專利名稱：去甲基斑蟊素衍生物及其合成方法
技術領域：
本發明涉及一種雜環化合物及其合成方法，特別涉及一種去甲基斑蟊素衍 生物及其合成，屬醫藥制備技術領域。
背景技術：
去甲斑蝥素是根據鞘翅目芫菁科昆蟲斑蝥的抗腫瘤有效成分斑蝥素的化學 結構，去除l, 2位甲基人工合成而得，去甲斑蝥素減輕了斑蝥素嚴重的泌尿系 統刺激性，同時保持斑蝥素較強的抗腫瘤活性和獨特的升髙白細胞作用，目前 臨床主要用于原發性肝癌的治療，其較好的治療效果、較小的不良反應，特別 是無骨髄抑制的優勢使其得以廣泛應用。但該藥臨床應用劑量稍大時即出現不 良反應，如泌尿系統的刺激性和胃腸道反應等。動物試驗表明，在給藥劑量增 大到一定程度時，腎臟和肝臟組織出現病理變化。使用劑量的嚴格限制也嚴重 地阻礙了藥物療效的發揮，因此，如何得到去甲斑蝥素的主動或被動肝靶向性 藥物成為解決上述問題的關鍵。
肝臟主要有3種細胞(肝實質細胞、Kupffer細胞、內皮細胞)具有特殊的識 別受體，艮卩去唾液酸糖蛋白受體(Asialoglyc-opretein receptor, ASGP-R)、 甘露糖受體(Mannose-specificrec印tor)和磷脂酰絲氨酸受體 (Phosphatydilserine receptor)。其中，ASGP-R是一種專一性識別末端含有 半乳糖或乙酰氨基半乳糖的糖蛋白。因此，可將大分子藥物或載體等經半乳糖 糖基化制成以ASGP—R受體為介導的肝耙向前體藥物或新的制劑。
在本發明做出之前，公開號為CN1927169的中國發明專利"去甲斑蝥素磁 性納米微球及其制備方法"中，提供了一種制備去甲斑蝥素磁性納米微球的方 法，它以生物可降解聚合物為載體，納米Fe304作磁性種子，利用復合乳液一 溶劑揮發法制備包裹去甲斑蝥素的磁性納米微球，但其藥物的包封率僅為8 15%;由于去甲斑蝥素極強的水溶性，將其包裹在具有被動耙向的藥物載體系統 如納米粒，脂質體等載體中，包封率均較低，難以形成有效的治療的肝靶向性。 目前，國內外尚未見將去甲斑蝥素與乳糖酸連接起來得到具有肝靶向性的新的 衍生物的報道。
發明內容
本發明的目的在于克服現有技術存在的不足，提供一種合成工藝簡單，生 產成本低，產率髙，具有肝靶向性的去甲基斑蟊素衍生物及其合成方法。
本發明采用的技術方案是提供一種去甲基斑蟊素衍生物，它以乙二胺為 連接臂，將去甲斑蝥素和乳糖酸連接在一起，其結構式如下.-
同時，提供一種去甲基斑蟊素衍生物的制備方法，步驟如下
(1) 將去甲斑蝥素溶解于甲醇溶液中，再逐滴加入無水乙二胺，冰浴條件 下攪拌至溶解后，常溫攪拌2 9小時，靜置并過濾取濾液，用乙酸乙酯與甲醉 的混合液為流動相過柱分離，經旋轉蒸發，得到白色粉末狀的去甲斑蝥素單酰 胺
(2) 乳糖酸鈉水溶液經陽離子交換柱處理，得到乳糖酸溶液，經真空干燥 后得到乳糖酸粉末；
(3) 將乳糖酸粉末在油浴條件下攪拌溶解于乙二醇甲醚中，經脫水濃縮處 理后，再用甲醇洗滌得到乳糖酸內酯；
(4) 將乳糖酸內酯溶解于甲醇溶液中，加入去甲斑蝥素單酰胺，在油浴條 件下攪拌4 6小時生成白色沉淀，將該沉淀物抽濾，并用甲醇洗滌2 3次， 在40 50X:的真空條件下干燥處理，得到白色粉末狀去甲基斑蟊素衍生物。
本發明公開了一種具有主動的肝靶向性的去甲斑蝥素的新衍生物的合成方 法，即利用乙二胺為連接臂將去甲斑蝥素和乳糖酸連接起來，該合成方法所用 原料成本低，反應易于進行，產率髙，容易實現工業化大生產；在合成過程中 的有毒物質乙二胺可以通過過柱除盡，甲苯和乙二醇甲醚亦未在終產物中檢出； 終產物不需要進一步純化，其純度即可達到98.34%以上。
本發明的設計依據是(1)去甲斑蝥素抗癌作用的發揮在于其氧橋結構的 完整，而本發明得到的新的衍生物并未破壞去甲斑蝥素的活性基團，能保持其 原有的抗癌活性。(2)肝臟細胞表面的去唾液酸糖蛋白受體專一性識別末端含有半乳糖或乙酰氨基半乳糖的糖蛋白，因此可將去甲斑蝥素進行乳糖化修飾后， 達到肝臟的主動靶向治療作用。(3)乙二胺的兩端的伯胺活性比較強，在作為 連接臂的反應中，反應容易進行，產率髙。 本發明技術方案的優點在于
(1) 將去甲斑蝥素進行乳糖化后能靶向于肝臟，給藥后能將治療藥物最大 限度地運送到靶區，使治療藥物在靶區濃集，治療效果明顯提髙；同時減少藥 物的用量，降低藥物的不良反應。
(2) 生產成本低，產率髙，經過簡單的反應過程即可以達到髙純度的終產 物，容易實現工業化大生產。
圖l是本發明提供的去甲基斑蟊素衍生物的氫譜(氘代DMS0溶解)圖； 圖2是本發明提供的去甲基斑蟊素衍生物的碳譜(氖代DMS0溶解)圖 圖3是本發明提供的去甲基斑蟊素衍生物的質譜圖。
具體實施方案 下面結合附圖和實施例對本發明作進一步描述
實施例"
步驟1:
將無水乙二胺(0.8ml, 12mmo1)逐滴加入去甲斑蝥素(2g,12mmo1)的甲醇 溶液中，冰浴攪拌5min溶解，常溫攪拌6小時，靜置，過濾，濾液過柱分離得 到白色粉末1.86g(8.9mmol;產率73.89%),即為去甲斑蝥素單酰胺。熔點 154-155"C; TLC:Rf 0. 5 (乙酸乙酯甲醇=4:1);紅外(v/cnT1): 3404(雙峰， -NH2)， 1689 (單峰-C=0)。
本步驟的反應式如下
步驟2:
乳糖酸鈉水溶液過陽離子交換柱，得乳糖酸水溶液，80'C真空干燥，得到
<formula>formula see original document page 5</formula>
白色的乳糖酸粉末。其反應式如下:<formula>formula see original document page 6</formula>
步驟3:
上述步驟得到的乳糖酸(5g, 13.95mmol)溶解于26ml乙二醇甲醚中，油浴 加熱攪拌溶解，加入13ml甲苯稀釋，蒸餾濃縮；當蒸氣的溫度達到乙二醇甲醚 的沸點時，再加入26ml乙二醇甲醚和13ml甲苯，然后常壓蒸餾濃縮，重復兩 次，將溶液冷卻，得到乳糖酸內酯結晶，過濾，甲醇洗滌后得到3.56g(10.55mmol; 產率75.35%)。熔點198-199'C， Max(kBr)/cnf1, 1716。
本步驟的反應式如下<formula>formula see original document page 6</formula>
1.356g(4mmol)乳糖酸內酯，溶解于20ml甲醇中，加熱溶解，將0.841g (4mmo1) NCTD單酰胺加入，80T油浴加熱攪拌4小時，產生沉淀，將該沉淀抽 濾，并用冷的甲醇洗滌數次，真空50'C干燥，得到白色粉末1.934g(3.7mmol:產 率92.54%),即為乳糖化-去甲斑蝥素。熔點191-192'C: TLC: Rf"0.7(甲醇 乙酸乙酯=1: 1)，Rf"0.6(正丁醇:醋酸水=2: 1: 1);紅外(v/cm—1)！ 3352.2(寬 峰，-OH)， 1696(單峰-C=0)。其反應式如下<formula>formula see original document page 6</formula>
步驟4:
參見附圖1,它是本實施例技術方案制備的去甲基斑蟊素衍生物的氫譜(氘 代DMSO溶解)圖；由圖1可見
1. 619 (4H, s, 1_H); 2. 982(2H, q, J=7-2, 3-H); 3-146 (1H, t, J=6. 8, 5-H); 3. 236 (1H, t, J=6. 4, 5-H); 3.321 (4H, m, 12-H, 15-H, 10-2H):
3. 399 (2H, t, J=4. 4, 4—H); 3. 491 (2H' t, J=5. 6， 16—H): 3. 579 (2H, m, 13—H, 14—H);
3. 672(2H, m'8-H， 9-H) ; 3. 961 (1H， s, 7-H) ; 4. 055 (1H, d， J=4. 4， 6-H);
4. 255(1H, d, J=6. 4， 11-H) ; 4. 663 (2H, s， 2-H);其結構式為
參見附圖2,它是本實施例技術方案制備的去甲基斑蟊素衍生物的碳譜(気 代DMSO溶解)圖由圖2看到，33.638 (l-C): 83.934(2-C); 55.124(3-C): 182. 903(a-C) ; 43. 382(4-C); 41.678(5-C); 178. 185 (b-C) ; 77, 461 (6-C); 75. 934(7-C); 88.434(8-C): 73.938(9-C); 66. 232 (10-C) : 110. 115(11-C); 78.825(12-0; 76. 938(13-C); 76. 920 (14-C); 81.264(15-0; 67. 937 (16-C)。
參見附圖3,它是本實施例技術方案制備的去甲基斑蟊素衍生物的質譜圖； 從圖3中可知，該物質為C22H34N2014,結構式為
Calculated: 550.2 ; Founds 549.3
實施例2: 步驟1:
將無水乙二胺(8ml, 120mmol)逐滴加入去甲斑蝥素(20g, 120mmol )的甲 醇中，冰浴攪拌10min溶解，常溫攪拌8小時，靜置，過濾，濾液過柱分離得
到白色粉末18.9g(90mmol;產率74.68%),即為去甲斑蝥素單酰胺。熔點 154-155'C; TLC:Rf^0.5 (乙酸乙酯甲醇=4:1):紅外(v/cm—'): 3403(雙峰， -NH2), 1688 (單峰-C=0)。 步驟2:
乳糖酸鈉水溶液過陽離子交換柱，得乳糖酸水溶液，80'C真空干燥，得到 白色的乳糖酸粉末。 步驟3:
乳糖酸(50g, 139. 5mmo1)在溫度為ll(TC的條件下溶解于260ml的乙二醇 甲醚中，油浴加熱攪拌溶解，加入130ml甲苯稀釋，蒸餾濃縮當蒸氣的溫度 達到乙二醇甲醚的沸點時，再加入260ml乙二醇甲醚和130ml甲苯，然后常壓 蒸餾濃縮，重復兩次，將溶液冷卻，得到乳糖酸內酯結晶，過濾，用冷的甲醇 洗滌后得到 35.8g(106. lmmol : 產率75.77%)。 熔點198-199 'C , Max(kBr)/cm—、 1716。
步驟4:
13.56g(40mmol)乳糖酸內酯，溶解于280ml甲醇中，加熱溶解，將8.41g (40匪o1) NCTD單酰胺加入，80'C油浴加熱攪拌6小時，產生沉淀，將該沉淀 抽濾，并用冷的甲醇洗滌數次，真空50'C干燥，得到白色粉末19. 56g(37.4mmol: 產率93.50%),即為乳糖化-去甲斑蝥素。
熔點191-192"; TLC: Rf^0.7(甲醇乙酸乙酯=1: 1) ,Rf"0.6(正丁 醇醋酸水=2: 1: 1);紅外(v/cm—3353(寬峰，-OH)， 1697(單峰-C=0)。
本發明的技術方案是利用乙二胺兩端活潑的伯胺基，分別與去甲斑蝥素和 乳糖酸內酯反應，形成兩個酰胺鍵，得到乳糖化-去甲斑蝥素，該新化合物在保 持原抗癌活性的同時能主動靶向于肝臟，因此能降低原藥去甲斑蝥素的毒副作 用，提髙療效。
本發明提供的去甲斑蝥素衍生物，它是利用乙二胺為連接臂將去甲斑蝥素 和乳糖酸連接起來得到的新化合物，具有優良的肝靶向性。其合成方法簡單， 產率髙，具有保持原有抗腫瘤作用的基礎上，提髙藥物在肝臟的濃度，提髙治 療肝癌的療效的同時可降低去甲斑蝥素在治療中的毒副作用。
權利要求
1.一種去甲基斑蟊素衍生物，其特征在于它以乙二胺為連接臂，將去甲斑蝥素和乳糖酸連接在一起，其結構式如下
2. —種去甲基斑蟊素衍生物的合成方法，其特征在于所述方法步驟如下(1) 將去甲斑蝥素溶解于甲醇溶液中，再逐滴加入無水乙二胺，冰浴條件 下攪拌至溶解后，常溫攪拌2 9小時，靜置并過濾取濾液，用乙酸乙酯與甲醇 的混合液為流動相過柱分離，經旋轉蒸發，得到白色粉末狀的去甲斑蝥素單酰 胺；(2) 乳糖酸鈉水溶液經陽離子交換柱處理，得到乳糖酸溶液，經真空干燥 后得到乳糖酸粉末(3) 將乳糖酸粉末在油浴條件下攪拌溶解于乙二醇甲醚中，經脫水濃縮處 理后，再用甲醇洗滌得到乳糖酸內酯(4) 將乳糖酸內酯溶解于甲醇溶液中，加入去甲斑蝥素單酰胺，在油浴條 件下攪拌4 6小時生成白色沉淀，將該沉淀物抽濾，并用甲醉洗滌2 3次， 在40 50t:的真空條件下干燥處理，得到白色粉末狀去甲基斑蟊素衍生物。
全文摘要
本發明公開了一種去甲基斑蟊素衍生物及其合成方法，屬醫藥制備技術領域。它利用乙二胺為連接臂將去甲斑蝥素和乳糖酸連接起來，得到的新化合物，在保持其抗癌活性的同時兼具優良的肝靶向性。其合成方法簡單，產率高，成本低，能有效的降低去甲斑蝥素在治療肝癌中的毒副作用，靶向于肝臟，提高療效。
文檔編號A61K31/7042GK101367850SQ200810155800
公開日2009年2月18日 申請日期2008年10月15日 優先權日2008年10月15日
發明者奕 周, 張學農, 欽 王, 良 章, 胡展紅 申請人:蘇州大學;蘇州利元醫藥科技有限公司