本發(fa)明涉及生物工程技(ji)術領域，具體涉及一種利(li)用(yong)富硒酵母制備硒酵母低聚肽粉的工藝。
背景技術：
蛋白質(zhi)是(shi)(shi)生命的(de)物(wu)質(zhi)基礎，是(shi)(shi)人體(ti)生命活(huo)(huo)動的(de)重(zhong)要物(wu)質(zhi)，機(ji)體(ti)中的(de)每一(yi)個(ge)組織細胞(bao)和所(suo)有重(zhong)要的(de)生理活(huo)(huo)動，都有蛋白質(zhi)參與，沒有蛋白質(zhi)就沒有生命。
蛋白(bai)質是(shi)由一條(tiao)或多條(tiao)多肽(tai)(tai)鏈(lian)(lian)組(zu)成(cheng)(cheng)的(de)生物大分(fen)子(zi)，每一條(tiao)多肽(tai)(tai)鏈(lian)(lian)含有幾(ji)個(ge)到數百個(ge)氨(an)基(ji)酸殘基(ji)不(bu)等，肽(tai)(tai)鏈(lian)(lian)按(an)照一定的(de)順序排列組(zu)成(cheng)(cheng)各(ge)種不(bu)同功能的(de)蛋白(bai)質。
蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)低聚肽(含3-9個氨基(ji)(ji)酸分子組成)是蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)質經蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)酶等生物(wu)(wu)酶水解(jie)作用(yong)后(hou)，再經過(guo)特殊工(gong)藝處理(li)得到(dao)(dao)的(de)蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)質水解(jie)產物(wu)(wu)，水解(jie)產物(wu)(wu)中還(huan)含有少量的(de)氨基(ji)(ji)酸、B族維生素、核苷酸和無機鹽(yan)等有效(xiao)成分，水溶(rong)性好(hao)，具有口(kou)感好(hao)和極(ji)易(yi)于人體(ti)消化吸收利(li)用(yong)等特性；蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)低聚肽具有以(yi)下(xia)生物(wu)(wu)學功(gong)能(neng)(neng)(neng)：1、增強人體(ti)肌肉活(huo)力(li)，加(jia)速(su)(su)肌紅蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)恢復(fu)。由于肽易(yi)于吸收，能(neng)(neng)(neng)迅速(su)(su)利(li)用(yong)，抑制(zhi)了(le)體(ti)內(nei)“負氮平衡”的(de)過(guo)程(cheng)，減(jian)慢肌蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)的(de)分解(jie)，加(jia)速(su)(su)體(ti)內(nei)正常蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)質的(de)合成，維護生理(li)機能(neng)(neng)(neng)，達(da)到(dao)(dao)抗疲勞的(de)效(xiao)果。2、促(cu)進能(neng)(neng)(neng)量代謝，蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)低聚肽比(bi)蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)質更能(neng)(neng)(neng)促(cu)進能(neng)(neng)(neng)量代謝。3、降低人體(ti)血清膽固醇，蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)低聚肽比(bi)蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)質更能(neng)(neng)(neng)阻(zu)礙腸道內(nei)膽固醇的(de)吸收，并加(jia)速(su)(su)其排(pai)出體(ti)外。
硒是(shi)人體(ti)必需的微量元素，是(shi)體(ti)內多(duo)種含硒蛋白質及含硒酶的重(zhong)要(yao)組(zu)成成分，具有提高(gao)人體(ti)免疫(yi)力、抗氧化、抗癌(ai)、抗艾(ai)滋病、維(wei)持正常生育(yu)、預防大骨節病的生理(li)功能。
而現有技術(shu)中還沒有見(jian)到利用富硒(xi)酵母(mu)來制(zhi)備硒(xi)酵母(mu)低聚肽粉的技術(shu)方案，鑒于此，提出本申請。
技術實現要素：
本發明所要解(jie)決的技術問題在于(yu)提高一種方法易于(yu)實現，經(jing)濟(ji)效益好(hao)的利用富(fu)硒酵(jiao)母制備硒酵(jiao)母低聚(ju)肽粉的工藝。
本發明所要解(jie)決(jue)的(de)技(ji)術問題采用以下技(ji)術方案(an)來實現(xian)：
一種利用富(fu)硒酵(jiao)母(mu)(mu)制備(bei)硒酵(jiao)母(mu)(mu)低聚肽粉的工(gong)藝，具體方法(fa)步(bu)驟(zou)如下：
(1)將釀酒酵進行搖床培養(yang)，再利用一級種子罐(guan)(guan)、二級種子罐(guan)(guan)及三(san)級種子罐(guan)(guan)逐級擴大培養(yang)，得(de)(de)到的培養(yang)物送入發酵罐(guan)(guan)，加入亞硒(xi)酸鈉進行發酵培養(yang)，經離心洗滌制得(de)(de)富硒(xi)酵母；
(2)采(cai)用蛋白酶(mei)(mei)對富硒(xi)酵(jiao)母(mu)酶(mei)(mei)解(jie)(jie)(jie)，底物濃(nong)度(du)為(wei)12％，pH維持在(zai),3-4,得到富硒(xi)酵(jiao)母(mu)酶(mei)(mei)解(jie)(jie)(jie)液；加(jia)酶(mei)(mei)及酶(mei)(mei)解(jie)(jie)(jie)時間因(yin)底物濃(nong)度(du)不(bu)同而異，本工藝確定蛋白質底物濃(nong)度(du)為(wei)12％。
(3)將富(fu)硒酵(jiao)母酶解(jie)液在溫度53-55℃，自(zi)然(ran)pH值下自(zi)溶2小(xiao)時，在自(zi)溶階段(duan)加入質(zhi)壁(bi)分離(li)劑(ji)(ji)，其中(zhong)質(zhi)壁(bi)分離(li)劑(ji)(ji)的加入量為富(fu)硒酵(jiao)母酶解(jie)液重(zhong)量的1-2％；
自(zi)溶是借助酵母菌體(ti)內的內源酶(mei)(蛋白酶(mei)、核酸酶(mei)、碳(tan)水(shui)化(hua)合物水(shui)解酶(mei)等)，將菌體(ti)細胞(bao)壁等大(da)分(fen)子物質部分(fen)酶(mei)解，降(jiang)低生(sheng)產成(cheng)本，并產生(sheng)風(feng)味物質成(cheng)份。
上述質壁分離劑為氯(lv)化鈉(na)或(huo)磷酸(suan)鹽緩沖液中(zhong)的一(yi)種或(huo)者(zhe)二者(zhe)的混合物。
(4)將自溶后的(de)(de)富(fu)硒(xi)酵(jiao)(jiao)(jiao)母酶(mei)解液的(de)(de)pH值調節至6-7，酵(jiao)(jiao)(jiao)母蛋白酶(mei)作用(yong)的(de)(de)最佳pH為(wei)(wei)5-8，合適(shi)的(de)(de)pH值能加(jia)速酶(mei)解并使產品(pin)風味獨(du)特；然后加(jia)入(ru)復(fu)(fu)合生物(wu)酶(mei)制(zhi)劑，復(fu)(fu)合生物(wu)酶(mei)制(zhi)劑的(de)(de)加(jia)入(ru)量為(wei)(wei)富(fu)硒(xi)酵(jiao)(jiao)(jiao)母重量的(de)(de)0.1-0.2％，得(de)到酶(mei)解液待(dai)用(yong)；
所述復合生物(wu)酶(mei)(mei)制(zhi)劑主要有細(xi)胞(bao)壁溶解酶(mei)(mei)、內切酶(mei)(mei)、外切酶(mei)(mei)和風(feng)(feng)味(wei)酶(mei)(mei)等酶(mei)(mei)，按任(ren)意比例(li)進行組合；其中細(xi)胞(bao)壁溶解酶(mei)(mei)的(de)作用是溶解細(xi)胞(bao)壁，內切酶(mei)(mei)把(ba)蛋(dan)白質分拆成(cheng)肽(tai)(tai)類，外切酶(mei)(mei)把(ba)大分子肽(tai)(tai)分解成(cheng)小(xiao)分子肽(tai)(tai)及部分氨基酸，風(feng)(feng)味(wei)酶(mei)(mei)產生自然純正(zheng)的(de)香味(wei)物(wu)質；
(5)將酶(mei)(mei)(mei)解液(ye)在溫(wen)度55±2℃下水解20-24小(xiao)時(shi)，酶(mei)(mei)(mei)解后(hou)，把酶(mei)(mei)(mei)解液(ye)加熱(re)到85℃-90℃，保溫(wen)2小(xiao)時(shi)，將溶液(ye)中的酶(mei)(mei)(mei)滅活，保證產品質量(liang)穩(wen)定，收率高(gao)，之后(hou)進行超(chao)濾，收集濾液(ye)，得到多肽濾液(ye)；
實驗證實，水解時(shi)間控(kong)制在(zai)20-24小時(shi)最佳，時(shi)間過短(duan)，蛋(dan)(dan)白質水解不完全，時(shi)間過長分(fen)解過度，小肽(tai)(tai)得率低，生產周期長效率低。因(yin)為分(fen)子(zi)(zi)量(liang)(liang)小于1000(即9肽(tai)(tai)以下)的(de)蛋(dan)(dan)白質低聚肽(tai)(tai)才有高效的(de)生物作用(yong)，本工藝采(cai)用(yong)截流分(fen)子(zi)(zi)量(liang)(liang)小于1000的(de)超(chao)濾膜(mo)分(fen)離濾液(ye)，保(bao)留分(fen)子(zi)(zi)量(liang)(liang)在(zai)1000以下的(de)硒蛋(dan)(dan)白小肽(tai)(tai)。
(6)將超濾后得到的多(duo)肽(tai)濾液(ye)進行(xing)納(na)濾脫鹽，得到脫鹽肽(tai)液(ye)；由(you)于酶解工藝(yi)中(zhong)加入NaCL、磷酸(suan)鹽等無機鹽，采(cai)用納(na)濾分離工藝(yi)脫去(qu)NaCL等鹽類，將產品純化，除去(qu)無效成(cheng)份，以免影響產品口感及功效，保(bao)證產品質量。
(7)對脫鹽肽液(ye)進行濃(nong)縮、干燥，即可(ke)得到(dao)硒酵母低聚肽粉(fen)。
其中濃縮采用低溫濃縮方(fang)式(shi)(shi)進行，干(gan)燥(zao)采用離心(xin)噴(pen)霧干(gan)燥(zao)方(fang)式(shi)(shi)，干(gan)燥(zao)溫度為50℃，不會破壞產品中的(de)(de)有效成份，能完(wan)全保(bao)證(zheng)產品的(de)(de)品質。
以(yi)富(fu)硒(xi)(xi)酵(jiao)(jiao)(jiao)母48kg計算，本申請中硒(xi)(xi)酵(jiao)(jiao)(jiao)母低(di)聚(ju)肽(tai)粉(fen)的(de)(de)產(chan)量為18.8kg，其(qi)中硒(xi)(xi)酵(jiao)(jiao)(jiao)母低(di)聚(ju)肽(tai)粉(fen)硒(xi)(xi)含量686ug/g，硒(xi)(xi)酵(jiao)(jiao)(jiao)母低(di)聚(ju)肽(tai)粉(fen)純度68％(硒(xi)(xi)酵(jiao)(jiao)(jiao)母蛋白(bai)小(xiao)肽(tai)的(de)(de)含量)，硒(xi)(xi)酵(jiao)(jiao)(jiao)母低(di)聚(ju)肽(tai)粉(fen)生產(chan)收(shou)率18.8/48＝39.16％。
如專利(li)號為CN01100600.5的發明專利(li)：含(han)有高生(sheng)物量的富(fu)硒(xi)酵母及(ji)其生(sheng)產方法(fa)(fa)，本(ben)申請補助(1)的富(fu)硒(xi)酵母制備方法(fa)(fa)可以按照上述專利(li)的方法(fa)(fa)進行
在肽(tai)(tai)的(de)(de)范疇里，多肽(tai)(tai)的(de)(de)分子量(liang)比低聚(ju)肽(tai)(tai)的(de)(de)分子量(liang)要(yao)大得多，低聚(ju)肽(tai)(tai)在人(ren)(ren)體內幾乎可以(yi)達(da)到不(bu)需消(xiao)化即(ji)可被(bei)人(ren)(ren)體吸收的(de)(de)程度，不(bu)增(zeng)加胃(wei)腸(chang)的(de)(de)消(xiao)化負擔，所以(yi)對(dui)于人(ren)(ren)體的(de)(de)營養改善(shan)作用(yong)(yong)很大，尤其是對(dui)于胃(wei)腸(chang)消(xiao)化功(gong)能(neng)(neng)不(bu)好的(de)(de)人(ren)(ren)群，并(bing)且低聚(ju)肽(tai)(tai)對(dui)于人(ren)(ren)體是有(you)(you)多方面的(de)(de)生(sheng)理功(gong)能(neng)(neng)的(de)(de)：1、抑制(zhi)細(xi)胞(bao)(bao)變(bian)性，增(zeng)強人(ren)(ren)體的(de)(de)免疫力；2、激活細(xi)胞(bao)(bao)活性，有(you)(you)效清(qing)除對(dui)人(ren)(ren)體有(you)(you)害的(de)(de)自由基；3、修復人(ren)(ren)體變(bian)性細(xi)胞(bao)(bao)，改善(shan)細(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)新陳(chen)代謝(xie)；4、促進(jin)、維持細(xi)胞(bao)(bao)正(zheng)常的(de)(de)新陳(chen)代謝(xie)功(gong)能(neng)(neng)。低聚(ju)肽(tai)(tai)是卓越的(de)(de)蛋白質(zhi)補(bu)充(chong)物，因為(wei)它本質(zhi)上和蛋白質(zhi)是同類(lei)物質(zhi)，是蛋白質(zhi)的(de)(de)組成(cheng)單位，能(neng)(neng)夠為(wei)人(ren)(ren)體補(bu)充(chong)蛋白質(zhi)，同時低聚(ju)肽(tai)(tai)的(de)(de)分子量(liang)很小，可以(yi)直(zhi)接被(bei)人(ren)(ren)體吸收利用(yong)(yong)，吸收效率更(geng)高，達(da)到100％吸收的(de)(de)特點。
本申請(qing)生(sheng)(sheng)(sheng)產(chan)的(de)硒(xi)酵母(mu)低聚(ju)肽粉，是以本公司(si)生(sheng)(sheng)(sheng)產(chan)的(de)產(chan)品富硒(xi)酵母(mu)為原料，應用現代生(sheng)(sheng)(sheng)物工(gong)程(cheng)技術(shu)(shu)，加入生(sheng)(sheng)(sheng)物酶(mei)(mei)制(zhi)劑(ji)，將富硒(xi)酵母(mu)經酶(mei)(mei)解轉化(hua)后，再經過超濾、納濾等現代分(fen)離純化(hua)技術(shu)(shu)生(sheng)(sheng)(sheng)產(chan)出來的(de)生(sheng)(sheng)(sheng)物技術(shu)(shu)產(chan)品-硒(xi)酵母(mu)低聚(ju)肽粉，該(gai)產(chan)品口(kou)感好，極易于(yu)人體消化(hua)吸收利(li)用，能迅速補充蛋白質(zhi)，增強人體免(mian)疫力，有抗疲(pi)勞(lao)、抗氧化(hua)、美容護膚的(de)效果。
將上述硒酵母(mu)低聚(ju)肽粉(fen)用于化(hua)妝品中可(ke)以制成富硒化(hua)妝品，能夠防止(zhi)老人皮膚老化(hua)，修復(fu)細胞，治療老年斑。
本(ben)發(fa)明的有益效果是：
1、硒(xi)(xi)酵母低聚肽粉是我公(gong)司奉(feng)獻(xian)給市(shi)場(chang)的(de)又一個高科技(ji)生(sheng)物技(ji)術產(chan)品，填補了此類(lei)產(chan)品的(de)市(shi)場(chang)空(kong)白，蛋白小肽能(neng)(neng)迅速(su)為人(ren)體(ti)吸收(shou)利用(yong)(yong)，減(jian)緩蛋白質(zhi)的(de)降解(jie)，加速(su)體(ti)內正常蛋白質(zhi)的(de)合成補給，有機硒(xi)(xi)易為人(ren)體(ti)吸收(shou)利用(yong)(yong)且對(dui)人(ren)體(ti)無(wu)毒副作用(yong)(yong)，對(dui)人(ren)體(ti)有顯著的(de)生(sheng)理保健功能(neng)(neng)。
2、此產(chan)(chan)品(pin)生(sheng)(sheng)產(chan)(chan)工(gong)藝(yi)獨特，技(ji)術含量高，創新性(xing)強(qiang)，采用了(le)復合生(sheng)(sheng)物酶制劑進(jin)行酶解，簡(jian)化了(le)生(sheng)(sheng)產(chan)(chan)工(gong)序，提高了(le)生(sheng)(sheng)產(chan)(chan)效率；應用了(le)當前國際先進(jin)的(de)分(fen)子膜分(fen)離(li)技(ji)術分(fen)離(li)純化產(chan)(chan)品(pin)。新材料新技(ji)術的(de)應用充分(fen)保證了(le)產(chan)(chan)品(pin)質量的(de)穩定。
3、將硒(xi)酵母破(po)壁后的(de)蛋白質(zhi)水解生(sheng)成(cheng)(cheng)(cheng)以硒(xi)蛋白低聚(ju)肽(含(han)(han)3-9個(ge)硒(xi)代氨基酸分子組成(cheng)(cheng)(cheng))為(wei)主，兼含(han)(han)核苷(gan)酸、氨基酸、B族維生(sheng)素、礦物質(zhi)等成(cheng)(cheng)(cheng)份的(de)復合物，再(zai)經過超(chao)濾(lv)、納(na)濾(lv)、濃(nong)縮、離心干燥等獨特工藝精制(zhi)而成(cheng)(cheng)(cheng)，產(chan)(chan)品生(sheng)產(chan)(chan)工藝先進，富有創新性，充分利用(yong)了國(guo)際(ji)前(qian)沿(yan)的(de)生(sheng)物酶解技(ji)術(shu)，超(chao)濾(lv)、納(na)濾(lv)分離純化等新材(cai)料新技(ji)術(shu)，填(tian)補了此項(xiang)產(chan)(chan)品的(de)市場空白。
具體實施方式
為了使本發明實(shi)現的技術手(shou)段、創(chuang)作特征、達成目的與(yu)功效易于明白(bai)了解，下面結合具體實(shi)施例，進一步闡述本發明。
實施例1
一種利用富硒酵(jiao)母(mu)制備硒酵(jiao)母(mu)低(di)聚肽(tai)粉的工藝(yi)，具(ju)體方(fang)法步驟如下：
(1)將釀(niang)酒(jiu)酵進行(xing)搖床培(pei)養(yang)，再利用(yong)一級(ji)種子(zi)罐、二(er)級(ji)種子(zi)罐及三級(ji)種子(zi)罐逐級(ji)擴大培(pei)養(yang)，得到的(de)培(pei)養(yang)物送入(ru)發酵罐，加入(ru)亞硒酸鈉進行(xing)發酵培(pei)養(yang)，經(jing)離(li)心洗滌制得富硒酵母；
(2)采用(yong)蛋(dan)白酶(mei)(mei)對富(fu)硒(xi)酵母酶(mei)(mei)解，底物(wu)(wu)濃度為12％，pH維持在,4,得到(dao)富(fu)硒(xi)酵母酶(mei)(mei)解液；加酶(mei)(mei)及酶(mei)(mei)解時間因底物(wu)(wu)濃度不同而異，本工藝確定蛋(dan)白質底物(wu)(wu)濃度為12％。
(3)將富硒酵(jiao)母(mu)酶解液在(zai)溫度55℃，自然pH值下自溶2小時(shi)，在(zai)自溶階段加入質(zhi)(zhi)壁(bi)分離劑，其中質(zhi)(zhi)壁(bi)分離劑的(de)加入量(liang)為富硒酵(jiao)母(mu)酶解液重量(liang)的(de)1％；
自溶是借助酵母(mu)菌體內的內源(yuan)酶(mei)(mei)(mei)(蛋(dan)白酶(mei)(mei)(mei)、核(he)酸酶(mei)(mei)(mei)、碳水(shui)化合物水(shui)解酶(mei)(mei)(mei)等(deng))，將菌體細(xi)胞壁等(deng)大分子(zi)物質部分酶(mei)(mei)(mei)解，降低生(sheng)產(chan)成本，并產(chan)生(sheng)風味物質成份(fen)。
上述質(zhi)壁分離(li)劑為氯(lv)化鈉(na)或(huo)磷酸鹽緩沖液(ye)中的(de)一種或(huo)者(zhe)二者(zhe)的(de)混(hun)合物。
(4)將(jiang)自溶后的(de)富硒(xi)酵(jiao)母(mu)酶解液(ye)的(de)pH值(zhi)調(diao)節至7，酵(jiao)母(mu)蛋白酶作用的(de)最佳(jia)pH為(wei)5-8，合適的(de)pH值(zhi)能(neng)加(jia)速酶解并使產品風(feng)味(wei)獨(du)特(te)；然后加(jia)入復合生物(wu)酶制(zhi)劑，復合生物(wu)酶制(zhi)劑的(de)加(jia)入量為(wei)富硒(xi)酵(jiao)母(mu)重量的(de)0.2％，得到酶解液(ye)待(dai)用；
所述復(fu)合(he)生物(wu)酶(mei)(mei)制劑主要有細胞壁(bi)溶解酶(mei)(mei)、內(nei)切(qie)酶(mei)(mei)、外切(qie)酶(mei)(mei)和(he)風(feng)味(wei)(wei)酶(mei)(mei)等酶(mei)(mei)，按任(ren)意比例(li)進(jin)行組合(he)；其中(zhong)細胞壁(bi)溶解酶(mei)(mei)的(de)作用是溶解細胞壁(bi)，內(nei)切(qie)酶(mei)(mei)把(ba)蛋白質(zhi)分(fen)拆成(cheng)(cheng)肽類，外切(qie)酶(mei)(mei)把(ba)大分(fen)子肽分(fen)解成(cheng)(cheng)小分(fen)子肽及部分(fen)氨基(ji)酸，風(feng)味(wei)(wei)酶(mei)(mei)產生自(zi)然純正(zheng)的(de)香味(wei)(wei)物(wu)質(zhi)；
(5)將酶解(jie)液(ye)在溫(wen)度55±2℃下水(shui)解(jie)20-24小時，酶解(jie)后，把酶解(jie)液(ye)加熱到(dao)(dao)85℃-90℃，保溫(wen)2小時，將溶液(ye)中的酶滅活，保證產品質(zhi)量穩定，收率高，之后進行超濾(lv)，收集濾(lv)液(ye)，得到(dao)(dao)多肽濾(lv)液(ye)；
實(shi)驗(yan)證(zheng)實(shi)，水解時(shi)間(jian)控制在(zai)20-24小(xiao)時(shi)最佳，時(shi)間(jian)過(guo)短，蛋(dan)白質水解不完全，時(shi)間(jian)過(guo)長(chang)分(fen)解過(guo)度，小(xiao)肽(tai)得率低，生產周期(qi)長(chang)效率低。因為(wei)分(fen)子(zi)量(liang)(liang)小(xiao)于1000(即9肽(tai)以下)的(de)(de)蛋(dan)白質低聚(ju)肽(tai)才(cai)有高效的(de)(de)生物作用(yong)，本(ben)工藝采用(yong)截流分(fen)子(zi)量(liang)(liang)小(xiao)于1000的(de)(de)超濾膜(mo)分(fen)離濾液，保留分(fen)子(zi)量(liang)(liang)在(zai)1000以下的(de)(de)硒蛋(dan)白小(xiao)肽(tai)。
(6)將超濾后得到(dao)的多(duo)肽濾液(ye)進行納(na)濾脫(tuo)鹽，得到(dao)脫(tuo)鹽肽液(ye)；由于酶解(jie)工藝中(zhong)加入NaCL、磷酸鹽等無機(ji)鹽，采用納(na)濾分離(li)工藝脫(tuo)去(qu)NaCL等鹽類，將產(chan)品(pin)(pin)純化(hua)，除(chu)去(qu)無效成份，以免影響產(chan)品(pin)(pin)口感及功(gong)效，保證產(chan)品(pin)(pin)質量。
(7)對脫鹽肽(tai)液進(jin)行濃縮(suo)、干燥(zao)，即可得到硒酵(jiao)母低聚肽(tai)粉。
其中濃縮(suo)采(cai)用(yong)低(di)溫濃縮(suo)方式(shi)進行，干燥(zao)采(cai)用(yong)離心噴霧干燥(zao)方式(shi)，干燥(zao)溫度為50℃，不(bu)會破(po)壞產品中的有(you)效(xiao)成(cheng)份(fen)，能(neng)完全保(bao)證(zheng)產品的品質。
以(yi)富(fu)硒(xi)(xi)酵(jiao)母(mu)48kg計(ji)算，本申請中(zhong)(zhong)硒(xi)(xi)酵(jiao)母(mu)低聚肽(tai)粉的產量為(wei)18.8kg，其中(zhong)(zhong)硒(xi)(xi)酵(jiao)母(mu)低聚肽(tai)粉硒(xi)(xi)含(han)量686ug/g，硒(xi)(xi)酵(jiao)母(mu)低聚肽(tai)粉純度68％(硒(xi)(xi)酵(jiao)母(mu)蛋白小肽(tai)的含(han)量)，硒(xi)(xi)酵(jiao)母(mu)低聚肽(tai)粉生產收率18.8/48＝39.16％。
實施例2
一種利(li)用(yong)富硒(xi)酵(jiao)母(mu)制備硒(xi)酵(jiao)母(mu)低聚肽粉的工藝(yi)，具體方法步驟如下(xia)：
(1)采用蛋(dan)白(bai)酶對富硒酵母酶解，底物(wu)(wu)濃(nong)度為(wei)12％，pH維持在,3,得到(dao)富硒酵母酶解液；加酶及酶解時間因底物(wu)(wu)濃(nong)度不同(tong)而異，本工藝確定蛋(dan)白(bai)質底物(wu)(wu)濃(nong)度為(wei)12％。
(2)將富硒(xi)酵母酶(mei)解液(ye)在(zai)(zai)溫度(du)53℃，自(zi)然pH值下自(zi)溶2小時(shi)，在(zai)(zai)自(zi)溶階段加(jia)入質(zhi)壁(bi)分離劑，其(qi)中質(zhi)壁(bi)分離劑的加(jia)入量為富硒(xi)酵母酶(mei)解液(ye)重量的2％；
自溶是(shi)借(jie)助(zhu)酵母菌(jun)體內的(de)內源(yuan)酶(蛋白酶、核酸(suan)酶、碳水化(hua)合(he)物(wu)(wu)水解(jie)酶等)，將(jiang)菌(jun)體細胞(bao)壁等大分子物(wu)(wu)質部(bu)分酶解(jie)，降低生產成本(ben)，并(bing)產生風味(wei)物(wu)(wu)質成份(fen)。
上述質(zhi)壁分(fen)離(li)劑為氯化(hua)鈉(na)或磷酸鹽緩沖液中的(de)一種或者二者的(de)混(hun)合物。
(3)將自溶后的富硒(xi)酵(jiao)母酶(mei)解液的pH值調節至6，酵(jiao)母蛋白酶(mei)作用的最佳(jia)pH為(wei)5-8，合適的pH值能加(jia)速酶(mei)解并使產品風(feng)味獨特；然后加(jia)入復合生(sheng)(sheng)物(wu)酶(mei)制劑，復合生(sheng)(sheng)物(wu)酶(mei)制劑的加(jia)入量為(wei)富硒(xi)酵(jiao)母重量的0.1％，得到酶(mei)解液待(dai)用；
所述復合生(sheng)物酶(mei)(mei)制劑(ji)主要(yao)有(you)細(xi)(xi)胞壁溶(rong)解酶(mei)(mei)、內切(qie)酶(mei)(mei)、外切(qie)酶(mei)(mei)和風味(wei)酶(mei)(mei)等(deng)酶(mei)(mei)，按任意比例進行組合；其中細(xi)(xi)胞壁溶(rong)解酶(mei)(mei)的作用是溶(rong)解細(xi)(xi)胞壁，內切(qie)酶(mei)(mei)把蛋白(bai)質分拆成肽(tai)類，外切(qie)酶(mei)(mei)把大(da)分子肽(tai)分解成小分子肽(tai)及(ji)部分氨基酸，風味(wei)酶(mei)(mei)產生(sheng)自然純正的香(xiang)味(wei)物質；
(4)將酶(mei)(mei)解液在溫度55±2℃下水解20-24小時，酶(mei)(mei)解后，把酶(mei)(mei)解液加熱到85℃-90℃，保(bao)(bao)溫2小時，將溶(rong)液中的酶(mei)(mei)滅活，保(bao)(bao)證產品質(zhi)量穩(wen)定，收率高，之后進行(xing)超濾，收集(ji)濾液，得到多肽濾液；
實驗證(zheng)實，水解(jie)時間(jian)控(kong)制(zhi)在20-24小(xiao)時最佳(jia)，時間(jian)過(guo)(guo)短，蛋白質水解(jie)不完全(quan)，時間(jian)過(guo)(guo)長(chang)分(fen)(fen)解(jie)過(guo)(guo)度，小(xiao)肽得率(lv)低(di)，生(sheng)產周(zhou)期長(chang)效率(lv)低(di)。因為分(fen)(fen)子量小(xiao)于1000(即9肽以(yi)下)的(de)(de)蛋白質低(di)聚肽才有高效的(de)(de)生(sheng)物(wu)作(zuo)用，本(ben)工藝(yi)采(cai)用截流分(fen)(fen)子量小(xiao)于1000的(de)(de)超濾膜分(fen)(fen)離濾液，保留分(fen)(fen)子量在1000以(yi)下的(de)(de)硒蛋白小(xiao)肽。
(5)將超(chao)濾后得到的多肽濾液(ye)進行(xing)納(na)濾脫(tuo)鹽，得到脫(tuo)鹽肽液(ye)；由(you)于酶解工藝(yi)中加入(ru)NaCL、磷酸鹽等(deng)無機鹽，采用納(na)濾分離工藝(yi)脫(tuo)去(qu)NaCL等(deng)鹽類，將產品(pin)純(chun)化，除(chu)去(qu)無效成(cheng)份，以免影響產品(pin)口感及(ji)功(gong)效，保證產品(pin)質(zhi)量。
(6)對脫鹽肽液(ye)進行濃縮、干燥，即可得到硒酵母低聚肽粉。
其中濃縮采(cai)用(yong)低溫(wen)濃縮方式進行，干(gan)(gan)燥采(cai)用(yong)離(li)心噴霧干(gan)(gan)燥方式，干(gan)(gan)燥溫(wen)度為50℃，不會(hui)破壞產品中的(de)有效成(cheng)份，能完全保(bao)證(zheng)產品的(de)品質。
上述富(fu)硒(xi)(xi)(xi)酵(jiao)母(mu)(mu)(mu)采用高(gao)硒(xi)(xi)(xi)酵(jiao)母(mu)(mu)(mu)粉(fen)，該高(gao)硒(xi)(xi)(xi)酵(jiao)母(mu)(mu)(mu)粉(fen)是將高(gao)硒(xi)(xi)(xi)酵(jiao)母(mu)(mu)(mu)漿制成干粉(fen)形態，其中(zhong)高(gao)硒(xi)(xi)(xi)酵(jiao)母(mu)(mu)(mu)粉(fen)硒(xi)(xi)(xi)含(han)(han)量(liang)(liang)為1560ug/g。以(yi)富(fu)硒(xi)(xi)(xi)酵(jiao)母(mu)(mu)(mu)48kg計算，本申請中(zhong)硒(xi)(xi)(xi)酵(jiao)母(mu)(mu)(mu)低(di)聚(ju)肽(tai)粉(fen)的產量(liang)(liang)為18.8kg，其中(zhong)硒(xi)(xi)(xi)酵(jiao)母(mu)(mu)(mu)低(di)聚(ju)肽(tai)粉(fen)硒(xi)(xi)(xi)含(han)(han)量(liang)(liang)686ug/g，硒(xi)(xi)(xi)酵(jiao)母(mu)(mu)(mu)低(di)聚(ju)肽(tai)粉(fen)純度68％(硒(xi)(xi)(xi)酵(jiao)母(mu)(mu)(mu)蛋白小肽(tai)的含(han)(han)量(liang)(liang))，硒(xi)(xi)(xi)酵(jiao)母(mu)(mu)(mu)低(di)聚(ju)肽(tai)粉(fen)生產收率18.8/48＝39.16％。
以上顯示和(he)(he)(he)(he)描述(shu)了本(ben)(ben)(ben)發明(ming)(ming)的(de)(de)(de)基本(ben)(ben)(ben)原理和(he)(he)(he)(he)主要(yao)特征和(he)(he)(he)(he)本(ben)(ben)(ben)發明(ming)(ming)的(de)(de)(de)優點(dian)。本(ben)(ben)(ben)行業的(de)(de)(de)技術人員應該(gai)了解，本(ben)(ben)(ben)發明(ming)(ming)不受上述(shu)實施(shi)例(li)的(de)(de)(de)限制，上述(shu)實施(shi)例(li)和(he)(he)(he)(he)說(shuo)明(ming)(ming)書中描述(shu)的(de)(de)(de)只(zhi)是說(shuo)明(ming)(ming)本(ben)(ben)(ben)發明(ming)(ming)的(de)(de)(de)原理，在(zai)不脫離本(ben)(ben)(ben)發明(ming)(ming)精神和(he)(he)(he)(he)范圍(wei)(wei)的(de)(de)(de)前提(ti)下(xia)，本(ben)(ben)(ben)發明(ming)(ming)還(huan)會(hui)有各種(zhong)變化和(he)(he)(he)(he)改進，這些變化和(he)(he)(he)(he)改進都落入要(yao)求(qiu)保護(hu)的(de)(de)(de)本(ben)(ben)(ben)發明(ming)(ming)范圍(wei)(wei)內。本(ben)(ben)(ben)發明(ming)(ming)要(yao)求(qiu)保護(hu)范圍(wei)(wei)由所附的(de)(de)(de)權利要(yao)求(qiu)書及其等效物界定。