斜面培養48小時;
[0101] B、種子培養
[0102] 制備液體種子培養基:將7g牛肉膏、3g氯化鈉與5g蛋白胨溶于水中,再用水補 充到總體積l〇〇〇ml,然后使用0. 8N鹽酸或氫氧化鈉水溶液將得到的溶液pH值調節至pH 7. 0〇
[0103] 將一環在步驟A得到的斜面培養物接種到液體種子培養基中,然后置于恒溫培養 箱中在溫度28°C與轉速180rpm的條件下培養5h,得到種子培養物;
[0104] C、發酵培養
[0105] 制備發酵培養基:將16g淀粉、l.Og玉米漿粉、2. 5g蛋白胨、2. 5g氯化鈉、l.Og Κ2ΗΡ04 ·3Η20、1. 0gNH4Cl與0. 2gMgS04 ·7Η20溶于水中,再用水補充到總體積1000ml,然后使 用0. 1N鹽酸或氫氧化鈉水溶液將得到的溶液pH值調節至pH 7. 2。
[0106] 按照以發酵培養基體積計5%接種量,將在步驟B得到的種子培養物轉接至發 酵培養基中,再置于發酵培養罐中,先在溫度28°C、轉速150rpm、風量1:1.0與罐內壓力 0. 06MPa的條件下培養15h,接著在溫度30°C與轉速360rpm的條件下繼續發酵培養至42h, 采用本技術領域里常規的活菌平板計數法測定,在發酵結束后得到的發酵培養物含有109 億/ml解淀粉芽孢桿菌LX-J1。
[0107] 實施例2 :解淀粉芽孢桿菌LX-J1的培養
[0108] 該實施例的實施步驟如下:
[0109] A、斜面培養
[0110] 制備斜面培養基:將7g牛肉膏、3.4g氯化鈉、10g蛋白胨與20g瓊脂溶于水中,再 用水補充到總體積l〇〇〇ml,然后使用0. 1N鹽酸或氫氧化鉀水溶液將得到的溶液pH值調節 至 pH 7. 1。
[0111] 使用接種環挑取一環保存于甘油管中的解淀粉芽孢桿菌LX-J1接種于斜面培養 基斜面上,然后置于恒溫培養箱中在溫度29°C的條件下斜面培養40小時;
[0112] B、種子培養
[0113] 制備液體種子培養基:將8g牛肉膏、2. 4g氯化鈉與10g蛋白胨溶于水中,再用水 補充到總體積l〇〇〇ml,然后使用0. 1N鹽酸或氫氧化鉀水溶液將得到的溶液pH值調節至pH 7. 1。
[0114] 將一環在步驟A得到的斜面培養物接種到液體種子培養基中,然后置于恒溫培養 箱中在溫度29°C與轉速180rpm的條件下培養6h,得到種子培養物;
[0115] C、發酵培養
[0116] 制備發酵培養基:將18g淀粉、1.8g玉米漿粉、5.0g蛋白胨、3. 5g氯化鈉、2. 5g Κ2ΗΡ04 ·3Η20、3. 0gNH4Cl與0. 4gMgS04 ·7Η20溶于水中,再用水補充到總體積1000ml,然后使 用0. 1N鹽酸或氫氧化鉀水溶液將得到的溶液pH值調節至pH 7. 0。
[0117] 按照以發酵培養基體積計6%接種量,將在步驟B得到的種子培養物轉接至發 酵培養基中,再置于發酵培養罐中,先在溫度29°C、轉速170rpm、風量1:1. 1與罐內壓力 0. 04MPa的條件下培養15h,接著在溫度32°C與轉速320rpm的條件下繼續發酵培養至40h, 采用本技術領域里常規的活菌平板計數法測定,在發酵結束后得到的發酵培養物含有106 億/ml解淀粉芽孢桿菌LX-J1。
[0118] 實施例3 :解淀粉芽孢桿菌LX-J1的培養
[0119] 該實施例的實施步驟如下:
[0120] A、斜面培養
[0121] 制備斜面培養基:將8g牛肉膏、2. 0g氯化鈉、7g蛋白胨與20g瓊脂溶于水中,再 用水補充到總體積l〇〇〇ml,然后使用2. 0N磷酸或氨水溶液將得到的溶液pH值調節至pH 7. 2。
[0122] 使用接種環挑取一環保存于甘油管中的解淀粉芽孢桿菌LX-J1接種于斜面培養 基斜面上,然后置于恒溫培養箱中在溫度30°C的條件下斜面培養44小時;
[0123] B、種子培養
[0124] 制備液體種子培養基:將5g牛肉膏、3. 6g氯化鈉與7g蛋白胨溶于水中,再用水補 充到總體積l〇〇〇ml,然后使用2. 0N磷酸或氨水溶液將得到的溶液pH值調節至pH 7. 2。
[0125] 將一環在步驟A得到的斜面培養物接種到液體種子培養基中,然后置于恒溫培養 箱中在溫度30°C與轉速180rpm的條件下培養10h,得到種子培養物;
[0126] C、發酵培養
[0127] 制備發酵培養基:將18g淀粉、2. 4g玉米楽:粉、2. 6g蛋白胨、1. 0g氯化鈉、3. 4g Κ2ΗΡ04 ·3Η20、1. 6gNH4Cl與0. lgMgS04 ·7Η20溶于水中,再用水補充到總體積1000ml,然后使 用2. 0N磷酸或氨水溶液將得到的溶液pH值調節至pH7. 4。
[0128] 按照以發酵培養基體積計8%接種量,將在步驟B得到的種子培養物轉接至發 酵培養基中,再置于發酵培養罐中,先在溫度30°C、轉速200rpm、風量1:1. 2與罐內壓力 0. 06MPa的條件下培養15h,接著在溫度34°C與轉速380rpm的條件下繼續發酵培養至45h, 采用本技術領域里常規的活菌平板計數法測定,在發酵結束后得到的發酵培養物含有120 億/ml解淀粉芽孢桿菌LX-J1。
[0129] 實施例4 :解淀粉芽孢桿菌LX-J1的培養
[0130] 該實施例的實施步驟如下:
[0131] A、斜面培養
[0132] 制備斜面培養基:將10g牛肉膏、5.0g氯化鈉、8g蛋白胨與20g瓊脂溶于水中,再 用水補充到總體積l〇〇〇ml,然后使用1. 4N鹽酸或氨水溶液將得到的溶液pH值調節至pH 7. 2。
[0133] 使用接種環挑取一環保存于甘油管中的解淀粉芽孢桿菌LX-J1接種于斜面培養 基斜面上,然后置于恒溫培養箱中在溫度30°C的條件下斜面培養46小時;
[0134] B、種子培養
[0135] 制備液體種子培養基:將10g牛肉膏、5. 0g氯化鈉與8g蛋白胨溶于水中,再用水 補充到總體積l〇〇〇ml,然后使用1. 4N鹽酸或氨水將得到的溶液pH值調節至pH 7. 2。
[0136] 將一環在步驟A得到的斜面培養物接種到液體種子培養基中,然后置于恒溫培養 箱中在溫度30°C與轉速180rpm的條件下培養8h,得到種子培養物;
[0137] C、發酵培養
[0138] 制備發酵培養基:將20g淀粉、3.0g玉米漿粉、3.6g蛋白胨、5.0g氯化鈉、5.0g Κ2ΗΡ04 ·3Η20、2. 4gNH4Cl與0. 5gMgS04 ·7Η20溶于水中,再用水補充到總體積1000ml,然后使 用1. 4N鹽酸或氨水溶液將得到的溶液pH值調節至pH 7. 5。
[0139] 按照以發酵培養基體積計10%接種量,將在步驟B得到的種子培養物轉接至發 酵培養基中,再置于發酵培養罐中,先在溫度30°C、轉速200rpm、風量1:1. 1與罐內壓力 0. 08MPa的條件下培養15h,接著在溫度35°C與轉速340rpm的條件下繼續發酵培養至40h, 采用本技術領域里常規的活菌平板計數法測定,在發酵結束后得到的發酵培養物含有115 億/ml解淀粉芽孢桿菌LX-J1。
[0140] 實施例5 :解淀粉芽孢桿菌LX-J1制劑的生產
[0141] 該實施例的實施步驟如下:
[0142] 往實施例1制備的解淀粉芽孢桿菌LX-J1發酵液中添加以金屬離子重量計為 0. 2%的硫酸銅、1. 0%的硫酸鋅與0. 4%的硫酸錳及0. 1 %黃原膠,得到所述的解淀粉芽孢 桿菌LX-J1制劑。采用本技術領域里常規的活菌平板計數法測定,每毫升解淀粉芽孢桿菌 LX-J1制劑含有103億個解淀粉芽孢桿菌LX-J1。
[0143] 實施例6 :解淀粉芽孢桿菌LX-J1制劑的生產
[0144] 該實施例的實施步驟如下:
[0145] 往實施例2制備的解淀粉芽孢桿菌LX-J1發酵液中添加以金屬離子重量計為 0. 1 %的硫酸銅、1. 4%的硫酸鋅與0. 1 %的硫酸錳0. 6%黃原膠,得到所述的解淀粉芽孢桿 菌LX-J1制劑。采用本技術領域里常規的活菌平板計數法測定,每毫升解淀粉芽孢桿菌 LX-J1制劑含有102億個解淀粉芽孢桿菌LX-J1。
[0146] 實施例7 :解淀粉芽孢桿菌LX-J1制劑的生產
[0147] 該實施例的實施步驟如下:
[0148] 往實施例的制備的解淀粉芽孢桿菌LX-J1發酵液中添加以金屬離子重量計為 0. 5%的硫酸銅、1. 8%的硫酸鋅與0. 5%的硫酸錳0. 3%黃原膠,得到所述的解淀粉芽孢桿 菌LX-J1制劑。采用本技術領域里常規的活菌平板計數法測定,每毫升解淀粉芽孢桿菌 LX-J1制劑含有110億個解淀粉芽孢桿菌LX-J1。
[0149] 實施例8 :解淀粉芽孢桿菌LX-J1制