專利名稱：一種制備牡蠣活性成份的方法
技術領域：
本發明屬于食品生物技術領域，具體涉及一種牡蠣活性成份的制備方法。
背景技術：
牡蠣又稱蠔、海蠣子等，是一種常見的海洋貝類動物，屬軟體動物門，瓣鰓綱(Lamellibranchia),牡販科(Ostreidae),牡販屬。世界沿海各國幾乎都產。牡販肉質鮮嫩，營養豐富，是一種營養價值極高的食品。現代研究表明，牡蠣肉中含有豐富的糖原、蛋白質、氨基酸、人體必需的微量元素、維生素和較多的具有重要生理活性的不飽和脂肪酸。當前，國外除了將牡蠣作為海味直接食用外，尚開發研制了大量以牡蠣提取物為主要成分的食品、保健品和藥品，這些產品不僅具有相當的營養或治療價值，而且也具有極高的經濟和社會效益。牡蠣中豐富的生物活性成分，為其在食品和醫藥領域的應用提供了巨大的支持。如何保護和合理利用牡蠣資源，開發新型牡蠣營養功能食品和醫藥品，促進牡蠣資源的可持續開發和利用，是未來牡蠣制品開發的方向。牡蠣提取物中的脂肪酸主要是正十四、十六、十八碳酸和二十烯酸等多不飽和脂肪酸，其中 EPA(eicosapentaenoic, 二十碳五稀酸)和 DHA(docosahexaenoic, 二十二碳六烯酸)含量較高，作為生物體的調節因子，EPA和DHA可降低血清LDL膽固醇(壞的膽固醇)及三甘油酯(中性油脂)，對心血管疾病諸如高血壓、血栓癥、心肌梗塞、狹心癥等心臟疾病有預防和治療作用，可促進學習腦力、記憶力并防止老化、老人癡呆癥等。目前關于從牡蠣中提取EPA、DHA的研究報道還很少。糖原是廣泛存在于動物內的多糖。糖原大量貯藏于肝臟，也存在于肌肉中，尤其是在一些水產的軟體動物體內。植物界菌類，細菌、酵母等也含有糖原。牡蠣中糖原含量約為7%，牡蠣糖原可直接被機體吸收，從而減輕胰腺負擔，因此對糖尿病的防治十分有效，研究表明，從牡蠣中提取的多糖具有明顯的降血壓，抗凝血，抗血栓，提高肌體的免疫功能和抗白細胞下降等作用；牡蠣中所含的糖原物能有效地使皮膚細胞再生，預防皺紋出現及阻止紫外線造成的皮膚損傷。牡蠣肉中蛋白質含量很高，并且氨基酸組成完善，為優質蛋白質；牡蠣肽是牡蠣蛋白水解的中間產物，牡蠣肽具有良好的水溶性，較好的酸、熱穩定性。作為一種世界性的海產經濟貝類，牡蠣的收獲季節比較集中，生鮮牡蠣易變質腐敗，長期保存和遠程運輸都有一定的困難，因此，對牡蠣進行深加工，提高產品的附加值，意義重大。當前，在牡蠣精深加工中對牡蠣肽、牡蠣糖原、牡蠣不飽和脂肪酸的研究都已經有零散的報道，但都沒有從產業化的角度對牡蠣這些主要成份的綜合、一體化開發進行深入研究。由于對牡蠣主要活性成份沒有進行綜合、一體化利用，造成嚴重的資源浪費。因此，建立合適的牡蠣活性成份綜合、一體化制備方法非常必要。中國專利申請200310112802.3，公開了一種從牡蠣肉同步提取糖原和肽粉的方法，但該方法僅提取兩種活性成份。

發明內容
本發明目的是提供一種制備牡蠣活性成分的方法，以同一批新鮮牡蠣為材料，依次提取牡蠣中不飽和脂肪酸、糖原、肽等有效成份。為實現上述目的，本發明的制備方法包括:一種制備牡蠣活性成份的方法，依次包括以下步驟:(I)以新鮮牡蠣為材料，用超臨界萃取不飽和脂肪酸，獲得不飽和脂肪酸和牡蠣渣；(2)以步驟(I)超臨界萃取不飽和脂肪酸后的牡蠣渣為材料，用蒸煮和酒精沉淀提取糖原，獲得糖原和牡蠣殘渣；(3)以步驟⑵提取糖原后的牡蠣殘渣為材料，用酶法水解牡蠣蛋白制備牡蠣肽。具體地，首先將牡蠣放入冷凍干燥機中真空凍干，使物料含水量達到3%以下，再用粉碎機粉碎至10目，然后進行超臨界萃取不飽和脂肪酸。萃取溫度為30-50°C、萃取壓力為25-45Mpa、CO2流量為15_30L/h，用超臨界CO2萃取設備萃取牡蠣不飽和脂肪酸45-80min，之后在分離溫度為35°C和分離壓力為SMpa的條件下分離出不飽和脂肪酸，并收集牡蠣渣；將經超臨界萃取方法萃取后的牡蠣渣，加入1-3倍體積的純水，然后采用超聲波破碎儀(功率為50-80W)進行破碎，再用熱水蒸煮20-30min，離心，得上清液和牡蠣殘渣，用濃度為60-90%的乙醇處理上清液，離心，得沉淀，將沉淀干燥后即得糖原；將經蒸煮和酒精沉淀提取糖原后的牡蠣殘渣加水溶解，在PH4-9、溫度為40-80°C下，用木瓜蛋白酶進行攪拌酶解反應，控制水解度(DH)為30-50%，反應結束后滅酶活(90-120°C )、離心，得酶解液，酶解液經噴霧干燥，獲得牡蠣肽粉末。上述方法所獲得的牡蠣不飽和脂肪酸、牡蠣糖原和肽可制成口服液、膠囊、沖劑或片劑。可作為功能性食品配料用于保健食品或普通食品配方中。根據本發明的方法可獲得有益的效果:本發明以同一批新鮮牡蠣為原材料，依次用超臨界萃取、蒸煮和酒精沉淀和酶法水解制備牡蠣中的活性成分，其中采用超臨界萃取方法提取牡蠣不飽和脂肪酸，排除了氧化和見光反應的可能性，得率高，質量好；同時對超臨界萃取后的牡蠣渣，利用蒸煮和酒精沉淀提取糖原，得率高，簡便易行，利于工業化生產；然后利用酶法水解牡蠣蛋白制備牡蠣肽，比傳統的酸法和自溶法產量高，產品的相對分子量易于控制，對牡蠣原料的綜合利用率高，且操作一體化，流程簡單，是一種高效的綜合性開發方法，可實現工業化生產。此外，過去的技術都是直接從牡蠣肉中提取分離牡蠣糖原，本發明是首次從經超臨界萃取后的牡蠣渣中，提取分離牡蠣糖原；通過應用超聲波破碎，有效地提高了牡蠣糖原的得率。
具體實施例方式本品牡販為近江牡販Ostrea rivularis Gould。實驗所用儀器:超臨界萃取儀(SFX-260D，美國ISC0)，氣相色譜儀(美國惠普公司)，旋轉真空蒸發儀(天津玻璃儀器廠)，722型分光光度計(上海精密科學儀器有限公司廣品)木瓜蛋白酶(食品級)。實施例1取新鮮牡蠣在冷凍干燥機中真空凍干，使物料含水量達到3%以下。之后用粉碎機粉碎至10目，打開超臨界萃取設備，設定萃取溫度為35°c，往萃取釜中加入50g物料。待萃取溫度達到設定值后，控制萃取壓力為35Mpa、CO2流量為20L/h的條件下萃取牡蠣不飽和脂肪酸60min，之后在分離溫度為35°C和分離壓力為SMpa的條件下分離出不飽和脂肪酸。從萃取釜中取出萃取脂肪酸后的牡蠣渣，加入2倍體積的純水，然后采用兩種方法進行糖原的提取分離:①不采用超聲波破碎儀進行破碎，②采用超聲波破碎儀進行破碎，功率為80W,時間為20min ;然后加入1/2體積水蒸煮30min，使糖原完全溶出，冷卻，離心20min。將上清液用濃度為90%的酒精處理上清液，再離心取其沉淀，將沉淀干燥后即得糖原產品。采用蒽酮比色法測定糖原含量。結果對比如下表所示:
權利要求
1.一種制備牡蠣活性成份的方法，依次包括以下步驟: (1)以新鮮牡蠣為材料，用超臨界萃取不飽和脂肪酸，獲得不飽和脂肪酸和牡蠣渣； (2)以步驟(I)超臨界萃取不飽和脂肪酸后的牡蠣渣為材料，用蒸煮和酒精沉淀提取糖原，獲得糖原和牡蠣殘渣； (3)以步驟(2)提取糖原后的牡蠣殘渣為材料，用酶法水解牡蠣蛋白制備牡蠣肽。
2.如權利要求1所述的方法，其中: 步驟(I)之前，進一步包括將牡蠣放入冷凍干燥機中真空凍干，使物料含水量達到3%以下，然后用粉碎機粉碎至10目的步驟。
步驟(I)所述的超臨近萃取不飽和脂肪酸包括:在萃取溫度為30-50°C、萃取壓力為25-45Mpa、CO2流量為15_30L/h下，用超臨界CO2萃取設備萃取牡蠣不飽和脂肪酸45-80min，之后在分離溫度為35°C和分離壓力為SMpa的條件下分離出不飽和脂肪酸，并收集牡蠣渣； 步驟(2)所述的提取糖原包括:將步驟(I)的牡蠣渣，加入1-3倍體積的純水，然后采用功率為50-80W的超聲波破碎儀進行破碎，再用熱水蒸煮20-30min ;離心，得上清液和牡蠣殘渣；用濃度為60-90%的乙醇處理上清液，離心，得沉淀；將沉淀干燥后獲得糖原； 步驟(3)所述的制備牡蠣肽包括:將步驟(2)獲得的牡蠣殘渣加水溶解，在PH4-9、溫度為40-80°C下，用木瓜蛋白酶進行攪拌酶解反應；控制水解度為30-50%，反應結束后于90-120°C滅酶活、離心，得酶解液；酶解液經噴霧干燥，獲得牡蠣肽粉末。
3.如權利要求1至2中任一項所述的方法制備的牡蠣活性成分在制備保健食品或普通食品中的應用。
全文摘要
本發明公開了一種牡蠣活性成份的綜合制備方法，涉及從一批牡蠣中同時分離制備不飽和脂肪酸、糖原和肽等三種牡蠣活性物質，所獲得的不飽和脂肪酸、糖原和肽可制成口服液、膠囊、沖劑或片劑；提供了將所獲得的牡蠣不飽和脂肪酸、糖原和肽等三種牡蠣活性物質作為功能性食品配料用于保健食品或普通食品中的應用。
文檔編號A23L1/33GK103099248SQ20111035441
公開日2013年5月15日 申請日期2011年11月10日 優先權日2011年11月10日
發明者王兵, 馮漢林, 張麗娟, 朱丹, 黃傳貴, 陳紅, 康暉 申請人:深圳海王藥業有限公司