶 劑下制備環磷腺苷三乙胺鹽，然后以丁酸酐為酰化劑，在有機非質子性溶劑中合成二丁酰 環磷腺苷，該方法與傳統工藝相比較，生產周期由原來的9~10天縮短至3-4天，粗品收率 提高至78~82%，純化后收率提高至90~94%，反應總收率提高至70~75%。本發明 采用連續洗滌的方法，再經過反相萃取，獲得的二丁酰環磷腺苷其液相色譜純度達到98~ 98. 5%。以高純度的二丁酰環磷腺苷為原料，經與無機鹽氯化鈣反應，一步獲得了高純度的 二丁酰環磷腺苷鈣，各項指標均符合藥典標準，同時簡化了制備工藝，適于工業化生產。
【附圖說明】
[0037] 圖1示本發明提供的二丁酰環磷腺苷鈣的制備工藝；
[0038] 圖2示實施例1制備的二丁酰環磷腺苷鈣質譜圖；
[0039] 圖3示二丁酰環磷腺苷鈣標準品的HPLC譜圖；
[0040] 圖4示實施例1制備的二丁酰環磷腺苷鈣的HPLC譜圖。
【具體實施方式】
[0041] 本發明公開了一種二丁酰環磷腺苷鈣的制備方法，本領域技術人員可以借鑒本文 內容，適當改進工藝參數實現。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動對本領域技術人 員來說是顯而易見的，它們都被視為包括在本發明。本發明的方法及應用已經通過較佳實 施例進行了描述，相關人員明顯