一種嗪草酮農藥殘留降解菌及其生產的菌劑和應用
【技術領域】
[0001] 本發明屬于生物高技術領域，提供一種嗪草酮農藥殘留降解菌及其生產的菌劑和 應用。
【背景技術】
[0002] 化學農藥的使用大大地促進了現代農業的發展，為農業生產挽回了大量因植物 病、蟲、草害等原因造成的損失，并極大地提高了農業生產的勞動效率和機械化程度，在農 業生產的現代化進程中起了不可估量的作用。但同時農藥是一些有毒有害化學物質，它們 進入生態環境后，不僅殺死了對人類有害的生物，同時也對生態系統造成了嚴重的危害。農 藥的大量使用引起農產品中農藥殘留超標，嚴重影響了人們的身體健康及農產品的安全生 產。隨著人們生活水平的提高和環境保護意識的增強，全社會對農藥殘留帶來的直接危害 和潛在影響也越來越關注，人們迫切需要無農藥殘留污染的清潔綠色農產品。但從目前我 國的農業生產形式和人口狀況來看，以停止農藥使用降低農業產量為代價的生產模式是行 不通的，農藥作為控制植物病、蟲、草害的有效手段還將繼續在農業生產中發揮巨大的作 用。如何能解決農業生產中的這個兩難問題就成為研究熱點。實驗室和實際應用研究都表 明利用微生物來降解土壤中的農藥殘留，從而降低糧食、蔬菜、茶葉等農產品中的農藥殘 留，提尚農廣品的品質和經濟價值是可彳丁的。

【發明內容】

[0003] 本發明的目的在于提供一種嗪草酮降解菌(Rhodococcussp. )QCT10。
[0004]本發明的另一目的在于上述的嗪草酮降解菌QCT10在降解嗪草酮和/或生產嗪草 酮農藥殘留降解菌劑中的應用。
[0005]本發明的目的還在于針對生產實踐中的實際問題和需求，開發研制出一種新型的 嗪草酮農藥殘留降解菌劑。
[0006]本發明的進一步目的在于上述的菌劑在降解嗪草酮中的應用。
[0007]本發明的目的可通過如下技術方案實現：
[0008] 本發明提供一種嗪草酮降解菌QCT10,為革蘭氏陽性菌，經鑒定為紅球菌 (Rhodococcus sp.)，2015年6月29日保藏于中國典型培養物保藏中心，菌種保藏號為： CCTCCN0:M2015392。菌株QCT10在LB固體平板上為粉紅色、菌落邊緣光滑，中間略微凸起。 菌株QCT10無鞭毛，大小為1.1 -1.2μπιX1.6-1.7μπι的短桿菌（圖1)，接觸酶陽性，可以抗多粘 菌素Β。本發明所述的嗪草酮降解菌QCT10在降解嗪草酮中的應用。
[0009]本發明所述的嗪草酮降解菌QCT10在生產嗪草酮農藥殘留降解菌劑中的應用。
[0010] 嗪草酮農藥殘留降解菌劑，優選通過以下方法制備得到：
[0011] 1)將上述的嗪草酮降解菌QCT10接種于肉湯培養基（牛肉膏10克，蛋白胨5克， NaCl5克，水1000毫升，pH7.0-7.2)搖瓶中，振蕩培養至對數期；
[0012] 2)將上述培養好的菌種按種子罐培養基的10 % (v/v)的接種量接種入500升種子 罐，培養過程中無菌空氣的通氣量為1:ο. 8-1.2，攪拌速度為180-240轉/分，培養溫度為30-32°C，培養至對數生長期，種子罐所用的培養基配方為：葡萄糖1.0wt%，NH4N03l.Owt%，K2HPO40.2wt%，MgS〇4 0.05wt%，NaCl0.01wt%，CaC03 0.3wt%，酵母膏0.02wt%，pH值 7.2-7.5；
[0013]3)將上述種子液按生產罐培養基的10% (v/v)接種量接入生產罐培養，生產罐所 用培養基與種子罐培養基相同，培養過程中無菌空氣的通氣量為1:0.8-1.2,攪拌速度為 180-240轉/分，培養溫度為30-32°C，全流程培養時間為36-48小時，發酵結束后菌體數量達 到10億個/ml以上，發酵完成后培養液出罐直接用塑料包裝桶或包裝瓶分裝成液體劑型或 采用泥炭吸附用包裝袋分裝成固體劑型。
[0014] 有益效果
[0015]使用該發明生產的農藥殘留降解菌劑具有生產使用成本低，使用方便，去除效果 好的優點，適合在全國糧油蔬菜生產出口基地或有綠色食品商標標志的地區大面積推廣使 用。本發明對于保護生態環境，保護人民的身體健康，提高農產品的附加值具有重要的意 義。降解菌QCT10能將土壤中嗪草酮農藥殘留降解50%以上，使用該降解菌劑可以在農作物 的正常生長過程中正常使用化學農藥進行草害防治而保證農產品中農藥殘留含量符合綠 色食品要求。
[0016]本發明成功地解決了農業生產中嗪草酮農藥殘留超標問題，既充分發揮了化學農 藥在草害防治中的高效快速的作用，又可以生產出無毒無公害的綠色農產品。
【附圖說明】
[0017]圖1降解菌株QCT10的透射電鏡照
[0018]生物材料保藏信息
[0019]一種嗪草酮降解菌QCT10,分類命名為Rhodococcussp.QCTIO,保藏于中國典型培 養物保藏中心，保藏日期為2015年6月29日，保藏地址為中國武漢?武漢大學，菌種保藏號 為：CCTCCΝ0:Μ2015392。
【具體實施方式】
[0020] 實施例1:菌株的分離、鑒定
[0021 ]采集長期受嗪草酮污染的土壤，取15g土壤樣品置于100mL添加50mg/L嗪草酮的無 機鹽液體培養基(NH4N03 1.0克，K2HP〇4 1.5克，KH2P〇4 0.5克，MgS〇4 0.2克，NaCll.O克，水 1000毫升，pH7.0-7.2)中，30°C、150r/min培養7天，以7.5%的接種量轉接到相同的添加 50mg/L嗪草酮的無機鹽液體培養基，連續轉接4次。通過液相色譜法測定降解效果。取0.5mL 有效果的富集液，梯度稀釋，每個梯度的稀釋富集液取l〇〇yL涂在含有50mg/L嗪草酮農藥的 無機鹽固體培養基平板上，30°C培養5d。挑取平板上長出的單菌落接種于液體LB培養基(蛋 白胨1克，酵母膏0.5克，NaClO. 5克，瓊脂粉20克，水1000毫升，pH7.0-7.2)試管中，30°C、 160r/min培養1天，取lmLLB培養液，接種至加有50mg·I/1嗪草酮的無機鹽液體培養基中， 30°C、150r/min培養5d，液相色譜檢測降解效果。對嗪草酮有降解效果的菌株即為降解菌 株。通過驗證得到1株降解菌株，命名為QCT10,經鑒定為紅球菌(Rhodococcussp.)。菌株 QCT10在LB固體平板上為粉紅色、菌落邊緣光滑，中間略微凸起。菌株QCT10無鞭毛，大小為 1 ·Η·2μπιχ1.6-1 ·7μπι的短桿菌，接觸酶陽性，可以抗多粘菌素B。