專利名稱：：取代的苯甲酸衍生物及其合成方法和用途的制作方法
技術領域：
：本發明涉及取代的苯曱酸衍生物，其合成方法和用于制備防治心腦血管疾病的藥物的用途。蒙藥廣棗是蒙醫習用治心病藥材，在蒙藥治心病藥方中多數以廣棗為主藥或配伍有廣棗(輔藥)，療效確切可靠。文獻報道廣棗含有酚酸類、黃酮類和甾醇類成分，其中酚酸類成分有沒食子酸、原兒茶酸、水楊酸和鞣花酸等。現代藥理研究表明，沒食子酸和原兒茶酸等酚酸類成分具有明顯的抗氧化、清除自由基、抑制血小板聚集作用和抗缺氧活性。但是此類酚酸物質成藥性不強。本發明以廣棗中所含沒食子酸、原兒茶酸等酚酸類物質為母體結構進行改造，改造后的衍生物經藥理實馬金4^i正，具有更強的藥理活性。本發明的目的在于提供一種苯曱酸衍生物及其合成方法，以及將苯曱酸衍生物用于制備預防和治療心腦血管疾病的藥物的用途。本發明實現過程如下通式(I)表示的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中，R2、R3、R4相互獨立地選自H、OH、曱氧基或乙氧基；R!、115相互
背景技術：
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發明內容獨立地選自H、OH、F或C1;R^為環烷氧基<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>在本發明的一個實施方案中，RpRs同時為F或Cl。在本發明的另一個實施方案中，R。Rs同時為H。在本發明的第三個實施方案中，R,、R4、Rs同時為H。在本發明的一個優選實施方案中，RpRs同時為H，R2、R3、R4均為OH，、o、R6選自環烷氧基""、V或I,即如式(IV)和(V)所示的3,4,5-三羥基苯曱酸冰片酯和3,4,5-三幾基苯曱酸薄荷酯。(IV)在本發明的另一個優選實施方案中，R。R4、Rs同時為H，R2、R3均為OH，\0、R6選自環垸氧基？'o',即如式(VI)和(VII)所示的3,4-二羥基苯曱酸冰片酯和3，4-二羥基苯曱酸薄荷酯,oHO(VI)(VII)上述通式(I)所述化合物的合成方法以通式(II)與通式(III)所示化合物為原料合成，R3,R5R6畫H(II)(III)其中RpR2、R3、R4、Rs和R6的意義同通式(I)中所述。5合成路線方法中反應涉及到的催化劑為濃H2S04、HC1(氣體)、DCC/DMAP(1，3-dicyclohexylcar-bodiimide,1,3-二環己基碳化二亞胺/4-dimethylaminopyridine，4-二曱氨基吡啶)、對曱基苯磺酸或S2082-/Zr02,使用DCC/DMAP、對曱基苯磺酸或S20〖-/Zr02是尤其有利的。所迷反應在溶劑中進行，所用的溶劑選自四氫呋喃、丙酮、曱苯、1,4-二氧六環、乙二醇二甲醚和AgV-二曱基曱酰胺。優選地，所用的溶劑選自四氫呋喃、1,4-二氧六環。反應溫度根據所選擇路線的不同而變化，控制在0。C150。C是有利的。優選地，反應溫度為25°C~100°C。反應時間可以是2h24h,優選5h15h,更優選8h12h,最優選8h。在本發明的一個具體實施方案中，式(II)的化合物的合成方法包括使3,4,5-三羥基苯甲酸與水片在催化劑存在下反應。其中所述的催化劑為路易斯酸催化劑，如對甲基苯磺酸或S20t/Zr02。其中所述的3,4,5-三羥基苯曱酸與冰片的反應摩爾比為i:i~i:1.5,優選為i:i.2i:1.5,更優選為1:1.5。所述反應在溶劑中進行，且溶劑選自四氫呋喃、1,4-二氧六環或A^V-二曱基曱酰胺，優選為1，4-二氧六環。反應溫度根據所用溶劑的不同而變化，通常控制在65。C15(TC,優選控制在105°C。反應時間為1524h,優選為18h。在使用S2082-/Zr02作為催化劑的情況下，任選地可以通過以下方法制備S2082—/Zr02:在010。C下，將氨水加至ZrOCl2溶液中，至pH值9-12，陳化，洗滌沉淀至無Cr，烘干、研磨后置于(NH4)2S20s溶液中浸泡，過濾、干燥、研磨，于500~700。C培燒2-5h制得820〖_/Zr02。在本發明的第三方面，提供了本發明的化合物用于制備預防和治療心腦血管疾病的藥物的用途，尤其是將3，4，5-三羥基苯甲酸冰片酯(式II的化合物)用于制備預防和治療心腦血管疾病的藥物。具體實施例方式以下結合合成實例及受體色譜與細胞活性試驗，對本發明作進一步的詳細說明。應該理解，以下實施例僅僅用于描述本發明，而不是限制本發明。實施例l:3，4,5-三羥基苯曱酸冰片酯的合成一(1)3，4，5-三乙酰氧基苯曱酸的合成在三口瓶中加入0.05mo1沒食子酸和0.30mo1乙酸酐，攪拌，完全溶解，緩慢加入幾滴濃H2S04,加料過程冷水浴控制溫度在60。C以下。升溫到90。C，反應lh。停止反應，冷卻后有白色晶體析出，抽濾，洗滌，得白色結晶物，50°C真空干燥。(2)3,4，5-三乙酰氧基苯甲酸水片酯的合成將0.01mol3，4,5-三乙酰氧基苯曱酸、0.015mol冰片置入100mL三口瓶中，然后加入36mL四氬呋喃，攪拌，溶解，再加入0.01gDMAP、0.01molDCC,室溫反應24h。反應結束后，抽濾，減壓蒸餾除去反應溶劑，在所得淺黃褐色油狀物中加入20mL乙酸乙酯，所得溶液依次用飽和NaHC03、飽和NaCl洗滌。無水Na2S04干燥，減壓濃縮，得亮黃色油狀物，柱層析分離得白色或淺黃色固體，6(TC真空干燥成粉狀，該物質紅外和核^磁共振凄t據如下IR(KBr)v/cm":3004.35(Ar-H),2942.60(CH3)，2886.96(CH2)，1781.92、1709.00(C=O)，1594.37、1498.32、1425.79(苯環骨架)，1369.22、1324.58(CH(CH3)2),1251.10、1188.14(C-0);'H-NMR(CDC13，400匿z)(5/ppm:7.784(s，Ar國H)，5.083畫5.106(t,1H)，2.428-2.437(m,1H)，2.310-2.316(s，9HCH3CO),2.012-2.078(m,1H),1.724-1.832(m，2H)，1.365-1.428(m,1H)，1.241-1.330(m，lH),1.072-1.115(m,IH)，0.857-0.953(t,9H)。(3)3,4,5-三羥基苯曱酸冰片酯的合成將0.26g3,4，5-三乙酰氧基苯曱酸水片酯置于含15mL丙酮的三口瓶中，待固狀物溶解后，加入5mL稀HC1，回流3h，停止反應，冷至室溫，再加入30rnL乙酸乙酯，飽和NaCl洗滌，無水Na2S04干燥，減壓濃縮，得淺黃色油狀物，柱層析分離得白色或淺黃色固體，60。C真空干燥。所得產物由質語、紅外光鐠、核磁共振語表征，具體數據如下ESI(國)畫MS:m/z305.0(M-l);IR(KBr)Wcm":3470.85、3331.45(OH)，3047.83(Ar-H),2954.77(CH3),2878.64(CH2)，1678.43(C=0),1612.68、1536.05、1453.05(苯環骨架)，1246.56(C國0);'HNMR(CD3SOCD3，400固z)c5/ppm:9.252(s,OH),8.912(s,OH),6.977(s,Ar-H),4.916-4.935(m,1H),2.34-2.50(m,1H),2.032國2.085(m,1H),1.762(s，1H),1.703(s,1H),1.373-1.403(d,1H),1.239-1.279(t，1H)，0.841曙1.005(q,9H)。13CNMR(CD3SOCD3,400MHz)5/ppm:168.680，147.989，140.736，122.585,111.061，81.672，51.264，50.093,46.975，39.184,30.341，29.590，22.076，21.289，21.207，16.152,16.075。實施例2:3,4,5-三羥基苯曱酸冰片酯的合成二在三口瓶中加入0.012mol3,4,5-三羥基苯曱酸和0.018mol水片，然后加入0.20g催化劑對曱基苯磺酸，25mL四氫呋喃，在65。C下反應18h。反應結束后柱層析分離除去催化劑、溶劑和未反應的冰片，得白色或淺黃色固體。所得產物的質i普、紅外光譜、iH-NMR鐠、"CNMR語數據與實施例1相同。實施例3:3,4，5-三輕基苯曱酸冰片酯的合成三在三口瓶中加入0.012mol3，4,5-三羥基苯甲酸和0.015mol冰片，然后加入0.20g催化劑對甲基苯磺酸，25mL1，4-二氧六環，在105。C下反應18h。反應結束后減壓蒸餾除去反應溶劑，在所得固體物質中加入200mL乙酸乙酯，所得溶液用飽和NaHC03洗滌以除去未反應的沒食子酸和對曱基苯磺酸，減壓濃縮取乙酸乙酯層，得淡黃色固體，柱層析分離得白色或淺黃色固體。所得產物的質譜、紅外光譜、iH-NMR譜、"CNMR譜數據與實施例1相同。實施例4:3,4,5-三羥基苯甲酸冰片酯的合成四在三口瓶中加入O.lmol3,4,5-三羥基苯曱酸和0.15mol水片，然后加入1.33g催化劑820〗-/2^)2，5ml濃鹽酸，400ml1,4-二氧六環，于105。C下反應18h。反應結束后抽濾除去催化劑S20『/Zr02,然后減壓蒸餾除去溶劑，得淺紅棕色固體，所得固體物質中加入200mL乙酸乙酯，所得溶液用飽和NaHC03、飽和NaCl洗滌呈中性，無水Na2S04干燥，減壓濃縮，柱層析分離得白色或淺黃色固體。產物的質鐠、紅外光譜和核^茲共振譜(^-NMR和13CNMR)數據與實施例1相同。催化劑S20827Zr02的制備方法如下取0.025molZrOCl2'8H20配制成1mol.L"的ZrOCl2溶液，在水水浴中攪拌，慢慢滴入6molvL"的氨水，直至pH值至10，陳化12h，抽濾，用蒸餾水洗滌沉淀至無Cr為止(用0.1mol.L"AgN03檢驗)。將沉淀在ll(TC下烘10h，研細，然后用0.5mol.L"(NH4)2S20s溶液浸泡12h,抽濾，干燥，研細，在馬弗爐中60(TC下培燒3h即制得S20/7Zr02。實施例5:3，4-二羥基苯曱酸冰片酯的合成3，4-二羥基苯曱酸冰片酯的合成類似于實施例1,2,3，4。在具體實施中是以3,4-二羥基苯曱酸和冰片為原料進行反應。所得產物為白色晶體。ESI(-)-MS:m/z289.0(M-l);IR(KBr)v/cm":3445.94(OH)，2965.57(CH3)，2877.59(CH2),1680.30(C=O),1605.73、1524.91、1447.97(苯環骨架)，1379.88,1307.01(CH(CH3)2)，1235.45(00);!HNMR(CD3SOCD3，400MHz)9.775(s，-OH)，9.395(s，-OH),7.410國7.414(d,1H),7.335-7.360(dd,1H),6.829-6.850(d，IH)，4.948-4.971(m，1H)，2.34-2.50(m,1H)，2.036國2細(m,1H),1.759(s,1H),1.702-1.728(t,IH)，1.244-1.404(2H),0.922-1.077(lH)，0.690-0.883(q，9H)。實施例6:3,4,5-三羥基苯曱酸薄荷酯的合成3，4,5-三羥基苯曱酸薄荷酯的合成類似于實施例1，2，3，4。在具體實施中是以3,4，5-三羥基苯曱酸和薄荷為原料進行反應。所得產物為白色晶體。ESI(-)-MS:m/z307.0(M-l)IR(KBr)v/cm":3372.01(OH),2956.96(CH3),2927.73(CH2),2S69.73(CH),91678.03(C=O)，1612.96、1535.47、1452.86(苯環骨架)，1388,1313.01(CH(CH3)2),1250.78(C-O);iHNMR(CD3SOCD3，400MHz)外pm:9.269(s,OH)，8.944(s，OH)，6.929(s，ArH),4.688-4.752(m,1H),1.922-1.951(1H)，1.818-1.888(1H)，1.666-1.692(2H),1.446畫1.502(2H),1.163-1.199(3H)，0.727-0.909(9H)。實施例7:3，4-二幾基苯曱酸薄荷酯的合成3,4-二羥基苯甲酸薄荷酯的合成類似于實施例1,2，3,4。在具體實施中是以3，4-二羥基苯曱酸和薄荷為原料進行反應。所得產物為白色晶體。ESI(誦)掘m/z291.0(M-l);IR(KBr)v/cm":3281.33(OH),2957.33(CH3),2927.73(CH2)，2869.58(CH)，1676.42(C=0),1603.17、1524.25、1444.80(苯環骨架)，1371，1296.02(CH(CH3)2)，1229.40(C-O);'HNMR(CD3SOCD3，400MHz)外pm:9.776(s,1H)，9.371(s,1H)，7.320-7.362(t，2H)，6.793-6.813(d,IH)，4.714-4.778(t，1H),1.922-1.951(IH),1.818-1.888(1H)，1.666-1.692(2H)1.446-1.502(2H)U63-1.199(3H)0.677誦0.905(9H)。實施例8:3,5-二曱氧基-4羥基苯曱酸冰片酯的合成3，5-二曱氧基-4羥基苯曱酸水片酯的合成類似于實施例2,3,4。在具體實施中是以3，5-二曱氧基-4羥基苯甲酸和水片為原料進行反應。所得產物為白色晶體。ESI(-)國MS:m/z333.0(M-l);IR(KBr)Wcm":3430.75(OH)，2954.20(CH3)，2882.44(CH2),2840.47(CH)，1690.21(C=O),1613.08、1519.22、1461.74(苯環骨架)，1376.42、1337.98(CH(CH3)2)，1272.98、1236.60、1202.17(C-O-C);'HNMR(CD3SOCD3,400MHz)飾pm:9.372(s,lH),7.223(s，2H)，4.973-4.996(d,1H),3.819(s,6H)，2.367誦2.376(d，1H),2.051國2.068(t,lH)，1.704-1.770(2H),101.297陽1.389(t，2H),1.030國1.072(q，1H),0.864-0.93l(t，9H)。實施例9:2，5-二氟-4羥基苯甲酸冰片酯的合成2,5-二氟-4羥基苯曱酸水片酯的合成類似于實施例2，3,4。在具體實施中是以2，5-二氟-4羥基苯曱酸和冰片為原料進行反應。所得產物為白色晶體。ESI(-)畫MS:m/z309.3(M-l);IR(KBr)v/cm":3320.23(OH)，2968.14(CH3),2876.36(CH2),2845.69(CH)，1688.30(C=O),1609.15、1522.19、1474.61(苯環骨架)，1367.24、1334.48(CH(CH3)2),1268.56、1234.88、1198.11(C畫0-C);'HNMR(CD3SOCD3,400MHz)(5/ppm:9.551(s，lH),7.082(d，2H),4.505-4.569(d,1H),3.759(s,6H)，2.264-2.286(d，1H),1.923誦1.946(t,1H)，1.515-1.530(2H),1.280國1.301(t,2H),1.025-1.068(q,1H),0.877國0.964(t,9H)。實施例10:3，4，5-三羥基苯曱酸冰片酯抗腦缺血作用一、方法取體重180-220gSD大鼠60只，雄性，隨機分成假手術對照組(2°/。泊洛沙姆)、模型對照組(2%泊洛沙姆)和3，4，5-三羥基苯曱酸冰片酯組(5、10和20mg/kg)。麻醉后，頸部正中切口，暴露左側頸總動脈(CCA),向外牽引二腹肌及胸鎖乳突肌，由CCA分叉處向頭端依次游離，結扎并剪斷頸外動脈(ECA)的所有分支，在ECA遠端結扎并切斷使其主干游離備用；然后分離頸內動脈(ICA),用絲線在ECA根部打一松扣，夾閉CCA和ICA。將做好的栓線經ECA主干切口，緩慢向ICA入顱方向推進，以CCA分叉處為標記，推進20mm左右時感到阻力，即達到了較細的大腦前動脈內，阻斷了MCA的所有血供來源，扎緊ECA根部松扣，松開CCA和ICA的微動脈夾，縫合皮膚。假手術組除不插入線栓外，其余步驟同上。分別于造模后即刻及造模后23h尾靜脈注射給藥各一次。1.Bederson行為評分術后麻醉清醒按Bederson的方法對動物的行為缺陷進行分級評分，進行5分制評分0分，無神經功能缺失癥狀；l分，不能完全伸展對側前爪；2分，向外側(左)轉圈；3分，向對側傾倒；4分，不能自行行走，意識喪失。分值越高，行為障礙越嚴重，各組模型均制作成功。2.腦梗塞范圍的影響MCA024h后，斷頭處死大鼠，取出左腦，去除嗅球、小腦和低位腦干后稱重。在視交叉及其前后各2mm處，做冠狀切片，腦切片于TTC溶液中避光37。C孵育20min,正常組織染成玫瑰紅色，而梗死組織呈白色，將白色組織4子細挖下稱重，以梗塞組織重量占右側半腦重量的百分比作為腦梗塞范圍。3.SOD、MDA含量的影響斷頭處死大鼠，冰盤中快速分離左側大腦皮層，用水冷勻漿介質制成勻漿,按試劑盒說明書，測定各組皮層的MDA、SOD、LA、GSH等含量。二、結果1.對大鼠神經癥狀的影響表l3,4，5-三羥基苯曱酸冰片酯對MCAT大鼠神經癥狀的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>與才莫型組相比，*P<0.05，**P<0.01實驗結果表明，假手術組未見行為異常改變，腦缺血模型組大鼠在術后6h,24h均出現偏癱樣癥狀，主要表現為手術對側前肢內收，肩內旋，前肢肌張力降低，肩抗力下降。3,4,5-三羥基苯甲酸水片酯20mg/kg劑量組對大鼠術后6h，24h的神經癥狀均有明顯改善。2.對腦梗塞范圍的影響表23,4,5-三羥基苯曱酸冰片酯對MCAT大鼠腦梗塞范圍的影響組別劑量(mg/kg)例數腦梗塞范圍(％)假手術組-100±0**模型組-1112.32±4.213,4,5-三羥基苯曱酸冰片酯組20108.10±4.24*3,4,5-三羥基苯曱酸冰片酯組101010.25±5.633,4,5-三輕基苯甲酸冰片酯組51012.11±4.65與才莫型組相比，*P<0.05，**P<0.01實驗結果表明，術后24h，3，4,5-三羥基苯曱酸水片酯20mg/kg組大鼠梗塞程度與模型組相比有明顯改善。3.對SOD、MDA含量的影響表33,4,5-三羥基苯曱酸冰片酯對大鼠腦組織SOD活力及MDA含量影響組別劑量(mg/kg)例數SOD(U/mgpro)MDA(nmol/mgpro)假手術組-1095.2±32.45.44±0.82模型組-11117.6±37.65.36±1.343,4,5-三羥基苯曱酸冰片酯組2010181.2±25.5**3.98±0.67**3，4,5隱三幾基苯甲酸冰片酯組1010154.8±36.4*楊±0.733,4,5-三羥基苯甲酸水片酯組510113.9±51.84.59±0.67與模型組相比較,P<0.01,P<0.05實驗結果表明，3,4,5-三羥基苯曱酸冰片酯10mg/kg和20mg/kg腦缺血大鼠大腦SOD活力進一步明顯升高；3,4,5-三羥基苯曱酸水片酯20mg/kg可明顯抑制腦缺血大鼠腦組織中MDA的含量。權利要求1.一種由通式(I)表示的化合物其中，R2、R3、R4相互獨立地選自H、OH、甲氧基或乙氧基；R1、R5相互獨立地選自H、OH、F或Cl；R6為環烷氧基id="icf0002"file="A20092C2.tif"wi="51"he="17"top="85"left="117"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>2、根據權利要求1所述的化合物，其特征在于R5同時為H。3、根據權利要求1所述的化合物，其特征在于R。R4、Rs同時為H,R2、R3為曱氧基或OH。4、根據權利要求2所述的化合物，其特征在于R2、R3、R4同時為OH。5、根據權利要求2所述的化合物，其特征在于R2、R3為OH，R4為H。6、根據權利要求2所述的化合物，其特征在于R2、R4為曱氧基，R3為OH，或R2、R4均為OH,Rs為曱氧基。7、權利要求1所述化合物的合成方法，其特征在于以通式(II)與通式(III)的化合物為原料進行合成，其中R"R2、R3、R4、Rs和R6的意義同通式(I)中所述。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>8、根據權利要求7所述合成方法，其特征在于反應均在溶劑中進行，溶劑選自乙酸酐、四氬呋喃、1,4-二氧六環、丙酮、乙二醇二曱醚或稀鹽酸；反應催化劑為濃H2S04、HC1、DCC/DMAP、對曱基苯磺酸或320〗_/Zr02。9、權利要求1所述化合物用于制備預防和治療心腦血管疾病的藥物的用獨立地選自H、OH、F或C1;R6為環烷氧基":<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>全文摘要本發明涉及一種通式(I)表示的化合物，其中R₂、R₃、R₄相互獨立地選自H、OH、甲氧基或乙氧基；R₁、R₅相互獨立地選自H、OH、F或Cl，R₆選自環烷氧基。本發明還涉及通式(I)表示的化合物的合成方法，以及通式(I)表示的化合物用于制備預防和治療心腦血管疾病的藥物的用途。文檔編號A61P9/10GK101607907SQ200910023010公開日2009年12月23日申請日期2009年6月22日優先權日2009年6月22日發明者南葉飛,張群正,王世祥,趙新鋒,鄭曉暉申請人:西北大學