本申請涉及藥物晶型領域，具體涉及一種烏苯美司δ晶型及其制備方法。
背景技術：
：烏苯美司(Ubenimex)，其化學名稱為：N-[(2S，3R)-3-氨基-2-羥基-4-苯基丁酰]-L-亮氨酸；分子式：C16H24N2O4；分子量：308.37；其結構式如下：烏苯美司是1976年由日本學者梅澤濱夫從橄欖網狀鏈霉菌的培養液中分離而得的二肽化合物，可競爭性的抑制氨肽酶B及亮氨酸肽酶和半胱天冬酶等，誘導腫瘤細胞凋亡和促進宿主免疫功能。可配合化療、放療及聯合應用于白血病、多發性骨髓瘤、骨髓增生異常綜合征及造血干細胞移植后，以及其它實體瘤患者。US4281180公開了烏苯美司的α、β晶型的制備工藝，其中，在烏苯美司中間體用鈀炭氫化反應時，容易產生過度氫化雜質。在后續加鹽酸溶解，然后滴加氨水調pH值析晶的過程中，該雜質無法被有效的除掉。US4786754公開了烏苯美司γ晶型，并指出β晶型在空氣中通過吸收水分會變成二水合物α晶型，而α晶型在148°下干燥可以得到β晶型，最終α、β晶型均會轉變為穩定型γ晶型。因此α、β晶型存在不穩定導致產品很難控制的問題。同時，由于γ晶型是通過α、β制備而來，因此，同樣也存在由于過度氫化導致雜質難以有效去除的問題。中國專利CN103910648A提供了一種鹽酸烏苯美司的晶型制備方法：將鹽酸烏苯美司加入到乙酸異丙酯與二甲基甲酰胺的混合溶劑中微熱溶解，攪拌1-5h，靜置使溶劑揮發后得到晶型。這種方法揮發時間長、只適合于小劑量晶型制備，無法滿足大批量晶型制備要求。眾所周知，對于藥物的多晶型而言，不同的晶型可以具有不同的化學和物理特性，包括化學穩定性、溶解度、光學和機械性質等，這些性質可以直接影響原料藥和制劑的處理和生產工藝過程，并且會影響到制劑的穩定性、溶解度和生物利用度。因此，晶型的研究對于藥物制劑的質量、安全性和有效性具有重要意義。技術實現要素：本申請在不斷地研究過程中，通過試驗摸索，意外的獲得了一種烏苯美司的δ晶型。該晶型顯示了良好的穩定性，同時具有更好的流動性，更適合工業化大生產所需。本申請提供了烏苯美司的一種新的δ晶型，使用Cu-ka射線進行X射線粉末測定，其圖譜具有下表所示的衍射角、晶面間距和相對強度：2θ衍射角的誤差為±0.20。該晶型的DSC圖譜在244.43℃℃有特征吸收峰，TGA顯示該結晶樣品加熱至110℃時失重0.05％。對該結晶樣品用KF法進行水分測定得出其含水量為0.02％。該晶型為新晶型，定義為烏苯美司δ晶型。更進一步的，該晶型具有基本如附圖1所示的X射線粉末衍射圖譜。本申請還公開了烏苯美司δ晶型的制備方法，具體包含以下步驟：(1)將烏苯美司溶解于乙醇和純化水的混合溶劑中，乙醇和純化水的用量比例為(1：4)～(3：1)，烏苯美司與混合溶劑的用量比例為1g：(20～60ml)，溶解溫度為40～60℃；(2)向步驟(1)所得溶液加入活性炭，活性炭與烏苯美司的用量比例為：(0.01～0.1)：1，脫色溫度40～70℃，脫色時間為0.5h～4h；(3)將步驟(2)所得溶液進行抽濾；(4)在180r/min～200r/min轉速攪拌下將步驟(3)所得濾液降溫析晶，析晶時間為2h～6h，析晶溫度為5～25℃，；(5)將步驟(4)所得溶液進行抽濾；(6)將步驟(5)所得濾餅置入真空烘箱里干燥4h～24h，溫度條件為50～80℃。其中，步驟(1)中，乙醇和純化水的用量比例優選為(1：2)～(2：1)，烏苯美司與混合溶劑的用量比例優選為1g：(30ml～40ml)，溶解溫度優選為50～60℃。其中，步驟(2)中，活性炭與烏苯美司的用量比例優選為：(0.02～0.05)：1，脫色溫度優選為50～60℃，脫色時間為優選為0.5h～2h。其中，步驟(4)中，攪拌轉速優選為180r/min～190r/min，析晶時間優選為3h～4h，析晶溫度優選為10～15℃；其中，步驟(6)中，所述干燥時間優選為8h～16h，所述溫度條件優選為70～80℃。采用本申請制備的烏苯美司δ晶型具有以下優點：1、通過溶解性、影響因素實驗顯示，本申請制備的δ晶型具有更好的溶解性和穩定性；通過粒度、休止角測試實驗顯示，本申請的晶型粒度較γ晶型更大，休止角較γ晶型更小，流動性更好。眾所周知，烏苯美司是難溶性藥物，粒徑的大小，流動性的優劣會對后期制劑產品的溶出以及最終質量產生較大影響，因此，本申請δ晶型相比現有晶型更具有制劑優勢。2、本申請晶型制備反應條件溫和、操作簡單，所用溶劑僅為乙醇和水，利于環保，回收利用方便，降低了試劑成本和能耗，而現有γ晶型的制備是先制備烏苯美司的α、β晶型，再通過α、β在有機溶劑中攪拌進行轉化得到，所用溶劑包括甲乙酮、二乙酮、乙酸乙酯、二惡烷等，這些溶劑毒性大，且對環境污染嚴重。3、通過對δ晶型制備過程中的各關鍵參數控制，本申請制備方法能夠顯著提高δ晶型的收率，并得到單一晶型，工藝重現性好，純度高(HPLC純度＞99.8％)，使得實現工業化生產條件可控，有利于大規模產業化。附圖說明圖1實施例1烏苯美司δ晶型的XRPD圖譜圖2實施例1烏苯美司δ晶型的HPLC圖譜圖3對比例烏苯美司γ晶型的XRPD圖譜圖4實施例1烏苯美司δ晶型的粒度分布圖圖5對比例烏苯美司γ晶型的粒度分布圖具體實施方式以下將結合實施例對本申請作進一步的詳細描述，本申請的實施例僅用于說明本申請的技術方案，并非限制本申請的實質和范圍。化合物的結構是通過核磁共振(1HNMR)來測定的。核磁共振(1HNMR)位移(δ)以百萬分之一(ppm)為單位給出；核磁共振(1HNMR)的測定是用BrukerAVANCE-400核磁儀進行，測定溶劑為六氘代二甲基亞砜(CDCl3)，內標為四甲基硅烷(TMS)。HPLC譜圖的測定采用安捷倫Agilent1260DAD型液相色譜儀進行。本申請所述的X射線粉末衍射(XRPD)的測定是采用遼寧丹東浩元DX-2700X粉末衍射儀進行采集，具體參數如下表：本申請所述的差示掃描量熱分析(DSC)和熱重分析(TGA)測定數據分別在TAQ2000差示掃描量熱儀和TAQ5000熱重分析儀上采集，儀器參數如下表所示：DSCTGA樣品盤鋁盤，壓蓋鉑金盤，敞開溫度范圍室溫-300℃室溫-350℃掃描速率10℃/分鐘10℃/分鐘保護氣體氮氣氮氣本申請粒度測試所使用的儀器為激光粒度分析儀LS-C(III)，由珠海歐美克儀器有限公司提供。本申請所述“室溫”是指溫度處于10～25℃之間。本申請中，烏苯美司HPLC純度用以下方法進行：(1)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱(5μm粒徑，柱溫25℃)；(2)流動相A：稀釋的0.1mol/L磷酸二氫鉀溶液(13→20)和乙腈混合物(V/V＝17/3)；流動相B：乙腈和稀釋的0.1mol/L的磷酸二氫鉀溶液(13→20)混合物(V/V＝2/1)；流動相A和B的洗脫梯度見下表：(3)檢測器：紫外吸收光度計(波長：220nm)；(4)流速：調整流速，使得烏苯美司的保留時間約為14分鐘；(5)運行時間：從溶劑峰開始計時，約為烏苯美司保留時間的5倍；(6)標準溶液：將30毫克烏苯美司溶解在10毫升的流動相A中，作為樣品溶液。吸取2毫升樣品溶液，加流動相A稀釋到200毫升；(7)進樣量：20μl，通過自動積分法測定樣品溶液按峰面積計算樣品中烏苯美司的純度。具體實施方式：實施例1烏苯美司δ晶型的制備將10g烏苯美司溶解于200ml乙醇和200ml純化水的混合溶劑中，溶解溫度為60℃，溶解完全后加入1.0g活性炭脫色1h，脫色溫度為60℃；負壓抽濾，所得濾液在180r/min轉速攪拌下降溫析晶，析晶溫度為10℃，析晶時間為3h；負壓抽濾，濾餅置入70℃真空烘箱里干燥8h，得白色固體粉末9.25g,收率92.5％，HPLC純度為99.89％，總雜0.11％，最大單雜0.06％。其核磁共振結果為：1HNMR(400MHz,DMSO)：δ7.30(s,5H),3.99(s,1H),3.89(s,1H),3.57(s,1H),2.92(m,2H),1.90(s,1H),1.60(s,2H),0.85(d,J＝4.7Hz,6H)13CNMR(101MHz,DMSO)：δ175.07(s,1C),171.48(s,1C),137.13(s,1C),129.50(s,2C),128.48(s,2C),126.64(s,1C),68.48(s,1C),55.20(s,1C),52.77(s,1C),35.43(s,1C),24.71(s,1C),23.23(s,1C),21.32(d,J＝14.7Hz,2C)該結晶樣品的DSC在244.43℃有特征吸收峰，TGA顯示該結晶樣品加熱至110℃時失重0.05％。對該結晶樣品用KF法進行水分測定得出其含水量為0.02％。根據以上結果得知，該晶型為新晶型，定義為烏苯美司δ晶型。使用Cu-ka射線進行X射線粉末測定，其圖譜具有下表所示衍射角、晶面間距和相對強度：2θ衍射角的誤差為±0.20。更進一步的，實施例1的烏苯美司δ晶型具有基本如附圖1所示的X射線粉末衍射圖譜。實施例2：烏苯美司δ晶型的制備將烏苯美司16g溶解于乙醇320ml和純化水160ml的混合溶劑中，溶解溫度為60℃，溶解完全后加活性炭1.28g脫色2h，脫色溫度為50℃；負壓抽濾，濾液在200r/min轉速攪拌下降溫析晶，析晶溫度為15℃，析晶時間為4h；負壓抽濾，濾餅置入75℃真空烘箱里干燥16h，得白色固體粉末14.6g,收率91.25％。HPLC純度為99.88％，總雜0.12％，最大單雜0.07％。其核磁數據、DSC數據、粉末衍射數據與實施例1數據基本保持一致。實施例3：烏苯美司δ晶型的制備將烏苯美司10g溶解于乙醇180ml和純化水320ml的混合溶劑中，溶解溫度為55℃，溶解完全后加活性炭1.0g脫色2h，脫色溫度為55℃；負壓抽濾，濾液在180r/min轉速攪拌下降溫析晶，析晶溫度為5℃，析晶時間為3h；負壓抽濾，濾餅置入80℃真空烘箱里干燥4h，得白色固體粉末8.96g,收率89.6％。HPLC純度為99.90％，總雜0.10％，最大單雜0.05％。其核磁數據、DSC數據、粉末衍射數據與實施例1數據基本保持一致。實施例4：烏苯美司δ晶型的制備將烏苯美司50g溶解于乙醇800ml和純化水1600ml的混合溶劑中，溶解溫度為50℃，溶解完全后加活性炭0.5g脫色0.5h脫色溫度為70℃；負壓抽濾，濾液在200r/min轉速攪拌下降溫析晶，析晶溫度為8℃，析晶時間為5h；負壓抽濾，濾餅置入80℃真空烘箱里干燥20h，得白色固體粉末44.35g,收率88.7％。HPLC純度為99.85％，總雜0.14％，最大單雜0.08％。其核磁數據、DSC數據、粉末衍射數據與實施例1數據基本保持一致。實施例5：烏苯美司δ晶型的制備將烏苯美司8g溶解于乙醇125ml和純化水180ml的混合溶劑中，溶解溫度為60℃，溶解完全后加活性炭0.8g脫色0.5h，脫色溫度為60℃；負壓抽濾，濾液在200r/min轉速攪拌下降溫析晶，析晶溫度為12℃，析晶時間為2h；負壓抽濾，濾餅置入60℃真空烘箱里干燥10h，得白色固體粉末7.46g，收率93.25％。HPLC純度為99.91％，總雜0.10％，最大單雜0.05％。其核磁數據、DSC數據、粉末衍射數據與實施例1數據基本保持一致。實施例6烏苯美司δ晶型的制備將烏苯美司10g溶解于乙醇100ml和純化水100ml的混合溶劑中，溶解溫度為60℃，溶解完全后加活性炭0.5g脫色4h，脫色溫度為40℃；負壓抽濾，濾液在,190r/min轉速攪拌下降溫析晶，析晶溫度為25℃，析晶時間為6h；負壓抽濾，濾餅置入50℃真空烘箱里干燥24h，得白色固體粉末9.53g,收率95.3％。HPLC純度為99.87％，總雜0.13％，最大單雜0.04％。其核磁數據、DSC數據、粉末衍射數據與實施例1數據基本保持一致。實施例7烏苯美司δ晶型的制備將烏苯美司10g溶解于乙醇100ml和純化水300ml的混合溶劑中，溶解溫度為60℃，溶解完全后加活性炭0.2g脫色4h，脫色溫度為40℃；負壓抽濾，濾液在190r/min轉速攪拌下降溫析晶，析晶溫度為25℃，析晶時間為6h；負壓抽濾，濾餅置入50℃真空烘箱里干燥24h，得白色固體粉末9.67g,收率96.7％。HPLC純度為99.86％，總雜0.14％，最大單雜0.06％。其核磁數據、DSC數據、粉末衍射數據與實施例1數據基本保持一致。對比例樣品：烏苯美司γ晶型的制備按照US4786754專利實施例1公開的內容，將通過等電點沉淀法獲得的烏苯美司α晶型100g，放入150℃烘箱里干燥3h，得到經XPRD驗證的烏苯美司γ晶型91g。其粉末衍射數據XPRD測試結果見下表和附圖3。試驗例1溶解性考察試驗為了考察本申請δ晶型與γ晶型在溶解上的區別，本申請分別在25℃、37℃條件下在pH＝1.0(0.1N)的鹽酸和pH＝4.5的乙酸-乙酸鈉緩沖溶液中，測定平衡溶解度(飽和溶液)，結果如下表1所示:表1溶解性試驗溶解性試驗結果表明，上述各種條件下，與對比γ晶型相比，本申請烏苯美司δ晶型溶解性均更好。試驗例2化學穩定性考察試驗將實施例1～5制備的烏苯美司δ晶型和對比例制備的烏苯美司γ晶型樣品分別放入潔凈的培養皿中敞口平攤放置，考察在高溫(60℃)、高濕(25℃、RH90％±5％)、強光(1.2×106Lux)條件下樣品的穩定性，考察取樣時間為5天和10天，放置10天。分別在5天和10天取樣測定，HPLC純度檢測結果見下表2：表2穩定性試驗純度測定結果穩定性考察試驗結果表明，在光照、高溫、高濕三種條件下，本申請烏苯美司δ晶型純度基本沒有發生變化，而對比例樣品的數據相對變化明顯，即說明本申請的晶型的穩定性較對比γ晶型更優異。試驗例3粒度測試和流動性評價為了比較本申請實施例1制備的δ晶型樣品和對比例γ晶型樣品在粒度分布和流動性的差異，申請人分別按照激光散色衍射法和注入法測定粒度分布和休止角，結果如表3所示：表3粒度、休止角測試結果從表3可以看出，本申請實施例1制備的δ晶型77.88％粒徑為32-65μm；而對比例γ晶型占比86.99％的粒徑為3-32μm，即本申請δ晶型粒度大于γ晶型。對于同一種物料，粒徑愈小，顆粒間相互粘附力越大、流動性越差。本申請δ晶型休止角為為38.66°，對比例樣品休止角為50.43°。同一物質，休止角越小，流動性越好。這兩個結果均證明，δ晶型與γ晶型相比具有更好的流動性。眾所周知，烏苯美司是難溶性藥物，對于難溶性藥物而言，原料藥的粒度、休止角會影響到后期制劑產品壓片、溶出效果等，最終會影響到產品質量。流動性越差，后期制劑過程中往往需要通過通過加入助流劑等來改善流動性。而對于藥品而言，在滿足藥品質量符合藥品注冊要求的前提下，輔料的用量應越少越好。因此，相比于對比例γ晶型而言，本申請的δ晶型粒度更大，休止角更小，在粉體流動性方面的優勢更明顯，后期制劑過程中部不需要刻意改善流動性，更具有制劑優勢，更適合用于工業化大生產。綜上所述，本申請提供了一種烏苯美司新的δ晶型，該晶型具有優異的穩定性，更好地溶解性；通過粒度、休止角測試實驗顯示，本申請的晶型粒度較γ晶型更大，休止角較γ晶型更小，即相對于γ晶型，本申請制備的晶型具有更好的流動性和制劑優勢。本申請制備反應條件溫和、操作簡單，工藝重現性好，純度高所用溶劑僅為乙醇和水，利于環保，回收利用方便，降低了試劑成本和能耗，與現有制備工藝需使用毒性大的有機溶劑相比，更環保，更適合工業化大生產。對于本領域的普通技術人員而言明顯的是，在不偏離本申請精神或者范圍的情況下，可對本申請化合物、組合物以及其制備方法進行的多種修飾和變化，因此，本申請的保護范圍涵蓋了對本申請進行的各種修飾和變化，只要所述修飾或變化處于權利要求和其等同實施方式所涵蓋的范圍內。當前第1頁1 2 3