專利名稱：一種提純苦馬豆素的方法
技術領域：
本發明涉及一種提純苦馬豆素的方法，特別是涉及一種超臨界(X)2萃取提純苦馬豆素的方法。
背景技術：
苦馬豆素化學名是1，2，8-三羥基八氫吲哚茲啶，白色針狀結晶，熔點 1440C _145°C，分子式C8H15O3N,易溶于水、甲醇、乙醇、丙酮等。苦馬豆素是最初從灰苦馬豆中分離出來一種毒性成分，是導致動物中毒的瘋草的主要成分。現代醫學研究表明，苦馬豆素能激活動物腹腔吞噬細胞的細胞結合活性，從而可抑制腫瘤細胞，對治療腫瘤、感染性疾病、免疫抑制性疾病有重要意義。苦馬豆素作為一種新的天然抗腫瘤藥物越來越受到重視。苦馬豆素的來源主要有三類一是從微生物菌絲體或發酵液中進行提取；二是化學合成；三是從植物中提取。微生物發酵和化學合成反應條件苛刻和繁瑣，很難批量生產。 從植物瘋草中提取，瘋草包括棘豆屬和黃芪屬兩屬有毒植物，國內外均有廣泛分布，原料是易得，生產成本較低。現有從植物中提純苦馬豆素方法，一般采用常規試劑提取，氯仿萃取或樹脂分離， 再硅膠柱層析或升華純化。專利(申請號02114590. 3) “瘋草中苦馬豆素提取的提純工藝”公開的方法是采用陽離子交換法提取出大極性生物堿粗品，再用堿性氯仿抽提，抽提部分經硅膠柱層析分離得到苦馬豆素粗品，最后分步升華獲得苦馬豆素純品。專利(申請號200610104918. 3) “從甘肅棘豆中分離提取苦馬豆素的工藝方法” 該方法采用逆流萃取的方法在酸性條件下用氯仿脫脂除雜，然后在堿性條件下用正丁醇逆流萃取得到總生物堿粗品。將所得總生物堿粗品經硅膠柱層析分離得到苦馬豆素粗品，然后重結晶獲得苦馬豆素純品。專利(申請號200810018178. 3) “一種從豆科棘豆屬或黃芪屬植物中提純苦馬豆素的工藝”，該專利公開的方法是先純水超聲提取，再過大孔樹脂分離粗品，最后用分步升華的方法得到純品。專利(申請號200710017M2.X) “連續柱層析法提純苦馬豆素的工藝”，該專利公開的方法是(1)瘋草的預處理；(2)瘋草浸膏的獲取；(3)粗品制備浸膏用極性大孔吸附樹脂進行粗分，TLC檢測，合并含有苦馬豆素的洗脫液作為粗品備用；(4)純化苦馬豆素 將上述粗品過硅膠柱層析純化，TLC檢測，GC檢測，分別收集苦馬豆素相對含量> 10%的部分；^HPLC檢測獲得苦馬豆素純品將(4)中的收集部分通過HPLC檢測，收集苦馬豆素出峰時間段的流出液，揮干溶劑后，重結晶即得苦馬豆素純品。如上所述，現有方法存在著工藝步驟復雜，提取效率低，污染嚴重等技術缺陷。

發明內容
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本發明的目的在于克服現有技術不足，提供一種提純苦馬豆素的方法。為實現上述目的，本發明的技術解決方案如下一種提純苦馬豆素的方法，其特征在于包含以下步驟將瘋草原料粉碎，過40-80 目篩，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，收集萃取物，用二氯甲烷溶解，加適量氧化鋁拌樣烘干，裝柱，二氯甲烷-甲醇混合溶液洗脫，TLC檢測，收集高濃度流分，回收試劑，去離子水溶解過濾，冷凍干燥，即得白色苦馬豆素產品。所述的超臨界(X)2的條件為萃取溫度為35_40°C，萃取壓力為18_20MPa，分離釜 I溫度為50-65°C，壓力為7-9MPa，分離釜II溫度為40_55°C，壓力為5_7MPa。所述的氧化鋁為120-300目的中性氧化鋁。本發明優勢在于采用超臨界(X)2萃取，這是一種高效環保的萃取方法，能耗低，周期短，所得提取物含量高，易于純化，簡化后續純化工藝；而且整個工藝無廢液產生，減少了對環境的污染，是一種綠色生產工藝。下面將結合具體實施方式
進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式
具體實施例方式實施例1 將瘋草原料粉碎，過40目篩，稱取Ikg加入萃取釜中，開啟機器，調節下列參數 萃取溫度為40°C，萃取壓力為20MPa，分離釜I溫度為65°C，壓力為9MPa，分離釜II溫度為 55°C，壓力為5MPa。參數正常后，以20kg/h的流速動態萃取2小時，解析萃取物，用二氯甲烷回流溶解，濾過，回收試劑，加適量氧化鋁(120-300目的中性氧化鋁)拌樣烘干，裝柱，二氯甲烷-甲醇03 1 混合溶液洗脫，TLC檢測，收集高濃度流分，回收試劑，適量去離子水加熱溶解，過濾，冷凍干燥，得白色苦馬豆素產品32mg，含量98. 5%。實施例2 將瘋草原料粉碎，過80目篩，稱取Ikg加入萃取釜中，開啟機器，調節下列參數 萃取溫度為35°C，萃取壓力為18MPa，分離釜I溫度為55°C，壓力為7MPa，分離釜II溫度為 40°C，壓力為5MPa。參數正常后，以25kg/h的流速動態萃取1小時，解析萃取物，用二氯甲烷回流溶解，濾過，回收試劑，加適量氧化鋁(120-300目的中性氧化鋁)拌樣烘干，裝柱，二氯甲烷-甲醇03 14)混合溶液洗脫，TLC檢測，收集高濃度流分，回收試劑，適量去離子水加熱溶解，過濾，冷凍干燥，得白色苦馬豆素產品35mg，含量98. 3%。實施例3 將瘋草原料粉碎，過60目篩，稱取Ikg加入萃取釜中，開啟機器，調節下列參數 萃取溫度為40°C，萃取壓力為18MPa，分離釜I溫度為55°C，壓力為8MPa，分離釜II溫度為 50°C，壓力為5MPa。參數正常后，以25kg/h的流速動態萃取1小時，解析萃取物，用二氯甲烷回流溶解，濾過，回收試劑，加適量氧化鋁(120-300目的中性氧化鋁)拌樣烘干，裝柱，二氯甲烷-甲醇05 19)混合溶液洗脫，TLC檢測，收集高濃度流分，回收試劑，適量去離子水加熱溶解，過濾，冷凍干燥，得白色苦馬豆素產品3aiig，含量99. 1%。實施例4 將瘋草原料粉碎，過40目篩，稱取2kg加入萃取釜中，開啟機器，調節下列參數萃取溫度為40°C，萃取壓力為19MPa，分離釜I溫度為55°C，壓力為8MPa，分離釜II溫度為 40°C，壓力為5MPa。參數正常后，以25kg/h的流速動態萃取2小時，解析萃取物，用二氯甲烷回流溶解，濾過，回收試劑，加適量氧化鋁(120-300目的中性氧化鋁)拌樣烘干，裝柱，二氯甲烷-甲醇07 21)混合溶液洗脫，TLC檢測，收集高濃度流分，回收試劑，適量去離子水加熱溶解，過濾，冷凍干燥，得白色苦馬豆素產品68mg，含量98. 7%。
權利要求
1.一種提純苦馬豆素的方法，其特征在于包含以下步驟將瘋草原料粉碎，過40-80目篩，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，收集萃取物，用二氯甲烷溶解，加適量氧化鋁拌樣烘干，裝柱，二氯甲烷-甲醇混合溶液洗脫，TLC檢測，收集高濃度流分，回收試劑，去離子水溶解過濾，冷凍干燥，即得白色苦馬豆素產品。
2.如權利要求1所述提純苦馬豆素的方法，其特征在于所述的超臨界CO2萃取條件為 萃取溫度為35-40°C，萃取壓力為18-20MPa，分離釜I溫度為50-65°C，壓力為7_9MPa，分離釜II溫度為40-55°C，壓力為5-7MPa。
3.如權利要求1所述提純苦馬豆素的方法，其特征在于所述的氧化鋁為120-300目的中性氧化鋁。
全文摘要
本發明涉及一種提純苦馬豆素的方法，方法是將瘋草原料粉碎，過40-80目篩，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，收集萃取物，用二氯甲烷溶解，加適量氧化鋁拌樣烘干，裝柱，二氯甲烷-甲醇混合溶液洗脫，TLC檢測，收集高濃度流分，回收試劑，去離子水溶解過濾，冷凍干燥，即得白色苦馬豆素產品。本發明采用超臨界CO2萃取苦馬豆素，提取效率高，而且無污染。
文檔編號C07D471/04GK102241677SQ20111011799
公開日2011年11月16日 申請日期2011年5月6日 優先權日2011年5月6日
發明者蘇劉花 申請人:南京澤朗農業發展有限公司