Penicillitone在制備治療阿爾茨海默病藥物中的應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及化合物Penicillitone的新用途，尤其涉及Penicillitone在制備治 療阿爾茨海默病藥物中的應用。
【背景技術】
[0002] 阿爾茨海默病是一種常見的老年性腦神經退行性病變，發病率較高，已成為現代 社會嚴重威脅老年人生命和健康的疾病之一。該疾病典型的病理變化包括β淀粉樣蛋白 沉積形成老年斑，神經纖維纏結，基底前腦膽堿能功能障礙和皮層、海馬廣泛的神經元丟失 和突觸形態的改變（參見：R〇berson ED，Mucke L.lOOyears and counting:prospects for defeating Alzheimer's disease. Science 2006 ;314 (5800):781-4)。
[0003] 研究發現阿爾茨海默病患者腦內皮層及海馬區的病變比較明顯，以前腦基底核膽 堿能神經元破壞最多。因此，通過增加乙酰膽堿的含量，或作用于膽堿受體，可增強和改善 中樞膽堿能系統的功能，從而達到促智治病的目的（Baskin DS, Browning JL，Pirozzolo FJ, Korporaal S,Baskin JA, Appel SH. Brain choline acetyltransferase and mental function in Alzheimer disease. Archives of Neurology 1999 ;56 (9) : 1121-3) 〇 乙酉先膽 堿酯酶抑制劑就是建立在這種理論基礎上開發出來的臨床上用于阿爾茨海默病治療的最 早最成熟的一類藥物（Taylor P. Development of acetylcholinesterase inhibitors in the therapy of Alzheimer's disease. Neurology 1998 ；51 (Supplement 1),S30 - S35), 該類藥物對輕、中度阿爾茨海默病患者療效確切，可使其認知功能及其它癥狀得到部分改 善。目前多種乙酰膽堿酯酶抑制劑已經用于阿爾茨海默病的治療。
[0004] 本發明涉及的化合物Penicillitone是一個2014年發表（Jinghua Xue， et al. , Penicillitone,a Potent in Vitro Anti-inflammatory and Cytotoxic Rearranged Sterol with an Unusual Tetracycle Core Produced by Penicillium purpurogenum. · Organic Letters, 2014, 16, 1518-1521.)的新化合物，該化合物擁有全 新的骨架類型，目前的用途僅僅涉及抗炎作用（Jinghua Xue，et al·，Penicillitone, a Potent in Vitro Anti-inflammatory and Cytotoxic Rearranged Sterol with an Unusual Tetracycle Core Produced by Penicillium purpurogenum. . Organic Letters, 2014, 16, 1518-1521.)，對于本發明涉及的Penicillitone在制備治療阿爾茨海 默病藥物中的用途屬于首次公開，由于屬于全新的結構類型，而且其對于治療阿爾茨海默 病的活性強得意想不到，不存在由其他化合物給出任何啟示的可能，具備突出的實質性特 點，同時用于治療阿爾茨海默病顯然具有顯著的進步。

【發明內容】

[0005] 本發明的目的在于提供一種具有乙酰膽堿酯酶抑制活性和神經細胞保護作用的 Penicillitone，具體為Penicillitone在制備治療阿爾茨海默病藥物的應用。
[0006] 所述化合物Penicillitone結構如式（I )所示：
[0008] 通過對該化合物的生物學活性進行研究，發現該化合物具有較強的乙酰膽堿酯酶 抑制作用及對淀粉樣蛋白誘導的神經細胞損傷的保護作用。因此，該化合物可以作為 多靶點的抗阿爾茨海默病化合物，用于防治阿爾茨海默病藥物的制備。
[0009] 本發明涉及所述的Penicillitone在制備治療阿爾茨海默病藥物中的應用。
[0010] Penicillitone作為一種多作用革E1點的新型抗阿爾茨海默病的化合物，能夠同時 具有乙酰膽堿酯酶抑制活性和神經細胞保護作用，用于制備治療阿爾茨海默病的藥物中， 對阿爾茨海默病具有良好的治療效果。
[0011] 本發明涉及的Penici 11 itone在制備治療阿爾茨海默病藥物中的用途屬于首次 公開，由于骨架類型屬于全新的骨架類型，而且其對于乙酰膽堿酯酶抑制活性強得意想不 到，不存在由其他化合物給出任何啟示的可能，具備突出的實質性特點，同時用于阿爾茨海 默病的防治顯然具有顯著的進步。
[0012] 以下通過實施例對本發明作進一步詳細的說明，但本發明的保護范圍不受具體實 施例的任何限制，而是由權利要求加以限定。
【具體實施方式】
[0013] 本發明所涉及化合物Penicillitone的制備方法參見文獻（Jinghua Xue，et al. ,Penicillitone, a Potent in Vitro Anti-inflammatory and Cytotoxic Rearranged Sterol with an Unusual Tetracycle Core Produced by PeniciIlium purpurogenum.. Organic Letters，2014, 16, 1518-1521.)
[0014] 以下通過實施例對本發明作進一步詳細的說明，但本發明的保護范圍不受具體實 施例的任何限制，而是由權利要求加以限定。
[0015] 實施例1 :本發明所涉及化合物Penicillitone片劑的制備：
[0016] 取20克化合物Penicillitone加入制備片劑的常規輔料180克，混勻，常規壓片 機制成1000片。
[0017] 實施例2 :本發明所涉及化合物Penicillitone膠囊劑的制備：
[0018] 取20克化合物Penicillitone加入制備膠囊劑的常規輔料如淀粉180克，混勻， 裝膠囊制成1000粒。
[0019] 下面通過藥效學實驗來進一步說明其藥物活性。
[0020] 實驗例1 :Penicillitone的乙酰膽堿酯酶抑制活性
[0021] 1、Penicillitone對電暢乙酰膽堿酯酶抑制活性
[0022] 酶反應在25°C，0. 1M pH8. 0的磷酸緩沖液中進行，總反應體積為200 yL，內 含3. 33mM 5,5' -二硫-聯（2-硝基苯甲酸）20yL，0. 35U/mL乙酰膽堿酯酶溶液20yL 和5. 3mM碘化硫代乙酰膽堿溶液20 μ L，測試該化合物溶液10 μ L，在412nm用酶標儀 (Sunrise, Tecan, Austria)檢測5min。樣品重復三次。以未加化合物孔的光密度值作為 100%，化合物測定孔的光密度與之比較，降低的百分率即為酶抑制率。該化合物至少測5 個濃度梯度對乙酰膽堿酯酶的抑制活性，通過化合物濃度對數對抑制率作圖求IC50值（抑 制50 %酶活性時化合物的濃度）。
[0023] 本發明測試了 Penicillitone的乙酰膽堿酯酶抑制活性。該化合物具有顯著的乙 酰膽堿酯酶抑制活性，其抑制乙酰膽堿酯酶的IC50值為0.20 μΜ，與陽性對照他克林相當 (IC50 值 0· 17 μΜ)。
[0024] 實驗例2 :Penicillitone對β -淀粉樣蛋白誘導的SH-SY5Y細胞損傷的保護作用
[0025] SH-SY5Y細胞以1 X 104個/mL接種于多孔板，培養24h貼壁后更換含10 μ Μ視黃 酸（RA)的DMEM培養基。每兩天更換一次培養基，處理7天，誘導細胞分化。誘導分化的細 胞，用D-Hank' s液輕輕洗滌2次，試驗分為空白對照組、模型組、藥物處理組、陽性對照組。 空白對照組更換含10%活性炭/葡聚糖處理胎牛血清的無酚紅1640培養基；模型組加入 終濃度為15 μΜ的β -淀粉樣蛋白；藥物處理組在加入不同濃度的Penicillitone預孵3h 后加入15 μΜβ -淀粉樣蛋白；陽性對照組在加入雌激素2nM 3h后加入β -淀粉樣蛋白。 各處理組細胞培養72h后用ΜΤΤ法檢測細胞存活率。實驗結果見表1。
[0026] 表1Penicillitone對β -淀粉樣蛋白誘導的SH-SY5Y細胞損傷的保護作用
[0028] *Ρ〈0· 05與模型組比較
[0029] 由表1可以看出，15 μΜβ -淀粉樣蛋白處理分化的SH-SY5Y細胞72h后，細胞存活 率下降為空白對照的7. 24%。化合物Penicillitone處理細胞都能明顯提高細胞的存活 率。
[0030] 結論：Penicillitone具有顯著的乙酰膽堿酯酶抑制活性和神經細胞保護作用， 可以作為阿爾茲海默癥的治療藥物。
【主權項】
1.Penicillitone在治療阿爾茨海默病藥物中的應用，所述化合物化nicillitone結 構如式（I)所示：式（I)。
【專利摘要】本發明公開了Penicillitone的新用途。Penicillitone具有乙酰膽堿酯酶抑制活性和神經細胞保護作用；作為一種多作用靶點的化合物可用于制備抗阿爾茨海默病的藥物。本發明涉及的Penicillitone在制備治療阿爾茨海默病藥物中的用途屬于首次公開，由于骨架類型屬于全新的骨架類型，而且其對于乙酰膽堿酯酶抑制活性強得意想不到，不存在由其他化合物給出任何啟示的可能，具備突出的實質性特點，同時用于阿爾茨海默病的防治顯然具有顯著的進步。
【IPC分類】A61K31/336, A61P25/28
【公開號】CN105232518
【申請號】CN201510752309
【發明人】田麗華
【申請人】淄博齊鼎立專利信息咨詢有限公司
【公開日】2016年1月13日
【申請日】2015年11月7日