專利名稱：艾迪注射制劑的檢測方法
技術領域：
本發明涉及艾迪注射制劑的檢測方法，屬于藥品的技術領域。
背景技術：
癌癥是嚴重威脅人類健康的一大類疾病，艾迪注射制劑主要由斑蝥、人 參、黃芪和刺五加組成，具有清熱解毒、消瘀散結的作用，主要用于原發性肝癌，肺癌，直腸 癌，惡性淋巴瘤，婦科惡性腫瘤等疾病。其中“艾迪注射液”刊登在中藥部頒標準第20冊。 但是隨著社會的發展，對于藥品的質量控制的要求越來越高，而且對于尋找快捷方便可控 的檢測方法的需求也越來越迫切，本發明人經過研究發現，現有艾迪注射制劑質量控制標 準中，產品性狀的描述不夠確切；對人參、黃芪的薄層鑒別中，供試品溶液的制備方法較繁 瑣，上柱洗脫的操作方法時間較長；展開劑的選擇配比不夠理想，很難將各有效成份特別是 人參皂苷Rgl和黃芪甲苷完全分開，同時展開劑有配置條件的限制，這些都易導致在鑒別 過程中分離度不好，斑點顯色不夠清晰；另外原標準中未對薄層板厚度進行規定，但經大 量實現表明，人參對薄層板的要求很嚴，如果薄層板過薄，人參皂苷Rgl與黃芪甲苷很難分 開，必須要厚板(500 μ m以上)才能將二者有效分離，同時濕度對其影響也很大，在展開過 程中要嚴格控制濕度；故現有質量控制方法不能有效控制艾迪注射制劑的質量，從而將影 響該制劑的臨床療效。

發明內容
本發明的目的在于提供一種艾迪注射制劑的質量控制方法，該注射制劑包括凍 干粉針劑、輸液劑和水針劑。本發明針對現有技術的不足，對這種艾迪注射制劑的質量控制 方法進行了研究，改進了斑蝥素的含量測定方法以及人參、黃芪的薄層鑒別方法，并增加了 這種艾迪制劑的安全性指標檢查項目，提高了艾迪注射制劑的質量控制標準，從而保證了 該制劑的臨床療效。本發明所述艾迪注射制劑是這樣構成的按照重量組份計算它主要由斑蝥 0. 5-5、人參20-80、黃芪200-600、刺五加100-200制備而成。其制備方法為以上四味，人 參切片，用20-85%乙醇加熱回流提取1-5次，合并提取液，濾過，回收乙醇，藥液備用；藥渣 與其余斑蝥等三味加水煎煮1-6次，合并煎液，濾過，濾液與人參提取液合并，以石硫法沉 淀處理1-3次，所得上清液加乙醇使含醇量達50-99%，靜置過夜，取上清液減壓回收乙醇 至無醇味，再按照常規方法分別制成凍干粉針劑、輸液劑或水針劑。本發明所述質量控制方法主要包括性狀、鑒別、檢查以及含量測定項目中的部分 或全部；其中鑒別包括α-萘酚顯色反應、以人參皂苷Re、RgU Rb以及黃芪甲苷為對照對 制劑中人參和黃芪的薄層色譜鑒別；含量測定是對制劑中人參所含人參皂苷Re、斑蝥所含 斑蝥素的含量測定。人參和黃芪的鑒別方法是以人參皂苷Re、Rgl、Rb以及黃芪甲苷為對照，以三氯甲 烷甲醇水=10-50 1-9 0. 5-5為展開劑的薄層色譜方法。人參和黃芪的鑒別方法還可以是以人參皂苷Re、Rgl、Rb以及黃芪甲苷為對照，以三氯甲烷醋酸乙酯甲醇水=1-10 2-15 1-10 1-10為展開劑的薄層色譜方法。鑒別方法包括以下項目的部分或全部(1)分別取凍干粉針加注射用水使溶解、或取輸液濃縮、或直接取水針劑，加乙醇 攪勻，濾過，沉淀物用乙醇洗滌1-5次，將沉淀物用蒸餾水溶解，取0. 5-3ml置試管中，微熱 后加入2-10% α-萘酚乙醇溶液，搖勻，再沿管壁緩緩加入濃硫酸，在二液面接界處顯紫紅 色環；(2)方法一分別取凍干粉針加注射用水使溶解、或取輸液濃縮、或直接取水針 劑，置分液漏斗中，用三氯甲烷振搖提取，棄去三氯甲烷液，水層用水飽和正丁醇提取1-4 次，合并正丁醇液，用氨試液洗滌1-4次，棄去氨試液，正丁醇液于水浴上蒸干，殘渣加甲醇 使溶解，作為供試品溶液。另取人參皂苷Re、Rgl、Rb1及黃芪甲苷對照品，加甲醇溶解，作為 對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液，分別點 于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷甲醇水=10-50 1-9 0.5-5為展開劑，展開， 取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，加熱，放置后再置紫外光燈200-500nm下檢視；供試品 色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。方法二 分別取凍干粉針加注射用水使溶解、或取輸液濃縮、或直接取水針劑， 置分液漏斗中，用水飽和的正丁醇提取1-4次，合并提取液，置水浴上蒸干，殘渣用蒸餾 水溶解，加入預先制備好的DA-201樹脂柱上，用水洗滌，再用20-80%甲醇液洗脫，收集 洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取人參皂苷Re、Rgl、Rb及黃芪甲 苷對照品，加甲醇溶解，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄薄層色譜法試 驗，吸取上述兩種溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿醋酸乙酯甲醇水= 1-10 2-15 1-10 l-10，10°c以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以 10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱數分鐘，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品 色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。具體的鑒別方法包括以下項目的部分或全部(1)取凍干粉針400-1000mg加注射用水5_20ml使溶解、或取輸液200-500ml濃縮 至5-20ml、或取水針劑20-100ml濃縮至5_20ml ；分別取上述藥品，加乙醇20_100ml，攪勻， 濾過，沉淀物用乙醇洗滌1-4次，將沉淀物用蒸餾水2-10ml溶解，取0. 5_3ml置試管中，微 熱后加入2-10 % α-萘酚乙醇溶液2-10滴，搖勻，再沿管壁緩緩加入濃硫酸0. 2~2ml，在二 液面接界處顯紫紅色環；(2)方法一取凍干粉針400-1000mg加注射用水20-100ml使溶解、或取輸液 200-500ml濃縮至20_100ml、或取水針劑20_100ml ；置分液漏斗中，用10_50ml三氯甲烷 振搖提取，棄去三氯甲烷液，水層用水飽和正丁醇提取1-4次，每次40-60ml，合并正丁醇 液，用氨試液洗滌1-4次，每次10-50ml，棄去氨試液，正丁醇液于水浴上蒸干，殘渣加甲醇 0. 5-3ml使溶解，作為供試品溶液；另取人參皂苷Re、Rg1 > Rb1及黃芪甲苷對照品，加甲醇制 成每Iml各含0. 5-3mg的混合溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄薄層 色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各3-20 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，厚500 μ m及 500 μ m以上；以三氯甲烷甲醇水=10-50 1-9 0. 5_5為展開劑，在必要時控制濕 度，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱數分鐘，放置1小時以上后再置 紫外光燈200-500nm下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。方法二 取凍干粉針400-1000mg加注射用水20_100ml使溶解、或取輸液 200-500ml濃縮至20_100ml、或取水針劑20_100ml ；置分液漏斗中，用水飽和的正丁醇提取 1-4次，每次10-60ml，合并提取液，置水浴上蒸干，殘渣用蒸餾水I-IOml溶解，加入預先制 備好的DA-201樹脂柱上，內徑0. 5 2cm，長10_20cm，填充10_15cm的DA-201樹脂后，再填 充l_5g中性氧化鋁；用水50-200ml洗滌，再用20-80 %甲醇液洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘 渣加甲醇0. 5-5ml使溶解，作為供試品溶液；另取人參皂苷Re、Rg1 > Rb及黃芪甲苷對照品， 加甲醇制成每Iml各含0. 5-3mg的混合溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部 附錄薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各3-20 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯 仿醋酸乙酯甲醇水=1-10 2-15 1-10 1-10，10°C以下放置的下層溶液為展開 齊U，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱數分鐘，置紫外光燈200-500nm 下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。制劑中人參皂苷Re的含量測定方法是以人參皂苷Re對照品為對照的分光光度 法。制劑中斑蝥素的含量測定方法是以斑蝥素對照品為對照，以0V-17為固定液的氣 相色譜法。含量測定方法包括(1)人參皂苷Re對照品溶液的制備精密稱取人參皂苷Re對照品，加甲醇溶解，搖勻，即得；標準曲線的制備精密量取對照品溶液0、20、40、60、80、10(^1，分別置IOml具塞 試管中，置水浴上揮去溶劑，立即取出，放冷，加2-10%香草醛冰醋酸溶液、高氯酸，搖勻，置 水浴中加熱，取出，用水冷卻，加冰醋酸，搖勻，照中國藥典分光光度法，測定吸收度，以吸收 度為縱坐標、濃度為橫坐標，繪制標準曲線；供試品溶液的制備分別取凍干粉針加注射用水使溶解、或取輸液濃縮、或直接 取水針劑，置分液漏斗中，用氯仿提取1-5次，合并氯仿提取液，用蒸餾水洗滌1-4次，棄去 氯仿液，洗液與上述水層合并，置分液漏斗中，用水飽和的正丁醇提取1-5次，合并正丁醇 提取液，加入無水硫酸鈉，攪拌，放至澄清，將正丁醇液移至蒸發皿中，用少量正丁醇洗滌無 水硫酸鈉，洗液并入蒸發皿中，蒸干，用少量蒸餾水溶解殘渣，加到大孔吸附樹脂DA-201柱 上，待液面接近棉花層后，用蒸餾水洗脫，棄去洗液，用40-90 %乙醇洗脫，收集洗脫液于蒸 發皿中，置水浴上蒸干，用甲醇溶解殘渣，移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得；測定法精密量取供試品溶液100 μ 1，照標準曲線的制備項下的方法，自“置IOml 具塞試管中”起依法測定吸收度。從標準曲線上讀出供試品溶液中人參皂苷Re的重量μ g， 計算；該注射制劑中，凍干粉針劑中含人參以人參皂苷Re計，不得少于；輸液劑中含 人參以人參皂苷Re計，不得少于0. 01mg/ml ；水針劑中含人參以人參皂苷Re計，不得少于 0. lmg/ml0(2)斑蝥素方法一照中國藥典氣相色譜法測定。色譜條件與系統適用性試驗玻璃色譜柱l-2mX3mm id，以0V-17為固定 液，OV-17由50%甲基、50%苯基聚硅氧烷組成，涂漬量為0. 5-3%,擔體ShimaliteW(Aff-DMCS)60-120目。柱溫為160士 10°C ；理論板數按斑蝥素峰計算，應不低于1500 ；對照品溶液的制備取斑蝥素對照品，精密稱定，加氯仿溶解，搖勻，作為對照品溶 液；供試品溶液的制備分別取凍干粉針加注射用水使溶解、或取輸液濃縮、或直接取 水針劑，加入l-3mol/L硫酸溶液，再精密加入氯仿，振搖提取，靜置分層，必要時離心，取下 層液即得；測定法分別精密量取對照品溶液和供試品溶液，注入氣相色譜儀，計算； 該注射制劑中，凍干粉針劑中含斑蝥素為0. 0005 % -0. 05% ；輸液劑中含斑蝥素為 0. 00001-0. 001mg/ml ；水針劑中含斑蝥素為 0. 0001-0. 005mg/ml。方法二 照中國藥典氣相色譜法測定。色譜條件與系統適用性試驗以聚乙二醇20M及甲基硅橡膠SE-30為固定液，涂布 濃度分別為5-20%和1-10%，0. 5-2 0.5-2混合裝柱。柱溫為180士 10°C；理論板數按斑 蝥素峰計算，應不低于1500。對照品溶液的制備取斑蝥素對照品，精密稱定，加氯仿溶解，作為對照品溶液。供試品溶液的制備分別取凍干粉針加注射用水使溶解、或取輸液濃縮、或直接取 水針劑，加入l-3mol/L硫酸溶液，用氯仿振搖提取1-5次，合并氯仿液，用K-D濃縮器濃縮 定容，即得。測定法分別精密量取對照品溶液和供試品溶液，注入氣相色譜儀，計算，即 得；該注射制劑中，凍干粉針劑中含斑蝥素為0. 0005% -0. 05 % ；輸液劑中含斑蝥素為 0. 00001-0. 001mg/ml ；水針劑中含斑蝥素為 0. 0001-0. 005mg/ml。更具體的含量測定方法包括(1)人參皂苷Re對照品溶液的制備精密稱取人參皂苷Re對照品，置量瓶中，加甲醇溶解使每Iml 中含人參皂苷Re l_2mg，搖勻，即得；標準曲線的制備精密量取對照品溶液0、20、40、60、80、10(^1，分別置IOml具塞
試管中，置水浴上揮去溶劑，立即取出，放冷，加2-10%香草醛冰醋酸溶液0. 05-lml、高氯 酸0. 5-1. 5ml，搖勻，置40-80°C水浴中加熱8-25分鐘，取出，用水冷卻1-3分鐘，加冰醋酸 2-10ml，搖勻，照中國藥典分光光度法，在400-700nm波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐 標、濃度為橫坐標，繪制標準曲線；供試品溶液的制備取凍干粉針200_400mg加注射用水10_30ml使溶解、或取輸 液50-200ml濃縮至10-30ml、或取水針劑10_30ml ；分別精密量取上述藥品，置分液漏斗 中，用氯仿提取1-5次，每次10-30ml，合并氯仿提取液，用蒸餾水洗滌1_4次，每次2_10ml， 棄去氯仿液，洗液與上述水層合并，置分液漏斗中，用水飽和的正丁醇提取1-5次，每次 40-60ml，合并正丁醇提取液，加入無水硫酸鈉l_5g，攪拌，放至澄清，將正丁醇液移至蒸發 皿中，用少量正丁醇洗滌無水硫酸鈉，洗液并入蒸發皿中，蒸干，用少量蒸餾水溶解殘渣， 加到大孔吸附樹脂DA-201柱上，待液面接近棉花層后，用蒸餾水IOOml洗脫，控制流速為 0. 3-0. 6ml/min，棄去洗液，用40-90%乙醇70_100ml洗脫，收集洗脫液于蒸發皿中，置水浴 上蒸干，用甲醇溶解殘渣，移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得；測定法精密量取供試品溶液100 μ 1，照標準曲線的制備項下的方法，自“置IOml具塞試管中”起依法測定吸收度。從標準曲線上讀出供試品溶液中人參皂苷Re的重量μ g， 計算；該注射制劑中，凍干粉針劑中含人參以人參皂苷Re計，不得少于；輸液劑中含 人參以人參皂苷Re計，不得少于0. 01mg/ml ；水針劑中含人參以人參皂苷Re計，不得少于 0. lmg/ml0(2)斑蝥素方法一照中國藥典氣相色譜法測定。色譜條件與系統適用性試驗玻璃色譜柱l-2mX3mm id，以0V-17為固定 液，OV-17由50%甲基、50%苯基聚硅氧烷組成，涂漬量為0. 5-3%,擔體Shimalite W(Aff-DMCS)60-120目。柱溫為160士 10°C ；理論板數按斑蝥素峰計算，應不低于1500 ；對照品溶液的制備取斑蝥素對照品，精密稱定，加氯仿制成每Iml含 0. 005-0. 02mg的溶液，作為對照品溶液；供試品溶液的制備取凍干粉針30_100g加注射用水5_20ml使溶解、或取輸液 30-100ml濃縮至約5-20ml、或取水針劑5_20ml ；分別精密量取上述藥品，加入l-3mol/L硫 酸溶液0. 5-2ml，再精密加入0. 5-2ml氯仿，振搖提取，靜置分層，必要時離心，取下層液即 得；測定法分別精密量取對照品溶液和供試品溶液各2_12μ 1，注入氣相色譜儀， 計算；該注射制劑中，凍干粉針劑中含斑蝥素為0. 0005% -0. 05% ；輸液劑中含斑蝥素為 0. 00001-0. 001mg/ml ；水針劑中含斑蝥素為 0. 0001-0. 005mg/ml。方法二 照中國藥典氣相色譜法測定。色譜條件與系統適用性試驗以聚乙二醇20M及甲基硅橡膠SE-30為固定液，涂布 濃度分別為5-20%和1-10%，0. 5-2 0.5-2混合裝柱。柱溫為180士 10°C；理論板數按斑 蝥素峰計算，應不低于1500。對照品溶液的制備取斑蝥素對照品，精密稱定，加氯仿制成每Iml含0. 05-0. 2mg 的溶液，作為對照品溶液。供試品溶液的制備取凍干粉針400-1000mg加注射用水20-100ml使溶解、或取輸 液200-500ml濃縮至20_100ml、或取水針劑20_100ml，加入l_3mol/L硫酸溶液2-lOml，用 氯仿振搖提取1-5次，每次IO-IOOml，合并氯仿液，用K-D濃縮器濃縮定容至2_8ml，即得。測定法分別精密量取對照品溶液和供試品溶液，注入氣相色譜儀，計算，即 得；該注射制劑中，凍干粉針劑中含斑蝥素為0. 0005% -0. 05 % ；輸液劑中含斑蝥素為 0. 00001-0. 001mg/ml ；水針劑中含斑蝥素為 0. 0001-0. 005mg/ml。檢查項目包括以下項目的部分或全部PH 值應為 3. 0-6. 5 ；重金屬取凍干粉針20-40mg加注射用水2ml使溶解、或取輸液8_20ml濃縮至 2ml、或取水針劑2ml ；置坩堝中，水浴上蒸干，照中國藥典重金屬檢查法檢查，含重金屬不 得過百萬分之五；熱原取凍干粉針300-600mg加注射用水30ml使溶解、或取輸液100-300ml濃縮 至30ml、或取水針劑30ml ；用氯化鈉注射液或5 10%葡萄糖注射液稀釋至100ml，按家兔 體重IKg注射IOml的劑量，照中國藥典熱原檢查法檢查，應符合規定；蛋白質取凍干粉針10-20mg加注射用水Iml使溶解、或取輸液4_10ml濃縮至lml、或取水針劑Iml ；加新配制的30%磺基水楊酸溶液1ml，混勻，放置5分鐘，不得出現渾 濁；鞣質取凍干粉針10-20mg加注射用水Iml使溶解、或取輸液4_10ml濃縮至lml、 或取水針劑Iml ；加新配制的含雞蛋清的生理氯化鈉溶液5ml，必要時，用0. 45um微孔 濾膜濾過，放置10分鐘，不得出現渾濁或沉淀；樹脂取凍干粉針50-100mg加注射用水5ml使溶解、或取輸液20_50ml濃縮至 5ml、或取水針劑5ml ；加鹽酸1滴，放置30分鐘，不得出現沉淀；草酸鹽取凍干粉針20-40mg加注射用水2ml使溶解、或取輸液8_20ml濃縮至 2ml、或取水針劑2ml ；用稀鹽酸調節PH值至1_2，濾過，濾液調節PH值至5_6，加3%氯化鈣 溶液2-3滴，放置10分鐘，不得出現渾濁或沉淀；鉀離子取凍干粉針20-40mg加注射用水2ml使溶解、或取輸液8_20ml濃縮至 2ml、或取水針劑2ml ；蒸干，按照中國藥典鉀離子測定法測定，應符合規定；砷鹽取凍干粉針10-20mg加注射用水Iml使溶解、或取輸液4_10ml濃縮至lml、 或取水針劑Iml ；精密量取，于坩堝中蒸干，加2%的硝酸鎂乙醇溶液3ml，點燃，燃盡后，先 用小火熾灼使炭化，再在500-600°C熾灼至完全灰化，放冷，加鹽酸5ml與水21ml使溶解，照 中國藥典砷鹽檢查法檢查；每Iml成品中含砷量不得過百萬分之二 ；溶血與凝聚2%紅細胞混懸液的制備取兔血或羊血數毫升，放入盛有玻璃珠的錐 形瓶中，振搖10分鐘，除去纖維蛋白原，使成脫纖血，加約10倍量的生理氯化鈉溶液洗滌 2-3次，至上清液不顯紅色為止，將所得紅細胞用生理氯化鈉溶液配成2%的混懸液，即得；供試品溶液的制備取凍干粉針100_200mg加注射用水IOml使溶解、或取輸液 40-100ml濃縮至10ml、或取水針劑IOml ；加生理氯化鈉溶液稀釋成50ml，混勻，即得；試驗方法取試管6支，按下表中配比量依次加入2%紅細胞混懸液和生理氯化鈉 溶液，混勻后，于37°C恒溫箱中放置30分鐘，分別加入不同量的供試品溶液，第6管為對照 管，搖勻后，置37°C 士0. 5°C恒溫箱中，開始每隔15分鐘觀察一次，1小時后，每隔1小時觀 察一次，共觀察3小時；
試管編號~3 46
2%紅細胞混懸液/ml 2.5 ~275 2^5 Γδ Γδ 2^5~
0.9% 氯化鈉溶液/ml 2.0 2.1 2.2 2.3 2.4 2.5 供試品溶液/ml0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0.0按上法檢查，以第3管為準，本品在3小時內不得出現溶血和紅細胞凝聚；異常毒性取凍干粉針加注射用水使溶解、或取輸液、或取水針劑；按小鼠每只 0. 5ml，照中國藥典異常毒性檢查法檢查；過敏物質檢查取凍干粉針加注射用水使溶解、或取輸液、或取水針劑；以原藥濃 度，按豚鼠致敏劑量為0. 5ml/只，激發劑量為1. Oml/只；照中國藥典過敏物質檢查法檢查， 應符合規定；升壓物質檢查取凍干粉針加注射用水使溶解、或取輸液、或取水針劑；以原藥濃 度，按大鼠體重Ikg注射IOml的劑量，照中國藥典升壓物質檢查法檢查，應符合規定；降壓物質檢查取凍干粉針加注射用水使溶解、或取輸液、或取水針劑；以原藥濃度，按貓體重Ikg注射Iml的劑量，照中國藥典降壓物質檢查法檢查，應符合規定；其他應符合中國藥典注射劑項下有關的各項規定；本發明所述質量控制方法為性狀對于凍干粉針劑，產品為淺黃色至淺棕色的疏松塊狀物；對于輸液劑，產品為淺黃色至淺棕色的澄明液體；對于水針劑，產品為淺黃色至淺棕色的澄明液體；鑒別(1)分別取凍干粉針加注射用水使溶解、或取輸液濃縮、或直接取水針劑，加乙醇 攪勻，濾過，沉淀物用乙醇洗滌1-5次，將沉淀物用蒸餾水溶解，取0. 5-3ml置試管中，微熱 后加入2-10% α-萘酚乙醇溶液，搖勻，再沿管壁緩緩加入濃硫酸，在二液面接界處顯紫紅 色環；(2)分別取凍干粉針加注射用水使溶解、或取輸液濃縮、或直接取水針劑，置分液 漏斗中，用三氯甲烷振搖提取，棄去三氯甲烷液，水層用水飽和正丁醇提取1-4次，合并正 丁醇液，用氨試液洗滌1-4次，棄去氨試液，正丁醇液于水浴上蒸干，殘渣加甲醇使溶解，作 為供試品溶液；另取人參皂苷Re、Rgl、Rb1及黃芪甲苷對照品，加甲醇溶解，作為對照品溶 液；照中國藥典2005年版一部附錄薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液，分別點于同一硅 膠G薄層板上，以三氯甲烷甲醇水=10-50 1-9 0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干， 噴以10%硫酸乙醇溶液，加熱，放置后再置紫外光燈200-500nm下檢視；供試品色譜中，在 與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；檢查pH 值應為 3. 0-6. 5 ；重金屬取凍干粉針20_40mg加注射用水2ml使溶解、或取輸液8_20ml濃縮至 2ml、或取水針劑2ml ；置坩堝中，水浴上蒸干，照中國藥典重金屬檢查法檢查，含重金屬不 得過百萬分之五；熱原取凍干粉針300-600mg加注射用水30ml使溶解、或取輸液100-300ml濃縮 至30ml、或取水針劑30ml ；用氯化鈉注射液或5 10%葡萄糖注射液稀釋至100ml，按家兔 體重Ikg注射IOml的劑量，照中國藥典熱原檢查法檢查，應符合規定；其他應符合中國藥典注射劑項下有關的各項規定；含量測定(1)人參皂苷Re對照品溶液的制備精密稱取人參皂苷Re對照品，加甲醇溶解，搖勻，即得；標準曲線的制備精密量取對照品溶液0、20、40、60、80、10(^1，分別置IOml具塞 試管中，置水浴上揮去溶劑，立即取出，放冷，加2-10%香草醛冰醋酸溶液、高氯酸，搖勻，置 水浴中加熱，取出，用水冷卻，加冰醋酸，搖勻，照中國藥典分光光度法，測定吸收度，以吸收 度為縱坐標、濃度為橫坐標，繪制標準曲線；供試品溶液的制備分別取凍干粉針加注射用水使溶解、或取輸液濃縮、或直接 取水針劑，置分液漏斗中，用氯仿提取1-5次，合并氯仿提取液，用蒸餾水洗滌1-4次，棄去 氯仿液，洗液與上述水層合并，置分液漏斗中，用水飽和的正丁醇提取1-5次，合并正丁醇 提取液，加入無水硫酸鈉，攪拌，放至澄清，將正丁醇液移至蒸發皿中，用少量正丁醇洗滌無水硫酸鈉，洗液并入蒸發皿中，蒸干，用少量蒸餾水溶解殘渣，加到大孔吸附樹脂DA-201柱 上，待液面接近棉花層后，用蒸餾水洗脫，棄去洗液，用40-90 %乙醇洗脫，收集洗脫液于蒸 發皿中，置水浴上蒸干，用甲醇溶解殘渣，移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得；測定法精密量取供試品溶液100 μ 1，照標準曲線的制備項下的方法，自“置IOml 具塞試管中”起依法測定吸收度；從標準曲線上讀出供試品溶液中人參皂苷Re的重量μ g， 計算；該注射制劑中，凍干粉針劑中含人參以人參皂苷Re計，不得少于；輸液劑中含 人參以人參皂苷Re計，不得少于0. 01mg/ml ；水針劑中含人參以人參皂苷Re計，不得少于 0. lmg/ml ；(2)斑蝥素照中國藥典氣相色譜法測定；色譜條件與系統適用性試驗以聚乙二醇20M及甲基硅橡膠SE-30為固定液，涂布 濃度分別為5-20%和1-10%，0. 5-2 0. 5-2混合裝柱；柱溫為180士 10°C ；理論板數按斑 蝥素峰計算，應不低于1500;對照品溶液的制備取斑蝥素對照品，精密稱定，加氯仿溶解，作為對照品溶液；供試品溶液的制備分別取凍干粉針加注射用水使溶解、或取輸液濃縮、或直接取 水針劑，加入l-3mol/L硫酸溶液，用氯仿振搖提取1-5次，合并氯仿液，用K-D濃縮器濃縮 定容，即得；測定法分別精密量取對照品溶液和供試品溶液，注入氣相色譜儀，計算，即 得；該注射制劑中，凍干粉針劑中含斑蝥素為0. 0005% -0. 05% ；輸液劑中含斑蝥素為 0. 00001-0. OOlmg/ml ；水針劑中含斑蝥素為 0. 0001-0. 005mg/ml。具體的質量控制方法為性狀對于凍干粉針劑，產品為淺黃色至淺棕色的疏松塊狀物；對于輸液劑，產品為淺黃色至淺棕色的澄明液體；對于水針劑，產品為淺黃色至淺棕色的澄明液體；鑒別(1)取凍干粉針400-1000mg加注射用水5-20ml使溶解、或取輸液200-500ml濃縮 至5-20ml、或取水針劑20-100ml濃縮至5_20ml ；分別取上述藥品，加乙醇20_100ml，攪勻， 濾過，沉淀物用乙醇洗滌1-4次，將沉淀物用蒸餾水2-10ml溶解，取0. 5_3ml置試管中，微 熱后加入2-10 % α-萘酚乙醇溶液2-10滴，搖勻，再沿管壁緩緩加入濃硫酸0. 2~2ml，在二 液面接界處顯紫紅色環；(2)取凍干粉針400-1000mg加注射用水20_100ml使溶解、或取輸液200_500ml 濃縮至20-100ml、或取水針劑20-100ml ；置分液漏斗中，用10_50ml三氯甲烷振搖提取，棄 去三氯甲烷液，水層用水飽和正丁醇提取1-4次，每次40-60ml，合并正丁醇液，用氨試液 洗滌1-4次，每次10-50ml，棄去氨試液，正丁醇液于水浴上蒸干，殘渣加甲醇0. 5_3ml使溶 解，作為供試品溶液；另取人參皂苷Re、Rg1, Rb1及黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每Iml各 含0. 5-3mg的混合溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄薄層色譜法試 驗，吸取上述兩種溶液各3-20 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，厚500 μ m及500 μ m以 上；以三氯甲烷甲醇水=10-50 1-9 0.5-5為展開劑，在必要時控制濕度，展開， 取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱數分鐘，放置1小時以上后再置紫外光 燈200-500nm下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點檢查pH 值應為 3. 0-6. 5 ；重金屬取凍干粉針20-40mg加注射用水2ml使溶解、或取輸液8_20ml濃縮至 2ml、或取水針劑2ml ；置坩堝中，水浴上蒸干，照中國藥典重金屬檢查法檢查，含重金屬不 得過百萬分之五；熱原取凍干粉針300-600mg加注射用水30ml使溶解、或取輸液100-300ml濃縮 至30ml、或取水針劑30ml ；用氯化鈉注射液或5 10%葡萄糖注射液稀釋至100ml，按家兔 體重Ikg注射IOml的劑量，照中國藥典熱原檢查法檢查，應符合規定；其他應符合中國藥典注射劑項下有關的各項規定；含量測定(1)人參皂苷Re對照品溶液的制備精密稱取人參皂苷Re對照品，置量瓶中，加甲醇溶解使每Iml 中含人參皂苷Re l_2mg，搖勻，即得；標準曲線的制備精密量取對照品溶液0、20、40、60、80、10(^1，分別置101111具塞
試管中，置水浴上揮去溶劑，立即取出，放冷，加2-10%香草醛冰醋酸溶液0. 05-lml、高氯 酸0. 5-1. 5ml，搖勻，置40-80°C水浴中加熱8-25分鐘，取出，用水冷卻1-3分鐘，加冰醋酸 2-10ml，搖勻，照中國藥典分光光度法，在400-700nm波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐 標、濃度為橫坐標，繪制標準曲線；供試品溶液的制備取凍干粉針200_400mg加注射用水10_30ml使溶解、或取輸 液50-200ml濃縮至10-30ml、或取水針劑10_30ml ；分別精密量取上述藥品，置分液漏斗 中，用氯仿提取1-5次，每次10-30ml，合并氯仿提取液，用蒸餾水洗滌1_4次，每次2_10ml， 棄去氯仿液，洗液與上述水層合并，置分液漏斗中，用水飽和的正丁醇提取1-5次，每次 40-60ml，合并正丁醇提取液，加入無水硫酸鈉l_5g，攪拌，放至澄清，將正丁醇液移至蒸發 皿中，用少量正丁醇洗滌無水硫酸鈉，洗液并入蒸發皿中，蒸干，用少量蒸餾水溶解殘渣， 加到大孔吸附樹脂DA-201柱上，待液面接近棉花層后，用蒸餾水IOOml洗脫，控制流速為 0. 3-0. 6ml/min，棄去洗液，用40-90%乙醇70_100ml洗脫，收集洗脫液于蒸發皿中，置水浴 上蒸干，用甲醇溶解殘渣，移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得；測定法精密量取供試品溶液100μ 1，照標準曲線的制備項下的方法，自“置IOml 具塞試管中”起依法測定吸收度；從標準曲線上讀出供試品溶液中人參皂苷Re的重量μ g， 計算；該注射制劑中，凍干粉針劑中含人參以人參皂苷Re計，不得少于；輸液劑中含 人參以人參皂苷Re計，不得少于0. 01mg/ml ；水針劑中含人參以人參皂苷Re計，不得少于 0. lmg/ml ；(2)斑蝥素照中國藥典氣相色譜法測定；色譜條件與系統適用性試驗以聚乙二醇20M及甲基硅橡膠SE-30為固定液，涂布 濃度分別為5-20%和1-10%，0. 5-2 0. 5-2混合裝柱；柱溫為180士 10°C ；理論板數按斑 蝥素峰計算，應不低于1500;對照品溶液的制備取斑蝥素對照品，精密稱定，加氯仿制成每Iml含0. 05-0. 2mg 的溶液，作為對照品溶液；
供試品溶液的制備取凍干粉針400-1000mg加注射用水20_100ml使溶解、或取輸 液200-500ml濃縮至20_100ml、或取水針劑20_100ml，加入l_3mol/L硫酸溶液2-lOml，用 氯仿振搖提取1-5次，每次IO-IOOml，合并氯仿液，用K-D濃縮器濃縮定容至2_8ml，即得；測定法分別精密量取對照品溶液和供試品溶液，注入氣相色譜儀，計算，即 得；該注射制劑中，凍干粉針劑中含斑蝥素為0. 0005% -0. 05% ；輸液劑中含斑蝥素為 0. 00001-0. 001mg/ml ；水針劑中含斑蝥素為 0. 0001-0. 005mg/ml。本發明所述質量控制方法還可為性狀對于凍干粉針劑，產品為淺黃色至淺棕色的疏松塊狀物；對于輸液劑，產品為淺黃色至淺棕色的澄明液體；對于水針劑，產品為淺黃色至淺棕色的澄明液體；鑒別(1)分別取凍干粉針加注射用水使溶解、或取輸液濃縮、或直接取水針劑，加乙醇 攪勻，濾過，沉淀物用乙醇洗滌1-5次，將沉淀物用蒸餾水溶解，取0. 5-3ml置試管中，微熱 后加入2-10% α-萘酚乙醇溶液，搖勻，再沿管壁緩緩加入濃硫酸，在二液面接界處顯紫紅 色環；(2)分別取凍干粉針加注射用水使溶解、或取輸液濃縮、或直接取水針劑，置分 液漏斗中，用水飽和的正丁醇提取1-4次，合并提取液，置水浴上蒸干，殘渣用蒸餾水溶 解，加入預先制備好的DA-201樹脂柱上，用水洗滌，再用20-80%甲醇液洗脫，收集洗脫 液，蒸干，殘渣加甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取人參皂苷Re、Rgl、Rb及黃芪甲苷對 照品，加甲醇溶解，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄薄層色譜法試驗， 吸取上述兩種溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿醋酸乙酯甲醇水= 1-10 2-15 1-10 1-10，10°C以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以 10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱數分鐘，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品 色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；檢查PH 值應為 3. 0-6. 5 ；重金屬取凍干粉針20_40mg加注射用水2ml使溶解、或取輸液8_20ml濃縮至 2ml、或取水針劑2ml ；置坩堝中，水浴上蒸干，照中國藥典重金屬檢查法檢查，含重金屬不 得過百萬分之五；熱原取凍干粉針300-600mg加注射用水30ml使溶解、或取輸液100-300ml濃縮 至30ml、或取水針劑30ml ；用氯化鈉注射液或5 10%葡萄糖注射液稀釋至100ml，按家兔 體重IKg注射IOml的劑量，照中國藥典熱原檢查法檢查，應符合規定；蛋白質取凍干粉針10-20mg加注射用水Iml使溶解、或取輸液4_10ml濃縮至 lml、或取水針劑Iml ；加新配制的30%磺基水楊酸溶液1ml，混勻，放置5分鐘，不得出現渾 濁；鞣質取凍干粉針10-20mg加注射用水Iml使溶解、或取輸液4_10ml濃縮至lml、 或取水針劑Iml ；加新配制的含雞蛋清的生理氯化鈉溶液5ml，必要時，用045um微孔濾 膜濾過，放置10分鐘，不得出現渾濁或沉淀；樹脂取凍干粉針50-100mg加注射用水5ml使溶解、或取輸液20_50ml濃縮至5ml、或取水針劑5ml ；加鹽酸1滴，放置30分鐘，不得出現沉淀；草酸鹽取凍干粉針20_40mg加注射用水2ml使溶解、或取輸液8_20ml濃縮至 2ml、或取水針劑2ml ；用稀鹽酸調節PH值至1_2，濾過，濾液調節PH值至5_6，加3%氯化鈣 溶液2-3滴，放置10分鐘，不得出現渾濁或沉淀；鉀離子取凍干粉針20_40mg加注射用水2ml使溶解、或取輸液8_20ml濃縮至 2ml、或取水針劑2ml ；蒸干，按照中國藥典鉀離子測定法測定，應符合規定；砷鹽取凍干粉針10-20mg加注射用水Iml使溶解、或取輸液4_10ml濃縮至1ml、 或取水針劑Iml ；精密量取，于坩堝中蒸干，加2%的硝酸鎂乙醇溶液3ml，點燃，燃盡后，先 用小火熾灼使炭化，再在500-600°C熾灼至完全灰化，放冷，加鹽酸5ml與水21ml使溶解，照 中國藥典砷鹽檢查法檢查；每Iml成品中含砷量不得過百萬分之二 ；溶血與凝聚2%紅細胞混懸液的制備取兔血或羊血數毫升，放入盛有玻璃珠的錐 形瓶中，振搖10分鐘，除去纖維蛋白原，使成脫纖血，加約10倍量的生理氯化鈉溶液洗滌 2-3次，至上清液不顯紅色為止，將所得紅細胞用生理氯化鈉溶液配成2%的混懸液，即得；供試品溶液的制備取凍干粉針100_200mg加注射用水IOml使溶解、或取輸液 40-100ml濃縮至10ml、或取水針劑IOml ；加生理氯化鈉溶液稀釋成50ml，混勻，即得；試驗方法取試管6支，按下表中配比量依次加入2%紅細胞混懸液和生理氯化鈉 溶液，混勻后，于37°C恒溫箱中放置30分鐘，分別加入不同量的供試品溶液，第6管為對照 管，搖勻后，置37°C 士0. 5°C恒溫箱中，開始每隔15分鐘觀察一次，1小時后，每隔1小時觀 察一次，共觀察3小時；
權利要求
一種艾迪注射制劑的檢測方法，其特征在于所述檢測方法為性狀對于凍干粉針劑，產品為淺棕色的疏松塊狀物；對于輸液劑，產品為淺棕色的澄明液體；對于水針劑，產品為淺棕色的澄明液體；鑒別(1)分別取凍干粉針加注射用水使溶解、或取輸液濃縮、或直接取水針劑，加乙醇攪勻，濾過，沉淀物用乙醇洗滌1 5次，將沉淀物用蒸餾水溶解，取0.5 3ml置試管中，微熱后加入2 10％α 萘酚乙醇溶液，搖勻，再沿管壁緩緩加入濃硫酸，在二液面接界處顯紫紅色環；(2)分別取凍干粉針加注射用水使溶解、或取輸液濃縮、或直接取水針劑，置分液漏斗中，用水飽和的正丁醇提取1 4次，合并提取液，置水浴上蒸干，殘渣用蒸餾水溶解，加入預先制備好的DA 201樹脂柱上，用水洗滌，再用20 80％甲醇液洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取人參皂苷Re、Rg1、Rb及黃芪甲苷對照品，加甲醇溶解，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇∶水＝1 10∶2 15∶1 10∶1 10，10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱數分鐘，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；檢查pH值應為3.0 6.5；重金屬取凍干粉針20 40mg加注射用水2ml使溶解、或取輸液8 20ml濃縮至2ml、或取水針劑2ml；置坩堝中，水浴上蒸干，照中國藥典重金屬檢查法檢查，含重金屬不得過百萬分之五；熱原取凍干粉針300 600mg加注射用水30ml使溶解、或取輸液100 300ml濃縮至30ml、或取水針劑30ml；用氯化鈉注射液或5～10％葡萄糖注射液稀釋至100ml，按家兔體重1kg注射10ml的劑量，照中國藥典熱原檢查法檢查，應符合規定；其他應符合中國藥典注射劑項下有關的各項規定；含量測定(1)人參皂苷Re對照品溶液的制備精密稱取人參皂苷Re對照品，加甲醇溶解，搖勻，即得；標準曲線的制備精密量取對照品溶液0、20、40、60、80、100μl，分別置10ml具塞試管中，置水浴上揮去溶劑，立即取出，放冷，加2 10％香草醛冰醋酸溶液、高氯酸，搖勻，置水浴中加熱，取出，用水冷卻，加冰醋酸，搖勻，照中國藥典分光光度法，測定吸收度，以吸收度為縱坐標、濃度為橫坐標，繪制標準曲線；供試品溶液的制備分別取凍干粉針加注射用水使溶解、或取輸液濃縮、或直接取水針劑，置分液漏斗中，用氯仿提取1 5次，合并氯仿提取液，用蒸餾水洗滌1 4次，棄去氯仿液，洗液與上述水層合并，置分液漏斗中，用水飽和的正丁醇提取1 5次，合并正丁醇提取液，加入無水硫酸鈉，攪拌，放至澄清，將正丁醇液移至蒸發皿中，用少量正丁醇洗滌無水硫酸鈉，洗液并入蒸發皿中，蒸干，用少量蒸餾水溶解殘渣，加到大孔吸附樹脂DA 201柱上，待液面接近棉花層后，用蒸餾水洗脫，棄去洗液，用40 90％乙醇洗脫，收集洗脫液于蒸發皿中，置水浴上蒸干，用甲醇溶解殘渣，移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得；測定法精密量取供試品溶液100μl，照標準曲線的制備項下的方法，自“置10ml具塞試管中”起依法測定吸收度；從標準曲線上讀出供試品溶液中人參皂苷Re的重量μg，計算；該注射制劑中，凍干粉針劑中含人參以人參皂苷Re計，不得少于1％；輸液劑中含人參以人參皂苷Re計，不得少于0.01mg/ml；水針劑中含人參以人參皂苷Re計，不得少于0.1mg/ml；(2)斑蝥素照中國藥典氣相色譜法測定；色譜條件與系統適用性試驗玻璃色譜柱1 2m×3mm id，以OV 17為固定液，OV 17由50％甲基、50％苯基聚硅氧烷組成，涂漬量為0.5 3％，擔體Shimalite W AW DMCS 60 120目；柱溫為160±10℃；理論板數按斑蝥素峰計算，應不低于1500；對照品溶液的制備取斑蝥素對照品，精密稱定，加氯仿溶解，搖勻，作為對照品溶液；供試品溶液的制備分別取凍干粉針加注射用水使溶解、或取輸液濃縮、或直接取水針劑，加入1 3mol/L硫酸溶液，再精密加入氯仿，振搖提取，靜置分層，離心，取下層液即得；測定法分別精密量取對照品溶液和供試品溶液，注入氣相色譜儀，計算；該注射制劑中，凍干粉針劑中含斑蝥素為0.0005％ 0.05％；輸液劑中含斑蝥素為0.00001 0.001mg/ml；水針劑中含斑蝥素為0.0001 0.005mg/ml。
2.按照權利要求1所述艾迪注射制劑的檢測方法，其特征在于具體的檢測方法為性 狀對于凍干粉針劑，產品為淺棕色的疏松塊狀物； 對于輸液劑，產品為淺棕色的澄明液體； 對于水針劑，產品為淺棕色的澄明液體； 鑒別(1)取凍干粉針400-1000mg加注射用水5-20ml使溶解、或取輸液200-500ml濃縮至 5-20ml、或取水針劑20-100ml濃縮至5_20ml ；分別取上述藥品，加乙醇20_100ml，攪勻，濾 過，沉淀物用乙醇洗滌1-4次，將沉淀物用蒸餾水2-10ml溶解，取0. 5-3ml置試管中，微熱 后加入2-10 % a-萘酚乙醇溶液2-10滴，搖勻，再沿管壁緩緩加入濃硫酸0. 2-2ml，在二液 面接界處顯紫紅色環；(2)取凍干粉針400-1000mg加注射用水20-100ml使溶解、或取輸液200-500ml濃 縮至20-100ml、或取水針劑20-100ml ；置分液漏斗中，用水飽和的正丁醇提取1_4次，每 次10-60ml，合并提取液，置水浴上蒸干，殘渣用蒸餾水l-10ml溶解，加入預先制備好的 DA-201樹脂柱上，內徑0. 5 2cm，長10-20cm，填充10_15cm的DA-201樹脂后，再填充l_5g 中性氧化鋁；用水50-200ml洗滌，再用20-80%甲醇液洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇 0. 5-5ml使溶解，作為供試品溶液；另取人參皂苷Re、Rgl、Rb及黃芪甲苷對照品，加甲醇制 成每1ml各含0. 5-3mg的混合溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄薄層 色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各3-20 iU，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿醋酸 乙酯甲醇水=1-10 2-15 1-10 1-10，10°C以下放置的下層溶液為展開劑，展開， 取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱數分鐘，置紫外光燈200-500nm下檢視； 供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；檢查pH 值應為 3. 0-6.5 ；重金屬取凍干粉針20-40mg加注射用水2ml使溶解、或取輸液8_20ml濃縮至2ml、 或取水針劑2ml ；置坩堝中，水浴上蒸干，照中國藥典重金屬檢查法檢查，含重金屬不得過 百萬分之五；熱原取凍干粉針300-600mg加注射用水30ml使溶解、或取輸液100_300ml濃縮至 30ml、或取水針劑30ml ；用氯化鈉注射液或5 10%葡萄糖注射液稀釋至100ml，按家兔體 重1kg注射10ml的劑量，照中國藥典熱原檢查法檢查，應符合規定； 其他應符合中國藥典注射劑項下有關的各項規定； 含量測定(1)人參皂苷Re對照品溶液的制備精密稱取人參皂苷Re對照品，置量瓶中，加甲醇溶解使每lml中含 人參皂苷Re l-2mg，搖勻，即得;標準曲線的制備精密量取對照品溶液0、20、40、60、80、100111，分別置10ml具塞試 管中，置水浴上揮去溶劑，立即取出，放冷，加2-10%香草醛冰醋酸溶液0. 05-lml、高氯酸 0. 5-1. 5ml，搖勻，置40-80°C水浴中加熱8-25分鐘，取出，用水冷卻1 -3分鐘，加冰醋酸 2-10ml，搖勻，照中國藥典分光光度法，在400-700nm波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐 標、濃度為橫坐標，繪制標準曲線；供試品溶液的制備取凍干粉針200-400mg加注射用水10-30ml使溶解、或取輸液 50-200ml濃縮至10-30ml、或取水針劑10_30ml ；分別精密量取上述藥品，置分液漏斗中， 用氯仿提取1-5次，每次10-30ml，合并氯仿提取液，用蒸餾水洗滌1-4次，每次2-10ml， 棄去氯仿液，洗液與上述水層合并，置分液漏斗中，用水飽和的正丁醇提取1-5次，每次 40-60ml，合并正丁醇提取液，加入無水硫酸鈉l_5g，攪拌，放至澄清，將正丁醇液移至蒸發 皿中，用少量正丁醇洗滌無水硫酸鈉，洗液并入蒸發皿中，蒸干，用少量蒸餾水溶解殘渣， 加到大孔吸附樹脂DA-201柱上，待液面接近棉花層后，用蒸餾水100ml洗脫，控制流速為 0. 3-0. 6ml/min，棄去洗液，用40-90%乙醇70_100ml洗脫，收集洗脫液于蒸發皿中，置水浴 上蒸干，用甲醇溶解殘渣，移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得；測定法精密量取供試品溶液100 yl，照標準曲線的制備項下的方法，自“置10ml具 塞試管中”起依法測定吸收度；從標準曲線上讀出供試品溶液中人參皂苷Re的重量Pg， 計算；該注射制劑中，凍干粉針劑中含人參以人參皂苷Re計，不得少于；輸液劑中含 人參以人參皂苷Re計，不得少于0. 01mg/ml ；水針劑中含人參以人參皂苷Re計，不得少于 0. lmg/ml ；(2)斑蝥素照中國藥典氣相色譜法測定；色譜條件與系統適用性試驗玻璃色譜柱l-2mX3mm id,以OV-17為固定液，OV-17由 50%甲基、50%苯基聚硅氧燒組成，涂漬量為0. 5-3%，擔體Shimalite ff Aff-DMCS 60-120 目；柱溫為160士 10°C ；理論板數按斑蝥素峰計算，應不低于1500 ；對照品溶液的制備取斑蝥素對照品適量，精密稱定，加氯仿制成每lml含 0. 005-0. 02mg的溶液，作為對照品溶液；供試品溶液的制備取凍干粉針30-100g加注射用水5-20ml使溶解、或取輸液 30-100ml濃縮至約5-20ml、或取水針劑5_20ml ；分別精密量取上述藥品，加入l-3mol/L硫 酸溶液0. 5-2ml，再精密加入0. 5-2ml氯仿，振搖提取，靜置分層，離心，取下層液即得；測定法分別精密量取對照品溶液和供試品溶液各2-12 yl,注入氣相色譜儀，計 算；該注射制劑中，凍干粉針劑中含斑蝥素為0. 0005% -0. 05 % ；輸液劑中含斑蝥素為 0. 00001-0. 001mg/ml ；水針劑中含斑蝥素為 0. 0001-0. 005mg/ml。
全文摘要
本發明提供了艾迪注射制劑的檢測方法，所述檢測方法為性狀、鑒別、檢查以及含量測定項目；其中鑒別為α-萘酚顯色反應、以人參皂苷Re、Rg1、Rb以及黃芪甲苷為對照對制劑中人參和黃芪的薄層色譜鑒別；含量測定是對制劑中人參所含人參皂苷Re、斑蝥所含斑蝥素的含量測定；檢查為對pH值、重金屬、熱原、蛋白質、鞣質等安全性指標的檢查；與現有技術相比，本發明質量控制方法可有效地控制產品質量，從而確保其臨床療效。
文檔編號G01N30/90GK101991636SQ201010531088
公開日2011年3月30日 申請日期2007年11月19日 優先權日2007年11月19日
發明者葉湘武, 湯瓊, 竇啟玲 申請人:貴州益佰制藥股份有限公司