本發明(ming)涉及(ji)包含混合(he)草藥(yao)提取(qu)物(wu)的(de)(de)用于治療(liao)和預防(fang)男(nan)性(xing)(xing)不育癥(zheng)的(de)(de)組合(he)物(wu)，具(ju)體(ti)而言涉及(ji)包含巴戟天(Morinda Officinalis)根、菟絲(si)子(Cuscuta)種子以及(ji)洋蔥(Allium cepa)鱗莖(bulb)的(de)(de)混合(he)草藥(yao)提取(qu)物(wu)的(de)(de)用于預防(fang)和治療(liao)男(nan)性(xing)(xing)不育癥(zheng)的(de)(de)組合(he)物(wu)及(ji)其(qi)用途。

背景技術：

[文獻1]Agarwal A,Deepinder F,Cocuzza M,Agarwal R,Short RA,Sabanegh E等(2007)Efficacy of varicocelectomy in improving semen parameters:new meta-analytical approach.Urology 70,532-538.

[文(wen)獻(xian)2]Agarwal A,Sharma RK,Desai NR,Prabakaran S,Tavares A&;Sabanegh E.(2009)Role of Oxidative Stress in Pathogenesis of Varicocele and Infertility.Urology 73,461-469.

[文獻3]Cheng D,Zheng XM,Li SW,Yang ZW&Hu LQ.(2006)Effects of epidermal growth factor on sperm content and motility of rats with surgically induced varicoceles.Asian J Androl 8,713-717.

[文獻(xian)4]Ding H,Tian JQ,Du W,Zhang LY,Wang HZ&Wang ZP.(2012)Open non-microsurgical,laparoscopic or open microsurgical varicocelectomy for male infertility:a meta-analysis of randomized controlled trials.BJU Int 110,1536-1542.

[文獻5]Evers JL&Collins JA.(2003)Assessment of efficacy of varicocele repair for male subfertility:a systematic review.The Lancet 361,1849-1852.

[文獻6]Ficarra V,Cerruto MA,Liguori G,Mazzoni G,Minucci S,Tracia A等(deng)(2006)Treatment of varicocele in subfertile men:the Cochrane reviewa contrary opinion.Eur Urol 49,258-263.

[文獻7]Fisch H&Hyun G.(2012)Varicocele repair for low testosterone.Curr Opin Urol 22,495-498.

[文獻8]Fretz PC&Sandlow JI.(2002)Varicocele:current concepts in pathophysiology,diagnosis,and treatment.Urol Clin North Am 29,921-937.

[文(wen)獻9]Mehta A&Goldstein M.(2012)Microsurgical varicocelectomy:a review.Asian J Androl 15,56-60.

[文(wen)獻10]Mehta A &Goldstein M.(2013)Microsurgical varicocelectomy:a review.Asian J Androl 15,56-60.

[文獻11]Sharma R,Agarwal A,Mohanty G,Hamada AJ,Gopalan B,Willard B等(2013)Proteomic analysis of human spermatozoa proteins with oxidative stress.Reprod Biol Endocrinol 11,48.

[文(wen)獻12]Tanriverdi O,Miroglu C,Horasanli K,Altay B,Caliskan KC&Gumus E.(2006)Testicular blood flow measurements and mean resistive index values after microsurgical and high ligation varicocelectomy.Urology 67,1262-1265.

[文獻(xian)13]Mark sigman,Stacy Glass,Janice Campagnone,John L.Reyor,Carnitine for the treatment of idiopathic asthenospermia:a randomized,double-blind,placebo-controlled trial,Fertility and Sterility Vol 85,No 5,2006.

技術實現要素：

技術問題

本發(fa)明(ming)涉及(ji)包含混合草藥提取物(wu)的用(yong)于治(zhi)療和預防男(nan)性不育癥的組(zu)合物(wu)，具(ju)體而言涉及(ji)包含巴戟天根(gen)、菟絲(si)子種子以及(ji)洋蔥鱗莖的混合草藥提取物(wu)作為有(you)效成分的用(yong)于預防和治(zhi)療男(nan)性不育癥的組(zu)合物(wu)。

已經存在(zai)報(bao)(bao)道(dao)稱(cheng)，男(nan)(nan)性因素不(bu)(bu)育癥的(de)(de)(de)(de)(de)(de)最可能得到治療(liao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)起因精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)索(suo)(suo)靜(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)脈(mo)(mo)曲(qu)(qu)(qu)張(zhang)(varicocele)是(shi)以精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)索(suo)(suo)內蔓狀叢(cong)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)靜(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)脈(mo)(mo)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)彎(wan)折(zhe)和(he)擴張(zhang)為(wei)特征。精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)索(suo)(suo)靜(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)脈(mo)(mo)曲(qu)(qu)(qu)張(zhang)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)患(huan)病率(lv)(lv)在(zai)患(huan)有(you)原(yuan)發(fa)性不(bu)(bu)育的(de)(de)(de)(de)(de)(de)男(nan)(nan)性中為(wei)19％-41％，而(er)(er)在(zai)患(huan)有(you)繼發(fa)性不(bu)(bu)育的(de)(de)(de)(de)(de)(de)男(nan)(nan)性中為(wei)高(gao)于80％(Agarwal A,Deppinder F,Cocuzza M,Agarwal R,Short RA,Sabanegh E等(2007)Efficacy of varicocelectomy in improving semen parameters:new meta-analytical approach.Urology 70,pp532-538；Agarwal A,Sharma RK,Desai NR,Prabakaran S,Tavares A &Sabanegh E.(2009)Role of Oxidative Stress in Pathogenesis of Varicocele and Infertility,Urology 73,pp461-469)。用于治療(liao)由(you)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)索(suo)(suo)靜(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)脈(mo)(mo)曲(qu)(qu)(qu)張(zhang)引起的(de)(de)(de)(de)(de)(de)男(nan)(nan)性不(bu)(bu)育癥的(de)(de)(de)(de)(de)(de)最常實施的(de)(de)(de)(de)(de)(de)外科手(shou)術(shu)(shu)(shu)是(shi)自(zi)多(duo)年前(qian)開始實施的(de)(de)(de)(de)(de)(de)曲(qu)(qu)(qu)張(zhang)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)索(suo)(suo)靜(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)脈(mo)(mo)切(qie)除(chu)術(shu)(shu)(shu)，其包括(kuo)非顯(xian)微外科手(shou)術(shu)(shu)(shu)方(fang)法、腹腔(qiang)鏡或(huo)顯(xian)微外科曲(qu)(qu)(qu)張(zhang)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)索(suo)(suo)靜(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)脈(mo)(mo)切(qie)除(chu)術(shu)(shu)(shu)(Mehta A及(ji)Goldstein M.(2012)Microsurgical varicocelectomy：a review.Asian J.Androl.，15，56-60頁)。就不(bu)(bu)育癥男(nan)(nan)性患(huan)者的(de)(de)(de)(de)(de)(de)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)索(suo)(suo)靜(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)脈(mo)(mo)曲(qu)(qu)(qu)張(zhang)進行(xing)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)手(shou)術(shu)(shu)(shu)矯正(zheng)而(er)(er)言(yan)，盡管在(zai)進行(xing)曲(qu)(qu)(qu)張(zhang)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)索(suo)(suo)靜(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)脈(mo)(mo)切(qie)除(chu)術(shu)(shu)(shu)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)患(huan)者中有(you)50％-80％顯(xian)示(shi)出(chu)(chu)改善的(de)(de)(de)(de)(de)(de)參數(妊(ren)娠率(lv)(lv)31％-74％)(Cheng D,Zheng XM,Li SW,Yang ZW&Hu LQ.(2006)Effects of epidermal growth factor on sperm content and motility of rats with surgically induced varicoceles.Asian J Androl 8,713-717；Ding H,Tian JQ,Du W,Zhang LY,Wang HZ&Wang ZP.(2012)Open non-microsurgical,laparoscopic or open microsurgical varicocelectomy for male infertility:a meta-analysis of randomized controlled trials.BJU Int 110,1536-1542；Fisch H&Hyun G.(2012)Varicocele repair for low testosterone.Curr Opin Urol 22,495-498；Fretz PC&Sandlow JI.(2002)Varicocele:current concepts in pathophysiology,diagnosis,and treatment.Urol Clin North Am 29,921-937；Mehta A&Goldstein M.(2013)Microsurgical varicocelectomy:a review.Asian J Androl 15,56-60；Tanriverdi O,Miroglu C,Horasanli K,Altay B,Caliskan KC&Gumus E.(2006)Testicular blood flow measurements and mean resistive index values after microsurgical and high ligation varicocelectomy.Urology 67,1262-1265)，然(ran)(ran)而(er)(er)，一些報(bao)(bao)道(dao)認為(wei)，由(you)于在(zai)不(bu)(bu)育癥術(shu)(shu)(shu)后顯(xian)示(shi)出(chu)(chu)高(gao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)妊(ren)娠失敗率(lv)(lv)，因此精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)索(suo)(suo)靜(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)脈(mo)(mo)曲(qu)(qu)(qu)張(zhang)修復對于男(nan)(nan)性而(er)(er)言(yan)似乎并(bing)非有(you)效的(de)(de)(de)(de)(de)(de)治療(liao)(Evers JL&Collins JA.(2003)Assessment of efficacy of varicocele repair for male subfertility:a systematic review.The Lancet 361,1849-1852；Ficarra V,Cerruto MA,Liguori G,Mazzoni G,Minucci S,Tracia A等(2006)Treatment of varicocele in subfertile men:the Cochrane review a contrary opinion.Eur Urol 49,258-263)。盡管精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)索(suo)(suo)靜(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)脈(mo)(mo)曲(qu)(qu)(qu)張(zhang)患(huan)者的(de)(de)(de)(de)(de)(de)睪(gao)丸功(gong)能受損導(dao)致(zhi)不(bu)(bu)育的(de)(de)(de)(de)(de)(de)確切(qie)機(ji)(ji)制目前(qian)為(wei)止尚未完全闡明，然(ran)(ran)而(er)(er)已經提出(chu)(chu)了一些假(jia)設的(de)(de)(de)(de)(de)(de)機(ji)(ji)制來對各種精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)索(suo)(suo)靜(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)脈(mo)(mo)曲(qu)(qu)(qu)張(zhang)相關的(de)(de)(de)(de)(de)(de)睪(gao)丸機(ji)(ji)能障礙進行(xing)研究，這些障礙包括(kuo)睪(gao)丸中的(de)(de)(de)(de)(de)(de)血流變化、陰囊溫度升高(gao)、異常激素值(zhi)、活性氧(ROS)過多(duo)等(Agarwal A,Sharma RK,Desai NR,Prabakaran S,Tavares A &Sabanegh E.(2009)Role of Oxidative Stress in Pathogenesis of Varicocele and Infertility.Urology 73,461-469；Fretz PC&Sandlow JI.(2002)Varicocele:current concepts in pathophysiology,diagnosis,and treatment.Urol Clin North Am 29,921-937)。

作(zuo)(zuo)為(wei)重(zhong)要的(de)(de)生理性細胞內過程(cheng)的(de)(de)調(diao)節(jie)劑，ROS(活(huo)性氧物(wu)質(zhi)(zhi))是由氧代(dai)謝和(he)能量(liang)產(chan)生過程(cheng)再生的(de)(de)副產(chan)物(wu)之一。少量(liang)ROS在(zai)對(dui)男(nan)性生殖道中精子(zi)(zi)功能的(de)(de)控制中起重(zhong)要作(zuo)(zuo)用。在(zai)異常條(tiao)件下，隨著ROS水平(ping)增加或抗(kang)氧化能力降低發生氧化應(ying)激。具體而(er)言(yan)，氧化應(ying)激引起精子(zi)(zi)中表達的(de)(de)蛋白質(zhi)(zhi)水平(ping)改變，導致分(fen)子(zi)(zi)和(he)基(ji)因產(chan)生缺陷(Sharma R,Agarwal A,Mohanty G,Hamada AJ,Gopalan B,Willard B等(2013)Proteomic analysis of human spermatozoa proteins with oxidative stress.Reprod Biol Endocrinol 11,48)。

正常地，健(jian)康夫婦(fu)的(de)妊娠(shen)率在性(xing)(xing)關系后第一個月達到(dao)(dao)20％-25％，半年(nian)(nian)時達到(dao)(dao)75％，并在一年(nian)(nian)時達到(dao)(dao)85％-90％。在臨床上(shang)，在將性(xing)(xing)關系后一年(nian)(nian)內(nei)妊娠(shen)失敗的(de)情況定義為“不育(yu)”的(de)條(tiao)件下，認(ren)為韓國已婚夫婦(fu)中不育(yu)患(huan)(huan)者比例為約(yue)13％-20％(約(yue)1,400,000對夫婦(fu))。其中，35％-50％的(de)不育(yu)是由男性(xing)(xing)健(jian)康問(wen)題(ti)引起的(de)，并且約(yue)30％的(de)問(wen)題(ti)是由精子活力降(jiang)低造成的(de)。男性(xing)(xing)不育(yu)是門(men)診(zhen)患(huan)(huan)者的(de)重要(yao)和嚴重疾病之一，占泌(mi)尿科醫(yi)院門(men)診(zhen)患(huan)(huan)者人數的(de)4％。

近來，由(you)于(yu)生(sheng)(sheng)殖生(sheng)(sheng)物(wu)學或ART(輔助生(sheng)(sheng)殖技術)的(de)進(jin)步(bu)，已經(jing)開發(fa)了(le)諸如(ru)IVF(體外受精)、顯微操作技術等(deng)各(ge)種ART。然(ran)而，這些(xie)技術也有(you)(you)著一些(xie)缺點和問題(ti)，例如(ru)，僅有(you)(you)20％至40％的(de)低妊娠(shen)率、需要過(guo)多費(fei)用、由(you)于(yu)抱怨疼痛而難以應用于(yu)女性、發(fa)生(sheng)(sheng)并發(fa)癥等(deng)。體外受精則(ze)可(ke)能引(yin)發(fa)遺傳問題(ti)，并主要限于(yu)對(dui)自然(ran)妊娠(shen)的(de)關注。

盡管不(bu)(bu)育(yu)癥的治(zhi)療已得到(dao)發展，然(ran)而(er)迄今(jin)為止(zhi)尚未(wei)開發治(zhi)療男性不(bu)(bu)育(yu)癥和提(ti)高(gao)(gao)精(jing)(jing)子活力(li)的有(you)效(xiao)(xiao)治(zhi)療劑，并且(qie)幾乎(hu)沒有(you)關于可提(ti)高(gao)(gao)妊娠率的藥物(wu)的研究。作(zuo)為對精(jing)(jing)子活力(li)低(di)的男性的精(jing)(jing)液參(can)數進行(xing)改(gai)善的現有(you)方法之(zhi)一，除內科和外科方法之(zhi)外，已經開發出(chu)L-肉堿作(zuo)為治(zhi)療劑，然(ran)而(er)據報(bao)道該藥物(wu)幾乎(hu)未(wei)顯示出(chu)明(ming)顯功效(xiao)(xiao)(Mark sigman,Stacy Glass,Janice Campagnone,John L.Reyor,Carnitine for the treatment of idiopathic asthenospermia:a randomized,double-blind,placebo-controlled trial,Fertility and Sterility Vol 85,No 5,2006)。

巴戟天(tian)根：據報(bao)道，屬于茜(qian)草科(ke)(Rubiaceae)并分布于中國(guo)南方地(di)區的(de)巴戟天(tian)的(de)根含有(you)維(wei)生素(su)C、糖等(B.S.Chung等,YoungRim Press,第(di)二版,DohaeHyangYakDaeSaJeon.,pp 927-928,1998)。

菟絲(si)子(zi)種子(zi)：據報道，屬(shu)于(yu)旋(xuan)花科(Convolvulaceae)的日本菟絲(si)子(zi)(Cuscuta japonica)等的種子(zi)含有(you)樹脂糖(tang)苷、糖(tang)、維生素A、β-胡蘿卜素、γ-胡蘿卜素、teraxanthin、葉(xie)黃素等(B.S.Chung等,YoungRim Press,第二版,DohaeHyangYakDaeSaJeon.,pp882-883,1998)。

洋蔥(cong)鱗莖：據報道，屬于百合科(Liliaceae)并源于西伯利(li)亞(ya)或阿(a)爾泰的洋蔥(cong)的鱗莖含有硫(liu)醇、二甲基二硫(liu)化物、二烯丙基二硫(liu)化物、咖啡(fei)酸、阿(a)魏酸、芥子酸等(B.S.Chung等,YoungRim Press,第二版,DohaeHyangYakDaeSaJeon.,pp155-156,1998)。

然而，任(ren)何上述(shu)引用文(wen)獻中均未報道或(huo)公開包含巴戟(ji)天根、菟(tu)絲子(zi)種子(zi)和洋蔥鱗莖的(de)混合草藥提取物對于男性不育(yu)癥具有治療效果，通過引用的(de)方式將(jiang)上述(shu)文(wen)獻的(de)公開內容并入本文(wen)。

因此，本發明人經過不(bu)懈努力，發現了用于治(zhi)療(liao)和(he)預防男(nan)性不(bu)育癥的(de)(de)(de)有效(xiao)草(cao)(cao)藥制劑，該(gai)包含(han)巴戟天根、菟絲子種子和(he)洋蔥鱗莖的(de)(de)(de)混(hun)合(he)草(cao)(cao)藥組合(he)物(wu)對(dui)人類不(bu)育癥顯示出有效(xiao)的(de)(de)(de)治(zhi)療(liao)效(xiao)果(guo)，該(gai)效(xiao)果(guo)通過多種實(shi)驗(yan)得以證實(shi)，例如體外精(jing)子質量促(cu)進效(xiao)果(guo)評價以及體內精(jing)索靜脈(mo)曲(qu)張動(dong)物(wu)模型(xing)評價方法(fa)，該(gai)方法(fa)用于對(dui)草(cao)(cao)藥提(ti)取(qu)物(wu)對(dui)體內精(jing)索靜脈(mo)曲(qu)張動(dong)物(wu)模型(xing)中精(jing)子計(ji)數和(he)活力變化的(de)(de)(de)影響進行研(yan)究。最后(hou)，本發明人發現，上(shang)述混(hun)合(he)草(cao)(cao)藥提(ti)取(qu)物(wu)在治(zhi)療(liao)和(he)預防男(nan)性不(bu)育癥中是有效(xiao)的(de)(de)(de)。

技術方案

本(ben)發(fa)明的(de)(de)課題在于開(kai)發(fa)通過提高(gao)精子活力(li)來提高(gao)妊(ren)娠率(lv)(lv)、最(zui)終恢復先前的(de)(de)高(gao)妊(ren)娠率(lv)(lv)的(de)(de)新(xin)方法(fa)。通過本(ben)發(fa)明，有助于提高(gao)不育夫(fu)婦的(de)(de)妊(ren)娠率(lv)(lv)并有助于開(kai)發(fa)國家(jia)政策中針對出(chu)生(sheng)率(lv)(lv)回復和高(gao)齡(ling)化社(she)會的(de)(de)應對體系、可開(kai)發(fa)新(xin)型天然(ran)藥物并創造(zao)新(xin)的(de)(de)附加值、可復興工(gong)業并提高(gao)國家(jia)利益。

為了解決上述(shu)問題(ti)，本發明提(ti)供了一種用于預防和治療男性(xing)不育癥的(de)藥物(wu)(wu)(wu)組(zu)合(he)物(wu)(wu)(wu)，所述(shu)藥物(wu)(wu)(wu)組(zu)合(he)物(wu)(wu)(wu)包含巴戟天(tian)根、菟(tu)絲子種子和洋蔥(cong)鱗莖的(de)混合(he)草藥提(ti)取物(wu)(wu)(wu)作(zuo)為活性(xing)成分(fen)。

本(ben)發明還提供了一種(zhong)用于預防和(he)改善男性(xing)(xing)(xing)不育(yu)癥(zheng)的保健(jian)功能(neng)性(xing)(xing)(xing)食品，所(suo)述保健(jian)功能(neng)性(xing)(xing)(xing)食品包含巴戟天(tian)根(gen)、菟絲(si)子種(zhong)子和(he)洋蔥鱗莖的混合草藥提取物作(zuo)為活性(xing)(xing)(xing)成分。

在本(ben)發明中，本(ben)文公開的“提取物(wu)”包括混(hun)合草(cao)藥(yao)提取物(wu)，優(you)選(xuan)巴戟(ji)天根、菟(tu)絲子(zi)(zi)種子(zi)(zi)和洋蔥鱗莖基于每(mei)種草(cao)藥(yao)的干重的混(hun)合比例(w/w)為0.01-100:0.01-1:1-100(w/w)，更優(you)選(xuan)為0.1-50:0.1-1:1-50(w/w)，進一步更優(you)選(xuan)為1-30:1:1-30(w/w)。

具體而言，本文公開的術語“提取物”包括可溶于水、C₁-C₄醇(chun)或它們的(de)(de)混合物(wu)(wu)的(de)(de)提(ti)取物(wu)(wu)，優(you)(you)選(xuan)可溶于水(shui)或水(shui)與乙醇(chun)的(de)(de)混合物(wu)(wu)的(de)(de)提(ti)取物(wu)(wu)，更優(you)(you)選(xuan)可溶于水(shui)與乙醇(chun)的(de)(de)混合物(wu)(wu)的(de)(de)提(ti)取物(wu)(wu)。

具體而言，本文公開的術語“男性不育癥”包括所有的男性不育癥，例如但不限于由諸如順鉑、長春堿(vinblastin)、博來霉素等抗癌劑的不良反應引起的男性不育癥；無精子癥(精子計數無)、少精子癥(精子計數≤2×10⁷/ml)、弱精子癥(高活力(li)精子比例(li)≤40％)、畸形(xing)精子癥(正(zheng)常精子比例(li)≤40％)等(deng)與精子相(xiang)關(guan)的不(bu)育(yu)癥(參見Korean Society for sexual medicine and andrology,Textbook of andrology,2010)。

下文對本發明進(jin)行詳細說明。可根據以下常(chang)規(gui)提取(qu)方法得到單一草(cao)藥(yao)(yao)提取(qu)物和混合草(cao)藥(yao)(yao)提取(qu)物。

例如，本(ben)(ben)發(fa)明還提供了一種(zhong)制(zhi)(zhi)備本(ben)(ben)發(fa)明的(de)草(cao)藥提取(qu)物的(de)方(fang)法，所(suo)述方(fang)法包(bao)括以下(xia)步驟(zou)：在(zai)第(di)1步驟(zou)，分別對干(gan)燥(zao)的(de)巴戟天根(gen)、菟(tu)絲子(zi)(zi)種(zhong)子(zi)(zi)和洋蔥鱗莖進(jin)行(xing)洗滌，并向其添加1至(zhi)20倍(bei)(w/v)、優(you)(you)選1至(zhi)10倍(bei)(w/v)體(ti)積(ji)的(de)水、諸如甲醇、乙(yi)醇等醇或(huo)它們的(de)混(hun)合(he)物，優(you)(you)選水、乙(yi)醇或(huo)它們的(de)混(hun)合(he)物；在(zai)第(di)2步驟(zou)，通過以下(xia)提取(qu)方(fang)法對各(ge)溶液進(jin)行(xing)提取(qu)：在(zai)50℃～120℃、優(you)(you)選約80℃～100℃的(de)溫度下(xia)，用(yong)熱水、冷(leng)水或(huo)超(chao)聲(sheng)波提取(qu)(優(you)(you)選熱水提取(qu))1至(zhi)5小(xiao)時(shi)、優(you)(you)選2至(zhi)4小(xiao)時(shi)；在(zai)第(di)3步驟(zou)，重復上述提取(qu)過程來過濾(lv)收集各(ge)濾(lv)液，通過冷(leng)凍干(gan)燥(zao)、自然(ran)空氣干(gan)燥(zao)或(huo)熱空氣干(gan)燥(zao)工(gong)(gong)序(優(you)(you)選冷(leng)凍干(gan)燥(zao)工(gong)(gong)序)進(jin)行(xing)干(gan)燥(zao)，分別獲(huo)得(de)巴戟天根(gen)、菟(tu)絲子(zi)(zi)種(zhong)子(zi)(zi)或(huo)洋蔥鱗莖的(de)干(gan)燥(zao)提取(qu)物；以及在(zai)第(di)4步驟(zou)，基于每種(zhong)草(cao)藥的(de)干(gan)重，以巴戟天根(gen):菟(tu)絲子(zi)(zi)種(zhong)子(zi)(zi):洋蔥鱗莖的(de)混(hun)合(he)比例(w/w)為0.01-100:0.01-1:1-100(w/w)、優(you)(you)選0.1-50:0.1-1:1-50(w/w)、更優(you)(you)選1-30:1:1-30(w/w)混(hun)合(he)每種(zhong)草(cao)藥的(de)干(gan)燥(zao)提取(qu)物，從而制(zhi)(zhi)備本(ben)(ben)發(fa)明的(de)混(hun)合(he)草(cao)藥提取(qu)物。

本(ben)發(fa)明的(de)另一目(mu)的(de)是提(ti)供一種用于預防和治療(liao)男性不(bu)育癥(zheng)的(de)藥物組合物或保(bao)健功(gong)能性食(shi)品，其包含通過上(shang)述(shu)方法獲得的(de)上(shang)述(shu)巴戟天根、菟絲子(zi)種子(zi)和洋(yang)蔥鱗莖(jing)的(de)草藥提(ti)取(qu)物作為活性成分。

本(ben)發明(ming)的(de)巴(ba)戟(ji)天根、菟絲子種(zhong)子和(he)(he)洋蔥鱗莖的(de)草藥提(ti)(ti)取(qu)物(wu)對(dui)人(ren)類不育(yu)癥(zheng)顯(xian)示出有(you)(you)效的(de)治(zhi)療效果，這通過多種(zhong)實(shi)(shi)驗(yan)得以(yi)證實(shi)(shi)，例如體外精(jing)(jing)子質量促進效果評價(jia)以(yi)及體內精(jing)(jing)索靜脈曲(qu)張動物(wu)模型(xing)評價(jia)方法(fa)，該方法(fa)用于對(dui)草藥提(ti)(ti)取(qu)物(wu)對(dui)體內精(jing)(jing)索靜脈曲(qu)張動物(wu)模型(xing)中精(jing)(jing)子計(ji)數和(he)(he)活(huo)力變(bian)化的(de)影響進行研究，已經證實(shi)(shi)本(ben)發明(ming)的(de)混(hun)合提(ti)(ti)取(qu)物(wu)對(dui)精(jing)(jing)子計(ji)數和(he)(he)精(jing)(jing)子活(huo)力顯(xian)示出更有(you)(you)效的(de)提(ti)(ti)升作用。因此，本(ben)發明(ming)的(de)草藥提(ti)(ti)取(qu)物(wu)可以(yi)有(you)(you)效地用于預防和(he)(he)治(zhi)療男性不育(yu)癥(zheng)的(de)藥物(wu)組合物(wu)、保健功能(neng)性食品和(he)(he)保健補充食品中。

本發明(ming)的用(yong)于(yu)治(zhi)療目標疾病的藥物組(zu)合物可以(yi)基于(yu)組(zu)合物的總重(zhong)量包含約0.01w/w％至99w/w％的上述(shu)本發明(ming)的草藥提取物。

然而(er)，上述(shu)組(zu)合物的(de)(de)(de)量和每種(zhong)組(zu)分(fen)可隨患(huan)者(zhe)的(de)(de)(de)狀況、患(huan)者(zhe)疾病(bing)的(de)(de)(de)發展、疾病(bing)的(de)(de)(de)種(zhong)類等而(er)變化。

本發明的含(han)有提取(qu)物的組合物可以(yi)根據使用方(fang)法而另(ling)外包(bao)含(han)常(chang)規(gui)的載體、佐(zuo)劑或(huo)稀釋劑。

可(ke)(ke)將本(ben)發明(ming)所(suo)述(shu)的草藥(yao)組合(he)物(wu)(wu)配(pei)制為口(kou)服(fu)(fu)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)型(xing)，如(ru)(ru)(ru)散(san)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、顆(ke)粒劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、片劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、膠(jiao)囊劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、混(hun)懸(xuan)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、乳劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、糖(tang)(tang)(tang)漿(jiang)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、氣(qi)霧劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)等；局部制劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)；或(huo)者注射溶液(ye)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)。本(ben)發明(ming)所(suo)述(shu)的草藥(yao)組合(he)物(wu)(wu)可(ke)(ke)以作為含有(you)藥(yao)學上可(ke)(ke)接受(shou)的載(zai)(zai)體(ti)、佐劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)或(huo)稀釋劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)的藥(yao)物(wu)(wu)組合(he)物(wu)(wu)提(ti)供(gong)，所(suo)述(shu)載(zai)(zai)體(ti)、佐劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)或(huo)稀釋劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)例(li)如(ru)(ru)(ru)乳糖(tang)(tang)(tang)、葡萄(tao)糖(tang)(tang)(tang)、蔗(zhe)糖(tang)(tang)(tang)、山梨(li)糖(tang)(tang)(tang)醇(chun)、甘露糖(tang)(tang)(tang)醇(chun)、木(mu)糖(tang)(tang)(tang)醇(chun)、赤蘚(xian)糖(tang)(tang)(tang)醇(chun)、麥芽糖(tang)(tang)(tang)醇(chun)、淀粉、阿拉伯(bo)膠(jiao)、藻酸(suan)(suan)(suan)鹽、明(ming)膠(jiao)、磷酸(suan)(suan)(suan)鈣(gai)、硅(gui)酸(suan)(suan)(suan)鈣(gai)、纖維素、甲基(ji)纖維素、微晶纖維素、聚(ju)乙(yi)烯吡咯烷(wan)酮、水(shui)、羥(qian)(qian)基(ji)苯甲酸(suan)(suan)(suan)甲酯(zhi)、羥(qian)(qian)基(ji)苯甲酸(suan)(suan)(suan)丙(bing)酯(zhi)、硬(ying)脂(zhi)酸(suan)(suan)(suan)鎂和礦(kuang)物(wu)(wu)油(you)(you)。所(suo)述(shu)制劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)還可(ke)(ke)另(ling)外包(bao)(bao)含賦形劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)，如(ru)(ru)(ru)填充劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、膨脹(zhang)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、粘合(he)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、潤(run)濕(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、崩解(jie)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、表面活性(xing)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、稀釋劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)等。固(gu)體(ti)口(kou)服(fu)(fu)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)型(xing)包(bao)(bao)括片劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、丸劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、散(san)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、顆(ke)粒劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、膠(jiao)囊劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)等；所(suo)述(shu)固(gu)體(ti)口(kou)服(fu)(fu)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)型(xing)通(tong)過將至(zhi)少(shao)一種賦形劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(如(ru)(ru)(ru)淀粉、碳酸(suan)(suan)(suan)鈣(gai)、蔗(zhe)糖(tang)(tang)(tang)、乳糖(tang)(tang)(tang)或(huo)明(ming)膠(jiao)等)添加至(zhi)所(suo)述(shu)草藥(yao)提(ti)取(qu)物(wu)(wu)來制備。可(ke)(ke)以使用諸如(ru)(ru)(ru)硬(ying)脂(zhi)酸(suan)(suan)(suan)鎂或(huo)滑石等的潤(run)滑劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)。水(shui)性(xing)口(kou)服(fu)(fu)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)型(xing)包(bao)(bao)括混(hun)懸(xuan)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、口(kou)服(fu)(fu)溶液(ye)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、乳劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、糖(tang)(tang)(tang)漿(jiang)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)；所(suo)述(shu)水(shui)性(xing)口(kou)服(fu)(fu)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)型(xing)可(ke)(ke)包(bao)(bao)含數種賦形劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)，如(ru)(ru)(ru)潤(run)濕(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、甜(tian)味劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、芳(fang)香劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、防腐(fu)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、以及水(shui)、液(ye)體(ti)石蠟。胃腸外劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)型(xing)包(bao)(bao)括無(wu)菌水(shui)溶液(ye)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、非水(shui)性(xing)溶劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、混(hun)懸(xuan)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、乳劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、凍干(gan)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)、栓劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)等。載(zai)(zai)體(ti)的合(he)適實例(li)包(bao)(bao)括丙(bing)二醇(chun)、聚(ju)乙(yi)二醇(chun)、植物(wu)(wu)油(you)(you)(如(ru)(ru)(ru)橄欖油(you)(you))、可(ke)(ke)注射的酯(zhi)(如(ru)(ru)(ru)油(you)(you)酸(suan)(suan)(suan)乙(yi)酯(zhi))。栓劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)基(ji)質(zhi)可(ke)(ke)包(bao)(bao)括witepsol、macrogol、吐(tu)溫(wen)61、可(ke)(ke)可(ke)(ke)脂(zhi)、月桂(gui)精(laurin)、甘油(you)(you)明(ming)膠(jiao)等，但并不(bu)限于此。

本(ben)發明組合物的(de)(de)期(qi)望(wang)劑(ji)量(liang)(liang)根據受試(shi)者的(de)(de)狀況和體(ti)重(zhong)(zhong)、疾病嚴重(zhong)(zhong)程度、藥(yao)物形式、給藥(yao)途徑和周期(qi)而(er)變化，并可(ke)(ke)以(yi)由(you)本(ben)領(ling)域技術人(ren)員進行選擇。然而(er)，為了獲得期(qi)望(wang)的(de)(de)效果，通常推薦以(yi)如下(xia)劑(ji)量(liang)(liang)的(de)(de)量(liang)(liang)給予本(ben)發明的(de)(de)組合物：0.01mg/kg重(zhong)(zhong)量(liang)(liang)/天(tian)至10g/kg重(zhong)(zhong)量(liang)(liang)/天(tian)、優選1mg/kg重(zhong)(zhong)量(liang)(liang)/天(tian)至1g/kg重(zhong)(zhong)量(liang)(liang)/天(tian)。所述劑(ji)量(liang)(liang)可(ke)(ke)以(yi)每天(tian)以(yi)單次劑(ji)量(liang)(liang)或多次劑(ji)量(liang)(liang)給予。因此，上述劑(ji)量(liang)(liang)并不以(yi)任何方式限(xian)制(zhi)本(ben)發明的(de)(de)范圍。

可(ke)以(yi)通(tong)過(guo)各(ge)種(zhong)途徑向諸如哺乳動物(wu)(wu)的受(shou)試動物(wu)(wu)(大(da)鼠、小鼠、家(jia)養動物(wu)(wu)或人)給(gei)(gei)(gei)予本(ben)發明的藥(yao)物(wu)(wu)組合物(wu)(wu)。所有給(gei)(gei)(gei)藥(yao)模式均在預期之內，例如，可(ke)以(yi)口服給(gei)(gei)(gei)藥(yao)、直(zhi)腸(chang)給(gei)(gei)(gei)藥(yao)或通(tong)過(guo)靜脈內注(zhu)射進行(xing)給(gei)(gei)(gei)藥(yao)。

本(ben)發(fa)明(ming)的(de)(de)又一目的(de)(de)在于(yu)(yu)(yu)(yu)提(ti)供(gong)一種(zhong)(zhong)用于(yu)(yu)(yu)(yu)預防和(he)治療男性(xing)(xing)(xing)不(bu)育癥(zheng)的(de)(de)精(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)活力改(gai)善(shan)劑(ji)(ji)，其(qi)包(bao)(bao)含巴戟天根、菟絲子(zi)(zi)種(zhong)(zhong)子(zi)(zi)和(he)洋蔥(cong)鱗莖的(de)(de)混合草藥提(ti)取物作為活性(xing)(xing)(xing)成分。所述精(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)活力改(gai)善(shan)劑(ji)(ji)可(ke)以提(ti)高體(ti)(ti)外受(shou)(shou)精(jing)(jing)(jing)的(de)(de)受(shou)(shou)精(jing)(jing)(jing)率。另外，可(ke)將(jiang)本(ben)發(fa)明(ming)的(de)(de)包(bao)(bao)含所述提(ti)取物的(de)(de)男性(xing)(xing)(xing)不(bu)育癥(zheng)治療劑(ji)(ji)用作女性(xing)(xing)(xing)用陰道(dao)用藥劑(ji)(ji)、陰道(dao)栓劑(ji)(ji)以及陰道(dao)用插入劑(ji)(ji)，用于(yu)(yu)(yu)(yu)增強精(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)活力。另一方面，本(ben)發(fa)明(ming)提(ti)供(gong)了一種(zhong)(zhong)用于(yu)(yu)(yu)(yu)在體(ti)(ti)外受(shou)(shou)精(jing)(jing)(jing)時(shi)提(ti)高受(shou)(shou)精(jing)(jing)(jing)率的(de)(de)、用于(yu)(yu)(yu)(yu)體(ti)(ti)外受(shou)(shou)精(jing)(jing)(jing)中的(de)(de)精(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)保存的(de)(de)添加劑(ji)(ji)，所述添加劑(ji)(ji)包(bao)(bao)含上述提(ti)取物。

本發明的(de)又一(yi)目的(de)在于提供(gong)一(yi)種治(zhi)療方法，所述方法包(bao)括向(xiang)需要治(zhi)療或預防男性(xing)不育癥的(de)受試者(zhe)給予包(bao)含巴戟天(tian)根(gen)、菟(tu)絲子種子和洋蔥鱗(lin)莖的(de)混合草藥(yao)提取物的(de)組合物。

本發明的(de)又一目(mu)的(de)在(zai)于提供(gong)巴戟天根、菟絲子種子和洋蔥鱗莖的(de)混合草藥(yao)(yao)提取物作為活性成(cheng)分在(zai)制造用(yong)于預防(fang)和治(zhi)療人(ren)或哺乳(ru)動物中雄性不育癥的(de)藥(yao)(yao)物中的(de)用(yong)途。

根據本發明的(de)(de)(de)一(yi)方面，提(ti)(ti)供了一(yi)種(zhong)用于預防(fang)或改(gai)善(shan)男性(xing)不育癥的(de)(de)(de)保健(jian)功(gong)能性(xing)食品(pin)，所述保健(jian)功(gong)能性(xing)食品(pin)包(bao)含巴戟天根、菟絲子(zi)種(zhong)子(zi)和洋(yang)蔥鱗莖的(de)(de)(de)混合草(cao)藥提(ti)(ti)取物作為活性(xing)成分。

本(ben)文所定(ding)義的(de)術語(yu)“保健功(gong)能(neng)性食(shi)品(pin)”包(bao)括通過(guo)將(jiang)本(ben)發(fa)明的(de)提(ti)取物添(tian)加至(zhi)常規食(shi)品(pin)中以對(dui)人或(huo)(huo)哺乳動(dong)物的(de)目標疾病進行預防(fang)或(huo)(huo)改善，具有增強的(de)功(gong)能(neng)性(如(ru)物理功(gong)能(neng)或(huo)(huo)生(sheng)理功(gong)能(neng))，并且符合韓國(guo)保健功(gong)能(neng)性食(shi)品(pin)法6727條(the Law for Health Functional Foods 6727in Republic of Korea)規定(ding)的(de)功(gong)能(neng)性食(shi)品(pin)。

用(yong)于(yu)(yu)預防和改善目標疾病的(de)保健功能性食品組合(he)(he)物(wu)(wu)可基于(yu)(yu)組合(he)(he)物(wu)(wu)的(de)總重量包含約(yue)0.01w/w％至(zhi)95w/w％、優(you)選1w/w％至(zhi)80w/w％的(de)上述本發明的(de)草藥組合(he)(he)物(wu)(wu)。

此(ci)外，還可將本(ben)發明的(de)(de)提取物用作制備用于預防或改善(shan)男(nan)性不育癥、或改善(shan)睪丸(wan)功能的(de)(de)各種(zhong)保健(jian)功能性食品(pin)和保健(jian)補充食品(pin)的(de)(de)主要成分或添加劑(ji)(ji)和助劑(ji)(ji)(aiding agent)。

本發(fa)明(ming)的用(yong)于預防或改善男性不育癥(zheng)的保健功能性食(shi)品可(ke)以制備和加工(gong)為(wei)藥學(xue)上可(ke)接(jie)受(shou)的劑(ji)(ji)型(xing)(如(ru)散(san)劑(ji)(ji)、顆粒劑(ji)(ji)、片劑(ji)(ji)、膠(jiao)囊劑(ji)(ji)、丸(wan)劑(ji)(ji)、混懸劑(ji)(ji)、乳劑(ji)(ji)、糖漿劑(ji)(ji)等)或保健功能性食(shi)品形式(如(ru)茶袋、浸出茶(leached tea)、保健飲料等)。

本(ben)發明的(de)(de)又一目的(de)(de)在于(yu)(yu)提供一種用于(yu)(yu)預防或改(gai)善男性不育(yu)癥的(de)(de)保健(jian)補充(chong)食品，所述保健(jian)補充(chong)食品包含巴(ba)戟天(tian)根、菟絲子種子和洋(yang)蔥(cong)鱗莖的(de)(de)混合(he)草藥提取物作為主要成分。

上(shang)述術語“作為主要成分”是(shi)指上(shang)述保健補(bu)充食品基于(yu)組(zu)合物的總重量包含約30w/w％至(zhi)99w/w％、優選(xuan)50w/w％至(zhi)99w/w％、更優選(xuan)70w/w％至(zhi)99w/w％的本發明(ming)提取物(活(huo)性(xing)成分)。

當將本發明的(de)(de)混合(he)(he)草(cao)藥提(ti)取(qu)物(wu)(wu)(wu)(wu)用作保(bao)健(jian)(jian)功(gong)能(neng)性飲料(liao)組(zu)(zu)(zu)合(he)(he)物(wu)(wu)(wu)(wu)中的(de)(de)組(zu)(zu)(zu)分時，不受限制地，類似于典型的(de)(de)飲料(liao)組(zu)(zu)(zu)合(he)(he)物(wu)(wu)(wu)(wu)，所述保(bao)健(jian)(jian)功(gong)能(neng)性飲料(liao)組(zu)(zu)(zu)合(he)(he)物(wu)(wu)(wu)(wu)可包含其(qi)它組(zu)(zu)(zu)分，如(ru)調(diao)味(wei)(wei)劑(ji)或天然(ran)碳水(shui)化合(he)(he)物(wu)(wu)(wu)(wu)。天然(ran)碳水(shui)化合(he)(he)物(wu)(wu)(wu)(wu)的(de)(de)實(shi)例包括單糖(tang)(tang)(tang)，如(ru)葡萄糖(tang)(tang)(tang)、果糖(tang)(tang)(tang)等(deng)；二糖(tang)(tang)(tang)，如(ru)麥芽(ya)糖(tang)(tang)(tang)、蔗(zhe)糖(tang)(tang)(tang)等(deng)；以(yi)及多糖(tang)(tang)(tang)，例如(ru)，諸(zhu)如(ru)糊精、環糊精等(deng)糖(tang)(tang)(tang)以(yi)及諸(zhu)如(ru)木(mu)糖(tang)(tang)(tang)醇、山梨糖(tang)(tang)(tang)醇、赤(chi)蘚糖(tang)(tang)(tang)醇等(deng)糖(tang)(tang)(tang)醇。可在所述保(bao)健(jian)(jian)功(gong)能(neng)性飲料(liao)組(zu)(zu)(zu)合(he)(he)物(wu)(wu)(wu)(wu)中添加(jia)天然(ran)調(diao)味(wei)(wei)劑(ji)(索馬甜(tian)、甜(tian)葉菊提(ti)取(qu)物(wu)(wu)(wu)(wu)(萊(lai)鮑迪苷A、甘草(cao)甜(tian)素(su)等(deng)))和合(he)(he)成調(diao)味(wei)(wei)劑(ji)(糖(tang)(tang)(tang)精、阿斯(si)巴甜(tian)等(deng))。天然(ran)碳水(shui)化合(he)(he)物(wu)(wu)(wu)(wu)的(de)(de)量通常(chang)為(wei)在每100ml本發明組(zu)(zu)(zu)合(he)(he)物(wu)(wu)(wu)(wu)中添加(jia)約(yue)1g至(zhi)20g、優選約(yue)5g至(zhi)12g。

當將本發明的混(hun)合(he)草藥(yao)提取(qu)物(wu)用(yong)作(zuo)用(yong)于(yu)(yu)預(yu)防或(huo)改善目標疾病的保健食品(pin)(pin)的食品(pin)(pin)添(tian)加(jia)劑時，所(suo)述混(hun)合(he)草藥(yao)提取(qu)物(wu)可以原樣添(tian)加(jia)或(huo)根據通常方法與其它食品(pin)(pin)組(zu)分共同使用(yong)。所(suo)述食品(pin)(pin)的實(shi)例包括肉制(zhi)品(pin)(pin)、香(xiang)腸、面(mian)(mian)包、巧克(ke)力、糖果、小吃、薄(bo)脆餅(cracker)、餅干(gan)(biscuit)、比薩(sa)餅、拉面(mian)(mian)、面(mian)(mian)條制(zhi)品(pin)(pin)、口香(xiang)糖、諸如冰淇淋等乳制(zhi)品(pin)(pin)、湯(tang)、飲(yin)料、茶、飲(yin)品(pin)(pin)、酒精飲(yin)品(pin)(pin)、維生素復合(he)物(wu)等，但(dan)在本文中并不限于(yu)(yu)此。

除(chu)上(shang)(shang)述組(zu)(zu)(zu)成之外(wai)的(de)(de)其它組(zu)(zu)(zu)分為(wei)各種營養素、維生素、礦(kuang)物質或電解(jie)質、諸(zhu)如天然(ran)調味(wei)劑(ji)(ji)(ji)和(he)合(he)成調味(wei)劑(ji)(ji)(ji)等(deng)調味(wei)劑(ji)(ji)(ji)、著色劑(ji)(ji)(ji)和(he)改良劑(ji)(ji)(ji)(在干酪、巧克力等(deng)的(de)(de)情況(kuang)下)、果膠酸及其鹽(yan)、藻(zao)酸及其鹽(yan)、有機酸、保護性膠體粘合(he)劑(ji)(ji)(ji)、pH調節劑(ji)(ji)(ji)、穩定劑(ji)(ji)(ji)、防腐劑(ji)(ji)(ji)、甘油、醇、用(yong)(yong)于碳(tan)酸飲料(liao)的(de)(de)碳(tan)化劑(ji)(ji)(ji)等(deng)。除(chu)上(shang)(shang)述組(zu)(zu)(zu)分之外(wai)的(de)(de)其它組(zu)(zu)(zu)分可以是(shi)用(yong)(yong)于制(zhi)備天然(ran)果汁(zhi)、果汁(zhi)飲料(liao)和(he)蔬菜(cai)飲料(liao)的(de)(de)果汁(zhi)。其中，上(shang)(shang)述組(zu)(zu)(zu)分可以單獨使(shi)用(yong)(yong)或組(zu)(zu)(zu)合(he)使(shi)用(yong)(yong)。上(shang)(shang)述組(zu)(zu)(zu)分的(de)(de)比例并非(fei)特(te)別重要，但(dan)是(shi)通常范(fan)圍為(wei)每100w/w％本發明組(zu)(zu)(zu)合(he)物中約0w/w％至20w/w％。

另(ling)外(wai)，可(ke)將上述提取(qu)物添加至(zhi)(zhi)食(shi)品(pin)(pin)(pin)或飲料以用于(yu)對目標疾(ji)病進行(xing)預防和改(gai)善。作為保健功能性食(shi)品(pin)(pin)(pin)或保健補充食(shi)品(pin)(pin)(pin)的(de)(de)食(shi)品(pin)(pin)(pin)或飲料中(zhong)(zhong)的(de)(de)上述提取(qu)物的(de)(de)量(liang)通(tong)常可(ke)以是用于(yu)保健功能性食(shi)品(pin)(pin)(pin)組合(he)物的(de)(de)食(shi)品(pin)(pin)(pin)總(zong)重量(liang)的(de)(de)約0.01w/w％至(zhi)(zhi)15w/w％。并且，本發明的(de)(de)提取(qu)物可(ke)在每100ml保健飲料組合(he)物中(zhong)(zhong)添加0.02g至(zhi)(zhi)5g、優選0.3g至(zhi)(zhi)1g。

有益效果

如本發(fa)(fa)明(ming)(ming)所述，本發(fa)(fa)明(ming)(ming)的混(hun)合(he)(he)草(cao)藥組(zu)合(he)(he)物(wu)對(dui)(dui)人類不育(yu)癥(zheng)顯示(shi)出有效(xiao)(xiao)的治療效(xiao)(xiao)果，這(zhe)通過多種(zhong)實(shi)驗得以(yi)證實(shi)，例如體外(wai)精(jing)子(zi)質(zhi)量(liang)促進效(xiao)(xiao)果評價以(yi)及體內(nei)(nei)精(jing)索靜脈(mo)曲張(zhang)動物(wu)模型(xing)(xing)評價方(fang)法(fa)，該方(fang)法(fa)用(yong)于對(dui)(dui)草(cao)藥提取物(wu)對(dui)(dui)體內(nei)(nei)精(jing)索靜脈(mo)曲張(zhang)動物(wu)模型(xing)(xing)中精(jing)子(zi)計(ji)數和(he)(he)活力(li)(li)變化的影(ying)響進行研究，已(yi)經證實(shi)本發(fa)(fa)明(ming)(ming)的混(hun)合(he)(he)提取物(wu)對(dui)(dui)精(jing)子(zi)計(ji)數和(he)(he)精(jing)子(zi)活力(li)(li)顯示(shi)出更有效(xiao)(xiao)的提升作用(yong)。因此，本發(fa)(fa)明(ming)(ming)的草(cao)藥提取物(wu)可以(yi)有效(xiao)(xiao)地用(yong)于預防和(he)(he)治療男性不育(yu)癥(zheng)的藥物(wu)組(zu)合(he)(he)物(wu)、保(bao)健功(gong)能性食品和(he)(he)保(bao)健補充食品中。

附圖說明

圖1示出(chu)了(le)測(ce)(ce)試(shi)(shi)樣(yang)品(巴戟天根、菟絲子(zi)種子(zi)和(he)洋蔥鱗莖的(de)混合(he)草藥提取物)對人(ren)精液中的(de)人(ren)精子(zi)計(ji)數和(he)人(ren)精子(zi)活力的(de)改(gai)善效(xiao)果(在測(ce)(ce)試(shi)(shi)前，對CINTM1(10:1:10)、CINTM1(5:1:5)和(he)CINTM1(1:1:1)的(de)每一測(ce)(ce)試(shi)(shi)樣(yang)品進行了(le)初步測(ce)(ce)試(shi)(shi))。

圖2示出了(le)對于每(mei)種草藥的(de)(de)提(ti)(ti)(ti)(ti)取物(wu)和(he)混合草藥提(ti)(ti)(ti)(ti)取物(wu)，測(ce)試樣品對人(ren)精液中的(de)(de)人(ren)精子(zi)(zi)計(ji)數和(he)人(ren)精子(zi)(zi)活(huo)力的(de)(de)改善(shan)效果(CINThera-1：巴戟天(tian)根提(ti)(ti)(ti)(ti)取物(wu)；CINThera-2：菟(tu)絲子(zi)(zi)種子(zi)(zi)提(ti)(ti)(ti)(ti)取物(wu)；CINThera-3：洋蔥鱗(lin)莖(jing)提(ti)(ti)(ti)(ti)取物(wu)；10:1:10表示以巴戟天(tian)根:菟(tu)絲子(zi)(zi)種子(zi)(zi):洋蔥鱗(lin)莖(jing)＝10:1:10進行混合)。

圖3示出了測試樣品(pin)對誘導精索靜(jing)脈曲張的(de)動物組(zu)(zu)中的(de)精子計數的(de)改(gai)善效(xiao)果(guo)(CTR：對照組(zu)(zu)，OP：手術(shu)組(zu)(zu))。

圖4顯示了測試樣品對誘導精索靜脈曲張(zhang)的(de)動物組(zu)中的(de)精子活力的(de)改善效果(CTR：對照組(zu)，OP：手術組(zu))。

具體實施方式

通過以(yi)下(xia)實(shi)施例(li)和試驗(yan)例(li)更具體地解(jie)釋本發(fa)明。

實施例

以(yi)下實施例和試(shi)驗例旨(zhi)在(zai)進一步說明(ming)本發明(ming)而不限(xian)制其范(fan)圍。

實施例1各組分(單一草藥提取物)的制(zhi)備

(1)巴戟(ji)天根提(ti)取物(CINThera-1)

將3,000g購自位于首爾(er)的(de)慶東市場(chang)的(de)干燥巴(ba)戟天根(gen)(Dukhyundang Pharmacy)洗滌并添加(jia)至(zhi)6L的(de)95％乙(yi)醇中，用(yong)超聲提取(qu)90分鐘進行(xing)3次提取(qu)。用(yong)濾(lv)紙對殘余物(wu)進行(xing)過濾(lv)，得到提取(qu)物(wu)，并將過濾(lv)的(de)提取(qu)物(wu)在真空下濃縮。用(yong)冷凍干燥器(ScanVac，Labogene)對濃縮的(de)提取(qu)物(wu)進行(xing)干燥，得到139.4g(產率：4.6％)巴(ba)戟天根(gen)提取(qu)物(wu)粉末，在4℃下儲存(cun)。

在用(yong)于(yu)后續實驗(yan)之(zhi)前，將(jiang)干燥(zao)提取物溶于(yu)生(sheng)理鹽水溶液中(zhong)并在室溫下劇烈(lie)攪拌2分(fen)鐘(zhong)。

(2)菟絲(si)子種子提取物(CINThera-2)

將5.2kg購自(zi)位(wei)于首爾的慶東市場的干燥菟絲(si)子(zi)(zi)種子(zi)(zi)(Backjangsaeng Pharmacy)洗滌、粉(fen)碎并(bing)添加至5L的95％乙醇中(zhong)，用(yong)超聲(sheng)提取(qu)90分鐘進(jin)(jin)行(xing)2次(ci)提取(qu)。用(yong)濾(lv)紙對(dui)殘(can)余物進(jin)(jin)行(xing)過濾(lv)，得到提取(qu)物，并(bing)將過濾(lv)的提取(qu)物在真空(kong)下(xia)濃縮。用(yong)冷凍干燥器(ScanVac，Labogene)對(dui)濃縮的提取(qu)物進(jin)(jin)行(xing)干燥，得到264.3g(產率：4.36％)菟絲(si)子(zi)(zi)種子(zi)(zi)提取(qu)物粉(fen)末，在4℃下(xia)儲(chu)存。

在(zai)用于后(hou)續實驗之前，將(jiang)干燥提取物溶于生理鹽水溶液中并在(zai)室溫下劇烈攪拌(ban)2分鐘(zhong)。

(3)洋(yang)蔥鱗莖(jing)提取(qu)物(CINThera-3)

將1,000g購自位(wei)于慶尚南道(韓國)的(de)昌寧市場(chang)的(de)洋蔥鱗(lin)莖(Backjangsaeng Pharmacy)洗滌、干(gan)燥并(bing)添加至5L的(de)70％乙醇中，在(zai)70℃下(xia)通過回流(liu)提(ti)取(qu)(qu)2小(xiao)時進(jin)行(xing)提(ti)取(qu)(qu)。用(yong)濾(lv)(lv)紙(zhi)對殘(can)余物進(jin)行(xing)過濾(lv)(lv)，得到(dao)提(ti)取(qu)(qu)物，并(bing)將過濾(lv)(lv)的(de)提(ti)取(qu)(qu)物在(zai)真空下(xia)濃縮。用(yong)冷凍干(gan)燥器(ScanVac，Labogene)對濃縮的(de)提(ti)取(qu)(qu)物進(jin)行(xing)干(gan)燥，得到(dao)13.8g(產率：1.38％)洋蔥鱗(lin)莖提(ti)取(qu)(qu)物粉末，在(zai)4℃下(xia)儲存(cun)。

在(zai)(zai)用于后續實驗之前(qian)，將干燥提(ti)取物溶于生理鹽水溶液(ye)中并(bing)在(zai)(zai)室溫下(xia)劇烈攪拌2分鐘。

實施(shi)例2混合草藥(yao)提(ti)取物的制(zhi)備(bei)(CINThera-1:CINThera-2:CINThera-3＝10:1:10)

分別稱量實(shi)施(shi)例1中制(zhi)備(bei)的干(gan)燥巴戟天根提取(qu)物(wu)(wu)(CINThera-1)10mg、菟(tu)絲子(zi)種子(zi)提取(qu)物(wu)(wu)(CINThera-2)1mg和(he)洋蔥鱗莖(jing)提取(qu)物(wu)(wu)(CINThera-3)10mg，使用混(hun)(hun)合(he)器(Vortex genie-2，scientific industries，USA)充分混(hun)(hun)合(he)，獲得混(hun)(hun)合(he)草藥(yao)提取(qu)物(wu)(wu)21mg，并在以下實(shi)驗中用作測試樣品(pin)(pin)。同樣制(zhi)備(bei)5:1:5和(he)1:1:1的測試樣品(pin)(pin)。

(以下(xia)稱為“CINTM1”)

試驗例1.體外精子(zi)活(huo)力促進效果評價

為了對(dui)上述實施(shi)例中獲得的(de)本發明提(ti)取(qu)物對(dui)人精(jing)子的(de)精(jing)子計(ji)數和精(jing)子活力的(de)影響進(jin)行(xing)研究，根據文獻(xian)公(gong)開(kai)的(de)體外(wai)精(jing)子活力促進(jin)效(xiao)果(guo)評價方法(Martin Blomberg Jensen,Poul J.Bjerrum,Torben E.Jessen,John E.Nielsen,Ulla N.Joensen等(2011)Vitamin D is positively associated with sperm motility and increases intracellular calcium in human spermatozoa.Human Reproduction,Vol.26,No.6pp.1307-1317)進(jin)行(xing)了以下體外(wai)實驗。

1-1.實驗程序

對來自患(huan)有不育癥的就(jiu)診志愿患(huan)者(韓國全北國立大學(xue)醫院泌尿科分部，20至50歲，約(yue)85名患(huan)者)的人(ren)精(jing)液(ye)(ye)的精(jing)子(zi)計數(shu)和(he)精(jing)子(zi)活(huo)(huo)力進(jin)行測(ce)定后，將精(jing)液(ye)(ye)倒入(ru)保(bao)持在37℃的培養箱中。精(jing)液(ye)(ye)充分液(ye)(ye)化后，向200μL精(jing)液(ye)(ye)中添加(jia)20μL測(ce)試(shi)樣品提取物，直(zhi)至終濃(nong)度為(wei)2mg/ml。加(jia)入(ru)3小時后，使用計數(shu)室(shi)(MAKLER計數(shu)室(shi)，self-Medical Instruments、Haifa、Israel)和(he)顯微鏡(Axiovert25，ZEISS，USA)對精(jing)子(zi)活(huo)(huo)力進(jin)行測(ce)定。

作為對照組，使(shi)用3H緩沖液(ye){Hams F-10(N6635，Sigma chemical Co.，USA)+0.4％HAS(A1635，Sigma Chemical Co.，USA)+12mM HEPES(H4034，Sigma Chemical Co.，USA)[3H，pH 7.4]。將測試(shi)樣(yang)品(pin)溶解在與上述相同的3H緩沖液(ye)中，調節至pH 7.4，并通過離(li)心裝置(A32010(1)，LABOGENE，13,000rpm，2分鐘(zhong)，4℃)離(li)心，得(de)到上清液(ye)用于測定(ding)。

根據以下經驗公(gong)式(shi)1計算精(jing)子活力。

[經驗公式1]

1-2.實驗結果

為(wei)了確(que)定巴戟天(tian)根、菟絲子(zi)(zi)(zi)種子(zi)(zi)(zi)以及洋蔥鱗(lin)莖的(de)(de)(de)混合(he)(he)天(tian)然提(ti)取(qu)物的(de)(de)(de)比例，對于由上述患有不(bu)育癥的(de)(de)(de)就診(zhen)志愿者獲(huo)得的(de)(de)(de)精液進行測定的(de)(de)(de)結果，在分別(bie)使用三(san)種本(ben)發明組(zu)(zu)(zu)合(he)(he)(CINTM1(10:1:10)、CINTM1(5:1:5)和(he)CINTM1(1:1:1))處(chu)理的(de)(de)(de)組(zu)(zu)(zu)中(zhong)，分別(bie)在組(zu)(zu)(zu)CINTM1(10:1:10)：濃度為(wei)0.05mg/ml時為(wei)70％；組(zu)(zu)(zu)CINTM1(5:1:5)：濃度為(wei)0.5mg/ml時為(wei)62％；組(zu)(zu)(zu)CINTM1(1:1:1)：濃度為(wei)0.005mg/ml時為(wei)63％的(de)(de)(de)情況下顯示(shi)出最高的(de)(de)(de)精子(zi)(zi)(zi)活力增(zeng)加(jia)值。在測試樣(yang)品組(zu)(zu)(zu)中(zhong)，與不(bu)同混合(he)(he)比的(de)(de)(de)其它(ta)組(zu)(zu)(zu)相比，組(zu)(zu)(zu)CINTM1(10:1:10)顯示(shi)出最高的(de)(de)(de)精子(zi)(zi)(zi)活力增(zeng)加(jia)效力(參(can)見圖(tu)1)。

對于由上述患有不育癥的(de)就診志愿(yuan)者獲得的(de)精液(ye)進行測定的(de)結果，在分(fen)別使(shi)用CINThera-1、CINThera-2、CINThera-3和CINTM1(10:1:10)處理的(de)試(shi)(shi)驗組(zu)中，在0.05mg/ml的(de)同一濃度(du)下分(fen)別顯示出55％、53.5％、48.0％以及59.5％的(de)最(zui)高(gao)的(de)精子(zi)(zi)活力(li)增(zeng)加(jia)值。在測試(shi)(shi)樣(yang)品組(zu)中，與其它(ta)單獨的(de)天然(ran)提(ti)取(qu)(qu)物組(zu)相比，混合(he)天然(ran)提(ti)取(qu)(qu)物組(zu)CINTM1(10:1:10)顯示出最(zui)高(gao)的(de)精子(zi)(zi)活力(li)增(zeng)加(jia)效力(li)(參見圖(tu)2)。

試(shi)驗(yan)例2.使(shi)用體內(nei)精索靜(jing)脈曲張動(dong)物模型對混合草藥(yao)提(ti)取物的效果進行(xing)評(ping)價

為了對上述實施例中獲得的本(ben)發明提(ti)取物(wu)在體(ti)(ti)內精(jing)索靜脈(mo)曲張(zhang)動(dong)物(wu)模(mo)型(xing)中對人精(jing)子的精(jing)子計數和(he)精(jing)子活力的影響進行研究，根據文獻中記載的體(ti)(ti)內精(jing)索靜脈(mo)曲張(zhang)動(dong)物(wu)模(mo)型(xing)評(ping)價方法(Zhang LT,Kim HK,Choi BR,Zhao C,Lee SW,Jang KY等(deng)(2014)Analysis of testicular-internal spermatic vein variation and the recreation of varicocoele in a Sprague-Dawley rat model.Andrology.2,466-73)進行了以下體(ti)(ti)內試(shi)驗。

2-1.體內精(jing)索靜脈(mo)曲張動物模型的(de)建立(li)

為了建立體內精(jing)索靜脈曲(qu)張動(dong)物模型，獲(huo)取購自KOATECH.Ltd(位于(yu)韓(han)國平澤市)的(de)重量為300至(zhi)(zhi)350g的(de)9周齡Sprague-Dawley大鼠，經一周時間適(shi)應環境后，飼(si)養于(yu)塑料(liao)籠(long)中，每(mei)籠(long)四(si)(si)只(zhi)大鼠。在飼(si)養場所中，將人工照明調(diao)節為在早7時至(zhi)(zhi)晚7時的(de)12小時內進行(xing)(xing)，室內溫度(du)維持(chi)在18至(zhi)(zhi)23℃，相對(dui)濕度(du)維持(chi)在40至(zhi)(zhi)60％。供(gong)給標準大鼠飼(si)料(liao)并(bing)(bing)允許自由飲水。使(shi)用氯胺酮+賽拉(la)嗪(qin)(50mg/kg+25mg/kg)的(de)混合物對(dui)每(mei)只(zhi)大鼠進行(xing)(xing)腹(fu)膜內麻醉(zui)，沿中線切開腹(fu)部，并(bing)(bing)經切口接近左腎后暴露出與(yu)腔(qiang)靜脈相連的(de)左腎靜脈。以(yi)(yi)具有(you)平行(xing)(xing)金屬探針(外(wai)徑(jing)：0.85mm)的(de)5.0尼龍(long)縫合線結(jie)扎(zha)(zha)左腎靜脈，隨(sui)后取出金屬探針，使(shi)得左腎靜脈在結(jie)扎(zha)(zha)點處直徑(jing)減小50％，并(bing)(bing)且血管持(chi)續收縮。結(jie)扎(zha)(zha)ISV(精(jing)索內靜脈)枝以(yi)(yi)誘導(dao)精(jing)索靜脈曲(qu)張，用作誘導(dao)精(jing)索靜脈曲(qu)張的(de)動(dong)物組，并(bing)(bing)且在結(jie)扎(zha)(zha)后四(si)(si)周，口服(fu)給予(yu)溶(rong)解于(yu)生理鹽水溶(rong)液中的(de)測試樣品。

2-2.體內精索靜脈曲張動物(wu)模(mo)型中的混合(he)天然提取(qu)物(wu)的效力評價

對于將左腎(shen)靜脈部(bu)分結扎以(yi)誘(you)導(dao)精(jing)(jing)索(suo)靜脈曲張(zhang)的(de)精(jing)(jing)索(suo)靜脈曲張(zhang)手(shou)術組以(yi)及正常(chang)對照組，在手(shou)術后28日(對照組為在安定(ding)后28日)內，每日口服給予(yu)測試樣品(CINTM1(10:1:10))或生(sheng)(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui)溶液2ml(正常(chang)對照組：生(sheng)(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui)2ml/天(tian)(tian)、混合草(cao)(cao)藥(yao)提(ti)(ti)取(qu)物(wu)100mg/kg/2ml/天(tian)(tian)、混合草(cao)(cao)藥(yao)提(ti)(ti)取(qu)物(wu)200mg/kg/2ml/天(tian)(tian)；精(jing)(jing)索(suo)靜脈曲張(zhang)手(shou)術組：生(sheng)(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui)2ml/天(tian)(tian)、混合草(cao)(cao)藥(yao)提(ti)(ti)取(qu)物(wu)100mg/kg/2ml/天(tian)(tian)、混合草(cao)(cao)藥(yao)提(ti)(ti)取(qu)物(wu)200mg/kg/2ml/天(tian)(tian))，然(ran)后稱量大鼠體重。在全身麻(ma)醉下(xia)切除大鼠的(de)輸(shu)精(jing)(jing)管，對其中的(de)精(jing)(jing)子計數(shu)和活力進行(xing)測定(ding)，并對雙(shuang)側(ce)睪丸和附睪的(de)重量進行(xing)稱重以(yi)進行(xing)比(bi)較(jiao)。

2-3.實驗結果

作為給藥后28日時精子計數的測定結果，觀察到誘導精索靜脈曲張的組中，給予混合天然提取物的組獲得的精液中精子計數有所增加。在誘導精索靜脈曲張的組中，給予生理鹽水的組中，獲得的精液中的精子計數僅為18.25±9.53×10⁶/ml，而100mg/kg/2ml/天以及200mg/kg/2ml/天的混合天然提取物的組中，觀察到精子計數分別為20.91±12.25×10⁶/ml和28.63±8.90×10⁶/ml，產生了大幅增加(參見(jian)圖3)。

作為給藥后28日時精(jing)子(zi)活(huo)(huo)力(li)的(de)(de)測(ce)定結果，觀察到誘(you)導精(jing)索(suo)靜脈曲張(zhang)的(de)(de)組(zu)(zu)中，給予(yu)混合天(tian)(tian)然提取物的(de)(de)組(zu)(zu)獲得(de)(de)的(de)(de)精(jing)液中精(jing)子(zi)活(huo)(huo)力(li)有所增加(jia)。在誘(you)導精(jing)索(suo)靜脈曲張(zhang)的(de)(de)組(zu)(zu)中，給予(yu)生理(li)鹽(yan)水的(de)(de)組(zu)(zu)中，獲得(de)(de)的(de)(de)精(jing)液中的(de)(de)精(jing)子(zi)活(huo)(huo)力(li)僅為31.3±18.8％，而100mg/kg/2ml/天(tian)(tian)以及200mg/kg/2ml/天(tian)(tian)的(de)(de)混合天(tian)(tian)然提取物的(de)(de)組(zu)(zu)中，確認精(jing)子(zi)活(huo)(huo)力(li)分別為53.8±20.7％和53.3±12.1％，精(jing)子(zi)活(huo)(huo)力(li)強化效(xiao)果優異(參見圖4)。

在(zai)下(xia)文中，將對包含本發明的(de)提(ti)取物和多種賦形劑的(de)組合物的(de)制(zhi)劑例(li)進行描(miao)述，然而以下(xia)內容僅為進行具體描(miao)述，并非旨在(zai)限制(zhi)本發明。

制劑例1.散劑的制備

混合草(cao)藥(yao)提(ti)取(qu)物(CINTM1) 20mg

乳糖 100mg

滑石 10mg

將上述組分混合后，通過(guo)填充密(mi)封包裝制備(bei)散劑。

制(zhi)劑例2.片劑的制(zhi)備

將(jiang)上述組分混(hun)合后，通過常規片劑制(zhi)(zhi)造方法制(zhi)(zhi)備片劑。

制(zhi)劑(ji)例(li)3.膠囊劑(ji)的制(zhi)備

將上述組分混合(he)后，通過常規膠囊劑制備方法填(tian)充明膠膠囊制備膠囊劑。

制(zhi)劑例4.注射(she)劑的制(zhi)備

通過常(chang)規注射劑制備方法，溶解上(shang)述成分(fen)并以每安瓿(2ml)中填入(ru)如上(shang)所(suo)述含(han)量(liang)的全部組分(fen)來制備注射劑。

制劑例5.液體劑的制備(bei)

通(tong)過常(chang)規液體劑制(zhi)備方法，向蒸(zheng)餾(liu)水(shui)中(zhong)添(tian)加(jia)(jia)各活(huo)性組分(fen)(fen)并溶解，加(jia)(jia)入適(shi)量檸(ning)檬香料后，將上述成分(fen)(fen)混合后添(tian)加(jia)(jia)蒸(zheng)餾(liu)水(shui)，然后將所(suo)有組分(fen)(fen)添(tian)加(jia)(jia)蒸(zheng)餾(liu)水(shui)調節(jie)至100ml后，填充至棕色瓶中(zhong)并滅菌(jun)，從而制(zhi)備液體劑。

制劑例6.保健食品的制備

盡(jin)管上(shang)述(shu)維(wei)生素和礦物質(zhi)的混(hun)(hun)合(he)物的組成(cheng)比(bi)是按照比(bi)較(jiao)適(shi)合(he)于(yu)保(bao)健(jian)食品(pin)的成(cheng)分(fen)的優(you)選實(shi)(shi)施例(li)混(hun)(hun)合(he)組成(cheng)的，然而也(ye)可任意(yi)改變(bian)其配合(he)比(bi)例(li)來實(shi)(shi)施。根據常規的保(bao)健(jian)食品(pin)的制備方法(fa)，可將上(shang)述(shu)成(cheng)分(fen)混(hun)(hun)合(he)后，制造顆粒，并依照常規方法(fa)將其用于(yu)制備保(bao)健(jian)食品(pin)組合(he)物。

制劑(ji)例(li)7.保健飲料的制備

通過常規保健飲料的制備方法，通過將上述(shu)成分混合(he)(he)后(hou)，在85℃下攪拌(ban)加熱1小時，隨后(hou)將所得溶液(ye)過濾(lv)并滅(mie)菌，填(tian)充(chong)于2L容器中(zhong)，密封(feng)滅(mie)菌后(hou)冷藏保管，從而制備本發明(ming)的保健飲料組合(he)(he)物。

盡管上(shang)述組成比是按照(zhao)比較適合于嗜(shi)好(hao)飲料(liao)的成分的優選實施例(li)混合組成的，然而也(ye)可(ke)根據所(suo)需水平、所(suo)需國家、所(suo)需用途等地域、民(min)族偏好(hao)而任意(yi)改(gai)變其配合比例(li)來實施。

工業實用性

如本(ben)發(fa)(fa)明(ming)所述(shu)，本(ben)發(fa)(fa)明(ming)的(de)巴戟天根(gen)、菟絲子種子和(he)洋蔥鱗(lin)莖的(de)混合(he)草藥組(zu)合(he)物(wu)對(dui)人類不育(yu)癥(zheng)顯示(shi)出有效的(de)治療(liao)效果(guo)(guo)，這通(tong)過多種實驗得以證(zheng)實，例(li)如體外精子質量促進(jin)效果(guo)(guo)評(ping)價以及體內精索(suo)靜(jing)脈(mo)曲張(zhang)動物(wu)模(mo)型評(ping)價方(fang)法，該方(fang)法用于(yu)對(dui)草藥提取(qu)物(wu)對(dui)體內精索(suo)靜(jing)脈(mo)曲張(zhang)動物(wu)模(mo)型中(zhong)(zhong)精子計(ji)數和(he)活力(li)變(bian)化的(de)影響進(jin)行研究，已經證(zheng)實本(ben)發(fa)(fa)明(ming)的(de)混合(he)提取(qu)物(wu)對(dui)精子計(ji)數和(he)精子活力(li)顯示(shi)出更有效的(de)提升作用。因此，本(ben)發(fa)(fa)明(ming)的(de)草藥提取(qu)物(wu)可以有效地用于(yu)預防和(he)治療(liao)男性不育(yu)癥(zheng)的(de)藥物(wu)組(zu)合(he)物(wu)、保健功能性食(shi)(shi)品和(he)保健補充(chong)食(shi)(shi)品中(zhong)(zhong)。