荸薺皮提取5-異戊烯基金魚草素的方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于天然有機化學領域，涉及一種5-異戊烯基金魚草素的提取分離方法， 特別是涉及一種從荸薺皮中提取分離5-異戊烯基金魚草素的方法。
【背景技術】
[0002] 5-異戊稀基金魚草素（5-Prenylaureusidin)，化學名為5-異戊稀 基-4, 6, 3'，4'-四羥基橙酮，為橙色無定形粉末，溶于甲醇、乙醇，是天然植物中分布較 少的一類黃酮化合物。據報道，5-異戊烯基金魚草素具有良好的抗氧化、抗真菌、抗微生 物、抑制葡萄糖合成酶等活性。5-異戊烯基金魚草素可從植物中分離，也可合成制備，已有 外國專利WO 97/26873公開了其合成和抗微生物方面的研宄。該專利公布的合成方法，以 2, 4, 6-三羥基苯與3, 4-二甲氧基苯甲醛為原料，經五步反應合成5-異戊烯基金魚草素，但 缺點是，合成過程容易帶入構型相反的金魚草素異構體。與合成相比，天然5-異戊烯基金 魚草素避免了合成過程中帶來的異構體，被認為更具安全性。目前還沒有發現從植物中提 取天然5-異戊烯基金魚草素的技術介紹。
[0003] 荸養（Eleocharis tuberosa)，又稱馬蹄，屬莎草科多年生淺水草本植物荸養的地 下球莖，我國大部分地區都有栽培。其中，廣西荸薺產量占全國70%，賀州荸薺產量占廣西 70%。據文獻報道，荸薺有抗菌、抗腫瘤、防治呼吸道疾病、利腸通便和利尿排淋等作用；臨 床上可用于治療咽喉疼痛、痰熱咳嗽、熱病煩渴、小便不利、痢疾等癥。研宄表明，荸薺的活 性物質主要富集在果皮和果肉之間。在荸薺加工過程中，被丟棄的荸薺皮質量約占新鮮荸 薺質量的25%，資源非常豐富。我們在研宄中發現荸薺皮中含有5-異戊烯基金魚草素，但 目前未見從荸薺皮中提取分離該化合物的文獻報道。經中國公開專利檢索，沒有發現與本 專利申請相同的技術方案。
【發明內容】
[0004] 本發明的目的在于：提出一種荸薺皮提取5-異戊烯基金魚草素的方法。
[0005] 5-異戊烯基金魚草素，其化學結構式如下：
[0006]
【主權項】
1. 一種荸薺皮提取5-異戊烯基金魚草素的方法，其具體步驟如下： (1) 將新鮮的荸薺皮風干，粉碎，備用；以重量計，稱取荸薺皮粉末1份，加入提取罐中， 每次加入4-10份70%體積百分比的丙酮水溶液，在25°C下浸泡24h，浸泡3次，過濾，合并 濾液，減壓濃縮至膏狀，獲得提取物。 (2) 以重量計，將提取物1份分散在5份體積的水中制成懸濁液，用1-2份水體積的乙 酸乙酯萃取3次，合并萃取液，減壓濃縮至干，獲得萃取物； (3) 往萃取物中加入甲醇至完全溶解，用2-4倍萃取物質量的聚酰胺拌樣，將甲醇揮發 至干，裝柱，連接MCI柱進行中壓分離，以40-100%體積百分比的甲醇水溶液為流動相梯度 洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并流動相濃度為70-90%體積百分比的洗脫液，減壓濃縮，獲 得粗品A ; (4) 往粗品A中加入甲醇至完全溶解，用2-4倍質量的聚酰胺拌樣，將甲醇揮發至干，轉 入聚酰胺色譜柱進行分離，用體積比為3:1-1:1的氯仿-甲醇溶液洗脫，薄層色譜法檢測， 收集合并含有5-異戊烯基金魚草素的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品B ; (5) 以重量計，將粗品B1份，溶于4-8份甲醇中，加入等體積的水制成懸濁液，用 Sephadex LH-20凝膠色譜柱純化，用甲醇洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并含有5-異戊烯 基金魚草素的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品C ;將所得粗品C再次用Sephadex LH-20凝膠色 譜純化，用70%體積百分比的甲醇水溶液洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并含有5-異戊烯 基金魚草素的洗脫液，減壓濃縮，干燥，獲得含量達95%以上的5-異戊烯基金魚草素產品。
2. 根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟（3)中的所述的MCI柱規格 為70X460mm，填充材料為MCI-gel CHP-20P，柱色譜條件為：柱壓為80Psi，流動相流速為 50mL/min，檢測波長為245nm ;所述的流動相為40-100%體積百分比的甲醇水溶液。
3. 根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟（4)中所述的聚酰胺，規格為 200-300目；所用洗脫液為體積比為3:1-1:1的氯仿-甲醇溶液。
【專利摘要】本發明的荸薺皮提取5-異戊烯基金魚草素的方法，屬于天然有機化學領域，其特征在于，以丙酮水溶液為溶劑，提取荸薺皮中的5-異戊烯基金魚草素，提取物用乙酸乙酯萃取后，萃取物經中壓MCI柱色譜和聚酰胺柱色譜分離，然后用Sephadex LH-20凝膠色譜反復純化，獲得含量在95％以上的5-異戊烯基金魚草素產品。本發明開辟了從天然植物中提取分離5-異戊烯基金魚草素的新途徑，分離效果好，產品純度高，使一貫被視為廢棄物的荸薺皮變廢為寶，所選用的層析材料MCI、聚酰胺和凝膠可反復使用，原料易得，資源豐富，生產成本低，可進行規模化生產，滿足醫藥工業需要。
【IPC分類】C07D307-83
【公開號】CN104529961
【申請號】CN201410833115
【發明人】羅楊合, 李行任, 劉珊, 方方, 韋家興
【申請人】賀州學院
【公開日】2015年4月22日
【申請日】2014年12月29日