本發明涉(she)及有(you)機化工技術領(ling)域，特(te)別是一種(zhong)三唑酰(xian)胺(an)酮(tong)類殺(sha)菌劑(ji)及其(qi)合成方法。

背景技術：

為了應對不斷變異的細菌和真菌以及各種不同條件下對殺菌劑使用限制的需求，研究開發出更多具有更好抑菌活性的新型殺菌劑，是促進殺菌劑發展的關鍵。目前商品化的三唑類殺菌劑的特點在于：大多數殺菌劑的藥效團三唑環都連接在碳鏈上，且分子結構中含有酰胺鍵的殺菌劑有很多，但三唑類殺菌劑分子結構中含有酰胺鍵的卻很少見報道。目前商業化的殺菌劑存在抑菌活性不夠理想、半抑制濃度(IC₅₀)較高等問題。

技術實現要素：

本發(fa)明(ming)的主要目的在于提供一種三唑(zuo)酰胺酮類殺菌(jun)劑(ji)及(ji)其合成方法。

本發(fa)明的技術(shu)方(fang)案如下：

一種三(san)唑酰(xian)胺(an)酮(tong)類殺菌劑(ji)，所述殺菌劑(ji)化學結構式(shi)為：

其中，取代基R₁和R₂為苯(ben)(ben)(ben)(ben)基(ji)或(huo)(huo)(huo)(huo)對(dui)(dui)(dui)氯(lv)苯(ben)(ben)(ben)(ben)基(ji)或(huo)(huo)(huo)(huo)對(dui)(dui)(dui)溴(xiu)苯(ben)(ben)(ben)(ben)基(ji)或(huo)(huo)(huo)(huo)對(dui)(dui)(dui)氟(fu)苯(ben)(ben)(ben)(ben)基(ji)或(huo)(huo)(huo)(huo)鄰(lin)氟(fu)苯(ben)(ben)(ben)(ben)基(ji)或(huo)(huo)(huo)(huo)鄰(lin)氯(lv)苯(ben)(ben)(ben)(ben)基(ji)或(huo)(huo)(huo)(huo)2,4-二氯(lv)苯(ben)(ben)(ben)(ben)基(ji)或(huo)(huo)(huo)(huo)2,4-二氟(fu)苯(ben)(ben)(ben)(ben)基(ji)或(huo)(huo)(huo)(huo)叔丁基(ji)或(huo)(huo)(huo)(huo)鄰(lin)甲基(ji)苯(ben)(ben)(ben)(ben)基(ji)或(huo)(huo)(huo)(huo)間氟(fu)苯(ben)(ben)(ben)(ben)基(ji)或(huo)(huo)(huo)(huo)對(dui)(dui)(dui)三氟(fu)甲基(ji)苯(ben)(ben)(ben)(ben)基(ji)或(huo)(huo)(huo)(huo)鄰(lin)甲基(ji)對(dui)(dui)(dui)氯(lv)苯(ben)(ben)(ben)(ben)基(ji)及其他(ta)共軛體系，取代(dai)基(ji)位置、個(ge)數(shu)以及共軛位置不固定。

合成所(suo)述(shu)的三唑酰胺酮類殺菌(jun)劑的方(fang)法(fa)(fa)，所(suo)述(shu)方(fang)法(fa)(fa)包括以(yi)下合成路徑：

1)室溫條件下，向(xiang)反應瓶中加(jia)入二(er)(er)氯(lv)甲烷(wan)，稱取三苯(ben)基膦和六氯(lv)乙烷(wan)溶于二(er)(er)氯(lv)甲烷(wan)中，攪拌1小時；

2)將所述步驟1)中的(de)反(fan)應體系置于0℃下，向反(fan)應瓶(ping)中加入化合(he)物1，化合(he)物2，緩慢(man)滴加有機堿，滴加完畢后于0℃下繼續攪(jiao)拌反(fan)應1～2小時；

所(suo)述(shu)化合物(wu)1為1,2,4-三唑(zuo)-1-乙酸，所(suo)述(shu)化合物(wu)2為α-氨基酮衍生物(wu)；

3)取(qu)所述步驟(zou)2)的反應液TLC監測，反應完(wan)畢后(hou)，減壓除去溶劑二氯甲烷，剩(sheng)余物經硅膠(jiao)柱(zhu)進行柱(zhu)層析分離(li)純化得到化合物3；

完成三唑(zuo)酰胺酮類殺菌劑的合成。

所(suo)述步驟1)三苯基膦與六氯乙烷(wan)的投(tou)(tou)料(liao)比為(wei)(wei)1:1，攪(jiao)拌時間為(wei)(wei)1小時。改變投(tou)(tou)料(liao)比，化(hua)合(he)物(wu)3的收率會有較大提高；攪(jiao)拌時間不低(di)于(yu)1小時，以使反(fan)應能充分(fen)進行，否(fou)則反(fan)應收率降低(di)。

所述步驟2)反(fan)(fan)應溫度為0℃。在此反(fan)(fan)應溫度下有(you)利于反(fan)(fan)應平穩進行(xing)，減(jian)少副產(chan)物(wu)生成。高于此反(fan)(fan)應溫度反(fan)(fan)應將加劇(ju)，副產(chan)物(wu)增多。

所述步驟2)投料的順序(xu)為化合物1，化合物2，有機堿。改(gai)變投料順序(xu)或有機堿加入過快易(yi)導(dao)致反應(ying)劇(ju)烈而產(chan)生副產(chan)物。

所述步驟2)化合物1與化合物2的(de)(de)投料比為(wei)1:1，反應時(shi)(shi)間1～2小時(shi)(shi)。改(gai)變投料比，化合物3的(de)(de)收率有很大提(ti)高(gao)，投料比的(de)(de)范圍較大，有利于精(jing)細化學品的(de)(de)生(sheng)產。反應時(shi)(shi)間為(wei)1～2小時(shi)(shi)，少于1小時(shi)(shi)則(ze)反應不完全，多(duo)于2小時(shi)(shi)則(ze)副產物增多(duo)。

所(suo)述步驟3)有機堿為三乙胺。若(ruo)為其它有機堿，反(fan)應不發生或者(zhe)收(shou)率很低。

本發明有益(yi)效(xiao)果如(ru)下：

1、本發明為以1,2,4-三唑-1-乙酸與α-氨基酮衍生物在有機催化劑作用下經縮合反應，將酰胺鍵引入三唑類化合物，得到的三唑酰胺酮類殺菌劑，其抑菌活性較高，半抑制濃度(IC₅₀)較低，有利(li)于(yu)在各種條件下作(zuo)為殺菌劑的應(ying)用；

2、本發明合成(cheng)一類與傳(chuan)統(tong)商業(ye)化殺(sha)菌(jun)劑不同的新型三唑酰(xian)胺酮類殺(sha)菌(jun)劑，提(ti)供了一種制備成(cheng)本低、操(cao)作簡單且(qie)反應(ying)效率高(gao)的合成(cheng)新方法。

3、本發明合(he)成了(le)一類三(san)唑酰胺酮類殺菌(jun)劑，此類化合(he)物在抑制小麥(mai)赤(chi)霉(mei)菌(jun)、稻瘟菌(jun)、指狀青(qing)霉(mei)菌(jun)、意大利青(qing)霉(mei)菌(jun)、水稻紋(wen)枯菌(jun)等菌(jun)類方面有較廣(guang)泛的研究與應(ying)用。

具體實施方式

下(xia)面結合實(shi)施例來進一步說明(ming)本(ben)發(fa)明(ming)，但本(ben)發(fa)明(ming)要求保(bao)護(hu)的范(fan)圍并不局限于實(shi)施例表述(shu)的范(fan)圍。

儀器及試劑：

熔點用X4型熔點儀(北京第三光學儀器廠生產)測定，溫度計未經校正；¹H NMR和¹³C NMR用VarianMercury400型400MHz核磁共振儀或者VarianMercury 600型600MHz核磁共振儀測定，氘代氯仿(CDCl₃)或者氘代二甲亞砜(DMSO-d₆)為(wei)(wei)溶劑(ji)，TMS為(wei)(wei)內標；MS使用FinniganTrace質譜儀(yi)(yi)測定；元素分析使用Vario ELIII元素分析儀(yi)(yi)測定；所用試(shi)劑(ji)為(wei)(wei)國產(或(huo)進口)化學純或(huo)分析純。溶劑(ji)甲苯是經(jing)過(guo)(guo)重蒸干燥過(guo)(guo)的，三(san)乙胺也是通過(guo)(guo)重蒸處理過(guo)(guo)的。

實施例1

一種(zhong)合成(cheng)N-(4-溴苯基(ji))-N-(2-氧代-2-苯乙基(ji))-2-(1H-1,2,4-三唑)乙酰胺的方法，包括以(yi)下(xia)實(shi)驗步驟：

取1,2,4-三唑-1-乙酸(0.76g，6mmol)，稱取2-((4-溴苯基)氨基)-1-苯乙酮1.74g(6mmol)，慢慢滴加三乙胺(3.03g，30mmol)，滴加完畢后0℃下繼續反應1-2小時，TLC監測，反應完畢后，減壓除去溶劑二氯甲烷，剩余物經硅膠柱進行柱層析分離(洗脫劑：V_乙酸乙酯/V_石油醚＝1:1)，即可得到三(san)唑酰(xian)胺酮3a：

產率：86％

實施例2

一種合成(cheng)N-(2-(4-氯苯(ben)基)-2-氧代乙基)-N-(4-氟苯(ben)基)-2-(1H-1,2,4-三唑(zuo))乙酰胺的方法，包括以(yi)下(xia)實驗(yan)步(bu)驟：

取1,2,4-三唑-1-乙酸(0.76g，6mmol)，稱取1-(4-氯苯基)-2-((4-氟苯基)氨基)乙酮1.58g(6mmol)，慢慢滴加三乙胺(3.03g，30mmol)，滴加完畢后0℃下繼續反應1-2小時，TLC監測，反應完畢后，減壓除去溶劑二氯甲烷，剩余物經硅膠柱進行柱層析分離(洗脫劑：V_乙酸乙酯/V_石油醚＝1:1)，即(ji)可(ke)得(de)到三唑酰胺酮(tong)3b：

產率：89％

實施例3

一(yi)種(zhong)合(he)成N-(2-(4-氯(lv)苯基(ji)(ji))-2-氧(yang)代(dai)乙基(ji)(ji))-N-(2-氟苯基(ji)(ji))-2-(1H-1,2,4-三唑)乙酰胺的方法(fa)，包(bao)括以下(xia)實驗步驟：

取1,2,4-三唑-1-乙酸(0.76g，6mmol)，稱取1-(4-氯苯基)-2-((2-氟苯基)氨基)乙酮1.58g(6mmol)，慢慢滴加三乙胺(3.03g，30mmol)，滴加完畢后0℃下繼續反應1-2小時，TLC監測，反應完畢后，減壓除去溶劑二氯甲烷，剩余物經硅膠柱進行柱層析分離(洗脫劑：V_乙酸乙酯/V_石油醚＝1:1)，即可得到三唑酰(xian)胺(an)酮3c：

產率：81％

實施例4

一(yi)種合(he)成N-(4-氯(lv)苯(ben)基)-N-(2-(2,4-二氯(lv)苯(ben)基)-2-氧代(dai)乙(yi)基)-2-(1H-1,2,4-三唑)乙(yi)酰(xian)胺的方法(fa)，包括以下實驗(yan)步驟(zou)：

取1,2,4-三唑-1-乙酸(0.76g，6mmol)，稱取2-((4-氯苯基)氨基)-1-(2,4-二氯苯基)乙酮1.88g(6mmol)，慢慢滴加三乙胺(3.03g，30mmol)，滴加完畢后0℃下繼續反應1-2小時，TLC監測，反應完畢后，減壓除去溶劑二氯甲烷，剩余物經硅膠柱進行柱層析分離(洗脫劑：V_乙酸乙酯/V_石油醚＝1:1)，即可得(de)到三(san)唑酰胺酮3d：

產率：78％

實施例5

一種合(he)成N-(4-氟苯(ben)基)-N-(2-(2,4-二氯苯(ben)基)-2-氧代乙基)-2-(1H-1,2,4-三(san)唑)乙酰胺的(de)方法(fa)，包括以下實驗步驟：

取1,2,4-三唑-1-乙酸(0.76g，6mmol)，稱取2-((4-氟苯基)氨基)-1-(2,4-二氯苯基)乙酮1.79g(6mmol)，慢慢滴加三乙胺(3.03g，30mmol)，滴加完畢后0℃下繼續反應1-2小時，TLC監測，反應完畢后，減壓除去溶劑二氯甲烷，剩余物經硅膠柱進行柱層析分離(洗脫劑：V_乙酸乙酯/V_石油醚＝1:1)，即可(ke)得(de)到三唑(zuo)酰胺酮3e：

產率：80％

實施例6

一種合成(cheng)N-(4-氯苯基)-N-(2-(4-氟(fu)苯基)-2-氧代(dai)乙基)-2-(1H-1,2,4-三唑)乙酰(xian)胺的方法，包(bao)括以下實驗步(bu)驟：

取1,2,4-三唑-1-乙酸(0.76g，6mmol)，稱取2-((4-氯苯基)氨基)-1-(4-氟苯基)乙酮1.58g(6mmol)，慢慢滴加三乙胺(3.03g，30mmol)，滴加完畢后0℃下繼續反應1-2小時，TLC監測，反應完畢后，減壓除去溶劑二氯甲烷，剩余物經硅膠柱進行柱層析分離(洗脫劑：V_乙酸乙酯/V_石油醚＝1:1)，即可(ke)得到三(san)唑酰胺(an)酮3f：

產率：88％

實施例7

一種(zhong)合成N-(2-(2,4-二(er)氯苯(ben)基(ji))-2-氧代(dai)乙基(ji))-N-(2,4-二(er)氟苯(ben)基(ji))-2-(1H-1,2,4-三唑)乙酰胺的方法(fa)，包括以下(xia)實驗步(bu)驟：

取1,2,4-三唑-1-乙酸(0.76g，6mmol)，稱取1-(2,4-二氯苯基)-2-((2,4-二氟苯基)氨基)乙酮1.90g(6mmol)，慢慢滴加三乙胺(3.03g，30mmol)，滴加完畢后0℃下繼續反應1-2小時，TLC監測，反應完畢后，減壓除去溶劑二氯甲烷，剩余物經硅膠柱進行柱層析分離(洗脫劑：V_乙酸乙酯/V_石油醚＝1:1)，即可(ke)得(de)到(dao)三唑酰胺酮3g：

產率：67％

實施例8

一種(zhong)合成N-(4-氯苯基(ji))-N-(3,3-二(er)甲基(ji)-2-氧(yang)代丁基(ji))-2-(1H-1,2,4-三唑)乙酰胺的方(fang)法，包括(kuo)以(yi)下實驗步驟(zou)：

取1,2,4-三唑-1-乙酸(0.76g，6mmol)，稱取1-((4-氯苯基)氨基)-3,3-二甲基-丁酮1.35g(6mmol)，慢慢滴加三乙胺(3.03g，30mmol)，滴加完畢后0℃下繼續反應1-2小時，TLC監測，反應完畢后，減壓除去溶劑二氯甲烷，剩余物經硅膠柱進行柱層析分離(洗脫劑：V_乙酸乙酯/V_石油醚＝1:1)，即可得(de)到三唑酰胺酮3h：

產率：74％

實施例9

一種(zhong)合成N-(2-(4-氯(lv)苯基)-2-氧代乙基)-N-(鄰甲苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑)乙酰(xian)胺的方法，包括(kuo)以下實驗步驟：

取1,2,4-三唑-1-乙酸(0.76g，6mmol)，稱取1-苯基-2-(鄰甲苯胺基)-乙酮1.56g(6mmol)，慢慢滴加三乙胺(3.03g，30mmol)，滴加完畢后0℃下繼續反應1-2小時，TLC監測，反應完畢后，減壓除去溶劑二氯甲烷，剩余物經硅膠柱進行柱層析分離(洗脫劑：V_乙酸乙酯/V_石油醚＝1:1)，即可(ke)得到三唑酰胺酮3i：

產率：63％

實施例10

一種合成(cheng)N-(3-氟(fu)苯基)-N-(2-(4-氯苯基)-2-氧(yang)代乙(yi)基)-2-(1H-1,2,4-三唑)乙(yi)酰胺的方法(fa)，包括以下實驗步驟(zou)：

取1,2,4-三唑-1-乙酸(0.76g，6mmol)，稱取1-(4-氯苯基)-2-((3-氟苯基)氨基)乙酮1.58g(6mmol)，慢慢滴加三乙胺(3.03g，30mmol)，滴加完畢后0℃下繼續反應1-2小時，TLC監測，反應完畢后，減壓除去溶劑二氯甲烷，剩余物經硅膠柱進行柱層析分離(洗脫劑：V_乙酸乙酯/V_石油醚＝1:1)，即可得到三唑酰胺酮3j：

產率：71％

實施例11

一(yi)種(zhong)合成N-(3,3-二甲基-2-氧代丁基)-N-苯基-2-(1H-1,2,4-三唑)乙酰胺(an)的(de)方法，包括(kuo)以下(xia)實驗步驟：

取1,2,4-三唑-1-乙酸(0.76g，6mmol)，稱取3,3-二甲基-1-(苯基氨基)-2-丁酮1.15g(6mmol)，慢慢滴加三乙胺(3.03g，30mmol)，滴加完畢后0℃下繼續反應1-2小時，TLC監測，反應完畢后，減壓除去溶劑二氯甲烷，剩余物經硅膠柱進行柱層析分離(洗脫劑：V_乙酸乙酯/V_石油醚＝1:1)，即可得到三唑酰胺酮3k：

產率：75％

實施例12

一種合成N-(2-氯苯(ben)基)-N-(2-氧代-2-苯(ben)乙基)-2-(1H-1,2,4-三唑)乙酰胺的(de)方法，包(bao)括(kuo)以下實驗步驟(zou)：

取1,2,4-三唑-1-乙酸(0.76g，6mmol)，稱取2-((2-氯苯基)氨基)-1-苯乙酮1.47g(6mmol)，慢慢滴加三乙胺(3.03g，30mmol)，滴加完畢后0℃下繼續反應1-2小時，TLC監測，反應完畢后，減壓除去溶劑二氯甲烷，剩余物經硅膠柱進行柱層析分離(洗脫劑：V_乙酸乙酯/V_石油醚＝1:1)，即可(ke)得到三唑(zuo)酰(xian)胺酮3l：

產率：74％

實施例13

一種(zhong)合成N-(3,3-二甲基-2-氧代丁基)-N-(4-氟苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑)乙酰胺(an)的方法，包括以下(xia)實驗步驟：

取1,2,4-三唑-1-乙酸(0.76g，6mmol)，稱取1-((4-氟苯基)氨基)-3,3-二甲基-丁酮1.26g(6mmol)，慢慢滴加三乙胺(3.03g，30mmol)，滴加完畢后0℃下繼續反應1-2小時，TLC監測，反應完畢后，減壓除去溶劑二氯甲烷，剩余物經硅膠柱進行柱層析分離(洗脫劑：V_乙酸乙酯/V_石油醚＝1:1)，即可得到(dao)三唑酰胺酮(tong)3m：

產率：88％

實施例14

一種合成N-(4-氟苯(ben)基)-N-(2-氧代-2-苯(ben)乙(yi)基)-2-(1H-1,2,4-三唑)乙(yi)酰(xian)胺的方法，包括(kuo)以下實驗步(bu)驟(zou)：

取1,2,4-三唑-1-乙酸(0.76g，6mmol)，稱取2-((4-氟苯基)氨基)-1-苯乙酮1.38g(6mmol)，慢慢滴加三乙胺(3.03g，30mmol)，滴加完畢后0℃下繼續反應1-2小時，TLC監測，反應完畢后，減壓除去溶劑二氯甲烷，剩余物經硅膠柱進行柱層析分離(洗脫劑：V_乙酸乙酯/V_石油醚＝1:1)，即可(ke)得到三唑酰(xian)胺酮3n：

產率：83％

實施例15

一(yi)種合成(cheng)N-(2-(4-氯苯(ben)基(ji)(ji))-2-氧代乙(yi)基(ji)(ji))-2-(1H-1,2,4-三(san)唑)-N-(4-(三(san)氟甲基(ji)(ji))苯(ben)基(ji)(ji))乙(yi)酰胺的方(fang)法(fa)，包(bao)括以下實(shi)驗步驟：

取1,2,4-三唑-1-乙酸(0.76g，6mmol)，稱取1-(4-氯苯基)-(2-(4-(三氟甲基)苯基)氨基)乙酮1.88g(6mmol)，慢慢滴加三乙胺(3.03g，30mmol)，滴加完畢后0℃下繼續反應1-2小時，TLC監測，反應完畢后，減壓除去溶劑二氯甲烷，剩余物經硅膠柱進行柱層析分離(洗脫劑：V_乙酸乙酯/V_石油醚＝1:1)，即可(ke)得到三唑酰(xian)胺(an)酮(tong)3o：

產率：60％

實施例16

一種合成N-(4-氯-2-甲基(ji)苯基(ji))-N-(2-氧代-2-苯乙基(ji))-2-(1H-1,2,4-三唑)乙酰胺的方法，包括以下實驗步驟：

取1,2,4-三唑-1-乙酸(0.76g，6mmol)，稱取2((4-氯-2-甲基苯基)氨基)-1-苯乙酮1.56g(6mmol)，慢慢滴加三乙胺(3.03g，30mmol)，滴加完畢后0℃下繼續反應1-2小時，TLC監測，反應完畢后，減壓除去溶劑二氯甲烷，剩余物經硅膠柱進行柱層析分離(洗脫劑：V_乙酸乙酯/V_石油醚＝1:1)，即可得到三唑酰胺酮3p：

產率：66％

實施例17

一種合成N-(4-氟(fu)苯基)-N-(2-氧代-2-苯乙基)-2-(1H-1,2,4-三唑)乙酰胺的方(fang)法(fa)，包括以下(xia)實驗(yan)步驟(zou)：

取1,2,4-三唑-1-乙酸(0.76g，6mmol)，稱取2-((4-氟苯基)氨基)-1-苯乙酮1.38g(6mmol)，慢慢滴加三乙胺(3.03g，30mmol)，滴加完畢后0℃下繼續反應1-2小時，TLC監測，反應完畢后，減壓除去溶劑二氯甲烷，剩余物經硅膠柱進行柱層析分離(洗脫劑：V_乙酸乙酯/V_石油醚＝1:1)，即可得到三唑酰胺(an)酮3q：

產率：83％

實施例18

一種合成N-(2-(4-溴苯(ben)基)-2-氧代乙基)-N-(鄰甲苯(ben)基)-2-(1H-1,2,4-三唑(zuo))乙酰胺的方法，包括以下實驗步(bu)驟：

取1,2,4-三唑-1-乙酸(0.76g，6mmol)，稱取1-(4-溴苯基)-2-(鄰甲苯氨基)乙酮1.83g(6mmol)，慢慢滴加三乙胺(3.03g，30mmol)，滴加完畢后0℃下繼續反應1-2小時，TLC監測，反應完畢后，減壓除去溶劑二氯甲烷，剩余物經硅膠柱進行柱層析分離(洗脫劑：V_乙酸乙酯/V_石油醚＝1:1)，即可得(de)到三唑酰(xian)胺酮(tong)3r：

產率：64％

實施例19

一種合(he)成N-(2-(4-溴(xiu)苯(ben)基)-2-氧代乙基)-N-苯(ben)基-2-(1H-1,2,4-三唑)乙酰胺(an)的方法，包(bao)括(kuo)以下實驗步驟：

取1,2,4-三唑-1-乙酸(0.76g，6mmol)，稱取1-(4-溴苯基)-2-(苯基氨基)乙酮1.74g(6mmol)，慢慢滴加三乙胺(3.03g，30mmol)，滴加完畢后0℃下繼續反應1-2小時，TLC監測，反應完畢后，減壓除去溶劑二氯甲烷，剩余物經硅膠柱進行柱層析分離(洗脫劑：V_乙酸乙酯/V_石油醚＝1:1)，即可得到三唑酰(xian)胺酮3s：

產率：75％

實施例20

一種合成(cheng)N-(2,4-二(er)氟苯基)-N-(2-氧(yang)代-2-苯乙(yi)基)-2-(1H-1,2,4-三唑)乙(yi)酰胺的(de)方法，包括以(yi)下實驗步驟(zou)：

取1,2,4-三唑-1-乙酸(0.76g，6mmol)，稱取2-((2,4-二氟苯基)氨基)-1-苯乙酮1.48g(6mmol)，慢慢滴加三乙胺(3.03g，30mmol)，滴加完畢后0℃下繼續反應1-2小時，TLC監測，反應完畢后，減壓除去溶劑二氯甲烷，剩余物經硅膠柱進行柱層析分離(洗脫劑：V_乙酸乙酯/V_石油醚＝1:1)，即可得到三唑(zuo)酰(xian)胺酮3t：

產率：79％

實施例21

一種合(he)成N-(2-(4-氯(lv)苯(ben)基)-2-氧代乙(yi)基)-N-(2,4-二氟苯(ben)基)-2-(1H-1,2,4-三唑(zuo))乙(yi)酰(xian)胺的方法(fa)，包括以下實驗步驟：

取1,2,4-三唑-1-乙酸(0.76g，6mmol)，稱取1-(4-氯苯基)-2-((2,4-二氟苯基)氨基)乙酮1.69g(6mmol)，慢慢滴加三乙胺(3.03g，30mmol)，滴加完畢后0℃下繼續反應1-2小時，TLC監測，反應完畢后，減壓除去溶劑二氯甲烷，剩余物經硅膠柱進行柱層析分離(洗脫劑：V_乙酸乙酯/V_石油醚＝1:1)，即可(ke)得(de)到三唑酰胺酮3u：

產率：80％

上述的(de)(de)實(shi)施(shi)例僅為(wei)本(ben)發明的(de)(de)優選技(ji)術(shu)(shu)方案(an)，而不(bu)應視(shi)為(wei)對于(yu)本(ben)發明的(de)(de)限制，本(ben)申請(qing)中(zhong)的(de)(de)實(shi)施(shi)例及實(shi)施(shi)例中(zhong)的(de)(de)特征在(zai)(zai)不(bu)沖(chong)突的(de)(de)情況下，可以相互(hu)任意組合。本(ben)發明的(de)(de)保(bao)護(hu)(hu)范(fan)圍(wei)應以權(quan)(quan)利(li)要求記載的(de)(de)技(ji)術(shu)(shu)方案(an)，包(bao)括權(quan)(quan)利(li)要求記載的(de)(de)技(ji)術(shu)(shu)方案(an)中(zhong)技(ji)術(shu)(shu)特征的(de)(de)等同替換方案(an)為(wei)保(bao)護(hu)(hu)范(fan)圍(wei)。即(ji)在(zai)(zai)此范(fan)圍(wei)內的(de)(de)等同替換改進，也在(zai)(zai)本(ben)發明的(de)(de)保(bao)護(hu)(hu)范(fan)圍(wei)之(zhi)內。

化合物波普性質：

3a:N-(4-bromophenyl)-N-(2-oxo-2-phenylethyl)-2-(1H-1,2,4-triazol-1-yl)acetamide

White solid,mp 123-124℃；¹H NMR(CDCl₃,400MHz)δ(ppm)8.50(s,1H,Ar-H),8.03(s,3H,Ar-H),7.78-7.71(m,3H,Ar-H),7.59(d,J＝6.0Hz,4H,Ar-H),5.29(s,2H,CH₂),5.11(s,2H,CH₂)；¹³C NMR(CDCl₃,100MHz)δ(ppm)192.4,165.5,153.8,152.0,139.8,134.4,133.8,133.4,130.1,128.7,127.8,123.2,56.7,51.0；MS(EI,70eV):m/z(％)＝398(4)[M⁺],295(15),184(10),105(100).Anal.Calcd for C₁₈H₁₅BrN₄O₂:C,54.15；H,3.79；N,14.03.Found:C,54.02；H,3.94；N,13.88.

3b:N-(2-(4-chlorophenyl)-2-oxoethyl)-N-(4-fluorophenyl)-2-(1H-1,2,4-triazol-1-yl)acetamide

White solid,mp 145-147℃；¹H NMR(CDCl₃,600MHz)δ(ppm)8.45(s,1H,Ar-H),8.02(d,J＝7.8Hz,2H,Ar-H),7.67-7.62(m,4H,Ar-H),7.42-7.39(m,3H,Ar-H),5.26(s,2H,CH₂),5.18(s,2H,CH₂)；¹³C NMR(CDCl₃,150MHz)δ(ppm)192.9,165.4,162.5,160.8,138.8,137.0,133.2,130.6,130.5,129.9,129.0,116.8,116.7,56.6,51.2；MS(EI,70eV):m/z(％)＝372(20)[M⁺],263(31),233(80),139(100),136(18).Anal.Calcd for C₁₈H₁₄ClFN₄O₂:C,57.99；H,3.79；N,15.03.Found:C,57.78；H,3.90；N,14.98.

3c:N-(2-(4-chlorophenyl)-2-oxoethyl)-N-(2-fluorophenyl)-2-(1H-1,2,4-triazol-1-yl)acetamide

White solid,mp 158-159℃；¹H NMR(CDCl₃,600MHz)δ(ppm)8.23(s,1H,Ar-H),7.88-7.84(m,3H,Ar-H),7.68(s,1H,Ar-H),7.46-7.39(m,3H,Ar-H),7.25-7.23(m,2H,Ar-H),5.63(d,J＝17.4Hz,1H,CH₂),5.00(d,J＝16.8Hz,1H,CH₂),4.85(d,J＝16.8Hz,1H,CH₂),4.55(d,J＝17.4Hz,1H,CH₂)；¹³C NMR(CDCl₃,100MHz)δ(ppm)191.3,165.7,158.8,156.3,151.5,144.7,144.1,132.8,131.9,131.8,131.2,131.1,130.0,129.0,128.0,125.5,117.2,117.0,55.5,50.3；MS(EI,70eV):m/z(％)＝372(11)[M⁺],263(36),233(54),139(100),136(21).Anal.Calcd for C₁₈H₁₄ClFN₄O₂:C,57.99；H,3.79；N,15.03.Found:C,57.70；H,3.93；N,14.90.

3d:N-(4-chlorophenyl)-N-(2-(2,4-dichlorophenyl)-2-oxoethyl)-2-(1H-1,2,4-triazol-1-yl)acetamide

Yellow solid,mp 120-122℃；¹H NMR(CDCl₃,600MHz)δ(ppm)8.43(s,1H,Ar-H),7.61-7.27(m,8H,Ar-H),5.30(s,2H,CH₂),5.00(s,2H,CH₂)；¹³C NMR(CDCl₃,100MHz)δ(ppm)194.1,164.5,150.0,143.6,138.5,135.5,134.1,132.3,131.1,130.6,130.5,129.7,127.6,59.6,52.9；MS(EI,70eV):m/z(％)＝422(4)[M⁺],313(9),249(100),173(54).Anal.Calcd for C₁₈H₁₃Cl₃N₄O₂:C,51.03；H,3.09；N,13.22.Found:C,50.85；H,3.20；N,13.00.

3e:N-(2-(2,4-dichlorophenyl)-2-oxoethyl)-N-(4-fluorophenyl)-2-(1H-1,2,4-triazol-1-yl)acetamide

Yellow solid,mp 139-140℃；¹H NMR(CDCl₃,600MHz)δ(ppm)8.20(s,1H,Ar-H),7.63-7.26(m,8H,Ar-H),5.09(s,2H,CH₂),4.97(s,2H,CH₂)；¹³C NMR(DMSO,150MHz)δ(ppm)195.2,165.4,148.5,144.8,137.0,136.8,134.5,131.7,131.2,130.6,130.5,130.3,127.7,116.9,116.7,58.7,51.1；MS(EI,70eV):m/z(％)＝406(4)[M⁺],297(9),233(100),173(42).Anal.Calcd for C₁₈H₁₃Cl₂FN₄O₂:C,53.09；H,3.22；N,13.76.Found:C,52.99；H,3.33；N,13.60.

3f:N-(4-chlorophenyl)-N-(2-(4-fluorophenyl)-2-oxoethyl)-2-(1H-1,2,4-triazol-1-yl)acetamide

Yellow solid,mp 128-129.℃；¹H NMR(CDCl₃,600MHz)δ(ppm)8.22(s,1H,Ar-H),7.92(s,2H,Ar-H),7.53-7.09(m,7H,Ar-H),5.11(s,2H,CH₂),5.07(s,2H,CH₂)；¹³C NMR(CDCl₃,150MHz)δ(ppm)191.1,166.9,165.2,165.1,147.5,138.9,135.4,130.8,130.7,130.5,129.8,116.1,116.0,56.8,52.0；MS(EI,70eV):m/z(％)＝372(13)[M⁺],263(10),249(32),140(39),123(100).Anal.Calcd for C₁₈H₁₄ClFN₄O₂:C,57.99；H,3.79；N,15.03.Found:C,57.74；H,3.92；N,14.86.

3g:N-(2-(2,4-dichlorophenyl)-2-oxoethyl)-N-(2,4-difluorophenyl)-2-(1H-1,2,4-triazol-1-yl)acetamide

Light yellow solid,mp 88-89℃；¹H NMR(CDCl₃,600MHz)δ(ppm)8.36-7.31(m,8H,Ar-H),5.23-5.01(s,4H,2CH₂)；¹³C NMR(CDCl₃,150MHz)δ(ppm)193.9,174.5,165.2,163.6,162.0,157.0,138.4,134.0,132.7,132.2,131.4,130.3,127.7,123.6,113.5,113.4,105.9,59.1,54.0；MS(EI,70eV):m/z(％)＝424(4)[M⁺],315(12),251(87),173(100).Anal.Calcd for C₁₈H₁₂Cl₂F₂N₄O₂:C,50.84；H,2.84；N,13.18.Found:C,50.68；H,2.92；N,13.00.

3h:N-(4-chlorophenyl)-N-(3,3-dimethyl-2-oxobutyl)-2-(1H-1,2,4-triazol-1-yl)acetamide

Light yellow solid,mp 141-142℃；¹H NMR(CDCl₃,600MHz)δ(ppm)9.89(s,1H,Ar-H),8.32(s,1H,Ar-H),7.53-7.28(m,4H,Ar-H),5.18(s,2H,CH₂),4.62(s,2H,CH₂),1.15(s,9H,3CH₃)；¹³C NMR(CDCl₃,100MHz)δ(ppm)208.4,164.1,144.6,143.6,138.9,135.3,130.5,129.7,55.4,52.5,43.2,26.1；MS(EI,70eV):m/z(％)＝334(25)[M⁺],277(30),249(100),140(81),139(37).Anal.Calcd for C₁₆H₁₉ClN₄O₂:C,57.40；H,5.72；N,16.73.Found:C,57.23；H,5.87；N,16.55.

3i:N-(2-(4-chlorophenyl)-2-oxoethyl)-N-(o-tolyl)-2-(1H-1,2,4-triazol-1-yl)acetamide

Light yellow solid,mp 116-117℃；¹H NMR(CDCl₃,600MHz)δ(ppm)8.41(s,1H,Ar-H),7.85-7.27(m,9H,Ar-H),5.61(d,J＝17.4Hz,1H,CH₂),5.26(d,J＝16.8Hz,1H,CH₂),5.00(d,J＝16.8Hz,1H,CH₂),4.39(d,J＝17.4Hz,1H,CH₂),2.45(s,3H,CH₃)；¹³C NMR(CDCl₃,100MHz)δ(ppm)191.1,164.5,143.4,143.1,140.2,138.6,135.8,132.8,132.0,129.9,129.4,129.1,128.0,55.7,52.7,17.8；MS(EI,70eV):m/z(％)＝368(16)[M⁺],229(74),249(100),160(15),139(39),120(100),118(35).Anal.Calcd for C₁₉H₁₇ClN₄O₂:C,61.87；H,4.65；N,15.19.Found:C,61.79；H,4.77；N,14.92.

5j:N-(2-(4-chlorophenyl)-2-oxoethyl)-N-(3-fluorophenyl)-2-(1H-1,2,4-triazol-1-yl)acetamide

Light yellow solid,mp 88-89℃；¹H NMR(CDCl₃,600MHz)δ(ppm)8.28(s,1H,Ar-H),7.83(d,J＝8.4Hz,2H,Ar-H),7.47-7.36(m,6H,Ar-H),7.14(s,1H,Ar-H)),5.20(s,2H,CH₂),5.09(s,2H,CH₂)；¹³C NMR(CDCl₃,100MHz)δ(ppm)191.4,164.9,161.6,146.2,141.6,140.3,132.6,129.4,129.0,124.2,116.7,116.5,115.9,115.7,109.7,56.7,52.2；MS(EI,70eV):m/z(％)＝372(11)[M⁺],263(24),233(54),139(100).Anal.Calcd for C₁₈H₁₄ClFN₄O₂:C,57.99；H,3.79；N,15.03.Found:C,57.76；H,3.90；N,14.89.

3k:N-(3,3-dimethyl-2-oxobutyl)-N-phenyl-2-(1H-1,2,4-triazol-1-yl)acetamide

White solid,mp 143-144℃；¹H NMR(CDCl₃,600MHz)δ(ppm)8.34(s,1H,Ar-H),7.54-7.43(m,5H,Ar-H),7.28(s,1H,Ar-H)),5.19(s,2H,CH₂),4.64(s,2H,CH₂),1.16(s,9H,3CH₃)；¹³C NMR(CDCl₃,150MHz)δ(ppm)208.4,164.0,143.7,140.4,130.4,129.4,128.2,55.5,52.9,43.2,26.2；MS(EI,70eV):m/z(％)＝300(21)[M⁺],243(24),215(66),147(13),118(35),106(100),105(30).Anal.Calcd for C₁₆H₂₀N₄O₂:C,63.98；H,6.71；N,18.65.Found:C,63.87；H,6.86；N,18.44.

3l:N-(2-chlorophenyl)-N-(2-oxo-2-phenylethyl)-2-(1H-1,2,4-triazol-1-yl)acetamide

Light yellow solid,mp 186-188℃；¹H NMR(CDCl₃,600MHz)δ(ppm)8.36(s,1H,Ar-H),7.95-7.90(m,3H,Ar-H),7.63-7.60(m,2H,Ar-H),7.50-7.44(m,4H,Ar-H),5.80(d,J＝17.4Hz,1H,CH₂),5.26(d,J＝16.8Hz,1H,CH₂),4.92(d,J＝16.8Hz,1H,CH₂),4.42(d,J＝18.0Hz,1H,CH₂)；¹³C NMR(DMSO,150MHz)δ(ppm)193.2,165.1,146.9,144.5,137.5,134.5,134.0,132.2,131.6,131.3,130.9,129.0,128.1,55.4,51.6；MS(EI,70eV):m/z(％)＝354(7)[M⁺],229(74),249(19),140(33),105(100).Anal.Calcd for C₁₈H₁₅ClN₄O₂:C,60.94；H,4.26；N,15.79.Found:C,60.88；H,4.44；N,15.60.

3m:N-(3,3-dimethyl-2-oxobutyl)-N-(4-fluorophenyl)-2-(1H-1,2,4-triazol-1-yl)acetamide

White solid,mp 156-157℃；¹H NMR(CDCl₃,600MHz)δ(ppm)8.39(s,1H,Ar-H),7.59(s,2H,Ar-H),7.26(s,1H,Ar-H),7.18(m,2H,Ar-H),5.24(s,2H,CH₂),4.61(s,2H,CH₂),1.15(s,9H,3CH₃)；¹³C NMR(CDCl₃,150MHz)δ(ppm)208.6,164.0,163.5,161.8,142.3,136.2,130.4,117.4,55.6,53.2,43.2,26.1；MS(EI,70eV):m/z(％)＝318(30)[M⁺],261(32),233(100),124(99),123(52).Anal.Calcd for C₁₆H₁₉FN₄O₂:C,60.37；H,6.02；N,17.60.Found:C,60.23；H,6.22；N,17.48.

3n:N-(4-fluorophenyl)-N-(2-oxo-2-phenylethyl)-2-(1H-1,2,4-triazol-1-yl)acetamide

White solid,mp 106-108℃；¹H NMR(CDCl₃,600MHz)δ(ppm)8.39(s,1H,Ar-H),7.90(s,2H,Ar-H),7.65(s,2H,Ar-H),7.57(s,1H,Ar-H),7.45(s,2H,Ar-H),7.27(s,1H,Ar-H),7.17(s,2H,Ar-H),5.27(s,2H,CH₂),5.12(s,2H,CH₂)；¹³C NMR(CDCl₃,100MHz)δ(ppm)192.7,164.6,143.3,136.1,134.3,133.8,130.5,130.4,128.7,127.9,117.3,117.0,57.1,53.1；MS(EI,70eV):m/z(％)＝338(8)[M⁺],320(8),237(19),233(22),124(17),105(100).Anal.Calcd for C₁₈H₁₅FN₄O₂:C,63.90；H,4.47；N,16.56.Found:C,63.77；H,4.56；N,16.71.

3o:N-(2-(4-chlorophenyl)-2-oxoethyl)-2-(1H-1,2,4-triazol-1-yl)-N-(4-(trifluoromethyl)phenyl)acetamide

Yellow solid,mp 70-72℃；¹H NMR(CDCl₃,600MHz)δ(ppm)8.42-7.07(m,10H,Ar-H),5.50-4.04(m,4H,2CH₂)；¹³C NMR(CDCl₃,100MHz)δ(ppm)191.7,174.7,165.4,143.6,140.6,132.7,131.7,130.4,130.0,129.5,128.0,126.1,124.3,122.5,120.7,58.3,55.6；MS(EI,70eV):m/z(％)＝422(7)[M⁺],283(32),174(25),138(100).Anal.Calcd for C₁₉H₁₄ClF₃N₄O₂:C,53.98；H,3.34；N,13.25.Found:C,53.76；H,3.47；N,13.10.

3p:N-(4-chloro-2-methylphenyl)-N-(2-oxo-2-phenylethyl)-2-(1H-1,2,4-triazol-1-yl)acetamide

Light yellow solid,mp 46-48℃；¹H NMR(CDCl₃,600MHz)δ(ppm)8.23(s,1H,Ar-H),7.91(s,2H,Ar-H),7.64-7.58(m,3H,Ar-H),7.45-7.28(m,4H,Ar-H),5.68(m,1H,CH₂),5.11(m,1H,CH₂),4.87(m,1H,CH₂),4.36(m,1H,CH₂),2.42(s,3H,CH₃)；¹³C NMR(CDCl₃,150MHz)δ(ppm)192.1,175.3,165.1,146.8,137.9,137.5,135.5,134.5,134.0,131.9,131.1,128.9,128.1,128.0,56.8,52.0,18.0；MS(EI,70eV):m/z(％)＝368(15)[M⁺],263(25),154(37),105(100).Anal.Calcd for C₁₉H₁₇ClN₄O₂:C,61.87；H,4.65；N,15.19.Found:C,61.75；H,4.74；N,15.01.

3q:N-(4-fluorophenyl)-N-(2-oxo-2-phenylethyl)-2-(1H-1,2,4-triazol-1-yl)acetamide

Light yellow solid,mp 80-82℃；¹H NMR(CDCl₃,600MHz)δ(ppm)9.64(s,1H,Ar-H),8.27(s,1H,Ar-H),7.89(d,J＝8.0Hz,2H,Ar-H),7.62-7.56(m,3H,Ar-H),7.45-7.43(m,2H,Ar-H),7.17-7.15(m,2H,Ar-H),5.17(s,2H,CH₂),5.11(s,2H,CH₂)；¹³C NMR(CDCl₃,100MHz)δ(ppm)192.6,164.9,145.6,143.9,136.3,134.3,133.8,130.3,128.7,127.9,117.2,117.0,57.0,52.4；MS(EI,70eV):m/z(％)＝338(14)[M⁺],233(28),124(36),105(100).Anal.Calcd for C₁₈H₁₅FN₄O₂:C,63.90；H,4.47；N,16.56.Found:C,63.72；H,4.58；N,16.73.

3r:N-(2-(4-bromophenyl)-2-oxoethyl)-N-(o-tolyl)-2-(1H-1,2,4-triazol-1-yl)acetamide

White solid,mp 128-131℃；¹H NMR(CDCl₃,400MHz)δ(ppm)8.37(s,1H,Ar-H),7.78(d,J＝8.0Hz,2H,Ar-H),7.65(d,J＝7.6Hz,1H,Ar-H),7.59(d,J＝8.4Hz,2H,Ar-H),7.38-7.27(m,4H,Ar-H),5.61(d,J＝16.8Hz,1H,CH₂),5.24(d,J＝16.8Hz,1H,CH₂),5.00(d,J＝16.8Hz,1H,CH₂),4.39(d,J＝17.2Hz,1H,CH₂),2.46(s,3H,CH₃)；MS(EI,70eV):m/z(％)＝412(5)[M⁺],229(87),183(23),120(100).Anal.Calcd for C₁₉H₁₇BrN₄O₂:C,55.22；H,4.15；N,13.56.Found:C,55.03；H,4.24；N,13.38.

3s:N-(2-(4-bromophenyl)-2-oxoethyl)-N-phenyl-2-(1H-1,2,4-triazol-1-yl)acetamide

White solid,mp 130.0-131.9℃；¹H NMR(CDCl₃,600MHz)δ(ppm)9.84(s,1H,Ar-H),8.29(s,1H,Ar-H),7.79(d,J＝8.4Hz,2H,Ar-H),7.62-7.58(m,4H,Ar-H),7.53-7.44(m,3H,Ar-H),5.20(s,2H,CH₂),5.11(s,2H,CH₂)；MS(EI,70eV):m/z(％)＝398(3)[M⁺],185(31),118(31),106(100).Anal.Calcd for C₁₈H₁₅BrN₄O₂:C,54.15；H,3.79；N,14.03.Found:C,54.00；H,3.86；N,13.87.

3t:N-(2,4-difluorophenyl)-N-(2-oxo-2-phenylethyl)-2-(1H-1,2,4-triazol-1-yl)acetamide

White solid,mp 139-140℃；¹H NMR(CDCl₃,600MHz)δ(ppm)9.05(s,1H,Ar-H),8.39(s,1H,Ar-H),8.01(d,J＝7.2Hz,2H,Ar-H),7.84-7.80(m,1H,Ar-H),7.68-7.80(m,1H,Ar-H),7.60-7.54(m,3H,Ar-H),7.29(m,1H,Ar-H),5.58-5.53(m,1H,CH₂),5.29(d,J＝17.4Hz,1H,CH₂),5.06(d,J＝17.4Hz,1H,CH₂),4.95(d,J＝18.0Hz,1H,CH₂)；¹³C NMR(DMSO,150MHz)δ(ppm)193.8,166.2,157.4,149.0,145.2,134.9,134.3,132.6,129.3,128.4,125.0,124.9,113.1,113.0,110.0,106.1,56.1,51.2；MS(EI,70eV):m/z(％)＝356(7)[M⁺],247(20),142(19),105(100).Anal.Calcd for C₁₈H₁₄F₂N₄O₂:C,60.67；H,3.96；N,15.72.Found:C,60.44；H,4.05；N,15.55.

3u:N-(2-(4-chlorophenyl)-2-oxoethyl)-N-(2,4-difluorophenyl)-2-(1H-1,2,4-triazol-1-yl)acetamide

Light yellow solid,mp 94-96℃；¹H NMR(CDCl₃,600MHz)δ(ppm)8.39-7.04(m,9H,Ar-H),5.46-4.07(m,4H,2CH₂)；¹³C NMR(CDCl₃,150MHz)δ(ppm)191.4,165.8,151.7,144.7,140.5,132.7,132.0,131.9,129.3,129.1,128.5,128.4,124.2,112.9,112.8,105.6,55.6,50.4；MS(EI,70eV):m/z(％)＝390(5)[M⁺],281(27),251(30),138(100).Anal.Calcd for C₁₈H₁₃ClF₂N₄O₂:C,55.32；H,3.35；N,14.34.Found:C,55.14；H,3.47；N,14.21.

目標化合物三(san)唑酰胺酮3的(de)生物活性測試

設備和材料：

臺(tai)式壓(ya)力(li)高溫蒸汽(qi)滅菌(jun)(jun)箱(xiang)(YXQ.DY型(xing))，感量萬分之一的電(dian)子天平(ping)(Sartorius BT25S)，無菌(jun)(jun)操作臺(tai)(志(zhi)誠(cheng)，ZHJH-C1109B)，接種針，玻璃棒(bang)，刻度尺(chi)，打(da)火機，封口膜、三角(jiao)瓶(ping)(75mL)，量筒(20mL)，微(wei)量進樣器(100μL，200μL，500μL，1000μL)，培(pei)養皿(直(zhi)徑6cm)，霉菌(jun)(jun)培(pei)養箱(xiang)(MJX-250型(xing))，細紗布，酒精燈，直(zhi)徑5mm打(da)孔器。

PDA粉(青島海洋化工)，蒸餾水，DMSO，吐(tu)溫(wen)-80，小麥赤霉(mei)(mei)菌(jun)(jun)(Gibberellasaubinetii)，稻(dao)(dao)瘟菌(jun)(jun)(Magnaporthegrisea)，指狀青霉(mei)(mei)菌(jun)(jun)(Penicillium digitatum)，意大利青霉(mei)(mei)菌(jun)(jun)(Penicillium italicum)，水稻(dao)(dao)紋枯菌(jun)(jun)(Rhizoctonia solani)。

實驗方(fang)法(采用含毒介質法)

PDA培養基的制備

稱取PDA粉(fen)46g，加入蒸餾水(shui)1000mL，搖勻配(pei)置成溶液，用棉紗布蓋上瓶口(kou)。把(ba)此培養基放到(dao)高壓滅(mie)菌(jun)鍋內采用濕熱法于125℃下(xia)滅(mie)菌(jun)0.5h。

試樣的配制(zhi)(50mg/L)

用分(fen)析天(tian)平稱取2～3mg待(dai)測樣(yang)(yang)品(pin)放于已(yi)消毒的(de)樣(yang)(yang)品(pin)管中，加入幾滴(di)DMSO溶解該樣(yang)(yang)品(pin)，加入適量蒸餾水和一滴(di)吐溫(wen)-80，配置成均勻(yun)的(de)濃(nong)度為(wei)1000mg/L的(de)溶液(ye)，取此溶液(ye)1000μL，迅速加入到9.0mL熱的(de)(40～50℃)培養(yang)基內，搖勻(yun)即(ji)配置成待(dai)測樣(yang)(yang)品(pin)濃(nong)度為(wei)100mg/L的(de)培養(yang)基，水平放置在無菌操作(zuo)臺內紫外殺菌15min。

抑菌活性測定

用直(zhi)徑(jing)5mm打孔器取菌種瓊脂片，菌絲面(mian)朝下(xia)接種要(yao)含有(you)待測藥(yao)品的(de)(de)PDA培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)上，置于圓形培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)的(de)(de)正中心，切不要(yao)滑動菌種瓊脂片，以免污染培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)。每個待測樣(yang)(yang)品接種三個，以不含藥(yao)品但含有(you)相同濃度DMSO的(de)(de)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)為對(dui)(dui)空白照(zhao)，以含相同濃度的(de)(de)商品化藥(yao)物烯(xi)唑醇、三唑酮的(de)(de)作為對(dui)(dui)照(zhao)，放置在生(sheng)化培(pei)(pei)養(yang)(yang)箱內于25℃下(xia)培(pei)(pei)養(yang)(yang)3～5天(tian)后，測定培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)上的(de)(de)菌落的(de)(de)直(zhi)徑(jing)。通過和上述空白對(dui)(dui)照(zhao)組(zu)以及商品化藥(yao)物對(dui)(dui)照(zhao)組(zu)的(de)(de)比(bi)較來觀察(cha)待測樣(yang)(yang)品對(dui)(dui)菌絲生(sheng)長的(de)(de)影響(xiang)，計算待測樣(yang)(yang)品在100mg/L下(xia)對(dui)(dui)菌落生(sheng)長的(de)(de)抑制(zhi)率。

抑制(zhi)率(％)＝[(空白對照菌(jun)落直徑－待測樣品(pin)菌(jun)落直徑)/(空白菌(jun)落直徑－打孔器直徑)]×100％

目(mu)標化合物三唑酰胺酮3的(de)抑菌活性測試結果

表1：化合物3的(de)抑菌活性(xing)測試結(jie)果

注：化(hua)合(he)物(wu)濃度均(jun)為100mg/L；數據為三(san)次(ci)重復(fu)的平(ping)均(jun)值。

從上述表1可以看出，該系列化合物三唑酰胺酮3在100mg/L下對意大利青霉菌、指狀青霉菌、水稻紋枯菌、小麥赤霉菌和稻瘟菌均表現出了一定的抑制活性，其中對水稻紋枯病菌的抑制活性最好，大部分化合物的抑制率都在80％以上，如化合物3b、3c、3g、3i、3j和3l對水稻紋枯病菌的抑菌率達到100％，且化合物3b、3c、3g和3j的抑菌活性表現出了一定的廣譜性。通過化合物的抑菌活性和結構的關系總結我們可知，當化合物的取代基上含有氯和氟時抑菌活性要好一些，尤其是化合物的取代基上同時含有氯和氟時，且R¹含有氯、R²含有氟時化(hua)合物(wu)的抑菌活(huo)性最好，如化(hua)合物(wu)3c和3g。