專利名稱：用作pdgf－受體和/或lck酪氨酸激酶抑制劑的喹啉和喹喔啉化合物的制作方法
相關申請案介紹本申請是在1998年11月24日提交的第09/198,720號美國專利申請的延續，而該美國專利申請又是在1998年5月28日提交的第PCT/US98/11000號國際專利申請的延續，該國際專利申請是在1997年11月18日提交的第08/972,614號美國專利申請的延續，該美國專利申請是在1997年5月18日提交的、現在已經放棄的第08/864,455號美國專利申請的延續。
背景技術：
1.發明領域本發明涉及使用可用作蛋白質酪氨酸激酶抑制劑(TKIs)的喹啉/喹喔啉化合物來抑制細胞增殖和/或細胞基質產生和/或細胞運動(趨化性)和/或T細胞活化和增殖。
細胞信號傳導是通過相互作用系統介導的，包括細胞-細胞接觸或細胞-基質接觸或細胞外受體-底物接觸。細胞外信號經常通過酪氨酸激酶介導的磷酸化事件傳遞到細胞的其它部分，該磷酸化事件影響細胞膜結合的信號傳導復合物的下游底物蛋白。特定的受體-酶例如胰島素受體、表皮生長因子受體(EGF-R)或血小板衍生生長因子受體(PDGF-R)是參與細胞信號傳導的酪氨酸激酶的實例。對于有效的酶介導的、含有酪氨酸殘基的底物蛋白的磷酸化，酶的自身磷酸化是必需的。已知這些底物引起很多細胞事件，包括細胞增殖、細胞基質產生、細胞遷移和細胞凋亡(這只是其中的一小部分事件)。
眾所周知，有大量疾病是由于失控的細胞增殖或細胞基質過度生成或失控的編程性細胞死亡(細胞凋亡)引起的。這些疾病涉及多種細胞類型，并包括病癥例如白血病、癌癥、成膠質細胞瘤、牛皮癬、炎性疾病、骨疾病、纖維變性疾病、動脈粥樣硬化和冠狀動脈、股動脈或腎動脈的血管成形術后發生的再狹窄，或纖維增生性疾病例如關節炎、肺、腎和肝臟的纖維變性。此外，冠狀動脈旁路手術后會發生失控的細胞增殖。據信抑制酪氨酸激酶活性可用于控制失控的細胞增殖或細胞基質過度生成或失控的編程性細胞死亡(細胞凋亡)。
已知有一些酪氨酸激酶抑制劑可以與一類以上的酪氨酸激酶相互作用。而有一些酪氨酸激酶對于身體正常功能是至關重要的。例如，在大多數情況下并不希望抑制胰島素的作用。因此，能在有效地抑制胰島素受體激酶的濃度以下的濃度抑制PDGF-R酪氨酸激酶活性的化合物可以給特征是細胞增殖和/或細胞基質產生和/或細胞運動(趨化性)的疾病例如再狹窄的選擇性治療提供有價值的治療劑。
本發明涉及調節和/或抑制細胞信號傳導、細胞增殖、細胞外基質產生、趨化性，控制異常的細胞生長和細胞炎性反應。更具體來說，本發明涉及取代的喹喔啉化合物的應用，所述化合物能通過有效地抑制血小板衍生生長因子受體(PDGF-R)酪氨酸激酶活性和/或Lck酪氨酸激酶活性而選擇性地抑制分化、增殖或介質釋放。2.報道進展有許多文獻報道描述了對于酪氨酸激酶受體酶例如EGF-R或PDGF-R或非受體胞質酪氨酸激酶例如v-abl、p561ck或c-src有選擇性的酪氨酸激酶抑制劑。Spada和Myers(Exp.Opin.Ther.Patents 1995.，5(8).805)與Bridges(Exp.Opin.Ther.Patents 1995，5(12)，1245)的近期綜述分別總結了關于酪氨酸激酶抑制劑和EGF-R選擇性抑制劑的文獻。此外，Law和Lydon總結了酪氨酸激酶抑制劑的抗癌潛力(Emerging DrugsThe Prospect ForImproved Medicines 1996，241-260)。
已知的PDGF-R酪氨酸激酶活性抑制劑包括Maguire等人(J.Med.Chem.1994，37，2129)和Dolle等人(J.Med.Chem.1994，37，2627)報道的基于喹啉的抑制劑。最近下述作者報道了一類基于苯基氨基嘧啶的抑制劑Traxler等人在EP 564409中，和Zimmerman，J.；和Traxler，P.等人(Biorg.& Med.Chem.Lett.1996，6(11)，1221-1226)和Buchdunger，E.等人(Proc.Nat.Acad.Sci.1995，92，2558)。盡管在本領域內取得了這些進展，但是在這些類化合物當中，沒有一種被批準用來在人中治療增殖性疾病。
在整個科學文獻中，多因子再狹窄疾病與PDGF和PDGF-R之間的關系有廣泛的文獻報道。然而，最近關于肺纖維變性疾病的病因(Antoniades，H.N.；等人.J.Clin.Invest.1990，86，1055)、腎和肝臟纖維變性疾病的病因(Peterson，T.C.Hepatology，1993，17，486)的研究進展表明PDGF和PDGF-R可能也在這些疾病中起作用。例如，腎小球性腎炎是腎衰竭的主要原因，據鑒定在體外對于腎小球細胞，PDGF是有力的促細胞分裂劑，Shultz等人(Am.J.Physiol.1988，255，F674)和Floege等人(Clin.Exp.Immun.1991，86，334)證實了這一點。Thornton，S.C.等人(Clin.Exp.Immun.1991，86，79)等人報道，TNF-α和PDGF(得自類風濕性關節炎患者)是參與滑液細胞增殖的主要細胞因子。此外，已經鑒定出了過度表達PDGF蛋白或受體、并由此通過自分泌或旁分泌機制導致失控的癌細胞生長的具體腫瘤細胞類型(參見Silver，B.J.，BioFactors，1992，3，217)例如成膠質細胞瘤和卡波西肉瘤。由此，預計PDGF酪氨酸激酶抑制劑可用于治療多種表面上看來無關的、但是特征是在其病因中涉及PDGF和/或PDGF-R的人類疾病。
Hanke等人(Inflamm.Res.1995，44，357)與Bo1en和Brugge(Ann.Rev.Immunol.，1997，15，371)總結回顧了非受體酪氨酸激酶例如p56lck(下文中稱為″Lck″)在涉及T細胞活化和增殖的炎癥相關性病癥中的作用。這些炎性病癥包括變態反應、自身免疫性疾病、類風濕性關節炎和移植排斥。另一篇近期綜述總結了各類酪氨酸激酶抑制劑，包括具有Lck抑制活性的化合物(Groundwater等人，醫用化學進展(Progress in Medicinal Chemistry)，1996，33，233)。Lck酪氨酸激酶活性抑制劑包括通常是非選擇性酪氨酸激酶抑制劑的幾種天然產物，例如星形孢菌素、金雀異黃素、一些黃酮和制表菌素。虎刺醇是最近報道的低納摩爾Lck抑制劑(Faltynek，等人，Biochemistry，1995，34，12404)。Lck合成抑制劑的實例包括據報道具有低微摩爾-亞微摩爾活性的一系列二羥基異喹啉抑制劑(Burke，等人，J.Med.Chem.1993，36，425)；和Lck IC50為610微摩爾的活性差很多的喹啉衍生物。研究人員已經公開了在微摩爾-亞微摩爾低濃度下抑制Lck的一系列4-取代的喹唑啉(Myers等人，WO95/15758和Myers等人，Bioorg.Med.Chem.Lett.1997，7，417)。Pfizer的研究人員(Hanke等人，J.Biol.Chem.1996，271，695)公開了具有抗Lck和Fyn(另一Src家族激酶)的低毫微摩爾效力的稱為PP1和PP2的兩種具體吡唑并嘧啶抑制劑。沒有報道過任何關于基于喹啉或喹喔啉的化合物的Lck抑制劑。因此，預計基于喹啉或喹喔啉的Lck酪氨酸激酶活性抑制劑可用于治療多種表面上看來無關的、但是特征是在其病因中涉及Lck酪氨酸激酶信號傳導的人類病癥。
發明概述本發明涉及式I化合物、其N-氧化物、其水合物、其溶劑合物、其前藥、或其可藥用鹽 其中X是L1OH或L2Z2；L1是(CR3aR3b)r或(CR3aR3b)m-Z3-(CR3’aR3’b)n；L2是(CR3aR3b)p-Z4-(CR3’aR3’b)q或乙烯基；Z1是CH或N；Z2是任選取代的羥基環烷基、任選取代的羥基環烯基、任選取代的羥基雜環基或任選取代的羥基雜環烯基；Z3是O、NR4、S、SO或SO2；Z4是O、NR4、S、SO、SO2、或一個鍵；m是0或1；n是2或3，且n+m＝2或3；p和q獨立地為0、1、2、3或4，并且當Z4是一個鍵時，p+q＝0、1、2、3或4，當Z4不是一個鍵時，p+q＝0、1、2或3；r是2、3或4；R1a和R1b獨立地為任選取代的烷基、任選取代的芳基、任選取代的雜芳基、羥基、酰氧基、任選取代的烷氧基、任選取代的環烷氧基、任選取代的雜環氧基、任選取代的雜環基羰基氧基、任選取代的芳氧基、任選取代的雜芳氧基、氰基、R5R6N-或酰基R5N-，或者R1a和R1b當中一個是氫或鹵素，另一個是任選取代的烷基、任選取代的芳基、任選取代的雜芳基、羥基、酰氧基、任選取代的烷氧基、任選取代的環烷氧基、任選取代的雜環氧基、任選取代的雜環基羰基氧基、任選取代的芳氧基、任選取代的雜芳氧基、氰基、R5R6N-或酰基R5N-；R1c是氫、任選取代的烷基、任選取代的芳基、任選取代的雜芳基、羥基、酰氧基、任選取代的烷氧基、任選取代的環烷氧基、任選取代的雜環氧基、任選取代的雜環基羰基氧基、任選取代的芳氧基、任選取代的雜芳氧基、鹵素、氰基、R5R6N-或酰基R5N-；R3a、R3b、R3’a和R3’b獨立地為氫或烷基；R4是氫、烷基或酰基；且R5和R6獨立地為氫或烷基，或者R5和R6與它們所連接的氮原子一起形成氮雜雜環基。
本發明另一方面涉及含有藥物學有效量的式I化合物和可藥用載體的藥物組合物。本發明還涉及用于制備式I化合物的中間體，制備所述中間體和式I化合物的方法，以及式I化合物在治療患有或易患有涉及細胞分化、增殖、細胞外基質產生或介質釋放的疾病/病癥的患者中的應用。
發明詳述除非另有說明，否則在上文和整個本發明說明書中使用的下述術語具有下述含義定義“患者”包括人和其它哺乳動物。
“有效量”是指能有效抑制PDGF-R酪氨酸激酶活性和/或Lck酪氨酸激酶活性、從而產生期望療效的本發明化合物的量。
“烷基”是指具有約1-約10個碳原子的支鏈或直鏈脂族烴基。優選的烷基是具有約1-約6個碳原子的“低級烷基”。支鏈是指一個或多個低級烷基例如甲基、乙基或丙基接在直鏈烷基鏈上。烷基還可任選被烷氧基、鹵素、羧基、羥基或R5R6N-取代。烷基的實例包括甲基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、乙基、正丙基、異丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、戊基和己基。
“鏈烯基”是指含有碳-碳雙鍵、在鏈中具有約2-約10個碳原子的直鏈或支鏈脂族烴基。優選的鏈烯基在鏈中具有2-約6個碳原子；更優選在鏈中具有約2-約4個碳原子。支鏈是指一個或多個低級烷基例如甲基、乙基或丙基接在直鏈鏈烯基鏈上。“低級鏈烯基”是指在直鏈或支鏈的鏈中具有約2-約4個碳原子。鏈烯基可被烷氧羰基取代。鏈烯基的實例包括乙烯基、丙烯基、正丁烯基、異丁烯基、3-甲基丁-2-烯基、正戊烯基、庚烯基、辛烯基、環己基丁烯基和癸烯基。
“1，2-亞乙烯基(ethylenyl)”是指-CH＝CH-。
“環烷基”是指具有約3-約10個碳原子的非芳族單環或多環環系。環烷基可任選被一個或多個、優選1-3個、更優選1-2個下述“環烷基的取代基”取代烷基、羥基、酰氧基、烷氧基、鹵素、R5R6N-、酰基R5N-、羧基或R5R6NCO-取代基，更優選的取代基是烷基、羥基、酰氧基、烷氧基、和R5R6NCO-。此外，當環烷基被至少兩個羥基取代基取代時，則至少兩個羥基取代基可以與具有1-6個碳原子的醛或酮發生縮酮化或縮醛化作用，以形成相應的縮酮或縮醛。“羥基環烷基”是指HO-環烷基，其中該環烷基可如上所述被取代。當羥基環烷基是源自也被羥基取代的環烷基時，則這兩個羥基取代基可以與具有1-6個碳原子的醛或酮發生縮酮化或縮醛化作用，以形成相應的縮酮或縮醛。偕二醇的縮酮化導致形成螺稠合環系。優選的螺環烷基環是1，4-二氧雜螺[4，5]癸-8-基。優選的未取代或取代的單環環烷基環包括環戊基、羥基環戊基、氟環戊基、環己基、羥基環已基、羥基甲基環己基和環庚基；更優選羥基環己基和羥基環戊基。多環環烷基環的實例包括1-十氫化萘、金剛烷(1-或2-)基、[2.2.1]二環庚烷基(降冰片烷基)、羥基[2.2.1]二環庚烷基(羥基降冰片烷基)、[2.2.2]二環辛烷基、和羥基[2.2.2]二環辛烷基；更優選羥基[2.2.1]二環庚烷基(羥基降冰片烷基)、和羥基[2.2.2]二環辛烷基。
“環烯基”是指包含碳-碳雙鍵、并具有約3-約10個碳原子的非芳族單環或多環環系。環烯基可任選被一個或多個、優選1-3個、更優選1-2個如上所述的環烷基的取代基取代。“羥基環烯基”是指HO-環烯基，其中該環烯基可如上文所述被取代。優選的未取代或取代的單環環烯基環包括環戊烯基、環己烯基、羥基環戊烯基、羥基環己烯基和環庚烯基；更優選羥基環戊烯基和羥基環己烯基。優選的多環環烯基環包括[2.2.1]二環庚烯基(降冰片烯基)和[2.2.2]二環辛烯基。
“芳基”是指包含約6-約10個碳原子的芳族碳環基團。芳基的實例包括苯基或萘基，或者被一個或多個相同或不同的芳基的取代基取代的苯基或萘基，其中“芳基的取代基”包括氫、羥基、鹵素、烷基、烷氧基、羧基、烷氧羰基或Y1Y2NCO-，其中Y1和Y2獨立地為氫或烷基。優選的芳基的取代基包括氫、鹵素和烷氧基。
“雜芳基”是指約5元-約10元芳族單環或多環烴環系，其中環系中的一個或多個碳原子是非碳元素，例如氮、氧或硫。“雜芳基”也可以被一個或多個如上所述的“芳基的取代基”取代。雜芳基的實例包括取代的吡嗪基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、嘧啶基、異噁唑基、異噻唑基、噁唑基、噻唑基、吡唑基、呋咱基、吡咯基、咪唑并[2，1-b]噻唑基、苯并呋咱基、吲哚基、吖吲哚基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、喹啉基、咪唑基和異喹啉基。
“雜環基”是指約4元-約10元單環或多環環系，其中環系中的一個或多個原子是選自氮、氧和硫的非碳元素。雜環基可任選被一個或多個、優選1-3個、更優選1-2個如上所述的環烷基的取代基取代。“羥基雜環基”是指HO-雜環基，其中該雜環基可如上文所述被取代。“氮雜雜環基”是指其中至少有一個環原子是氮的上述雜環基。雜環基部分的實例包括奎寧環基(quinuclidyl)、硫雜己環、四氫吡喃基、四氫噻吩基、吡咯烷基、四氫呋喃基、或7-氧雜二環[2.2.1]庚烷基。
“雜環基羰基氧基”是指經由羰基氧基(-C(O)O-)連接在母體分子部分上的如本文所定義的雜環基。其中的雜環基部分可任選被一個或多個、優選1-3個、更優選一個如上所述的環烷基的取代基取代。代表性的雜環基羰基氧基是[1，4’]-聯哌啶基-1’-羰基氧基。
“雜環烯基”是指含有至少一個碳-碳或碳-氮雙鍵的如本文所定義的雜環基環系。雜環烯基可任選被一個或多個、優選1-3個、更優選1-2個如上所述的環烷基的取代基取代。“羥基雜環烯基”是指HO-雜環烯基，其中該雜環烯基可如上文所述被取代。“氮雜雜環烯基”是指其中至少有一個環原子是氮的上述雜環烯基。代表性的單環雜環烯基包括1，2，3，4-四氫吡啶、1，2-二氫吡啶基、1，4-二氫吡啶基、1，2，3，6-四氫吡啶、1，4，5，6-四氫嘧啶、3，4-二氫-2H-吡喃、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、2-咪唑啉基、2-吡唑啉基、四氫噻吩基、四氫噻喃基等。
“酰基”是指H-CO-或烷基-CO-，其中烷基如上文所定義。優選的酰基包含低級烷基。酰基的實例包括甲酰基、乙酰基、丙酰基、2-甲基丙酰基、丁酰基和棕櫚酰基。
“芳酰基”是指芳基-CO-，其中烷基如上文所定義。其實例包括苯甲酰基與1-萘甲酰基和2-萘甲酰基。
“烷氧基”是指烷基-O-，其中烷基如上文所定義。優選的烷氧基是具有約1-約6個碳原子的“低級烷氧基”。烷氧基可任選被一個或多個氨基、烷氧基、羧基、烷氧羰基、羧基芳基、氨基甲酰基或雜環基取代。烷氧基的實例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、庚氧基、2-(嗎啉-4-基)乙氧基、2-(乙氧基)乙氧基、2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙氧基、氨基甲酰基、N-甲基氨基甲酰基、N，N-二甲基氨基甲酰基、羧基甲氧基和甲氧基羰基甲氧基。
“環烷氧基”是指環烷基-O-，其中環烷基如上文所定義。環烷氧基的實例包括環戊氧基、環己氧基、羥基環戊氧基、和羥基環己氧基。
“雜環氧基”是指雜環基-O-，其中雜環基如上文所定義。雜環氧基的實例包括奎寧環氧基、硫雜己環氧基、四氫吡喃基氧基、四氫噻吩基氧基、吡咯烷基氧基、四氫呋喃基氧基、7-氧雜二環[2.2.1]庚烷氧基、羥基四氫呋吡喃基氧基、和羥基-7-氧雜二環[2.2.1]庚烷氧基。
“芳氧基”是指芳基-O-，其中芳基如上文所定義。
“雜芳氧基”是指雜芳基-O-，其中雜芳基如上文所定義。
“酰氧基”是指酰基-O-，其中酰基如上文所定義。
“羧基”是指HO(O)C-(羧酸)基。
“R5R6N-”是指取代或未取代的氨基，其中R5和R6如上文所定義。其實例包括氨基(H2N-)、甲基氨基、乙基甲基氨基、二甲基氨基和二乙基氨基。
“R5R6NCO-”是指取代或未取代的氨基甲酰基，其中R5和R6如上文所定義。其實例是氨基甲酰基(H2NCO-)、N-甲基氨基甲酰基(MeNHCO-)、和N，N-二甲基氨基甲酰基(Me2NCO-)。
“酰基R5N-”是指酰基氨基，其中R5和酰基如上文所定義。
“鹵素”是指氟、氯、溴、或碘。優選氟、氯或溴，更優選氟或氯。
“前藥”是指式I化合物這樣的形式，它們適于給患者施用，不引起不適的毒性、刺激、過敏反應等，并能有效地實現其預期應用，包括縮酮、酯和兩性離子形式。前藥在體內轉化成式I母體化合物，例如通過在血液中水解轉化成母體化合物。T.Higuchi和V.Stella，作為新的遞送系統的前藥(Pro-drues as Novel DeliverySystems)，the A.C.S.Symposium Series第14卷，和Edward B.Roche編，藥物設計中生物可逆轉的載體(Bioreversible Carriersin Drug Design)，American Pharmaceutical Association andPergamon Press，1987中對前藥作了充分論述，二者引入本發明以作參考。
“溶劑合物”是指本發明化合物與一個或多個溶劑分子形成的物理結合體。該物理結合體涉及不同程度的離子鍵和共價鍵，包括氫鍵。在某些情況下，例如當一個或多個溶劑分子摻入到結晶固體的晶格中時，溶劑合物能被分離出來。“溶劑合物”包括溶液相和可分離溶劑合物。溶劑合物的實例包括乙醇合物、甲醇合物等。“水合物”是其中溶劑分子是H2O的溶劑合物。
另外優選的本發明化合物是定義如下的式I化合物、其N-氧化物、其水合物、其溶劑合物、其前藥、或其可藥用鹽，其中X是L2Z2；L2是(CR3aR3b)p-Z4-(CR3’aR3’b)q；Z2是任選取代的羥基環烷基；Z3是O和NR4；p是0；q是0或1；R1a和R1b獨立地為任選取代的烷基、任選取代的烷氧基、任選取代的環烷氧基、或任選取代的雜環氧基，或者R1a和R1b當中一個是氫或鹵素，另一個是任選取代的烷基、任選取代的烷氧基、任選取代的環烷氧基、或任選取代的雜環氧基；R1c是氫；R3’a和R3’b獨立地為氫；且R4是氫。
另外優選的本發明化合物是這樣的式I化合物，其中R1a和R1b獨立地為任選被羥基取代的低級烷基、羥基、低級烷氧基、環烷氧基、雜環氧基，或者R1a和R1b當中一個是氫或鹵素，另一個是任選被羥基取代的低級烷基、羥基、低級烷氧基、環烷氧基、雜環氧基。
另外優選的本發明化合物是這樣的式I化合物，其中R1a和R1b獨立地為雜環基羰基氧基或任選取代的低級烷氧基；更優選低級烷氧基為甲氧基或乙氧基。
另外優選的本發明化合物是這樣的式I化合物，其中R1a和R1b為低級烷基；更優選低級烷基為甲基或乙基。
另外優選的本發明化合物是這樣的式I化合物，其中R1a和R1b當中一個是低級烷氧基，另一個是鹵素；更優選低級烷氧基為甲氧基或乙氧基，鹵素為氯或溴。
另外優選的本發明化合物是這樣的式I化合物，其中R1a和R1b當中一個是低級烷基，另一個是低級烷氧基；更優選低級烷氧基為甲氧基或乙氧基，低級烷基為甲基或乙基。
另外優選的本發明化合物是這樣的式I化合物，其中R1a和R1b當中一個是低級烷氧基，另一個是環烷氧基；更優選低級烷氧基為甲氧基或乙氧基，環烷氧基為環戊氧基或環己氧基。
另外優選的本發明化合物是這樣的式I化合物，其中R1a和R1b當中一個是氫，另一個是低級烷氧基、環烷氧基或雜環氧基；更優選低級烷氧基為甲氧基或乙氧基，環烷氧基為環戊氧基或環己氧基，且雜環氧基為呋喃基氧基。
另外優選的本發明化合物是這樣的式I化合物，其中R1a和R1b是低級烷氧基，其中所述低級烷氧基可任選被烷氧基、雜環基、羧基、烷氧基羰基或氨基甲酰基取代。
另外優選的本發明化合物是這樣的式I化合物，其中R1a和R1b當中一個是未取代的低級烷氧基，另一個是任選取代的雜環基羰基氧基或是被烷氧基、雜環基、羧基、烷氧基羰基或氨基甲酰基取代的低級烷氧基。
另外優選的本發明化合物是這樣的式I化合物，其中R1a和R1b當中一個是甲氧基，另一個是[1，4′]-聯哌啶-1′-基羰基氧基、2-(乙氧基)乙氧基、2-(4-嗎啉基)乙氧基、2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙氧基、羧基甲氧基、甲氧基羰基甲氧基、氨基羰基甲氧基、N-甲基氨基羰基甲氧基、或N，N-二甲基氨基羰基甲氧基。
另外優選的本發明化合物是這樣的式I化合物，其中R1c是氫、低級烷基或低級烷氧基；更優選低級烷氧基為甲氧基或乙氧基。
另外優選的本發明化合物是Z1為CH的式I化合物。
另外優選的本發明化合物是Z1為N的式I化合物。
另外優選的本發明化合物是Z2為任選取代的羥基環烷基的式I化合物。
另外優選的本發明化合物是p和q為0的式I化合物。
另外優選的本發明化合物是p+q＝1的式I化合物。
另外優選的本發明化合物是Z4為O的式I化合物。
另外優選的本發明化合物是Z4為O、且p和q為0的式I化合物。
另外優選的本發明化合物是Z4為O、且p+q＝1的式I化合物。
另外優選的本發明化合物是Z4為NR4的式I化合物。
另外優選的本發明化合物是Z4為NR4、且p和q為0的式I化合物。
另外優選的本發明化合物是Z4為NR4、且m+n＝1的式I化合物。
另外優選的本發明化合物是Z4為S的式I化合物。
另外優選的本發明化合物是Z4為S、且p和q為0的式I化合物。
另外優選的本發明化合物是Z4為S、且p+q＝1的式I化合物。
另外優選的本發明化合物是Z2是(羥基或烷基)取代的羥基環烷基、更優選為(低級烷基)羥基環烷基的式I化合物。
優選的本發明化合物選自反式-4-(7-氯-6-甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環己醇；反式-4-(6-氯-7-甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環己醇；反式-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環己醇；順式-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環己醇；(2內，5外)-5-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-二環[2.2.1]庚-2-醇；(2外，5內)-5-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-二環[2.2.1]庚-2-醇；(2內，3外，5外)-5-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-二環[2.2.1]庚-2，3-二醇；順式-2-(6-甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環戊醇；反式-2-(6-甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環戊醇；反式-4-(6-甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環己醇；[3aR，4S，6R，6aS]-6-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2，2-二甲基四氫環戊二烯并[1，3]間二氧雜環戊烯-4-甲酸乙基酰胺；2-(1，4-二氧雜螺[4，5]癸-8-基氧基)-6，7-二甲氧基喹喔啉；4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氧基甲基)環己醇；3-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氧基)環己醇；4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氧基)環己醇；5-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氧基)-二環[2.2.1]庚烷-2，3-二醇；(2外，3外，5外)-5-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-二環[2.2.1]庚烷-2，3-二醇；乙酸順式-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氧基)環己基酯；順式-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氧基)環己醇；二甲基氨基甲酸4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氧基)環己基酯；反式-4-(6，7-二甲氧基-4-氧基喹喔啉-2-基氨基)環己醇；乙酸反式-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環己基酯；(2外，5外)-5-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-二環[2.2.1]庚-2-醇；(2內，5外)-5-(6，7-二甲氧基喹啉-2-基氨基)-二環[2.2.1]庚-2-醇；(2外，6外)-6-(6，7-二甲氧基喹啉-2-基氨基)-二環[2.2.1]庚-2-醇；4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇；(2反式，4反式)-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇；(+)-(2反式，4反式)-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇；(-)-(2反式，4反式)-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇；(2反式，4反式)-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇；(2順式，4順式)-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇；(2順式，4反式)-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇；4-(6，7-二甲基喹喔啉-2-基氨基)環己醇；和(1S，2R，4S，5R)-5-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-二環[2.2.1]庚-2-醇。
更優選的化合物如下反式-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環己醇；順式-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環己醇；4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇；(-)-(2反式，4反式)-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇；(2外，5外)-5-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-二環[2.2.1]庚-2-醇；反式-4-(7-氯-6-甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環己醇；和4-(6，7-二甲氧基喹啉-3-基氨基)環己醇；和(1S，2R，4S，5R)-5-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-二環[2.2.1]庚-2-醇。
應當理解，本發明包括本文特定和優選組的所有適當組合。
本發明化合物可通過使用文獻中已知的方法由已知化合物或易于制得的中間體制得。一般方法的實例如下。
此外，式I化合物是依據下述反應方案I-X制得的，其中各變量如上所述，但是本領域技術人員可理解的與所述方法不相容的變量除外。
反應方案I 反應方案II 反應方案III 反應方案IV 反應方案V
反應方案VI 其中R1a、R1b和R1c當中至少有一個是低級其中R1a、R1b和R1c當中至少有一個如本文烷氧基，且X’’’是L1OP’或L2Z2，其中P’ 所定義，且X是L1OP’，然后除去保護基是適于在堿和烷化劑存在下保護羥基部 P’以生成相應的OH部分分的保護基在反應方案VI、VII和VIII中，R代表如本文所定義的R1a、R1b或R1c的前體基團，這樣在反應方案VI、VII和VIII中所描述的條件下，RBr、ROH、或RCOCl與芳羥基的反應導致形成R1a、R1b或R1c。代表性的RBr包括溴乙酸和溴乙酸甲酯與溴乙酸乙酯。代表性的ROH包括2-乙氧基乙醇、2-(4-嗎啉基)乙醇和3-(4-甲基哌嗪基)丙醇。代表性的RCOCl是[1，4’]-聯哌啶-1’-基羰基氯。
反應方案VII
反應方案VIII
反應方案X I.一般方法1.將2-氯取代的喹喔啉與胺或苯胺偶聯將2-氯-6，7-二甲氧基喹喔啉(1當量)與胺(約1-約5當量)的混合物在約160-約180℃加熱約3小時至過夜。將該深棕色殘余物溶于甲醇/二氯甲烷(0％-10％)中，并通過硅膠色譜純化，用己烷/乙酸乙酯或甲醇/二氯甲烷(0％-100％)洗脫，獲得了所需產物。可通過在甲醇、二氯甲烷或甲醇/水中重結晶來將目的產物進一步純化。2.將2-氯取代的喹喔啉與醇或苯酚偶聯將醇或硫醇(1當量)與氫化鈉(約1-約3當量)在無水DMF/THF(0％-50％)中的懸浮液回流1小時，然后加入2-氯-6，7-二甲氧基喹喔啉(1當量)。將所得混合物回流約1-約4小時。將該懸浮液中和至約pH5-8，并在二氯甲烷與鹽水之間分配。將二氯甲烷濃縮后，通過硅膠色譜純化殘余物，用己烷/乙酸乙酯或甲醇/二氯甲烷(0％-100％)洗脫，獲得了所需產物。3.將氨基喹啉與醛或酮進行還原胺化反應將適當取代的3-氨基喹啉(1當量)與1當量合適的醛或酮在甲醇(或另一合適的溶劑混合物)中攪拌直至TLC表明亞胺形成已完全。加入過量NaCNBH4或NaBH4、或另一種合適的還原劑，將該混合物攪拌直至TLC表明亞胺中間體已完全消耗。將該混合物濃縮，通過硅膠色譜純化殘余物，用己烷/乙酸乙酯(0-100％)或氯仿/甲醇(0-20％)洗脫，獲得了所需產物。4.將3-氨基取代的喹啉與溴苯基化合物偶聯在惰性氣氛例如氬氣氛下，將適當取代的3-氨基喹啉(1當量)與～1.4當量強堿例如叔丁醇鈉、1當量合適的溴苯基化合物、和催化量的2，2’-二(二苯基膦基)-1，1’-聯萘(S-BINAP)與二(二亞芐基丙酮)鈀(Pd(dba)2)在惰性有機溶劑例如甲苯中攪拌混合，并在約80℃加熱過夜。將該混合物冷卻，用溶劑例如乙醚稀釋，過濾，濃縮并通過色譜法純化，用50％EtOAc/己烷洗脫，獲得了所需產物。5.由3-羥基取代的喹啉通過Mitsunobu條件形成醚用各1當量的所需醇、三苯基膦和偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)或適當等同物處理適當取代的羥基喹喔啉的THF溶液(在約0-約25℃)。通過TLC監測反應進程，反應完全后(約1-約24小時)，將該混合物濃縮，通過硅膠色譜純化殘余物，獲得了所需產物。6.低級烷氧基取代的喹啉或喹喔啉的脫烷基化、和隨后的烷基化用過量乙硫醇鈉(通常約2或更多當量)處理在DMF中的適當低級烷氧基取代的喹啉或喹喔啉(1當量)，在攪拌下將該反應混合物加熱約1-約24小時。將該混合物在水與乙酸乙酯之間分配。萃取，如果需要的話然后進行色譜純化，獲得了相應的所需羥基取代的喹啉或喹喔啉產物。
可用如上所詳述的Mitsunobu反應條件將所得羥基取代的喹啉或喹喔啉產物烷基化。或者，采用本領域眾所周知的方法，在合適的溶劑中使用NaH或另一適當堿，用活性烷基鹵或芐基鹵進行簡單烷基化，以生成所需烷基化產物。7.將喹啉或喹喔啉中的氮氧化成相應的N-氧化物式(I)喹啉或喹喔啉化合物中的亞胺(＝N-)部分可轉化成該亞胺部分被氧化成N-氧化物的相應化合物，優選通過與過酸例如在乙酸中的過乙酸或在惰性溶劑例如二氯甲烷中的間氯過苯甲酸于約室溫-回流溫度、優選提高的溫度下反應來進行氧化。
游離堿或游離酸或可藥用鹽形式的本發明化合物都是有用的。所有這些形式都在本發明范圍內。
當本發明化合物被堿性部分取代時，可形成酸加成鹽，并且其只是更便于使用的形式；實際上，使用該鹽形式本質上相當于使用游離堿形式。可用于制備酸加成鹽的酸優選包括當與游離堿合并時能生成可藥用鹽的酸，可藥用鹽是表示在該鹽的藥用劑量下其陰離子對患者沒有毒性，這樣該游離堿所固有的對PDGF的有益抑制作用就不被陰離子的副作用所失效。雖然所述堿性化合物的可藥用鹽是優選的，但是所有酸加成鹽都可用作游離堿形式的來源，即使特定的鹽自身僅作為中間產物而需要，例如形成該鹽僅是為了純化和鑒定，或者該鹽用作通過離子交換方法制備可藥用鹽的中間體。在本發明范圍內的可藥用鹽是用下述酸形成的鹽無機酸例如鹽酸、硫酸、磷酸、和氨基磺酸；和有機酸例如乙酸、檸檬酸、乳酸、酒石酸、丙二酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、對甲苯磺酸、環己基氨基磺酸、奎尼酸等。相應的酸加成鹽包含下述鹽氫鹵酸鹽例如鹽酸鹽和氫溴酸鹽，硫酸鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、氨基磺酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、丙二酸鹽、草酸鹽、水楊酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、亞甲基二-β-羥基萘甲酸鹽、2，5-二羥基苯甲酸鹽、甲磺酸鹽、羥乙基磺酸鹽和二對甲苯甲酰基酒石酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、環己基氨基磺酸鹽和奎尼酸鹽。
依據本發明另一方面，本發明化合物的酸加成鹽可通過使用已知方法或對已知方法作改動將游離堿與合適的酸反應而制得。例如，本發明化合物的酸加成鹽可這樣制得將游離堿溶于含有適當酸的水溶液或含水醇溶液或其它合適溶劑中，并通過蒸發該溶液分離出所生成的鹽；或者將游離堿與酸在有機溶劑中反應，在這種情況下，鹽直接分離出來，或者可通過將溶液濃縮來獲得鹽。
通過使用已知方法或對已知方法作改動，可從酸加成鹽再生出本發明化合物。例如，本發明母化合物可通過用堿例如碳酸氫鈉水溶液或氨水溶液處理其酸加成鹽而從中再生出來。
當本發明化合物被酸性部分取代時，可形成堿加成鹽，并且其只是更便于使用的形式；實際上，使用該鹽形式本質上相當于使用游離酸形式。可用于制備堿加成鹽的堿優選包括當與游離酸合并時能生成可藥用鹽的堿，可藥用鹽是表示在該鹽的藥用劑量下其陽離子對動物機體沒有毒性，這樣該游離酸所固有的對PDGF的有益抑制作用就不被陽離子的副作用所失效。在本發明范圍內的可藥用鹽包括例如堿金屬鹽和堿土金屬鹽，是用下述堿形成的鹽氫化鈉、氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣、氫氧化鋁、氫氧化鋰、氫氧化鎂、氫氧化鋅、氨、三甲胺、三乙胺、乙二胺、N-甲基葡糖胺、賴氨酸、精氨酸、鳥氨酸、膽堿、N，N’-二芐基乙二胺、氯普魯卡因、二乙醇胺、普魯卡因、N-芐基苯乙胺、二乙胺、哌嗪、三(羥基甲基)氨基甲烷、氫氧化四甲基銨等。
本發明化合物的金屬鹽可通過將游離酸形式的本發明化合物與所選金屬的氫化物、氫氧化物、碳酸鹽或類似活性化合物在含水溶劑或有機溶劑中接觸來制得。所用的含水溶劑可以是水，或者可以是水與有機溶劑的混合物，所述有機溶劑優選為醇例如甲醇或乙醇，酮例如丙酮，脂族醚例如四氫呋喃，或酯例如乙酸乙酯。這樣的反應通常是在室溫進行的，但是如果需要的話，可以在加熱條件下進行。
本發明化合物的胺鹽可通過將游離酸形式的本發明化合物與胺在含水溶劑或有機溶劑中接觸來制得。合適的含水溶劑包括水以及水與下述有機溶劑的混合物醇例如甲醇或乙醇，醚例如四氫呋喃，腈例如乙腈，或酮例如丙酮。氨基酸鹽可通過類似方法制得。
通過使用已知方法或對已知方法作改動，可從堿加成鹽再生出本發明化合物。例如，本發明母體化合物可通過用酸例如鹽酸處理其堿加成鹽而從中再生出來。
除了用作活性化合物以外，本發明化合物的鹽還可用于純化本發明化合物，例如，通過采用本領域技術人員眾所周知的技術，利用該鹽與母體化合物、副產物和/或原料之間的溶解度差異來進行純化。
本發明化合物可含有不對稱中心。這些不對稱中心可獨立地呈R或S構型。一些式I化合物可能表現出幾何異構現象，這對于本領域技術人員來說也是顯而易見的。幾何異構體包括順式和反式形式的本發明化合物、即在環系上有鏈烯基部分或取代基的化合物。此外，二環環系包括內型和外型異構體。本發明包含單獨的幾何異構體、立體異構體、對映體和它們的混合物。
通過使用已知方法或對已知方法作改動，例如使用色譜技術和重結晶技術，可從其混合物中分離出這樣的異構體，或者可用其中間體的適當異構體分開地制備它們，例如通過使用或改變本文所述方法來進行制備。
原料和中間體是通過使用已知方法或對已知方法作改動，例如使用在參考實施例中描述的方法或其明顯的化學等同方法，或者通過依據本發明描述的方法制得的。
描述本發明化合物制備的下述示例性實施例進一步舉例說明了本發明，但不是對本發明的限制。
此外，下述實施例是用于合成本發明化合物的代表性方法。實施例1 3-環己氧基-6，7-二甲氧基喹啉在0℃，向THF溶液(30mL)中加入3-羥基-6，7-二甲氧基喹啉(0.237g，1.15mmol)、環己醇(0.347g，3.46mmol)、Ph3P(0.908g，3.46mmol)。滴加偶氮二甲酸二乙酯直至該溶液保持深紅色為止(0.663g，3.81mmol)。4小時后，將該溶液濃縮，通過色譜法純化殘余物(50％EtOAc的己烷溶液)。用異丙醇/己烷將該產物重結晶，獲得了其鹽酸鹽，為白色固體(m.p.229-232℃，分解溫度)。實施例2 2-苯氨基-6-異丙氧基喹喔啉鹽酸鹽在氬氣氛下，向NaH(0.033g，0.84mmol)加入1mL DMF。滴加在1.5mL DMF中的2-苯氨基-6-喹喔啉醇(0.1g，0.42mmol)。30分鐘后，滴加2-溴丙烷，將該溶液在50℃加熱1.5小時。用水處理該冷卻的反應混合物，在EtOAc與水之間分配，依次用H2O(3×)、鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，并濃縮。通過色譜法純化殘余物(30％EtOAc/己烷)，獲得了0.05g二烷基化產物和0.1g本標題化合物。將IPA(異丙醇)/HCl加到該游離堿的Et2O/IPA溶液中以制得鹽酸鹽(m.p.205-210℃，分解溫度)，將其用作鹽酸鹽分析樣本。元素分析C17H17N3O·HCl計算值C，64.65；H，5.74；N，13.31；實測值C，64.51；H，5.90；N，13.09。實施例3 2-苯氨基-6-甲氧基喹喔啉鹽酸鹽在氬氣氛下，向2-氯-6-甲氧基喹喔啉(0.93g，4.8mmol)中加入苯胺(1.3mL，14.3mmol)。將該反應混合物在120℃加熱2小時，然后在150℃加熱1.5小時。將該混合物冷卻，并加入二氯甲烷。將所得懸浮液攪拌，濾出有機固體，用CH2Cl2/Et2O洗滌，然后在水中劇烈攪拌40分鐘，過濾，并用Et2O洗滌，獲得了亮黃色固體。實施例4 2-苯氨基-6-喹喔啉醇按照Feutrill，G.I.；Mirrington，R.N.Tet.Lett.1970，1327的方法，將芳基甲基醚轉化成苯酚衍生物。在氬氣氛下，向DMF中的2-苯氨基-6-甲氧基喹喔啉(0.27g，1.07mmol)中加入乙硫醇鈉(0.19g，2mmol)。將該反應混合物在110℃加熱過夜。將該混合物濃縮，并在乙酸乙酯與水/5％酒石酸之間分配，這樣水層的pH大約為4。依次用水(4×)、2.5％氫氧化鈉(4×)洗滌有機層。將堿性層合并，用乙酸乙酯(2×)洗滌，用5％酒石酸再酸化，并用乙酸乙酯洗滌多次。將有機層合并，用鹽水洗滌，干燥(硫酸鈉)并濃縮。通過色譜法純化獲得的固體(50％EtOAc/己烷)。用乙醚將產物研制，獲得了黃色粉末(m.p.211-213℃)，將其用作分析樣本。元素分析C14H11N3O計算值C，70.88；H，4.67；N，17.71；實測值C，70.64；H，4.85；N，17.58。實施例5 苯基-[6-(四氫呋喃-3-(R)-基氧基)喹喔啉-2-基]胺在0℃、氬氣氛下，向THF溶液中加入2-苯氨基-6-喹喔啉醇(0.23g，0.97mmol)、(S)-(+)-3-羥基四氫呋喃(0.086mL，1.3mmol)、和三苯基膦(0.31g，1.2mmol)。滴加DEAD(0.18mL，1.2mmol)。將該反應混合物升至室溫，并攪拌1.5小時。將該混合物濃縮，并在乙酸乙酯和水之間分配。依次用水和鹽水洗滌有機層，干燥(MgSO4)，并濃縮。通過色譜法純化所得黃色油狀物(50％EtOAc/己烷)，并置于Et2O/IPA。滴加HCl/Et2O溶液，將所得紅橙色粉末真空干燥。通過在含有洗滌過的(3×H2O、5×MeOH)堿離子交換樹脂的甲醇中攪拌來除去所得粉末中的堿。將該混合物攪拌30分鐘，過濾，濃縮，并用EtOAc/己烷重結晶，分兩批獲得了產物(m.p.173-175℃)。元素分析C18H17N3O2計算值C，70.35；H，5.57；N，13.67；實測值C，70.19；H，5.60；N，13.66。實施例6 2，7-二環己氧基-6-甲氧基喹喔啉在氬氣氛下，向NaH(0.32g，8mmol)的DMF溶液(5mL)中滴加環己醇(0.7mL，6.7mmol)。將該混合物在室溫攪拌25分鐘，然后滴加2-氯-6，7二甲氧基喹喔啉。將該反應在室溫攪拌15分鐘，在90℃攪拌2小時，在110℃攪拌1小時。將該混合物冷卻，用水處理，并在EtOAc/H2O之間分配。用水和鹽水洗滌有機層，干燥(MgSO4)，并通過色譜法純化(10％EtOAc/己烷)，獲得了蠟狀白色固體(m.p.75-78℃)。元素分析C21H28N2O3計算值C，70.76；H，7.92；N，7.86；實測值C，70.81；H，7.79；N，7.70。實施例7 環己基-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基甲基)胺向0.067M 6，7-二甲氧基-2-喹喔啉甲醛在2∶1 MeOH/1，2-二氯乙烷(7.5mL，0.5mmol)內的溶液中加入環己基胺(0.11mL，0.9mmol)。將該反應在室溫攪拌過夜，然后加入NaBH4(0.038g，1mmol)，并將該反應混合物攪拌過夜。然后將該混合物濃縮，并通過色譜法純化(50％EtOAc/己烷-約5％MeOH在50％EtOAc/己烷中的溶液)。將所得油狀物溶于EtOAc/己烷，并用HCl的EtOH溶液處理。將所得溶液濃縮，異丙醇研制所得固體，在60℃真空干燥，獲得了白色固體(m.p.185-190℃，分解溫度)。元素分析C17H23N3O2·HCl計算值C，60.44；H，7.16；N，12.44；實測值C，60.48；H，6.88；N，12.07。實施例8 (6，7-二甲氧基喹啉-3-基)-反式-(3-(R)-甲基環己基)胺和(6，7-二甲氧基喹啉-3-基)-順式-(3-(R)-甲基環己基)胺按照與上述制備類似的方式，用游離堿形式的3-氨基-6，7-二甲氧基喹啉(0.32g，1.6mmol)與(R)-(+)-3-甲基環己酮(0.23mL，1.9mmol)進行反應。通過色譜法純化所得產物混合物(70％EtOAc/己烷)，并用EtOAc/己烷重結晶，獲得了白色固體(1∶1的順式和反式異構體混合物)(m.p.153-160℃)。元素分析C18H24N2O2計算值C，71.97；H，8.05；N，9.33；實測值C，72.12；H，7.85；N，9.29。實施例9 3-(6，7-二甲氧基喹啉-3-基氨基)-2，2-二甲基丙-1-醇按照與實施例7中的制備相類似的方式進行反應。在氬氣氛下，向4分子篩粉末(0.35g)的MeOH溶液中加入3-氨基-6，7-二甲氧基喹啉(0.32g，1.6mmol)和2，2-二甲基-3-羥基丙醛(0.19g，1.9mmol)。通過色譜法純化該產物混合物(3％MeOH/CHCl3)，獲得了0.10g物質，將其在CH2Cl2/10％NaOH之間分配。依次用10％NaOH、H2O、和鹽水洗滌有機層，然后干燥(MgSO4)，并用EtOAc/己烷重結晶，獲得了淺橙色固體(m.p.170-173.5℃)元素分析C16H22N2O3計算值C，66.18；H，7.64；N，9.65；實測值C，66.11；H，7.49；N，9.33。實施例10 環己基-(6-甲氧基-7-嗎啉-4-基-喹喔啉-2-基)胺該制備是通過將Buchwald，等人在J.Am.Chem.Soc.，1996，118，7215中描述的方法作適當改動而進行的。在氬氣氛下，向2-環己基氨基-6-甲氧基-7-溴喹喔啉(0.1g，0.3mmol)的甲苯溶液中加入嗎啉(0.1g，0.3mmol)、叔丁醇鈉(0.04g，0.42mmol)、S-(-)-BINAP(約0.001g)、和二(二亞芐基丙酮)鈀(約0.001g)。將該反應混合物在80℃加熱過夜。將該混合物冷卻，用乙醚稀釋，過濾，濃縮，并通過色譜法純化(50％EtOAc/己烷)。用EtOAc/己烷將產物重結晶，分兩批獲得了黃色固體(m.p.194-196℃)。元素分析C19H26N4O2計算值C，66.64；H，7.65；N，16.36；實測值C，66.60；H，7.60；N，16.51。實施例11 反式-4-(7-氯-6-甲氧基喹喔啉-2-氨基)環己醇和反式-4-(6-氯-7-甲氧基喹喔啉-2-基-氨基)環己醇在氬氣氛下，向裝配有迪安-斯達克分水器和冷凝器的反應燒瓶中加入6∶1 2，7-二氯-6-甲氧基喹喔啉2，6-二氯-7-甲氧基喹喔啉(0.30g，1.3mmol)和反式-4-氨基環己醇(0.35g，3mmol)。將該反應混合物在170℃加熱約10小時，然后濃縮，進行2次色譜分離(7％MeOH/CHCl3，然后是5％MeOH/CHCl3)。用EtOAc/己烷將產物重結晶，獲得了淺黃色固體(m.p.144-147℃)。元素分析C19H26N4O2·0.4H2O計算值C，57.20；H，6.02；N，13.34；實測值C，57.21；H，5.97；N，13.08。1H NMR分析表明產物是2∶1的反式-4-(7-氯-6-甲氧基喹喔啉-2-氨基)環己醇反式-4-(6-氯-7-甲氧基喹喔啉-2-基-氨基)環己醇混合物。實施例12 反式-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環己醇將反式-4-氨基環己醇(0.11g，2當量)與2-氯-6，7-二甲氧基喹喔啉(0.1g，1當量)混合，并在160-180℃加熱4-8小時。將該深棕色懸浮液過濾并濃縮。通過快速柱色譜法純化殘余物，用3％甲醇/二氯甲烷洗脫，獲得了產物，為黃色粉末，熔點為119-123℃。元素分析C16H21N3O3計算值C，62.33；H，7.05；N，13.63；實測值C，62.35；H，7.09；N，13.18。
可通過下述方法將產物重結晶。將0.2g黃色粉末在2.5mL水與1.25mL甲醇的混合物中回流以獲得澄清的橙色溶液。將該熱溶液靜止，并逐漸冷卻。通過過濾收集橙色針狀結晶，并在高度真空下干燥，獲得了黃色固體(m.p.119-120℃)。
或者，按如下所述制備本標題化合物的鹽酸鹽在0℃，向反式-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環己醇的異丙醇溶液中加入HCl溶液。將該混合物攪拌15分鐘，然后過濾。將所收集的固體在高度真空下干燥，獲得了反式-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環己醇鹽酸鹽。元素分析C16H22ClN3O3·1.2H2O計算值C，53.19；H，6.80；N，11.63；Cl，9.81；實測值C，53.14；H，6.85；N，11.24；Cl，10.28。
或者，按如下所述制備本標題化合物的硫酸鹽按照常規操作，將反式-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環己醇溶于丙酮或另一適當有機溶劑中，并按照需要溫熱至45℃。在快速攪拌下向所得溶液中小心地加入硫酸水溶液(1當量，1M溶液)。收集由此形成的鹽并干燥，以＞80％的產率獲得了硫酸鹽。
使用適當原料通過類似方法制備下述化合物。3-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)丙-1-醇(m.p.154.5-156℃).元素分析C13H17N3O3計算值C，59.30；H，6.51；N，15.96；實測值C，59.30；H，6.46；N，15.87。3-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2，2-二甲基丙-1-醇(m.p.174-176.5℃).元素分析C15H21N3O3計算值C，61.84；H，7.27；N，14.42；實測值C，61.67；H，7.22；N，14.22。4-(6，7-二甲基喹喔啉-2-基氨基)環己醇(m.p.168-171℃).元素分析C16H21N3O計算值C，70.82；H，7.80；N，15.48；實測值C，70.76；H，7.90；N，15.20。實施例13 順式-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環己醇將順式-4-氨基環己醇(400mg，3.48mmol)和2-氯-6，7二甲氧基喹喔啉(450mg，2mmol)在5mL乙醇中的混合物置于密封管中，然后在180℃加熱3小時。通過硅膠色譜純化該深棕色混合物，用乙酸乙酯洗脫，獲得了所需產物(m.p.65-67℃)。元素分析C16H21N3O3·0.6H2O計算值C，61.17；H，7.12；N，13.37；實測值C，61.22；H，7.19；N，12.19。實施例14 (±)-二環[2.2.1]庚-2-基-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基)胺方法A將2-氯-6，7-二甲氧基喹喔啉(5g，22.3mmol)與(±)-外降冰片烷基-2-胺(10g，90mmol)的混合物在160-180℃加熱過夜。將該深棕色殘余物溶于200mL二氯甲烷中，并用1N NaOH(50mL)洗滌。用硫酸鎂將有機層干燥，然后過濾。濃縮后，通過硅膠色譜純化殘余物，用己烷/乙酸乙酯(80％)洗脫，獲得了所需產物，為黃色固體，可將其在甲醇中重結晶。
方法B將2-氯-6，7-二甲氧基喹喔啉(9g，40.1mmol)與(±)-外降冰片烷基-2-胺(5.77g，52mmol)、叔丁醇鈉(4.22g，44mmol)、2，2’-二(二苯基膦基)-1，1’-聯萘(BINAP，120mg)以及二(二亞芐基丙酮)鈀(Pd(dba)2，40mg)在80mL甲苯中的混合物在80℃加熱8小時。加入另一部分BINAP(60mg)和Pd(dba)2(20mg)，將該混合物在100℃加熱過夜。用200mL二氯甲烷稀釋后，用1NNaOH(100mL)洗滌該反應混合物。用硫酸鎂將有機層干燥并過濾。濃縮后，通過硅膠色譜法純化殘余物，用己烷/乙酸乙酯(80％)洗脫，獲得了所需產物，為淺黃色固體(m.p.188-189℃)。元素分析C17H21N3O3計算值C，68.20；H，7.07；N，14.04；實測值C，68.18；H.7.03；N，14.03。
用適當原料以類似方法(方法A)制備下述化合物外-二環[2.2.1]庚-5-烯-2-基-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基)胺(m.p.175-177℃)元素分析C17H19N3O2·0.4H2O計算值C，60.94；H，6.56；N，13.78；實測值C，66.98；H，6.62；N，12.73。(2內，5外)-5-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)二環[2.2.1]庚-2-醇(m.p.90-93℃).(2外，5外)-5-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)二環[2.2.1]庚-2-醇(m.p.97-100℃).(2內，3外，5外)-5-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)二環[2.2.1]庚-2，3-二醇(m.p.220-222℃).元素分析C17H21N3O4·0.2H2O計算值C，60.96；H，6.44；N，12.54；實測值C，60.93；H，6.06；N，11.60。環己基-(6，8-二甲基喹喔啉-2-基)胺[MS m/z255(M+)]元素分析C16H21N3計算值C，75.26；H，8.29；N，16.46；實測值C，75.08；H，8.28；N，15.86。順式/反式-2-(6-甲氧基-喹喔啉-2-基氨基)環戊醇(m.p.137-139℃).元素分析C14H17N3O2計算值C，64.85；H，6.61；N，16.20；實測值C，64.87；H，6.45；N，16.22。反式-4-(6-甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環己醇(m.p.70-75℃).元素分析C15H19N3O2·0.3H2O計算值C，64.64；H，7.09；N，15.08；實測值C，64.68；H，7.06；N，14.77。[3aR，4S，6R，6aS]-6-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2，2-二甲基四氫環戊二烯并[1，3]間二氧雜環戊烯-4-甲酸乙基酰胺(m.p.94-97℃).元素分析C21H28N4O5·0.3H2O計算值C，59.79；H，6.83；N，13.28；實測值C，59.80；H，6.89；N.12.03。(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基)-(4-甲氧基環己基)胺(m.p.58-68℃)。元素分析C17H23N3O3·0.5H2O計算值C，62.56；H，7.41；N，12.87；實測值C，62.53；H，7.22；N，12.22。實施例15 外-2-(二環[2.2.1]庚-2-基氧基)-6，7-二甲氧基喹喔啉將外-2-降冰片(223mg，2mmol)和NaH(60％，100mg，2.5mmol)在10mL無水THF中的混合物回流0.5小時，然后加入2-氯-6，7-二甲氧基喹喔啉(336mg，1.5mmol)。將所得混合物繼續回流2小時。過濾并濃縮后，通過硅膠色譜純化殘余物(50％乙醚/己烷)，獲得了所需產物，為白色固體(m.p.135-137℃)。元素分析C17H20N2O3計算值C，67.98；H，6.71；N，9.33；實測值C，67.96；H，6.762；N，9.19。
用適當原料以類似方法制備下述化合物外-2-(二環[2.2.1]庚-5-烯-2-基氧基)-6，7-二甲氧基喹喔啉(m.p.108-110℃).元素分析C17H18N2O3計算值C，68.44；H，6.08；N，9.39；實測值C，68.54；H，6.23；N，9.27。2-(二環[2.2.1]庚-5-烯-2-基氧基)-6，7-二甲氧基喹喔啉(m.p.93-95℃).元素分析C17H18N2O3計算值C，68.44；H，6.08；N，9.39；實測值C，68.32；H，5.98；N，9.25。2-(1，4-二氧雜螺[4，5]癸-8-基氧基)-6，7-二甲氧基喹喔啉(m.p.124-125℃).元素分析C18H22N2O5計算值C，62.42；H，6.40；N，8.09；實測值C，62.63；H，6.46；N，7.79。實施例16 順式/反式-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氧基)環己烷甲酸將順式/反式-4-羥基-環己烷甲酸(144mg，1mmol)和NaH(60％，160mg，4mmol)在無水THF/DMF(10mL/2mL)中的混合物回流1小時，然后加入2-氯-6，7-二甲氧基喹喔啉(225mg，1mmol)。將所得混合物繼續回流4小時。將所得混合物中和至pH5，并用乙酸乙酯萃取(2×50mL)。用硫酸鎂干燥合并的有機溶液，并過濾。濃縮后，通過硅膠色譜純化殘余物(乙酸乙酯，然后甲醇)，獲得了所需產物，為白色固體(m.p.90-93℃)。元素分析C17H20N2O5·0.5H2O計算值C，59.89；H，6.19；N，8.22；實測值C，59.91；H，6.62；N，7.90。
使用適當原料通過類似方法制備下述化合物4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氧基甲基)環己醇(m.p.118-121℃)元素分析C17H22N2O4·0.3H2O計算值C，63.15；H，7.03；N，8.66；實測值C，63.13；H，6.65；N，9.01。3-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氧基)環己醇(m.p.151-153℃).元素分析C16H20N2O4計算值C，63.14；H，6.62；N，9.20；實測值C，62.56；H，6.58；N，8.67。4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氧基)環己醇(m.p.162-164℃).元素分析C16H20N2O4計算值C，63.14；H，6.62；N，9.20；實測值C，62.52；H，6.80；N，8.88。實施例17 5-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氧基)二環[2.2.1]庚-2，3-二醇在室溫，向2-(二環[2.2.1]庚-5-烯-2-基氧基)-6，7-二甲氧基喹喔啉(149mg，0.5mmol)和4-甲基嗎啉N-氧化物(234mg，2mmol)在5mL THF內的溶液中加入OsO4在叔丁醇中的溶液(2.5％重量比，0.2mL)。將該棕色溶液劇烈攪拌2小時，然后用飽和NaHS2O3(2mL)中止反應。使用乙醚(3×100mL)進行萃取，然后用硫酸鎂干燥。過濾并濃縮后，通過硅膠色譜純化殘余物(50％乙酸乙酯/己烷)，獲得了所需產物(m.p.85-88℃)。元素分析C17H20N2O5·0.9H2O計算值C.58.73；H，6.29；N，8.06；實測值C，58.74；H，5.91；N，7.53。
以類似方法制備(2外，3外，5外)-5-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)二環[2.2.1]庚烷-2，3-二醇(m.p.150-153℃)。實施例18 乙酸順式-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氧基)環己基酯和順式-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氧基)環己醇將順式-4-乙酰氧基環己醇(632mg，4mmol)和NaH(60％，220mg，5.5mmol)在15mL無水THF中的混合物回流0.5小時，然后加入2-氯-6，7-二甲氧基喹喔啉(674mg，3mmol)。將所得混合物繼續回流2小時。過濾并濃縮后，通過硅膠色譜(乙醚)純化殘余物，獲得了乙酸順式-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氧基)環己基酯(m.p.150-152℃)，元素分析C18H22N2O5計算值C，62.42；H，6.40；N，8.09；實測值C，62.39；H，6.55；N，7.82.和順式-4-(6，7二甲氧基喹喔啉-2-基氧基)環己醇(m.p.148-150℃)。元素分析C16H20N2O4計算值C，63.14；H，6.62；N，9.20；實測值C，62.80；H，6.76；N，8.67。
以類似方法制得了反式-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氧基)環己醇[MS m/z304(M+)]。實施例19 二甲基氨基甲酸4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氧基)環己基酯將4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氧基)環己醇(100mg，0.33mmol)、二甲基氨基甲酰氯(90μL，1.2mmol)和NaH(60％，19.6mg，0.49mmol)在5mL THF中的混合物在室溫攪拌3天，通過色譜法(50％乙酸乙酯/己烷)分離，獲得了白色固體(m.p.152-155℃)。元素分析C19H25N3O5計算值C，60.79；H，6.71；N，11.19；實測值C，60.38；H，6.54；N，10.43。實施例20 3-環己氧基-6，7-二甲氧基喹喔啉1-氧化物將2-環己氧基-6，7-二甲氧基喹喔啉(110mg，0.38mmol)和間氯過苯甲酸(70％，113mg，0.46mmol)在10mL二氯甲烷中的混合物于室溫攪拌一天。過濾后，將該溶液濃縮，通過硅膠色譜純化殘余物(20％乙酸乙酯/己烷)，獲得了所需產物(m.p.167-169℃)。以類似方法制備反式-4-(6，7-二甲氧基-4-氧基喹喔啉-2-基氨基)環己醇(m.p.220-222℃)。元素分析C16H21N3O4·0.2H2O計算值C，59.42；H，6.69；N，12.99；實測值C，59.43；H，6.64；N，12.95。實施例21 乙酸反式-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環己基酯將反式-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環己醇(303mg，1mmol)、乙酸酐(2mL)和吡啶(2mL)在10mL二氯甲烷中的混合物于室溫攪拌過夜。用水(5mL)處理該混合物，并用二氯甲烷(2×30mL)萃取。用硫酸鎂干燥并過濾后，將該溶液在旋轉蒸發儀中濃縮。通過硅膠色譜純化殘余物(乙酸乙酯)，獲得了所需的乙酸酯，為淺黃色固體(m.p.176-177℃)。元素分析C18H23N3O4計算值C，62.59；H，6.71；N，12.17實測值C.62.89O；H，6.67；N，11.95。實施例22 (2外，5外)-5-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)二環[2.2.1]庚-2-醇將(2外，5外)-5-氨基二環[2.2.1]庚-2-乙酸鹽(127mg，0.75mmol)和2-氯-6，7-二甲氧基喹喔啉(224mg，1mmol)的混合物在180℃加熱6小時。然后將該混合物冷卻至室溫，溶于二氯甲烷中，并通過快速色譜柱純化。將收集的產物(20mg，7.5％收率)溶于甲醇(2mL)中，加入新制備的1N甲醇鈉溶液(0.063mL，0.063mmol)。將該反應混合物回流90分鐘。通過制備型薄層色譜純化粗產物混合物，獲得了產物，為黃色固體，m.p.為97-100℃。C17H21N3O3(m/z)315。
用適當原料以類似方法制得了下述化合物(2內，5外)-5-(6，7-二甲氧基喹啉-2-基氨基)-二環[2.2.1]庚-2-醇，為黃色固體。C17H21N3O3(m/z)315。(2外，6外)-6-(6，7-二甲氧基-喹啉-2-基氨基)-二環[2.2.1]庚-2-醇，為黃色固體(30mg，總收率為21％)。C17H21N3O3(m/z)315。元素分析C17H21N3O3計算值C，64.74；H，6.71；N，13.32；實測值C，58.42；H，6.26；N，11.56。實施例23 (2反式，4順式)-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇和(2反式，4反式)-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇將2-氯-6，7-二甲氧基喹喔啉(1.08g，4.81mmol)和(2反式)-4-氨基-2-甲基環己醇(620mg，4.81mmol)在180℃加熱6小時。該反應生成了兩種非對映體。
分離到的主要異構體是黃色固體，是(2反式，4反式)-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇，C17H23N3O3(m/z)317。元素分析C17H23N3O3·2H2O計算值C，58.00；H，7.69；N，11.94；實測值C，58.0；H，6.58；N，11.24。
次要異構體也是黃色固體，是(2反式，4順式)-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇。C17H23N3O3(m/z)317。元素分析C17H23N3O3·H2O計算值C，60.08；H，6.94；N，12.53；實測值C，61.21；H，6.94；N，11.56。
通過手性HPLC將(2反式，4反式)-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇進一步分離成其單獨的對映體。第一個對映體具有(+)-旋光(在Chiracel OJ上的洗脫順序)。第二個對映體具有(-)-旋光(在Chiracel OJ上的洗脫順序)。使用Chiracel OD柱的分析條件使得(+)-對映體后被洗脫出。(-)-對映體在PDGF-R ELISA測定中表現出更好的活性。實施例24 (2順式，4順式)-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇和(2順式，4反式)-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇向(2反式，4反式)-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇和(2反式，4順式)-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇的2∶1混合物(120mg，0.38mmol)在THF(7mL)內的溶液中加入三苯基膦(110mg，0.42mmol)和偶氮二甲酸二乙酯(0.066mL，0.42mmol)以及苯甲酸(46.4mg，0.38mmol)。將該混合物在室溫攪拌過夜，然后通過硅膠色譜純化處理后的殘余物(30％乙酸乙酯/己烷)，獲得了苯甲酸酯的混合物。
向主要的苯甲酸酯(50mg，0.12mmol)在甲醇(2mL)內的溶液中加入1N氫氧化鈉(0.12mL，0.12mmol)。通過制備型薄層色譜分離到了純產物(13mg，32％收率)，為黃色固體(m.p.85-88℃)，該產物是(2順式，4順式)-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇。C17H23N3O3(m/z)317。
以類似方法將次要苯甲酸酯(4.4mg)水解，通過制備型薄層色譜分離出所需產物(3.3mg.100％)，為黃色固體，該產物是(2順式，4反式)-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇。C17H23N3O3(m/z)317。實施例25 (1R，2R，4S)-(+)-二環[2.2.1]庚-2-基-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基)胺將實施例14的(±)-二環[2.2.1]庚-2-基-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基)胺在手性HPLC柱(Chiralpac AD，25×2cm，含有10mM(1S)-(+)-樟腦磺酸的60％庚烷/40％乙醇，12mL/分鐘)上拆分，獲得了作為首批洗脫物的上述標題產物。合并所收集的級分，用50mL1N NaOH洗滌，然后干燥(MgSO4)。過濾后，將該溶液在旋轉蒸發儀上濃縮，然后在高度真空下干燥。獲得了黃色固體。[α]d20+19.5°(c＝0.20，CH2Cl2)m.p.184-186℃。元素分析C17H21N3O2×0.3H2O計算值C，66.90；H，7.15；N，13.77實測值C，66.86；H，7.01；N，13.86。實施例26 通過生物轉化制備(1S，2R，4S，5R)-5-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)二環[2.2.1]庚-2-醇真菌菌株F 2052(深黃被孢霉(Mortierella isabellina))購自Northern Utilization Research and Development Division(NRRL)。
將該真菌于-25℃保藏。將2mL真菌懸浮液接種到分別含有50mL種子培養基(培養基216)的250mL錐形瓶中，并在旋轉搖床上(200rpm)于23℃培養3天。將2mL種子培養物接種到分別含有50mL相同培養基的250mL錐形瓶中，并在旋轉播床上(200rpm)于23℃培養。24小時后，將實施例25的(1R，2R，4S)-(+)-二環[2.2.1]庚-2-基-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基)胺溶于MeOH中，并以300mg/L的終濃度加到該錐形瓶中。培養24小時后，收獲培養物。(培養基216葡萄糖0.4％，酵母提取物0.05％，大豆粉0.05％，NaCl 0.05％，KH2PO40.05％)。通過將2體積乙腈、1體積叔丁基甲基醚和1體積正庚烷加到1體積肉湯中來進行提取。在22℃磁攪拌后，提取物分成了3層。收集中間層并蒸發至干，然后再溶于乙酸乙酯中。使用硅膠(0.04-0.063mm)分離乙酸乙酯提取物，用乙酸乙酯洗脫。使用C18二氧化硅分離含有生物轉化產物的級分，用H2O/MeOH進行梯度洗脫。通過該色譜純化獲得了純的本標題化合物，為無定形黃色粉末m.p.190-192℃。實施例27 反式-4-[7-甲氧基-6-(2-嗎啉-4-基乙氧基)喹喔啉-2-基氨基]環己醇和反式-4-[6-甲氧基-7-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)喹喔啉-2-基氨基]環己醇本標題化合物是這樣制得的使用實施例1的方法，將6-羥基-7-甲氧基-2-氯喹喔啉7-(2-嗎啉-4-基乙氧基)-6-甲氧基-2-氯喹喔啉與2-(嗎啉-4-基)乙醇反應進行Mitsunobu偶聯，并使用實施例11的方法將所得6-(2-嗎啉-4-基乙氧基)-7-甲氧基-2-氯喹喔啉7-(2-嗎啉-4-基乙氧基)-6-甲氧基-2-氯喹喔啉與反式-4-氨基環己醇反應。實施例28 2-[2-(反式-4-羥基環己基氨基)-7-甲氧基喹喔啉-6-基氧基]-1-乙酸和2-[2-(反式-4-羥基-環己基氨基)-6-甲氧基喹喔啉-7-基氧基]-1-乙酸本標題化合物是這樣制得的按照實施例4的方法，用乙硫醇的鈉鹽在DMF中將4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環己醇脫烷基化，然后如一般方法6中所述，在堿存在下用溴乙酸烷基化。實施例29 2-[2-(反式-4-羥基環己基氨基)-7-甲氧基喹喔啉-6-基氧基]-N，N-二甲基乙酰胺和2-[2-(反式-4-羥基環己基氨基)-6-甲氧基喹喔啉-7-基氧基]-N，N-二甲基乙酰胺本標題化合物是用二甲基胺將實施例28的化合物氨解而制得的。中間體實施例1 4-溴-5-甲氧基-苯-1，2-二胺二鹽酸鹽在氬氣氛下，向EtOAc(50mL)與5-溴-4-甲氧基-2-硝基-苯基胺(2.5g，10mmol)的溶液中加入5％Pd/C(0.5g)。將該反應混合物在50psi氫化1小時。在N2氣氛下將該反應混合物經由硅藻土過濾到HCl/IPA/EtOAc溶液中，用EtOAc洗滌濾墊。濾出所得沉淀，獲得了白色固體。中間體實施例2 7-溴-6-甲氧基喹喔啉-2-醇和6-溴-7-甲氧基喹喔啉-2-醇在氬氣氛下，向MeOH(15mL)中加入粉碎的NaOH顆粒(0.86g，21mmol)和4-溴-5-甲氧基-苯-1，2-二胺二鹽酸鹽(2.7g，9.3mmol)。將該混合物攪拌10分鐘，然后滴加45％乙醛酸乙酯的甲苯溶液(2.7g，12mmol)。將該反應混合物回流1小時，然后冷卻，加入水，之后將該懸浮液過濾。依次用水、MeOH、IPA、和Et2O洗滌所得固體，獲得了黃色粉末。中間體實施例3 7-溴-2-氯-6-甲氧基喹喔啉和6-溴-2-氯-7-甲氧基喹喔啉向7-溴-6-甲氧基喹喔啉-2-醇和6-溴-7-甲氧基喹喔啉-2-醇的混合物(1g，3.9mmol)中加入POCl3(5mL)。將該反應混合物回流1小時，倒入冰水中，過濾，然后用水洗滌，獲得了淺褐色固體。1HNMR證實7-溴-2-氯-6-甲氧基喹喔啉6-溴-2-氯-7-甲氧基喹喔啉比例約為7∶1。中間體實施例4 5-氯-4-甲氧基-2-硝基苯胺向N-(5-氯-4-甲氧基-2-硝基苯基)乙酰胺(2g，8.2mmol)在5NHCL(20mL)內的溶液中加入1，4-二氧雜環己烷(10mL)，將該混合物在60℃攪拌1.5小時。將該反應混合物濃縮，并在EtOAc/2N NaOH之間分配。將水層用EtOAc(3×)、鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，吸附在硅膠上，并通過色譜法純化(70％EtOAc/己烷)，獲得了橙色粉末。中間體實施例5 4-氯-5-甲氧基-苯-1，2-二胺二鹽酸鹽在氬氣氛下，向EtOAc(50mL)與5-氯-4-甲氧基-2-硝基苯基胺(1.6g，7.9mmol)的溶液中加入5％Pd/C(0.5g)。將該反應混合物在50psi氫化1小時。將該反應混合物經由硅藻土過濾到1NHCl/Et2O的EtOAc溶液中，用EtOAc洗滌濾墊。濾出所得固體，獲得了白色固體。中間體實施例6 7-氯-6-甲氧基-喹喔啉-2-醇和6-氯-7-甲氧基-喹喔啉-2-醇在0℃、氬氣氛下，向4-氯-5-甲氧基-苯-1，2-二胺二鹽酸鹽(1.8g，7.2mmol)在EtOH(15mL)內的溶液中加入TEA(2.5mL，18mmol)。將該混合物攪拌20分鐘，然后滴加45％乙醛酸乙酯的甲苯溶液(2.1g，9.3mmol)。將該反應混合物升至室溫，回流1.5小時，然后冷卻，加入水，然后將該懸浮液過濾，并依次用水、IPA、和Et2O洗滌，獲得了淺黃色粉末。用甲苯將該產物共沸數次，并在使用前真空干燥。中間體實施例7 2，7-二氯-6-甲氧基喹喔啉和2，6-二氯-7-甲氧基喹喔啉在用CaCl2干燥的試管內，向7-氯-6-甲氧基喹喔啉-2-醇和6-氯-7-甲氧基喹喔啉-2-醇(1g，4.7mmol)的混合物中加入POCl3(5mL)。將該反應混合物回流30分鐘，倒入冷的飽和碳酸氫鈉溶液中，過濾，然后用水洗滌，獲得了固體。1H NMR證實2，7-二氯-6-甲氧基喹喔啉2，6-二氯-7-甲氧基喹喔啉的比例約為6∶1。中間體實施例8 順式-4-氨基環己醇依據文獻中的方法[J.Med.Chem.18(6)634 1975]并作少許改動來制備順式-4-氨基環己醇。中間體實施例9 外-二環[2.2.1]庚-5-烯-2-胺外-二環[2.2.1]庚-5-烯-2-胺是按照與中間體實施例15相同的方法由5-降冰片烯-2-醇經由通用中間體外-2-二環[2.2.1]庚-5-烯-2-基異吲哚-1，3二酮制得的。中間體實施例10 (2外，6外)-2-(6-羥基-二環[2.2.1]庚-2-基異吲哚-1，3-二酮和(2外，5外)-2-(5-羥基二環[2.2.1]庚-2-基異吲哚-1，3-二酮在0℃，向外-2-二環[2.2.1]庚-5-烯-2-基異吲哚-1，3-二酮(320mg，1.34mmol)在5mL THF內的混合物中加入BH3/THF溶液(1M，2mL，2mmol)。將該混合物在室溫攪拌2小時，然后加入水(2mL)和NaBO3·4H2O(900mg)。將所得懸浮液攪拌過夜。用乙醚(3×50mL)萃取，并用硫酸鎂干燥。過濾并濃縮后，通過硅膠色譜(乙醚)純化殘余物，獲得了所需產物，可將其進一步分離。中間體實施例11 (2外，5內)-2-(5-羥基-二環[2.2.1]庚-2-基異吲哚-1，3-二酮(a)將(2外，6外)-2-(6-羥基二環[2.2.1]庚-2-基異吲哚-1，3-二酮和(2外，5外)-2-(5-羥基二環[2.2.1]庚-2-基異吲哚-1，3-二酮(800mg，3.3mmol)、以及氯鉻酸吡啶(2g)在10mL二氯甲烷中的混合物在室溫攪拌一個周末。用乙醚(100mL)稀釋后，將該懸浮液過濾，把所得溶液濃縮。通過硅膠色譜(乙醚)純化殘余物，獲得了750mg(95％)相應的酮。通過反相HPLC(CH3CN/H2O，10-70％)將該酮進一步分離，獲得了外-2-(5-氧基二環[2.2.1]庚-2-基異吲哚-1，3-二酮。(b)在0℃，向外-2-(5-氧基二環[2.2.1]庚-2-基異吲哚-1，3-二酮(250mg，0.98mmol)在10mL甲醇內的溶液中加入NaBH4(38mg，1mmol)。再將該混合物攪拌0.5小時，用1N HCl(1mL)中止反應。濃縮后，用二氯甲烷提取殘余物(2×50mL)。將二氯甲烷蒸發，獲得了所需產物，不用進一步純化直接使用。中間體實施例12(2內，5外)-5-氨基二環[2.2.1]庚-2-醇，(2外，5外)-5-氨基二環[2.2.1]庚-2-醇，(2內，6外)-6-氨基二環[2.2.1]庚-2-醇，和(2外，6外)-6-氨基二環[2.2.1]庚-2-醇本標題化合物是用中間體實施例11的方法由適當原料制得的。中間體實施例13 2-甲基-6，7-二甲氧基喹喔啉本標題化合物是通過將Tamao等人在Tetrahedron，1982，38，3347-3354中出版的方法作改進而制得的。在氬氣氛下向THF溶液中加入2-氯-6，7-二甲氧基喹喔啉(5g，26mmol)和NiCl2(dppp)(0.14g，0.26mmol)。將該反應混合物冷卻至0℃，向其中滴加3MMeMgBr的乙醚溶液(13mL，39mmol)。將該反應混合物升至室溫，攪拌1小時，然后回流1.5小時。將該混合物冷卻，用10％HCl中止反應，攪拌10分鐘，然后用5％NaOH堿化。向該反應混合物中加入CH2Cl2和H2O，將該反應混合物攪拌過夜，然后加入CH2Cl2、H2O、和NaCl，過濾該混合物。將所得溶液倒入分液漏斗中，用二氯甲烷將水層洗滌3次。合并有機層，用鹽水洗滌，干燥(MgSO2)，濃縮到硅膠上，并通過色譜法處理(50％-80％EtOAc/己烷)，獲得了橙色固體(收率為49％)。中間體實施例14 6，7-二甲氧基-2-喹喔啉甲醛在氬氣氛下，向反應燒瓶中加入1，4-二氧雜環己烷(20mL)、2-甲基-6，7-二甲氧基喹喔啉(1.09g，5.3mmol)和SeO2(1.8g，16mmol)。將該混合物在100℃加熱2小時45分鐘，冷卻，并經由硅藻土過濾。用EtOAc和CH2Cl2將濾墊洗滌數次。將所得溶液濃縮，置于MeOH/CH2Cl2中，施加到硅膠柱上，進行色譜處理(30％EtOAc/CH2Cl2)，獲得了灰白色固體(收率為73％)。中間體實施例15 (2外，5外)-5-氨基二環[2.2.1]庚烷-2-乙酸酯依據R.Gagnon(J.Chem.Soc.，Perkin trans.1，15051995)的方法、并作較小改進，由二環[2.2.1]庚-2，5-二烯制備外-5-乙酰氧基二環[2.2.1]庚-2-酮和外-6-乙酰氧基二環[2.2.1]庚-2-酮。
在室溫，向外-5-乙酰氧基二環[2.2.1]庚-2-酮(350mg，2.08mmol)在10mL THF內的溶液中加入1M硼烷/THF溶液(1.2mL，1.2mmol)。將該混合物攪拌0.5小時，然后在0℃用甲醇(3mL)和1N HCl(1.5mL)中止反應。用乙酸乙酯(3×30mL)萃取，并用硫酸鎂干燥。過濾并濃縮后，通過硅膠色譜純化，獲得了(2內，5外)-5-乙酰氧基二環[2.2.1]庚-2-醇。
在0℃，向(2內，5外)-5-乙酰氧基二環[2.2.1]庚烷-2-醇(350mg，2.06mmol)在THF(10mL)內的溶液中加入鄰苯二甲酰亞胺(454mg，3.09mmol)、三苯基膦(810mg，3.09mmol)和偶氮二甲酸二乙酯(0.49mL.3.09mmol)。將該反應混合物攪拌過夜，然后用旋轉蒸發儀濃縮，通過色譜柱純化殘余物(20％乙酸乙酯/己烷)，獲得了所需產物，為黃色固體。
將上述固體(300mg，1mmol)和肼(0.126mL，2.2mmol)在5mL甲醇中的混合物加熱回流6小時。除去甲醇后，用二氯甲烷(3×30mL)萃取殘余物。將溶劑濃縮，獲得了(外，外)-5-氨基二環[2.2.1]庚烷-2-乙酸酯(127mg，75％)，不用進一步純化直接用于偶聯反應。
同樣，由適當原料制備(2內，5外)-5-氨基二環[2.2.1]庚烷-2-乙酸酯、(2內，6外)-6-氨基二環[2.2.1]庚烷-2-乙酸酯和(2外，6外)-6-氨基二環[2.2.1]庚烷-2-乙酸酯。中間體實施例16 (2反式)-4-氨基-2-甲基環己醇將3-甲基-2-環己烯酮(4g，36.36mmol)、甲苯磺酸(100mg)和乙二醇(7mL)在100mL甲苯中的混合物回流過夜，通過迪安-斯達克分水器除去形成的水。濃縮后，通過硅膠色譜純化殘余物(10％乙酸乙酯/己烷)，獲得了3.36g(62％)7-甲基-1，4-二氧雜螺[4.5]癸-7-烯。
在室溫、攪拌下，向7-甲基-1，4-二氧雜螺[4.5]癸-7-烯(3.36g，22.47mmol)在四氫呋喃(THF)(125mL)內的溶液中加入1M硼烷的THF溶液(22.47mL，22.47mmol)。將該混合物攪拌1小時，通過在0℃加入H2O(10mL)、然后加入過硼酸鈉四水合物(10.0g，66mmol)來中止反應。將該混合物攪拌過夜，分離出兩層，將水層用乙酸乙酯(4×150mL)洗滌數次。通過快速柱色譜純化后，獲得了所需的醇，為澄清液體。
將上述醇(1.8g，10.5mmol)溶于甲醇(50mL)和1N HCI(16mL)中。將該反應混合物攪拌過夜。用1N氫氧化鈉(18mL)將該酸性溶液中和。然后進行標準水后處理。通過快速柱色譜法純化粗產物混合物(50％乙酸乙酯)，獲得了反式-4-羥基-3-甲基環己酮。
向反式-4-羥基-3-甲基環己酮(780mg，6.1mmol)的水(3mL)溶液中加入羥基胺鹽酸鹽(550mg，7.92mmol)，然后緩慢地加入飽和碳酸鈉(326mg，3.8mmol)水(1.02mL)溶液。攪拌30分鐘后，向該反應混合物中加入乙醚，分離出兩層。將有機層濃縮，并溶于乙醇(10mL)中。用1小時時間向該回流的乙醇溶液中加入鈉(1.8g，78.3mmol)，將所得混合物再加熱2.5小時。除去乙醇后，加入正丙醇(10mL)、乙醚(25mL)、和水(3mL)。用硫酸鎂將有機相干燥并過濾。將溶劑濃縮，獲得了(2反式)-4-氨基-2-甲基環己醇的混合物，為白色固體。中間體實施例17 2-甲氧基-4，5-二氨基苯酚二鹽酸鹽本標題化合物是依據Ehrlich等人，J.Org.Chem.，1947，12，522的方法，通過將2-甲氧基-4，5-二硝基苯酚氫化而制得的。中間體實施例18 7-羥基-6-甲氧基喹喔啉-2-醇和6-羥基-7-甲氧基喹喔啉-2-醇按照中間體實施例2的方法，通過將4-甲氧基-5-羥基苯-1，2-二胺二鹽酸鹽與NaOH和乙醛酸乙酯反應制得了本標題化合物。中間體實施例19 7-羥基-6-甲氧基-2-氯喹喔啉和6-羥基-7-甲氧基-2-氯喹喔啉。
按照中間體實施例3的方法，通過將7-羥基-6-甲氧基喹喔啉-2-醇和6-羥基-7-甲氧基喹喔啉-2-醇與POCl3反應制得了本標題化合物。
本發明式I化合物通過抑制PDGF-R酪氨酸激酶活性而抑制細胞增殖和/或細胞基質產生和/或細胞運動(趨化性)。有大量疾病是由于失控的細胞增殖或細胞基質過度生成或失控的編程性細胞死亡(細胞凋亡)引起的。這些疾病涉及多種細胞類型，并包括病癥例如白血病、癌癥、成膠質細胞瘤、牛皮癬、炎性疾病、骨疾病、纖維變性疾病、動脈粥樣硬化和冠狀動脈、股動脈或腎動脈的血管成形術后發生的再狹窄，或纖維增生性疾病例如關節炎、肺、腎和肝臟的纖維變性。特別是，據報道PDGF和PDGF-R牽涉特定類型的癌癥和腫瘤，例如腦癌、卵巢癌、結腸癌、前列腺癌、肺癌、卡波西肉瘤和惡性黑素瘤。此外，冠狀動脈旁路手術后會發生失控的細胞增殖。據信抑制酪氨酸激酶活性可用于控制失控的細胞增殖或基質過度生成或失控的編程性細胞死亡(細胞凋亡)。
本發明涉及調節和/或抑制細胞信號傳導、細胞增殖和/或細胞基質產生和/或細胞運動(趨化性)，控制異常的細胞生長和細胞炎性反應。更具體來說，本發明涉及取代的喹啉和喹喔啉化合物的應用，所述化合物能通過有效地抑制血小板衍生生長因子受體(PDGF-R)酪氨酸激酶活性而選擇性地抑制分化、增殖、基質產生、趨化性或介質釋放。
抑制自身磷酸化，即生長因子受體自身的磷酸化，和細胞內底物的受體的磷酸化是在細胞信號傳導、細胞增殖、基質產生、趨化性和介質釋放過程中涉及的一些生物事件。
通過有效地抑制Lck酪氨酸激酶活性，本發明化合物還可用于治療移植抵抗性和自身免疫性疾病例如類風濕性關節炎、多發性硬化和全身性紅斑狼瘡，移植物排斥，移植物對宿主的疾病，過度增殖性(hyperproliferative)疾病例如腫瘤和牛皮癬，和細胞接受促炎性信號的疾病例如哮喘、炎性腸病和胰腺炎。在治療移植物排斥時，本發明化合物可用于預防人體對移植的器官或組織的不良反應，或者在發生這樣的反應后對其進行治療。當預防性地使用時，在進行移植手術前將本發明化合物施用給患者或欲進行移植的組織或器官。預防性治療還包括在移植手術后、但是觀察到任何移植不良反應征兆之前進行給藥治療。當發生不良反應后再給藥時，在表現出外在抵抗性癥狀之后，將本發明化合物直接對患者給藥以治療對移植物的抵抗性。
依據本發明另一個方面，本發明提供了抑制PDGF酪氨酸激酶活性的方法，包括將權利要求1的化合物與含有PDGF酪氨酸激酶的組合物接觸。
依據本發明另一個方面，本發明提供了抑制Lck酪氨酸激酶活性的方法，包括將權利要求1的化合物與含有Lck酪氨酸激酶的組合物接觸。
依據本發明另一個方面，本發明提供了治療患有或易患有可通過施用PDGF-R酪氨酸激酶活性和/或Lck酪氨酸激酶活性抑制劑而得到改善或阻止的疾病例如上述疾病之患者的方法，包括給所述患者施用有效量的式I化合物、含有式I化合物的組合物、或其可藥用鹽。
本文所提及的治療包括預防性治療和治療已發疾病。
本發明還包括含有可藥用量的至少一種式I化合物與可藥用載體例如輔料、稀釋劑、包衣和賦形劑的藥物組合物。
在實踐中，本發明化合物或組合物可以以任意合適的形式給藥，例如吸入給藥、局部給藥、腸胃外給藥、直腸給藥或口服給藥，更優選口服給藥。更具體的給藥途徑包括靜脈內給藥、肌內給藥、皮下給藥、眼內給藥、滑膜內給藥、結腸給藥、腹膜給藥、經上皮給藥包括經皮給藥、眼給藥、舌下給藥、頰給藥、皮膚給藥、眼給藥、通過吹入法的鼻吸入給藥、和噴霧給藥。
式I化合物可在能容許以大多數合適途徑給藥的劑型中施用，并且本發明還涉及含有至少一種適于用作治療患者的藥物的本發明化合物的藥物組合物。這些組合物可依據常規方法，用一種或多種可藥用輔料或賦形劑制得。輔料尤其包括稀釋劑、無菌含水介質和各種無毒有機溶劑。本發明組合物可呈片劑、丸劑、粒劑、粉劑、水溶液或懸浮劑、注射液、酏劑或糖漿劑的形式，并且為了獲得可藥用制劑，本發明組合物可含有一種或多種選自下述物質的輔助劑甜料例如蔗糖、乳糖、果糖、糖精或Nutrasweet，矯味劑例如薄荷油、冬綠油、或櫻桃或橙子調味劑，著色劑，或穩定劑例如對羥基苯甲酸甲酯和對羥基苯甲酸丙酯。
載體的選擇和活性物質在載體中的含量通常是由產物的溶解性和化學性質、特定給藥方式和藥物實踐中所遵守的原則決定的。例如，賦形劑如乳糖、檸檬酸鈉、碳酸鈣、磷酸二鈣和崩解劑例如淀粉、藻酸和一些復合硅膠以及潤滑劑例如硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉和滑石粉可用于制備片劑、錠劑、丸劑、膠囊等。為了制備膠囊，使用乳糖和液體載體例如高分子量聚乙二醇是有利的。可使用各種其它物質以用作包衣或修飾劑量單位的物理形態。例如，可用蟲膠、糖或蟲膠和糖將片劑、丸劑或膠囊包衣。當使用水懸浮劑時，其可含有乳化劑或促進懸浮的物質。還可以使用稀釋劑例如蔗糖、乙醇、多元醇例如聚乙二醇、丙二醇和甘油、和氯仿或它們的混合物。此外，可將活性化合物配制成緩釋制劑。
為了口服給藥，可將活性化合物與例如惰性稀釋劑或可同化的可食用載體一起給藥，或者可將其包封在硬或軟明膠膠囊殼中，或者可將其壓制成片，或者直接與食品混合，或者與賦形劑混合，并以吞服片、口腔片、錠劑、膠囊、酏劑、懸浮劑、糖漿劑、糯米紙囊劑(wafer)等形式使用。
為了腸胃外給藥，可使用本發明化合物在植物油例如芝麻油、花生油或橄欖油，或含水有機溶液例如水和丙二醇，可注射有機酯例如油酸乙酯，以及可藥用鹽的無菌水溶液等中的乳劑、懸浮劑或溶液劑。注射劑型的流動性必須達到易于注射的程度，并且可通過例如使用包衣如卵磷脂，通過維持所需粒劑大小(對于分散體)和通過使用表面活性劑來維持適當流動性。可通過使用延遲吸收的物質例如一硬脂酸鋁和明膠來延長注射組合物的吸收。本發明產物的鹽的溶液尤其適用于通過肌內或皮下注射進行給藥。作為游離堿或可藥用鹽的活性化合物的溶液可在適當與表面活性劑例如羥丙基纖維素混合的水中制備。還可以在甘油、液體聚乙二醇、和它們的混合物以及油中制備分散體。包含鹽在純蒸餾水中的溶液的水溶液可用于靜脈內給藥，條件是適當地調節其pH，將其適當地緩沖和用足量葡萄糖或氯化鈉使其等滲，并通過加熱、輻射、微量過濾、和/或通過各種抗菌劑和殺真菌劑例如對羥基苯甲酸酯類、氯丁醇、苯酚、山梨酸、硫柳汞等將其滅菌。
無菌注射液是通過將必需量的活性化合物與各種其它上述組分(按照需要)混合在適當溶劑中、然后過濾滅菌制得的。分散體一般是通過將各種滅菌的活性組分加到含有分散基質和必需的其它上述組分的無菌載體中制得的。對于制備無菌注射液的無菌粉末，優選的制備方法是真空干燥和冷凍干燥技術，通過使用這樣的技術可由其無菌過濾溶液制得活性組分與任意其它所需組分的粉末。
對于局部給藥，可使用含有本發明化合物的凝膠劑(以水或醇為基質)、霜劑或軟膏劑。還可將本發明化合物摻入到用于在貼劑中施用的凝膠或基質中，其中貼劑能經由經皮屏障控制化合物釋放。
對于吸入給藥，可將本發明化合物溶解或懸浮在用于噴霧器或懸浮液或溶液氣霧劑中的適當載體中，或者可將本發明化合物吸收或吸附在用于干粉吸入器中使用的適當固體載體上。
直腸給藥固體組合物包括依據已知方法配制的并含有至少一種式I化合物的栓劑。
還可以將本發明組合物配制成這樣的制劑，它們抵抗通過對流和/或擴散從血管(動脈和靜脈)壁中的快速清除，因此延長了藥物在所需作用位點的停留時間。可使用含有本發明化合物的外膜周圍貯藥庫來進行持續釋放。一種適用于施用本發明化合物的這樣的貯藥庫可以是被硅橡膠殼環繞的共聚物基質，例如乙烯-乙酸乙烯酯共聚物或聚乙烯醇凝膠。或者，可從植入在外膜中的硅氧烷聚合物中局部遞送本發明化合物。
將在經皮、經血管遞送期間本發明化合物的沖失程度降至最小的方法包括使用不可擴散的藥物洗脫微顆粒。微顆粒可以由多種合成聚合物例如聚交酯或天然物質包括蛋白質或多糖構成。這樣的微顆粒能以預定方式控制包括藥物總劑量及其釋放動力學在內的可變參數。可通過多孔囊式導管或固定在斯滕特固定模(stent)上的囊有效地將微顆粒注射到動脈或靜脈壁內，并且在血管壁和外膜周圍組織中保持至少2周。Reissen等人的(J.Am.Coll.Cardiol.1994；231234-1244)中描述了用于局部血管內定點遞送治療劑的制劑和方法，該文獻全文引入本發明以作參考。
本發明組合物還可包含水凝膠，這樣的水凝膠是由可用作藥物吸收海綿的任何生物相容或無毒(均聚或或雜聚)聚合物例如親水性聚丙烯酸聚合物制得的。這樣的聚合物描述在例如WO93/08845中，該文獻全文引入本發明以作參考。其中一些聚合物，例如得自乙烯和/或氧化丙烯的聚合物可商購獲得。
在使用本發明化合物來治療與過度增殖性病癥有關的疾病時，可以以不同方法施用本發明化合物。為了治療再狹窄，通過血管成形術用囊將本發明化合物直接施加到血管中，所述囊包衣著用化合物飽和的親水性薄膜(例如水凝膠)，或通過含有化合物輸注室(infusionchamber)的任何其它導管施用本發明化合物，其中能以精確方式將這樣的導管施用到待治療部位，并使得化合物在所治療的細胞位置局部且高效地釋放。該給藥方法能有利地使化合物與需要治療的細胞迅速接觸。
本發明治療方法優選包括將本發明化合物施加到待治療部位。例如，可將含有組合物的水凝膠直接放置在欲治療組織的表面、例如在手術期間放置。有利起見，通過下述方式將水凝膠引入到目的血管內位點上包衣導管例如囊導管，并遞送到血管壁，優選在血管成形術期間遞送。在一種特別有利的方式中，通過囊導管將飽和水凝膠引入到治療位點。在將導管放置到靶血管中時，可用保護鞘保護囊，以使得在導管引入到血流內后藥物沖失降至最小。
在本發明另一實施方案中，通過灌注囊施用本發明化合物。這些灌注囊通過囊的膨脹能夠維持血流，并因此降低心肌缺血的危險性，還能使得化合物在常壓下局部釋放20分鐘以上的較長時間，這可能是實現其最佳作用所必需的，或者，可使用具有通道的囊式導管(“具有通道的囊式血管成形術用導管”，Mansfield Medical，BostonScientific Corp.，Watertown，MA)。后者由包衣著一層24個有孔通道的常規囊構成，這些有孔通道通過另外的輸注口經由獨立的腔灌注。可用于實施本發明的各種類型囊式導管，例如雙重囊、多孔囊、微孔囊、通道囊、固定在斯滕特固定模上的囊、和水凝膠導管公開在Reissen等人。(1994)的文獻中，該文獻全文引入本發明以作參考。
使用灌注囊式導管是特別有利的，因為能同時獲得將囊維持膨脹較長時間(通過保持促進的滑行性)和維持水凝膠的位點特異性這兩個效果。
本發明另一方面涉及含有本發明化合物和泊咯沙姆的藥物組合物，例如Poloxamer 407是市售的無毒的生物相容多元醇(BASF，Parsippany，NJ)。
可將浸滲有本發明化合物的泊咯沙姆直接放在治療組織的表面，例如在手術期間放置。泊咯沙姆具有與水凝膠基本上相同的優點，同時具有較低粘度。
使用含有浸滲著本發明化合物的泊咯沙姆的通道囊式導管是特別有利的。在這種情況下，優點是能在保持促進的滑行性的情況下同時獲得將囊維持膨脹較長時間和維持泊咯沙姆的位點特異性這兩個效果。
活性組分在本發明組合物中的百分比可以變化，其必須占一定比例以獲得合適的劑量。很明顯，可大約同時施用幾個單位劑型。所用劑量可由醫師或有資格的醫療執業人員確定，并取決于期望治療效果、給藥途徑和治療持續時間、以及患者的身體狀況。對于成人，當吸入給藥時，劑量一般為約0.001-約50、優選約0.001-約5mg/kg體重/天，當口服給藥時，劑量一般為約0.01-約100、優選0.1-70、更優選0.5-10mg/kg體重/天，當靜脈內給藥時，劑量一般為約0.001-約10、優選0.01-10mg/kg體重/天。在每一特定情況下，劑量是依據欲治療患者的特定因素，例如年齡、體重、一般健康狀況、和可影響本發明化合物效力的其它因素確定的。
本發明化合物/組合物可以按照需要頻繁給藥以獲得所需療效。某些患者可能會對較高或較低劑量迅速起反應，并且可能很低的維持劑量就足夠了。對于其它患者，可能需要依據每一特定患者的生理需要以1-4次給藥/天的速度進行長期治療。本發明活性產物通常每天口服給藥1-4次。當然，對于其它患者，必須每天給藥不超過1次或2次。
還可以將本發明化合物配制成與其它治療劑聯合使用或者與治療技術聯合使用的形式，以治療可通過施用式I化合物得以改善的病癥，例如本發明化合物可用于治療使用任何方法例如氣脹術、消融術或激光技術的血管成形術后的再狹窄。本發明化合物可用于在將斯滕特固定模置于血管系統中之后在下述兩種情況下治療再狹窄，1)初次治療血管阻塞，或者2)在使用任何方法的血管成形術未能給患者提供動脈時。本發明化合物可通過口服、胃腸外給藥來使用，或者本發明化合物可通過放置在特定裝置中或者適當地配制成在斯滕特固定模裝置上的包衣來局部施用。
在一個方面，斯滕特固定模上的包衣是通過將摻合著本發明化合物的聚合材料涂敷在斯滕特固定模裝置的至少一個表面上而形成的。
適于摻合本發明化合物的聚合材料包括具有相對低加工溫度的聚合物，例如聚己內酯、聚(乙烯共聚乙酸乙烯酯)或聚乙酸乙烯酯或硅氧烷樹膠橡膠以及具有類似較低加工溫度的聚合物。其它合適的聚合物包括能攜帶和遞送治療藥物的不可降解聚合物，例如膠乳、尿烷、聚硅氧烷、苯乙烯-乙烯/丁烯-苯乙烯嵌段共聚物(SEBS)，和能攜帶與遞送治療藥物的生物可降解、生物可吸附聚合物，例如聚-DL-乳酸(DL-PLA)、和聚-L-乳酸(L-PLA)、聚原酸酯、聚亞氨基碳酸酯、脂族聚碳酸酯、和聚磷腈。
還可以通過將porosigen與治療藥物一起加到聚合物中來把porosigen摻入到負載藥物的聚合物中，以形成多孔負載藥物的聚合膜。“Porosigen”是指當浸在體液中時能溶解或降解以在聚合材料中留下多孔網絡的任何部分，例如氯化鈉、乳糖或肝素鈉的微粒。這樣的porosigen留下的孔一般可大至10微米。通過porosigen例如聚乙二醇(PEG)、聚氧化乙烯/聚氧化丙烯(PEO/PPO)共聚物形成的孔可例如小于1微米，當然從連續的藥物負載聚合基質中形成相分離、并且隨后可被體液浸濾出的類似材料也可用于形成小于1微米的孔。可將聚合材料涂敷在斯滕特固定模上，同時治療藥物和porosigen材料包含在聚合材料中，這樣當把斯滕特固定模置于血管中時porosigen溶解或降解，或者可將porosigen溶解并從聚合材料中除去以在聚合材料中形成孔，然后將與斯滕特固定模結合的聚合材料放置在血管中。
如果需要的話，還可在藥物負載聚合物上涂敷控速膜以限制本發明化合物的釋放速度。可通過從溶液中涂敷上包衣或直接涂敷上分層包衣來加上控速膜。涂敷在聚合材料上的控速膜可包含porosigen在控速膜中的均勻分散體，在控速膜中的porosigen可溶解并在控速膜中形成通常大至10微米或小至1微米的孔，但是所形成的孔也可以小于1微米。在控速膜中的porosigen可以是例如氯化鈉、乳糖、肝素鈉、聚乙二醇、聚氧化乙烯/聚氧化丙烯共聚物以及它們的混合物。
另一方面，斯滕特固定模裝置上的包衣可這樣形成將本發明化合物涂敷在斯滕特固定模裝置的至少一個表面上以形成生物活性層，然后在生物活性層上涂敷一層或多層具有足夠厚度以提供化合物緩釋效果的多孔聚合材料包衣。
一方面，多孔聚合材料可由通過不使用催化劑的蒸氣沉積由聚酰胺、聚對亞苯基二甲基或聚對亞苯基二甲基衍生物組成。“聚對亞苯基二甲基”是指基于對苯二甲基的聚合物，并且是按照在US5824049中描述的汽相聚合法制得的，該文獻引入本發明以作參考。
或者，通過等離子體沉積涂敷多孔聚合材料。適用于等離子體沉積的代表性聚合物包括聚(氧化乙烯)、聚(乙二醇)、聚(氧化丙烯)，和甲烷、硅氧烷、四氟乙烯四甲基二硅氧烷的聚合物等。
其它合適的聚合物系統包括源自可光聚合的單體例如液體單體的聚合物，所述單體優選具有至少兩個交聯C-C(碳碳)雙鍵，并且是可非氣相加成聚合的烯不飽和化合物，在常壓下的沸點大于100℃，分子量約為100-1500，并且能易于形成高分子量加聚物。更優選地，單體優選為含有2個或更多個丙烯酸酯或異丁烯酸酯基團/分子的可加成光聚合的多烯不飽和丙烯酸酯或異丁烯酸酯或它們的混合物。這樣的多官能團丙烯酸酯的代表性實例是乙二醇二丙烯酸酯、乙二醇二異丁烯酸酯、三羥甲基丙烷三丙烯酸酯、三羥甲基丙烷三異丁烯酸酯、季戊四醇四丙烯酸酯、或季戊四醇四異丁烯酸酯、1，6-己二醇二異丁烯酸酯、和二甘醇二異丁烯酸酯。
在某些特別情況中，也可使用一丙烯酸酯例如丙烯酸正丁酯、異丁烯酸正丁酯、丙烯酸2-乙基己酯、丙烯酸月桂酯、和丙烯酸2-羥基丙酯。少量(甲基)丙烯酸的酰胺例如N-羥甲基異丁烯酰胺丁基醚也是合適的，N-乙烯基化合物例如N-乙烯吡咯烷酮、脂族一元羧酸的乙烯基酯例如油酸乙烯酯、二醇的乙烯基醚例如丁二醇-1，4-二乙烯基醚和烯丙基醚以及烯丙基酯也是合適的。還包括其它單體例如二環氧化物或多環氧化物例如丁二醇-1，4-一縮二甘油醚或雙酚A一縮二甘油醚與(甲基)丙烯酸的反應產物。對于具體應用，可合適地選擇單體或其混合物來改變光聚合液體分散介質的特征。
其它有用的聚合物系統包括生物相容的、并且當植入斯滕特固定模時將對血管的刺激降至最小的聚合物。根據所需的釋放速度或者所需的聚合物穩定性程度，聚合物可以是生物穩定或可生物吸收的聚合物。可使用的可生物吸收的聚合物包括聚(L-乳酸)、聚己內酯、聚(丙交酯-共聚-乙交酯)、聚(羥基丁酸酯)、聚(羥基丁酸酯-共聚-戊酸酯)、聚二氧雜環己酮、聚原酸酯、聚酐、聚(乙醇酸)、聚(D，L-乳酸)、聚(乙醇酸-共聚-碳酸亞丙基酯)、聚磷酸酯、聚磷酸酯尿烷、聚(氨基酸)、氰基丙烯酸酯、聚(碳酸亞丙基酯)、聚(亞氨碳酸酯)、共聚(醚-酯)(例如PEO/PLA)、聚亞烷基草酸酯、聚磷腈，和生物分子例如血纖維蛋白、血纖維蛋白原、纖維素、淀粉、膠原和透明質酸。還可以使用具有較低慢性組織反應的生物穩定聚合物，例如聚氨酯、硅氧烷和聚酯，也可以使用能溶解并固化或聚合在斯滕特固定模上的其它聚合物，例如聚烯烴、聚異丁烯、和乙烯-α烯烴共聚物；丙烯酸聚合物和共聚物、乙烯基鹵聚合物和共聚物例如聚氯乙烯；聚乙烯基醚，例如聚乙烯基甲基醚；聚偏二鹵代乙烯，例如聚偏二氟乙烯和聚偏二氯乙烯；聚丙烯腈，聚乙烯基酮，聚乙烯基芳族化合物例如聚苯乙烯，聚乙烯基酯例如聚乙酸乙烯酯；乙烯基單體彼此間的共聚物和乙烯基單體與烯烴的共聚物，例如乙烯-異丁烯酸甲酯共聚物、丙烯腈-苯乙烯共聚物、ABS樹脂、和乙烯-乙酸乙烯酯共聚物；聚酰胺，例如Nylone 66和聚己內酰胺；烷基樹脂，聚碳酸酯；聚甲醛；聚酰亞胺、聚醚；環氧樹脂、聚氨酯；人造纖維；三乙酸人造纖維；纖維素、乙酸纖維素、丁酸纖維素；乙酸丁酸纖維素；玻璃紙、硝酸纖維素；丙酸纖維素；纖維素醚；和羧甲基纖維素。
除了等離子體沉積和氣相沉積以外，可采用在斯滕特固定模表面上涂敷各種包衣的其它技術。例如，可將聚合物溶液涂敷在斯滕特固定模上，并讓溶劑蒸發，由此在斯滕特固定模表明上留下了聚合物和治療物質的包衣。在斯滕特固定模上涂敷溶液一般可通過將溶液噴霧到斯滕特固定模上或者將斯滕特固定模浸泡在聚合物溶液中來進行。
本發明化合物可用于與任何抗凝血劑、抗血小板劑、抗血栓形成劑或血纖維蛋白原溶解劑(profibrinolytic agent)聯合使用來治療再狹窄。通常在手術前、手術期間或手術后用這些類治療劑對患者進行并行治療，以使手術能安全地進行或者防止血栓形成的有害作用。作為已知抗凝血劑、抗血小板劑、抗血栓形成劑或血纖維蛋白原溶解劑的治療劑的一些實例包括肝素、低分子量肝素、戊糖、血纖蛋白原受體拮抗劑、凝血酶抑制劑、Xa因子抑制劑或VIIa因子抑制劑的所有制劑。
本發明化合物可用于與抗高血壓劑或膽固醇或脂質調節劑聯合使用來實施與高血壓或動脈粥樣硬化治療并行進行的再狹窄或動脈粥樣硬化的治療。可用于治療高血壓的治療劑的一些實例包括下述種類的化合物β-阻滯劑、ACE抑制劑、鈣通道拮抗劑和α-受體拮抗劑。可用于治療高膽固醇水平或失調的脂質水平的治療劑的一些實例包括作為已知HMGCoA還原酶抑制劑的化合物、fibrate類化合物。
本發明化合物還可單獨使用或者與可用于治療癌癥的已知化合物聯合使用來治療各種類型癌癥。
應當理解，本發明包括本發明化合物與一種或多種上述類型治療劑的組合。
在依據文獻描述進行的試驗中，在本發明范圍內的化合物表現出顯著的藥理活性，我們相信這些試驗結果與在人和其它哺乳動物中的藥理活性相關。下述體外和體內藥理試驗結果是本發明化合物的典型特征。
藥物組合物制備和藥理試驗部分在本發明范圍內的化合物表現出顯著的蛋白酪氨酸激酶抑制劑活性，并具有下述治療價值作為抗細胞增殖劑用于治療一些病癥包括牛皮癬、動脈粥樣硬化和再狹窄損傷。在本發明范圍內的化合物表現出調節和/或抑制細胞信號傳導和/或細胞增殖和/或基質產生和/或趨化性和/或細胞炎性反應的活性，并且可用于預防或延遲這類病癥的發作或復發或治療這樣的病癥。
為了確定本發明化合物的有效性，使用在本領域內接受的、并且被公認與在哺乳動物中的藥理活性相關的下述藥理試驗。已在這些不同試驗中測試了在本發明范圍內的化合物，并且認為所得結果與有用的細胞分化介質活性相關。相信這些試驗結果能給藥理和藥物化學領域的技術人員提供足夠的信息，以確定出在一個或多個其中所述的治療中使用所研究化合物的參數。1.PDGF-R酪氨酸激酶自身磷酸化ELISA測定本標題測定是按照Dolle等人(J.Med.Chem 1994，37，2627)的方法進行的(該文獻引入本發明以作參考)，但是不同之處在于使用如下所述的得自人主動脈平滑肌細胞(HAMSC)的細胞裂解產物。2.有絲分裂測定一般方法a.細胞培養將人主動脈平滑肌細胞(第4-9代)以6000個細胞/孔的濃度鋪在含有生長支持培養基的96孔平板中，并生長2-3天。在達到大約85％匯合時，用不含血清的培養基(SFM)中止細胞生長。b.有絲分裂測定剝奪血清24小時后，除去培養基，并代之以在SFM中的測試化合物/載體(200μl/孔)。化合物是以10mM的濃度溶解在細胞培養DMSO中，并在SFM中進一步稀釋。
與化合物預孵育30分鐘后，用PDGF以10ng/mL的濃度刺激細胞。對于每一化合物濃度，用刺激和未刺激的孔以一式兩份的方式進行測定。
4小時后，加入1μCi3H胸腺嘧啶核苷/孔。
加入生長因子24小時后，中止培養物的生長。用胰蛋白酶解離細胞，并用自動細胞收獲器(Wallac MachII96)將細胞收獲到濾器墊上。將該濾器墊在閃爍計數器(Wallac Betaplate)中計數，以測定摻入DNA的標記。3.趨化性測定從ATCC中獲得早代人主動脈平滑肌細胞(HASMC)。將細胞在Clonetics SmGM 2 SingleQuots(培養基)中生長，使用第4-10代細胞。當細胞達到80％匯合時，向培養基中加入熒光探針—鈣黃綠素AM(5mM，Molecular Probe)，將細胞培養30分鐘。用HEPES緩沖鹽水洗滌后，用胰蛋白酶解離細胞，并用含有0.1％BSA、10mM谷氨酰胺和10％胎牛血清的MCDB 131緩沖液(Gibco)中和。離心后，將細胞再洗滌一次，并以30000個細胞/50mL的濃度重懸在不含胎牛血清的相同緩沖液中。將細胞與不同濃度的式I化合物(終DMSO濃度＝1％)在37℃培養30分鐘。為了測定趨化性，使用96孔改性的Boyden室(Neuroprobe，Inc.)和具有8mm孔的聚碳酸酯膜(Poretics，CA)。用膠原(Sigma C3657，0.1mg/mL)包被該膜。將含有和不含有式I化合物的在緩沖液中的PDGF-ββ(3ng/mL)加到下面的室中。將含有和不含有抑制劑的細胞(30000)加到上部的室中。將細胞培養4小時。取出濾膜，并除去在膜上側的細胞。干燥后，使用CytofluorII(Millipore)在485/530nm的激發/發射波長測定在膜上的熒光。在每一實驗中，從6個平行測定中獲得平均細胞遷移。由使用DMSO處理的對照值確定抑制百分比。從5個點的濃度依賴性抑制計算IC50值。所得結果以從5個這樣實驗獲得的平均值±SEM表示。4.EGF-受體純化按照Yarden和Schlessinger的方法純化EGF-受體。將A431細胞在80cm2瓶中生長至匯合(2×107個細胞/瓶)。用PBS將細胞洗滌2次，并用含有11.0mmol EDTA的PBS收獲細胞(在37℃1小時，并以600g離心10分鐘)。將細胞以2×107個細胞/mL的濃度溶解在冷的溶解緩沖液(50mmol Hepes緩沖液，pH7.6，1％Triton X-100，150mmol NaCl，5mmol EGTA，1mmol PMSF，50mg/mL抑酶肽，25mmol芐脒，5mg/mL亮抑蛋白酶肽，和10mg/mL大豆胰蛋白酶抑制劑)中，在4℃保持20分鐘。以100000g離心30分鐘后，將上清液施加到WGA-瓊脂糖柱上(100mL填充樹脂/2×107細胞)，并在4℃搖動2小時。除去未吸收的材料，將樹脂依次用HTN緩沖液(50mmol Hepes，pH7.6，0.1％Triton X-100，150mmol NaCl)洗滌2次、用含有1MNaCl的HTN緩沖液洗滌2次、和用HTNG緩沖液(50mmol Hepes，pH7.6，0.1％Triton X-100，150mmol NaCl，和10％乙二醇)洗滌2次。用含有0.5M N-乙酰基-D-葡萄糖胺的HTNG緩沖液分批洗脫EGF受體(200mL/2×107細胞)。將洗脫物以等分試樣的形式在-70℃貯存，在使用前用TMTNG緩沖液(50mmol Tris-Mes緩沖液，pH7.6，0.1％Triton X-100，150mmol NaCl，10％乙二醇)稀釋。5.抑制EGF-R自身磷酸化將A431細胞在包被著人纖連蛋白的組織培養皿中生長至匯合。用冰冷的PBS洗滌2次后，加入500mL/培養皿裂解緩沖液(50mmolHepes，pH7.5，150mmol NaCl，1.5mmol MgCl2，1mmol EGTA，10％甘油，1％tritonX-100，1mmol PMSF，1mg/mL抑酶肽，1mg/mL亮抑蛋白酶肽)將細胞裂解，在4℃培養5分鐘。用EGF刺激(500mg/mL 10分鐘，37℃)后，用抗EGF-R(Ab 108)進行免疫沉淀，將自身磷酸化反應(50mL等分試樣，3 mCi [g-32P]ATP)樣品在2或10mM本發明化合物存在下于4℃反應2分鐘。通過加入電泳樣品緩沖液中止該反應。進行SDA-PAGE分析(7.5％els)，然后進行放射自顯影分析，通過X-射線膠片測光密度掃描定量測定該反應。a.細胞培養如下所述制備稱為HER 14和K721A的細胞用野生型EGF-受體或缺乏酪氨酸激酶活性的EGF-受體突變體(在ATP-結合位點的Lys 721被Ala殘基替代)的cDNA結構轉染缺乏內源性EGF-受體的NIH3T3細胞(克隆2.2)(得自C.Fryling，NCI，NIH)。將所有細胞在含有10％胎牛血清的DMEM中(Hyclone，Logan，Utah)生長。6.使用市售試劑盒測定對PKA和PKC的選擇性a.Pierce Colorimetric PKA Assay試劑盒，Spinzyme Format方案簡述PKA酶(牛心臟)lU/分析管Kemptide肽(染料標記的)底物45分鐘于30℃在570nm的吸光度b.Pierce Colorimetric PKC Assay試劑盒，Spinzyme Format方案簡述PKC酶(大鼠腦)0.025U/分析管Neurogranin肽(染料標記的)底物30分鐘于30℃在570nm的吸光度7.p56lck酪氨酸激酶抑制活性測定依據在US 5714493中公開的方法測定p56lck酪氨酸激酶抑制活性，該文獻引入本發明以作參考。
或者依據下述方法測定酪氨酸激酶抑制活性。首先如下所述將底物(含有酪氨酸的底物，p56lck識別的Biot-(βAla)3-Lys-Val-Glu-Lys-Ile-Gly-Glu-Gly-Thr-Tyr-Glu-Val-Val-Tyr-Lys-(NH2)，1μM)磷酸化在有或沒有給定濃度的測試化合物存在下，給予一定量的從克隆酵母中純化(該酶的純化是通過下述標準方法進行的)的酶(通過在酵母構建物中表達p56lck基因而制得的酶)，在ATP(10μM)，MgCl2(2.5mM)，MnCl2(2.5mM)，NaCl(25mM)，DTT(0.4mM)存在下，在Hepes 50mM，pH7.5中于室溫磷酸化10分鐘。總的反應體積是50μl，在黑色96-孔氟平板中進行反應。通過加入150μl終止緩沖液(100mM Hepes pH7.5，KF 400mM，EDTA 133mM，BSA 1g/l)來終止反應，該終止緩沖液含有0.8μg/ml用Europium穴合物(PY20-K)標記的抗酪氨酸抗體和4μg/ml用別藻藍蛋白標記的鏈霉抗生物素蛋白(XL665)。鏈霉抗生物素蛋白和抗酪氨酸抗體的標記是通過Cis-Bio Intemational(法國)進行的。用能測定時間分辨均勻熒光轉移(在337nm激發，在620nm和665nm讀取)的PackardDiscovery計數器將該混合物計數。磷酸化酪氨酸的濃度以665nm信號/620nm信號比例表示。通過用緩沖液替換酶來獲得空白。特異信號是不用抑制劑獲得的該比例與使用空白所獲得的比例的差異。計算特異信號的百分比。IC50是使用Xlfit軟件由一式兩份的10個抑制劑濃度計算的。參照化合物是staurosporine(Sigma)，其IC50為30±6nM(n＝20)。8.測定體外腫瘤抑制按如下所述測定本發明化合物在體外抑制腫瘤的生長將C6大鼠神經膠質瘤細胞系(得自ATCC)以單層形式在含有2mML-谷氨酰胺、200U/ml青霉素、200μg/ml鏈霉素、并補充有10％(v/v)熱失活的胎牛血清的Dubelcco’s Modified Eagle Medium中生長。用胰蛋白酶處理指數生長期的細胞，用PBS洗滌，并在完全培養基中稀釋至終濃度為6500個細胞/ml。向該細胞懸浮液(2.5ml)中加入50μl測試藥物或對照溶劑，加入保持在45℃的0.4ml 2.4％Noble Difco瓊脂，并混合。將該混合物立即倒入培養皿中，在4℃放置5分鐘。在5％CO2氣氛下于37℃培養12天后，測定細胞克隆(＞60個細胞)的數目。每一藥物都是以一式兩份的方式以10、1、0.1和0.01μg/ml(在瓊脂中的終濃度)的濃度測試的。結果以相對于未處理對照組的克隆發生抑制百分比表示。IC50是從對于每一藥物濃度所測定的平均值的半對數圖中以圖解方式確定的。9.測定體內腫瘤抑制使用如US 5700823和US 5760066中所描述的皮下異種移植模型測定本發明化合物在體內對腫瘤生長的抑制，在所述模型中，給小鼠移植C6神經膠質瘤細胞，并用游標卡尺測定腫瘤生長。
通過上述實驗方法獲得的結果表明，在本發明范圍內的化合物具有有用的PDGF受體蛋白酪氨酸激酶抑制特性或p56lck酪氨酸激酶抑制特性，因此具有治療價值。對于特定治療目標，上述藥理試驗結果可用于確定劑量和給藥方式。
本發明可以以不背離其精神或必要技術特征的其它具體形式實施。
權利要求
1.式I化合物、其N-氧化物、其水合物、其溶劑合物、其前藥、或其可藥用鹽 其中X是L1OH或L2Z2；L1是(CR3aR3b)r或(CR3aR3b)m-Z3-(CR3’aR3’b)n；L2是(CR3aR3b)p-Z4-(CR3’aR3’b)q或乙烯基；Z1是CH或N；Z2是任選取代的羥基環烷基、任選取代的羥基環烯基、任選取代的羥基雜環基或任選取代的羥基雜環烯基；Z3是O、NR4、S、SO或SO2；Z4是O、NR4、S、SO、SO2、或一個鍵；m是0或1；n是2或3，且n+m＝2或3；p和q獨立地為0、1、2、3或4，并且當Z4是一個鍵時，p+q＝0、1、2、3或4，當Z4不是一個鍵時，p+q＝0、1、2或3；r是2、3或4；R1a和R1b獨立地為任選取代的烷基、任選取代的芳基、任選取代的雜芳基、羥基、酰氧基、任選取代的烷氧基、任選取代的環烷氧基、任選取代的雜環氧基、任選取代的雜環基羰基氧基、任選取代的芳氧基、任選取代的雜芳氧基、氰基、R5R6N-或酰基R5N-，或者R1a和R1b當中一個是氫或鹵素，另一個是任選取代的烷基、任選取代的芳基、任選取代的雜芳基、羥基、酰氧基、任選取代的烷氧基、任選取代的環烷氧基、任選取代的雜環氧基、任選取代的雜環基羰基氧基、任選取代的芳氧基、任選取代的雜芳氧基、氰基、R5R6N-或酰基R5N-；R1c是氫、任選取代的烷基、任選取代的芳基、任選取代的雜芳基、羥基、酰氧基、任選取代的烷氧基、任選取代的環烷氧基、任選取代的雜環氧基、任選取代的雜環基羰基氧基、任選取代的芳氧基、任選取代的雜芳氧基、鹵素、氰基、R5R6N-或酰基R5N-；R3a、R3b、R3’a和R3’b獨立地為氫或烷基；R4是氫、烷基或酰基；且R5和R6獨立地為氫或烷基，或者R5和R6與它們所連接的氮原子一起形成氮雜雜環基。
2.權利要求1的化合物、其N-氧化物、其水合物、其溶劑合物、其前藥、或其可藥用鹽，其中L1是(CR3aR3b)m-Z3-(CR3’aR3’b)n；L2是(CR3aR3b)p-Z4-(CR3’aR3’b)q；Z2是任選取代的羥基環烷基或任選取代的羥基雜環基；Z4是O和NR4；m是0；n是2或3；p+q＝0或1；R1a和R1b獨立地為任選取代的烷基、任選取代的烷氧基、任選取代的環烷氧基、任選取代的雜環氧基、或R5R6N-，或者R1a和R1b當中一個是氫或鹵素，另一個是任選取代的烷基、任選取代的烷氧基、任選取代的環烷氧基、任選取代的雜環氧基或R5R6N；R1c是氫、任選取代的烷基、或任選取代的烷氧基；R3a、R3b、R3’a和R3’b獨立地為氫或低級烷基；R4是氫；且R5和R6與它們所連接的氮原子一起形成氮雜雜環基。
3.權利要求1的化合物、其N-氧化物、其水合物、其溶劑合物、其前藥、或其可藥用鹽，其中X是L2Z2；L2是(CR3aR3b)p-Z4-(CR3’aR3’b)q；Z2是任選取代的羥基環烷基；Z3是O和NR4；p是0；q是0或1；R1a和R1b獨立地為任選取代的烷基、任選取代的烷氧基、任選取代的環烷氧基、或任選取代的雜環氧基，或者R1a和R1b當中一個是氫或鹵素，另一個是任選取代的烷基、任選取代的烷氧基、任選取代的環烷氧基、或任選取代的雜環氧基；R1c是氫；R3’a和R3’b獨立地為氫；且R4是氫。
4.權利要求1的化合物，其中Z1為CH。
5.權利要求1的化合物，其中Z1為N。
6.權利要求1的化合物，其中Z2為任選取代的羥基環烷基。
7.權利要求1的化合物，其中p和q為0。
8.權利要求1的化合物，其中p+q＝1。
9.權利要求1的化合物，其中Z4為O。
10.權利要求1的化合物，其中Z4為O，且p和q為0。
11.權利要求1的化合物，其中Z4為O，且p+q＝1。
12.權利要求1的化合物，其中Z4為NR4。
13.權利要求1的化合物，其中Z4為NR4，且p和q為0。
14.權利要求1的化合物，其中Z4為NR4，且p+q＝1。
15.權利要求1的化合物，其中Z4為S。
16.權利要求1的化合物，其中Z4為S，且p和q為0。
17.權利要求1的化合物，其中Z4為S，且p+q＝1。
18.權利要求1的化合物，其中R1a和R1b獨立地為任選被羥基取代的低級烷基、羥基、低級烷氧基、環烷氧基、雜環氧基，或者R1a和R1b當中一個是氫或鹵素，另一個是任選被羥基取代的低級烷基、羥基、低級烷氧基、環烷氧基、雜環氧基。
19.權利要求1的化合物，其中R1a和R1b獨立地為任選取代的雜環基羰基氧基或任選取代的低級烷氧基。
20.權利要求19的化合物，其中所述低級烷氧基為甲氧基或乙氧基。
21.權利要求1的化合物，其中R1a和R1b為低級烷基。
22.權利要求21的化合物，其中所述低級烷基為甲基或乙基。
23.權利要求1的化合物，其中R1a和R1b當中一個是低級烷氧基，另一個是鹵素。
24.權利要求23的化合物，其中所述低級烷氧基為甲氧基或乙氧基，鹵素為氯或溴。
25.權利要求1的化合物，其中R1a和R1b當中一個是低級烷基，另一個是低級烷氧基。
26.權利要求25的化合物，其中所述低級烷氧基為甲氧基或乙氧基，低級烷基為甲基或乙基。
27.權利要求1的化合物，其中R1a和R1b當中一個是低級烷氧基，另一個是環烷氧基。
28.權利要求27的化合物，其中所述低級烷氧基為甲氧基或乙氧基，環烷氧基為環戊氧基或環己氧基。
29.權利要求1的化合物，其中R1a和R1b當中一個是氫，另一個是低級烷氧基、環烷氧基或雜環氧基。
30.權利要求29的化合物，其中所述低級烷氧基為甲氧基或乙氧基，環烷氧基為環戊氧基或環己氧基，且雜環氧基更優選為呋喃基氧基。
31.權利要求1的化合物，其中R1c是氫、低級烷基或低級烷氧基。
32.權利要求31的化合物，其中所述低級烷基是甲基或乙基，低級烷氧基是甲氧基或乙氧基。
33.權利要求1的化合物，其中Z2是任選被羥基或烷基取代的羥基環烷基。
34.權利要求33的化合物，其中Z2是任選被低級烷基取代的羥基環烷基。
35.權利要求19的化合物，其中所述低級烷氧基可任選被烷氧基、雜環基、羧基、烷氧基羰基或氨基甲酰基取代。
36.權利要求35的化合物，其中R1a和R1b當中一個是未取代的低級烷氧基，另一個是任選取代的雜環基羰基氧基或被烷氧基、雜環基、羧基、烷氧基羰基或氨基甲酰基取代的低級烷氧基。
37.權利要求36的化合物，其中R1a和R1b當中一個是甲氧基，另一個是[1，4′-]-聯哌啶-1′-基羰基氧基、2-(乙氧基)乙氧基、2-(4-嗎啉基)乙氧基、2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙氧基、羧基甲氧基、甲氧基羰基甲氧基、氨基羰基甲氧基、N-甲基氨基羰基甲氧基、或N，N-二甲基氨基羰基甲氧基。
38.權利要求1的化合物，其是反式-4-(7-氯-6-甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環己醇；反式-4-(6-氯-7-甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環己醇；反式-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環己醇；順式-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環己醇；(2內，5外)-5-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)二環[2.2.1]庚-2-醇；(2外，5內)-5-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)二環[2.2.1]庚-2-醇；(2內，3外，5外)-5-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)二環[2.2.1]庚-2，3-二醇；順式-2-(6-甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環戊醇；反式-2-(6-甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環戊醇；反式-4-(6-甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環己醇；[3aR，4S，6R，6aS]-6-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2，2-二甲基四氫環戊二烯并[1，3]間二氧雜環戊烯-4-甲酸乙基酰胺；2-(1，4-二氧雜螺[4，5]癸-8-基氧基)-6，7-二甲氧基喹喔啉；4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氧基甲基)環己醇；3-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氧基)環己醇；4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氧基)環己醇；5-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氧基)二環[2.2.1]庚烷-2，3-二醇；(2外，3外，5外)-5-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)二環[2.2.1]庚烷-2，3-二醇；乙酸順式-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氧基)環己基酯；順式-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氧基)環己醇；二甲基氨基甲酸4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氧基)環己基酯；反式-4-(6，7-二甲氧基-4-氧基喹喔啉-2-基氨基)環己醇；乙酸反式-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環己基酯；(2外，5外)-5-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)二環[2.2.1]庚-2-醇；(2內，5外)-5-(6，7-二甲氧基喹啉-2-基氨基)二環[2.2.1]庚-2-醇；(2外，6外)-6-(6，7-二甲氧基喹啉-2-基氨基)二環[2.2.1]庚-2-醇；4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇；(2反式，4反式)-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇；(+)-(2反式，4反式)-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇；(-)-(2反式，4反式)-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇；(2反式，4順式)-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇；(2順式，4順式)-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇；(2順式，4反式)-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇；4-(6，7-二甲基喹喔啉-2-基氨基)環己醇；或(1S，2R，4S，SR)-5-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)二環[2.2.1]庚-2-醇，其N-氧化物、其水合物、其溶劑合物、其前藥、或其可藥用鹽。
39.權利要求1的化合物，其是反式-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環己醇，或其N-氧化物、其水合物、其溶劑合物、其前藥、或其可藥用鹽。
40.權利要求1的化合物，其是順式-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環己醇，或其N-氧化物、其水合物、其溶劑合物、其前藥、或其可藥用鹽。
41.權利要求1的化合物，其是4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇，或其N-氧化物、其水合物、其溶劑合物、其前藥、或其可藥用鹽。
42.權利要求1的化合物，其是(2外，5外)-5-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)二環[2.2.1]庚-2-醇，或其N-氧化物、其水合物、其溶劑合物、其前藥、或其可藥用鹽。
43.權利要求1的化合物，其是反式-4-(7-氯-6-甲氧基喹喔啉-2-基氨基)環己醇，或其N-氧化物、其水合物、其溶劑合物、其前藥、或其可藥用鹽。
44.權利要求1的化合物，其是4-(6，7-二甲氧基喹啉-3-基氨基)環己醇，或其N-氧化物、其水合物、其溶劑合物、其前藥、或其可藥用鹽。
45.權利要求1的化合物，其是(-)-(2反式，4反式)-4-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)-2-甲基環己醇，或其N-氧化物、其水合物、其溶劑合物、其前藥、或其可藥用鹽。
46.權利要求1的化合物，其是(1S，2R，4S，5R)-5-(6，7-二甲氧基喹喔啉-2-基氨基)二環[2.2.1]庚-2-醇，或其N-氧化物、其水合物、其溶劑合物、其前藥、或其可藥用鹽。
47.藥物組合物，其含有權利要求1的化合物和可藥用載體。
48.抑制PDGF酪氨酸激酶活性的方法，包括將權利要求1的化合物與含有PDGF酪氨酸激酶的組合物接觸。
49.抑制Lck酪氨酸激酶活性的方法，包括將權利要求1的化合物與含有Lck酪氨酸激酶的組合物接觸。
50.在患有特征是細胞增殖和/或分化和/或介質釋放的疾病的患者中抑制細胞增殖、分化或介質釋放的方法，包括給患者施用藥物學有效量的權利要求1的化合物。
51.治療與過度增殖性病癥有關的疾病的方法，所述方法包括給需要這種治療的患者施用藥物學有效量的權利要求1的化合物。
52.權利要求51的方法，其中所述疾病是再狹窄。
53.治療再狹窄的方法，包括給需要這種治療的患者在預定部位施用藥物學有效量的權利要求1的化合物。
54.權利要求53的方法，其中所述部位是在通過血管成形術治療動脈粥樣硬化損傷時所產生的動脈壁機械損傷部位。
55.權利要求53的方法，其中權利要求1的化合物是通過用權利要求1的化合物飽和的親水性薄膜包衣的血管成形術用囊來施用的。
56.權利要求53的方法，其中根據權利要求1的化合物是通過含有輸注室的導管施用的，其中所述輸注室含有權利要求1的化合物的溶液。
57.權利要求53的方法，其中使用在斯滕特固定模裝置上的包衣來施用權利要求1的化合物，其中所述包衣含有權利要求1的化合物。
58.權利要求51的方法，其中所述與過度增殖性病癥有關的疾病是可通過抑制PDGF酪氨酸激酶來治療的癌癥。
59.權利要求58的方法，其中所述癌癥是腦癌、卵巢癌、結腸癌、前列腺癌、肺癌、卡波西肉瘤或惡性黑素瘤。
60.在患有炎癥的患者中治療炎癥的方法，包括給所述患者施用有效量的權利要求1的化合物。
全文摘要
本發明涉及式(I)喹啉/喹喔啉化合物,其中X是L
文檔編號C07D241/44GK1356991SQ99815791
公開日2002年7月3日 申請日期1999年11月23日 優先權日1998年11月24日
發明者A·P·斯巴達, 何偉, M·R·梅耶爾斯 申請人:阿溫蒂斯藥物制品公司