本(ben)發明(ming)涉及包含(han)辣木(Moringa oleifera)葉提取(qu)物的(de)用于治療(liao)、改善或(huo)預(yu)防癌癥的(de)放(fang)射(she)(she)線聯(lian)(lian)合(he)處(chu)理(li)用組合(he)物及利用其的(de)聯(lian)(lian)合(he)處(chu)理(li)方法，具體涉及以下內(nei)容，即通(tong)過辣木葉提取(qu)物和少量放(fang)射(she)(she)線的(de)聯(lian)(lian)合(he)處(chu)理(li)使放(fang)射(she)(she)線的(de)副(fu)作用最小化，同時能(neng)夠獲得提高的(de)治療(liao)、改善或(huo)預(yu)防癌癥的(de)效果。

背景技術：

辣(la)(la)(la)木(mu)(mu)是原產地(di)為(wei)(wei)(wei)印(yin)度(du)(du)的(de)(de)(de)(de)喬木(mu)(mu)，但(dan)是在全(quan)世界很多(duo)地(di)方種(zhong)植(zhi)，并(bing)且(qie)(qie)在廣泛(fan)利用辣(la)(la)(la)木(mu)(mu)樹(shu)的(de)(de)(de)(de)很多(duo)地(di)區進(jin)行引種(zhong)而自然生長(chang)。屬于(yu)(yu)辣(la)(la)(la)木(mu)(mu)科的(de)(de)(de)(de)辣(la)(la)(la)木(mu)(mu)樹(shu)有(you)(you)13種(zhong)，其中最廣為(wei)(wei)(wei)人知的(de)(de)(de)(de)是印(yin)度(du)(du)傳統辣(la)(la)(la)木(mu)(mu)(Moringa oleifera)。印(yin)度(du)(du)傳統辣(la)(la)(la)木(mu)(mu)是以傘狀展開(kai)的(de)(de)(de)(de)4～8米高的(de)(de)(de)(de)灌(guan)木(mu)(mu)。其特征(zheng)為(wei)(wei)(wei)，長(chang)度(du)(du)為(wei)(wei)(wei)30～70cm的(de)(de)(de)(de)葉(xie)子為(wei)(wei)(wei)落葉(xie)性，花(hua)為(wei)(wei)(wei)白色且(qie)(qie)香氣濃郁(yu)，果實為(wei)(wei)(wei)綠(lv)色且(qie)(qie)為(wei)(wei)(wei)長(chang)達30～40cm的(de)(de)(de)(de)革質(zhi)及懸(xuan)垂的(de)(de)(de)(de)長(chang)三角(jiao)形形狀的(de)(de)(de)(de)長(chang)莢，并(bing)且(qie)(qie)原生于(yu)(yu)印(yin)度(du)(du)西北(bei)部喜馬拉雅山腳，在熱帶全(quan)部地(di)區種(zhong)植(zhi)的(de)(de)(de)(de)多(duo)用途樹(shu)種(zhong)中的(de)(de)(de)(de)一種(zhong)。辣(la)(la)(la)木(mu)(mu)是原生于(yu)(yu)東(dong)南(nan)亞等(deng)的(de)(de)(de)(de)植(zhi)物，其含有(you)(you)大量的(de)(de)(de)(de)營養成分(fen)，因此被稱為(wei)(wei)(wei)奇跡植(zhi)物，并(bing)且(qie)(qie)已知為(wei)(wei)(wei)具有(you)(you)抗(kang)糖尿病(bing)、抗(kang)癌、抗(kang)過敏(min)等(deng)多(duo)種(zhong)功效。

另外，目(mu)前(qian)癌癥(zheng)(zheng)(zheng)患(huan)者(zhe)的(de)(de)治(zhi)(zhi)療方法(fa)是依賴于外科手(shou)術(shu)、放(fang)(fang)(fang)射(she)治(zhi)(zhi)療、施(shi)用(yong)顯示40余種強細胞毒(du)性的(de)(de)抗(kang)癌物質的(de)(de)化學療法(fa)，但是這(zhe)些療法(fa)大(da)部(bu)分也(ye)只局限于早期癌癥(zheng)(zheng)(zheng)患(huan)者(zhe)或特定癌癥(zheng)(zheng)(zheng)，因(yin)(yin)此(ci)因(yin)(yin)癌癥(zheng)(zheng)(zheng)引(yin)起(qi)的(de)(de)死亡呈持續(xu)增長的(de)(de)趨勢。尤其是在放(fang)(fang)(fang)射(she)治(zhi)(zhi)療的(de)(de)情況下，因(yin)(yin)放(fang)(fang)(fang)射(she)線(xian)自身的(de)(de)副作(zuo)用(yong)而誘發(fa)免疫力下降及患(huan)者(zhe)的(de)(de)生活質量降低等繼發(fa)性問題，因(yin)(yin)此(ci)成為癌癥(zheng)(zheng)(zheng)患(huan)者(zhe)拒(ju)絕放(fang)(fang)(fang)射(she)治(zhi)(zhi)療的(de)(de)主要(yao)原因(yin)(yin)。就(jiu)這(zhe)種放(fang)(fang)(fang)射(she)治(zhi)(zhi)療而言，對患(huan)者(zhe)照射(she)高劑量的(de)(de)放(fang)(fang)(fang)射(she)線(xian)，從而誘發(fa)多種副作(zuo)用(yong)，這(zhe)種副作(zuo)用(yong)則(ze)依賴于放(fang)(fang)(fang)射(she)劑量。因(yin)(yin)此(ci)，目(mu)前(qian)迫切需(xu)要(yao)開發(fa)出降低放(fang)(fang)(fang)射(she)線(xian)照射(she)量的(de)(de)同(tong)時(shi)也(ye)能夠顯示出得到提高的(de)(de)抗(kang)癌效果(guo)的(de)(de)技術(shu)。

技術實現要素：

要解決的技術問題

為了解決(jue)上述問題，本發明欲(yu)提(ti)供包(bao)含源自天然物的(de)辣木葉提(ti)取物的(de)組(zu)合(he)(he)物，其特征(zheng)在于，通過同時施用所(suo)述組(zu)合(he)(he)物與少量放(fang)射線(xian)(xian)能夠(gou)獲得(de)與單獨照射放(fang)射線(xian)(xian)的(de)情況相比更加提(ti)高的(de)抗癌效果。

技術方案

本發明涉及用于治療(liao)、改善(shan)或預防(fang)癌(ai)癥的(de)放射線聯合處理用組合物(wu)，其特征在于，其包含辣木(Moringa oleifera)葉(xie)提取(qu)物(wu)。

此外(wai)，本發明涉及辣木葉提取物的(de)制備(bei)方(fang)法，其特征在于(yu)，其包括以下(xia)步(bu)驟：a)將辣木葉浸(jin)(jin)漬于(yu)水溶(rong)性(xing)溶(rong)劑中；b)獲取辣木葉的(de)浸(jin)(jin)出液(ye)，并去除不溶(rong)性(xing)物質；c)對(dui)所述已去除不溶(rong)性(xing)物質的(de)浸(jin)(jin)出液(ye)進行(xing)過濾。

作為(wei)另一種實施(shi)方(fang)(fang)式，本發(fa)明涉及(ji)用于治療、改善或(huo)預防(fang)癌癥的(de)治療方(fang)(fang)法，其(qi)特(te)征在于，其(qi)包括對(dui)癌細胞或(huo)患(huan)者施(shi)用包含辣木(Moringa oleifera)葉提取物(wu)的(de)組合物(wu)的(de)同時(shi)照射放射線的(de)步(bu)驟。

作為(wei)另一種(zhong)實施(shi)方(fang)式，本發明涉及用于治療、改(gai)善(shan)或預防癌癥的(de)放射線聯合(he)處理用組合(he)物(wu)的(de)應用，其特征在于，所述(shu)組合(he)物(wu)包(bao)含辣木(Moringa oleifera)葉提取物(wu)。

發明效果

通過(guo)(guo)本發明可以(yi)(yi)確認(ren)以(yi)(yi)下內容，即(ji)在放(fang)(fang)射(she)(she)線(xian)的(de)(de)照射(she)(she)前后同(tong)時施用本發明的(de)(de)辣木葉提取物(wu)，從而通過(guo)(guo)少量的(de)(de)放(fang)(fang)射(she)(she)線(xian)照射(she)(she)也能夠獲得與僅施用放(fang)(fang)射(she)(she)線(xian)或僅施用提取物(wu)的(de)(de)情(qing)況相(xiang)比更加提高(gao)的(de)(de)抗癌(ai)效果(guo)，通過(guo)(guo)上述內容可期(qi)待能夠實(shi)現將天然(ran)提取物(wu)作為(wei)放(fang)(fang)射(she)(she)線(xian)輔(fu)助劑使用而進行聯合治療的(de)(de)商用化。

附圖說明

圖1是放射線與(yu)辣(la)木葉提取(qu)物聯合處(chu)理A549細胞后(hou)實施流(liu)式細胞儀(FACScan)測定的結果。

圖2是將放(fang)射線與辣木(mu)葉(xie)提取物聯(lian)合處理A549細胞后(hou)實施FACScan測定(ding)的(de)結果以與圖1不同的(de)方式顯示的(de)結果。

圖(tu)3是將放(fang)射線與(yu)辣木葉提取物聯(lian)合處理A549細胞的(de)結(jie)果通過表達蛋白質(zhi)分析(xi)來顯示(shi)的(de)結(jie)果。

圖4是辣木(mu)葉提取物與放射線聯合處(chu)理時(shi)的(de)癌細(xi)胞的(de)細(xi)胞周(zhou)期(qi)變化及細(xi)胞凋(diao)亡(wang)效(xiao)果與辣木(mu)葉提取物或放射線單獨處(chu)理時(shi)的(de)情況進行比較(jiao)的(de)結果。

圖5是對(dui)小(xiao)鼠活體內(in vivo)的辣木(mu)葉(xie)提取物(wu)與放(fang)射線的聯合處(chu)理結果。

具體實施方式

本發明(ming)涉(she)及用于(yu)(yu)治療、改善或預防(fang)癌(ai)癥的放射線聯合處理用組合物(wu)，其特征在(zai)于(yu)(yu)，其包含辣木(Moringa oleifera)葉提取(qu)物(wu)。

本發明中(zhong)(zhong)(zhong)的所(suo)述癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)癥可以為選(xuan)(xuan)自大(da)(da)腸(chang)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、肝(gan)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、胃癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、結腸(chang)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、乳腺(xian)(xian)(xian)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、肺癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、鱗(lin)(lin)狀(zhuang)細(xi)胞(bao)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、纖維瘤(liu)(liu)(liu)、非小(xiao)細(xi)胞(bao)肺癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、骨癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、胰腺(xian)(xian)(xian)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、皮膚癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、頭(tou)頸癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、皮膚或(huo)(huo)眼球(qiu)內(nei)黑(hei)色素(su)瘤(liu)(liu)(liu)、子(zi)宮(gong)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、卵(luan)巢癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、直腸(chang)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、肛(gang)門周圍癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、輸卵(luan)管(guan)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、子(zi)宮(gong)內(nei)膜癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、宮(gong)頸癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、陰(yin)道(dao)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、外陰(yin)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、何(he)杰金(jin)氏(shi)病(Hodgkin's disease)、食管(guan)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、小(xiao)腸(chang)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、內(nei)分泌腺(xian)(xian)(xian)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、甲狀(zhuang)腺(xian)(xian)(xian)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、甲狀(zhuang)旁腺(xian)(xian)(xian)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、腎上(shang)腺(xian)(xian)(xian)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、軟(ruan)組織肉(rou)瘤(liu)(liu)(liu)、尿道(dao)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、陰(yin)莖癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、前列腺(xian)(xian)(xian)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、慢性(xing)(xing)或(huo)(huo)急性(xing)(xing)白血病、淋(lin)巴(ba)細(xi)胞(bao)性(xing)(xing)淋(lin)巴(ba)瘤(liu)(liu)(liu)、膀胱(guang)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、腎臟或(huo)(huo)輸尿管(guan)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、腎細(xi)胞(bao)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、腎盂癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、中(zhong)(zhong)(zhong)樞神經系統(tong)(Central nervous system，CNS)腫(zhong)瘤(liu)(liu)(liu)、原發性(xing)(xing)CNS淋(lin)巴(ba)瘤(liu)(liu)(liu)、脊髓腫(zhong)瘤(liu)(liu)(liu)、腦(nao)(nao)干(gan)神經膠質瘤(liu)(liu)(liu)或(huo)(huo)腦(nao)(nao)垂(chui)體腺(xian)(xian)(xian)瘤(liu)(liu)(liu)中(zhong)(zhong)(zhong)的一(yi)種(zhong)以上(shang)，優選(xuan)(xuan)為選(xuan)(xuan)自肺癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、大(da)(da)腸(chang)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、肝(gan)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、乳腺(xian)(xian)(xian)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、鱗(lin)(lin)狀(zhuang)細(xi)胞(bao)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)及纖維瘤(liu)(liu)(liu)中(zhong)(zhong)(zhong)的一(yi)種(zhong)以上(shang)，更優選(xuan)(xuan)為選(xuan)(xuan)自肺癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、肝(gan)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)或(huo)(huo)大(da)(da)腸(chang)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)，但并不限定于此(ci)。

本(ben)發明中的(de)所(suo)述(shu)提(ti)取物不受限制，其可以(yi)通(tong)過使用(yong)作為提(ti)取溶劑的(de)水、甲醇、乙醇或所(suo)述(shu)提(ti)取溶劑的(de)混(hun)合物來(lai)獲得。

本發(fa)明(ming)中的(de)所述水(shui)(shui)的(de)溫(wen)度(du)不受限制，該溫(wen)度(du)可以(yi)為(wei)0～60℃，優選為(wei)0～40℃，更(geng)優選為(wei)0～5℃。在上述溫(wen)度(du)范(fan)圍內提(ti)取(qu)(qu)(qu)的(de)辣木葉(xie)提(ti)取(qu)(qu)(qu)物顯示出更(geng)高(gao)(gao)的(de)抗(kang)癌(ai)(ai)活性。當(dang)作為(wei)提(ti)取(qu)(qu)(qu)溶劑(ji)的(de)水(shui)(shui)的(de)溫(wen)度(du)為(wei)60℃以(yi)上時，即使(shi)提(ti)高(gao)(gao)提(ti)取(qu)(qu)(qu)物的(de)濃度(du)進行處理，提(ti)取(qu)(qu)(qu)物對癌(ai)(ai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)生存的(de)影響也甚(shen)微，并(bing)且(qie)溫(wen)度(du)越低，提(ti)取(qu)(qu)(qu)物對癌(ai)(ai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)毒性越高(gao)(gao)。

本發(fa)明中的(de)所述提(ti)取(qu)物不(bu)受限制，其可以通(tong)過將辣(la)木(mu)葉浸漬于水中1～60分鐘來獲得，優(you)選可以浸漬1～30分鐘。在(zai)上述時(shi)間范圍內提(ti)取(qu)的(de)辣(la)木(mu)葉提(ti)取(qu)物顯示出更高的(de)抗(kang)癌活(huo)性。

根據上述(shu)條件獲得本發明一實施例(li)的辣木葉提取(qu)物，并(bing)(bing)將其(qi)命名(ming)為JCT-4并(bing)(bing)使用。

本發明中的所述放射線不受限制，其可以為γ射線、電子束、質子束、中子束或X射線，優選可以利用⁶⁰Co或^l37Cs來照(zhao)射所(suo)述γ射線。

本發(fa)明(ming)中(zhong)的(de)所(suo)述(shu)γ射(she)線(xian)不受限(xian)制，其(qi)可以(yi)以(yi)0.1～50Gy的(de)劑(ji)量(liang)來照(zhao)射(she)，優選可以(yi)以(yi)0.1～10Gy的(de)劑(ji)量(liang)來照(zhao)射(she)。當以(yi)上(shang)述(shu)范(fan)圍(wei)的(de)劑(ji)量(liang)來照(zhao)射(she)時，能夠大(da)幅度減少放射(she)線(xian)副作用所(suo)帶(dai)來的(de)免疫力下降及患(huan)者的(de)生活質量(liang)降低等繼發(fa)性問題，從而能夠使聯合施用效果極大(da)化。

本發(fa)明的(de)(de)一實(shi)施例中(zhong)(zhong)，所述辣木(mu)葉(xie)提取物的(de)(de)制備方法不受(shou)限制，其(qi)可以(yi)包括以(yi)下步(bu)驟：將辣木(mu)葉(xie)浸漬于(yu)以(yi)辣木(mu)葉(xie)質量計為5～10倍的(de)(de)0～20℃的(de)(de)水中(zhong)(zhong)；獲取辣木(mu)葉(xie)的(de)(de)浸出液，并(bing)去除不溶性物質；對所述已去除不溶性物質的(de)(de)浸出液進行過(guo)濾。在所述將辣木(mu)葉(xie)浸漬于(yu)水中(zhong)(zhong)的(de)(de)步(bu)驟中(zhong)(zhong)，優選將辣木(mu)葉(xie)浸漬于(yu)水中(zhong)(zhong)1～60分鐘(zhong)來進行提取。

此外，本發明涉及辣木葉提取物(wu)的制備方法，其特征(zheng)在于(yu)，其包括以下(xia)步驟：將(jiang)辣木葉浸漬(zi)于(yu)水溶性(xing)溶劑中；獲(huo)取辣木葉的浸出液，并去除不溶性(xing)物(wu)質；對所述已去除不溶性(xing)物(wu)質的浸出液進行過濾。

本發明中的(de)所述提(ti)取(qu)物(wu)不受限制，其(qi)可以通過使用作為提(ti)取(qu)溶(rong)劑的(de)水、甲醇、乙醇或(huo)所述提(ti)取(qu)溶(rong)劑的(de)混(hun)合物(wu)來獲得(de)。

本發明中(zhong)的(de)(de)(de)所述水(shui)的(de)(de)(de)溫(wen)(wen)度(du)不受(shou)限制，該溫(wen)(wen)度(du)可以(yi)為0～60℃，優(you)選(xuan)為0～40℃，更優(you)選(xuan)為0～5℃。在上(shang)述溫(wen)(wen)度(du)范(fan)圍內提(ti)取(qu)的(de)(de)(de)辣木(mu)提(ti)取(qu)物顯示出更高的(de)(de)(de)抗癌(ai)活性。當(dang)作為提(ti)取(qu)溶劑的(de)(de)(de)水(shui)的(de)(de)(de)溫(wen)(wen)度(du)為60℃以(yi)上(shang)時，即使提(ti)高提(ti)取(qu)物的(de)(de)(de)濃度(du)進行(xing)處(chu)理(li)，提(ti)取(qu)物對(dui)癌(ai)細(xi)胞(bao)生(sheng)存的(de)(de)(de)影(ying)響也甚微，并且溫(wen)(wen)度(du)越低，提(ti)取(qu)物對(dui)癌(ai)細(xi)胞(bao)的(de)(de)(de)毒性越高。

本發明中(zhong)的所(suo)述提(ti)(ti)取物(wu)不(bu)受限制(zhi)，其可(ke)以通過將辣(la)木(mu)葉(xie)浸(jin)(jin)漬(zi)于水中(zhong)1～60分(fen)鐘(zhong)來獲得(de)，優選可(ke)以浸(jin)(jin)漬(zi)1～30分(fen)鐘(zhong)。在(zai)上述時間范(fan)圍內提(ti)(ti)取的辣(la)木(mu)葉(xie)提(ti)(ti)取物(wu)顯示出更高(gao)的抗癌活(huo)性。

作為另一實施方式(shi)，本(ben)發明涉及用于治(zhi)療、改善或預(yu)防癌(ai)(ai)癥(zheng)的(de)治(zhi)療方法，其特(te)征在于，其包(bao)(bao)括對癌(ai)(ai)細胞或患者(zhe)施用包(bao)(bao)含辣木(Moringa oleifera)葉(xie)提(ti)取物(wu)的(de)組合物(wu)的(de)同時照射放射線的(de)步驟(zou)。

本發(fa)明中(zhong)(zhong)的所述癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)癥(zheng)可以(yi)(yi)為(wei)選(xuan)自(zi)大(da)(da)腸(chang)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、肝(gan)(gan)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、胃癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、結(jie)腸(chang)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、乳腺(xian)(xian)(xian)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、肺(fei)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、鱗狀細胞(bao)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、纖(xian)維瘤(liu)(liu)、非小細胞(bao)肺(fei)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、骨癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、胰腺(xian)(xian)(xian)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、皮膚癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、頭頸癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、皮膚或(huo)(huo)眼球(qiu)內(nei)黑色素瘤(liu)(liu)、子(zi)宮(gong)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、卵(luan)巢癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、直(zhi)腸(chang)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、肛門周圍癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、輸卵(luan)管(guan)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、子(zi)宮(gong)內(nei)膜癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、宮(gong)頸癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、陰(yin)道癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、外陰(yin)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、何杰金氏病(bing)(Hodgkin's disease)、食管(guan)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、小腸(chang)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、內(nei)分泌腺(xian)(xian)(xian)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、甲狀腺(xian)(xian)(xian)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、甲狀旁(pang)腺(xian)(xian)(xian)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、腎(shen)上(shang)腺(xian)(xian)(xian)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、軟(ruan)組織肉瘤(liu)(liu)、尿(niao)道癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、陰(yin)莖癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、前列腺(xian)(xian)(xian)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、慢性(xing)(xing)(xing)或(huo)(huo)急性(xing)(xing)(xing)白血病(bing)、淋巴(ba)(ba)細胞(bao)性(xing)(xing)(xing)淋巴(ba)(ba)瘤(liu)(liu)、膀胱(guang)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、腎(shen)臟或(huo)(huo)輸尿(niao)管(guan)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、腎(shen)細胞(bao)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、腎(shen)盂癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、中(zhong)(zhong)樞(shu)神經(jing)系統(Central nervous system，CNS)腫瘤(liu)(liu)、原(yuan)發(fa)性(xing)(xing)(xing)CNS淋巴(ba)(ba)瘤(liu)(liu)、脊髓腫瘤(liu)(liu)、腦干(gan)神經(jing)膠質瘤(liu)(liu)或(huo)(huo)腦垂體腺(xian)(xian)(xian)瘤(liu)(liu)中(zhong)(zhong)的一種以(yi)(yi)上(shang)，優選(xuan)為(wei)選(xuan)自(zi)肺(fei)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、大(da)(da)腸(chang)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、肝(gan)(gan)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、乳腺(xian)(xian)(xian)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、鱗狀細胞(bao)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)及纖(xian)維瘤(liu)(liu)中(zhong)(zhong)的一種以(yi)(yi)上(shang)，更優選(xuan)為(wei)選(xuan)自(zi)肺(fei)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、肝(gan)(gan)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)或(huo)(huo)大(da)(da)腸(chang)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)，但并不限定于(yu)此。

本發明中的所述放射線不受限制，其可以為γ射線、電子束、質子束、中子束或X射線，優選可以利用⁶⁰Co或^l37Cs來照(zhao)射(she)所述γ射(she)線。

本發明中的(de)(de)所(suo)述γ射線(xian)不(bu)受限制，其可(ke)以(yi)以(yi)0.1～50Gy的(de)(de)劑(ji)量(liang)(liang)(liang)來(lai)(lai)照射，優(you)選可(ke)以(yi)以(yi)0.1～10Gy的(de)(de)劑(ji)量(liang)(liang)(liang)來(lai)(lai)照射。當以(yi)上述范圍的(de)(de)劑(ji)量(liang)(liang)(liang)來(lai)(lai)照射時，能(neng)夠大(da)幅度減少放射線(xian)副作用(yong)所(suo)帶來(lai)(lai)的(de)(de)免疫(yi)力下降(jiang)及患者(zhe)的(de)(de)生活質量(liang)(liang)(liang)降(jiang)低(di)等繼發性(xing)問題，從而能(neng)夠使聯合施用(yong)效果極大(da)化。

作為另一實(shi)施(shi)方式，本發明涉及用(yong)于治療(liao)、改善或預防癌(ai)癥(zheng)的放射(she)線聯(lian)合處理用(yong)組合物(wu)的應用(yong)，其特征在于，所述組合物(wu)包含辣(la)木(Moringa oleifera)葉提取物(wu)。

本(ben)發明中的所述(shu)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)癥(zheng)可以(yi)為選自大(da)(da)腸(chang)(chang)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、肝(gan)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、胃癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、結腸(chang)(chang)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、乳(ru)腺癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、肺(fei)(fei)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、鱗狀細胞癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、纖維(wei)瘤(liu)(liu)、非小細胞肺(fei)(fei)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、骨癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、胰腺癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、皮膚癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、頭頸癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、皮膚或眼球內黑色素瘤(liu)(liu)、子宮(gong)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、卵巢癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、直腸(chang)(chang)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、肛門周(zhou)圍癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、輸(shu)卵管癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、子宮(gong)內膜癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、宮(gong)頸癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、陰(yin)道癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、外陰(yin)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、何(he)杰金氏病(bing)(Hodgkin's disease)、食管癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、小腸(chang)(chang)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、內分泌腺癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、甲(jia)狀腺癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、甲(jia)狀旁腺癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、腎上(shang)腺癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、軟組織肉(rou)瘤(liu)(liu)、尿(niao)道癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、陰(yin)莖癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、前列(lie)腺癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、慢性或急性白血(xue)病(bing)、淋巴細胞性淋巴瘤(liu)(liu)、膀胱癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、腎臟或輸(shu)尿(niao)管癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、腎細胞癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、腎盂癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、中樞(shu)神經系統(Central nervous system，CNS)腫(zhong)瘤(liu)(liu)、原發性CNS淋巴瘤(liu)(liu)、脊髓(sui)腫(zhong)瘤(liu)(liu)、腦(nao)干神經膠(jiao)質瘤(liu)(liu)或腦(nao)垂體腺瘤(liu)(liu)中的一(yi)種(zhong)以(yi)上(shang)，優選為選自肺(fei)(fei)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、大(da)(da)腸(chang)(chang)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、肝(gan)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、乳(ru)腺癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、鱗狀細胞癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)及纖維(wei)瘤(liu)(liu)中的一(yi)種(zhong)以(yi)上(shang)，更(geng)優選為選自肺(fei)(fei)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)、肝(gan)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)或大(da)(da)腸(chang)(chang)癌(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)(ai)，但并不限(xian)定于此。

以(yi)下，參照附圖對本(ben)(ben)(ben)發(fa)明的(de)組(zu)合物進(jin)行(xing)詳細說明。就(jiu)這時(shi)所(suo)使用(yong)的(de)技術(shu)術(shu)語及(ji)科學術(shu)語而言，在沒(mei)有其它定(ding)義的(de)情況下，其具有本(ben)(ben)(ben)發(fa)明所(suo)屬技術(shu)領域中的(de)技術(shu)人員通常所(suo)理(li)解(jie)的(de)意(yi)思，并且(qie)在下述說明及(ji)附圖中會省略可能使本(ben)(ben)(ben)發(fa)明的(de)要(yao)點模糊的(de)公知功能及(ji)組(zu)成的(de)說明。

〈制備(bei)例〉辣(la)木葉提(ti)取物的(de)制備(bei)

干燥(zao)(zao)的(de)(de)(de)(de)辣(la)木葉(xie)(xie)(M.oleifera leaves)是從GL網絡有限公司(GL Network Co.,Ltd.)購買(mai)的(de)(de)(de)(de)(清(qing)(qing)邁，泰國(guo))。將150mg的(de)(de)(de)(de)干燥(zao)(zao)的(de)(de)(de)(de)辣(la)木葉(xie)(xie)浸漬于1ml的(de)(de)(de)(de)4℃水中5分(fen)鐘，并實施渦流(liu)(vortexing)30秒鐘，然(ran)后在冷藏室(shi)中進(jin)行(xing)攪拌(stirring)并存放。之后，通過3次的(de)(de)(de)(de)離心分(fen)離(12000rpm，10分(fen)鐘)去除(chu)漂浮物的(de)(de)(de)(de)不溶性部分(fen)，然(ran)后對上清(qing)(qing)液(supernatant)進(jin)行(xing)過濾(0.2μm膜過濾(membrane filtration))，從而獲(huo)得(de)最(zui)終的(de)(de)(de)(de)辣(la)木葉(xie)(xie)提取物。對最(zui)終的(de)(de)(de)(de)辣(la)木葉(xie)(xie)提取物進(jin)行(xing)冷凍干燥(zao)(zao)，然(ran)后在-20℃下進(jin)行(xing)儲藏。

〈實驗方法〉

1.準備不(bu)同的(de)辣(la)木葉提取(qu)物濃度的(de)試料

利(li)用蒸餾水(shui)(shui)(DW)從100g的(de)辣(la)木葉干燥粉(fen)末(mo)進(jin)行提取的(de)情況下，對提取物進(jin)行冷(leng)凍干燥時(shi)，獲得(de)總17.5g的(de)具有活性(xing)的(de)水(shui)(shui)溶性(xing)干燥粉(fen)末(mo)。從初期原材料中獲得(de)水(shui)(shui)溶性(xing)干燥粉(fen)末(mo)的(de)收獲率(lv)約(yue)為17.5％。

另外，取出(chu)1g的(de)通過(guo)上(shang)述方(fang)法獲得(de)的(de)冷凍干(gan)燥(zao)粉末(mo)并(bing)溶解(jie)于10mL的(de)DW中，然(ran)后(hou)進(jin)(jin)行(xing)(xing)(xing)蛋(dan)白(bai)質(zhi)定量時，所述試料(liao)(liao)中含(han)(han)有的(de)蛋(dan)白(bai)質(zhi)量為(wei)322mg，因(yin)(yin)此(ci)(ci)干(gan)燥(zao)試料(liao)(liao)中的(de)蛋(dan)白(bai)質(zhi)含(han)(han)量約為(wei)32％。對此(ci)(ci)進(jin)(jin)行(xing)(xing)(xing)計算時，由于在初(chu)期(qi)用100g的(de)作為(wei)原材(cai)料(liao)(liao)的(de)辣木葉進(jin)(jin)行(xing)(xing)(xing)了提取，因(yin)(yin)此(ci)(ci)最終(zhong)蛋(dan)白(bai)質(zhi)收獲率(lv)為(wei)322mg*17.5＝5.6％。

即，用(yong)DW從1g的原(yuan)材(cai)料進行提取時(shi)，能夠獲(huo)得(de)0.175g的水溶(rong)性(xing)干燥粉末，并(bing)能夠獲(huo)得(de)0.056g的蛋白質(zhi)，具有活性(xing)的水溶(rong)性(xing)干燥粉末中含有的蛋白質(zhi)達到32％。

將(jiang)(jiang)上述提取(qu)結果進行(xing)(xing)代入計(ji)算(suan)時(shi)，每g的(de)(de)(de)干(gan)(gan)燥(zao)重(zhong)(zhong)(zhong)量(liang)(liang)中(zhong)含有32％的(de)(de)(de)蛋(dan)(dan)白(bai)質，因此將(jiang)(jiang)具有20mg/mL的(de)(de)(de)蛋(dan)(dan)白(bai)質的(de)(de)(de)試料(liao)換算(suan)成干(gan)(gan)燥(zao)重(zhong)(zhong)(zhong)量(liang)(liang)時(shi)，其結果與約60mg/mL的(de)(de)(de)干(gan)(gan)燥(zao)重(zhong)(zhong)(zhong)量(liang)(liang)相同。即，若要(yao)將(jiang)(jiang)在試驗(yan)中(zhong)所使用(yong)的(de)(de)(de)活(huo)性提取(qu)物的(de)(de)(de)所有蛋(dan)(dan)白(bai)質濃度換算(suan)成試料(liao)干(gan)(gan)燥(zao)重(zhong)(zhong)(zhong)量(liang)(liang)，則乘以(yi)3即可。即，當以(yi)蛋(dan)(dan)白(bai)質濃度為基準(zhun)使用(yong)100μg/mL、200μg/mL、300μg/mL時(shi)，提取(qu)物的(de)(de)(de)干(gan)(gan)燥(zao)重(zhong)(zhong)(zhong)量(liang)(liang)則相當于300μg/mL、600μg/mL、900μg/mL。但是(shi)，在小鼠活(huo)體內試驗(yan)的(de)(de)(de)情況下(xia)，不是(shi)以(yi)蛋(dan)(dan)白(bai)質濃度作為基準(zhun)，而是(shi)以(yi)總(zong)干(gan)(gan)燥(zao)重(zhong)(zhong)(zhong)量(liang)(liang)作為基準(zhun)進行(xing)(xing)處理。

2.細胞培(pei)養(yang)(cell culture)

為了確認本發明的效果，實驗中所使用的人肺癌細胞株(Lung cancer cell line)A549是購自美國標準菌種收藏所(American type culture collection，ATCC，美國)及韓國細胞株庫(Korean Cell Line Bank，KCLB)。在添加有10％的胎牛血清(fetal bovine serum，FBS)(海克隆實驗室(Hyclone lab)，美國)及1％的青霉素-鏈霉素的RPMI-1640(A549)培養基中培養細胞。將培養的細胞以1×10⁵細胞(cell)分別分配到6孔-平板上，然后保持37℃、95％的空氣/5％的CO₂條件。

3.放射線照(zhao)射后(hou)的流式細胞分析(Flow cytometric detection)

將人肺癌細胞株(A549)以1×10⁵細胞/ml接種(seeding)于T-25培養瓶(culture flask，Nunc產品，丹麥)中后培養4小時，然后用不同濃度的辣木葉提取物(JCT-4)進行處理。用辣木葉提取物進行處理后進一步培養20小時。對如此培養的人肺癌細胞株，利用⁶⁰Co以0.2Gy/min的(de)(de)(de)強度來照射(she)5Gy劑量(liang)的(de)(de)(de)γ射(she)線。放射(she)線照射(she)后(hou)進(jin)(jin)一步培(pei)養兩天，然(ran)后(hou)回收細胞(bao)(bao)，并(bing)用(yong)磷酸鹽緩(huan)沖液(ye)(PBS)洗(xi)滌，然(ran)后(hou)在(zai)暗(an)處(chu)用(yong)70％乙醇在(zai)4℃下反應2小時而進(jin)(jin)行(xing)(xing)固定。對固定的(de)(de)(de)細胞(bao)(bao)，用(yong)PBS進(jin)(jin)行(xing)(xing)兩次洗(xi)滌，然(ran)后(hou)在(zai)室溫用(yong)50μg/ml的(de)(de)(de)碘(dian)化(hua)(hua)丙(bing)啶(propidium iodide，PI)進(jin)(jin)行(xing)(xing)染(ran)色30分(fen)鐘。用(yong)FACScan(EPICS XL流式細胞(bao)(bao)儀，貝克(ke)曼庫爾(er)特計數器(Beckman Coulter Counter))測定DNA量(liang)。各(ge)個細胞(bao)(bao)周期(qi)(qi)中(zhong)顯示(shi)的(de)(de)(de)效(xiao)果是通過細胞(bao)(bao)周期(qi)(qi)的(de)(de)(de)各(ge)個時期(qi)(qi)中(zhong)顯示(shi)的(de)(de)(de)細胞(bao)(bao)排列的(de)(de)(de)％(百分(fen)比(bi))變化(hua)(hua)來進(jin)(jin)行(xing)(xing)測定，并(bing)通過菲尼(ni)克(ke)斯(si)多循環軟件(Phoenix Multicycler)程序(xu)(菲尼(ni)克(ke)斯(si)流式系統，Phoenix Flow System)來決定。

[實施例(li)1]利(li)用(yong)FACS分析來確(que)認辣木葉提取物與(yu)放射(she)線聯(lian)合處理所帶來的癌細胞的細胞周期(qi)變化及(ji)細胞凋亡效果

為了確(que)認辣(la)(la)木葉(xie)提(ti)取物(wu)對(dui)癌細(xi)胞(bao)帶來的細(xi)胞(bao)周期變化及細(xi)胞(bao)凋(diao)亡效果，用不同濃度的辣(la)(la)木葉(xie)提(ti)取物(wu)處(chu)理A549細(xi)胞(bao)株，然后(hou)(hou)在照射(she)放射(she)線48小(xiao)時后(hou)(hou)實施FACS分(fen)析。

分析(xi)結果(guo)(guo)可(ke)(ke)以確(que)(que)認(ren)(ren)(ren)隨(sui)著辣木葉(xie)提(ti)(ti)(ti)取(qu)物(wu)(wu)(wu)濃(nong)(nong)度的(de)(de)(de)變化(100μg/mL、125μg/mL、150μg/mL)會(hui)使亞Gl群體(sub-G1population)增(zeng)加(圖(tu)1及圖(tu)2)。尤(you)其是(shi)可(ke)(ke)以確(que)(que)認(ren)(ren)(ren)隨(sui)著辣木葉(xie)提(ti)(ti)(ti)取(qu)物(wu)(wu)(wu)的(de)(de)(de)濃(nong)(nong)度增(zeng)加，在同時照射(she)放(fang)射(she)線的(de)(de)(de)情況(kuang)下，抗癌(ai)(ai)(ai)活性會(hui)極(ji)具(ju)增(zeng)加，從而可(ke)(ke)以確(que)(que)認(ren)(ren)(ren)辣木葉(xie)提(ti)(ti)(ti)取(qu)物(wu)(wu)(wu)與(yu)放(fang)射(she)線的(de)(de)(de)聯(lian)合(he)處理(li)效(xiao)果(guo)(guo)卓(zhuo)越(yue)。這個(ge)結果(guo)(guo)也可(ke)(ke)以在圖(tu)3的(de)(de)(de)蛋白(bai)質(zhi)分析(xi)結果(guo)(guo)中確(que)(que)認(ren)(ren)(ren)，即可(ke)(ke)以確(que)(que)認(ren)(ren)(ren)放(fang)射(she)線與(yu)辣木葉(xie)提(ti)(ti)(ti)取(qu)物(wu)(wu)(wu)聯(lian)合(he)處理(li)的(de)(de)(de)情況(kuang)下，已知(zhi)為癌(ai)(ai)(ai)細(xi)胞凋(diao)亡(wang)時釋放(fang)的(de)(de)(de)半胱(guang)天冬(dong)酶(mei)-3(Caspase-3)蛋白(bai)質(zhi)的(de)(de)(de)釋放(fang)量會(hui)大(da)幅度增(zeng)加，通過此能夠再次確(que)(que)認(ren)(ren)(ren)放(fang)射(she)線與(yu)辣木葉(xie)提(ti)(ti)(ti)取(qu)物(wu)(wu)(wu)聯(lian)合(he)處理(li)時對癌(ai)(ai)(ai)細(xi)胞的(de)(de)(de)治療效(xiao)果(guo)(guo)卓(zhuo)越(yue)。

[實施例2]利(li)用FACS分(fen)析來確認(ren)辣(la)木葉提取物(wu)與放射線聯合(he)處理所帶來的(de)癌細(xi)胞(bao)的(de)細(xi)胞(bao)周期變化及細(xi)胞(bao)凋(diao)亡效果

類似(si)于所(suo)述實施例1，為(wei)了確(que)認辣(la)木(mu)葉(xie)提取(qu)物對(dui)癌(ai)細(xi)胞(bao)帶(dai)來的細(xi)胞(bao)周(zhou)期變化(hua)及(ji)(ji)細(xi)胞(bao)凋亡(wang)效果，施用150μg/mL的辣(la)木(mu)葉(xie)提取(qu)物的同時用1Gy、2Gy、3Gy、4Gy、5Gy及(ji)(ji)6Gy劑量(liang)的放(fang)射線對(dui)A549細(xi)胞(bao)株進行處(chu)理，然后(hou)在(zai)放(fang)射線照射48小時后(hou)實施FACS分析。

[比較例1]確認辣(la)木(mu)葉提(ti)取物單獨處理所(suo)帶(dai)來的(de)癌細(xi)胞的(de)細(xi)胞周(zhou)期變化及細(xi)胞凋亡(wang)效果

除(chu)了沒有同時用(yong)(yong)放射線進行處理以外，采(cai)用(yong)(yong)與所述實施(shi)例2相同的過程，然后(hou)實施(shi)FACS分析(xi)。

[比較(jiao)例(li)2]確認放射線單獨處理所帶(dai)來的(de)癌細胞的(de)細胞周期變化及細胞凋亡效果

除了沒(mei)有同時用辣木葉提取物進行處理以外(wai)，采用與所述實施(shi)例2相同的過程，然后(hou)實施(shi)FACS分(fen)析。

將(jiang)所(suo)述(shu)實施例2及所(suo)述(shu)比(bi)較(jiao)例1～2的(de)(de)結果(guo)(guo)顯示(shi)在(zai)圖4中。根據此(ci)結果(guo)(guo)可以確認，在(zai)沒有實施辣木葉提取物與放射(she)線(xian)聯合(he)處理的(de)(de)對(dui)照組即比(bi)較(jiao)例1、2的(de)(de)情況(kuang)下，對(dui)癌細胞的(de)(de)處理效(xiao)果(guo)(guo)甚(shen)微，尤其是對(dui)照射(she)6Gy劑(ji)量時(shi)的(de)(de)情況(kuang)與1Gy+150μg/mL聯合(he)處理時(shi)的(de)(de)情況(kuang)進(jin)行(xing)比(bi)較(jiao)時(shi)，可以確認與照射(she)6Gy的(de)(de)放射(she)線(xian)的(de)(de)情況(kuang)相比(bi)，實施1/6倍左(zuo)右的(de)(de)低劑(ji)量聯合(he)處理時(shi)能夠顯示(shi)出同等(deng)以上的(de)(de)抗癌效(xiao)果(guo)(guo)。

[實施(shi)例(li)3]對小鼠(shu)活(huo)體內的(de)聯(lian)合處理結果

將(jiang)在實驗(yan)室中(zhong)通常使(shi)用(yong)的健(jian)康小(xiao)鼠(shu)以(yi)(yi)每組10個(ge)個(ge)體分為4組，并(bing)分別移(yi)植肺癌細胞株LLC。之(zhi)后，將(jiang)冷凍干(gan)(gan)燥的辣(la)木葉(xie)提取(qu)物(wu)試料JCT-4(用(yong)20mg/mL的PBS原液制備，然后在使(shi)用(yong)時(shi)將(jiang)其(qi)溶化并(bing)使(shi)用(yong)。此時(shi)，所使(shi)用(yong)的濃度是(shi)以(yi)(yi)總干(gan)(gan)燥重量為基(ji)準(zhun)，而并(bing)非(fei)是(shi)以(yi)(yi)蛋白(bai)質濃度作為基(ji)準(zhun))以(yi)(yi)小(xiao)鼠(shu)個(ge)體重量計為200mg/kg(以(yi)(yi)總干(gan)(gan)燥重量為基(ji)準(zhun))的量每天(tian)(tian)口服給藥(yao)，一周給藥(yao)7次(ci)(ci)。在移(yi)植后的第8天(tian)(tian)及第20天(tian)(tian)以(yi)(yi)每次(ci)(ci)2Gy的劑量總共照(zhao)射2次(ci)(ci)(總4Gy)。此時(shi)，放射線的照(zhao)射是(shi)在用(yong)JCT-4處(chu)理后實施(shi)。

作為對照組的比較例3～5是(shi)在(zai)未處理及實施(shi)放(fang)射線單獨處理或辣木(mu)葉提取物單獨處理后(hou)同樣摘除腫瘤并測定其(qi)(qi)大小。其(qi)(qi)結果圖(tu)(tu)示在(zai)圖(tu)(tu)5及表1中。

其結(jie)果，通過動物實驗能夠確認聯合處理時(shi)與未處理對(dui)照組相比會(hui)減(jian)少(shao)約(yue)93％的腫瘤。

表1

如上所述，本(ben)發(fa)明人(ren)確認了在(zai)放(fang)射(she)線(xian)的照(zhao)(zhao)射(she)前(qian)后同時施用本(ben)發(fa)明的辣木葉提(ti)取物，從而通過少(shao)量的放(fang)射(she)線(xian)照(zhao)(zhao)射(she)也能夠獲得(de)與僅施用放(fang)射(she)線(xian)的情況相(xiang)比顯著提(ti)高(gao)的抗癌效果，并完成了本(ben)發(fa)明。