專利名稱：一種預知子提取物在治療原發性肝癌藥物中的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種預知子提取物在治療原發性肝癌藥物中的應用，具體說，是涉及一種預知子乙醇提取物在制備治療原發性肝癌的藥物制劑中的應用，屬于中藥技術領域。
背景技術：
預知子別名八月札、八月炸、八月楂、八月瓜、八月果、百日瓜、牽藤瓜、臘瓜、拉拉果、木通子、壓驚子、畜菖子、拿子、桴梭子、覆子、冷飯包、野香交、羊開口，為木通科植物木通(Akebia quinata (Thunb.)Decne.)、三葉木通(Akebia trifoliate (Thunb.)Koidz.)、白木通(Akebia trifoliate (Thunb.) Koidz.var.australis ((Diels)) Rehd.)的干燥近成熟果實。預知子性味苦寒，歸肝、膽、胃、膀胱經；疏肝理氣，和胃，活血止痛，軟堅散結，利尿；用于肝胃氣滯，脘脅脹痛，飲食不消，下痢便泄，痛經閉經，疝氣疼痛，痰核痞塊，小便不利等治療。迄今為止，預知子相關論著、專利、科技成果等文獻內容多以復方組成藥物之一的形式在臨床應用為主，單味藥研究特別是臨床常用功效機制研究罕見；在這些文獻中，預知子參與的組方多次提及治療肝癌，但未見其單味藥和單味藥的作用機制研究報道。預知子相關專利共計132項幾乎全是復方臨床應用，僅有I項單味藥相關專利CN200910040491.1中公開了一種預知子提取物及其制劑和其在抗抑郁藥物中的用途。對于預知子這一肝癌治療中藥復方常用藥，其單味藥應用于惡性腫瘤治療的研究發明至目前未見相關報道。原發性肝癌是我國重大疾病，居惡性腫瘤死亡率第2位，發病人數約占全球的55%，嚴重威脅人民生命，造成家庭和社會經濟負擔。然而原發性肝癌治療目前尚無特效治療方法和藥物。因此，尋找療效確切的抗癌藥物迫在眉睫。原發性肝癌發生發展的關鍵在于癌變細胞不可調控的惡性增殖，因此有效抑制癌細胞的增殖是原發性肝癌治療的關鍵所在。經文獻檢索，迄今尚未見有預知子提取物用于抑制原發性肝癌細胞惡性增殖及其直接相關疾病方面的報道。

發明內容
本發明的目的是提供一種預知子提取物的新應用。本發明提供的預知子提取物的一種新應用是指以預知子提取物作為活性成分之一或唯一活性成分用于制備治療原發性肝癌的藥物制劑。所述的預知子提取物優選為預知子的乙醇提取物。作為進一步優選方案，所述的預知子的乙醇提取物是由體積分數為60 90%的乙醇水溶液對預知子進行回流提取而得。作為更進一步優選方案，所述的預知子的乙醇提取物是由8 10倍重量體積的體積分數為70 80%的乙醇水溶液對預知子進行回流提取I 3次，每次I 3小時而得。所述的藥物制劑形式可以是任何可藥用的劑型，這些劑型包括:片劑、糖衣片劑、薄膜衣片劑、腸溶衣片劑、膠囊劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸齊 、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、栓劑、軟膏劑、硬膏劑、霜劑、噴霧劑、滴齊 、貼劑；優選口服劑型，如:膠囊劑、片劑、口服液、顆粒劑、丸劑、散劑、丹劑、膏劑等。所述的口服劑型可含有常用的賦形劑，諸如粘合劑、填充劑、稀釋劑、壓片劑、潤滑劑、崩解劑、著色劑、調味劑和濕潤劑，必要時可對片劑進行包衣。適宜的填充劑包括纖維素、甘露糖醇、乳糖和其它類似的填充劑；適宜的崩解劑包括淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和淀粉衍生物，例如羥基乙酸淀粉鈉；適宜的潤滑劑包括，例如硬脂酸鎂。適宜的藥物可接受的濕潤劑包括十二烷基硫酸鈉。本發明采用癌細胞生長增殖MTT檢測方法，實驗論證了預知子提取物具有非常顯著地抑制原發性肝癌細胞惡性增殖的作用，有望通過抑制原發性肝癌細胞惡性增殖應用于治療原發性肝癌的藥物制劑的制備中，為預知子提取物開拓了一種新的藥用價值。


圖1是各藥物組對SMMC7721肝癌細胞惡性增殖的抑制作用對比圖，其中:a是普通細胞組，b是用藥濃度為0.6mg/mL的G418組，c是用藥濃度為5mg/mL的柴胡乙醇提取物組，d是用藥濃度為5mg/mL的預知子乙醇提取物組，e是用藥濃度為5mg/mL的丹參乙醇提取物組，f是用藥濃度為5mg/mL的桃仁乙醇提取物組。圖2是不同劑量的預知子提取物對SMMC7721肝癌細胞惡性增殖的抑制作用對比圖，其中:a是普通細胞組，b是用藥濃度為0.6mg/mL的G418組，c是用藥濃度為1.25mg/mL的預知子乙醇提取物組，d是用藥濃度為2.5mg/mL的預知子乙醇提取物組，e是用藥濃度為5mg/mL的預知子乙醇提取物組，f是用藥濃度為10mg/mL的預知子乙醇提取物組；g是用藥濃度為20mg/mL的預知子乙醇提取物組。
具體實施例方式下面結合附圖和具體實施例對本發明做進一步詳細闡述。實施例1:制備各單味藥的乙醇提取物取柴胡、預知子、丹參、桃仁4味中藥飲片各35g，于60°C烘箱中干燥24小時后粉碎。向粉碎的各味藥材中分別加入350mL的體積分數為75%的乙醇水溶液，室溫下浸泡2h后，水浴加熱到回流，每次回流提取2h，共回流提取2次；收集乙醇提取液，過濾，分別濃縮至25mL，用堿調節pH為7.0，然后加雙蒸水定容至35mL (Ig生藥/mL)。細胞培養條件抽濾滅菌，即得。實施例2:上述各單味藥的乙醇提取物對原發性肝癌細胞增殖的抑制作用實驗將SMMC7721肝癌細胞進行96孔板鋪皿；過夜細胞貼壁后，均以5.0mg/mL的用藥濃度進行各單味藥乙醇提取物的給藥；并取用藥濃度為0.6mg/mL的細胞毒抗生素G418為陽性對照。分別在給藥24、48、72h后采用MTT法檢測SMMC7721肝癌細胞增殖生長率，并繪制
量效曲線。圖1是各藥物組對SMMC7721肝癌細胞惡性增殖的抑制作用對比圖，其中:a是普通細胞組，b是用藥濃度為0.6mg/mL的G418組，c是用藥濃度為5mg/mL的柴胡乙醇提取物組，d是用藥濃度為5mg/mL的預知子乙醇提取物組，e是用藥濃度為5mg/mL的丹參乙醇提取物組，f是用藥濃度為5mg/mL的桃仁乙醇提取物組。由圖1對比結果可見:用藥濃度為5mg/mL的預知子提取物對SMMC7721肝癌細胞增殖的抑制作用明顯優于相同用藥濃度的其它藥材，并強于用藥濃度為0.6mg/mL的陽性對照組一細胞毒抗生素G418組。實施例3:不同劑量的預知子提取物對原發性肝癌細胞增殖的抑制作用實驗將SMMC7721肝癌細胞進行96孔板鋪皿；過夜細胞貼壁后，分別以最終濃度為1.25mg/mL、2.5mg/mL、5.0mg/mL、10.0mg/mL>20.0mg/mL的5個劑量的預知子提取物進行給藥；并取用藥濃度為0.6mg/mL的細胞毒抗生素G418為陽性對照。分別在給藥24、48、72h后采用MTT法檢測SMMC7721肝癌細胞增殖生長率，并繪制
量效曲線。圖2是不同劑量的預知子提取物對SMMC7721肝癌細胞惡性增殖的抑制作用對比圖，其中:a是普通細胞組，b是用藥濃度為0.6mg/mL的G418組，c是用藥濃度為1.25mg/mL的預知子乙醇提取物組，d是用藥濃度為2.5mg/mL的預知子乙醇提取物組，e是用藥濃度為5mg/mL的預知子乙醇提取物組，f是用藥濃度為10mg/mL的預知子乙醇提取物組；g是用藥濃度為20mg/mL的預 知子乙醇提取物組。由圖2的對比結果可見:用藥濃度為5mg/mL的預知子提取物對SMMC7721肝癌細胞增殖具有顯著抑制作用，并強于用藥濃度為0.6mg/mL的陽性對照組一細胞毒抗生素G418組；而且當預知子提取物的用藥濃度達10mg/mL時，可以徹底抑制肝癌細胞的增殖，并殺死肝癌細胞。綜上所述可見:預知子乙醇提取物對肝癌細胞惡性增殖具有顯著地抑制作用，并呈量效關系，有望通過抑制原發性肝癌細胞惡性增殖應用于治療原發性肝癌的藥物制劑的制備中，具有藥用價值。最后有必要在此說明的是:以上實施例只用于對本發明的技術方案作進一步詳細地說明，不能理解為對本發明保護范圍的限制，本領域的技術人員根據本發明的上述內容作出的一些非本質的改進和調整均屬于本發明的保護范圍。
權利要求
1.一種預知子提取物在治療原發性肝癌藥物中的應用，其特征在于:是以預知子提取物作為活性成分用于制備治療原發性肝癌的藥物制劑。
2.如權利要求1所述的應用，其特征在于:以預知子提取物作為唯一活性成分用于制備治療原發性肝癌的藥物制劑。
3.如權利要求1或2所述的應用，其特征在于:所述的預知子提取物為預知子的乙醇提取物。
4.如權利要求3所述的應用，其特征在于:所述的預知子的乙醇提取物是由體積分數為60 90%的乙醇水溶液對預知子進行回流提取而得。
5.如權利要求4所述的應用，其特征在于:所述的預知子的乙醇提取物是由8 10倍重量體積的體積分數為70 80%的乙醇水溶液對預知子進行回流提取I 3次，每次I 3小時而得。 ·
全文摘要
本發明公開了一種預知子提取物在治療原發性肝癌藥物中的應用，所述應用是指以預知子提取物作為活性成分用于制備治療原發性肝癌的藥物制劑。本發明采用癌細胞生長增殖MTT檢測方法，實驗論證了預知子提取物具有非常顯著地抑制原發性肝癌細胞惡性增殖的作用，有望通過抑制原發性肝癌細胞惡性增殖應用于治療原發性肝癌的藥物制劑的制備中，為預知子提取物開拓了一種新的藥用價值。
文檔編號A61K36/185GK103191161SQ20131014080
公開日2013年7月10日 申請日期2013年4月22日 優先權日2013年4月22日
發明者方肇勤, 任紅艷, 梁超, 張園園, 潘志強, 盧文麗, 劉小美 申請人:上海中醫藥大學